Методы микробиологического контроля лекарственных средств

7

МЗРФ

ФАРМАКОПЕЙНЫЙ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ

ИЗМЕНЕНИЕ № 2

к статье Госфармакопеи XI издания

«Методы микробиологического контроля лекарственных средств»

(ГФХ1, вып. 2, с. 187)

Срок введения Изменения с 01.01.2002 г.

СОДЕРЖАНИЕ

РАЗДЕЛ 1. «Требования, предъявляемые к микробиологической чистоте лекарственных средств, субстанций и вспомогательных материалов»

РАЗДЕЛ 2. «Испытание на Enterobacteriacea»

РАЗДЕЛ 3. «Определение антимикробного действия нестерильных лекарственных средств»

РАЗДЕЛ 1. Требования, предъявляемые к микробиологической чистоте лекарственных средств, субстанций и вспомогательных материалов

Таблица 1. Микробиологическая чистота лекарственных средств

Категория	Применение	Рекомендуемые нормы для Госфармакопеи XII издания
1	Для парентерального введения Глазные лекарственные средства Для нанесения на открытые раны и ожоги Другие лекарственные средства, к которым предъявляется требование «стерильность»	Стерильность
2	Для применения местно, трансдермально Для применения (суммарно) - не более 102 интравагинально Для введения в полости Отсутствие бактерий уха, носа Для введения в дыхательные пути (за исключением тех лекарственных средств, которые должны быть стерильными)	Общее число аэробных бактерий и грибов (суммарно) - не более 102 в 1 г или в 1 мл Отсутствие бактерий семейства Enterobacteriace в 1 г или в 1 мл Отсутствие Pseudomonas aeruginosa в 1 г или в 1 мл Отсутствие Staphylococcus aureus в 1 г или в 1 мл
3	Для приема внутрь или введения ректально А. Лекарственные средства из субстанций синтетического происхождения Б. Лекарственные средства из субстанций природного происхождения (растительного, животного или минерального), за исключением лекарственных средств, включенных в Категорию 4 В. Детские лекарственные средства	Общее число аэробных бактерий не более 103 в 1 г или в 1 мл Общее число грибов - не более 102 в 1 г или 1 мл Отсутствие Escherichia coli в 1 г или 1 мл Общее число аэробных бактерий не более 104 в 1 г или в 1 мл Общее число грибов - не более 102 в 1 г или в 1 мл Отсутствие Escherichia coli в 1 г или в 1 мл Отсутствие Salmonella в 10 г или в 10 мл Отсутствие Pseudomonas aeruginosa в 1г или в 1 мл Отсутствие Staphylococcus aureus в 1г или в 1 мл Энтеробактерий - не более 102 в 1 г или в 1мл Общее число аэробных бактерий не более 500 в 1г или в 1мл Общее число грибов - не более 50 в 1г или в 1мл Отсутствие бактерий семейства Enterobacteriaceae в 1г или в 1мл Отсутствие Pseudomonas aeruginosa в 1г или в 1мл Отсутствие Staphylococcus aureus в 1г или в 1мл
4	Лекарственные средства, состоящие из одного вида сырья (фасованная продукция) или нескольких (сборы), а также растительное сырье «ангро» А. Лекарственные растительные средства или лекарственное сырье «ангро», применяемые в виде настоев и отваров, приготовленные с использованием термической обработки Б. Лекарственные растительные средства или растительное сырье «ангро», применяемые без термической обработки	Общее число аэробных бактерий не более 107 в 1г или в 1мл Общее число грибов - не более 105 в 1г или в 1мл Escherichia coli - не более 102 в 1г или в 1мл Общее число аэробных бактерий не более 105 в 1г или в 1мл Общее число грибов - не более 104 в 1г или в 1мл Отсутствие Escherichia coli - в 1г или в 1мл Отсутствие Salmonella в 10 г или в 10 мл Энтеробактерий - не более 103 в 1г или в 1мл

Таблица 2. Микробиологическая чистота субстанций и вспомогательных материалов для производства лекарственных средств

