Иммунные сыворотки

1. Определение

СЫВОРОТКА ИММУННАЯ, АНТИСЫВОРОТКА (antiserum, множ. antisera) - сыворотка, содержащая в своем составе антитела против определенных антигенов; может вводиться больному в лечебных целях или в качестве временной защиты (для создания пассивного иммунитета) от различных заболеваний. Для приготовления иммунной сыворотки в больших количествах используется биологический материал, взятый у лошадей. В лабораторных условиях иммунная сыворотка применяется для идентификации неизвестных ранее болезнетворных микроорганизмов.

2. Применение

Применяемые с лечебной целью специфические антитела выпускаются промышленностью в виде иммунных сывороток или активных в иммунном отношении фракций -- иммуноглобулинов. Их готовят из крови людей (гомологичные) или животных (гетерологичные). Гомологичные иммунные препараты обладают определенным преимуществом перед гетерологичными в связи со сравнительно большой продолжительностью (до 1-2 мес.) их циркуляции в организме и отсутствием у них побочных эффектов. Сыворотки и иммуноглобулины, изготовленные из крови животных, действуют сравнительно недолго (1--2 нед) и способны вызывать побочные реакции. Их можно применять только после проверки чувствительности организма больного с помощью внутрикожной пробы с разведенными препаратами. Сыворотку назначают при отрицательной пробе после предварительной десенсибилизации организма, осуществляемой путем последовательного подкожного (с интервалом в 30--60 мин) введения небольших порций этого вещества. Затем внутримышечно применяется вся доза лечебной сыворотки. При отдельных формах экзотоксических инфекций (токсическая дифтерия зева) 1/2--1/3 часть препарата при первом его введении может применяться внутривенно.

При положительной пробе на чувствительность к чужеродному белку гетерологичные препараты вводятся под наркозом или под прикрытием больших доз глюкокортикоидов.

Введение гетерологичных сывороток во всех случаях проводят после постановки больному капельницы (на фоне капельного введения кристаллоидных растворов). Эта процедура позволяет немедленно начинать оказывать неотложную помощь в случае развития неотложных состояний, связанных с применением чужеродного белка.

Эффективность иммунных сывороток (иммуноглобулинов) в значительной мере определяется оптимальной их дозой и своевременностью применения. Доза препарата должна соответствовать клинической форме инфекционного процесса и быть способной нейтрализовать не только циркулирующие в данный момент в организме антигены возбудителей заболевания, но и те, которые могут появиться в нем в промежуток времени между введениями препарата. Антимикробный и клинический эффект иммунных сывороток (иммуноглобулинов) тем выше, чем раньше они применяются. Назначение их после 4--5-го дня болезни редко дает выраженный положительный результат.

В настоящее время микробиологическая промышленность России и других стран производит иммунные сыворотки и иммуноглобулины для лечения больных различными инфекционными заболеваниями. Это предусмотрено в отношении возбудителей тех болезней, в патогенезе которых первостепенное значение играют экзотоксины (дифтерия, ботулизм, столбняк и др.), а также ряда опасных для здоровья людей болезней -- стафилококковой инфекции, сибирской язвы, лептоспироза, гриппа, бешенства, клещевого энцефалита.

Дифтерия.

Для лечения больных дифтерией в нашей стране выпускается очищенная и концентрированная методом «Диаферм-3» противодифтерийная сыворотка.

В ряде стран Европы и в США для этих целей производится также человеческий противодифтерийный гамма- глобулин.

Сыворотку получают из крови гипериммунизированных дифтерийным анатоксином лошадей. Ее доза и методика введения определяются клинической формой заболевания.

Основным препаратом иммунотерапии больных ботулизмом является противоботулиническая лошадиная очищенная и концентрированная сыворотка типов А, В, С, Е и F. Для людей, имеющих аллергию к чужеродному белку (положительная проба на внутрикожное введение раствора сыворотки), может быть использован поливалентный противоботулинический гамма-глобулин отечественного производства, приготовленный из крови доноров, иммунизированных ботулоанатоксинами типов А, В и Е. В 1-й ампуле содержится одна лечебная доза препарата. Противоботулиническая сыворотка выпускается в виде комплектов моновалентных (в упаковке находится по одной ампуле сыворотки каждого типа) или поливалентных (в одной ампуле -- антитоксины 3, 4 или 5 типов). В ампуле с моновалентной сывороткой содержится одна лечебная доза антитоксических тел соответствующего типа (для типа А -- 10 000 ME, типа В - 5000 ME, типа С - 10 000 ME, типа Е - 10 000 ME, типа F - 300 ME). В каждой ампуле с поливалентной сывороткой находится то же количество антител против всех пяти или трех типов ботулотоксина (антитоксины типов С и F, в связи с ограниченной потребностью в них, обычно в комплект не включаются).

