73

На правах рукописи

МИХАЛЁВ Виталий Иванович

АВТОРЕФЕРАТ

диссертации на соискание учёной степени доктора ветеринарных наук

Послеродовая субинволюция матки у коров,её морфофункциональное состояние и разработка эффективных методов терапии и профилактики

16.00.07 - ветеринарное акушерство и биотехника репродукции животных

16.00.02 - патология, онкология и морфология животных

Воронеж - 2006

1 Общая характеристика работы

Актуальность темы. Обязательным условием интенсивного ведения молочного скотоводства является повышение молочной продуктивности коров и максимальное использование репродуктивного потенциала маточного поголовья, что сдерживается болезнями половых органов, к числу которых относится и субинволюция матки.

Субинволюция матки - заболевание, характеризующееся замедлением процессов обратного её развития после родов до состояния, присущего этому органу у небеременных животных. Особая опасность данной патологии для последующей воспроизводительной функции у коров заключается в том, что на её фоне часто развиваются болезни половых органов воспалительного характера и функциональные расстройства яичников, приводящие к длительному или постоянному бесплодию животных.

Послеродовая субинволюция матки имеет широкое распространение. Так, по данным А. М. Вайнтрауба (1954) субинволюция матки регистрируется у 60,3% отелившихся коров, А. Я. Батракова (1973) - у 80-85%, А. Я. Крохина (1980), Н. И. Полянцева (1986) и А. Г. Нежданова (1987) - у 40-70%, Ф. У. Абдурахмановой (1979) - у 36%, В. Г. Гавриша (1997) - у 35,6%, А. Н. Турченко (1999) - у 30-45%, Р.Г. Кузьмича (2000) - у 30-35% животных.

Причины субинволюции матки у животных разнообразные. Многие авторы непосредственной причиной субинволюции матки у коров считают ослабление ее сократительной функции (гипотония, атония) матки, сопровождающееся слабой ретракцией ее мышц.

Вопросам диагностики, лечения и профилактики послеродовой субинволюции матки у коров уделено большое внимание как отечественных, так и зарубежных авторов (М. К. Криммер, 1942; Н. А. Флегматов, 1952; А. М. Вайнтрауб, 1954; В. В. Шорников, 1964; В. Д. Мисайлов, 1965; И. Я. Мюйрсепп, 1973; Н. И. Полянцев, 1978; В. С. Шипилов и В. А. Чирков, 1987; А. Г. Нежданов, 1987; J. Becze et al., 1979; M. Wandeplassche, Н. Kindahl et al., 1981). Несмотря на это степень распространения данной патологии имеет тенденцию к увеличению.

В связи с этим раскрытие механизмов развития послеродовой субинволюции и на основании этого разработка эффективных методов диагностики, комплексного лечения и профилактики послеродовой субинволюции матки является актуальной и требует всестороннего изучения.

Цель и задачи исследований. Целью данной работы является изучение этиологии послеродовой субинволюции матки у коров, морфофункциональная оценка её состояния и разработка эффективных методов терапии и профилактики. На разрешение поставлены следующие задачи:

1. Изучить причины развития послеродовой субинволюции матки у коров.

2. Определить морфофункциональное состояние матки у коров в динамике (2-3, 6-7 и 10-12 суток после отёла) при нормальном течении инволюционных процессов и её субинволюции.

3. Выяснить степень микробной контаминации матки коров в различные сроки послеродового периода при нормальном течении инволюционных процессов и её субинволюции.

4. Разработать эффективные способы терапии коров с острой послеродовой субинволюцией матки.

5. Разработать эффективные методы профилактики послеродовой субинволюции матки у коров.

Научная новизна. Впервые проведено комплексное изучение острой послеродовой субинволюции матки у коров с использованием клинических, гистерографических, гормональных, гистологических, гематологических, биохимических, иммунобиологических, бактериологических методов исследований. Установлено, что непосредственной причиной развития субинволюции матки у коров является ослабление интенсивности её сокращений в последовую стадию родов и в первые 3 ч после отёла, не обеспечивающее ретракцию мышц матки и нормального течения послеродового периода и показаны причинно-следственные отношения факторов, предрасполагающих к её возникновению.

Определено, что субинволюция матки является патогенетической основой развития острого послеродового эндометрита у коров. При использовании разработанного нами устройства для асептического получения проб содержимого матки (патент РФ на изобретение №2281721) выяснено, что у коров, оставшихся в последующем клинически здоровыми, в первые двое суток она в 90% случаев является свободной от бактерий, в то же время при её субинволюции потенциально-патогенная микрофлора изолируется из матки 88,9% животных. Ослабленная сократительная функция матки, не обеспечивающая достаточную ретракцию мышц, уменьшение размеров шейки матки, формирования в ней защитной слизистой пробки создаёт предпосылки для быстрого проникновения, размножения в ней микрофлоры и развития воспалительного процесса в различных отделах половых органов.

