Теория и практика использования направленного биокатализа в технологии пищевых продуктов и ингредиентов белковой и углеводной природы

Рис. 19. Влияние дозы ферментного препарата на выход белка из солодовой дробины

Рациональные показатели рН для всех видов исследуемых ферментов совпадают с естественным рН смеси сырья с водой (6,2-6,8), что упрощает биотехнологический процесс - не требуется использования кислот и щелочей для корректировки кислотности гидролизуемой смеси.

Рис. 20. Влияние гидромодуля на выход соевого белка при использовании различных ферментных препаратов: 1, 3, 5 - измельченные бобы сои; 2, 4, 6 - соевая обезжиренная мука

При использовании рациональных режимов биокатализа (табл. 5) максимальный выход белка из обезжиренной соевой муки составил 35 %, гороховой муки - 20,8 %; солодовой дробины - 11,3 %, пшеничных отрубей - 9,3 % к СВ сырья.

Исследована возможность совместного использования протеаз и карбогидраз в процессе экстрагирования белка.

Таблица 5

Рациональные режимы биокатализа в технологии пищевого белка

Вид сырья, в т.ч. ВСР производства	Нейтраза	Промальт	Бирзим
	Доза ферментного препарата, ед/г сырья	Гидромодуль	Температура, °С	рН (среднее значение)	Продолжительность, ч	Выход белка, % к СВ сырья	Доза ферментного препарата, ед/г сырья	Гидромодуль	Температура, °С	рН (среднее значение)	Продолжительность, ч	Выход белка, % к СВ сырья	Доза ферментного препарата, ед/г сырья	Гидромодуль	Температура, °С	рН (среднее значение)	Продолжительность, ч	Выход белка, % к СВ сырья
Из бобовых культур
Измельченные бобы сои	0,5	1:10	50	6,2	6,0	7,8	0,015	1:10	70	6,2	5,0	17,3	0,5	1:10	45	6,2	5,0	7,2
Соевая обезжиренная мука	0,5	1:10	50	6,8	5,0	20,8	0,015	1:10	70	6,8	5,0	35,1	0,5	1:10	45	6,8	5,0	15,8
Гороховая обезжиренная мука	0,25	1:10	50	6,7	5,0	2,8	0,01	1:10	60	6,7	4,0	20,8	0,35	1:10	45	6,7	4,0	7,1
Из зерновых культур
Пшеничные отруби	0,24	1:9	55	6,7	3,0	9,3	0,14	1:9	70	6,5	2,0	9,1	0,12	1:9	45	6,7	2,0	9,2
Солодовая дробина	0,24	1:10	50	6,2	4,0	11,3	0,14	1:10	70	6,2	4,0	10,6	0,35	1:9	45	6,2	4,0	11,0

Известно, что часть растительного белка находится в сырье в связанной с углеводами форме и не переходит в экстракт. Учитывая это, считали целесообразным создать композицию, включающую как протеолитические, так и ферментные препараты карбогидразного действия: целлюлазы, в-глюканазы, амилазы.

При использовании солодовой дробины показана эффективность совместного действия Нейтразы и Ксилозима, проявляющаяся в увеличении выхода солодового белка до 14,8 % к СВ.

Лучший результат для соевого белка получен с использованием композиции, состоящей из Нейтразы, Целлюкласта и Промальта. Установлено увеличение выхода соевого белка до 94,8 % к исходному содержанию в сырье, а также сокращение продолжительности процесса до 3 ч (рис. 21).

Рис. 21. Влияние продолжительности гидролиза на выход соевого белка

Для оптимизации состава композиции, состоящей из трех ферментных препаратов, были проведены экспериментальные исследования по схеме ортогонального центрального композиционного плана.

По результатам эксперимента было составлено уравнение второго порядка

У = 34,5 + 332х₁ + 7,6х₂ - 0,4х₃ - 224х₂х₃ - 1520х₁х₃ - 10800х₁² + 384х₃²,

где х₁, х_2, х_{3 -} дозы Промальта, Нейтразы и Целлюкласта.

График поверхности отклика при постоянной величине х₃ и варьировании переменных х₁, х₂ позволил найти оптимальное соотношение трех препаратов в композиции как 1:3,5:17,5 (рис. 22). При этом максимальный выход соевого белка составил 39,5 % , или 98,7 % от максимального содержания в исходном сырье.

Рис. 22. Зависимость выхода соевого белка от доз и соотношения ферментных препаратов в составе композиции: а - доза Целлюкласта 0,25 ед/г сырья; б - доза Целлюкласта 0,12 ед/г сырья

На основании результатов исследований разработана принципиальная схема получения белковых изолятов из бобовых культур (рис. 23).



Рис. 23. Принципиальная технологическая схема получения белковых изолятов с использованием биокатализа

В главе 6.2 представлены данные разработки биокаталитической технологии пектина из традиционного промышленного сырья: яблочных выжимок, свекловичного и цитрусового жома, и нетрадиционного - тыквенных и солодовых ВСР.

