Приготовление, фиксация и окраска мазков крови

Размещено на http://www.allbest.ru/

Приготовление, фиксация и окраска мазков крови

1. Подготовка стекол

Мазки крови делают на предметных стеклах с помощью более узкого шлифованного предметного стекла.

1. С предметных стекол, бывших в употреблении и соприкасавшихся с иммерсионным маслом, последнее удаляют сухой тряпкой или бензином. Затем стекла кипятят без мыла и соды в течение 15--20 мин, промывают чистой водой и погружают на 1 ч в насыщенный раствор двухромовокислого калия в серной кислоте. Обработанные таким образом стекла промывают в течение не менее 1 ч под струей водопроводной воды и насухо вытирают чистым поло­тенцем.

2. При отсутствии двухромовокислого калия и серной кислоты стекла, бывшие в употреблении, кладут в мыльный раствор и выдерживают в нем 8--10 ч, а затем в том же растворе кипятят их 5--10 мин.

От более длительного кипячения стекла делаются мутными.

После кипячения стекла вынимают и тщательно промывают под струей водопроводной воды, а затем насухо вытирают.

3. Стекла, не бывшие в употреблении, промывают в горячей воде и насухо вытирают. Хранят стекла в стеклянной широкогорлой банке с крышкой.

2. Приготовление мазков

Взяв предметное стекло за длинные края, прикасаются его поверхностью (отступя 0,5--1 см от узкого края) к капле крови (но не к коже). Предметное стекло держат на столе или в левой руке за узкие края. Правой рукой приставляют шлифованное стекло узким краем к стеклу с кровью слева от капли под углом 45° и продвигают его вправо до соприкосновения с кровью.

Выжидают, пока кровь расплывется по всему ребру шлифованного стекла, и затем легким быстрым движением ведут его справа налево до тех пор, пока не будет исчерпана вся капля. Капля крови должна быть небольшой и соразмерена так, чтобы весь мазок помещался на стекле, не доходя 1--1,5 см до его края. Нельзя прекращать размазывание и отнимать стекло раньше, чем капля будет исчерпана. Нельзя также сильно нажимать на стекло, так как многие клетки могут оказаться поврежденными. Хорошо сделанный мазок тонок, имеет желтоватый цвет и оканчивается «метелочкой».

Густо-розовые и красноватые мазки непригодны для счета, так как они слишком толсты и клеточные элементы при этом дифференцировать невозможно. После приготовления мазки быстро сушат на воздухе до исчезновения влажного блеска. При медленном высыхании может изменяться морфология клеток.

На высушенном мазке уголком предметного стекла или карандашом (только не химическим) пишут фамилию, инициалы больного, дату. При необходимости переслать мазок с консультационной целью в другой город мазок рекомендуется делать на хорошо отмытой использованной рентгеновской пленке, нарезанной по размеру предметного стекла.

Такие мазки можно пересылать в письмах.

Симптом крошковатости мазка крови.

При заболеваниях, протекающих с повышенным содержанием фибриногена в крови, мазок, сделанный на предметном стекле, имеет крошковатый характер. На этот простой, и доступный признак рекомендуется обратить особое внимание при взятии крови.

3. Фиксация мазков

Принцип.

Обработка мазков фиксирующими жидкостями, придающими форменным элементам стойкость по отношению к содержащейся в красках воде, которая без фиксации мазков гемолизирует эритроциты и изменяет строение лейкоцитов. Кроме того, фиксация, вызывая коагуляцию белка, прикрепляет препарат к стеклу.

Посуда и аппаратура.

1. Пинцет.

2. Специальная посуда для фиксации или стаканы, обрезанные до высоты 6--6,5 см.

3. Штатив для сушки мазков на воздухе.

4. Предметные стекла.

Реактивы.

Химически чистый метиловый спирт (метанол) или 96° этиловый спирт, или денатурированный спирт, или смесь Никифорова, состоящая из равных количеств этилового спирта и серного эфира.

Лучшим фиксатором является метиловый спирт.

Методика.

Высохшие на воздухе мазки крови, сложенные попарно (мазками наружу), опускают пинцетом в специальную посуду для фиксации или в обыкновенные стеклянные стаканы, обрезанные до 6--6,5 см и наполненные до определенной высоты фиксирующей жидкостью. В последнем случае для обеспечения свободного соприкосновения намазанных сторон препаратов с фиксатором сверху, между попарно сложенными мазками, прокладывают предметные стекла, опирающиеся своими ребрами на верхнюю часть стакана. В метиловом спирте мазки выдерживают не менее 5 мин, а в этиловом и денатурированном спирте и смеси Никифорова -- не менее 30 мин.

По окончании срока фиксации препараты вынимают пинцетом, сушат на воздухе или ополаскивают в банке с нейтрализованной дистиллированной водой и укладывают мазками кверху на стеклянный мостик для окраски.

4. Фиксация мазков по Яхонтовой

Принцип.

Повышение качества фиксации этиловым спиртом за счет предварительной обработки его цитратом и оксалатом натрия.

Посуда и аппаратура.

1. Цилиндры емкостью 100 мл.

2. Пипетки, стеклянные палочки для размешивания.

3. Водяная баня.

4. Пинцет.

5. Специаль­ная посуда для фиксации или стаканы, обрезанные до высоты 6--6,5 см.

6. Штатив для высушивания мазков на воздухе.

Реактивы.

Готовят 2 реактива.

1. В цилиндр емкостью 100 мл вносят 1,5 г цитрата натрия, приливают 1,5 мл дистиллированной воды, размешивают стеклянной палочкой и для ускорения растворения помещают цилиндр в горячую водяную баню. В полученный слегка мутноватый раствор приливают этиловый спирт до объема 100 мл и тщательно, в течение 5--8 мин, размешивают. При размешивании на дне цилиндра образуется клейкое белое вещество, тянущееся за палочкой.

Раствор оставляют в покое на сутки для отстаивания.

2. Реактив готовят так же, как и предыдущий, но вместо цитрата натрия берут оксалат натрия.

Методика.

Прозрачные реактивы 1 и 2 через сутки после их приготовления сливают в равных количествах и в этой смеси фиксируют сухие мазки крови в течение 20--30 с, после чего их подсушивают на воздухе (можно и не сушить!) и окрашивают.

Если при окраске эритроциты получаются не бледно-розовые, а серовато-розовые, то прибавляют раствор цитрата натрия в большем количестве. Качество окраски при такой фиксации получается хорошее, поэтому при отсутствии метилового спирта может быть применен описанный выше фиксатор.

5. Фиксация мазков парами фенола (по Сюткину)

Принцип.

Получение хорошего качества фиксации мазков при отсутствии спирта.

Посуда и аппаратура.