Лечение больных ботулизмом, когда неизвестен тип токсина, вызвавшего заболевание, начинается с применения поливалентного препарата или смеси моновалентных сывороток. Их вводят внутривенно. При затруднениях внутривенного применения сыворотки ее назначают внутримышечно. Обычно вводят 1 -- 1,5 лечебной дозы препарата. При тяжелом течении заболевания сыворотки применяют повторно (1--4 раза) с интервалом в 6--8 часов в 1,5 раза большей дозе, чем при среднетяжелой форме болезни. Повторное введение осуществляется внутримышечно. Если в ранние сроки заболевания установлен тип возбудителя ботулизма, лечение больных осуществляют моновалентной сывороткой.

Продолжительность курса серотерапии определяется клинической формой заболевания и динамикой исчезновения неврологических, сердечно-сосудистых и других нарушений. При легкой форме патологического процесса она, как правило, не превышает 2 сут, а при тяжелой -- 4--5 суток.

Столбняк.

Для лечения больных столбняком предназначена противостолбнячная очищенная и концентрированная лошадиная сыворотка, а также человеческий противостолбнячный гамма-глобулин.

Сыворотку получают из крови лошадей, иммунизированных столбнячным анатоксином. Ее применяют больным столбняком внутримышечно по 100-200 тыс. ME (в зависимости от тяжести состояния больного). Одновременно с этим 5-10 тыс. ME препарата вводят в ткани, окружающие рану.

При аллергии организма больного к чужеродному белку целесообразно вместо сыворотки применять специфический гамма-глобулин, приготовленный из крови доноров, иммунизированных столбнячным анатоксином. Препарат назначается с лечебной целью однократно в дозе 6--12 мл внутримышечно.

Стафилококковая инфекция.

При стафилококковой инфекции (стафилококковом сепсисе, стафилококковой пневмонии и др.) основным эффективным средством лечения больных являются препараты, содержащие специфические антитела -- противостафилококковый иммуноглобулин, противостафилококковая плазма, а также производимый в некоторых странах ближнего зарубежья (Грузия) гетерогенный иммуноглобулин.

Противостафилококковый иммуноглобулин готовят из крови доноров, иммунизированных стафилококковым анатоксином. Препарат выпускают в ампулах по 3--5 мл, в которых содержится 100 ME специфических антител. Разовая (она же суточная) доза противостафилококкового иммуноглобулина при остром стафилококковом сепсисе должна составлять 10 МЕ/кг массы тела (следовательно, для больного массой 70 кг она равна количеству препарата, содержащегося в 7 ампулах). Курс лечения при стафилококковом сепсисе должен продолжаться 8--10 сут, при стафилококковой пневмонии 3--5 сут, при стафилококковом остеомиелите 5-8 сут и более. В связи с вязкой консистенцией противостафилококкового иммуноглобулина следует его набирать и вводить с помощью толстой иглы.

Противостафилококковая плазма является жидкой частью крови людей, иммунизированных стафилококковым анатоксином. Содержащийся в ней антитоксин (антитела) оказывает выраженный терапевтический эффект при заболеваниях стафилококковой этиологии -- сепсисе, пневмонии, остеомиелите, перитоните, а также при локализованных гнойных процессах. В 1 мл плазмы содержится не менее 6 ME антитоксина.

Противостафилококковая плазма выпускается в замороженном состоянии (в стерильных пластиковых мешках емкостью от 10 до 250 мл) и в высушенном виде (в герметических стеклянных флаконах объемом 250 мл по 125 мл препарата -- для внутривенного введения и во флаконах емкостью 10 мл по 2 мл препарата -- для местного применения). Замороженную плазму перед употреблением оттаивают в подогретой до 37,0°С воде. Появляющиеся при этом хлопья вскоре растворяются, и плазма становится прозрачной. Появление на дне мешка с плазмой тонкого слоя осадка белого цвета не является противопоказанием для ее использования. Обязательным условием в этом случае является применение системы для переливания лечебных растворов, имеющей фильтр. Помутнение плазмы, наличие в ней грубого осадка, хлопьев, пленок -- свидетельство инфицированности ее и негодности для применения в лечебных целях.

