Способ получения биологической жидкости для морфологического исследования

Размещено на http://www.allbest.ru/

СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ БИОЛОГИЧЕСКОЙ ЖИДКОСТИ ДЛЯ МОРФОЛОГИЧЕСКОГО ИССЛЕДОВАНИЯ

Изобретение относиться к медицине, а именно к оториноларингологии, и может найти применение при лечении заболеваний верхних дыхательных путей, при диагностике патологических процессов или заболеваний слизистой оболочки полости носа и околоносовых пазух, а также для разработки новых методов исследования биологических жидкостей. Способ получения биологической жидкости для морфологического исследования включает получение из полипной ткани верхних дыхательных путей или слизистой оболочки верхних дыхательных путей жидкого субстрата путем гомогенизации, который затем центрифугируют 15 минут со скоростью 900g, а полученную надосадочную жидкость в объеме 2,0-2,5 мкл наносят на поверхность стекла в виде капли и высушивают ее методом клиновидной или краевой дегидратации до получения структуры твердой фазы. Технический результат: способ позволяет получить биологическую жидкость в нативном, максимально естественном состоянии, пригодную для морфологического исследования методами клиновидной и краевой дегидратации.

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

дегидратация гомогенизация ткань

Известно, что организм человека состоит из устойчивых структур - клеток и высокодинамичных - биологических жидкостей. Эти системы являются взаимодополняющими. Если высокодинамичные структуры могут существовать без клеточных форм, то клеточные структуры не могут существовать без жидкостных сред, так как поступление питательных веществ и выброс продуктов жизнедеятельности клеток осуществляется путем обмена внутриклеточных и внеклеточных жидкостей организма.

Биологический материал организма, а именно биологические жидкости, отделяемое из ран, секреты желез, субстраты или гомогенаты тканей, несет в себе информацию о состоянии внутренней среды и является предметом лабораторных исследований для диагностики различных патологических состояний.

Биологические жидкости представляют наиболее удобный для изучения динамики физиологических и патологических процессов организма объект. Это - сложные полидисперстные неклеточные структуры с неустойчивыми связями входящих в них компонентов: сыворотка крови, лимфа, ликвор, секреты эндокринных и экзокринных желез, внутриклеточная и внеклеточная жидкость.

По составу биологические жидкости являются лиотропными жидкими кристаллами. Это структурно упорядоченные растворы биологических молекул, в том числе - амфифильных, которыми являются липиды. Амфифильными называются молекулы, имеющие в своем составе растворимую в воде ионную и нерастворимую часть, обладающие отчетливыми двулучепреломляющими свойствами кристаллов.

Биологические жидкости играют важную роль в жизнедеятельности организма, выполняя информационную, управленческую и исполнительную функции.

Самые незначительные изменения в процессе жизнедеятельности организма проявляются в изменении структурной упорядоченности лиотропных жидких кристаллов. Элементы биологических жидкостей моментально реагируют изменением своей структуры на любые воздействия внешнего и внутреннего характера, что позволяет следить за течением заболевания в процессе лечения и осуществлять оперативную коррекцию терапевтических программ.

В настоящее время созданы методики, позволяющие анализировать принципиальные связи устойчивых структур организма, например компьютерная томография, ЯМР-томография и другие. Однако технология выявления высокодинамичных связей в жидких средах организма была разработана лишь в последние годы [1]. Методы клиновидной и краевой дегидратации биологических жидкостей дают возможность получения интегрированной информации, заложенной в особенностях морфологической картины твердой фазы биологических жидкостей, так как дегидратированная биологическая жидкость представляет собой тонкую пленку и фактически является тонким «срезом» неклеточной ткани организма.

Изучение динамики патологических процессов, происходящих в тканях организма при заболеваниях уха, горла, носа, с помощью новой диагностической технологии впервые было проведено в отделении оториноларингологии МОНИКИ им. М.Ф.Владимирского (руководитель отделения - проф. В.Г.Зенгер) и показало возможности использования этой технологии в диагностике заболеваний ЛОР-органов, в том числе на ранних стадиях, а также прогнозировании и исхода патологического процесса, оценки эффективности проводимой терапии [2].