1. Эксикатор.

2. Стеклянный мостик для мазков.

3. Термометр.

Реактивы.

1. Кристаллический фенол.

2. Дистиллированная вода.

Методика.

В эксикаторе заменяют фарфоровую подставку на стеклянный мостик для мазков. Притираемые поверхности эксикатора и его крышки смазывают вазелином. На дно эксикатора наливают жидкий фенол (90 весовых частей кристаллического фенола и 10 весовых частей дистиллированной воды) из расчета 100 мл на 1,4 л объема эксикатора. В близи эксикатора на стене вешают термометр. Приготовленные обычным способом сухие мазки крови помещают в эксикатор на мостике в один ряд намазанной поверхностью вниз.

Для сохранения формы эритроцитов, лейкоцитов и дифференцированной окраски зернистости лейкоцитов воздействие на мазки крови паров фенола должно продолжаться в зависимости от комнатной температуры строго определенное время: при температуре 16--18° -- 20 мин, при 19--21°--10 мин, при 22--24° -- 5 мин, при 25--27° -- 3 мин.

По истечении этого времени мазки вынимают, раскладывают на столе намазанной поверхностью кверху. Время выветривания мазков должно быть не менее времени фиксации. Время фиксации мазков крови парами фенола может быть сокращено до 1ч-1ч30мин в условиях термостата при 28--30°.

Время освобождения от паров фенола при воздействии его в течение 10-- 20 мин может быть в срочных случаях сокращено до 5 мин путем подогревания при 37° в термостате, сушильном шкафу, на батареях водяного отопления или выветриванием настольным электровентилятором.

Если применяют жидкий фенол, качество которого бывает различным, то время фиксации может не совпасть с указанным выше.

В этом случае во избежание ошибок производят пробную фиксацию нескольких мазков в течение 3; 5; 10; 15; 20; 25 мин.

После окраски мазков отбирают те из них, в которых хорошо выражена нейтрофильная зернистость и отсутствует гемолиз эритроцитов. То же проделывают при возможных колебаниях комнатной температуры.

По отобранным мазкам составляют таблицу времени фиксации парами фенола в зависимости от температуры в комнате.

Недостаточная фиксация мазков дает слабую окраску нейтрофильной зернистости, а недостаточное освобождение мазков от паров фенола ведет к гемолизу эритроцитов при окраске или окрашиванию мазка в красный цвет.

6. Окраска мазков

Краску следует готовить на воде нейтральной реакции.

Принцип.

Все предложенные методы окраски мазков основаны главным образом на химическом сродстве основных частей клеток к определенным анилиновым краскам и в меньшей степени на их физических свойствах. Цитоплазма одних клеток, будучи щелочной, имеет сродство к кислым краскам, выявляя оксифильные элементы крови. Цитоплазма других клеток, содержащих базофильные и нейтрофильные субстанции, поглощает и кислые, и основные краски. Ядра, содержащие в значительном количестве нуклеиновую кислоту, связывают главным образом основные краски.

К основным гематологическим краскам относятся метиленовый синий и его производные-- азур I (метиленазур) и азур II (смесь равных частей азура I и метиленового синего), к кислым -- водорастворимый желтый эозин.

Азур-эозиновые смеси красок обладают высокой чувствительностью к реакции воды и поэтому применяемая для приготовления красителей и для смывания их дистиллированная вода должна иметь нейтральную реакцию, т. е. рН 7,0. При кислей реакции воды клетки долго не прокрашиваются и имеют красный оттенок. При щелочной реакции эритроциты окрашиваются в серовато-синий цвет, а ядра и цитоплазма клеток -- в очень темные цвета.

Определение рН воды.

Концентрацию водородных ионов (рН) воды определяют с помощью рН-метра, или индикаторных бумажек.

Нейтрализация дистиллированной воды.

Кислую воду подщелачивают по каплям 1% раствором карбоната натрия, щелочную -- подкисляют 1% раствором уксусной кислоты до тех пор, пока она не будет иметь рН 7,0.

Более удобен способ нейтрализации буферными смесями.

Для этого готовят 1/15 н. растворы:

1) динатрийфосфата (Na2HPO4*2Н20), высушенного в теплом месте в течение 5 сут, растворением 11,876 г его в 1 л дистиллированной воды

2) монофосфата калия (КН2РО4) растворением 9,078 г его в 1 л дистиллированной воды. Эти растворы хранят в темном месте с прибавлением кристаллика тимола для предотвращения образования плесени.

Пользоваться ими можно до образования в них хлопьев.

Рабочую смесь готовят смешиванием 7 частей первого раствора с 3 частями второго.

Пример.

Определяют рН дистиллированной воды, подлежащей нейтрализации. Допустим, что рН воды 5,2, тогда к 100 мл дистиллированной воды прибавляют 4,5--5 мл указанной выше буферной смеси, перемешивают и вновь определяют рН. Если рН будет 6,8--7,0, т. е. требуемая, то, исходя из этого, высчитывают по простому тройному правилу количество буферного раствора, которое необходимо добавить ко всему количеству дистиллированной воды, подлежащей нейтрализации.

7. Окраска по Романовскому

Принцип.

Окрашивание различных элементов клеток в разные цвета и оттенки смесью основных (азур II) и кислых (водорастворимый желтый эозин) красок.

Посуда и аппаратура.

1. Колба или бутыль емкостью 1 л.

2. Измерительные цилиндры емкостью 250 мл.

3. Цилиндры для разведения красок емкостью 100 мл.

4. Градуированная пипетка.

5. Штатив для мазков.

6. Кювета со стеклянным мостиком для окраски.

Реактивы.

В продаже имеется готовый раствор краски Романовского, а также сухая краска Романовского (Гимзы), из которой приготовляют раствор следующим образом: 3,8 г сухой краски Романовского растворяют в 250 мл чи­стого метилового или этилового спирта (последний хуже).

Раствор оставляют на 3--5 сут, часто взбалтывая для лучшего растворения краски.

Затем прибавляют 250 мл чистого глицерина и вновь оставляют на 3--5 сут, периодически взбалтывая. Приготовленная таким образом краска хорошо сохраняется длительное время в темных бутылях в шкафу, где нет ни кислот, ни щелочей.

Вновь полученный или приготовленный раствор красителя Романовского перед употреблением оттитровывают, т. е. окрашивают несколько фиксированных мазков крови в течение 25--40 мин различно разведенной краской (1--2 капли краски на 1 мл дистиллированной воды). По хорошо окрашенному препарату устанавливают нужное количество капель краски на 1 мл воды и время окрашивания.

Методика.

Фиксированные мазки укладывают на мостик, состоящий из двух стеклянных палочек, уложенных на два противоположных края кюветы.

