Элементный анализ

Размещено на http://www.allbest.ru/

Элементный анализ

Оглавление

Оглавление

Введение

Глава 1. Основы фармацевтического анализа

1.1 Основные принципы фармацевтического и фармакопейного анализа

1.2 Критерии фармацевтического анализа

1.3 Ошибки, возможные при проведении фармацевтического анализа

1.4 Общие принципы испытаний подлинности лекарственных веществ

1.5 Общие требования к испытаниям на чистоту

1.6 Методы исследования качества лекарственных средств

Глава 2. Качественные реакции обнаружения катионов и анионов

2.1 Реакции на катионы

2.2 Реакции на анионы

Глава 3. Качественные реакции определения функциональных групп органических соединений

3.1 Определение спиртового гидроксила

3.2 Определение фенольного гидроксила

3.3 Определение альдегидной группы

3.4 Определение карбоксильной группы

3.5 Определение простой эфирной связи

3.6 Определение сложно-эфирной связи

3.7 Обнаружение амидной группы

3.8 Обнаружение первичной ароматической аминогруппы

3.9 Обнаружение ароматической нитрогруппы

3.10 Обнаружение гидразидной группы

3.11 Обнаружение имидной группы

3.12 Обнаружение сульфамидной группы

Глава 4. Количественный элементный анализ

4.1 Определение азота

4.2 Метод определения галоген-содержащих соединений

4.3 Определение мышьяксодержащих соединений

4.4 Определение ртутьсодержащих соединений

Выводы

Список использованной литературы

Введение

Фармацевтический анализ является одним из основных разделов фармацевтической химии. Его задача установить доброкачественность лекарственного вещества, т. е. его подлинность, чистоту и количественное содержание в препарате.

Объектом фармацевтического анализа являются вещества разнообразной химической структуры: неорганические и органические соединения как индивидуальные, так и в смесях, содержащих различное количество компонентов.

В фармацевтическом анализе используются разнообразные методы исследования: физические, физико-химические, химические, биологические. Применение физических и физико-химических методов требует соответствующих приборов и инструментов, поэтому данные методы называют также приборными, или инструментальными.

Использование физических методов основано на измерении физических констант, например, прозрачности или степени мутности, цветности, влажности, температуры плавления, затвердевания и кипения и др.

С помощью физико-химических методов измеряют физические константы анализируемой системы, которые изменяются в результате химических реакций. К этой группе методов относятся оптические, электрохимические, хроматографические.

Биологический контроль лекарственных веществ осуществляют на животных, отдельных изолированных органах, группах клеток, на определенных штаммах микроорганизмов.

Химические методы анализа основаны на выполнении химических реакций.

Методики, используемые в фармацевтическом анализе, должны быть чувствительными, специфическими, избирательными, быстрыми и пригодными для экспресс-анализа в условиях аптеки.

Химические методы определения катионов, анионов и функциональных групп в органических соединениях находят по-прежнему широкое применение, несмотря на развитие инструментальных методов анализа.

В связи с появлением инструментальных методов анализа, например инфракрасной спектроскопии, газовой хроматографии и ядерно-магнитного резонанса, может показаться, что традиционные «мокрые» химические методы анализа устарели. Однако это не так. В большинстве производств органических продуктов численность персонала, занятого химическим анализом, обычно превышает численность прибористов, газохроматографистов или спектроскопистов.

Несомненно, быстрые инструментальные методы позволяют проводить многочисленные измерения, неосуществимые чисто химическими методами. Вместе с тем химия развивается столь быстро, что даже при наличии этих новых мощных средств химические методы не только сохраняют свое значение, но и продолжают развиваться. Свидетельством тому служат новые химические методы, которые продолжают разрабатываться и в наше время.

Элементный анализ (определение углерода, водорода и др.), являющийся одним из первых количественных аналитических методов в органической химии, еще широко используется, и он непрерывно совершенствуется, например, применяются автоматические печи или новые методы определения элементов. Таким образом, аналитические инструментальные методы обогащают аналитические, не вытесняя прежние методы.

Причины такой «жизнеспособности» химических методов анализа можно сформулировать следующим образом:

В некоторых случаях химические методы более применимы, чем инструментальные. Возможность широкого выбора реакций придает химическому анализу достаточную гибкость. Например, анализ некоторых сложных систем удобнее проводить «мокрыми» химическими методами, поскольку для органических соединений разных классов характерны специфические реакции. Для анализа следов веществ также предпочтительны химические методы с использованием специфической для исследуемых веществ колориметрической реакции. Сочетание физико-химических инструментальных методов с химическими позволяет аналитикам решать разнообразные задачи.

Для анализа инструментальными методами, как правило, необходимы калибровочные кривые или числовые данные калибрования. Для калибрования нужны чистые образцы исследуемых веществ. Для «мокрых» химических методов подобная калибровка вообще не требуется. Если аналитическая лаборатория имеет дело со сравнительно небольшими сериями аналитических проб, предпочтительнее использовать мокрые методы. В большинстве исследовательских органических лабораторий и в некоторых заводских лабораториях аналитику приходится работать с одиночными пробами или небольшими сериями проб, в дальнейшем не повторяющимися. Именно в таких случаях «мокрые» химические методы наиболее целесообразны. Напротив, при необходимости выполнения анализа большого числа проб оправдано калибрование прибора.

Стоимость оборудования для химического анализа невысока, поскольку применяются такие стандартные приборы, как весы, бюретки, пипетки, стаканы и колбы.

Общим принципом традиционных химических методов является применение характерных реакций для групп, подлежащих определению. Реакция должна быть не только возможно более специфичной, но и достаточно быстрой, и в ней должны участвовать реагент или продукт реакции, легко поддающиеся определению. Наибольшее применение находят реакции, в которых потребляются или образуются следующие реагенты или продукты: кислоты, основания, окислители, восстановители, газы, вода, ионы металлов, малорастворимые или окрашенные соединения, комплексы.

Глава 1. Основы фармацевтического анализа

1.1 Основные принципы фармацевтического и фармакопейного анализа

Фармацевтический анализ - это наука о химической характеристике и изменении биологически активных веществ на всех этапах производства: от оценки сырья до оценки качества полученного лекарственного вещества, изучения его стабильности, установления сроков годности и стандартизации готовой лекарственной формы. К фармацевтическому анализу предъявляются высокие требования: специфичность, чувствительность, точность по отношению к нормативам, обусловленным ГФ XI, ФС и др. НД, выполнение в короткие сроки с использованием минимальных количеств лекарственных препаратов и реактивов.