Разработаны эффективные способы лечения коров с субинволюцией матки (патент РФ на изобретение №2266124) с применением двух средств неспецифической общестимулирующей терапии, а также окситоцина на фоне синестрола и препаратов антимикробного действия дифура (патент РФ на изобретение №2259820) и энрофура (патент РФ на изобретение №2275902).

Разработан способ профилактики послеродовой субинволюции матки у коров (патент РФ на изобретение №2268034) с использованием глюкозы, препаратов кальция, простагландина F-2_б и окситоцина.

Дана морфологическая характеристика субинволюции матки у коров через 2-3, 6-7 и 10-11 суток после отёла. Разработанный нами биотом для взятия тканей слизистой и мышечной оболочек матки защищён патентом РФ на изобретение (№2281720).

Практическая значимость. Дана комплексная диагностика субинволюции матки у коров, разработано устройство для взятия тканей стенки матки для гистологических исследований и устройство для асептического получения содержимого матки у коров для проведения бактериологических исследований. Разработаны и предложены производству эффективные способы лечения коров с острой послеродовой субинволюцией, обеспечивающие выздоровление 89,2-96,0% животных в течение 10,8-13,3 суток и наступление оплодотворения через 43,6-59,6 дней после отёла, а также её профилактики, позволяющие предупредить развитие субинволюции матки у 90-95% отелившихся коров с последующим оплодотворением 86,7-100% животных через 39,4-46,1 дней.

Внедрение результатов исследований. Результаты исследований вошли в «Методические указания по диагностике, терапии и профилактике болезней органов размножения у коров и тёлок», одобренные бюро Отделения ветеринарной медицины РАСХН 1 июня 2005 г., в «Методические рекомендации по диагностике, терапии и профилактике субинволюции матки у коров», одобренные секцией патологии, фармакологии и терапии Россельхозакадемии (протокол №1 от 24 марта 2005г).

Апробация результатов исследований. Основные положения диссертационной работы доложены на: международной научно-практической конференции «Актуальные проблемы болезней молодняка в современных условиях» 23-25 сентября, Воронеж, 2002; на международной научно-практической конференции «Свободные радикалы, антиоксиданты и здоровье животных» 21-23 сентября, Воронеж, 2004; на международной научно-практической конференции, посвященной 35-летию организации ВНИВИПФиТ «Актуальные проблемы болезней органов размножения и молочной железы у животных» 5-7 октября, Воронеж, 2005; 1-ой научно-практической конференции «Современная ветеринарная защита коров высокопродуктивных пород» 23-24 июня, Воронеж, 2005; на международной научно-производственной конференции, посвящённой 100-летию со дня рождения проф. Авророва А.А. «Актуальные проблемы ветеринарной патологии и морфологии животных» 22-23 июня, Воронеж, 2006.

Публикации. По материалам диссертации опубликовано 36 работ.

Объём и структура диссертации. Материалы диссертации изложены на 310 страницах текста в компьютерном исполнении, включает обзор литературы, материал и методы исследований, результаты собственных исследований и их анализ, выводы, практические предложения, список литературы, содержащий 412 источников, в том числе 98 зарубежных авторов. Диссертация содержит 33 таблицы и 71 рисунок.

2 Материал и методы исследований

Работа выполнена в 1998-2006 гг. в отделах патологии размножения и молочной железы у сельскохозяйственных животных и патологической морфологии, а также в других подразделениях института.

Клинические и лабораторные исследования по теме диссертации проведены в соответствии с планом научно-исследовательских работ Всероссийского НИВИ патологии, фармакологии и терапии по заданию 04.01:03: «Изучение этиологии и патогенеза субклинического мастита у супоросных свиноматок и сухостойных коров, субинволюции матки у коров и разработка методов их диагностики, терапии и профилактики», номер государственной регистрации 01.200.117018.

Для изучения степени распространения и форм проявления острой послеродовой субинволюции матки у коров проведено клиническое обследование 3952 отелившихся коров 23 хозяйств Белгородской, Воронежской, Волгоградской, Липецкой и Орловской областей. Диагноз на послеродовую субинволюцию матки у коров устанавливали в соответствии с «Методическими указаниями по диагностике, терапии и профилактике болезней органов размножения у коров и тёлок», утверждённых Департаментом ветеринарии №13-5-2/2057 от 04.07.2000 г. (М., 2000).

Сократительная функция матки у коров изучена с использованием метода внутренней гистерографии в последовую стадию родов (через 1,5-2,0 ч после рождения телёнка) и через 0,5; 3, 6, 9, 12, 18, 24, 36, 48, 72, 96 и 120 ч после отделения последа при нормальном течении родов и послеродового периода (n=10) и при субинволюции матки (n=15), из которых у 7 животных она развилась после задержания последа. У них гистерография проводилась через 24, 48, 72 и 96 ч после рождения телёнка.