Кате-гория	Применение	Рекомендуемые нормы для Госфармакопеи XII издания
1.2 2.2 3.2 4.2	Субстанции для производства: Стерильных лекарственных средств Нестерильных лекарственных средств, относящихся к Категории 2 Нестерилъных лекарственных средств, относящихся к Категории 3В Субстанции синтетического происхождения для производства нестерильных лекарственных средств Субстанции природного происхождения (растительного, животного или минерального) Вспомогательные материалы (мука пшеничная, крахмал, тальк и т.д.)	Общее число аэробных бактерий и грибов (суммарно) не более 102 в 1г или в 1мл Отсутствие бактерий семейства Enterobacteriaceae в 1 г или в 1мл Отсутствие Pseudomonas aeruginosa в 1г или в 1мл Отсутствие Staphylococ-cus аuerus 1 г или в 1мл Общее число аэробных бактерий не более 103 в 1г или в 1 мл Общее число грибов - не более 102в 1г или в 1мл Отсутствие Escherichia coli - в 1г или в 1мл Общее число аэробных бактерий не более 104 в 1г или в 1мл Общее число грибов - не более 102 в 1 г или в 1мл - - Отсутствие Escherichia coli - в 1г или в 1мл Отсутствие Salmonella в 10 г или в 10 мл Отсутствие Pseudomonas aeruginosa в 1г или в 1мл Отсутствие Staphylococ-cus aureus в 1г или в 1мл Энтеробактерий - не более 102 в 1г или в 1мл Общее число аэробных бактерий не более 103 в 1г или в 1мл Общее число грибов - не более 102 в 1г или в 1мл Отсутствие Escherichia coli - в 1г или в 1мл Отсутствие Salmonella в 10 г или в 10 мл Отсутствие Pseudomonas aeruginosa в 1г или в 1мл Отсутствие Staphylococ-cus aureus в 1г или в 1мл

Примечания к таблицам 1 и 2:

- В фармакопейных статьях предприятия (ФСП) могут быть указаны в виде исключения и другие нормативы

- При обнаружении других патогенных бактерий, кроме указанных выше, считают, что качество лекарственных средств, субстанций и вспомогательного материала не соответствует требованиям по показателю «Микробиологическая чистота»

РАЗДЕЛ 2. ИСПЫТАНИЕ НА Enterobacteriaceae

Дополнение к разделу: «Выявление и идентификация семейства Enterobacteriaceae» общей ФС «Испытание на микробиологическую чистоту» ГФХ1 издания, выпуск 2,стр.197-198.

2.1 КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ ЭНТЕРОБАКТЕРИЙ ЗА ИСКЛЮЧЕНИЕМ Escherichia coli и Salmonella

Юг или 10 мл испытуемого образца помещают в 100 мл среды № 11, гомогенизируют и инкубируют при температуре 32.5 + 2.5°С в течение, как правило, двух часов, но не более пяти. В случае, если лекарственное средство - суппозитории или растворы в маслах, в среду № 11 добавляют стерильный Твин-80 в количестве не более 5% и стеклянные бусы для эмульгирования.

Гомогенат перемешивают и готовят разведения 1:10 и 1:100, используя для этого среду № 3. В три пробирки с 10 мл среды № 3 вносят 1 мл гомогената в первую, 1 мл разведения 1:10 во вторую и 1 мл разведения 1:100 в третью, то есть соответственно 0.1 г, 0.01 г, 0.00 1 г образца. Посевы инкубируют при температуре (32.5 + 2.5)°С в течение 24-48 ч. При наличии роста делают пересев петлей на плотную среду № 4 (агар Эндо) и инкубируют чашки Петри при той же температуре в течение 18-24 ч. В случае появления характерных для Enterobacteriaceae колоний грамотрицательных палочек определяют количество энтеробактерий в 1 г или в 1 мл образца по Таблице 3.

Таблица 3. Количественное определение энтеробактерий

Количество испытуемого образца	Вероятностное количество бактерий в 1 г (мл)
0,1 г (мл) 1 мл гомогената	0,01 г (мл) 1 мл гомогената в разведении 1:10	0,001 г (мл) 1 мл гомогената в разведении 1:100
+ - - -	+ + - -		Более 100 От 100 до 1000 От 10 до 100 Менее 10

Обозначения:

+ - наличие роста бактерий

- - отсутствие роста бактерий

Количество клеток E.coli в 1г (мл) исследуемого лекарственного средства определяют, пользуясь также данной таблицей.