Сухую плазму перед использованием растворяют бидистиллированной водой. После этого она не должна содержать хлопьев, сгустков, осадка. Противостафилококковая плазма, как правило, применяется внутривенно. При остром стафилококковом сепсисе ее назначают по 200 мл один раз в 2 дня. При тяжелом течении заболевания кратность применения препарата увеличивают до 1--2 раза в сутки.

Противостафилококковый гетерогенный иммуноглобулин получают из крови лошадей, иммунизированных стафилококковым анатоксином. В 1 мл препарата содержится 800 ME антитоксина. При остром стафилококковом сепсисе назначают по 1--2 мл/сутки иммуноглобулина. Однако он обладает очень высокой реактогенностью и в 1/5 части случаев дает побочные реакции (в основном сывороточную болезнь).

Сибирская язва.

Для иммунотерапии больных сибирской язвой предназначен противосибиреязвенный глобулин. Его получают из сывороток крови иммунизированных лошадей. Препарат выпускается в герметических флаконах по 20 мл и предназначается для внутримышечного введения. Его лечебная доза определяется тяжестью состояния больного и составляет 20-80 мл/сут. При тяжелой форме заболевания иммуноглобулин вводят и в последующие 3-5 дней в первоначальной дозировке. Больным, у которых обнаруживается аллергия к чужеродному белку, препарат вводится по жизненным показаниям. Эту процедуру осуществляют под наблюдением врача на фоне применения больших доз глюкокортикоидов с соблюдением ряда предосторожностей. Последовательно с интервалом в 15--20 мин вводят подкожно 0,5, 2,0 и 5 мл разведенного в 100 раз глобулина. При отсутствии реакции организма на раствор препарата через 20 мин вводят подкожно 0,1 мл не разведенного вещества, а через 30 мин -- всю его лечебную дозу (внутримышечно). В случаях появления реакции организма на небольшие дозы глобулина его применяют под наркозом.

Лептоспироз.

Препаратом иммунотерапии больных лептоспирозом является противолептоспирозный гамма- глобулин. Его получают из крови гипериммунизированных волов. Препарат содержит антитела против антигенов пяти наиболее распространенных возбудителей заболевания -- grippotyphosa, pomona, icterohaemorrhagie, canicola, tarasovi. Его применяют после проверки чувствительности организма больного к чужеродному белку. При отрицательной внутрикожной пробе на разведенный в 100 раз гамма-глобулин, его назначают после предварительной десенсибилизации организма путем последовательного подкожного (с интервалом в 20--30 мин) введения различных доз препарата. Лечебную дозу лекарственного вещества применяют внутримышечно: в 1-е сутки -- 10--15 мл, во 2-е и 3-й -- по 5--10 мл.

Грипп.

Для лечения больных гриппом используется противогриппозный гамма-глобулин. Его получают из крови доноров, иммунизированных живой вакциной вирусов гриппа А и В. Доза препарата определяется клинической формой заболевания и составляет 6--12 мл. При отсутствии выраженного эффекта его назначают через каждые 6 часов в течение 1--2 сут.

Клещевой энцефалит.

При этом заболевании используется противоэнцефалитный гамма-глобулин, изготовленный из крови лошадей, иммунизированных вирусом клещевого энцефалита, или иммуноглобулин из крови иммунизированных людей. Первый из них представляет собой чужеродный белок и способен вызывать побочные реакции. В связи с этим его применяют редко, в соответствии с общепринятыми правилами использования гетерологичных лекарственных веществ белковой природы. Предварительно проверяют чувствительность организма к чужеродному белку с помощью внутрикожной пробы. При наличии аллергии к препарату его вводят внутримышечно после предварительной десенсибилизации организма с помощью дробного (с интервалом в 20--30 мин) подкожного введения разведенной (в 100 раз) сыворотки (по 0,5, 2,0 и 5 мл). В случаях, когда в ходе десенсибилизации появляется реакция на одну из доз введенного препарата, его применяют под наркозом или же вместо гетерологичного иммуноглобулина применяют человеческий. В случаях использования гетерологичного лекарственного вещества одновременно осуществляют мероприятия по профилактике сывороточной болезни (за 15--20 мин до введения иммуноглобулина больному и в последующие 7 сут применяют антигистаминные средства, хлорид кальция, глюкокор-тикоиды). Доза иммуноглобулинов против клещевого энцефалита определяется клинической формой заболевания (6 мл/сут -- при легкой, 12 мл -- при среднетяжелой и 24 мл -- при тяжелой).

Полиомиелит. Паротит. Для предупреждения осложненного течения этих заболеваний в ранние сроки манифестирования инфекционного процесса применяют нормальный человеческий иммуноглобулин (20 мл внутримышечно). Препарат производится из плацентарной, абортной и венозной крови людей.

