Особенности влияния антисептических растворов на костную и хрящевую ткань молодых белых крыс в условиях субхронического эксперимента

ОСОБЕННОСТИ ВЛИЯНИЯ АНТИСЕПТИЧЕСКИХ РАСТВОРОВ НА КОСТНУЮ И ХРЯЩЕВУЮ ТКАНЬ МОЛОДЫХ БЕЛЫХ КРЫС В УСЛОВИЯХ СУБХРОНИЧЕСКОГО ЭКСПЕРИМЕНТА

А.Н. Романюк, проф.; Д.В. Овечкин, врач

Сумский государственный университет

ВСТУПЛЕНИЕ

В современных условиях значительно изменились взгляды на роль различных микроорганизмов в этиологии ОГО у детей. В последние годы вновь наметилась тенденция к возрастанию роли грамположительных кокковых бактерий, особенно эпидермального стафилококка, штаммы которых характеризуются множественной антибиотикорезистентностью. Селекция таких штаммов происходит в стационарах параллельно с внедрением новых препаратов широкого спектра действия аминогликозидового и особенно цефалоспоринового ряда. По данным разных авторов [7, 8], лидирующим является стафилококк (62,9-88,5%). Большой процент высеваемости стафилококка обусловлен широким разнообразием антибиотикорезистентных вирулентных штаммов этой группы, обладающих высокой способностью к адаптации, и их циркуляцией в роддоме и детском стационаре. В связи с возрастающей устойчивостью патогенных микроорганизмов к антибактериальным средствам, трудностью создания высоких концентраций в гнойном очаге при внутривенных и внутримышечных инъекциях особое значение приобретает проблема подбора препаратов для полноценного местного лечения ОГО, обладающих выраженным бактерицидным действием и не оказывающих токсического влияния на окружающие ткани и организм ребёнка в целом.

ЦЕЛЬ РАБОТЫ

Экспериментальное определение артропатического и общетоксического действия растворов, применяемых для санации воспалительного очага при ОГО у детей (0,06% раствора гипохлорита натрия (NaClO), 1% раствора диоксидина, 30% раствора линкомицина), путём их внутрисуставного введения молодым белым крысам.

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

Исследования проводились на молодых неполовозрелых беспородных белых крысах обоего пола (возраст 2 мес.), содержащихся в условиях вивария, на полноценном рационе согласно установленным нормам [2].

Методом случайной выборки создано 4 группы (3 опытных и 1 контрольная) по 30 животных. Крысам I опытной группы ежедневно инъекционным методом, после предварительного максимального удаления суставной жидкости, вводили в коленный сустав 0,4 мл 0,06% раствора гипохлорита натрия (0,24 мг). II опытной группе животных таким же образом вводили 0,4 мл 1% раствора диоксидина (4 мг), III - 30% раствор линкомицина в дозе 20 мг/кг массы тела, крысам контрольной группы - 0,4 мл 0,09% изотонического раствора хлорида натрия.

О действии вводимых препаратов судили по состоянию животных (потреблению воды и корма, виду слизистых оболочек и шерстяного покрова, характеру фекалий) и динамике массы тела. Под легким эфирным наркозом крыс подвергали декапитации через 1 сутки, 1 неделю, 3 недели. Определялись массы внутренних органов, остеометрические показатели большеберцовых и бедренных костей, оценивалась гистоструктура суставного, эпифизарного хряща, синовиальной оболочки. Объектами морфологических исследований являлись печень, почки, легкие. Фрагменты перечисленных тканей фиксировали в 10% растворе формалина, проводили через спирты возрастающей концентрации и заливали парафином. Изготовленные парафиновые срезы окрашивали гематоксилином и эозином.

РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ

В результате проведённых исследований установлено, что в течение всего периода наблюдения (21 день) общее состояние животных нарушено не было. Крысы имели опрятный вид, охотно поедали корм. Положительная тенденция в динамике массы тела в опытных группах практически не отличалась от таковой в контрольной группе животных (табл.1).

Достоверных различий массы внутренних органов опытных и контрольной групп животных также не выявлено.

При сравнении остеометрических показателей костей, образующих исследуемый коленный сустав, статистически достоверных различий выявлено не было. Для изучения характера изменений во внутренних органах, суставах и синовиальных оболочках проводились наблюдения через 1 сутки, 1 неделю и 3 недели после начала эксперимента.

Таблица 1 - Динамика массы тела животных (M±m, n=10)

При проведении исследований внутренних органов животных (печень, почки, легкие) патологических изменений не было выявлено, консистенция и цвет не изменены, структура тканей обычного строения .