Затем мазки заливают разведенной краской, которую наливают на мазок возможно более высоким слоем. Окрашивание длится в зависимости от температуры воздуха в помещении от 25 до 45 мин.

Если температура в помещении низкая или требуется быстрее окрасить мазки, то разведенную краску можно подогреть до 60--70° (до кипения доводить нельзя).

После окончания окраски краску смывают (но не сливают) сильной струей воды и ставят мазки вертикально в деревянный штатиз для просушивания.

Разведенной краской можно пользоваться только в течение одного дня.

8. Окраска по Романовскому в модификации Филипсона

Принцип.

Применение красителей-фиксаторов, которыми мазки крови в первый период одновременно фиксируются и частично окрашиваются, а во второй период, после разбавления красителей -фиксаторов дистиллированной водой, докрашиваются окончательно.

Посуда и аппаратура -- см. «Окраска по Романовскому».

Реактивы.

1.Одну часть готовой краски Романовского и 3 части этилового спирта (ректификата) тщательно смешивают. Краска сразу же пригодна к употреблению, но можно готовить ее и заранее.

2. Дистиллированная вода нейтральной реакции.

Методика.

Приготовленный краситель наливают на нефиксированный мазок, покрывая его полностью и через 1 -- 1мин30 сек, не сливая красителя, прибавляют к нему но каплям примерно столько же дистиллированной воды, следя за тем, чтобы вода при соединении с красителем не сливалась с мазка. Через 20--30 мин краситель смывают водой и мазок высушивают. Этим способом клетки окрашиваются хорошо, но иногда, по-видимому, от недоброкачественности спирта в эритроцитах обнаруживаются мелкие пузырьки, мешающие определению степени насыщения их гемоглобином.

9. Окраска по Лейшману

Способ Лейшмана отличается от предыдущего лишь применяемым красителем и продолжительностью периодов фиксации и окраски. При этом способе применяют краситель, получаемый растворением смеси азура I, метиленового синего и желтого водорастворимого эозина в количестве 0,2 г в 10 мл абсолютного метилового спирта.

Продолжительность фиксации неразбавленным красителем 3--4 мин, а окраски с равным количеством воды 5--10 мин.

10. Способы быстрой окраски мазков краской Романовского по Алексееву

Принцип.

Одновременная фиксация и окраска мазков с применением для ускорения окрашивания по первому способу подогрева дистиллированной воды и по второму способу -- подогрева разведенной краски Романовского.

Посуда и аппаратура.

1. Глазные пипетки.

2. Водяная баня.

3. Темная бутыль с притертой пробкой емкостью 1 л. Остальное -- см. «Окраска по Романовскому».

Реактивы.

1. Разведенная краска Романовского (1,5 капли краски на 1 мл дистиллированной воды).

2. Краситель Лейшмана для второго метода (растворяют 4 г сухой краски в 1 л метилового спирта и хранят в темной посуде).

3. Чистый метиловый спирт.

4. Нейтральная дистиллированная вода.

5. Фильтровальная бумага.

Методика.

1. На сухой нефиксированный мазок наносят глазной пипеткой 6--10 капель краски Романовского, распределяя ее той же пипеткой равномерным слоем. Через 30 с другой пипеткой добавляют к краске по каплям удвоенное количество подогретой до 50--60° дистиллированной воды. Покачиванием препарата перемешивают краску с водой и оставляют на 3 мин в покое, затем смывают ее дистиллированной водой и высушивают мазок фильтровальной бумагой. При этом методе окраски частично гемолизируются эритроциты, однако клетки белой крови не изменяются.

При втором способе, приводимом ниже, результаты получаются лучшей окраска препаратов мало отличается от обычной окраски по Романовскому.

2. На сукой нефиксированный мазок наливают равномерным слоем 10--12 ка­пель краски Лейшмана. Через 20--30 с, не сливая краску, добавляют к ней нагретый до 50--60° раствор краски Романовского в количестве, способном удержаться на препарате. Через 3 мин, не сливая краску, смывают ее сильной струей дистиллированной воды и высушивают препарат фильтровальной бумагой.

11. Окраска по Нохту

Принцип.

Воздействие на фиксированный мазок водного раствора смеси основной (азур II) и кислой краски (эозин).

Посуда и аппаратура --

см. «Окраска по Романовскому».

Реактивы.

1. Раствор 1 г азура II в 1 л дистиллированной воды.

2. Раствор 1 г водорастворимого желтого эозина в 1 л дистиллированной воды.

Каждый из этих растворов хорошо перемешивают и оставляют созревать при ежедневном встряхивании на 10--14 дней.

Перед окрашиванием раствор красителя готовят смешиванием 25 мл раствора 1,

20 мл раствора 2 с 55 мл нейтральной дистиллированной воды (пропорции вновь приготовленных растворов иногда приходится подбирать эмпирически).

Методика.

Краситель наливают на фиксированный мазок, и окрашивание длится в зависимости от температуры воздуха 25--45 мин. Затем краситель смывают и мазки высушивают на воздухе.

12. Окраска по Паппенгейму -- Крюкову

Принцип.

Комбинированная окраска фиксатором-красителем Мая--Грюнвальда и краской Романовского, дающая возможность очень хорошо дифференцировать составные части клеток.

Посуда и аппаратура -- см. «Окраска по Романовскому».

Реактивы

1. Готовый краситель-фиксатор Мая--Грюнвальда, состоящий из эозин метиленового синего в метиловом спирте.

2. Свежеприготовленный раствор краски Романовского

(1--2 капли краски на 1 мл дистиллированной воды).

3. Нейтральная дистиллированная вода.

При отсутствии готового красителя-фиксатора Мая-Грюнвальда его можно приготовить растворением 0,3-0,5 г сухой краски Мая-Грюнвальда в 100 мл чистого метилового спирта с добавлением (или без него) 50 мл чистого глицерина.

Краситель в обоих случаях созревает 4 дня при комнатной температуре.

Методика.

На нефиксированный мазок наливают пипеткой 10--15 капель готового красителя-фиксатора Мая--Грюнвальда, через 3 мин прибавляют по каплям столько же воды и продолжают окрашивание еще 1 мин, после чего краситель смывают водой и мазок высушивают на воздухе.

Затем на высушенный мазок наливают свежеприготовленный водный раствор красителя Романовского на 8--15 мин в зависимости от температуры в помещении, смывают краску водой и мазок высушивают на воздухе. Этот способ окраски является наилучшим.

13. Окраска по Райту

Принцип.

Применение специально приготовленного красителя-фиксатора, дающего наиболее четкую окраску зернистости гранулоцитов особенно базофилов.

Посуда и аппаратура.

1. Стеклянные колбы емкостью 250 и 1000 мл.