Показано, что эффективность биокатализа выражается в увеличении выхода пектина при сохранении его природной желирующей способности. Лучший результат по выходу яблочного высокоэтерифицированного пектина отмечен при использовании ПТЭ Bacillus subtilis (Мацерина Г20Х) - 14,6 %. Увеличение выхода по сравнению с контролем (кислотный гидролиз) - около 40 % (рис. 24).

Наибольший выход низкоэтерифицированного свекловичного пектина установлен при применении Целлюкласта - 22,1 % к массе сырья.

Известно, что при традиционном кислотном способе выделения пектиновых веществ желирующая способность пектина снижается в результате действия кислот (рН 1,9-2,0) и высоких температур (до 110 єС). В связи с этим была изучена зависимость желирующей способности пектина от температуры биокатализа.

Рис. 24. Влияние продолжительности ферментативной обработки на выход яблочного пектина

Установлено, что температура процесса выше 65 °С негативно влияет на прочность желе независимо от используемого вида ферментного препарата (рис. 25).

Рис. 25. Влияние температуры ферментативной обработки на желирующую способность яблочного пектина

Выбраны рациональные дозы ферментных препаратов, входящих в композицию: Мацерин Г20Х - 440 ед/г, Целлюкласт - 3,8 ед/г, Промальт - 0,05 ед/г сырья или соответственно 0,1; 0,075 и 0,05% к массе сырья.

Отмечен рост желирующей способности при использовании энзимной композиции, включающей Мацерин Г20Х, Промальт, Целлюкласт, до 150 °SAG. Сделан вывод о необходимости использования "ограниченного" во времени ферментативного гидролиза пектинсодержащего сырья - 3 ч (рис. 26).

Рис. 26. Зависимость желирующей способности яблочного пектина от продолжительности ферментативной обработки

Показатель экстрагируемости пектина и его выход зависят также от соотношения твердой и жидкой фазы, т.е. гидромодуля (ГМ). Определен рациональный ГМ для яблочных выжимок - 1:14 (рис. 27).

1

ГМ 1:4	ГМ 1:10	ГМ 1:14

Рис. 27. Соотношение доли растворимого и нерастворимого пектина в зависимости от гидромодуля

Установлены режимы получения низкоэтерифицированного пектина (СЭ=30 %) с использованием препаратов пектинэстеразы (из культур Aspergillus foetidus, Aspergillus awamori или Aspergillus aculeutus): t=40 °С, доза пектинэстеразы - 20 ед /г пектина и продолжительность процесса 2 ч. Для достижения степени этерификации (СЭ) 20 % требуется доза ПЭ - 40 ед/г пектина при продолжительности процесса деэтерификации 4 ч при той же температуре (рис. 28).

Рис. 28. Влияние продолжительности ферментативного процесса на СЭ пектина

На основании полученных рациональных режимов процесса биокатализа, последующих процессов очистки, концентрирования и сушки пектина разработана принципиальная схема и ТД его производства, отличающаяся от традиционной заменой двух стадий: кислотного гидролиза на ферментативный и спиртоосаждения пектина на его выделение и очистку методом ультрафильтрации (рис. 29).

Рис. 29. Принципиальная технологическая схема производства пектина

Сочетание этих двух приемов ферментативного катализа и мембранной очистки экстрактов обеспечивает увеличение выхода пектина на 355% по сравнению с традиционной технологией. Способ получения яблочного и цитрусового пектина запатентован (а.с. № 1658437, 1993 г., патенты РФ № 218151, 2002 г. и № 2262865, 2005 г.).

В главе 6 (раздел 3) представлены данные разработки биокаталитической технологии нерастворимых ПВ.

Исследован ферментативный процесс гидролиза крахмала в сырье с наибольшим его содержанием в пшеничных отрубях. Критерием оценки эффективности действия ферментных препаратов являлся выход ПВ, выраженный в % к исходному содержанию в сырье (ИСС) (рис. 30).

Рис. 30. Влияние амилолитических ферментов на выход ПВ из пшеничных отрубей

*- исходное содержание ПВ в пшеничных отрубях - 37,2 г/100 г сырья

Установлена эффективность гидролиза пшеничного крахмала препаратом Термамил - выход ПВ до 46 % к ИСС. Значительно меньший эффект получен с амилоглюкозидазой, что обусловлено различием их действия на субстрат. Показано, что при получении ПВ достаточным является гидролиз крахмала до растворимых декстринов, т.е. предпочтительным выбором является Термамил.

Исследовали влияние ферментных препаратов на выход ПВ из ВСР с наибольшим содержанием белка, т.е. пшеничных отрубей и солодовой дробины. Отмечен невысокий выход ПВ из пшеничных отрубей при использовании 3-х исследуемых препаратов: Промальта (ПМ), Вискозима (ВИС) и Термамила (ТМ) - не более 60 %.

Наилучший эффект при действии на субстраты солодовой дробины получен с ферментным препаратом Бирзим (БР) - выход ПВ - 97,6 %, максимальный выход тыквенных ПВ отмечен при использовании ВИС - на уровне 90 %; наибольший выход яблочных ПВ отмечен при действии ТМ - 93,1 % и ВИС - 90,0 %. Данные согласуются с субстратным составом этих ВСР и технологией первичной переработки исходного сырья (рис. 31).