Осложнения при применении иммунных сывороток. Гамма-глобулины из крови человека отличаются ареактогенностью. Только у отдельных людей, обладающих чрезвычайно высокой чувствительностью, они могут вызывать кратковременное повышение температуры тела. Иногда возникает реакция на повторное введение этих препаратов: через 1--3 дня после применения сыворотки развивается зудящая уртикарная сыпь.

Побочные реакции наблюдаются преимущественно при использовании иммунных сывороток и гамма-глобулинов, изготовленных из крови иммунизированных животных. Они обусловлены в основном формированием в организме больных иммунных реакций к антигенам чужеродного белка и проявляются анафилактическим шоком или сывороточной болезнью.

Анафилактический шок связан со способностью антигенов белков животных индуцировать синтез IgE. В этих случаях через несколько секунд - минут после введения препарата (противодифтерийной, противоботулинической и других сывороток, противолептоспирозного и др. гамма-глобулинов из крови животных) он вызывает иммунную реакцию, сопровождающуюся внезапным развитием острой сердечно-сосудистой недостаточности, способной вызвать гибель больного.

Наряду с отмеченным, гетерологичные сыворотки обусловливают выработку в организме больных противосывороточных антител классов IgA, IgM, IgG. Последние способны взаимодействовать с молекулами применяемого чужеродного белка, образовывать иммунные комплексы антиген--антитело. Особенно много их образуется при продолжительном введении иммунных сывороток. В этих случаях происходит поражение иммунными комплексами капилляров, лимфатических сосудов, синовиальных оболочек, а также тканей внутренних органов. Клинический синдромокомплекс этого состояния называется сывороточной болезнью.

Сывороточная болезнь развивается через 7--12 сут с момента начала серотерапии и характеризуется лихорадкой, полиаденитом, уртикарной, эритематозной или другого характера сопровождающейся зудом экзантемой, артралгическим, невралгическим, гепатолиенальным синдромами, тахикардией, лейкопенией, относительным лимфоцитозом, тромбоцитопенией, повышением СОЭ и другими изменениями.

3. Специфическая активная иммунотерапия

Основана на применении препаратов из антигенов возбудителей заболевания (вакцин). Применение в острый период инфекционного заболевания противопоказано, так как она способна увеличить иммунодепрессивный эффект, обусловленный инфекционным процессом, и способствовать неблагоприятному его течению. Вакцины, как правило, следует назначать в период ремиссии болезней с целью обеспечить формирование полноценного иммунитета, способного предупредить развитие их рецидивов, или при затяжном и хроническом течении с незначительно выраженными клиническими проявлениями инфекционного процесса.

Лечебные вакцины применяют внутривенно, внутримышечно, подкожно и внутрикожно. Наиболее эффективным способом является внутрикожный.

Весьма важным требованием специфической активной иммунотерапии является правильный выбор для каждого больного рабочей дозы вакцины. Большие дозы препарата могут оказать иммунодепрессивное действие и вызвать рецидив заболевания, а малые -- вообще не дают необходимого эффекта.

В период применения вакцин с лечебной целью противопоказано использование глкжокортикоидов, антибиотиков, цитостатиков и других веществ, угнетающих формирование иммунитета.

Важным условием эффективности специфической активной иммунотерапии является применение в этот период препаратов, обеспечивающих активность метаболических процессов иммунокомпетентных клеток (метилурацил, нуклеинат натрия, пентоксил, витамины).

Брюшной тиф. Для профилактики рецидивов заболевания используется гретая моновакцина с титром 20 млн микробных тел в мл. Ее применяют через 1 сутки после нормализации температуры тела. Обычно препарат вводят внутрикожно в ладонную поверхность предплечий по ОД мл: в 1-й день -- 3 инъекции, во 2-й -- 4 и т. д. до 10.

Бруцеллез. Многообразие клинических форм заболевания и различие механизмов поражения макроорганизма при них определяют различные подходы к методам специфической активной иммунотерапии больных. При остросептическом бруцеллезе она противопоказана в остром периоде и осуществляется только во время его ремиссии с целью формирования иммунитета, способного предупредить развитие рецидива. В этих случаях в основном используют внутрикожный способ введения бруцеллезной вакцины. Предварительно из промышленного препарата, имеющего титр 1 млрд микробных клеток, готовят ряд разведении. С их помощью определяют рабочую дозу лекарственного вещества (та, которая на месте внутрикожной инъекции вызывает гиперемию и инфильтрацию кожи размером около 10 мм в диаметре). Количество ежедневных инъекций вакцины, а также продолжительность курса лечения те же, что и при других инфекционных заболеваниях.