2. Аппарат Коха.

3. Воронки.

4. Измерительный цилиндр емкостью 500 мл.

5. Штатив для мазков.

6. Мостик для окраски с кюветой.

Реактивы.

Краситель-фиксатор: 1% раствор медицинского метиленового синего на 0,5% водном растворе двууглекислого натрия наливают в сосуд так, чтобы высота слоя не превышала 6 см, и нагревают в аппарате Коха при 100° в течение часа с момента образования пара. Затем жидкость охлаждают и фильтруют. Фильтрат при искусственном освещении в тонком слое должен иметь пурпурно-красный оттенок.

К 100 мл фильтрата прибавляют 500 мл 0,1% водного раствора эозина (желтого, водорастворимого). При смешении обеих жидкостей тотчас же образуется обильный осадок, который отфильтровывают и высушивают. Полученный краситель растворяют в чистом метиловом спирте в соотношении 0,1 : 60.

Методика.

На сухой нефиксированный мазок наливают несколько капель краски, спустя 1 мин прибавляют столько же капель дистиллированной воды. Через 2--3 мин препарат промывают в воде (около полминуты), пока он в тонком слое не приобретает розового оттенка.

14. Приготовление и окраска толстой капли

Принцип.

Использование большего­ объема крови с целью улучшения условий обнаружения в крови малярийных плазмодий, спирохет возвратного тифа, эозинофилов и полихроматофилов.

Посуда и аппаратура.

1. Предметные стекла.

2. Мостик для окраски с кюветой.

3. Штатив для сушки мазков.

Реактивы.

1. Краска Романовского.

2. Дистиллированная вода.

Методика.

Приготовляют обычный мазок крови и на толстые места его наносят отдельно две большие капли крови. Каждую каплю концом иглы или углом другого стекла размазывают до величины двух- или трехкопеечной монеты и сушат на воздухе.

Мазок до нанесения толстых капель и после не фиксируют, а наливают на него на несколько минут дистиллированную воду для извлечения гемоглобина. Окрашенную гемоглобином воду затем осторожно сливают и на препарат наливают разведенную, как обычно, краску Романовского на 20--30 мин. После окраски препарат осторожно промывают водой, чтобы не смыть каплю, и высушивают на воздухе.

Больший объем крови, чем в мазках, и гемолиз эритроцитов позволяют легче обнаружить в крови малярийные плазмодии, спирохеты возвратного тифа, а также эозинофилы и полихроматофилы.

При хорошей фиксации и окраске любым из приведенных выше способов ядра лейкоцитов окрашиваются в вишнево-красный цвет с хорошо видимой структурой хроматина,

ядрышки -- в синевато-голубоватый или в светло-фиолетовый,

цитоплазма нейтрофилов -- в светло-розовый,

лимфоцитов -- в чистый сине-голубой,

моноцитов -- в серо-голубой или дымчатый,

зернистость нейтрофильная -- в красновато-фиолетовый,

эозинофильная -- в оранжево-красный,

базофильная -- в темно-фиолетовый или темно-серый,

азурофильная -- в вишнево-красный,

эритроциты -- в бледно-розовый цвет.

Клиническое значение.

Приведенные методы окраски дают возможность дифференцировать вид клеток, особенности структуры их ядер и цитоплазмы и патологические изменения в них.

15. Окраска патологической (токсигенной) зернистости нейтрофилов по Шмелеву

Принцип.

Окрашивание патологической зернистости нейтрофилов в кислых растворах азура II и эозина

(начиная с рН 5,4). При этом в норме зернистость не выявляется и цитоплазма нейтрофилов окрашивается в гомогенно-розовый цвет.

Посуда и аппаратура.

1. Специальная посуда для фиксации или стаканы, обрезанные до высоты 6--6,5 см.

2. Пинцет.

3. Остальное см. «Окраска по Романовскому».

Реактивы.

1. Дифосфат натрия.

2. Монофосфат калия.

3. Краска азур II.

4. Водорастворимый желтоватый эозин.

5. Дистиллированная вода.

6. Фильтровальная бумага.

Приготовление буферного раствора.

11,876 г высушенного в теплом месте в течение 5 сут двуводиого дифосфата натрия (Na2HP04*2H20) растворяют в 1 л дистиллированной воды;

9,078 г монофосфата калия (КН2Р04) также растворяют в 1 л дистиллированной воды.

Для получения буферной смеси рН 5,4 0,4 мл полученного раствора дифосфата натрия смешивают с 9,6 мл раствора монофосфата калия.

Краситель готовят из 0,1% водного раствора азура II и 0,1% водного раствора водорастворимого желтоватого эозина. Смешивают 10 мл фосфатной буферной смеси с 2,5 мл 0,1% водного раствора азура II и 1,5 мл 0,1% водного раствора эозина.

Методика.

Мазок фиксируют в течение 4 мин в метиловом спирте, затем окрашивают в течение часа азуром II -- эозином в фосфатной буферной смеси. После этого краску смывают дистиллированной водой и мазок просушивают фильтровальной бумагой.

При правильной окраске наряду с нейтрофилами, цитоплазма которых содержит фиолетовые зерна (патологическая зернистость), встречаются клетки с совершенно гомогенной розовой цитоплазмой. При слишком кислой смеси лейкоциты почти не окрашиваются.

При щелочной среде зернистость выявляется во всех нейтрофилах.

В этих случаях нужно немного увеличить количество или дифосфата натрия, или монофосфата калия. Индикатором точности реакции буферной смеси служат мазки крови.

16. Окраска патологической (токсигенной) зернистости по Фреифельд

Принцип.

Применение основной краски -- карбол-фуксин-метиленового синего.

Посуда и аппаратура см. «Окраска по Романовскому» и водяная баня.

Реактивы.

1. 1 г основного фуксина растворяют при слабом нагревании в 15 г 96° этилового спирта, охлаждают и к спиртовому раствору добавляют 100 мл 5% раствора карболовой кислоты.

2. 1% водный раствор метиленового синего.

Оба красителя можно хранить в отдельности практически неограниченное время.

Рабочую смесь готовят непосредственно перед окраской, так как она непригодна для хранения.

К 20 мл водопроводной воды приливают 7 капель первой краски, смешивают, прибавляют 5 капель второй краски и снова смешивают.

Методика.

Мазки крови, фиксированные 3 мин в метиловом спирте, красят 1 час рабочей смесью красителя, а затем краситель смывают водой и мазки высушивают.

Препарат, уже окрашенный по Романовскому, может быть окрашен этим способом без предварительного обесцвечивания.

