Диагностика аскаридоза

Содержание

Введение

2.1 Метод толстого мазка под целлофаном по Като и Миура

2.2 Методы флотации

По распространенности аскаридоз уступает только энтеробиозу. Черви-паразиты, вызывающие его, обитают в кишечнике человека.

Аскарида - ежегодно поражает до 100 миллионов человек.

Аскаридоз распространен повсеместно, за исключением тех стран, климат которых характеризуется очень низкими температурами. В тропических странах инвазировано более 50 % населения. Считается, что в мире более 1 млрд. человек заражены аскаридозом. Для массового заражения людей в умеренных широтах характерна летне-осенняя сезонность, когда в почве накапливается наибольшее количество инвазивных яиц и высок риск заражения населения. У сельских жителей и детей аскаридоз встречается чаще, чем у городских жителей и взрослых. Жители крупных благоустроенных городов, где формирование почвенных очагов аскаридоза невозможно, заражаются в летний период в сельской местности или через привозимые на рынок овощи, ягоды, зелень Лебедева М.Н., Михайлицын Ф.С., Фролова А.А., Халилулина А.С., Сергиев В.П. Социально-экономическая эффективность профилактики массовых гельминтозов // Мед. паразитол.- 1998.- №3.- С. 23-26..

В связи с широкой распространенностью заболевания необходимо знание основных признаков, возбудителей, мер профилактики аскаридоза. Поэтому данная тема является актуальной.

Целью данной работы является изучение морфологии аскарид, лабораторной диагностики и путей профилактики аскаридоза.

1. Морфология, цикл, развитие аскариды

Аскариды (Ascaris lumbricoides) - семейство червей класса нематод, паразитирующих в кишечнике человека и позвоночных животных. Наиболее распространены свиная аскарида и человеческая аскарида, вызывающие аскаридоз.

Длина взрослой самки 20-40 см, самца -15-25 см. Задний конец тела самца загнут на брюшную сторону (рис.). Аскариды не имеют органов прикрепления, они удерживаются в кишечнике, продвигаясь навстречу пище. Снаружи веретеновидное тело аскариды покрыто плотной кутикулой, защищающей ее от механических воздействий и не допускающей переваривания паразита в желудочно-кишечном тракте хозяина. Эпителий аскариды (гиподерма) образует снаружи многослойную гибкую кутикулу, которая выполняет роль своеобразного наружного скелета, а также защищает от механических воздействий, ядовитых веществ и переваривания пищеварительными ферментами хозяина. Под гиподермой находятся продольные мышцы. Из органов чувств развиты только осязательные бугорки вокруг рта, а у самцов на заднем конце тела находится трубковидный кишечник, фагоцитарные клетки и половые органы.

Пищеварительная система начинается ротовым отверстием, окруженным 3 губами (валиками). Полупереваренная хозяином пища сначала попадает в короткую глотку, затем в среднюю кишку, где окончательно переваривается и усваивается. Средняя кишка переходит в заднюю, заканчивающуюся анальным отверстием.

Половая система самца представлена одним семенником, переходящим в семяпровод, впадающий в заднюю кишку. У самок имеется 2 яичника. От них отходят яйцеводы, переходящие в матки, которые сливаются в непарное влагалище, открывающиеся отверстием в брюшной стороне тела. Оплодотворение внутреннее. Размножаются аскариды только половым путем. Это раздельнополые организмы. Органы размножения имеют вид извитых трубочек. У оплодотворенной самки на границе передней и средней трети тела имеется кольцевое углубление -- перетяжка Мозговой А. А., Аскаридаты животных и человека и вызываемые ими заболевания, кн. 1, М., 1953..

Самка ежесуточно откладывает в кишечнике человека до 240000 яиц, которые с каловыми массами выводятся во внешнюю среду. Яйца покрыты 5-тью оболочками, поэтому они очень устойчивы к неблагоприятным условиям, их могут убить только вещества, растворяющие жир: спирт, эфир, бензин или горячая вода, прямые солнечные лучи. Развитие аскариды проходит без хозяина, яйца достигают зрелости в почве после выхода из кишечника человека. Влажная почва, прямой доступ кислорода и температура 25-27° С способствуют формированию в яйце личинки на 16-17-е сутки. При более низкой или более высокой температуре сроки созревания меняются.

Морфологическое строение яиц аскарид приведено в таблице.