Используют также и подкожный способ применения бруцеллезной вакцины. Вводят по 10-20-40-80-150-250-400-600- 900 млн микробных тел препарата с интервалом в 3--4 дня.

При хронических формах бруцеллеза ведущее значение в поражении макроорганизма имеют аллергические (иммунные) реакции, связанные с микробными антигенами. Снизить или подавить их выраженность представляется возможным путем применения весьма больших доз бруцеллезной вакцины. Ее назначают в острый период заболевания внутривенным способом. В этих случаях часто развиваются тяжелые поствакцинальные реакции. С целью их предупреждения используется двухэтапный способ внутривенного использования препарата: вводят половинную его дозу (0,3--0,5 млн микробных тел), а через 2 ч -- вторую ее часть (0,3--0,5 млн микробных тел). Вакцина вводится повторно через 3--4 дня между первыми 5 процедурами и через 7 дней -- между последующими, увеличивая каждый раз ее дозу в два раза. Вместе с тем, в случаях резко выраженной реакции организма на применение препарата, его дозу уменьшают, а интервал удлиняют. При слабой реакции следует поступать наоборот.

Дизентерия. Для лечения больных хронической дизентерией используется спиртовая дизентерийная вакцина, содержащая в 1 мл препарата 1 млрд убитых шигелл Флекснера и 500 млн микробных клеток Зонне. В качестве рабочей концентрации препарата используется его разведение с содержанием 300 млн микробных клеток в 1 мл. Его вводят внутрикожно по той же методике, что и брюшнотифозную вакцину.

Туляремия. Для лечения больных с затяжным течением туляремии применяется туляремийная вакцина. Ее назначают подкожно по 1,0--5,0--10,0 и 15,0 млн микробов на инъекцию с интервалом в 5 сут.

Токсоплазмоз. Одним из важнейших лечебных мероприятий при хроническом токсоплазмозе является вакцинотерапия токсоплазмином. Ее осуществляют внутрикожно по общепринятой методике: определяют рабочую концентрацию токсоплазмина и ежедневно вводят препарат в ладонную поверхность предплечий (по 0,1 мл в 3 участка кожи в 1-й день, в 4 -- во 2-й и т. д., доводя до 10 инъекций на 8-й день лечения).

4. Неспецифическая активная иммунотерапия

Основана на применении неспецифических антигенных препаратов, позволяющих изменять (повышать) реактивность иммунной системы и неспецифических факторов защиты микроорганизма. Как и специфическая активная иммунотерапия, она может применяться только в период ремиссии, а также в случаях затяжного или хронического течения инфекционных заболеваний при незначительно выраженных проявлениях инфекционного процесса и отсутствии лихорадки.

В настоящее время чаще всего для этих целей рекомендуются пирогенал (липополисахарид бактерий Salmonella Typhi) и продигиозан (липополисахарид бактерий В. Prodigiosuni). Их применение вызывает активацию естественных киллеров, макрофагов, Т- и В-лимфоцитов, повышает функциональное состояние гипоталамо-гипофизарно-адреналовой системы, влияет на терморегуляторные процессы и др.

Пирогенал назначают внутримышечно 1 раз в 3--4 дня, начальная доза препарата в зависимости от массы тела составляет 7--7,5 мкг. В последующем при каждой инъекции ее подбирают индивидуально. Если температурная реакция на введение препарата продолжалась 1--3 ч, последующая доза препарата увеличивается на 5 мкг. При более выраженной гипертермии ее составляют такой, как и при предыдущем введении препарата. Курс лечения составляет 5--10 инъекций.

Продигиозон применяют внутримышечно 1 раз в день. Начальная доза аппарата -- 25 мг. Через каждые 4 дня ее увеличивают в 2 раза. Максимальная разовая доза проигиозона составляет 100 мг.

Более новым (в историческом аспекте) вариантом неспецифической активной иммунотерапии является иммунокоррекция (иммуномодуляция). Она осуществляется с помощью биологических (препараты тимуса -- тималин и Т-активный интерлейкин-2, интерфероны) и химических (декарис, амиксин, циклоферон, неовир) препаратов, обладающих способностью повышать активность функциональных структур иммунной системы.