Содержание половых стероидов (прогестерона и эстрадиола-17в) определено в крови 20 коров за 30-35 дней, 7-8 суток, 24-48 ч до отёла и во время родов (стадия выведения плода) методом иммуноферментного анализа (ИФА) с использованием иммуноферментных наборов фирмы «Diagnostic System Laboratories» с последующим ретроспективным анализом результатов исследований с учётом всех случаев задержания последа и субинволюции матки.

Для проведения гематологических, биохимических и иммунобиологических исследований взяты пробы крови от коров за 30-35 (n=29) и 5-7 дней (n=29) до родов с последующей ретроспективной оценкой состояния животных, через 2-3 (n=20) и 6-7 (n=20) суток после отёла при различном характере течения послеродового периода, а также в начале и в конце курса лечения больных (n=39). Гематологические исследования проведены по общепринятым методам, биохимические - в соответствии с «Методическими указаниями по применению унифицированных биохимических методов исследований, крови, мочи и молока в ветеринарных лабораториях» (М., 1981), бактерицидную активность сыворотки крови определяли по О.В. Смирновой и Т.А. Кузьминой (1966), лизоцимную - по К. Кагромановой, З.В. Ермольевой (1966), комплементарную - по Г.Ф. Вагнеру (1963), фагоцитарную активность лейкоцитов - с антигеном Staph. aureus по В.С. Гостеву (1950).

Показатели системы перекисного окисления липидов и антиоксидантной защиты определены за 5-7 суток до родов (n=30) совместно с сотрудниками отдела клинической биохимии института в соответствии с «Методическим пособием по изучению процессов перекисного окисления липидов и системы антиоксидантной защиты организма у животных» (Воронеж, 1997).

Для изучения микробного пейзажа матки коров взяты пробы её содержимого через 1-2 (n=19) и 6-7 (n=20) суток после отёла при нормальном течении инволюционных процессов и её субинволюции с использованием разработанного нами устройства (патент РФ на изобретение №2281721). Бактериологические исследования проведены совместно с сотрудниками отдела микробиологии, вирусологии и иммунологии института с использованием общепринятых методов.

Гистологические и гистохимические исследования выполнены в отделе патологической морфологии института в соответствии с «Методами морфологических исследований» (Воронеж, 2000), а морфометрические - по Г.Г. Автандилову (1990). Материалом для гистологических исследований служили образцы стенки матки клинически здоровых коров (n=30), больных острой субинволюцией матки (n=30) через 2-3, 6-7 и 10-11 суток после отёла и в конце курса лечения больных коров (n=25), взятые с помощью разработанного нами биотома для биопсии слизистой и мышечной оболочек матки (патент РФ на изобретение №2281720). Биоптат фиксировали в 10% растворе нейтрального формалина и жидкости Карнуа, обезвоживали в спиртах, хлороформе, заливали в парафин, готовили срезы на микротоме МПС-2 толщиной 5-7 мкм, депарафинировали и окрашивали гематоксилин-эозином, по Ван-Гизон и толлуидиновым синим.

Опыт по определению эффективности способов терапии коров с острой послеродовой субинволюции матки проведён на 72 животных, разделённых по принципу аналогов на 3 группы. Животным всех опытных групп внутримышечно дважды с 24-часовым интервалом вводили 2% раствор синестрола в дозе 0,4 мл/100 кг массы тела, а начиная через одни сутки после первичного введения синестрола в течение 4 дней инъецировали окситоцин в дозе 8-10 ЕД/100 кг по 1 разу в день. Кроме того, всем коровам на 5 сутки курса лечения однократно внутриматочно вводили дифур или энрофур в дозе 30 мл/100 кг массы тела. Помимо этого в качестве средства общестимулирующей неспецифической терапии коровам первой группы (n=24) подкожно вводили препарат плаценты денатурированной эмульгированной (ПДЭ) в первый, пятый и девятый дни лечения в дозе 5 мл/100 кг массы тела, второй группы (n=25) - подкожно ПДЭ в первый, пятый и девятый дни курса лечения в дозе 5 мл/100 кг массы тела, а также 7% стерильный ихтиол, приготовленный на 0,85% растворе натрия хлорида подкожно трёхкратно с 48-часовым интервалом, начиная с первого дня лечения в дозе 5, 6 и 7 мл/100 кг массы тела, а коровам третьей группы (базовый вариант, n=23) - подкожно 7% стерильный раствор ихтиола шестикратно с 48-часовым интервалом в дозе 4, 5, 6, 7, 6 и 5 мл/100 кг массы тела, начиная с первого дня лечения.