Рисунок - Аскарида человеческая

2. Лабораторная диагностика аскаридоза

Диагностика аскаридоза в миграционной стадии основывается на распознавании эозинофильных инфильтратов с учетом клинико-рентгенологических, гематологических и иммунологических данных. Рентгенологическая картина этих инфильтратов может симулировать туберкулез, пневмонию, опухоль легкого. Основное отличие инфильтратов при аскаридозе - быстрое их исчезновение без каких-либо остаточных явлений. Подобные инфильтраты могут обнаруживаться и при других гельминтозах - анкилостомидозах и стронгилоидозе.

Достоверное установление аскаридоза в первой фазе основано на обнаружении личинок аскарид в мокроте и постановке иммунологических реакций, обнаруживающих в крови больных специфические антитела. В кишечной стадии заболевания основным методом является исследование кала на яйца аскарид. Если яйца обнаруживаются в дуоденальном содержимом, то это может свидетельствовать о наличии паразитов в желчных и панкреатических протоках. Однако иногда в кишечнике находятся паразиты одного пола, тогда обнаружить их можно рентгенологически. После приема больным контрастной массы аскариды в виде полосок просветления шириною 0,4-0,6 см выявляются на экране.

Лабораторная диагностика аскаридоза проводится путем выявления яиц гельминтов в фекалиях. Лабораторная диагностика основана на обнаружении яиц аскарид в фекалиях методом Като или обогащения по Калантарян, Фюллеборну и др. Или взрослых аскарид после диагностической дегельминтизации. Личиночный аскаридоз можно диагностировать иммунологическими методами (РП, РНГА, РСК, РЛА, реакция бетонит - флоккуляции).

Методы лабораторной диагностики паразитарных заболеваний применяются: с диагностической целью; для контроля эффективности лечения паразитарных заболеваний; для оценки качества проведения комплекса противопаразитарных мероприятий; с целью выявления источников заражения; для установления уровня пораженности населения Основные методы лабораторной диагностики паразитарных болезней.- ВОЗ, Женева, 1994..

2.1 Метод толстого мазка под целлофаном по Като и Миура

Толстый мазок представляет собой тонкий слой фекалий на предметном стекле под гигроскопическим целлофаном, пропитанным смесью глицерина и фенола.

Необходимые реактивы и оборудование:

1. Глицерин.

2. Фенол - 6%-ный раствор (100 мл дистиллированной воды + 6 г фенола).

3. Малахитовый зеленый - 3%-ный раствор (2,5 г малахитовой зелени + 75 мл дистиллированной воды).

4. Целлофан (гигроскопический).

5. Предметные стекла.

6. Палочки стеклянные или деревянные.

7. Валик или резиновая пробка.

8. Микроскоп.

Подготовка к работе

Приготовление рабочего раствора Като

100 мл 6%-ного р-ра фенола + 100 мл глицерина + 1,2 мл 3%-ного р-ра малахитового зеленого (раствор можно хранить длительное время в склянке из темного стекла с притертой крышкой).

Фенол дезинфицирует препарат; глицерин просветляет мазок; малахитовая зелень снимает напряжение глаз микроскописта.

При отсутствии фенола и малахитовой зелени можно использовать раствор глицерина (50 мл глицерина + 50 мл дистиллированной воды).

Подготовка целлофановых полосок

Нарезать полоски из гидрофильного целлофана (гидрофильный целлофан горит, в отличие от полиэтиленовой пленки, которая плавится и непригодна для исследования), чтобы их размер соответствовал размеру предметного стекла.

Полоски поместить в рабочий раствор Като не менее чем на 24 ч до проведения анализа. В 200 мл рабочего раствора можно обрабатывать до 5 тыс. новых целлофановых полосок.

Ход исследования:

- На предметное стекло нанести 30-50 мг фекалий (размером с горошину). Растереть индивидуальной палочкой (стеклянной, деревянной).

- Фекалии накрыть целлофановой полоской, обработанной в растворе Като.

- Целлофан сверху притереть резиновой пробкой или специальным валиком, ширина которого соответствует или немного больше ширины предметного стекла, до получения тонкого, равномерного, прозрачного слоя.

- Препарат выдержать при комнатной температуре в течение 1 ч или в термостате при 40 град. С в течение 20-30 мин.