В цитоплазме лейкоцитов выявляется синеватая сеточка со всеми переходами к образованию крупных комочков. Количество клеток с патологической зернистостью в цитоплазме выражают в процентном отношении; например, количество всех нейтрофилов 75%, из них с патологической зернистостью 48%

Клиническое значение.

Наличие в цитоплазме нейтрофилов патологической зернистости имеет большое значение для оценки состояния больного при инфекционных процессах, при сепсисе, новообразованиях, интоксикациях и других заболеваниях.

Увеличение количества нейтрофилов с патологической зернистостью указывает на тяжесть процесса, уменьшение их при повторных исследованиях крови -- на благоприятное течение болезни. При острых инфекциях патологическая зернистость появляется не ранее 4--5-го дня от начала заболевания и часто не идет параллельно с ядерным сдвигом, который обычно появляется в начале болезни.

17. Окраска для выявления базофильной пунктации эритроцитов по Фреифельд

Принцип.

Базофильная зернистость эритроцитов хорошо воспринимает щелочной раствор метиленового синего.

Посуда и аппаратура см.

«Окраска по Романовскому».

Реактивы.

1. 1% водный раствор метиленового синего.

2. Метиловый спирт.

Методика.

Мазок фиксируют в течение 3 мин в метиловом спирте, а затем окрашивают в течение часа раствором метиленового синего (5 капель 1% раствора на 20 мл водопроводной воды).

Краску смывают водой и мазок высушивают.

Базофильную пунктацию можно обнаружить и в мазках крови, окрашенных обычными способами по Романовскому, Паппенгейму--Крюкову и др.

В этом случае она приобретает фиолетово-синий цвет.

Обычно сосчитывают 10 000 эритроцитов и отмечают количество эритроцитов с базофильной пунктацией. Лучше считать 1 000 000 эритроцитов, а ответ давать в пересчете на 10 000.

У здоровых людей количество эритроцитов с базофильной пунктацией колеблется от 0 до 3--4 на 10 000 эритроцитов.

Клиническое значение.

Число эритроцитов с базофильной пунктацией увеличивается в крови плода, при некоторых анемиях, отравлении тяжелыми металлами (свинец, висмут, цинк, ртуть). Однако этот симптом не является специфичным для какого-либо заболевания.

Увеличение количества эритроцитов с базофильной пунктацией не всегда наблюдается даже при свинцовом отравлении.

18. Техника взятия крови

Прежде чем приступить к взятию крови у больного, нужно знать, для какой цели ее берут и какое количество крови нужно для анализа.

Место взятия крови. Если нужно взять несколько капель крови, ее берут из мочки уха или из мякоти третьей фаланги пальца руки. В клинических и больничных учреждениях чаще берут кровь из пальца. Когда нужно получить несколько миллилитров крови, ее берут из вены предплечья.

Время взятия крови. Важен также момент взятия крови. Для определения количества лейкоцитов нужно брать кровь натощак, так как после еды может быть пищеварительный лейкоцитоз.

Инструменты для взятия крови и их стерилизация. Из пальца можно получить кровь любым колющим инструментом: иглой от шприца, писчим пером, оспенным ланцетом, небольшим хирургическим скальпелем и т. д. Удобным инструментом для взятия крови из пальца считалась ранее специальная игла Франка .

Брать кровь у больного следует таким образом, чтобы возможность внесения инфекции в рану была полностью исключена. Инструменты должны быть простерилизованы кипячением или обеззаражены спиртом. От кипячения скальпель и ланцеты тупятся, а у иглы Франка для взятия крови часто ржавеет пружина. Стерилизация спиртом ланцета иглы Франка недостаточна, в связи с чем не исключена возможность занесения инфекции в ранку пальца.

Поэтому в настоящее время применяют иглу-скарификатор со сменными копьями (иглами), устроенными наподобие иглы Франка. К игле-скарификатору приложено 16 съемных копий (игл), которые кипятят и сменяют после каждого взятия крови.

Часто предпочитают брать кровь из пальца простыми инструментами (оспопрививательными перышками, иглой от шприца и др.), которые стерилизуются кипячением.

Стерилизация кожи больного и медсестры. Кожу на том месте, где должна быть взята кровь, протирают спиртом, а затем эфиром. Если кожа загрязнена, ее тщательно (щеткой) моют водой с мылом. Не нужно слишком растирать кожу, чтобы не вызвать гиперемии: последняя может дать местные изменения состава крови, в результате чего получится неправильный результат анализа.

Медицинская сестра перед взятием крови у больного должна тщательно вымыть руки с мылом и протереть их спиртом. Место укола и инструменты должны быть сухими. В противном случае кровь, выходя на поверхность кожи, смешается с водой или со спиртом и изменит свой состав. Если кожа сухая, то кровь не расплываегся и выступает на поверхность в виде шарика.

Первым и вторым пальцами левой руки захватывают с боков третью фалангу пальца больного и приставляют к ее мякоти перпендикулярно к поверхности колющий инструмент, который держат в правой руке. Слегка нажимая, производят прокол поверхности слоя кожи, вполне достаточный для получения нескольких капель крови.

Силу нажима нужно соразмерять с толщиной кожи больного. Укол должен быть настолько глубоким, чтобы кровь самостоятельно выступила на поверхность кожи.

Первую выступившую каплю стирают кусочком стерильной марли, так как кровь в ней может быть изменена вследствие некоторого разрушения тканей в результате укола.

Кровь для исследований берут из последующих капель. После взятия крови к месту укола прикладывают кусочек стерильной марли или ваты и предлагают больному прижать ее другим пальцем. В большинстве случаев этого бывает вполне достаточно, чтобы кровь быстро остановилась.

Если кровотечение не прекращается, накладывают маленькую давящую повязку.

Как взять кровь из вены, рассказано в курсе по общему уходу за больным.

19. Определение количества гемоглобина

Количество гемоглобина обычно определяют при помощи гемометра. Прибор состоит из деревянного корпуса, в середину которого вставлена градуированная пробирка, имеющая две шкалы, нанесенные с обеих сторон. Первая шкала показывает количество гемоглобина в граммах на 100 мл крови -- грамм-проценты гемоглобина (г%). Вторая шкала показывает единицы гемометра (или проценты гемоглобина), при этом 100% (единиц) гемоглобина соответствуют 16,67% (51).

На пробирке может быть нанесена только одна, первая шкала. Тогда для получения количества единиц число грамм-процентов нужно умножить на шесть. .

По обе стороны центральной пробирки с исследуемым раствором укреплены две запаянные пробирки, содержащие стандартный раствор сернокислого гематина. Сзади в корпус вмонтировано матовое

стекло. К гемометру прилажены пипетка, которой насасывают кровь, пипетка для прибавления воды и палочка для размешивания. Так как раствор солянокислого гематина, заключенный в стандартных пробирках, постепенно выцветает, в новых приборах пробирки заменены сплошными стеклянными палочками соответствующего цвета, которые не подвержены выцветанию.