Эффективность лечения учитывали по срокам выздоровления больных коров, количеству выздоровевших и оплодотворившихся животных, продолжительности периода от отёла до оплодотворения и коэффициенту оплодотворения.

Производственные испытания эффективности способов терапии коров с острой послеродовой субинволюцией матки проведены на 197 больных коровах красно-пёстрой породы с массой тела 500-580 кг и продуктивностью 6000 кг молока в год, разделённых по принципу аналогов на 3 группы. Коровам первой группы (n=65) вводили ПДЭ, синестрол, окситоцин и дифур или энрофур, второй (n=69) ПДЭ, 7% раствор ихтиола, синестрол, окситоцин и дифур или энрофур и третьей (базовый вариант, n=63) - шестикратно 7% раствор ихтиола в повышающе-понижающихся дозах, а также окситоцин, синестрол, дифур или энрофур. Дозы и кратность введения препаратов такие же, как и при изучении эффективности способов терапии коров с субинволюцией матки в опытных условиях.

Дифур и энрофур, являющиеся препаратами антимикробного действия, разработаны нами совместно с другими сотрудниками института, а также ЗАО НПП «Агрофарм» и защищены патентами РФ на изобретения (№2259820 и №.2275902).

Для изучения эффективности методов профилактики острой послеродовой субинволюции матки проведены 2 опыта. Первый опыт проведён на 45 коровах. В рацион опытных животных за 2 месяца до предполагаемого отёла введён трикальцийфосфат и премикс, содержащий недостающие микроэлементы и витамины в дозе 20 г/100 кг массы тела. Кроме того, им инъецировали 0,5% раствор селенита натрия в дозе 2 мл/100 кг массы тела. В начале и в конце опыта (перед отёлом) от 10 коров взяты пробы крови для проведения гематологических, биохимических и иммунобиологических исследований, оценки системы перекисного окисления липидов и антиоксидантной защиты, а также учтены все случаи задержания последа, послеродовой субинволюции матки и острого послеродового эндометрита.

Второй опыт, предусматривающий разработку комплексных способов профилактики послеродовой субинволюции матки с использованием специальных ветеринарных мероприятий, проведён на 95 коровах. Животные через 1 час после рождения телёнка разделены по принципу аналогов на 5 групп. Коровам первой группы (n=18) внутримышечно вводили окситоцин в дозе 6 ЕД/100 кг массы тела через 1 и 4 ч после рождения телёнка, второй группы (n=19) через 1 ч после рождения телёнка внутримышечно вводили препарат простагландина F-2_б магэстрофан в дозе 2 мл и окситоцин по той же схеме, что и животным первой группы, третьей группы (n=20) инъецировали магэстрофан в дозе 2 мл внутримышечно через 1 ч после рождения телёнка и окситоцин по той же схеме как и животным первой группы, а также внутривенно вводили 40% раствор глюкозы в дозе 150 мл и 10% раствор кальция хлорида в дозе 100 мл, четвёртой группы (n=18) через 12 и 72 ч после окончания родов подкожно вводили ПДЭ в дозе 5 мл/100 кг массы тела. Животные пятой группы (n=20) служили в качестве отрицательного контроля, им препараты не вводили.

Производственные испытания способов профилактики послеродовой субинволюции матки проведены на 90 коровах чёрно-пёстрой породы с молочной продуктивностью 5500 кг молока в год, разделённых по принципу аналогов на три группы. Животным первой группы (n=30) инъецировали окситоцин, магэстрофан, глюкозу и хлористый кальций, второй (базовый вариант, n=30) - окситоцин в тех же дозах и в те же сроки, что и при изучении эффективности способов профилактики в опытных условиях. Животные третьей группы (n=30) служили в качестве отрицательного контроля и им препараты не назначали.

Гематологические, биохимические, иммунобиологические и бактериологические исследования проведены совместно с сотрудниками других подразделений института, за что автор выражает им свою признательность и благодарность.

Полученный цифровой материал подвергали математической обработке с помощью программы ExStat на ЭВМ РС АМD K7-800 Athlon.

Экономическую эффективность лечебно-профилактических мероприятий оценивали по «Методике определения экономической эффективности ветеринарных мероприятий» (М., 1997) и «Методике определения экономической эффективности использования в сельском хозяйстве результатов научно-исследовательских и опытно-конструкторских работ, новой техники, изобретений и рационализаторских предложений» (М., 1980).

3 Результаты собственных исследований

3.1 Степень распространения и формы проявления послеродовой субинволюции матки у коров

Установлено, что из обследованных 3952 отелившихся коров острая послеродовая субинволюция матки диагностирована у 2282 коров, что составляет 57,7%.

При этом необходимо отметить, что заболеваемость коров после отёла субинволюцией матки находится в зависимости от их молочной продуктивности. При удое 3000-3500 кг молока заболеваемость коров послеродовой субинволюцией матки составляет 31,6-36,2%, 4000-4500 - 41,3-45,9%, 5000-5500 - 59,5-71,8% и свыше 6000 кг - 75,6-84,4%.