- Микроскопировать при увеличении: объектив х 8 или х 10, окуляр х 7 или х 10 (для уточнения морфологического строения яиц гельминтов объектив х 40).

Эффективность метода:

- Позволяет просмотреть в 20-30 раз больше фекалий, чем в нативном мазке.

- Выявляет яйца кишечных и печеночных гельминтов при высокой и средней интенсивности инвазии.

- Менее эффективен для выявления инвазий низкой интенсивности.

Применение метода:

- Рекомендуется при массовых обследованиях населения на кишечные гельминтозы, например: при обследовании декретированных контингентов взрослого населения и детей организованных коллективов.

- В клинико-диагностических лабораториях, когда в направлениях врачей отсутствуют конкретные диагнозы или указания, на какие инвазии необходимо обследовать больного, что не позволяет лаборанту выбрать специальные методы лабораторной диагностики.

- Препараты, приготовленные методом Като, можно сохранять при комнатной температуре в течение длительного времени (за исключением яиц анкилостомид и карликового цепня) в качестве музейных препаратов Бронштейн А.М., Малышев Н.А. Современные вопросы патофизиологии, диагностики и лечения паразитарных заболеваний органов пищеварения // Российский ж. гастроэнтерол., гепатол., колопроктол.- 2003.- Т. 14.- №4 (приложение).- С. 60-66..

2.2 Методы флотации

В основе методов флотации (всплывания) лежит разность удельного веса флотационного раствора и яиц гельминтов, удельный вес флотационного раствора выше, в результате яйца гельминтов всплывают на поверхность жидкости и обнаруживаются в поверхностной пленке.

Необходимые реактивы и оборудование:

1. Один из флотационных растворов.

2. Ареометр.

3. Проволочная петля (из нескольких круглых петель диаметром от 0,5 до 1 см).

4. Предметные стекла (обезжиренные).

5. Пипетки стеклянные.

6. Химические стаканчики емкостью 30-50 мл.

7. Кюветы эмалированные.

8. Чашки Петри.

9. Стеклянные или деревянные палочки.

10. Спиртовка.

Подготовка к работе

Приготовление флотационного раствора.

1. Раствор нитрата аммония NH₄NO₃ (гранулированной или обычной селитры) плотностью 1,3 готовят из расчета 1500 г вещества на 1 л горячей воды.

2. Раствор нитрата натрия NaNO₃ или азотнокислого натрия (предложенный автором Калантарян) с плотностью 1,38-1,4 готовят из расчета 1000 г вещества на 1 л горячей воды.

Раствор тиосульфата натрия Na₂S₂O₃ x 5H₂O (гипосульфита натрия) с плотностью 1,4 готовят из расчета 1750 г вещества на 1 л горячей воды.

4. Раствор сульфата натрия Na₂SO₄ или английской соли с плотностью 1,26-1,28 готовят из расчета 920 г вещества на 1 л горячей воды.

5. Насыщенный раствор хлорида натрия NaCl (поваренной соли) с плотностью 1,18- 1,2 (предложенный автором Фюллеборном) готовят из расчета 400-420 г соли на 1 л кипящей воды.

Любую из выше предложенных солей растворяют в горячей воде в эмалированной посуде, причем кладут соль в емкость с горячей водой порциями при подогревании на плите и постоянном перемешивании до полного растворения.

Удельный вес флотационных растворов измеряется ареометром только после остывания раствора при комнатной температуре.

Измерение удельного веса флотационного раствора ареометром строго обязательно, т.к. приготовление раствора по прописи не гарантирует получение нужного удельного веса (например, когда используемая соль недостаточно химически чистая).

Фильтровать приготовленные растворы не обязательно. Если раствор приготовлен в большом количестве, то в последующие дни перед исследованием его подогревают с размешиванием осадка и после остывания раствора снова измеряют ареометром удельный вес.

Подготовка предметных стекол: предметные стекла обязательно обезжирить, например в смеси Никифорова (равные части этилового спирта и эфира).

Ход исследования:

- В химический стаканчик объемом 30-50 мл налить немного одного из выше описанных флотационных растворов (стаканчик лучше предварительно поставить в чашку Петри).

- Поместить в стаканчик 2,5 г фекалий (объем с большой "боб").

- Тщательно размешать палочкой (индивидуальной для каждого обследуемого).

- Удалить сразу же после размешивания всплывшие крупные частицы палочкой (или ложечкой с дырочками).