Фармацевтический анализ включает различным формы контроля качества лекарств:

ѕ Фармакопейный анализ

ѕ Постадийныш контроль производства лекарственных средств

ѕ Анализ лекарственных форм индивидуального изготовления

ѕ Экспресс - анализ в условиях аптеки

ѕ Биофармацевтический анализ.

Фармакопейный анализ является составной частью фармацевтического анализа и представляет собой совокупность способов исследования лекарственных препаратов и форм, изложенные в ГФ, ФС, ФСП. Выполнение фармакопейного анализа позволяет установить подлинность лекарственного средства, его чистоту (содержание примесей), количественное содержание фармацевтического средства, возможность или невозможность использования его врачами и пациентами.

1.2 Критерии фармацевтического анализа

На различных этапах фармацевтического анализа в зависимости от поставленных задач имеют значение такие критерии, как избирательность, чувствительность, точность, время, затраченное на выполнение анализа, израсходованное количество анализируемого препарата (лекарственной формы).

Избирательность метода очень важна при проведении анализа смесей веществ, поскольку дает возможность получать истинные значения каждого из компонентов. Только избирательные методики анализа позволяют определять содержание основного компонента в присутствии продуктов разложения и других примесей.

Требования к точности и чувствительности фармацевтического анализа зависят от объекта и цели исследования. При испытании степени чистоты препарата используют методики, отличающиеся высокой чувствительностью, позволяющие устанавливать минимальное содержание примесей.

При выполнении постадийного контроля производства, а также при проведении экспресс-анализа в условиях аптеки важную роль имеет фактор времени, которое затрачивается на выполнение анализа. Для этого выбирают методы, позволяющие провести анализ в наиболее короткие промежутки времени и вместе с тем с достаточной точностью.

При количественном определении лекарственного вещества используют метод, отличающийся избирательностью и высокой точностью. Чувствительностью метода пренебрегают, учитывая возможность выполнения анализа с большой навеской препарата.

Мерой чувствительности реакции является предел обнаружения. Он означает наименьшее содержание, при котором по данной методике можно обнаружить присутствие определяемого компонента с заданной доверительной вероятностью. Термин ''предел обнаружения" введен вместо такого понятия, как "открываемый минимум", им пользуются также взамен термина "чувствительность". На чувствительность качественных реакций оказывают влияние такие факторы, как объемы растворов реагирующих компонентов, концентрации реактивов, рН среды, температура, продолжительность опыта. Это следует учитывать при разработке методик качественного фармацевтического анализа. Для установления чувствительности реакций все шире используют показатель поглощения (удельный или молярный), устанавливаемый спектрофотометрическим методом. В химическом анализе чувствительность устанавливают по величине предела обнаружения данной реакции. Высокой чувствительностью отличаются физико-химические методы анализа. Наиболее высокочувствительны радиохимические и масс-спектральный методы, позволяющие определять 10-8--10-9% анализируемого вещества, полярографические и флуориметрические 10-6--10-9%; чувствительность спектрофотометрических методов Ю-3--10-6%, потенциометрических 10-2%.

Термин "точность анализа" включает одновременно два понятия: воспроизводимость и правильность полученных результатов. Воспроизводимость характеризует рассеяние результатов анализа по сравнению со средним значением. Правильность отражает разность между действительным и найденным содержанием вещества. Точность анализа у каждого метода различна и зависит от многих факторов: калибровки измерительных приборов, точности отвешивания или отмеривания, опытности аналитика и т.д. Точность результата анализа не может быть выше, чем точность наименее точного измерения.

Так, при вычислении результатов титриметрических определений наименее точная цифра -- количество миллилитров титранта, израсходованного на титрование. В современных бюретках в зависимости от класса их точности максимальная ошибка отмеривания около ±0,02 мл. Ошибка от натекания тоже равна ±0,02 мл. Если при указанной общей ошибке отмеривания и натекания ±0,04 мл на титрование расходуется 20 мл титранта, то относительная ошибка составит 0,2%. При уменьшении навески и количества миллилитров титранта точность соответственно уменьшается. Таким образом, титриметрическое определение можно выполнять с относительной погрешностью ±(0,2--0,3)%.

Точность титриметрических определений можно повысить, если пользоваться микробюретками, применение которых значительно уменьшает ошибки от неточного отмеривания, натекания и влияния температуры. Погрешность допускается также при взятии навески.

Отвешивание навески при выполнении анализа лекарственного вещества осуществляют с точностью до ±0,2 мг. При взятии обычной для фармакопейного анализа навески 0,5 г препарата и точности взвешивания ±0,2 мг относительная ошибка будет равна 0,4%. При анализе лекарственных форм, выполнении экспресс-анализа такая точность при отвешивании не требуется, поэтому навеску берут с точностью ±(0,001--0,01) г, т.е. с предельной относительной ошибкой 0,1--1%. Это можно отнести и к точности отвешивания навески для колориметрического анализа, точность результатов которого ±5%.

1.3 Ошибки, возможные при проведении фармацевтического анализа

При выполнении количественного определения любым химическим или физико-химическим методом могут быть допущены три группы ошибок: грубые (промахи), систематические (определенные) и случайные (неопределенные).

Грубые ошибки являются результатом просчета наблюдателя при выполнении какой-либо из операций определения или неправильно выполненных расчетов. Результаты с грубыми ошибками отбрасываются как недоброкачественные.

Систематические ошибки отражают правильность результатов анализа. Они искажают результаты измерений обычно в одну сторону (положительную или отрицательную) на некоторое постоянное значение. Причиной систематических ошибок в анализе могут быть, например, гигроскопичность препарата при отвешивании его навески; несовершенство измерительных и физико-химических приборов; опытность аналитика и т.д. Систематические ошибки можно частично устранить внесением поправок, калибровкой прибора и т.д. Однако всегда необходимо добиваться того, чтобы систематическая ошибка была соизмерима с ошибкой прибора и не превышала случайной ошибки.

Случайные ошибки отражают воспроизводимость результатов анализа. Они вызываются неконтролируемыми переменными. Среднее арифметическое случайных ошибок стремится к нулю при постановке большого числа опытов в одних и тех же условиях. Поэтому для расчетов необходимо использовать не результаты единичных измерений, а среднее из нескольких параллельных определений.

Правильность результатов определений выражают абсолютной ошибкой и относительной ошибкой.

Абсолютная ошибка представляет собой разность между полученным результатом и истинным значением. Эта ошибка выражается в тех же единицах, что и определяемая величина (граммах, миллилитрах, процентах).