Первичная субинволюция матки у коров как самостоятельное заболевание установлена в 74,3%, а вторичная, развившаяся после родовспоможения, задержания последа - в 25,7% случаев. По степени тяжести на долю тяжёлой формы субинволюции матки, проявляющейся выделением значительного количества жидких кровянистых лохий в первые сутки после отёла, сохранением вибрации средней маточной артерии на стороне рога, служившего плодовместилищем, до 6-7 суток после родов, обильным выделением на 5-7 сутки жидких лохий грязно-серого цвета с примесью крошковатой массы распадающихся карункулов или их кусков при существенном увеличении размеров матки и её атонии, а также при наличии лёгкого угнетения животных и снижении молочной продуктивности, приходится 12,3% к числу заболевших.

При отсутствии своевременной диагностики и надлежащего лечения острая послеродовая субинволюция матки у коров в 47,2% случаев принимает подострое течение, а в 52,8% случаев - осложняется развитием острого послеродового эндометрита.

Результаты исследований показали, что острая послеродовая субинволюция матки имеет широкое распространение, регистрируется у 57,7% отелившихся коров и находится в зависимости от их молочной продуктивности. Определено, что на первичную субинволюцию матки приходится 74,3%, а на вторичную - 25,7% случаев. Кроме того, в 12,3% случаев субинволюция матки протекает в тяжёлой форме. Особая опасность субинволюции матки у коров заключается в том, что при отсутствии или малоэффективном лечении в 52,8% случаев на её фоне развивается острый послеродовой, преимущественно катарально-гнойный, эндометрит.

3.2 Этиология острой послеродовой субинволюции матки у коров

3.2.1 Сократительная функция матки у коров во время и после родов

Сократительная функция матки у коров изучена во время последовой стадии родов (через 1,5-2,0 ч после рождения телёнка), а также через 0,5; 3, 6, 9, 12, 18, 24, 36, 48, 72, 96 и 120 ч после отделения последа при нормальном течении родов и послеродового периода и при развитии субинволюции матки.

Показатели сократительной функции матки коров, оставшихся клинически здоровыми и с её субинволюцией в разные сроки исследований представлены в таблице 1, а контракционный индекс (КИ), подсчитанный планиметрическим методом и являющийся интегрированным показателем интенсивности сократительной функции матки представлен графически (рис. 1).

Установлено, что в последовую стадию родов (через 1,5-2 ч после рождения телёнка) сократительная функция матки у коров, оставшихся клинически здоровыми характеризуется наличием ритмичных сокращений с амплитудой 28,9+0,73 мм ртутного столба и продолжительностью 2,86+0,05 мин. Контракционный индекс составляет 144,7+3,27 мм²/мин. У коров, у которых в последующем развилась субинволюция матки, амплитуда, продолжительность сокращений и контракционный индекс составляют соответственно 17,9+0,64 мм, 1,86+0,04 мин и 52,7+2,35 мм²/мин, что в 1,61, 1,54 и 2,75 раза меньше, чем у животных, оставшихся клинически здоровыми.

Максимальной интенсивности сократительная функция матки у коров, как с нормальным течением послеродового периода, так и с субинволюцией матки достигает через 0,5 ч после отделения последа. Амплитуда сокращений у них составляет соответственно 39,5+0,54 и 17,1+0,53 мм рт. ст., их продолжительность - 3,25+0,04 и 1,99+0,05 мин и контракционный индекс - 175,6+2,96 и 97,1+2,87 мм²/мин, что свидетельствует о том, что у коров с развившейся в последующем субинволюцией матки эти показатели оказались меньше, чем у оставшихся клинически здоровыми соответственно в 2,31; 1,63 и 1,81 раза.

Таблица-1. Показатели сократительной функции матки коров при различном характере течения родов и послеродового периода

Содержание прогестерона и эстрадиола-17Я в крови 20 коров определяли за 30-35, 7-8, 1-2 суток до отёла и во время родов (стадия выведения плода) с использованием метода иммуноферментного анализа (ИФА) с последующей ретроспективной оценкой результатов исследований в зависимости от клинического состояния животных..

Установлено (табл. 3), что концентрация прогестерона в крови за 30-35 дней до отёла была наибольшей (3,52+0,14 нг/мл) у коров, у которых в последующем развилась первичная субинволюция матки, что на 16,2% (Р<0,02) выше, чем у животных с нормальным течением послеродового периода и на 30,9% (Р<0,002) больше, чем у животных с вторичной (после задержания последа) субинволюцией матки. За 7-8 суток до отёла у коров, у которых в последующем развилась первичная субинволюция матки, содержание прогестерона оказалось в 1,56 (Р<0,001) раза выше, чем у которых развилась вторичная субинволюция и в 1,79 (Р<0,001) раза больше, чем у оставшихся клинически здоровых.