Перед взятием крови в совершенно чистую и сухую пробирку до метки 10 наливают децинормальный1 раствор соляной кислоты. Кровь берут из пальца, насасывая ее капиллярной пипеткой до метки 20 мм3. Кончик пипетки обтирают кусочком ваты, опускают до дна пробирки и осторожно выдувают кровь в раствор. Затем раствор втягивают и выдувают обратно в пробирку несколько раз, чтобы промыть оставшуюся в ней кровь. Вследствие смешивания крови с соляной кислотой гемоглобин переходит в солянокислый гематин и раствор приобретает коричневый цвет. Через несколько минут в раствор прибавляют пипеткой по каплям дистиллированную воду и помешивают стеклянной палочкой до тех пор, пока цвет раствора исследуемой крови не сравняется с цветом боковых стандартных пробирок. Деление пробирки, которое будет соответствовать уровню раствора, укажет количество единиц содержания гемоглобина в исследуемой крови. Разумеется, чем больше гемоглобина в крови, тем больше ее нужно разбавлять водой, чтобы окраска сравнялась со стандартами.

20. Взятие крови для подсчета эритроцитов и лейкоцитов

Смесители. Для подсчета форменных элементов кровь набирают в специальные смесители, в которых для облегчения счета разбавляют ее в определенной пропорции. Смесители представляют собой капиллярные пипетки, заканчивающиеся небольшим стеклянным резервуаром, в котором свободно лежит небольшая стеклянная бусинка. Пипетка смесителя для счета красных кровяных телец посредине имеет метку 0,5, в конце-- 1,0 а в месте, где оканчивается резервуар,-- 101. Пипетка смесителя для счета лейкоцитов имеет такие же деления, но только резервуар ее меньше и в конце его стоит метка 11.

Раствор для смесителей. Для подсчета эритроцитов «ровь нужно разбавлять такой жидкостью, которая не растворяет красных телец. Поэтому кровь нельзя разбавлять дистиллированной водой, -- ее разбавляют 0,85--1% раствором поваренной соли. В качестве разбавляющей жидкости для подсчета лейкоцитов пользуются 3% раствором уксусной кислоты, которая растворяет эритроциты и не изменяет лейкоциты.

Взятие крови в смесители. Смесители должны быть абсолютно чисты и сухи, а бусинка должна совершенно свободно кататься

1 Нормальным титрованным раствором называется такой раствор, в 1 л которого содержится 1 грамм-эквивалент растворенного вещества. Грамм-эквивалент вещества -- это количество граммов, численно равное его эквивалентному весу. Эквивалентный вес вычисляется путем деления атомного веса на валентность. Валентностью называется способность атомов различных элементов присоединять или замещать в химических соединениях определенное число атомов водорода. Децинормальный раствор -- одна десятая нормального раствора, т. е. его концентрация в десять раз меньше нормального, в стеклянном резервуаре. Для подсчета эритроцитов берут пипетку с большим резервуаром, на конце которого стоит метка 101, насасывают кровь до деления 0,5 или 1,0, обтирают кончик смесителя кусочком ваты, сразу опускают смеситель в раствор поваренной соли и насасывают его до метки 101. Если кровь набирают до метки 0,5, она разбавляется в 200 раз. Затем зажимают концы смесителя пальцами одной руки и встряхивают: бусинка в резервуаре равномерно распределяет форменные элементы. После этого берут смеситель для лейкоцитов, насасывают кровь тоже до 0,5 или 1,1, обтирают кончик смесителя кусочком ваты и затем набирают до метки 11 раствор уксусной кислоты. Для подсчета лейкоцитов кровь разбавляют в 10 или 20 раз.

По окончании насасывания раствора смеситель хорошо встряхивают, зажав его концы.

В настоящее время в лабораторной практике применяют более простой способ разбавления крови не в смесителях, а в пробирках. Для подсчета эритроцитов в обыкновенную лабораторную пробирку (сухую и чистую) длиной в 15 см и диаметром не более 1,5 см наливают 4 мл раствора хлорида натрия (1--3%). В такую же пробирку длиной в 10 см и диаметром до 1 см наливают заранее 0,4 мл раствора уксусной кислоты (1--3%) для подсчета лейкоцитов. Набирают из пальца кровь в особый капилляр (до метки 20 мм3) и добавляют в пробирку. В пробирке с хлоридом натрия для эритроцитов получается разведение в 200 раз, а в пробирке с уксусной кислотой для лейкоцитов -- разведение в 20 раз.

21. Приготовление мазков крови и толстой капли

Чтобы увидеть под микроскопом форменные элементы крови или микроорганизмы, нужно тонким равномерным слоем нанести кровь на предметное стекло. Техника приготовления мазка крови очень проста, но требует определенных точных приемов.

Чтобы мазок был правильно приготовлен, удобнее всего пользоваться предметными стеклами; на них наносят каплю крови и затем размазывают ее покровным стеклышком. Для приготовления мазка требуется только 1--2 капли крови. Сделав укол в палец, к выступившей капле, не касаясь пальца, прикладывают предметное стекло с какого-либо одного края. После этого стекло поворачивают каплей вверх и берут его первым и третьим пальцами левой руки. Первым и вторым пальцами правой руки берут покровное стеклышко, приставляют его плотно ребром к предметному стеклу, приблизительно под углом в 45°, подводят к капле крови и, после того как кровь распределится вдоль ребра покровного стеклышка, быстро проводят им по предметному стеклу; при этом получается тонкий равномерный мазок крови (52). После приготовления мазков предметные стекла на 5--10 минут кладут вверх той стороной, на которой размазана кровь, чтобы дать ей высохнуть.

В некоторых случаях бывает нужно приготовить не тонкий слой крови, а толстый. Это бывает необходимо, когда в крови ищут микроорганизмы, например плазмодии малярии, которых может быть настолько мало, что в тонком слое найти их будет чрезвычайно трудно. Для этого приготовляют так называемую толстую каплю. На предметное стекло наносят большую каплю крови и иглой размазывают ее до величины десятикопеечной монеты; стекло кладут вверх той стороной, на которой размазана кровь, чтобы она высохла.

6000--8000 лейкоцитов. Увеличение количества белых кровяных телец называется лейкоцитозом, а уменьшение -- лейкопенией. Иногда количество лейкоцитов увеличивается в несколько раз, например при крупозной пневмонии может доходить до 20 000--30 000 и более в 1 мм3.

Диагностическое значение имеет не только общее количество лейкоцитов, но и количество различных их видов, которое в норме тоже вполне определенно. Различного вида лейкоциты отличаются тем, что их ядра и протоплазма по-разному окрашиваются одними и теми же красками.