Относительная ошибка определения равна отношению абсолютной ошибки к истинному значению определяемой величины. Выражают относительную ошибку обычно в процентах (умножая полученную величину на 100). Относительные ошибки определений физико-химическими методами включают как точность выполнения подготовительных операций (взвешивание, отмеривание, растворение), так и точность выполнения измерений на приборе (инструментальная ошибка).

Значения относительных ошибок находятся в зависимости от того, каким методом выполняют анализ и что представляет собой анализируемый объект -- индивидуальное вещество или многокомпонентную смесь. Индивидуальные вещества можно определять при анализе спек- трофотометрическим методом в УФ- и видимой областях с относительной погрешностью ±(2--3)%, ИК-спектрофотометрией ±(5--12)%, газо- жидкостцой хроматографией ±(3--3,5)%; полярографией ±(2--3)%; потенциометрией ±(0,3--1)%.

При анализе многокомпонентных смесей относительная погрешность определения этими методами возрастает примерно в два раза. Сочетание хроматографии с другими методами, в частности использование хроматооптических и хроматоэлектрохимических методов, позволяет выполнять анализ многокомпонентных смесей с относительной погрешностью ±(3--7)%.

Точность биологических методов намного ниже, чем химических и физико-химических. Относительная ошибка биологических определений достигает 20--30 и даже 50%. Для повышения точности в ГФ XI введен статистический анализ результатов биологических испытаний.

Относительная ошибка определения может быть уменьшена за счет увеличения числа параллельных измерений. Однако эти возможности имеют определенный предел. Уменьшать случайную ошибку измерений, увеличивая число опытов, целесообразно до тех пор, пока она станет меньше систематической. Обычно в фармацевтическом анализе выполняют 3--6 параллельных измерений. При статистической обработке результатов определений с целью получения достоверных результатов выполняют не менее семи параллельных измерений.

1.4 Общие принципы испытаний подлинности лекарственных веществ

Испытание на подлинность -- это подтверждение идентичности анализируемого лекарственного вещества (лекарственной формы), осуществляемое на основе требований Фармакопеи или другой нормативно-технической документации (НТД). Испытания выполняют физическими, химическими и физико-химическими методами. Непременным условием объективного испытания подлинности лекарственного вещества является идентификация тех ионов и функциональных групп, входящих в структуру молекул, которые обусловливают фармакологическую активность. С помощью физических и химических констант (удельного вращения, рН среды, показателя преломления, УФ- и ИК-спектра) подтверждают и другие свойства молекул, оказывающие влияние на фармакологический эффект. Применяемые в фармацевтическом анализе химические реакции сопровождаются образованием окрашенных соединений, выделением газообразных или нерастворимых в воде соединений. Последние можно идентифицировать по температуре плавления.

1.5 Общие требования к испытаниям на чистоту

Оценка степени чистоты лекарственного препарата -- один из важных этапов фармацевтического анализа. Все лекарственные препараты независимо от способа получения испытывают на чистоту. При этом устанавливают содержание примесей. Их можно разделить на две группы: примеси, оказывающие влияние на фармакологическое действие лекарственного препарата, и примеси, указывающие на степень очистки вещества. Последние не влияют на фармакологический эффект,, но присутствие их в больших количествах снижает концентрацию и соответственно уменьшает активность препарата. Поэтому фармакопеи устанавливают определенные пределы этих примесей в лекарственных препаратах.

Таким образом, основной критерий доброкачественности лекарственного препарата -- наличие допустимых пределов физиологически неактивных примесей и отсутствие токсичных примесей. Понятие отсутствие условно и связано с чувствительностью способа испытания.

Общие требования, которые предъявляются к испытаниям на чистоту, -- чувствительность, специфичность и воспроизводимость используемой реакции, а также пригодность ее применения для установления допустимых пределов содержания примесей.

Для испытаний чистоты избирают реакции с такой чувствительностью, которая позволяет определить допустимые пределы примесей в данном лекарственном препарате. Эти пределы устанавливают предварительной биологической проверкой с учетом возможного токсического воздействия примеси.

Определить максимальное содержание примесей в испытуемом препарате можно двумя путями (эталонным и безэталонным). Один из них основан на сравнении с эталонным раствором (стандартом). При этом в одинаковых условиях наблюдают окраску или помутнение, возникающие под действием какого-либо реактива. Второй путь -- установление предела содержания примесей по отсутствию положительной реакции. При этом используют химические реакции, чувствительность которых ниже, чем предел обнаружения допустимых примесей.

Для ускорения выполнения испытаний на чистоту, их унификации и достижения одинаковой точности анализа в отечественных фармакопеях использована система эталонов. Эталон представляет собой образец, содержащий определенное количество открываемой примеси. Установление наличия примесей производят колориметрическим или нефелометрическим методом, сравнивания результаты реакций в растворе эталона и в растворе препарата после добавления одинаковых количеств соответствующих реактивов. Достигаемая при этом точность вполне достаточна, чтобы установить, больше или меньше, чем допустимо, содержится примесей в испытуемом препарате.

При выполнении испытаний на чистоту необходимо строго соблюдать общие указания, предусмотренные фармакопеями. Вода и используемые реактивы не должны содержать ионов, наличие которых устанавливают; одинакового диаметра и бесцветными должны быть пробирки; навески должны отвешиваться с точностью до 0,001 г; реактивы следует добавлять одновременно и в одинаковых количествах как к эталонному, так и к испытуемому раствору; образующуюся опалесценцию наблюдают в проходящем свете на темном фоне, а окраску -- в отраженном свете на белом фоне. Если устанавливают отсутствие примеси, то к испытуемому раствору прибавляют все реактивы, кроме основного; затем полученный раствор делят на две равные части и к одной из них прибавляют основной реактив. При сравнении не должно быть заметных различий между обеими частями раствора.

Следует иметь в виду, что последовательность и скорость прибавления реактива влияют на результаты испытаний на чистоту. Иногда необходимо также соблюдать интервал времени, в течение которого следует вести наблюдение за результатом реакции.

Источником примесей при производстве готовых лекарственных форм могут служить плохо очищенные наполнители, растворители и другие вспомогательные вещества. Поэтому степень чистоты этих веществ должна подвергаться тщательному контролю перед использованием их в производстве.

1.6 Методы исследования качества лекарственных средств

В соответствии с ГФ XI методы исследования лекарственных средств подразделяются на физические, физико-химические и химические.

Физические методы. Включают методы определение температуры плавления, затвердевания, плотности (для жидких веществ), показателя преломления (рефрактометрия), оптического вращения (поляриметрия) и др.

