Болезнь Ньюкасло

Размещено на http://www.allbest.ru/

Болезнь Ньюкасло

1. Характеристика возбудителя

1.1 Наименование вируса (историческая справка)

Её впервые диагностировал и описал Краневельд в 1927 г. на острове Ява.

Вирус впервые выделил Кранвельд (1927) и описал Доил (1940).

1.2 Систематика

Вирус относится к:

царству VIRA,

Семейству Paramyxoviridae,

Парамиксовирусы (от греч. рага - около и mуха - слизь) - группа вирусов, поражающая позвоночных животных.

Подсемейству Paramyxovirinae,

Роду Rubulavirus

1.3 Морфология

Вирионы содержат односпиральную линейную минус РНК. Тип симметрии спиральный, количество капсомеров 738, форма - шар (иногда палочковидная), размер вириона 120-300 нм в диаметре, сложноорганизован, плеоморфен. В капсиде содержат два основных белка - гемагглютинин и нейраминидазу.

1.4 Антигенные свойства

Как патогенные, так и апатогенные штаммы вируса НБ содержат 6 полипелтидов: Z, HN, F, M, NP и полипептид с мол. м. 47000 Д. В составе вируса обнаружены 3 основных и 5 минорных белковых компонентов. В какой степени они соответствуют 6 вышеуказанным: полипептиды неизвестно. К основным относятся гемагглютинин, белок внутренней оболочки и белок РНП. Нейраминидаза - один из минорных компонентов. Кроме этого, в вирионах I вируса НБ обнаружена эндорибонуклеаза, а в вирусе, полученном из хронически инфицированных клеток Z, РНК-зависимая ДНК-полимераза (обратная транскриптаза).

Вирус содержит гемагтлютинин и нейраминидазу, М-, F-белков и S (РНП) - антигены, различающиеся по локализации в вирионе, иммуногенности и АГ-активности. Каждый вирион содержит определенное число идентичных молекул HN, каждая молекула HN содержит 2 домена: НА и NA. Каждый домен содержит идентичные или отличные друг от друга АГ-детерминанты (эпитопы) (30). В молекуле F-протеина выявлено 4 различных АГ-сайта (1-4). AT к сайтам 1, 2 и 3 предотвращают вирусиндуцированный гемолиз эритроцитов птиц. AT к сайту 4 ингибируют или гемолиз, или разрушение клеток. АГ-активность F-протеина высоко консервативна, поэтому рекомбинантные штаммы, экопрессирующие белок F, желательны в качестве кандидатов для живых вакцин. Кроме того, при вакцинации птицы белком F можно легко дифференцировать иммунный ответ, индуцированный вакцинацией, от иммунного ответа, связанного с инфекцией. В противоположность F-белку, ГА и нейраминидаза обладают выраженной АГ-изменчивостью.

Различия в вирулентности штаммов вируса НБ связаны с изменением в структуре HN-гена, кодирующего ГА-нейраминидазу. Большинство аминокислотных замен располагается в четырех участках N-конца HN-белка (40), Имеются данные, свидетельствующие о связи вирулентности вируса НБ с расщеплением гликопротеина слияния (белка Fo) клеточными протеазами (28,31), или изменением других свойств белков F и HN (37).

Антигенная активность, Гликопротеидный ГА-нейраминидазный комплекс вируса (шт. La-Sota) обладает выраженной АГ- и протективной активностью на курах. Большинство исследованных клонов моиАТ против ГА-нейраминидазы вируса НБ в равной степени вызывают оба варианта слияния (43).

В вирионах обнаружено 6 полипептидов, три из которых связаны с нуклеокапсидом, а 3 входят в состав липопротеидной оболочки, причем 2 из последних являются гликопротеинами. Гликопротеины образуют выступы наружной оболочки и отвечают за адсорбцию вирионов на клеточной поверхности и слияние клеток, В вирионах содержится 70% белка, 20-25% липидов и 6% углеводов. Углеводы и липиды имеют клеточное происхождение.