Некоторые из перечисленных средств (препараты тимуса и декарис, левамизол) в основном обладают способностью стимулировать созревание популяции Т-лимфоцитов. Однако применение их в остром периоде тяжело протекающих инфекционных заболеваний оказывается неэффективным. Это объясняется тем, что в подобных случаях депрессия иммунокомпетентных клеток обусловлено чрезвычайно большой микробной антигенемии. Увеличение количества иммунокомпетентных клеток в организме не влияет на их функциональное состояние, а соответственно, и на механизмы самогенеза. В связи с этим препараты тимуса и декарис показано применять при рецидивирующей затяжной, вялотекущей формах инфекционного процесса, сопровождающихся существенным снижением в крови количества Т-лимофоцитов. Тималин назначают внутримышечно 1 раз в день по 10--20 мг в течение 510 сут. Т- активные применяют подкожно 1 раз в день по 1 мл 0,01% раствора. Тимоген (синтетический аналог препаратов тимуса) используют внутримышечно 1 раз в день по 1 мл 0,01% раствора в течение 5--10 сут. Декарис дают внутрь по 0,075 г 1 раз в день (на ночь) в течение 5--10 сут.

В силу исторических обстоятельств иммунология длительное время не входила в число университетских дисциплин. Это недоразумение основывалось на том, что первоначально иммунология рассматривалась как наука о защите организмов от инфекционных агентов и способах предотвращения инфекционных заболеваний. Вследствие этого она оказалась в ряду прикладных медицинских дисциплин. Однако уже в первые годы ее существования были сформулированы фундаментальные аспекты этой науки, которые, начиная с 50-х годов ХХ столетия заняли в структуре иммунологии доминирующее положение. Иммунология стала рассматриваться как наука о сохранении биологической индивидуальности организмов путем распознавания и элиминации продуктов чужеродной генетической информации.

5. Серотерапия

Серотерапия (от лат. serum - сыворотка и терапия), - метод лечения заболеваний (преимущественно инфекционных) при помощи иммунных сывороток. Лечебный эффект основан на явлении пассивного иммунитета - обезвреживании микробов (токсинов) антителами (антитоксинами), содержащимися в сыворотках. Сыворотки применяют при лечении, ботулизма, при лечении гриппа, столбняка, оспы, стафилококковых инфекций и других заболеваний. Применение сыворотки служит для улучшения самочувствия и повышения жизненного тонуса, а так же как омолаживающее средство.

Сыворотка с помощью инъекции вводится под кожу по аккопунктурным точкам. Сыворотки существуют и в таблетированном виде, но инъекции более эффективны.

Сыворотка является стимулятором работы жизненно важных органов.

Побочные эффекты: при введении сыворотки возможны легкие аллергические реакции. Перед началом лечение обязательно проводятся пробные инъекции, чтобы исключить любые негативные последствия индивидуальной непереносимости препарата.

* Нарушения, вызванные вирусными инфекциями

* Гормональные нарушения, такие как потенция, фертильность, дисфункция.

* Посттравматические синдромы

* Прогрессирующие болезни: артриты, спондилиты.

* Ревматические болезни, например хронический полиартрит

* Нарушение обмена веществ.

* Функциональные расстройства, такие как вегетативная дестония и проч.

Благодаря эффективному регенерирующему действию сывороток, они так же оказывают омолаживающее действие, которое в сочетании с другими методами натуротерапии позволяет добиться превосходных результатов в самые короткие сроки.

Поскольку риск осложнений при использовании иммунных сывороток, в том числе противоядных и антитоксических, очень высок, они применяются только в тех случаях, когда отсутствуют соответствующие специфические иммуноглобулины. Иммунные сыворотки вызывают местные и системные аллергические реакции и сывороточную болезнь. Сывороточная болезнь развивается приблизительно у 20% реципиентов иммунных сывороток, полученных от лошадей, через 1 --3 нед после введения. Ее риск особенно высок при назначении иммунных сывороток в высоких дозах. Предварительное иммунологическое исследование неинформативно. Для предупреждения и снижения тяжести сывороточной болезни применяют H1-блокаторы.

а. Иммунные сыворотки применяются только по абсолютным показаниям.

б. Обязательно уточняют, назначались ли иммунные сыворотки раньше и не было ли на них реакций. Особую осторожность следует соблюдать при сенсибилизации к лошадиным эпидермальным аллергенам. Даже в отсутствие реакций на иммунные сыворотки в анамнезе их вводят только после проведения кожных проб.

в. Сначала проводят пунктационную пробу. Иммунную сыворотку разводят физиологическим раствором в соотношении 1:100. Реакцию оценивают через 20 мин. Если она отрицательна, внутрикожно вводят 0,02 мл сыворотки в разведении 1:1000. При отрицательной реакции пробу повторяют с сывороткой в разведении 1:100. Реакцию оценивают через 30 мин.