В настоящее время в доступной литературе опубликованы результаты исследования только внеклеточных биологических жидкостей (сыворотка крови, лимфа, ликвор, секреты эндокринных и экзокринных желез). Последние исследовались как традиционными методами, так и с помощью клиновидной и краевой дегидратации.

В то же время особый интерес представляет морфологическое исследование внутриклеточных биологических жидкостей различных тканей организма человека. Это даст возможность получить новую информацию о процессах, происходящих на более высоком - внутриклеточном уровне. При заболеваниях верхних дыхательных путей большой интерес представляет изучение структур твердой фазы внутриклеточной жидкости слизистой оболочки в норме и при патологии. Однако внутри клетки вода находится большей частью в связанном состоянии, поэтому получение внутриклеточной жидкости представляет достаточно сложную практически задачу.

Для исследования химического состава разных по структурно-функциональному назначению тканей организма человека производится их гомогенизация. Известно достаточно много способов гомогенизации тканей. Однако во всех существующих способах гомогенизации используют добавление к гомогенату ткани различных жидкостных сред. Эта необходимость вызвана тем, что в результате гомогенизации, как правило, получается достаточно густая масса, исследование которой затруднительно. В то же время такое разведение нарушает динамику течения физико-химических процессов, происходящих в исследуемой ткани в естественном состоянии.

Известен традиционный гистологический способ подготовки биологического материала для морфологического исследования, включающий получение кусочка ткани во время операции [3]. Затем операционный материал фиксируют в 10% растворе формалина в течение 48 часов. Вырезанные из фиксированного материала кусочки подсушивают на фильтровальной бумаге и помещают в спирты восходящей крепости (50%, 70%, 96% и абсолютный). После обезвоживания в спиртах фиксированные кусочки переносят в смесь спирта с ксилолом на 1-3 часа, затем - в ксилол до просветления (30 минут). Далее материал помещают в расплавленную смесь парафина с хлороформом на 1-3 часа, с последующей заливкой в парафин. После охлаждения из парафина вырезают блоки с заключенным в них объектом исследования. Парафиновые блоки наклеивают на деревянные колодки. После нарезки на микротоме тонкие срезы толщиной 5 мкм наклеивают на предметное стекло. Далее производят окраску препаратов с помощью различных способов с последующим изучением их под световым микроскопом.

Этот способ позволяет получить тканевый материал, пригодный для морфологического исследования, однако этот материал не является биологической жидкостью. Материал представляет собой окрашенный срез ткани, который не отражает динамики естественных процессов, протекающих в ней в нативном виде. На таком срезе можно изучить только клеточную структуру ткани. Поскольку в процессе приготовления материала используют химическую обработку и дегидратацию, то в результате он представляет собой не биологическую жидкость, а является искусственно дегидратированным биологическим субстратом. Вследствие этого невозможно провести исследование структуризации полученного биологического материала методами клиновидной и краевой дегидратации.

Известен также способ носовой биопсии, включающий получение кусочка ткани нижней носовой раковины для гистологического исследования [4]. Биологический материал берут с помощью щипцов Gerritsma и заливают в гистологическую систему Ткань - Технология II О.С.Т и немедленно замораживают.

Недостатком данного способа является то, что после обработки тканевого материала в гистологической системе невозможно исследовать тканевую биологическую жидкость вследствие нарушения физиологических взаимосвязей последней. Полученный данным способом тканевый биологический материал пригоден для морфологического исследования, но только его клеточного состава, без динамики физиологических и патофизиологических процессов.

Наиболее близким по технической сущности и достигаемому результату к предлагаемому способу является способ получения субстрата гиалуроновой кислоты, включающий преобразование тканевого материала в биологическую жидкость [5]. Пупочные канатики, собранные в 0,5% растворе карболовой кислоты, отмывают дистиллированной водой, пропускают через мясорубку, взвешивают и заливают полуторным объемом дистиллированной воды. Смесь встряхивают, отжимают и помещают на 1 минуту в кипящую воду, количественно соответствующую первоначальному весу измельченных канатиков. После кипячения производят фильтрование через двойной слой марли.

Данный способ позволяет получить из биологической ткани жидкий субстрат для исследования. Однако добавление полутора объемов дистиллированной воды и кипячение биологической жидкости исключают последующее исследование ее структуризации. Причем добавление воды нарушает динамику течения естественных физико-химических процессов, а кипячение приводит к денатурации белков, определяющих специфику структуризации.