Антигенная вариабельность и родство. Подавляющее большинство полевых и вакцинных штаммов вируса НБ в АГ- и иммунобиологическом отношениях сходно. Некоторые природно-ослабленные штаммы (F, Bl, La Sota, КД, Beaudette, Бор/74/ВГНКИ и др.) широко используют в качестве живых вакцин. Установлено различие природных штаммов не только в вирулентности, но и значительное различие в тропизме к нервной, легочной и эн-теральной тканям. Показано, что при серийном пассировании (37°С, 120 ч) неразведенного вируса НБ в КЭ продуцируется избыточное (по отношению к контрольному вирусу) количество ГА; образование «неинфекционных» частиц является, вероятно, следствием множественной инфекции клеток; неинфекционный ГА формируется б результате интерференции при созревании активного вируса с вирусом неполным, инфекционность вируса более чувствительна к термальной инактивации, чем его ГА-активность (44).

Вирус локализуется в паренхиматозных органах, костном и головном мозге, мышцах, трахеальной слизи, толстом и тонком кишечниках, содержится в различных выделениях. В период выраженной клинической картины болезни в изобилии выделяется во внешнюю среду с фекалиями, трахеальной слизью и выдыхаемым воздухом. Вирус, как правило, можно выделить только в начале болезни. Переболевшие птицы могут долго быть вирусоносителями.

В организме неиммунных птиц велогенный вирус НБ обнаруживался через 24-48 ч и далее в течение 10 да во всех органах и тканях. У иммунных или частично иммунных птиц наиболее продолжительное время (19 дн) вирус выделяли из железистого желудка, лимфоидных образований слепой кишки, фабрициевой сумки и мозга. Поскольку ни один из указанных органов не отличался в отношении тропизма вируса, то в полевой диагностике рекомендуется исследовать все четыре органа. Не отмечено гибели среди групп птиц с высоким и низким уровнем иммунитета, на основании чего сделан вывод, что в странах, где проводится поголовная вакцинация или, где распространены лентогенные штаммы вируса, появление велогенного штамма может пройти не замеченным (33).

При наличии циркулирующих AT вирус иногда удается выделить из мозга переболевших птиц. Показано, что вирулентные штаммы могут бессимптомно персиетировать в организме иммунных птиц в течение 70 дн. Нет зависимости между титрами анти-ГА и степенью выделения вируса во внешнюю среду. С увеличением продолжительности вирусоносительства (выше 70 дн) вирулентность исходных штаммов вируса снижается независимо от первоначального титра анти-ГА, однако латентная форма инфекции может свободно переходить в клинически выраженную. Было показано, что после заражения иммунизированной птицы велогенным вирусом возможно носительство и выделение последнего в течение 14-17 дн, т.е. поствакцинальный иммунитет не исключает циркуляции дикого вело- или мезогенного вируса. Возможность длительной персистенции вирулентного вируса в организме вакцинированной птицы может обусловливать возникновение вирусоносительства (13).

Изучено in vitro связывание шт. V4 вируса НБ с клетками различных отделов пищеварительного тракта цыплят. Оказалось, что энтероциты 12-перстной, тощей, повздошной, слепой и прямой кишок связывали 97, 85, 99, 92 и 90% вируса соответственно, в то же время к эктероцитам пищевода, зоба и железистого желудка вирус не прикреплялся, поэтому и нефекционность супернатаита не изменялась.

Антигенная активность. Все формы НБ вызываются идентичными в АГ-отношении штаммами и протекают с образованием ВНА, анти-ГА и КСА. В сыворотке птиц AT появляются через 6-10 да после заражения, пока еще у больной птицы проявляются клинические признаки болезни. Наивысший титр их отмечают через 3-4 нед. Снижение титра AT обычно происходит медленно и становится заметным через 3-4 мес, а спустя 8-12 мес AT уже не выявляются. Установлена корреляция между анти-ГА и ПА. Низкий процент птиц (до 12) с ПА указывает на наличие в стаде выраженного иммунитета против НБ, а высокий процент (более 50) свидетельствует о персистентной инфекции.

Получены раздельно AT на гликопротеин ГА-нейраминидазы (ГП-ГН) и на гликопротеин слияния (ГП-С). Первые из них подавляют ГА- и нейрамннидазную активность вируса НБ и тормозят его гемолитическое действие, AT на ГП-С не влияют на его первые две активности, но подавляют его гемолитическую активность и тормозят эффект вирусиндуцированного слияния клеток. Шт. 575, выделенный от диких лебедей и королевских крачек в Канаде, обладал уникальной способностью вызывать образование не только анти-ГА, но и AT, блокирующих элюцию вируса с эритроцитов.