2.2 ИСПЫТАНИЕ НА НАЛИЧИЕ

Escherichia coli и Salmonella

Юг (мл) образца лекарственного средства вносят в 100 мл питательной среды №11 (лактозный бульон). В случае, если лекарственное средство - жидкость, количество среды уменьшают до 90 мл. Инкубируют при температуре (32.5 + 2.5)°С в течение 2-5 ч. 10 мл среды №11 переносят в 100 мл среды

№3, перемешивают и инкубируют при температуре (32.5 + 2.5)°С в течение 18-24 ч. При отсутствии роста на среде №3 (среда прозрачная, цвет не изменился) считают, что в лекарственном средстве не содержатся бактерии ceM.Enterobacteriaceae. При наличии роста испытания продолжают.

2.2.1 ИСПЫТАНИЕ НА E.coli

Со среды №3 делают пересев петлей на среду №4 (агар Эндо) и инкубируют при температуре (32.5 + 2.5)°С в течение 18-24 ч. На среде №4 E.coli образуют, как правило, характерные малиновые колонии с металлическим блеском или без него, диаметром 2-4 мм. Подозрительные на принадлежность к E.coli колонии микроскопируют. При обнаружении в мазках грамотрицательных палочек отсевают на скошенную в пробирках среду № 1 и инкубируют при температуре (32,5 + 2.5)° С в течение 18-24ч. Из пробирок с чистой культурой делают пересевы на среды №14 (агар Симмонса) и №15 (бульон Хоттингера),а также используют для теста на цитохромоксидазу. Через 18-24 ч инкубации при (32,5 + 2.5)°С отмечают бактериальный рост или его отсутствие на средах №14 и №15.Утилизацию цитрата устанавливают по изменению цвета среды №14 из зеленого в синий.Наличие индола определяют по появлению красного кольца на поверхности среды №15 при добавлении реактива Ковача или Эрлиха.

Если в образце обнаружены грамотрицательные неспорообразующие палочки, не обладающие ферментом цитохромоксидаза, не утилизирующие цитрат натрия и образующие индол, считают, что лекарственное средство контаминировано Escherichia coll.

2.2.2 ИСПЫТАНИЕ НА ВИДЫ Salmonella

1мл обогащенной культуры на среде №3 вносят в пробирку с 10 мл среды №12 (селенитовая среда) и инкубируют при (32,5 + 2,5)°С в течение 16-18 ч. Делают пересев петлей на среду №5 (висмут-сульфит агар) и инкубируют при температуре (32,5 + 2.5)°С в течение 24-48 часов. На среде №5 Salmonella образует, как правило, типичные черные колонии с характерным металлическим блеском, при этом участок среды под колонией прокрашивается в черный цвет. Подозрительные на принадлежность к Salmonella колонии микроскопируют и при обнаружении в мазках грамотрицательных палочек отсевают на среду №13 (трехсахарный агар с солями железа),нанося большое количество культуры петлей сначала на скошенную часть агара,а потом уколом в столбик. Параллельно ставят тест на цитохромоксидазу, используя чистую культуру со среды №1.Через 18-24 часа инкубации при (32,5 + 2.5)°С отмечают изменение цвета среды из красного в желтый только в столбике питательной среды. Почернение среды свидетельствует об образовании сероводорода - типичном признаке видов Salmonella.

Если в образце обнаружены грамотрицательные неспорообразующие палочки, не обладающие ферментом цитохромоксидаза,не ферментирующие сахарозу и лактозу и выделяющие сероводород, считают, что лекарственное средство контаминировано Salmonella.

2.3. Питательные среды и реактивы

1. Среда №11 (лактозный бульон) - для предварительного обогащения энтеробактерий

Состав:

Пептон ферментативный сухой - 8 г

Лактоза - 5 г

Вода дистиллированная - 1000 мл

рН после стерилизации 6,9 + 0,1

2. Среда №12 (селенитовая среда сухая) - для накопления и выделения сальмонелл.

Готовят согласно прописи на этикетке.

З. Среда №13 (трехсахарный агар с солями железа) - для выявления сероводорода

Состав:

Мясной экстракт - З г

Дрожжевой экстракт - З г

Пептон - 20 г

Лактоза - 10 г

Сахароза - 10 г

Глюкоза - 1 г

Железа сульфат - 0,2 г

Натрия хлорид - 5 г

Натрия тиосульфат - 0,3г

Феноловый красный - 0,024г

Агар - 15г

Вода дистиллированная -1000 мл

Рн после стерилизации 7.3 + 0.2. Разливают в пробирки по 5-7 мл. Стерилизуют при 121°С 15 мин. При охлаждении скашивают, оставляя столбик 2-2,5 см.