г. Если внутрикожная проба отрицательна, вводят гетерологичную сыворотку в/м. Даже при отрицательных кожных пробах соблюдают все меры предосторожности. При положительной кожной пробе проводят десенсибилизацию.

д. Если иммунную сыворотку необходимо ввести в/в, сначала медленно вводят пробную дозу -- 0,5 мл сыворотки в 10 мл физиологического раствора или 5% раствора глюкозы -- и наблюдают за больным в течение 30 мин. В отсутствие реакции вводят сыворотку в разведении 1:20, со скоростью не более 1 мл/мин.

е. Следует помнить, что иммунные сыворотки часто вызывают пирогенные реакции.

ж. При системных реакциях на иммунные сыворотки в анамнезе или положительных кожных пробах показана десенсибилизация.

1) Под рукой должны быть средства для лечения анафилактических реакций.

2) Единой схемы десенсибилизации не существует. Можно руководствоваться рекомендациями Американской академии педиатрии.

3) Если во время десенсибилизации развивается аллергическая реакция, а иммунная сыворотка абсолютно показана, рекомендуется следующее.

а) Вводят адреналин, 0,3--0,5 мл раствора 1:1000 в/м, детям -- 0,01 мл/кг в/м, и другие препараты, используемые для лечения анафилактических реакций.

б) Наблюдают за больным в течение 15--30 мин.

в) В отсутствие ухудшения вводят сыворотку в максимальной дозе, не вызывающей аллергическую реакцию, после чего дозу сыворотки осторожно повышают.

4) Профилактическое назначение H1-блокаторов и кортикостероидов снижает риск анафилактической реакции. За 2 ч до введения очередной десенсибилизирующей дозы сыворотки назначают метилпреднизолон, 1--2 мг/кг в/в, и дифенгидрамин, 1,5 мг/кг (не более 50 мг) в/в или в/м.

6. Иммунитет

Иммунитет - комплекс реакций, направленных на защиту организма от инфекционных агентов и веществ. К чужеродным для нас субстанциям относятся бактерии, их токсины, вирусы, простейшие, паразитические черви, пересаженные органы или ткани, измененные собственные клетки (например, раковые), которые содержат антигены. Именно влияние антигенов обуславливает образование противотел (антител) или другую форму иммунной реакции. Антитела вступают во взаимодействие с антигеном и обезвреживают его. Иммунная перестройка, происходящая в организме под влияние антигена, носит название “приобретенный иммунитет”. Активно приобретенный иммунитет может возникнуть в результате перенесения инфекционного заболевания или введения в организм вакцины. Он образуется через 1-2 недели после введения антигена и сохраняется годами или десятками лет (при кори - пожизненно). Пассивно приобретенный иммунитет возникает при передаче антител от матери к плоду через плаценту, обеспечивая в течение нескольких месяцев невосприимчивость новорожденных к некоторым инфекционным заболеваниям. Такой иммунитет можно создать искусственно, вводя в организм иммунные сыворотки. В защите организма от возбудителей инфекционных заболеваний существенную роль играют так называемые неспецифические факторы защиты: непроницаемость здоровых кожных и слизистых покровов для большинства микроорганизмов, наличие в коже и кислом содержимом желудка веществ, неблагоприятно действующих на микроорганизмы, присутствие в крови и жидкостях организма ферментных систем, разрушающих микроорганизмы. Сейчас уделяют много внимания разработке и изучению специфических средств, стимулирующих или подавляющих иммунные реакции организма. Положительное действие лекарственных веществ можно объяснить их способностью повышать иммунитет.

7. Серологические методы

В целях определения вида данного вируса при изучении защитных процессов в организме больного человека или зараженного животного применяются серологические методы. Серология (от лат. Serum - сыворотка, жидкая составная часть крови) - это раздел иммунологии, изучающий реакции антигена специфическими защитными веществами, антителами, которые находятся в сыворотке крови. Антитела нейтрализуют действие вируса. Они связываются с определенными антигенными веществами, находящимися на поверхности вирусных частиц. В результате связывания молекул антител с поверхностной структурой вируса последний теряет свои патогенные свойства. Для установления уровня (количества) антител в сыворотке или определения типа данного вируса проводится реакция нейтрализации вируса. Ее можно проводить как на животных, так и на культуре клеток.