Процентное отношение различных видов лейкоцитов к общему их числу называется лейкоцитарной формулой.

Таким образом, у здорового человека с нормальным составом крови лейкоцитарная формула может в известных пределах видоизменяться. В патологических случаях лейкоцитарная формула изменена значительно, независимо от общего количества белых кровяных телец:

При лейкоцитозе обычно наблюдается не равномерное увеличение количества лейкоцитов всех видов, а увеличение лишь одного или двух--трех видов; при этом число других видов лейкоцитов может даже уменьшаться. Многие болезни, особенно инфекционные, имеют свою определенную формулу, характерную для каждой из них. Так, для туберкулеза характерно увеличение числа лимфоцитов. Увеличение количества эозинофилов наблюдается при различных видах глистов, при бронхиальной астме и при других аллергических состояниях. При крупозном воспалении легких и при всевозможных септических (гнойных) заболеваниях наблюдается нейтрофильный лейкоцитоз, т. е. лейкоцитоз за счет увеличения нейтрофилов. Из этого видно, какое большое значение имеет лейкоцитарная формула для установления диагноза.

22. Определение скорости оседания эритроцитов

Если кровь смешать с 5% раствором лимоннокислого натрия (во избежание свертываемости) и вылить в какой-либо сосуд, то эритроциты, как более тяжелые элементы, постепенно будут оседать на дно. Высчитано, с какой скоростью эритроциты оседают в норме. Скорость оседания зависит от свойства самих эритроцитов, от имеющихся изменений в плазме крови и от некоторых других факторов. Изменения в нормальном соотношении белковых фракций в плазме крови, увеличение глобулинов и уменьшение альбуминов вызывают ускоренное оседание эритроцитов. Количество эритроцитов, их величина, содержание гемоглобина также влияют на скорость оседания эритроцитов. При многих заболеваниях -- анемиях, инфекционных болезнях, злокачественных опухолях, болезнях обмена -- наблюдается ускоренное оседание эритроцитов, при других заболеваниях, наоборот, отмечается замедленное их оседание.

В норме скорость оседания эритроцитов равна 4--10 мм в час, в патологических же случаях она доходит до 20--40-- 50 мм и даже больше. Во многих случаях реакция оседания эритроцитов (РОЭ) имеет диагностическое и прогностическое значение.

Для определения скорости оседания эритроцитов обычно пользуются способом Панченкова. Т. П. Панченков предложил для этой цели очень простой прибор (53), состоящий из штатива, на котором устанавливают вертикально одновременно четыре пипетки, диаметром 1 мм, градуированные от 0 до 100.

Чтобы кровь не свертывалась, ее при получении сразу же смешивают с 5% раствором лимоннокислого натрия. Перед взятием крови пипетку ополаскивают этим раствором, после чего наполняют этим же раствором наполовину, т. е. до метки 50, и выпускают раствор в заранее приготовленное часовое стекло. Затем набирают кровь из мякоти пальца в эту же пипетку до деления 0 и сразу выпускают ее на часовое стекло; затем набирают вторично и снова выпускают. Раствора было взято до метки 50, а крови 2 раза до метки 0; значит, соотношение количества раствора лимоннокислого натрия к количеству крови будет равно 1 :4. Смешав кровь с указанным раствором, ее вновь набирают в пипетку и устанавливают точно вертикально в штатив. Через час смотрят, до какого деления доходит столбик эритроцитов. Этот уровень укажет результат реакции.

23. Исследование мочи

Реакция мочи

Реакция мочи у здорового человека должна быть кислой или слабокислой.

Реакцию мочи определяют лакмусовой бумажкой. Синяя лакмусовая бумажка при кислой реакции краснеет, а красная лакмусовая бумажка при щелочной реакции синеет.

Для определения реакции мочи пинцетом захватывают синюю лакмусовую бумажку за один конец, а другой ее конец опускают в мочу. Если бумажка покраснеет, значит моча кислой реакции, если же цвет бумажки не изменится, то реакция может быть нейтральной или щелочной. Тогда таким же образом опускают в мочу красную бумажку. Если она посинеет, значит моча щелочная, если останется без изменения, значит реакция нейтральная.

Удельный вес мочи

Средний удельный вес нормальной мочи равен 1015--1020, т. е. если 1 л воды весит 1000 г, то 1 л мочи будет весить 1015--1020 г. Удельный вес мочи определяют особым прибором-- урометром. Прибор устроен по типу ареометров, предназначенных для определения удельного веса жидкостей.

Урометр (54) состоит из полого цилиндра, снизу наполненного ртутью, и цилиндрической трубочки, отходящей от верхней части цилиндра, на которую нанесена шкала с делениями.

Урометр должен быть сухим; его опускают медленно и замечают деление на шкале, которое соответствует уровню мочи. Удельный вес мочи определяется делением на шкале, соответствующим нижнему мениску', причем цилиндр с мочой нужно держать так, чтобы поверхность мочи была на уровне глаза. Так как пена мешает точному определению удельного веса, ее снимают полоской фильтровальной бумаги.

Разбавлять мочу приходится в том случае, если для анализа ее представлено недостаточно. После употребления урометры обмывают водой или каким-либо дезинфицирующим раствором. Хранят урометры в банке с 2% раствором хлорамина, 0,5% раствором формалина или каким-нибудь другим дезинфицирующим раствором.

24. Определение белка

В нормальной моче, как говорилось выше, белок содержится в столь незначительном количестве, которое обычными реактивами не обнаруживается, а поэтому практически принято считать, что в нормальной моче белка нет. В патологических же случаях наблюдается альбуминурия, т. е. выделение белка с мочой, что является одним из главных признаков воспаления почек.

Моча, посланная в лабораторию, должна быть абсолютно чистой, лишенной всяких примесей, особенно примесей, содержащих белок, например, таких, как менструальная кровь, мокрота. Она должна быть прозрачной, поэтому перед исследованием ее фильтруют'. Затем определяют реакцию мочи, так как для исследования на белок она должна быть кислой реакции. Если моча нейтральной или щелочной реакции, то ее предварительно подкисляют несколькими каплями 10% раствора уксусной кислоты.

Проба кипячением. В пробирку наливают несколько миллилитров профильтрованной кислой мочи и кипятят ее. При кипячении пробирку держат наклонно и так, чтобы пламя горелки охватывало только верхний слой жидкости. Подогревать нижний конец пробирки нельзя, так как закипающая снизу моча выбросит из пробирки все содержимое. Нельзя пробирку держать и так, чтобы пламя охватывало стекло выше жидкости, потому что от такого нагревания пробирка лопнет. Появление белых хлопьев или мути указывает на наличие в моче белка.Пробы с сульфосалициловой кислотой. Очень простой реакцией на присутствие белка в моче является проба с сульфосалициловой кислотой. К 5--10 мл кислой профильтрованной мочи прибавляют 5--10 капель 20% раствора сульфосалициловой кислоты. При небольшом количестве белка появляется ясно выраженное помутнение, а при большом -- выпадает хлопьевидный осадок.