Физико-химические методы. Их можно разделить на 3 основным группы: электрохимические (полярография, потенциометрия), хромато- графические и спектральным (УФ- и ИК-спектрофотометрия и фотоколориметрия ).

Полярография - метод изучения электрохимических процессов, основанный на установлении зависимости силы тока от напряжения, которое прикладывается к исследуемой системе. Электролиз исследуемых растворов проводится в электролизере, одним из электродов которой служит капельный ртутный электрод, а вспомогательным - ртутныш электрод с большой поверхностью, потенциал которого практически не изменяется при прохождении тока небольшой плотности. Полученная полярографическая кривая (полярограмма) имеет вид волны. Вымота волны связана с концентрацией реагирующих веществ. Метод применяется для количественного определения многих органических соединений.

Потенциометрия - метод определения рН и потенциометрическое титрование.

Хроматография - процесс разделения смесей веществ, происходящий при их перемещении в потоке подвижной фазы вдоль неподвижного сорбента. Разделение происходит благодаря различию тех или иных физико -химических свойств разделяемые веществ, приводящему к неодинаковому взаимодействию их с веществом неподвижной фазы, следовательно, к различию во времени удерживания слоя сорбента.

По механизму, лежащему в основе разделения, различают адсорбционную, распределительную и ионообменную хроматографию. По способу разделения и применяемой аппаратуре различают хроматографию на колонках, на бумаге в тонком слое сорбента, газовую и жидкостную хроматографию, высокоэффективную жидкостную хроматографию (ВЭЖХ) и др.

Спектральным методы основаны на избирательном поглощении электромагнитного излучения анализируемым веществом. Различают спектрофотометрические методы, основанным на поглощении веществом монохроматического излучения УФ- и ИК-диапазонов, колориметрические и фотоколориметрические методы, основанным на поглощении веществом немонохроматического излучения видимой части спектра.

Химические методы. Основаны на использовании химических реакций для идентификации лекарственные средств. Для неорганических лекарственных средств используют реакции на катионы и анионы, для органических - на функциональным группы, при этом применяются только такие реакции, которым сопровождаются наглядным внешним эффектом: изменением окраски раствора, выделением газов, выпадением осадков и т.д.

С помощью химических методов проводят определение численных показателей масел и эфиров (кислотное число, йодное число, число омыления), характеризующих их доброкачественность.

К химическим методам количественного анализа лекарственных веществ относятся гравиметрический (весовой) метод, титриметрические (объёмным) методы, включающие кислотно - основное титрование в водных и неводных средах, газометрический анализ и количественный элементный анализ.

Гравиметрический метод. Из неорганических лекарственных веществ этим методом можно определять сульфаты, переводя их в нерастворимым соли бария, и силикаты, предварительно прокаливая их до диоксида кремния. Возможно применение гравиметрии для анализа препаратов солей хинина, алкалоидов, некоторые витаминов и др.

Титриметрические методы. Это наиболее распространенным в фармацевтическом анализе методы, отличающиеся небольшой трудоемкостью и достаточно высокой точностью. Титриметрические методы можно подразделить на осадительное титрование, кислотно - основное, окислительно - восстановительное, комплексиметрию и нитритометрию. С их помощью количественную оценку производят, проводя определение отдельные элементов или функциональных групп, содержащихся в молекуле лекарственного вещества.

Осадительное титрование (аргентометрия, меркуриметрия, меркуро- метрия и др.).

Кислотно - основное титрование (титрование в водной среде, ацидиметрия - использование в качестве титранта кислоты, алкалиметрия - использование для титрования щелочи, титрование в смешанные растворителях, неводное титрование и др.).

Окислительно-восстановительное титрование (иодометрия, иодхлорометрия, броматометрия, перманганатометрия и др.).

Комплексиметрия. Метод основан на образовании прочных, растворимых в воде комплексов катионов металлов с трилоном Б или др. комплексонами. Взаимодействие происходит в стехиометрическом соотношении 1:1 независимо от заряда катиона.

Нитритометрия. Метод основан на реакциях первичных и вторичных ароматических аминов с нитритом натрия, которые используют в качестве титранта. Первичные ароматические амины образуют с нитритом натрия в кислой среде диазосоединение, а вторичным ароматические амины в этих условиях образуют нитрозосоединения

Газометрический анализ. Имеет ограниченное применение в фармацевтическом анализе. Объектами этого анализа являются два газообразныгх препарата: кислород и циклопропан. Сущность газометрического определения заключается во взаимодействии газов с поглотительными растворами.

Количественный элементный анализ. Этот анализ используют для количественного определения органических и элементорганических со - единений, содержащих азот, галогены, серу, а также мышьяк, висмут, ртуть, сурьму и др. элементы.

Биологические методы контроля качества лекарственных веществ. Биологическую оценку качества ЛB проводят по их фармакологической активности или токсичности. Биологические микробиологические методы применяют в тех случаях, когда с помощью физических, химических и физико-химических методов нельзя сделать заключение о доброкачественности ЛC. Биологические испытания проводят на животных кошки, собаки, голуби, кролики, лягушки и др.), отдельных изолированных органах (рог матки, часть кожи) и группах клеток (форменные элементы крови, штаммы микроорганизмов и др.). Биологическую активность устанавливают, как правило, путем сравнения действия испытуемых и стандартных образцов.

Испытаниям на микробиологическую чистоту подвергают не стерилизуемые в процессе производства ЛП (таблетки, капсулы, гранулы, растворы, экстракты, мази и др.). Эти испытания имеют своей целью определение состава и количества имеющейся в ЛФ микрофлоры. При этом устанавливается соответствие нормам, ограничивающим микробную обсемененность (контаминацию). Испытание включает количественное определение жизнеспособных бактерий и грибов, выявление некоторых видов микроорганизмов, кишечной флоры и стафилококков. Испытание выполняют в асептических условиях в соответствии с требованиями ГФ XI (в. 2, с. 193) двухслойным агаровым методом в чашках Петри.

Испытание на стерильность основано на доказательстве отсутствия в ЛС жизнеспособных микроорганизмов любого вида и является одним из важнейших показателей безопасности ЛС. Этим испытаниям подвергаются все ЛП для парентерального введения, глазные капли, мази и т.д. Для контроля стерильности применяют биогликолевую и жидкую среду Сабуро, используя метод прямого посева на питательные среды. Если ЛС обладает выраженным антимикробным действием или разлито в емкости более 100 мл, то используют метод мембранной фильтрации (ГФ, в. 2, с. 187).