Минимальную концентрацию сыворотки, содержащей антитела, достаточную для того, чтобы нейтрализовать вирус, не дать ему проявить цитопатическое действие, называют титром сыворотки, нейтрализующей вирус. Эта концентрация может быть выявлена и с помощью метода бляшек.

Для обнаружения антител используется метод торможения гемагглютинации (склеивания эритроцитов под воздействием вируса) и метод связывания комплемента. Из методов, применяемых в вирусологии для различных исследовательских целей, можно еще упомянуть методы, при помощи которых вирусологический материал подготавливается для физических и химических анализов, которые облегчают изучение тонкого строения и состава вирусов. Эти анализы требуют большого количества совершенно чистого вируса. Очистка вируса - процесс, при котором из суспензии с вирусом устраняются все посторонние, загрязняющие ее частицы. В основном это кусочки и «обломки» клеток - хозяев. Одновременно с очисткой происходит обычно сгущение суспензии, повышение концентрации вируса. Так получается исходный материал для многих исследований.

Из отдельных методов очистки упомянем лишь наиболее эффективный - метод ультрацентрифугирования, который дает препараты вируса очень высокой концентрации.

8. Процедура получения

Опишем вкратце процедуру получения и очистки вирусной суспензии. Процесс этот начинается с искусственного введения вируса в мозг подопытного животного. По прошествии нескольких дней вирус размножится в ткани мозга. При этом обнаружатся характерные нарушения функций нервной системы «хозяина», и у животного выявятся признаки заболевания. Когда симптомы достигнут наибольшего развития, зверька умерщвляют, а его мозг, в тканях которого содержатся большие количества вируса, извлекают в стерильных условиях из черепа животного. Затем из мозга готовится, скажем, 10 %-ная суспензия. Кроме вирионов она содержит еще и большое количество кусочков нервной ткани, остатки кровеносных сосудов, кровяные тельца и другие биологические компоненты. Кусочки ткани и другие крупные частицы устраняются первым центрифугированием со скоростью 5000- 10000 оборотов в минуту. Оно продолжается около получаса. Жидкость над осадком (суперкатакт) осторожно сливают в специальные пробирки для центрифугирования, сделанные из пластмассы или нержавеющей стали, поскольку стекло не выдерживает давление, которое развивается при высокоскоростном центрифугировании. А осадок обезвреживают дезинфицирующими средствами. Слитый «супернатант» обрабатывается затем уже в ультрацентрифуге.

Для седиментации мельчайших вирусов необходимо многочасовое ультрацентрифугирование, причем полученный осадок часто бывает не больше булавочной головки. Но и после такой обработки мы имеем не совсем чистый вирусный материал, в нем еще содержатся чужеродные примеси. Для тонких анализов этот осадок надо несколько раз обработать различными реактивами и повторить ультрацентрифугирование. Только тогда можно получить концентрированную суспензию вируса высокой чистоты, которая требуется для точных и достоверных биохимических, кристаллографических анализов или для наблюдений в электронно-оптических приборах.

В распоряжении вирусологов вообще много различных технических приспособлений, как , например , центрифугирование по градиентам концентрации, когда вирионы разделяются по степеням концентрации или по форме. Другой прибор, представляющий в наше время стандартное оборудование почти каждой научно-исследовательской вирусологической лаборатории - электронный микроскоп. Это дорогостоящий, большой и сложный аппарат.

Для получения изображения вирусов существует много различных методов, и все они прошли свои этапы развития. Чтобы обнаружить вирионы в клетках, в настоящее время пользуются методом ультратонких срезов Фиксированный материал, залитый эпоксидной смолой, разрезается тончайшим стеклянным или алмазным ножом. При помощи точных ультрамикротомов одну клетку можно разрезать более чем на тысячу тонких срезов. Полученные таким образом срезы обрабатываются затем специальными химикалиями, что обеспечивает лучшую их видимость.

Для наблюдения тонкого строения отдельных вирионов применяется метод негативного контрастирования (окрашивания), внедрение которого значительно повысило качественный уровень электронного микроскопирования. Вирусные частицы при этом осторожно смешиваются с раствором фосфовольфрамовой кислоты, дающей осадок, не пропускающий электронные лучи. В результате вирионы предстают в виде своих совершенно точных отпечатков, по которым можно изучать самые тонкие детали их поверхностей. При методе позитивного окрашивания (или «металлизирования» препарата) применяются такие вещества, которые способны выборочно прилипать к поверхности вирионов (например, специфические антитела, меченные ферритином, содержащим в своей молекуле железо и потому хорошо различимые в электронном микроскопе).