За 1-2 суток до отёла наибольшая концентрация прогестерона установлена у коров с задержанием последа и вторичной субинволюцией матки, составив 1,26+0,08 нг/мл, что соответственно в 1,21 (Р<0,05) раза выше, чем у животных с первичной субинволюцией и в 1,43 (Р<0,002) раза, чем у клинически здоровых. Во время родов у них содержание прогестерона выше соответственно в 1,23 (Р<0,05) и 1,41 (Р<0,01) раза.

Содержание эстрадиола-17в за 30-35, 7-8 дней, 1-2 суток до отёла и во время родов в крови коров, у которых послеродовой период протекал без осложнений составил соответственно 123,8+14,5, 372,7+18,7, 516,4+54,2 и 782,2+35,9 пг/мл, что выше соответственно в 1,57 (Р<0,02), 1,81 (Р<0,002), 1,59 (Р<0,02) и 1,79 (Р<0,001) раза, чем у коров, у которых после отёла развилась вторичная субинволюция и в 1,55 (Р<0,02), 1,59 (Р<0,001), 1,67 (Р<0,01) и 2,04 (Р<0,001) раза, чем у животных с первичной субинволюцией матки.

Отношение прогестерона к эстрадиолу-17в за 30-35 и 7-8 дней до отёла у коров с первичной субинволюцией матки составляет 44,16 и 12,44, что выше в 1,29 и 1,36 раза, чем у коров с вторичной субинволюцией и в 1,81 и 2,85 раза, чем у животных с нормальным течением послеродового периода. За 24-48 ч до отёла и во время родов наивысшее прогестерон-эстрадиоловое отношение установлено у коров с задержанием последа и развившейся в последующем вторичной субинволюцией матки, составив соответственно 3,89 и 2,68, что выше на 15,4 и 8,1%, чем у коров, у которых развилась первичная субинволюция матки и в 2,72 и 2,53 раза, чем у коров с нормальным течением послеродового периода.

Нами также установлено, что между содержанием половых стероидов и заболеваемостью коров послеродовой субинволюцией матки имеется достоверная коррелятивная связь: по прогестерону r= +0,79 - +0,89 (Р<0,05-0,001), по эстрадиолу-17в r= -0,76 - -0,91 (Р<0,02-0,001).

Таблица-3. Содержание прогестерона и эстрадиола-17 в крови коров в последний месяц беременности и во время родов

Примечание: числитель - содержание прогестерона, знаменатель - содержание эстрадиола-17

Таким образом, у коров, у которых в последующем развилась первичная субинволюция матки в последний месяц беременности и во время родов было достоверно более высокое содержание в крови прогестерона, оказывающего угнетающее влияние на сократительную функцию матки животных (прогестероновый блок по S. Scapo, 1956) при низком уровне эстрадиола-17в. В то же время у коров с задержанием последа более высокая концентрация прогестерона установлена за одни-двое суток до отёла и во время родов.

3.2.3 Микробная контаминация матки коров при нормальном течении послеродового периода и её субинволюции

Бактериологическими исследованиями проб содержимого матки, взятых с использованием разработанного нами устройства, установлено, что в первые двое суток матка коров с нормальным течением послеродового периода в 90,0% случаев является свободной от бактерий (табл. 4). Через 6-7 дней после отёла микрофлора в маточном содержимом в 60,0% случаев отсутствовала, а в 40,0% случаев выделяли Staph. еpidermidis и Staph. аureus.

При острой субинволюции матки микрофлора выделена в 88,9% случаев на вторые сутки после отёла и в 100% - через 6-7 дней после родов. Если через 2 суток после отёла выделялся преимущественно Staph. еpidermidis и Str. pyogenes, то через 6-7 дней после родов, кроме того, изолированы Staph. аureus и E. coli сероваров О 126 и О 139.

При этом из содержимого от клинически здоровых коров Staph. еpidermidis изолирован в 50,0%, Staph. аureus - в 37,5% и Bac. subtilis - 12,5% случаев, в то время как при развитии острой послеродовой субинволюции матки - Staph. еpidermidis выделен в 41,2% случаев, Str. pyogenes - 32,4%, Staph. аureus - в 17,6% и E. coli - в 8,8%.

Таблица-4. Микробная контаминация матки коров в различные сроки после отёла

Установлено, что в первые двое суток после родов матка коров с нормальным течением послеродового периода в 90% случаев является свободной от бактерий, тогда как при развитии субинволюции она на вторые сутки после отёла контаминирована бактериями в 88,9%, а на 6-7 день - в 100% случаев.