При исследовании морфологической структуры суставного хряща бедренной и большеберцовой костей через 24 часа с момента введения растворов было выявлено, что во всех группах четко различима зона хряща, которая представлена молодыми клетками, зона столбчатого и пузырчатого хряща без патологических изменений. В промежуточной зоне видны изогенные группы (из 2-4 хондроцитов) с хорошо различимой капсулой. В базальной зоне имеются гипертрофированные хондроциты, а также кальцифицирующийся хрящ.

Эпифизарный хрящ имеет обычное строение, в центре его выражена зона первичного окостенения. Хрящ эпифизарной пластинки состоит из 4 областей, переходящих последовательно одна в другую: зона покоящегося хряща, зона пролиферирующего молодого хряща, созревающего и обызвествленного хряща.

В опытных группах животных через 24 часа отмечалось увеличение молодых хондроцитов округлой и овальной форм: местами встречались безъядерные участки.

Во всех группах наблюдений синовиальная оболочка имела типичное строение: внутренний слой суставной щели, выстилающий изнутри поверхность сустава, представленный слоем синовиальных клеток, лежащих среди коллагеновых волокон с образованием на поверхности отростков, так называемых ворсин. Отмечается умеренная васкуляризация и кровенаполнение синовиальной оболочки, присутствуют тучные клетки. Следует отметить, что в микропрепаратах встречалась синовиальная оболочка двух типов: фиброзная и жировая.

При изучении изменений в тканях сустава, эпифизарном хряще через 1 неделю после введения соответствующих растворов выявились однотипные изменения: определялось умеренное кровенаполнение, правильное разделение хряща на слои, незначительное разрыхление надхрящницы, в зоне столбчатого и пузырчатого хрящей обнаруживались бесклеточные пустоты, в строении кости и хрящевой ткани отклонений от контрольных животных не обнаруживалось.

У всех крыс опытных групп через 3 недели в строении синовиальной оболочки, хрящевой и костной тканей не было выявлено структурных отличий от контрольных животных.

Вышеизложенное свидетельствует, что при многократном внутрисуставном введении в течение 3 недель в максимально допустимых объёмах 0,06% раствор гипохлорита натрия (NaClO), наравне с другими широкоиспользуемыми препаратами, такими, как 1% раствор диоксидина и 30% раствор линкомицина, не вызывает артропатического и общетоксического действия у молодых белых крыс.

ВЫВОДЫ

Установлено, что поведенческие реакции и динамика массы тела животных всех экспериментальных групп не отличаются от контрольной группы. Достоверных различий массы внутренних органов белых крыс в ходе исследований не выявлено. Макро- и микроскопические исследования внутренних органов существенных патоморфологических и гистологических изменений не выявили. Динамика роста костей, образующих исследуемый сустав, у животных всех экспериментальных групп не нарушена. При морфологических исследованиях гистологическая структура синовиальных оболочек, хрящевой и костной тканей крыс опытных групп не отличается от таковой контрольной группы. У животных после внутрисуставного введения 0,06% раствора гипохлорита натрия патоморфологических изменений в исследуемых тканях суставов не обнаружено.

Данные выводы открывают перспективы клинического исследования применения растворов гипохлорита натрия в лечении ОГО у детей.

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

1. Штабский Б.М., Гженецкий Ш.М., Гженецкий М.Р. и др. К методике определения среднесмертельных доз и концентрации химических веществ//Гигиена и санитария.-- 1980.-- № 10.-- С. 49-54.

2. Проблемы нормы в токсикологии (методические подходы, основные параметры и константы) / И.М. Трахтенберг, Р.С. Сова, В.О. Шефталь и др.-- М.: Медицина, 1992. -- 142 с.

3. Методические рекомендации по использованию поведенческих реакций в токсикологических исследованиях / Е. Н. Бурхецкая, В. Ф. Вейф и др.-- Киев, 1980.-- 47 с.

4. Саноцкий И.В. Методы определения токсичности и опасности химических веществ (токсикометрия).-- М.: Медицина, 1970.-- 342 с.

5. Гацура В.В. Методы первичного фармакологического исследования биологически активных веществ.-- М.: Медицина, 1974.-- 142 с.

6. Методические рекомендации по цитологическому исследованию синовиальной жидкости в диагностике суставных заболеваний / М.А. Астапенко и др._ М.: Медицина, 1976._ 13 с.

7. Біденко С.І. Збудники кістково-гнійної інфекції, сучасна хіміотерапія та хіміопрофілактика / Посібник з актуальних проблем кістково-гнійної хірургії та методів консервативного лікування. - Київ, 1999. - С. 296-357.

8. Хирургическое лечение остеомиелита / Г.Д. Никотин, А.В. Рак, С.А. Линкин и др. - С.-Петербург: ООО ИФК «Русская графика»,2000. - 288с.