4. Среда №14 (цитратный агар Симмонса)

Состав:

Натрия хлорид - 5 г

Магния сульфат - 0,2г

Аммония дигидрофосфат - 1 г

Калия гидрофосфат - 1 г

Натрия цитрат - Зг

Бромтимоловый синий - 0,08г

Агар - 20г

Вода дистиллированная - 1000мл

рН после стерилизации 7,2 + 0.1

Приготовление: агар расплавляют при нагревании в свежеприготовленной дистиллированной воде. Все соли сначала растворяют в небольшом объеме воды, затем раствор добавляют к расплавленному агару и доводят водой до 1000 мл. Устанавливают рН, добавляют индикатор в виде 0,2% водного раствора в объеме 40 мл, хорошо перемешивают и разливают в пробирки по 5-7 мл. Стерилизуют при 121°С 15 мин. При охлаждении скашивают, оставляя столбик 2-2,5 см.

5. Среда №15 (бульон Хоттингера) - для определения индола

Примечание: * - для испытания на микробиологическую чистоту можно использовать аналогичные сухие питательные среды отечественных и зарубежных производителей после их валидации.

Тест на индол

В пробирку со средой №15, в которой выросла исследуемая культура, вносят 0,5 мл реактива Ковача или Эрлиха и слегка встряхивают. При наличии индола наблюдают появление красного кольца на поверхности среды в пробирке.

Реактив Ковача:

Спирт амиловый или изоамиловый - 75 мл

Пара-диметиламинобензальдегид - 5 г

Кислота хлористоводородная, конц. - 20 мл

Навеску альдегида растворяют в спирте при легком нагревании (в водяной бане при 50-55°С), остужают и медленно добавляют кислоту. Раствор хранят в защищенном от света месте. Реактив должен быть желтого цвета.

Реактив Эрлиха:

Спирт этиловый 96% - 95 мл

Пара-диметиламинобензальдегид - 1 г

Кислота хлористоводородная, конц. - 20 мл

Навеску альдегида растворяют в спирте и медленно добавляют кислоту. Раствор хранят в защищенном от света месте.

РАЗДЕЛ 3. ОПРЕДЕЛЕНИЕ АНТИМИКРОБНОГО ДЕЙСТВИЯ НЕСТЕРИЛЬНЫХ ЛЕКАРСТВЕННЫХ СРЕДСТВ

Лекарственные средства, обладающие антимикробным действием, могут подавлять рост отдельных видов бактерий и грибов. Если исследуемое лекарственное средство оказывает ингибирующее действие на микроорганизмы, которые выявляют в нестерильных лекарственных средствах, необходимо адекватно инактивировать его во избежание неправильной оценки результатов испытания на микробиологическую чистоту. Определение антимикробного действия нестерильных лекарственных средств проводят с использованием тест-микроорганизмов, полученных из Государственных коллекций.

3.1 ПОДГОТОВКА ТЕСТ-ШТАММОВ ДЛЯ ОПРЕДЕЛЕНИЯ АНТИМИКРОБНОГО ДЕЙСТВИЯ НЕСТЕРИЛЬНЫХ ЛЕКАРСТВЕННЫХ СРЕДСТВ

1. Тест-микрорганизмы

Bacillus cereus ATCC1 10702 (NCTC2 8035)

Escherichia coli ATCC 25922

Pseudomonas aeruginosa ГИСК4 453

Staphylococcus aureus ATCC 6538-P(FDA3 209-P)

Candida albicans ATCC 885-653

Aspergillus niger BKM5 F-1119

ATCC1 - Американская коллекция типовых культур

NCTC2 - Национальная коллекция типовых культур, Великобритания

FDA3 - Управление по контролю качества пищевых продуктов и лекарственных средств, США ГИСК4 - Всероссийский музей патогенных бактерий (ГИСК им. Л.А. Тарасевича), Россия

ВКМ5 - Всероссийская коллекция микроорганизмов РАН, Россия

Тест-штаммы В. cereus, E. coli, P. aeruginosa, S. aureus получают из Государственной Коллекции патогенных микроорганизмов ГИСК им. Л.А.Тарасевича. Штамм С.albicans получают из Российского Микологического Центра (г. Санкт-Петербург), штамм A.niger - из ВКМ-Всероссийской Коллекции микроорганизмов РАН (г. Москва). Культуры тест-микероорганизмов могут быть получены также из ВКПМ - Всероссийской Коллекции промышленных микроорганизмов. Используемые тест-штаммы должны быть типичными по культурально-морфологическим и биохимическим свойствам.