Из вышесказанного ясно, что разработка новых способов получения внутриклеточной биологической жидкости для последующего исследования представляет в настоящее время несомненную актуальность.

Самым перспективным направлением современной лабораторной диагностики считается изучение феноменов, происходящих при высушивании (драинге) биологических жидкостей. Комплексный системный подход к изучению этого процесса с позицией физикохимии, кристаллографии и принципов синергетики разработан и описан В.Н.Шабалиным и С.Н. Шатохиной [6].

На основании характера драинга можно объективно судить о химическом составе биологической жидкости (в том числе и о спектре макромолекул), а также об их интегральных поверхностно-активных, сорбционных и осмоактивных свойствах. Теоретической основой к исследованию функциональной морфологии биологических жидкостей явилось учение о самоорганизации и поведении сложных систем, разработанное школами нобелевского лауреата И.Пригожина и Г. Хакена.

За последнее десятилетие Шабалин В.Н. и Шатохина С.Н. установили, что при переходе в твердую фазу в процессе самоорганизации (дегидратация, замораживание) биологические жидкости структуризируются и приобретают устойчивые морфологические формы. Этими авторами разработана методологическая основа исследования морфологических структур биологических жидкостей, а именно методы клиновидной и краевой дегидратации.

Любые как физиологические, так и патологические процессы, протекающие в живом организме, имеют в своей основе специфические особенности структуры белков и других органических молекул. В процессе самоорганизации при клиновидной или краевой дегидратации биологических жидкостей специфические структуры данных молекул формируют «мозаичные» структуры макроуровня, доступные для визуального анализа. В настоящее время выявлен ряд структурированных маркеров, указывающих на определённый патологический процесс.

Основным достоинством методов клиновидной и краевой дегидратации является получение оригинальных объективных и высокозначимых клинико-диагностических данных, позволяющих выявлять патологические отклонения на самых ранних этапах и контролировать самые небольшие изменения в динамике заболевания, что недоступно другим современным методам исследования. Исключительно важное значение данного научного направления состоит и в том, что оно открывает возможность широкого мониторинга здоровья практически здорового контингента населения и является базой для всеобщей диспансеризации, выявления резервов здоровья человека и принятия, своевременных мер по укреплению и предупреждению истощения этих резервов.

Высокая информативность методов морфологического анализа биологических жидкостей, уникальность получаемых данных, их простота и широкая доступность, экономичность и высокая диагностическая достоверность данных делает их самыми оптимальными для исследования полученной внутриклеточной биологической жидкости.

Технический результат заявляемого решения заключается в разработке способа получения внутриклеточной биологической жидкости в навитивном, максимально естественном состоянии для дальнейшего морфологического исследования ее системной и локальной самоорганизации методами клиновидной и краевой дегидратации.

Этот результат достигается тем, что в способе получения биологической жидкости для морфологического исследования, включающем получение из биологической ткани жидкого субстата путем гомогенизации, согласно изобретению в качестве биологической ткани используют полипную ткань верхних дыхательных путей или слизистую оболочку верхних дыхательных путей, гомогенат которой центрифугируют в течениие 15 минут со скоростью 900g, а полученную надосадочную жидкость в объеме 2,0 - 2,5 мкл наносят на поверхность стекла в виде капли и высушивают ее методом клиновидной или краевой дегидратации до получения структуры твердой фазы.

Наличие отличительных признаков, а именно использование в качестве биологической ткани полипной ткани верхних дыхательных путей или слизистую оболочку верхних дыхательных путей, центрифугирование тканевого гомогената в течение 15 минут со скоростью 900g, нанесение надосадочной жидкости в объеме 2,0-2,5 мкл на поверхность стекла в виде капли и высушивание ее методом клиновидной или краевой дегидратации до получения структуры твердой фазы, свидетельствует о соответствии заявляемого технического решения критерию патентоспособности «новизна».

Было обнаружено, что при гомогенизации ткани полипов выделяется достаточное количество жидкости, что связано с особенностью тканевой структуры полипной ткани, содержащей вследствие отека большое количество жидкости.

На основании этой особенности ткани полипов нами разработан способ получения биологической жидкости полипной ткани верхних дыхательных путей для ее дальнейшего исследования методами клиновидной и краевой дегидратации.