Глава 2. Качественные реакции обнаружения катионов и анионов

2.1 Реакции на катионы

КАЛИЙ

Методика 1.

Окрашивание пламени. Соль калия, внесенная в бесцветное пламя, окрашивает его в фиолетовый цвет. (ГФ Х, с. 744).

Методика 2.

К 2мл раствора соли калия (KCl) прибавляют 1мл раствора винной кислоты и 1мл раствора ацетата натрия, охлаждают и встряхивают; выпадает белый кристаллический осадок, растворимый в разведенных минеральных кислотах и растворах едких щелочей. (ГФ Х, с. 744).

При диссоциации винной кислоты по первой ступени образуются осаждающие K+ ионы HС4H4O6-:

H2С4H4O6 > H+ + HС4H4O6-

Однако реакция сопровождается в этом случае образованием сильной кислоты:

KCl + H2С4H4O6 > KHC4H4O6 + HCl,

что делает ее обратимой, поэтому при выполнении реакции необходимо, кроме реактива, прибавлять к исследуемому раствору ацетат натрия, образующий при взаимодействии с кислотой ацетатную буферную смесь. Осадок KHC4H4O6 растворим в сильной кислоте и щелочах, но не растворим в слабой кислоте (уксусной); в горячей воде и в большом количестве холодной воды осадок растворим.

KHC4H4O6 + HCl = KCl + H2C4H4O6

KHC4H4O6 + NaOH = KNaC4H4O6 + H2O

НАТРИЙ

Методика 1.

Окрашивание пламени. Бесцветное пламя горелки окрашивается солями натрия в желтый цвет.

Реакция окрашивания пламени солями натрия очень чувствительна: от- крышаемый минимум равен 0,0001 мкг. А между тем соединения натрия имеются везде: в пыли; они извлекаются из стекла посуды водой и т.д., поэтому о присутствии измеримых количеств натрия в исследуемом веществе можно заключить лишь по яркому и неисчезающему в течение нескольких секунд желтому окрашиванию пламени.

Методика 2.

1 мл 10% раствора натрия сульфата подкисляют разведенной уксусной кислотой, фильтруют, если необходимо, прибавляют 0,5 мл раствора цинк-уранил-ацетата; образуется желтый кристаллический осадок.

NaCl + Zn[(UO2)3(СH3СОО)8] + CH3COOH + 9H2O >

Na[Zn(UO2)3(CH3COO)9]*9H2Ov + HCl

АММОНИЙ

Методика 1.

Разложение при нагревании. 1 мл раствора соли аммония нагревают с 0,5 мл раствора едкого натра; выделяется аммиак, обнаруживаемый по запаху и по посинению влажной красной лакмусовой бумажки. ( ГФ Х, стр.743 ).

NH4Cl + NaOH > NH3^ + NaCl + H2O

Методика 2.

К 3 - 5 каплям хлорида аммония прибавляют 2 - 3 капли реактива Несслера - появляется осадок красно - бурого цвета или желто -- бурое окрашивание. Реактив Несслера - раствор комплексной соли меркурийодида калия K2[ HgI4] в KOH.

Вследствие высокой чувствительности реакции реактив Несслера дает возможность определить следовые количества аммиака и солей аммония. При добавлении избытка реактива Несслера протекает реакция:

МАГНИЙ

Методика 1.

К 1 мл раствора соли магния прибавляют 1 мл раствора хлорида аммония, 0,5 мл раствора гидрофосфата натрия и 1 мл раствора аммиака. Выпадает белый кристаллический осадок, растворимый в уксусной кислоте. ( ГФ Х, стр. 745).

МgSO4 + Na2HРO4 + NH4ОH + NН4Сl> МgNH4РO4 + Na2SO4 + Н2О

Соль аммония прибавляют для того, чтобы при действии аммиака не образовался осадок Мg(OН)2 . Выполнить эту важную реакцию лучше всего начиная с кислого раствора, постепенно понижая его кислотность, прибавляя по каплям NН4ОН. Растворимость МgNН4РO4 при этом будет постепенно уменьшаться, и тем самым будут созданы условия для медленной кристаллизации, способствующие образованию хорошего, явственно кристаллического осадка.

Методика 2.

К 1 мл раствора соли магния прибавляют по каплям раствор 8-оксихинолина - появляется зеленовато - желтый осадок оксихинолината магния (Берется аммиачный раствор соли магния ).

КАЛЬЦИЙ

Методика 1.

К 1 мл раствора соли кальция прибавляют 1 мл раствора оксалата аммония; образуется белый осадок, нерастворимый в уксусной кислоте и растворе аммиака, растворимый в разведенных минеральных кислотах. (ГФ Х, стр.744 ).

Методика 2.

Окрашивание пламени. Бесцветное пламя горелки окрашивается солями кальция в кирпично - красный цвет.

ЦИНК

Методика 1.

К 2 мл нейтрального раствора соли цинка прибавляют 0,5 мл сульфида натрия - образуется осадок белого цвета, нерастворимый в уксусной кислоте и растворимый в разведенной соляной кислоте. ( ГФ Х, стр.747 )

ZnSО4 + Na2S > ZnSv + Na2SО4

Белый осадок

Методика 2.

К 2 мл раствора соли цинка прибавляют 0,5 мл раствора ферроцианида калия; образуется белый студенистый осадок, нерастворимый в разведенной соляной кислоте.

3ZnSО4 + 2К4[Fe(СN)6] > K2Zn3[Fe(CN)6]2v + 3K2SО4

Жёлтая кровяная Белый осадок двойной соли соль ферроцианида цинка и калия

СВИНЕЦ

Методика 1.

К 1 мл раствора соли свинца прибавляют 4 - 5 капель раствора йодида калия; выпадает желтый осадок.

Pb(CH3COO)2 + 2KI > 4PbI2v + 2CH3COOK

Желтый осадок йодида свинца

Ион Pb2+ в водных растворах бесцветен. PbI2 выпадает в виде блестящих золотистых кристаллов. Это одна из наиболее красивых аналитических реакций.

Методика 2.

К 3 - 5 каплям раствора соли свинца прибавляют несколько капель раствора сульфида натрия; образуется осадок черного цвета.

Pb (CH3COO)2 + Na2S > 4PbSv + 2CH3COONa

Черный осадок сульфида свинца

СЕРЕБРО

Методика 1.

К 1 мл раствора соли серебра прибавляют раствор аммиака (до растворения образующегося осадка), затем прибавляют 2 - 3 капли формалина и нагревают; на стенках пробирки образуется налет металлического серебра (реакция серебряного зеркала) (ГФ Х, с. 746).