- Одновременно добавлять постепенно солевой раствор до 50 мл.

- При снятии поверхностной пленки предметным стеклом, стекло должно соприкасаться с жидкостью, поэтому стаканчик накрывается предметным стеклом, а флотационный раствор добавляется пипеткой до полного соприкосновения с предметным стеклом.

- Оставить взвесь на несколько мин, экспозиция зависит от того какой флотационный раствор применяется: при применении прописи NN 1 и 5 - экспозиция 30-60 мин; NN 2, 3, 4 - 30 мин.

- После вышеуказанной экспозиции снять предметное стекло с химического стаканчика, перевернув кверху ту его поверхность, которой оно соприкасалось с жидкостью, и положить сухой поверхностью на стекло большего размера.

- Микроскопировать без покровного стекла при увеличении: объектив х 8, х 10, окуляр х 7, х 10, уточнение морфологического строения - окуляр х 40.

- При снятии поверхностной пленки проволочной петлей (лучше использовать петли с несколькими ячейками) целесообразно исследовать не менее 8 капель. Микроскопировать под покровным стеклом (можно и без покровного стекла, предварительно на предметное стекло нанеся каплю глицерина, в которой размазывают каплю с петли).

- Петли перед и после исследования обжигать на пламени спиртовой горелки.

Примечание. Целесообразнее использовать для снятия пленки предметные стекла, т.к. это наиболее просто в применении и площадь снятия поверхностной пленки значительно увеличивается.

Эффективность метода:

- Наиболее эффективны методы флотации для обнаружения яиц нематод и цестод.

- Наиболее эффективно использование флотационного раствора с удельным весом 1,38-1,40 (всплывают и неоплодотворенные яйца аскарид).

- Неэффективен для выявления яиц трематод.

Применение метода

- Для обнаружения яиц гельминтов кишечника Основные методы лабораторной диагностики паразитарных болезней.- ВОЗ, Женева, 1994..

3. Пути заражения, профилактика, очаги аскаридоза

Аскарида человеческая паразитирует в кишечнике человека (в тонких кишках).

Проглоченное яйцо аскариды в тонкой кишке превращается в личинку, затем внедряется в стенку кишки, попадает в кровеносные капилляры, разносятся в печень, мозг, глаза, сердце и легкие. В процессе передвижения аскариды питаются кровью - эритроцитами и питательны ми веществами. Анемия (малокровие) - частый спутник аскаридоза.

Миграция личинок вызывает у человека аллергизацию, боли во всем теле, подъем температуры, повышение риска астмы, артритов, нейродермитов, экземы, судорог. При попадании в легкие вследствие разрыва сосудов возможны кровоизлияния и кровохарканье, на рентгеновских снимках - инфильтраты, как при туберкулезном процессе.

Передвигаясь по бронхам к глотке, аскариды с мокротой попадают в рот, а оттуда - в пищевод, желудок и кишечник. В кишечнике аскариды удерживаются, упираясь в стенки кишечника враспорку, вызывая воспаление, инфильтрацию и кровоизлияния. Возможны осложнения при попадании аскарид в носовые пазухи, печень, желчевыводящие пути, поджелудочную железу и почки. Встречаются кишечная непроходимость, нагноительные процессы в брюшной полости. Диагноз основан на анализах кала (не менее 3 раз), иммунологических тестах - в личиночном периоде.

Яйца созревают в почве после выхода из кишечника человека. Во влажной почве при доступе кислорода, температуре 25-27 градусов на 16-17 день в яйце формируется личинка. Заражение происходит в случае проглатывания таких яиц с немытыми овощами, фруктами, с водой, а также в случае переноса яиц мухами на продукты питания. Из проглоченных яиц в кишечнике выходят микроскопические личинки, которые затем совершают миграцию через стенки кишечника в кровеносные сосуды, печень, в нижнюю полую вену, в правое предсердие и желудочек сердца, а потом в легкие. При откашливании личинки из легких с током слизи по дыхательным путям попадают в глотку и вторично заглатываются, останавливаясь в тонкой кишке, где достигают половой зрелости.