Заявляемый способ позволяет получить тканевый гомогенат, который представляет собой смесь клеточных структур и вне- и внутриклеточной биологической жидкости в полном составе всех составляющих ингредиентов, без дополнительной жидкости, а также без кипячения. Это делает возможным произвести анализ наиболее динамичных и неуловимых при получении биологической жидкости другими способами происходящих в ней процессов даже на молекулярном уровне, осуществить исследование структуризации полученной биологической жидкости методами клиновидной и краевой дегидратации.

Предлагаемый нами способ получения именно внутриклеточной биологической жидкости в ее нативном состоянии для морфологического исследования методами клиновидной и краевой дегидратации позволяет в результате проведения исследования:

1. Изучить физиологические и патофизиологические механизмы самоорганизации и кристаллизации таких внутриклеточных биологических жидкостей, как гомогенаты полипозной ткани или слизистой оболочки верхних дыхательных путей (далее ВДП), что дает возможность выявить патогенетические механизмы заболеваний ВДП;

2. Выявить типичный для конкретного патологического процесса ВДП структурный морфотип твержой фазы гомогената ткани, что даст возможность разработать новые диагностические критерии для заболеваний верхних дыхательных путей.

3. Произвести объективную оценку прогноза патологического процесса ВДП, его динамики вследствие проводимой терапии, а также оценить эффективность действия применяемых лекарственных препаратов на основании анализа морфологических структур твердой фазы гомогената тканевого биологического материала.

Из вышесказанного следует, что технический результат достигается новой совокупностью существенных признаков, что свидетельствует о соответствии заявляемого технического решения критерию патентоспособности «изобретательский уровень».

Предложение поясняется чертежами, где на фиг.1 представлен увеличенный вид твердой фазы биологической жидкости гомогената полипной ткани, полученный методом клиновидной дегидратации; на фиг.2 представлен увеличенный вид твердой фазы биологической жидкости гомогената ткани носовой раковины, полученный методом клиновидной дегидратации.

Способ осуществляют следующим образом.

Получение биологического материала для исследования производят прямо в операционной. Кусочек удаленной слизистой оболочки ВДП или полипной ткани взвешивают, измельчают и гомогенизируют в гомогенизаторе. Гомогенат помещают в пробирку и центрифугируют в течение 15 минут с частотой 900g. После центрифугирования надосадочную жидкость набирают в лабораторную пипетку и наносят на предметное стекло для исследования в виде капли размером 2,5 мкл. Препарат изучают под микроскопом через 12-72 часов после его приготовления.

Метод клиновидной дегидратации заключается в следующем. Каплю биологической жидкости наносят на обезжиренное предметное стекло, расположенное строго горизонтально. При этом диаметр капли составляет 5-7 мм. Затем каплю высушивают при температуре 20-25°С и относительной влажности 65-70% при минимальной влажности окружающего воздуха. При высыхании капля должна быть неподвижной. Продолжительность периода высыхания (до момента анализа структуры) составляет 12-24 часа.

Клиновидная дегидратация обуславливает особые условия самоорганизации, в результате формируется сухая пленка (фация) со специфическими структурами, представляющими собой индивидуальные биологические параметры. Фация - это структурный макропортрет, отражающий молекулярные взаимоотношения в биологической жидкости, а значит и протекающие в ней патофизиологические процессы.

В этом состоит наибольшая ценность метода клиновидной дегидратации для клинической диагностики. Ни один другой метод лабораторной диагностики не дает информации столь значительного объема и качества.

Метод краевой дегидратации заключается в следующем. Испарение жидкости в капле, находящейся на предметном стекле, происходит из-под так называемой «аналитической ячейки», сформированной наложением на каплю покровного стекла. Испарение происходит через узкую щель между поверхностями стекол, то есть медленно - в течение 48-72 часов.

Если методом клиновидной дегидратации достигается быстрое (12-24 часа) формирование структур, а именно структуризация (системная самоорганизация), то при краевой дегидратации создаются условия для роста отдельных кристаллов, то есть кристаллизация (локальная организация).

Внешний их вид при микроскопии трактуется как текстура или морфотип. Исследования системной и локальной организации дегидратированной капли производят с помощью микроскопии.

Заявляемый способ подтверждается следующими конкретными примерами.