Экспериментальная инфекция. Легко воспроизводится на курах, цыплятах и индюшатах вирулентными штаммами при любом методе заражения. Вся зараженная велогенными штаммами птица, не имеющая пассивных материнских AT, погибает. Мезогенные штаммы (подобные вакцинному вирусу Н) вызывают летальный исход у цыплят до 45-60-сут возраста. Среди взрослой птицы отход достигает 25-30%. Чаще наблюдают параличи и парезы, У кур-несушек яйценоскость прекращается на 25-30-й день.

Лентогенные штаммы (Bl, F, La Sola, Бор/74/ВГНКИ) вызывают у цыплят слабую или инаппарантную форму болезни. Даже при интрацеребральном заражении цыплята не гибнут, КЭ также обычно не гибнут ранее 100 ч после введения минимальной летальной дозы.

Кроме кур и цыплят к экспериментальному заражению восприимчивы перепела, воробьи, тетерева, голуби. При парентеральном заражении некоторые штаммы оказались патогенными для морских свинок, кошек, собак и других млекопитающих. Интраназально и иктрацеребрально удается заразить и золотистых хомячков. Вопрос о трансвариальной передаче вируса НБ однозначно не решен. Однако факты последних лет свидетельствуют о возможности такой передачи. Так, например, в содержимом желудка очень молодых невакцинированных цыплят были обнаружены лентогенные штаммы вируса. Последний обнаруживался даже в КЭ, несмотря на присутствие материнских AT. Поствакцинальные титры AT низки н вариабельны у цыплят, предварительно инфицированных вирусом НБ (34).

ГА свойства. Вирус агглютинирует эритроциты амфибий, рептилий, птиц, человека, мышей и морских свинок. Эритроциты КРС, овец, коз, свиней и лошадей агглютинируются не всеми штаммами вируса Разнообразие в агглютинабельности эритроцитов КРС зависит от ионной силы, концентрации солей и рН р-ра. Инагтлютинабельность эритроцитов определенных видов объясняется, вероятно, быстрой элюцией с них вируса. Приблизительно 105 инфекционных единиц (ИД50) вируса равны 1 ГА. Некоторые штаммы вируса теряют ГА-активность при 56°С за 5 мин, сохраняя инфекционные свойства, другие, наоборот, сохраняют ГА-способность после прогревания при 56°С в течение 180-240 мин, а инфекционная активность их утрачивается через 90 мин. Для отдельных штаммов НБ характерна определенная температура, при которой они утрачивают ГА-активность. Это свойство можно использовать для дифференциации штаммов. ГА лентогенного шт. В1 в инфицированных клетках ХАО накапливаются к 12 ч культивирования в более низких титрах (1:16 - 1:32), чем ГА велогенного (Т/53) штамма (1:64 - 1:128).

Вирус НЕ, выращенный в КЭ, состоит из инфекционных и неинфекционных ГА частиц, У этих 2 типов частиц изучены структурные белки, ГА- и нейраминидазная активности, полипептидный состав жирных кислот в липидах мембраны. Фиксация эритроцитов цыплят глютерапьдегидом не снижет их агглютинабельности по отношению к вирусу НБ. Фиксированные таким образом эритроциты можно использовать в РГА и РТГА после хранения при температуре 4°С в течение 2 мес. Велогенные штаммы отличаются от лентогенных по ГА-свойствам. Оптимальный режим для дифференциации указанных возбудителей - обработка их в течение 1 ч азотистой кислотой при рН 4 и температуре 37°С.

Нейраминидазная активность. Выявлена обратная корреляция между нейроминидазной активностью и вирулентностью штаммов вируса. Считают, что параметры энзиматической активности могут являться маркерами вирулентности вируса in vivo.

Гемолитические свойства. Все штаммы вируса обладают гемолитической активностью по отношению к эритроцитам морских свинок, лошадей и кур, которая не связана с вирулентными свойствами и находится в прямой зависимости от ГА-титра вируса. Однако имеется и противоположное мнение. По гемолитической активности штаммы вируса НБ можно разделить на слабоактивные (S и М) и высокоактивные (Т, Н и В). На гемолитические свойства вируса влияют концентрация солей, рН и температура среды, вид эритроцитов. При 4°С она резко снижается. Гемолитические свойства вируса можно ннактивировать специфической антисывороткой и формалином.