Тест-штаммы бактерий хранят при температуре (5 + 1)° С в лиофилизированном состоянии или под слоем стерильного вазелинового масла на среде Романова следующего состава:

Панкреатический гидролизат казеина 8.0 г

Натрия хлорид 5.0 г

Агар 10.0 г

Вода дистиллированная 100.0 г

рН после стерилизации 7.1 + 0.1

Тест-культуру C.albicans хранят под слоем вазелинового масла на среде №2 (агар Сабуро), в которой количество агара уменьшено до 1%. Тест-культуру A.niger хранят на среде №2 (агар Сабуро) (Госфармакопея, вып.2, с.200), делая пересевы через каждые 3 месяца. Лиофилизированную культуру тест-штамма из ампулы или культуру со среды хранения переносят в пробирки с питательным бульоном: среда №8 для бактерий, жидкая среда Сабуро - для C.albicans. Посевы на среде N8 инкубируют при температуре (32.5 + 2.5)°С в течении 18-24ч, посевы на жидкой среде Сабуро - при температуре (22.5 + 2.5)°С в течение 48ч - для C.albicans. Посевы A.niger на среде №2 инкубируют при температуре (22.5 + 2.5)°С до появления черных или темнокоричневых экзогенных спор (конидий) в течении 5-7 сут.

Перед определением антимикробного действия нестерильных лекарственных средств культуры тест-штаммов бактерий отсевают на среду №8 (питательный бульон) и инкубируют при температуре (32.5 + 2.5)°С в течение 18-24 ч.

Культуры грибов выращивают заранее: C.albicans - на жидкой среде Сабуро за 48 ч, а A.niger - на среде N2 за 5-7 сут. до начала определения.

3.2 ПИТАТЕЛЬНЫЕ СРЕДЫ И РАСТВОРЫ

(Государственная фармакопея XI издания, выпуск 2, с. 193, 201, 208-209)

Среда №8 - для выращивания бактерий.

Жидкая среда Сабуро - для выращивания Candida albicans.

Среда №2 (агар Сабуро) - для выращивания Aspergillus niger.

Среды №№3-5 - для идентификации бактерий семейства Enterobacteriaceae.

Среда №9 - для идентификации Pseudomonas aeruginosa.

Среда №10 - для идентификации Staphylococcus aureus.

Фосфатный буферный раствор с натрия хлоридом и пептоном, рН 7.0.

3.3 ПРОВЕДЕНИЕ ИСПЫТАНИЯ

Готовят разведения лекарственного средства 1:10, 1:20, 1:50, 1:100, 1:200, 1:500, используя фосфатный буферный раствор (для приготовления эмульсий в раствор добавляют не более 5% Твина-80).

Бульонные культуры бактерий и C.albicans разводят фосфатным буферным раствором не менее, чем 1:1000. Культуру A.niger смывают со скошенного агара фосфатным буферным раствором с 0.05% Твина-80. Определяют количество конидий в 1 мл смыва, используя камеру Горяева или чашечный агаровый метод, и разводят до концентрации 103 - 104 КОЕ/мл.

Испытание проводят представленными в 3.3.1. и 3.3.2. методами определения антимикробного действия.

3.3.1 МОДИФИКАЦИЯ МЕТОДА ГОСФАРМАКОПЕИ XI

Каждое разведение лекарственного средства вносят по 1мл в чашки Петри диаметром 90 мм, в одни из которых добавляют по 0.2 мл взвеси культуры B.cereus, a в оставшиеся - по 0.2 мл культуры C.albicans и A.niger. В чашки с B.cereus вносят по 7-10мл расплавленной среды №1 при температуре (47.5 + 2.5)°С, в чашки с культурами C.albicans и A.niger - то же количество среды №2.