Пример 1. Бурмистров Михаил Владимирович, 45 лет. Диагноз: хронический полипозный риносинусит.

Во время операции 25 октября 2004 года получен кусочек ткани полипа. Затем кусочек ткани взвесили, измельчили и гомогенизировали в гомогенизаторе. Гомогенат поместили в пробирку и центрифугировали в течение 15 минут с частотой 900g. После центрифугирования надосадочную жидкость набрали в лабораторную пипетку и нанесли на предметное стекло в виде капли размером 2,5 мкл для исследования методом клиновидной дегидратации. Препарат изучали под микроскопом через 12 часов после его приготовления.

Вид твердой фазы биологической жидкости гомогената полипной ткани представлен на фиг.1. В исследуемом препарате четко прослеживаются две структурные зоны: центральная (мелкозернистая) и периферическая. Центральная зона представлена солевыми компонентами, а периферическая - белковыми (согласно теории самоорганизации). В периферической зоне присутствуют типичные элементы - аркады.

Таким образом, данный материал пригоден для морфологического исследования структур биологической жидкости.

Пример 2. Кузьмин Н.С., 26 лет. Диагноз: хронический полипозный риносинусит.

Во время операции 20 ноября 2004 года получен кусочек ткани носовой раковины. Затем кусочек ткани взвесили, измельчили и гомогенизировали в гомогенизаторе. Гомогенат поместили в пробирку и центрифугировали в течение 15 минут с частотой 900g. После центрифугирования надосадочную жидкость набрали в лабораторную пипетку и нанесли на предметное стекло в виде капли размером 2,5 мкл для исследования методом клиновидной дегидратации. Препарат изучали под микроскопом через 12 часов после его приготовления.

Вид твердой фазы биологической жидкости гомогената ткани носовой раковины представлен на фиг.2. Исследуемый препарат имеет четкую структурную морфологическую организацию. Видны структурные зоны и структурные компоненты, характерные для морфологической картины биологической жидкости после клиновидной дегидратации.

Таким образом, данный материал пригоден для морфологического исследования структур биологической жидкости.

Способ прошел апробацию в ГУ «Санкт-Петербургский НИИ уха, горла, носа и речи МЗ РФ» в 2004 г.

Из вышесказанного следует, что предлагаемый способ обеспечивает технический результат, не вызывает затруднений, предполагает использование освоенных материалов и стандартного оборудования, что свидетельствует о соответствии заявляемого технического решения критерию патентоспособности «промышленная применимость».

ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ

Способ получения биологической жидкости для морфологического исследования, включающий получение из биологической ткани жидкого субстрата путем гомогенизации, отличающийся тем, что в качестве биологической ткани используют полипную ткань верхних дыхательных путей или слизистую оболочку верхних дыхательных путей, гомогенат которой центрифугируют в течение 15 мин со скоростью 900 g, а полученную надосадочную жидкость в объеме 2,0-2,5 мкл наносят на поверхность в виде капли и высушивают ее методом клиновидной или краевой дегидратации до получения структуры твердой фазы.

????? ??????? ??? ????????????????? ???????????? ?????? ???? ? ?????? ????????????? ?????????

Пластиковый слайд-планшет содержит 10 камер для микроскопического исследования нативных или суправитально окрашенных препаратов, приготовленных из биологических жидкостей.

Каждая камера слайд-планшета покрыта тонкой, идеально прозрачной пластиковой пластинкой, играющей роль покровного стекла. Расстояние между поверхностью слайд-планшета и покровным стеклом позволяет клеточным элементам располагаться однослойно.

В каждой камере слайд-планшета слева расположены две серии окружностей, по 9 в каждой. Они видны в проходящем свете и на малом увеличении микроскопа. На большом увеличении микроскопа (окуляр х10 и объектив х40) одна окружность занимает все поле зрения.

Каждая окружность имеет диаметр 0,376 мм, объем одной окружности - 0,011 мкл. Объем каждой серии окружностей составляет 0.011х 9 = 0,099 мкл или ? 0,1 мкл. Следовательно, если количество клеточных элементов, подсчитанных в 9 окружностях камеры умножить на 10, то получается содержание клеточных элементов в 1 мкл исследуемой жидкости.

В одной упаковке 100 штук слайд-планшет.

???????????? ?????? ???? ?? ???????????