Токсические свойства. Токсичность вируса зависит от метода введения вируса: интрацеребрально, интраназально, внутривенно. У кроликов, зараженных в мозг, в первые 2 дн развиваются параличи, и к исходу 3 сут животные гибнут. При внутривенном заражении кроликов вирус вызывает пирогенную реакцию, могут появиться лимфоцитопения и лихорадка. У мышей при интраназальном введении развивается летальная пневмония, а после нескольких повторных интраназальных введений - гепатизация легких. После 1-кратного замораживания-оттаивания вируссодержащей экстраэмбриональной жидкости или обработки ее in vitro гомологичной иммуносывороткой токсические свойства вируса исчезают

Интерфероногенные свойства. Многие штаммы, особенно шт. Н, - хорошие индукторы интерферона. Выделены ts-мутанты этого вируса и изучена их способность индуцировать интерферон в первичных клетках КЭ. Показано, что 5% вирусного генома, связанного с инфекционностью, необходимо для индукции интерферона. Существенную роль в индукции интерферона играет ранняя транскрипция (2-3 ч после заражения) генома вируса. Способность индуцировать интерферон у интактных вирионов НБ, инактивированных р-пропиолактоном от вирионов и некоторых структурных компонентов сравнивали в тест-системе Р/3 ML - интерферон продуцирующих клеток (60).

С помощью метода фингерлринта можно идентифицировать высокопатогенные штаммы вируса, имеющие очень близкое АГ родство, а также определять корреляцию между наличием специфических олигонуклеотидов и патогенностью. Разработан культурально-тааневый метод дифференциации мезовелогенного и других штаммов вируса НБ, основанного на изучении характеристики ЦПД штаммов вируса, их инфекционных титров в культуре клеток LSGFS-SF3. Лентогенные штаммы в этой культуре клеток продуцируются в низком титре и ЦПД их слабо выражено (1, 2). Получены также монАТ, пригодные для штам-мовой дифференциации. Для дифференциации лентогенных штаммов вируса НБ применяют РТА - элюции. Эти штаммы можно разделить на две группы: быстро (-24R) и медленно (+24R+) элюирующие. Кроме того, используют тест термостабильности ГА и среднюю смертность зараженных КЭ (1,2).

2. Характеристика болезни вызываемой вирусом

2.1 Определение (синонимы)

Ньюкаслская болезнь (НБ), псевдочума птиц - высоко контагиозная вирусная инфекция, главным образом куриных, характеризующаяся пневмонией» энцефалитом, множественными точечными кровоизлияниями и поражением внутренних органе».

2.2 Эпизоотологические данные

Зарегистрирована на всех континентах. Наносит громадный экономический ущерб и относится к особо опасным инфекциям. Источник инфекции - больная птица. Заражение происходит при контакте больной птицы со здоровой, а также через инфицированную воду и пищевые отходы. Особенно быстро инфекция распространяется аэрогенно. Вольная птица через 2 пня после заражения и за день до появления клинических признаков болезни выделяет вирус с выдыхаемым воздухом, во время кашля.

Распространение инфекции на большие расстояния (по воздуху до 15 км) связано с перевозкой птицы, тушек вынужденно убитой птицы, инфицированной тары, яиц из неблагополучного хозяйства, а также необезвреженной одежды, обуви. В яйцах, собранных от больной птицы, зародыш при инкубации погибает от вируса.

Проведены интересные исследования роли лектинов злаков во взаимодействии вакцинного вируса НБ шт.V4. Показаны как сродство, так и антагонизм их ГА-активности (48). Имеются данные о передаче вируса через некоторых паразитов, в частности E.tenella, E. noeca-trix. Такую же роль могут играть кокцидии. Было доказано, что после заражения вирусом цыплят, которые до этого были инвазированы половозрелыми или развивающимися формами Ascaridae galli, вирус внедрялся в паразитов и его можно было выделить. Особую важность имеет наличие вируса в яйцах A.galli, в которых он может длительное время сохраняться и передаваться восприимчивым птицам. В Австралии проведена оценка патоген-ности 45 изолятов вируса НБ, циркулирующих в настоящее время. Все патогенные изоляты передавались путем контакта (47).

Спектр патогенности в естественных условиях. В естественных условиях вирус выделяли от домашних разных видов (индейки, цесарки, утки), синантропных (голуби, воробьи, галки) и диких птиц. В 1979 г. от попугаев (Katakoe Sulpurea) выделен велогенный штамм (GND-1) вируса НБ. В 1-5% случаев вирус выделяли из клоаки водоплавающих птиц, В 1982 г. от японского ястреба-перепелятника (Accipiter Virgatus golaris) выделен вариант вируса НБ, отличающийся температурочувствительностью в РГА; он вызывал ГА только при 4°С, а не при 25 или 37°С. В 1980 г. в Бельгии выделен вирус от голубей, все штаммы его оказались лентогенными. Высказано предположение о том, что голуби - естественные носители лентогенных штаммов (23,26).