Каждое разведение лекарственного средства вносят по 1мл в пробирки с 10 мл жидкой среды - №3 и №8. В пробирки со средой №3 добавляют по 1мл взвеси культуры E.coli, в пробирки со средой №8 - по 1мл взвеси культур P.aeruginosa и S.aureus, каждую отдельно. В контрольные чашки и пробирки вместо разведении лекарственного средства вносят такое же количество буферного раствора.

Посевы на средах №1, 3, 8 инкубируют при температуре (32.5 + 2.5)°С в течение 2 сут (среды №3, 8) и 5 сут.(среда №1). Посевы на среде №2 инкубируют при температуре (22.5 + 2.5)°С в течение 5 сут. В случае, если при внесении лекарственного средства в жидкие питательные среды (№3, №8) образуется помутнение, препятствующее учету результатов, делают пересев со среды №3 на среду №4 (агар Эндо), а со среды №8 - на среды №9 и № 10. При росте типичных колоний E.coli (среда №4), P.aeruginosa (среда №9) и S.aureus (среда №10) отмечают наличие роста тест-микроорганизма.

3.3.2 МЕТОД РЕПЛИКАЦИЙ (для водонерастворимых лекарственных средств)

В стерильные чашки Петри вносят по 1 мл каждого разведения исследуемого лекарственного средства. В контрольные чашки вносят по 1 мл растворителя, который используют для получения разведения. В чашки Петри (как в эксперименте, так и в контроле) добавляют по 15-20 мл расплавленной и охлажденной до (47.5 + 2,5)° С среды №1, в другие - такое же количество среды №2 и быстро перемешивают. После застывания агара чашки подсушивают для удаления конденсата с поверхности среды.

На поверхность агара бактериологической петлей или репликатором наносят бляшками инокулят каждого тест-штамма бактерий и грибов на среды №1 и №2 соответственно.

Чашки со средой №1 инкубируют при температуре

(32.5 + 2.5)°С в течение 48ч. Чашки со средой №2 инкубируют при температуре (22.5 + 2.5)°С в течение 3-5 сут.

Учет результатов. После окончания сроков инкубации посевов (появление типичного роста тест-микроорганизмов в контрольных чашках без лекарственного средства) отмечают наличие или отсутствие роста тест-штаммов бактерий и грибов на средах, в которые вносили различные разведения лекарственного средства.

Наличие такого же роста тест-микроорганизма, как в контроле, обозначают знаком «+»,отсутствие роста - знаком «-», слабый или замедленный рост - знаком «+».

Отсутствие роста тест-микроорганизма на среде с препаратом свидетельствует о том, что исследуемый препарат в данном разведении обладает антимикробным действием в отношении определенного тест-микроорганизма.

3.3.3 НЕЙТРАЛИЗАЦИЯ АНТИМИКРОБНОГО ДЕЙСТВИЯ

Для устранения антимикробного действия лекарственного средства используют различные методы: 1) увеличивают разведение лекарственного средства; 2) добавляют необходимое количество соответствующего специфического инактиватора, нейтрализующего антимикробное действие лекарственного средства, но не угнетающего рост микроорганизмов-контаминантов (например, бета-лактамазу - для пенициллинов и цефалоспоринов, пара-аминобензойную кислоту - для сульфаниламидов); 3) применяют неспецифнческий инактиватор следующего состава, используемого в качестве растворителя:

Твин-80 - З0 г

Лецитин яичный - З г

L-гистидина гидрохлорид - 1 г

Пептон (мясной или казеиновый) - 1 г

Натрия хлорид - 4.3 г

Калия фосфат однозамещенный - З.6 г

Натрия фосфат двузамещенный - 7.2 г

Воды дистиллированной - 1000.0 мл

Стерилизуют в паровом стерилизаторе насыщенным паром под давлением при температуре 121°С в течение 15 мин. Если антимикробное действие полностью не устраняется, увеличивают концентрацию Твина-80 или лецитина.

Директор ИГКЛС НЦЭГКЛС Минздрава России, профессор, академик МАИ - Н. С. Евтушенко.

Председатель Государственного Фармакопейного комитета, профессор, чл.-корр. РАМН А. П. Арзамасцев.

Главный Ученый секретарь Государственного Фармакопейного комитета, доктор фарм. наук В. Л. Багирова.