Отсутствие в 90% случаев бактериальной микрофлоры в матке коров с нормальным течением послеродового периода в первые двое суток после отёла установлено при использовании разработанного нами устройства для асептического взятия проб маточного содержимого (патент РФ на изобретение №2281721). Без применения данного устройства в 85-93% случаев в первые двое суток из матки коров была изолирована разнообразная микрофлора.

3.2.4 Гематологические, биохимические и иммунобиологические показатели крови коров за 30-35 и 5-7 суток до отёла при нормальном течении послеродового периода и с острой послеродовой субинволюцией матки

Для определения роли нарушений гематологического, биохимического и иммунобиологического статуса коров в этиологии острой послеродовой субинволюции матки проведены исследования крови за 30-35 и 5-7 дней до отёла с ретроспективным анализом их результатов.

При исследовании крови коров за 30-35 дней до отёла не установлено существенных различий между группами животных по показателям гематологического статуса, причём они были вполне удовлетворительными. Так, содержание эритроцитов было 5,19+0,26 - 5,48+0,45х10¹²/л, гемоглобина - 111,7+1,90 - 113,6+3,74 г/л, гематокрит - 34,4+0,89 - 35,8+1,33%. Не было также значительной разницы по содержанию общего белка (78,2+1,15 - 79,9+1,05 г/л), общих липидов (3,16+0,11 - 3,29+0,18 г/л), витамина А (67,7+5,75 - 70,1+4,44 мкг%), витамина Е (1,05+0,08 - 1,07+0,07 мг%). В то же время у животных, у которых в последующем развилась субинволюция матки было достоверно ниже (на 6,9%; Р<0,05) содержание общего кальция в сыворотке крови при повышении у них уровня неорганического фосфора на 17,5% (Р<0,01), в связи с чем кальциево-фосфорное отношение у них было ниже на 18,4% (1,51:1 в сравнении с 1,85:1 у животных, оставшихся клинически здоровыми), что свидетельствует о наличии у коров нарушений кальциево-фосфорного обмена, что подтверждается повышенной активностью (на 33,3%; Р<0,05) щелочной фосфатазы.

Кроме того, у коров, заболевших субинволюцией матки, повышена (на 15,1%; Р<0,001) активность фермента переаминирования - аспартатаминотрансферазы, что в сочетании с повышенной активностью щелочной фосфатазы свидетельствует о функциональных нарушениях печени. У них также более низкое содержание в крови меди (на 17,2%; Р<0,05) и связанного с белком йода (на 20,5%; Р<0,05).

Исследованиями также установлено снижение у заболевших животных ряда показателей гуморальной и клеточной защиты организма. Так, у них по сравнению с животными, оставшимися после отёла клинически здоровыми, бактерицидная активность сыворотки крови ниже на 15,1% (Р<0,01), комплементарная активность - на 10,9%, фагоцитарная активность лейкоцитов - на 17,0% (Р<0,001), фагоцитарное число - на 16,7% (Р<0,01) и фагоцитарный индекс - на 30,8% (Р<0,002).

Результаты исследований крови коров за 5-7 суток до отёла, у которых в последующем развилась субинволюция матки, свидетельствуют о том, что у них по сравнению с животными, оставшимися клинически здоровыми, были ниже показатели содержания общего белка - на 13,6% (Р<0,002), мочевины - на 12,2%, общих липидов - на 4,9%, глюкозы - на 11,7% (Р<0,05), меди - на 30,5% (Р<0,001), цинка - на 8,2%. Несмотря на то, что содержание общего кальция в крови коров, заболевших после отёла субинволюцией матки, ниже только на 6,5%, но из-за более высокого уровня неорганического фосфора, их соотношение составило всего лишь 1,55:1, а у оставшихся клинически здоровыми - 1,85:1. Это свидетельствует о нарушении кальциево-фосфорного обмена и наличии у них процессов остеодистрофии, что подтверждается и повышенной (на 33,8%; Р<0,05) активностью щелочной фосфатазы. У этих же животных повышена (на 21,4%) активность аспартатаминотрансферазы, на 39,2% (Р<0,001) увеличено содержание малонового диальдегида, являющегося наиболее токсичным продуктом перекисного окисления липидов.

У них также снижена (на 10,9%; Р<0,05) бактерицидная активность сыворотки крови, являющаяся интегрированным показателем гуморальной защиты животных, на 8,8% - фагоцитарная активность лейкоцитов, на 18,5% (Р<0,02) - фагоцитарное число и на 25,7% (Р<0,001) - фагоцитарный индекс, что свидетельствует о снижении и клеточной защиты организма.

Результаты исследований свидетельствуют о том, что у коров с субинволюцией матки перед родами наблюдаются нарушения обмена веществ, характеризующиеся достоверным снижением в крови (сыворотке) общего белка, глюкозы, меди, наличием остеодистрофии и функциональных нарушений печени, повышением уровня малонового диальдегида, а также более низкими показателями гуморальной и клеточной защиты организма животных.