Реакция протекает по стадиям:

AgNO3 + NH4OH > AgOH + NH4NO3

AgOH +2NH3 > [Ag(NH3)2]OH

2[Ag(NH3)2]OH + HCOH > 2Agv + 3NH3^ + HCOONH4 + H2O

Методика 2.

К 1мл раствора соли серебра прибавляют 2 - 3 капли натрия хлорида или разведенной кислоты: образуется осадок, растворимый в растворе аммиака.

AgNO3 + HCl > AgClv + HNO3

Белый творожистый осадок хлорида серебра

Осадок хлорида серебра при взбалтывании содержимого пробирки собирается в белые творожистые хлопья. На свету он становится фиолетовым или даже чернеет (разложение).

В разбавленных кислотах (HNO3, H2SO4) AgCl как соль, образованная сильной кислотой, нерастворим. Легко растворяется он в NH4OH вследствие связывания ионов серебра, отдаваемых в раствор осадком, в комплексные ионы:

AgCl + 2NH4OH > [Ag(NH3)2]+ + Cl- + 2H2O

МЕДЬ

Методика 1.

К 1 мл раствора сульфата меди прибавляют по каплям раствор аммиака: выпадает голубой осадок, который растворяется в избытке реактива с образованием раствора темно - синего цвета.

2СuSO4 + 2NH4ОН > (СuОН)2SO4v+ (NH4)2SO4

Голубой или зеленоватый осадок

(СuОН)2SО4 + (NH4)2SО4 + NH4ОН > 2[Сu(NН3)4]SО4 + 8Н2О

Аммиачный комплекс меди

интенсивного синего цвета

Методика 2.

К нескольким каплям раствора сульфата меди прибавляют раствор ферроцианида калия до образования красно - бурого осадка (при рН< 7) :

2СuSО4 + К4[Fе(СN)6] > 4Сu2[Fе(СN)6]v + 2К2SО4

 Красно - бурый осадок ферроцианида меди

Осадок не растворим в разбавленных кислотах, но растворяется в аммиаке (образование комплексного соединения) и разлагается при действии щелочей (образуется осадок Сu(ОН)2).

ЖЕЛЕЗО

Методика 1.

К 1 мл 3% раствора железа (III) хлорида прибавляют 5 мл воды, 0,5 мл разведенной соляной кислоты и 1-2 капли раствора гекса- цианоферрата (II) калия. Образуется синий осадок.

FеСl3 + К4[Fе(СN)6] > КFе[Fе(СN)6]v + 3КС1

Методика 2.

К 1 мл 3% раствора железа (III) хлорида прибавляют 5 мл воды и раствор сульфида аммония. Образуется черныш осадок.

2FеСl3 + 3(NH4)2S > Fе2S3v + NH4С1

2.2 Реакции на анионы

ХЛОРИДЫ, БРОМИДЫ, ЙОДИДЫ

Методика 1.

К 2 мл раствора испытуемого вещества прибавляют 0,5 мл разведенной азотной кислоты и 0,5 мл раствора нитрата серебра - выпадают творожистым осадки белого (АgС1), слегка желтоватого (АgBr) и желтого (АgI) цветов. ( ГФ Х, с. 747 )

Все осадки нерастворимы в разведенной азотной кислоте и различно растворяются в растворе аммиака (проверить растворимость!).

NaС1 + АgNО3 = AgС1v + NaNO3

 Белый творожистый осадок (растворяется в NН4ОН)

АgС1 + 2NH4ОН > [Аg(NH4)2]+ + С1- + 2Н2О

КBr + АgNО3 > АgBrv + KNO3

Желтоватый осадок (плохо растворим в NН4ОН)

КI + AgNO3 > AgIv + КNO3

Желтый осадок (не растворим в NН4OН)

Методика 2.

Окисление до элементарного галогена. К 1 мл раствора испытуемого вещества прибавляют 1 мл разведенной соляной кислоты, 0,5 мл раствора хлорамина Б и 1 мл хлороформа. Взбалтывают. Выделившийся бром окрашивает хлороформ в желто - бурый, йод - в фиолетовый цвет.

N-хлорбензолсульфамиднатрий Хлорамин Б - N - хлорбензолсульфамид-натрий тригидрат C6H5SO2N*NaCl*3H2O -- желтоватый кристаллический порошок со слабым запахом хлора; растворим в воде и спирте, мало растворим в эфире и хлороформе.

СУЛЬФАТЫ

Методика 1.

К 2 мл раствора сульфата прибавляют 0,5 мл разведенной HCl и 0,5 мл раствора хлорида бария; образуется белый кристаллический осадок, нерастворимый в разведенных минеральных кислотах. ( ГФ Х, стр .746 ).

BaCl2 + Na2SO4 > BaSO4v + 2NaC1

Белый кристаллический осадок

ФОСФАТЫ

Методика 1.

К 2 мл нейтрального 5% натрия фосфата двузамещенного прибавляют несколько капель раствора нитрата серебра; образуется желтый осадок, растворимый в разведенной азотной кислоте и растворе аммиака.

3AgNO3 + Na2НРО4 = Ag3РO4v + 2NaNO3+ НNО3

Желтый осадок фосфата серебра

Ag3РO4 + НNО3 > AgNO3 + Н3РO4

Ag3РO4 + NH4OН = [Ag(NН3)2]3РO4 + 6Н2O

Методика 2.

К 2 мл 5% натрия фосфата двузамещенного прибавляют 1 мл раствора хлорида аммония, 1 мл раствора аммиака и 0,5 мл раствора сульфата магния; образуется белый кристаллический осадок.

Na2НРO4 + NH4OН + МgSO4 > MgNH4РO4v + Na2SO4 + Н20

Гидрофосфат Белый кристаллический

натрия осадок

БОРАТЫ

Методика 1.

Несколько кристалликов борной кислоты смешивают с 1 - 2 мл этанола, прибавляют 1 каплю концентрированной серной кислоты и поджигают -- пламя окрашивается в зеленый цвет.

Н3BO3 + С2Н5OН > В(OС2Н5)3v + 3Н20

Летучий борно-этиловый эфир Летучие соединения бора окрашивают пламя в зеленый цвет.

КАРБОНАТЫ И ГИДРОКАРБОНАТЫ

Методика 1.

К 0,2 г карбоната (гидрокарбоната) или к 2 мл раствора карбоната (гидрокарбоната) (1: 10) прибавляют 0,5 мл разведенной кислоты; выделяются пузырьки углекислого газа. ( ГФ Х, стр.744).