В центрифужную пробирку налить не более 10 мл хорошо размешанной средней порции мочи.

Отцентрифугировать со скоростью 1500-2000 об/мин в течение 15 мин.

Надосадочную мочу с помощью пипетки отсосать и оставить в пробирке 1 мл мочи с осадком.

Содержимое пробирки тщательно без пены размешать той же пипеткой.

Каплей мочи с осадком заполнить камеру слайд-планшета. Остатки мочи удалить кусочком фильтровальной бумаги или ватным тампоном.

Слайд-планшет поместить на предметный столик микроскопа и при увеличении х200 или х400 произвести последовательно подсчет количества эритроцитов, лейкоцитов и цилиндров.

Рассчитать количество форменных элементов в 1 мл мочи по формуле:

N=(x*10*1000)/v, где:

N - количество форменных элементов в 1 мл мочи

X - количество форменных элементов в одной серии (9 окружностей) в 0,1мкл

V - количество мочи в мл, взятой для центрифугирования

10 - коэффициент пересчета количества форменных элементов в 1 мкл мочи

1000 - количество мочи в мкл, взятое для исследования

Если для центрифугирования всегда берется 10 мл мочи, то можно пользоваться следующим вариантом формулы:

N=X*1000

Нормальное количество форменных элементов мочи по Нечипоренко:

Лейкоциты - 2000 в 1 мл мочи,

Эритроциты - 1000 в 1 мл мочи.

Цилиндры - 20 в 1 мл мочи

Подсчет клеточных элементов в ликворе, окрашенном реактивом Самсона (определение цитоза)

· 10-20 капель хорошо перемешанной спинномозговой жидкости поместить в центрифужную или видалевскую пробирку, внести, соответственно, 1-2 капли реактива Самсона и аккуратно, без пены перемешать.

· Через 10-15 мин вновь перемешать содержимое пробирки и каплей перемешанного окрашенного ликвора заполнить камеру слайд-планшета.

· Лишний ликвор удалить с поверхности слайд-планшета фильтровальной бумагой или ватным тампоном.

· Подсчитать общее количество ликворных клеток (в зависимости от выраженности плеоцитоза).

При слабом плеоцитозе при условии, что клетки в камере распределены равномерно и попали в ячейки, можно подсчитать их количество в 18 ячейках камеры слайд-планшета. Полученное в 0,2 мкл ликвора количество клеток (в 18 ячейках) пересчитать на их содержание в 1 мкл ликвора по формуле:

Х= (Ах10)/2, где:

Х - количество клеток в 1 мкл ликвора;

А - количество клеток в 18 ячейках камеры слайд-планшета (в 0,2 мкл ликвора);

10 - цифра для получения количества клеток в 2 мкл;

2 - цифра для пересчета количества клеток на 1 мкл ликвора.

Если клеток очень много (умеренный или выраженный плеоцитоз), можно считать клетки в 9 ячейках камеры слайд-планшета и расчет производить по формуле:

Х = В х 10,

где: Х - количество клеток в 1 мкл ликвора;

B - количество клеток в 9 ячейках камеры слайд-планшета (в 0,1 мкл ликвора);

10 - цифра для получения количества клеток в 1 мкл ликвора.

Если клетки покрывают все ячейки камеры (резко выраженный или массивный плеоцитоз), можно считать клетки в одной ячейке и расчет производить по формуле:

Х = С х 9 х 10,

где: Х - количество клеток в 1 мкл ликвора;

C - количество клеток в одной ячейке камеры слайд-планшета;

9 - цифра для пересчета количества клеток в 9 ячейках камеры слайд-планшета;

10 - цифра для получения количества клеток в 1 мкл ликвора.

В нормальном ликворе взрослого человека практически отсутствуют клеточные элементы: в вентрикулярном ликворе 0-1 клетка/мкл, в субокципитальном - 2-3 клетки/мкл и люмбальном ликворе 3-5 клеток/мкл. Содержание клеток в нормальном ликворе уменьшается в направлении от люмбального к субокципитальному, а в вентрикулярном - почти равно нулю.

???????????? ???????????? ????????????? ????????? ? ?????-?????????