Аскарида травмируют слизистую оболочку кишечника человека, отравляют его организм ядовитыми веществами (продуктами обмена веществ). Вызывают боли в желудке и кишечнике, расстройство пищеварения, уменьшение аппетита, снижение работоспособности и другие явления. Для предохранения от заражения аскаридами необходимо соблюдать правила личной гигиены - старательно мыть руки перед едой, не употреблять плохо вымытые овощи и фрукты, беречь пищу от мух, тараканов и других насекомых. Больным аскаридозом следует обратиться к врачу и по рекомендации врача применять медицинские препараты (сантонин, гексилрезорцин) или кислородную терапию для удаления аскарид из кишечника.

Для профилактики аскаридоза достаточно соблюдать элементарные правила личной гигиены: мыть руки после возвращения с улицы, после контактов с домашними животными, перед едой; хорошо мыть овощи и фрукты; беречь пищу от тараканов, мух и других насекомых.

Как уже говорилось, для яиц аскариды характерна высокая устойчивость к воздействию факторов внешней среды. Они могут зимовать при низкой температуре и сохраняться в загрязненной почве в течение 5-6 лет. В компостных кучах на приусадебных и дачных участках яйца гельминтов погибают через 1-2 месяца, так как температура в компосте достигает 45° С.

Заключение

По работе можно сделать следующие выводы.

Аскарида - ежегодно поражает до 100 миллионов человек. Попадает в человека с пищей (чаще это неошпаренные зелень, овощи и фрукты), с сырой водой, грязными руками, пылью, активно переносится муха ми. Длина аскариды - до 40 см, одна самка аскариды ежедневно выделяет до 200 000 яиц, которые попадают в почву и хорошо в ней сохраняются годами.

Развитие аскариды проходит без хозяина, яйца достигают зрелости в почве после выхода из кишечника человека. Влажная почва, прямой доступ кислорода и температура 25-27° С способствуют формированию в яйце личинки на 16-17-е сутки. При более низкой или более высокой температуре сроки созревания меняются.

В отличие от взрослых особей личинка нуждается в кислороде. Из почвы яйца через воду, овощи и фрукты попадают в кишечный тракт человека. В кишечнике оболочки яиц растворяются, и из них появляются личинки. Сквозь стенку кишечника они попадают в кровеносные сосуды и мигрируют по организму.

Затем они вторично заглатываются хозяином и, остановившись в тонкой кишке, достигают половой зрелости. В общей сложности весь этот процесс занимает 2 недели, а превращение во взрослую форму длится в течение 70-75 суток. Срок жизни взрослых особей составляет 10-12 месяцев.

Основное воздействие аскарид на организм хозяина заключается в отравлении его токсическими продуктами их жизнедеятельности, что приводит к нарушениям в работе пищеварительной, нервной, половой и других систем.

Для профилактики аскаридоза достаточно соблюдать элементарные правила личной гигиены: мыть руки после возвращения с улицы, после контактов с домашними животными, перед едой; хорошо мыть овощи и фрукты; беречь пищу от тараканов, мух и других насекомых.

Список литературы

1. Павловский Е. Н., Руководство по паразитологии человека с учением о переносчиках трансмиссивных болезней, 5 изд., т. 1, М.--Л., 1946.

2. Мозговой А. А., Аскаридаты животных и человека и вызываемые ими заболевания, кн. 1, М., 1953.

3. Многотомное руководство по микробиологии, клинике и эпидемиологии инфекционных болезней, т. 9, М., 1968. - с. 269--698.

4. Бронштейн А.М., Малышев Н.А. Гельминтозы органов пищеварения: кишечные нематодозы, трематодозы печени и ларвальные цестодозы (эхинококкозы) // РМЖ.- 2004.- №4.- С. 208-211.

5. Бронштейн А.М., Малышев Н.А. Современные вопросы патофизиологии, диагностики и лечения паразитарных заболеваний органов пищеварения // Российский ж. гастроэнтерол., гепатол., колопроктол.- 2003.- Т. 14.- №4 (приложение).- С. 60-66.

6. Бронштейн А.М., Токмалаев А.К. Паразитарные болезни человека: протозоозы и гельминтозы.- М.: РУДН, 2002.- 207 с.

7. Лебедева М.Н., Михайлицын Ф.С., Фролова А.А., Халилулина А.С., Сергиев В.П. Социально-экономическая эффективность профилактики массовых гельминтозов // Мед. паразитол.- 1998.- №3.- С. 23-26.

8. Основные методы лабораторной диагностики паразитарных болезней.- ВОЗ, Женева, 1994.