Na2СO3 + 2НС1 > СO2^ + Н2O + 2NaС1

NaHСO3 + НС1 > СO2^ + Н2O + NaС1

Методика 2.

К 2 мл раствора карбоната (1:10) прибавляют 5 капель насыщенного раствора сульфата магния; образуется белый осадок. Гидрокарбонат образует осадок только при кипячении смеси.

4Н2O + 4Na2СO3 + 4МgSO4 > МgСO3*Мg(OН)2*3Н2Ov + СO2^ + 4Na2SO4

Белый осадок

НИТРАТЫ И НИТРИТЫ

Методика 1. К 0,01 г натрия нитрата или натрия нитрита прибавляют несколько капель раствора дифениламина в концентрированной серной кислоте. Появляется синее окрашивание.

Эта реакция окисления дифениламина лежит в основе испытаний подлинности нитратов и нитритов. Дифениламин восстанавливает нитраты и нитриты, окисляясь до имеющего синюю окраску хиноидного соединения - имониевой соли дифенилбензидина.

Методика 2.

Натрия нитрат (около 0,005 г) не обесцвечивает раствор перманганата калия, подкисленный серной кислотой (отличие от нитритов).

Методика 3. К 1 мл 10% раствора натрия нитрита прибавляют 1 мл разведенной серной кислоты. Выделяются желто - бурые пары (отличие от нитратов).

2NaNO2 + H2SO4 > NO^ NO2^ + Na2SO4 + Н2О

Глава 3. Качественные реакции определения функциональных групп органических соединений

Органические лекарственные препараты в большинстве своем являются неэлектролитами, поэтому в их анализе много специфических особенностей. Анализ органических лекарственных препаратов основан на использовании химических реакций, обусловленных наличием в молекуле определенных функциональных групп, причем важны не только реакции самих функциональных групп, но и их влияние на реакционную способность всей молекулы вещества. Соли органических кислот, как правило, подвергаются диссоциации, поэтому их идентифицируют по катионам и анионам аналогично неорганическим лекарственным препаратам.

3.1 Определение спиртового гидроксила (этиловый спирт) (ГФХ, с. 645)

Методика 1. Реакция образования эфиров

К 2 мл этанола прибавляют 0,5 мл ледяной уксусной кислоты, 1 мл концентрированной серной кислоты и нагревают до кипения - ощущается характерный запах этилацетата.

Методика 2. Йодоформная проба

0,5 мл этанола смешивают с 5 мл раствора едкого натра, прибавляют 2 мл 0,1 Н раствора йода - постепенно выпадает жёлтый осадок йодоформа и ощущается характерный запах.

С2Н5ОН + 4І2 + 6NaОН > 4СНІ3v + НСООH + 5NaІ + 5Н2О

Йодоформ (Жёлтый осадок)

Йодоформ имеет характерный запах.

Реакция чувствительна, но недостаточно специфична для этилового спирта. Её дают также соединения, имеющие в молекуле этоксильную (--ОС2Н5) группу (например, анестезин); ацетогруппу (СН3--С=О) (например, ацетон); некоторые оксикислоты.

Методика 3. Реакция на многоатомные спирты (глицерин, глюкоза).

К 5 мл 5% раствора сульфата меди прибавляют 1-2 мл раствора гидроксида натрия до образования осадка гидроксида меди, затем прибавляют раствор глицерина или глюкозы до растворения осадка. Получается раствор интенсивного синего цвета.

СuSО4 + 2NaОН > 4Сu(ОН)2v+ Na2SО4

3.2 Определение фенольного гидроксила (фенол, салициловая кислота) (ГФ X, с. 58)

Методика 1. Реакция с хлоридом железа (III).

Растворяют 0,01 г салициловой кислоты в 10 мл воды. К полученному раствору препарата прибавляют 1 каплю раствора хлорида железа (III). Появляется характерное сине-фиолетовое окрашивание.

Методика 2. Индофеноловая проба (реакция окисления)

0,05 г препарата растворяют в 0,5 мл раствора аммиака и добавляют 3-4 капли раствора хлорамина. Нагревают на кипящей водяной бане. Через несколько минут появляется сине-зелёная окраска, при последующем прибавлении кислоты изменяющаяся на красную. (Салициловая кислота реакцию не даёт!).



Методика 3. Нитрозореакция Либермана

Крупинку препарата помещают на часовое стекло, смачивают 2-3 каплями 1% раствора нитрита натрия в концентрированной серной кислоте - наблюдается тёмно - зелёное окрашивание (фенол) или светло-коричневое, переходящее в фиолетовое (салициловая кислота). При добавлении раствора гидроксида натрия окраска изменяется.

Методика 4. Реакция с реактивом Марки

Несколько кристалликов салициловой кислоты помещают на часовое стекло и смачивают 2-3 каплями реактива Марки - появляется красное окрашивание.

Реактив Марки: раствор формальдегида в конц. Н2SО4.



Методика 5. Реакция образования азокрасителя

К водному раствору препарата прибавляют 2 мл раствора аммиака и 1 мл диазореактива - появляется красное окрашивание или осадок.

Это реакция фенолов и их производных с солью диазония (реакция сочетания).

Сначала получают соль диазония.

Методика 6. Реакция с бромной водой

К раствору препарата в воде прибавляют по каплям бромную воду - выпадает осадок белого цвета.



3.3 Определение альдегидной группы (формальдегид (ГФ X, с. 628); глюкоза)

Методика 1. Реакция образования серебряного зеркала

К 2 мл раствора нитрата серебра прибавляют 10-12 капель раствора аммиака, 2-3 капли раствора препарата и нагревают на водяной бане с температурой 50-60oС до кипения - восстановленное серебро осаждается на стенках пробирки в виде зеркала или выпадает в виде черно - серого осадка.

Методика 2. Реакция с реактивом Фелинга

К 2 мл раствора препарата прибавляют по каплям реактив Фелинга, нагревают. Образуется жёлтый, а затем красный осадок.

Реактив Фелинга: смесь водного раствора СuSО4 и щелочного раствора К, № тартрата в равных объёмах.

Методика 3. Реакция с гидроксиламином

К 1 мл раствора гидроксиламина солянокислого прибавляют 1-2 капли бромфенолового синего (жёлтая окраска) и по каплям раствор 0,1 Н гидроксида натрия до появления сине-фиолетовой окраски. Затем прибавляют 0,5-1 мл раствора формальдегида и наблюдают изменение окраски индикатора (жёлтая - выделяется HCl).