· Стандартизация исследования

· Комфортность и удобство при работе

· При работе со слайд-планшетами не используются предметные и покровные стекла

· Исследование осадка мочи в слайд-планшете позволяет одновременно определить количество клеточных элементов в 1 мл мочи (число Нечипоренко) и получить представление о количестве форменных элементов в поле зрения или в препарате

· Быстрое и достаточно точное определение увеличенного количества клеток в ликворе (плеоцитоз)

· Подсчет и дифференциальная диагностика клеток в ликворе и в осадке мочи требуют для каждого анализа пришлифовывать покровное стекло к камере, что вызывает затруднение в работе и отнимает время. Подсчет и дифференциальная диагностика клеток в камере слайд-планшета производится под фиксированным покровным стеклом

УСТРОЙСТВА ДЛЯ ЦЕНТРИФУГИРОВАНИЯ

В лабораторной практике часто бывает необходимо быстро разделить биологические жидкости, состоящие из компонентов разной плотности, на составные части. Например, отделить форменные элементы крови от плазмы. Такое разделение осуществляют центрифугированием, принцип которого состоит в создании значительной центробежной силы, под влиянием которой скорость оседания более плотных компонентов смеси ускоряется во много раз. Основными характеристиками центрифуг служат величина фактора разделения и объем центрифугата.

Фактор разделения показывает, во сколько раз центробежное Ускорение превышает ускорение силы тяжести «g». Лабораторные Центрифуги обеспечивают фактор разделения от 1000 до 27000g. Фактор разделения пропорционален числу оборотов ротора центрифуги и квадрату радиуса вращения пробирки.

Рис. 141. Центрифуги.

Центрифуга ручная РЦ-4 (рис. 141, А) имеет вертикально расположенную ось с пробиркодержателем в виде крестовины на верхнем ее конце. Приводится в движение с помощью рукоятки через мультипликатор (ускоритель), который увеличивает число оборотов рукоятки в 8 раз. Благодаря этому можно получить число оборотов вращения пробирке-держателя до 1000 об/мин. В шарнирных гнездах его размещены 4 пластмассовые гильзы со вставленными в них центрифужными пробирками, наполняемыми жидкостью, подлежащей центрифугированию.

Пробирки могут стерилизоваться 6% раствором перекиси водорода. Масса 0,6 кг.

Центрифуга лабораторная малогабаритная настольная ЦУМ-1 (рис. 141, Б) предназначена для разделения жидких систем плотностью до 2 кг/л в поле центробежных сил. Имеет электрический привод, позволяющий получить число оборотов ротора от 2000 до 8000 об/мин. Роторы центрифуги сменные и характеризуются количеством пробирок, которые могут быть в них размещены и общим объемом центрифугата. Общий объем центрифугата при использовании полиэтиленовых пробирок 180 см³, а при использовании стеклянных пробирок--4х25 мл (100 см³). Могут быть использованы стеклянные пробирки вместимостью 5 и 10 мл. В комплект входят полиэтиленовые и стеклянные пробирки. К последним прилагают специальные резиновые амортизаторы. На центрифугу может быть одет ротор для определения гематокритного числа с 12 контейнерами-- РК-12.

Фактор разделения обеспечивается в данной центрифуге от б до 7 тыс. (при определении гематокрита). Мощность двигателя 280 Вт.

При приемке следует внимательно проверять комплектность поставки. Работоспособность проверяют опробованием.

Центрифуга лабораторная медицинская стационарная ЦЛС-31М (рис. 141, В) предназначена для тех же целей, что и предыдущая, однако располагает более широкими возможностями. Частота вращения центрифуги может плавно регулироваться от 1000 до 6000 об/мин. Центрифуга оснащена семью сменными роторами, что позволяет осуществлять центрифугирование жидкостей в пробирках вместимостью от 5 до 500 мл. Кроме того, в ней может быть применен механизм, увеличивающий частоту вращения ротора до 12 и 18 тыс. об/мин, что позволяет получать соответственно фактор разделения 13500 и 27500. Центрифуга имеет механизм отсчета времени, обеспечивающий работу циклами, кратными 5 мин, стрелочный указатель скорости вращения. Работает от сети напряжением 220В; мощность 2 кВт; габариты 605х790х790 мм; масса 120 кг. Общие технические требования к центрифугам и правила их приемки изложены в ОСТ 64-1-122--80 «Центрифуги лабораторные».

Размещено на Allbest.ru