Результаты проведённых исследований по изучению этиологии острой послеродовой субинволюции матки у коров показали, что непосредственной причиной её развития является ослабление маточной активности в последовую стадию родов и в первые 3 ч послеродового периода. Между интенсивностью сокращений матки, выраженной контракционным индексом и заболеваемостью коров субинволюцией установлена достоверная коррелятивная связь. При этом у коров с субинволюцией матки в течение последнего месяца стельности и во время родов достоверно повышалась концентрация в крови прогестерона, оказывающего тормозящее влияние на сократительную функцию матки животных и снижался уровень эстрадиола-17Я, наоборот, оказывающего стимулирующее влияние на моторику матки животных.

Выяснено, что у коров с субинволюцией матки имелся ряд нарушений обмена веществ, что не могло не сказаться на синтезе половых стероидов и показателях общей неспецифической резистентности животных.

Всё это свидетельствует о наличии сложных причинно-следственных отношений, обусловливающих развитие острой послеродовой субинволюции матки у коров.

3.3 Клинико-морфологическая характеристика острой послеродовой субинволюции матки у коров

3.3.1 Клиническая характеристика острой субинволюции матки у коров

При клиническом исследовании 145 коров ООО «Воронежпищепродук» установлено, что острая послеродовая субинволюция матки регистрируется у 45,5% отелившихся коров. При этом на долю первичной субинволюции приходится 71,1% случаев и вторичной - 28,9%. Кроме того, у 10,3% субинволюция протекает в тяжёлой форме. При развитии лёгкой формы первичной субинволюции матки температура тела составила 38,6+0,82^єС, частота пульса - 78,4+5,93/мин, дыхания 14,9+1,26/мин и руминации 4,75+0,39/5 мин, т.е. находились в пределах физиологических величин. В то же время при тяжёлой форме субинволюции матки эти показатели были несколько выше и составили соответственно 39,2+1,06; 85,9+6,12; 18,2+1,34 и 3,53+0,28. Кроме того, у 17,3% наблюдалось лёгкое угнетение и у 14,5% - снижение аппетита.

Установлено, что у коров с острой послеродовой субинволюцией матки в 2,37 раза (Р0,001) продолжительнее вибрация средней маточной артерии, чем у животных с нормальным течением послеродового периода, в 1,93 раза (Р0,001) позднее уплотняются крестцово-седалищные связки, существенно различаются характер и количество выделяемых из половых путей лохий, позднее на 9,6 дней (Р0,001) прекращается их выделение и завершаются инволюционные процессы (табл. 5).

Таблица-5. Показатели инволюции половых органов коров при различном характере течения послеродового периода

Критериями завершения инволюции матки служили: уменьшение её размеров, когда она свободно захватывается кистью руки, находится в тазовой полости, рога её относительно симметричны, упруго-эластичной консистенции и реагируют на массаж. Влагалищная часть шейки матки уменьшена в размере, оформлена в виде розетки, выступает в полость влагалища на 2,0-2,5 см, отёчность складок отсутствует. Слизистая оболочка влагалища бледно-розового цвета, гладкая, блестящая, умеренно увлажнена, выделение слизистого секрета из канала шейки матки прекращается

При ректальном исследовании клинически здоровых коров через 2-3 суток после отёла на поверхности матки выявляется выраженная поперечная и продольная складчатость, при массаже она становится бугристой, плотной «каменистой» консистенции, в то время как при субинволюции матка слабо реагирует на массаж и складчатость её поверхности незначительная.

В первые двое суток после родов у 82,4% животных, у которых в дальнейшем развилась острая субинволюция матки, отмечено обильное выделение жидких кровянистых лохий, при этом слизистая пробка в канале шейки матки у 88,2% животных отсутствовала. При нормальном течении послеродового периода на вторые сутки после отёла у 47,1% животных отсутствовало выделение каких-либо лохий, а у 42,9% они представлены небольшим количеством густой мутной тягучей слизи желтовато-белого или светло-коричневого цвета, находящейся как в полости влагалища, так и в канале шейки матки, образуя слизистую пробку, являющуюся своеобразным защитным механизмом, препятствующим проникновение микрофлоры в её полость.

При ректальном исследовании коров на 6-7 сутки после родов у больных животных матка имеет значительно большие размеры, не обхватывается рукой, не реагирует на массаж и имеет мягко-эластичную консистенцию. После массажа матки из половых органов выделяются лохии жидкой консистенции грязно-серого цвета с примесью крошковатой массы распадающихся карункулов или кусков карункулов, соединённых между собой участком сосудистой оболочки плода (при вторичной субинволюции матки). При нормальном течении послеродового периода лохии представляют собой густую гомогенную массу с примесью слизи красно-бурого цвета.