При взаимодействии альдегида с солянокислым гидроксиламином освобождается соляная кислота, которую можно оттитровать и произвести соответствующий расчет количественного содержания карбонильного соединения.

Методика 4. Реакция конденсации

К 0,03 г салициловой кислоты прибавляют 5 мл концентрированной серной кислоты, 2 капли формалина и нагревают; появляется красное окрашивание

3.4 Определение карбоксильной группы (ацетилсалициловая кислота, салициловая кислота, бензойная кислота)

Бензойная кислота Салициловая кислота Ацетилсалициловая кислота (аспирин)

Методика 1. Реакция с солями тяжелых металлов

Небольшое количество исследуемого препарата нейтрализуют 0,1 Н раствором гидроксида натрия (по фенолфталеину до слабо-розового окрашивания). Полученный раствор разливают в 3 пробирки; в одну прибавляют раствор хдорида железа (III), в другую - раствор сульфата меди, в третью - раствор нитрата кобальта. Наблюдают появление окрашенных осадков или окрашенных растворов.



Окрашивание исчезает от прибавления раствора HCl и сохраняется в присутствии CH3COOH.



3.5 Определение простой эфирной связи (димедрол)

Методика 1.

На часовое стекло наносят 3-4 капли концентрированной серной кислоты и прибавляют 0,02 г димедрола - появляется ярко- жёлтое окрашивание, постепенно переходящее в кирпично - красное.

При добавлении воды окраска исчезает, что связано с разложением оксониевой соли.

3.6 Определение сложно-эфирной связи (Ацетилсалициловая кислота)

Методика 1. Щелочной гидролиз

0,1 г препарата кипятят в течение 3 минут с 1 мл раствора гидроксида натрия, затем охлаждают и подкисляют разведенной серной кислотой - выпадает белый кристаллический осадок (салициловая кислота) и ощущается запах уксусной кислоты.

2СН3СOONа + Н2SO4 > Nа2SO4 + 2СН3СOOН

3.7 Обнаружение амидной группы (никотинамид) (ГФ X, с.463)

Методика 1.

0,1 г препарата нагревают с 2 мл 0,1 н. раствора гидроксида натрия; появляется запах аммиака.

3.8 Обнаружение первичной ароматической аминогруппы (анестезин, норсульфазол) (ГФ X, с.470)

Методика 1. Реакция образования азокрасителя

0,05-0,1 г препарата растворяют в 1 мл разведенной соляной кислоты и прибавляют по каплям в щелочной раствор бета-нафтола до получения вишнёво-красного раствора.

Это общая реакция для соединений, имеющих незамещенную первичную ароматическую аминогруппу.

Методика 2. Реакция образования оснований Шиффа (лигниновая проба)

На кусочек газетной бумаги, смоченной раствором соляной кислоты, помещают несколько капель раствора препарата - появляется жёлто - оранжевое окрашивание. Реакция в общем виде:



Сущность химического процесса: газетная бумага (древесина) содержит альдегиды лигнина. При действии разведенной HCl на газетную бумагу образуются ароматические альдегиды: п-оксибензальдегид, сиреневый альдегид, ванилин (в зависимости от вида лигнина). Альдегиды взаимодействуют с первичными ароматическими аминами, образуя Шиффовы основания.

Методика 3. Реакция окисления (для анестезина)

0,05 г анестезина растворяют в 2 мл воды, прибавляют 5 капель разведённой соляной кислоты и 2 мл раствора хлорамина. Через 3 минуты прибавляют 1-2 мл эфира и взбалтывают - эфирный слой окрашивается в оранжевый цвет.

В зависимости от условий реакция может протекать по следующей схеме:

Возможно протекание первой реакции по другой схеме:

3.9 Обнаружение ароматической нитрогруппы (Левомицетин) (ГФ X, с. 391)

Левомицетин относится к числу производных п-нитробензола:

По химическому строению левомицетин (амфеникол) представляет собой п-нитрофенил-2-дихлорацетиламинопропандиол - 1,3:

Методика 1. Образование ацинитросоли

К 0,1 г препарата прибавляют 5 мл раствора гидроксида натрия и нагревают - появляется жёлтое окрашивание, переходящее при дальнейшем нагревании в красно - оранжевое. При кипячении этого раствора окраска усиливается, выделяется кирпично - красный осадок и появляется запах аммиака.



При щелочном гидролизе левомицетина образуется «основание» левомицетина (жёлтое окрашивание), переходящее в ациформу (красно- оранжевое окрашивание).

Методика 2. Восстановление ароматической нитрогруппы

К 1 мл раствора препарата прибавляют 8-10 капель концентрированной со - ляной кислоты и 0,1 г цинковой пыли (или гранулированного цинка) и нагревают на водяной бане 2-3 минуты. После охлаждения раствор фильтруют. К фильтрату прибавляют 1-2 капли 1% раствора нитрита натрия и через 1 минуту 0,3-0,5 мл полученной смеси вливают в 1-2 мл свежеприготовленного щелочного раствора бета-нафтола - появляется розовое окрашивание.

3.10 Обнаружение гидразидной группы (изониазид) (ГФ X, с. 378)

Методика 1. Цветная реакция с раствором сульфата меди (II)

0,1 г препарата растворяют в 5 мл воды и прибавляют 4-5 капель раствора сульфата меди; выделяется голубой осадок; при встряхивании раствор также окрашивается в голубой цвет. При нагревании раствор и осадок становятся светло-зелёного, а затем жёлто-зелёного цвета и выделяются пузырьки газа.

Методика 2. Реакция «серебряного зеркала» (ГФ X, с. 378)

0,01 г препарата растворяют в 2 мл воды и прибавляют 1 мл аммиачного раствора нитрата серебра; появляется желтоватый осадок, который при нагревании на водяной бане темнеет и на стенках пробирки образуется серебряное зеркало.



3.11 Обнаружение имидной группы (барбитал, фенобарбитал) (ГФ Х,с. 525); теобромин (ГФ X, с. 684)

Барбитал и фенобарбитал - производные барбитуровой кислоты:

Теобромин - производное пурина. Пурин-конденсированная гетероциклическая система, состоящая из 2-х циклов: пиримидина и имидазола.

Методика 1. Реакция с солями тяжелых металлов

0,1 г препарата взбалтывают с 1 мл 1% раствора гидроксида натрия в течение 1-2 минут (до слабо-розового окрашивания по фенолфталеину). Полученный раствор разливают в три пробирки и в каждую прибавляют по 23 капли растворов хлорида железа(Ш), нитрата кобальта и сульфата меди.