25. Определение сахара

В норме количество сахара в моче настолько незначительно, что обычными реактивами оно не обнаруживается. Поэтому практически считается, что моча сахара не содержит, наличие же в ней сахара свидетельствует о патологическом состоянии организма. Исключение составляют лишь случаи выделения сахара с мочой после употребления его в большом количестве.

Для определения сахара обычно пользуются реакцией Нилан-дера, которая проводится с реактивом Ниландера. Сущность этой реакции состоит в том, что окись висмута, бесцветная в щелочной среде, при нагревании с виноградным сахаром восстанавливается в закись или в металлический висмут, имеющий черный цвет.

Если моча содержит белок, то перед исследованием ее нужно освободить от него, так как, разлагаясь, белок образует темный сернистый висмут.

Удаление белка из мочи. Профильтрованную мочу слегка подкисляют уксусной кислотой, добавляют поваренную соль и кипятят. Полученный осадок белка отфильтровывают, после чего в фильтрате определяют присутствие сахара.

К 5--10 мл профильтрованной мочи прибавляют 1--2 мл реактива Ниландера и кипятят в течение 2 минут. От выпавших фосфатов образуется белый осадок, который бывает и в норме и диагностического значения не имеет. Если в моче содержится сахар, осадок, а также вся жидкость темнеют, принимая коричневый, а при большом количестве сахара черный цвет.

В настоящее время часто применяют пробу Гайнеса, очень удобную по своей простоте: к 3--4 мл реактива прибавляют 8--12 капель мочи и кипятят. В присутствии сахара появляется желтая или красная окраска жидкости или осадка. Реакция основана на свойстве глюкозы восстанавливать в щелочной среде гидрат окиси меди в гидрат закиси меди (желтый цвет) или в закись меди (красный цвет). Эту реакцию можно произвести еще проще: достаточно смешать одну каплю мочи с 9 каплями реактива и довести их до кипения.

Наиболее распространенным в нашей стране методом определения СОЭ является микрометод Т.П. Панченкова, основанный на свойстве эритроцитов осаждаться на дне сосуда под воздействием силы тяжести.

Выше была описана методика взятия крови в капилляр Панченкова, предназначенный для стандартного определения СОЭ. Как вы помните, капилляр заполняют смесью цитрата натрия и крови в соотношении 1:4 и устанавливают вертикально в штатив. Смесь крови и цитрата при стоянии разделяется на два слоя: верхний -- плазма и нижний -- эритроциты.

СОЭ определяют через 1 час после начала исследования по величине столбика плазмы над осевшими эритроцитами (рис. 1.9). В норме СОЭ у мужчин составляет 2-10, а у женщин -- 4-15 мм в час.

26. Интерпретация результатов

Механизм агломерации (склеивания) эритроцитов и их оседания чрезвычайно сложен и зависит от многих факторов, в первую очередь от качественного и количественного состава плазмы крови и от физико-химических свойств самих эритроцитов.

Наиболее частой причиной повышения СОЭ является увеличение содержания в плазме крупнодисперсных белков (фибриногена, a- и g-глобулинов, парапротеинов), а также уменьшение содержания альбуминов.

Крупнодисперсные белки обладают меньшим отрицательным зарядом. Адсорбируясь на отрицательно заряженных эритроцитах, они уменьшают их поверхностный заряд и способствуют сближению эритроцитов и более быстрой их агломерации.

Существенное влияние на этот показатель оказывает также вязкость крови и общее число эритроцитов. При анемиях, сопровождающихся, как известно, значительным уменьшением вязкости крови, наблюдается повышение СОЭ, а при эритроцитозах -- увеличение вязкости и снижение СОЭ.

Уменьшению СОЭ способствуют три основных фактора: 1) сгущение крови, 2) ацидоз и 3) гипербилирубинемия.

Наибольшее диагностическое значение в клинике имеет повышение СОЭ, непосредственными причинами которого являются:

1. Любые воспалительные процессы и инфекции, сопровождающиеся накоплением в крови грубодисперсных фракций глобулинов (чаще a- и g-фракций), фибриногена и других белков острой фазы воспаления и т. п. (подробнее см. ниже). Исключение составляют ранние стадии некоторых вирусных инфекций (грипп, вирусный гепатит и др.).

2. Заболевания, сопровождающиеся не только воспалительной реакцией, но и распадом (некрозом) тканей, форменных элементов крови и всасыванием продуктов распада белков в кровь (гнойные и септические заболевания, злокачественные новообразования, инфаркты кишечника, мозга, легких и т. д.)

3. Заболевания соединительной ткани и системные васкулиты (ревматизм, ревматоидный артрит, системная красная волчанка, узелковый периартериит, склеродермия, дерматомиозит и др.).

4. Заболевания паренхимы печени (гепатит, циррозы печени, рак и др.), ведущие к выраженной диспротеинемии, иммунному воспалению и некрозам ткани печени.

5. Болезни обмена (сахарный диабет и др.).

6. Гемобластозы (лейкозы, лимфогранулематоз и др.).

7. Парапротеинемические гемобластозы (миеломная болезнь, болезнь Вальденстрема).

8. Анемии.

9. Заболевания почек, особенно сопровождающиеся нефротическим синдромом (гипоальбуминемия) и другие.

Запомните

Повышение СОЭ является весьма чувствительным, но неспецифическим гематологическим показателем различных патологических процессов. Наиболее значительное повышение СОЭ (до 50-80 мм/ч) чаще всего наблюдается при: 1) парапротеинемических гемобластозах (миеломная болезнь, болезнь Вальденстрема) и 2) заболеваниях соединительной ткани и системных васкулитах (системная красная волчанка, узелковый периартериит, склеродермия и др.).

Наиболее частой причиной значительного уменьшения СОЭ является увеличение вязкости крови при заболеваниях и синдромах, сопровождающихся увеличением числа эритроцитов (эритремия, вторичные эритроцитозы).

Кроме того, следует помнить, что при любых заболеваниях, для которых в принципе характерно увеличение СОЭ, этот показатель может оказаться не повышенным на определенных стадиях развития патологического процесса, если одновременно наблюдается сгущение крови, состояние ацидоза или гипербилирубинемия (желтуха, сердечная декомпенсация, состояние кетоацидоза при сахарном диабете и др.).