В литературе приведены случаи заражения людей вирусом НБ, которые, главным образом, могут быть при нарушении гигиены на предприятиях и индивидуальной гигиены персонала. У больных лиц развивался конъюнктивит.

Имеются сведения об эпизоотологических особенностях и клинической картине НБ среди голубей в некоторых районах Судана в 1982 г. Клинически эта болезнь характеризовалась внезапным угнетением, потерей аппетита, нервными явлениями, неспособностью летать. В ряде хозяйств летальность среди голубей достигала 100%. Выделенный вирус не отличался от прототипных штаммов вируса НБ. В течение 1984 г. в Австрии резко возросла инфицированность голубей вирусом НБ. В 1990-1991 гг. при серологическом определении AT против вируса НБ у водоплавающих (уток и гусей) с помощью РТГА и ИФА показано, что AT в РТГА выявлены у 3,]% мускусных и 10% пекинских уток, по ИФА - у 20,3 и 24,8% соответственно (2 ба).

В 1970-1972 гг. в Голландии погибло большое количество норок от менингоэнцефалита. Причиной смертности был вирус НБ. Выделенный на КЭ, он обладал низкой патогенностью для норок при интрацеребральном введении. Оказывается, животные заражались при поедании потрохов инфицированной птицы, среди которой в это время наблюдалась НБ.

Описан случай острого респираторного заболевания у 3-мес дрофы вихляя в Таифе (Саудовская Аравия). Из легких, селезенки и трахеи пораженной птицы был впервые выделен вирус НБ и вирус оспы птиц. Диагностирована также тяжелая вторичная бактериальная инфекция, описаны клиническая и патологоанатомическая картины (54).

2.3 Патогенез

ньюкасло болезнь вирус симптом

Вирус, проникая в организм, размножается в клетках эндотелия, в результате чего клетки кровеносных сосудов разрыхляются, нарушается их порозность и в них развивается воспалительно-некротические процессы. Через 24-36 ч вирус локализуется в паренхиматозных органах, костном и головном мозге, кишечнике и мышцах, вызывая наряду с резким расстройством гемодинамики тяжелые некрозодистрофические изменения.

2.4 Течение и симптомы (кратко)

Клинические и патологоанатомические изменения. При естественном течении инкубационный период длится от 5 до 15 дн (в среднем 5-6 дн). Симптомы болезни довольно разнообразны. Описаны четыре формы клинического проявления болезни. При первой - велогенной форме наблюдают угнетение, слабость, расстройство функции органов дыхания, диарею с появлением водянистых зеленоватых фекалий с примесью крови, тремор, опистотонус. Возможны параличи лап н крыльев, а также гибель птицы без каких-либо признаков. Смертность достигает 90%. Основной патологоанатомическнй признак - геморрагическое поражение Пищеварительного тракта Полагают, что эта форма болезни вызывается высокопатогенными (велогенными) азиатскими штаммами вируса. Велогенная висцеротропная НБ с летальностью до 100% в 1966-1973 гг. получила Эпизоотическое распространение, особенно в Европе и США.

Вторая форма болезни характеризуется поражением, главным образом, органов дыхания (кашель, удушье) и нервной системы. Погибает от 10 до 50% заболевшей птицы. Среди цыплят гибель достигает 90%. Пневмоэнцефалит с летальностью до 100% был широко распространен в Западном полушарии в 1940-1950 гг., в настоящее время регистрируется очень редко. Старая птица погибает редко. Некоторые мезогенные штаммы, вызывающие эту форму болезни, до сих пор используются в качестве вакцинных (шт. Н, Комаров и др.).

Третью наиболее легкую форму болезни вызывают лентогенные штаммы вируса. Наблюдают незначительные изменения респираторного а герминативного трактов (оофориты н сальпингиты). Яйценоскость прекращается на 7-22-й день, снижается аппетит, легкий кашель можно услышать ночью.

Четвертая - асимптоматическая форма протекает без клинических признаков и заболевание часто определяется серологически или выделением вируса.

Размещено на Allbest.ru