а	б

Рис. 31. Влияние продолжительности ферментативного процесса на выход пищевых волокон: а - из пшеничных отрубей; б - из солодовой дробины

Определены режимы ферментативной обработки ВСР при получении ПВ, которые позволили достичь высоких показателей выхода ПВ (> 90 %) из ВСР: солодовой дробины, яблочных и тыквенных выжимок (табл. 6).

Таблица 6

Рациональные режимы биокатализа при получении ПВ*

Используемые ВСР	Ферментные препараты	Режимы биокатализа	Выход ПВ, % к ИСС
		ГМ	Т,°С	Доза ФП, % к массе сырья
Пшеничные отруби	ТМ	1:10	70	0,02	66,8
	ПМ	1:10	70	0,025	65,8
	ВИС	1:10	50	0,03	50,2
Солодовая дробина	БР	1:9	50	0,15	97,2
	ПМ	1:9	70	0,05	94,3
Свекловичный жом	ВИС	1:10	50	0,03	84,9
	ПМ	1:10	70	0,05	82,7
	ТМ	1:10	70	0,02	82,1
Яблочные выжимки	ТМ	1:11	70	0,02	93,1
	ПМ	1:11	70	0,025	92,9
	ВИС	1:11	50	0,03	90,0
Тыквенные ВСР	ВИС	1:9	50	0,025	94,5
	ТМ	1:9	70	0,02	92,1
	ПМ	1:9	70	0,05	92,0

Показано, что для таких видов ВСР, как пшеничные отруби и свекловичный жом, не достигается выход ПВ на уровне, соответствующем другим источникам. Исходя из этого, создана композиция МФП, включающая ВИС и ТМ, использование которой позволило увеличить выход ПВ, например, из пшеничных отрубей до 98,2 %.

В заключение сделан вывод о том, что в технологии ПВ перспективными источниками являются как традиционно используемые за рубежом пшеничные отруби, яблочные выжимки, так и неиспользуемые ранее ВСР - солодовая дробина и тыквенный и свекловичный жом. Принимая во внимание высокое содержание компонентов ПВ в солодовой дробине - 78,6 %, а также выход ПВ на уровне 98 %, этот вид отходов является наиболее перспективным из исследуемых. Учитывая, что солодовая дробина содержит значительное количество белка, считали целесообразным разработать технологию комплексной переработки данного вида ВСР при одновременном получении двух продуктов - белка и ПВ (рис. 32). Новая биокаталитическая технология позволяет получить порошкообразные препараты солодового белка и ПВ с чистотой на уровне 92-93 %.

Новые биокаталитические технологии белка и растительных ПВ запатентованы (решение о выдаче патентов № 2007133464/20 и № 2007133465/20 от 28.04.2008).

Глава 7 «Изучение показателей качества пищевых ингредиентов белковой и углеводной природы».

Белковые препараты

По функционально-технологическим свойствам белковые препараты, полученные с использованием ферментативной обработки соевого и горохового сырья, практически не уступают коммерческим аналогам, а по некоторым показателям превосходят их: так, в экспериментальном соевом изоляте содержание белка - 94,8 %, тогда как в коммерческом препарате Майсол И - 90,2 %. Содержание белка в экспериментальном концентрате белка гороха - 70,8 %, что в несколько раз выше, чем в коммерческом препарате горохового белка - 27,0 %. Растворимость соевого изолята (при 70 °С) - 85,8 %, тогда как в зарубежном аналоге (Майсол И) - 79,1 %. По показателю ВУС экспериментальный концентрат белка гороха несколько превосходит ВУС зарубежного аналога (4,4 и 4,0 г/г соответственно).

Полученные экспериментальные образцы белковых препаратов из ВСР по содержанию белка относятся к концентратам - содержание белка в образцах из пшеничных отрубей - 67,5 %, из солодовой дробины - 68, 0 %.

Лучшая растворимость при сравнении данных образцов отмечена у солодового белкового препарата - 70 %. При сравнении ККГ исследуемые белковые препараты из ВСР (пшеничные и солодовые) находятся на одном уровне (31-32 %) и несколько уступают препаратам из нетрадиционного сырья - гороха. Однако экспериментальный препарат белка гороха значительно превосходит зарубежный коммерческий препарат фирма «Паула» (Польша) из аналогичного источника (23,0 и 18,0 соответственно).

Наибольшая устойчивость эмульсий отмечена в случае использования белковых концентратов из пшеничных отрубей и гороховой муки - 52,5 и 51,0 % соответственно.

Изучение аминокислотного состава экспериментальных белковых препаратов, полученных методом биокатализа, показало присутствие дефицитных аминокислот: в препарате из пшеничных отрубей - изолейцина, из солодовой дробины - лизина, а также повышенное в сравнении с эталоном ФАО/ВОЗ содержание фенилаланина и тирозина в препарате из солодовой дробины.

Высоко- и низкоэтерифицированные пектины

Показатели качества полученных промышленных образцов пектина, в том числе желирующая способность (150 °SAG), степень этерификации (68-72 %) и содержание галактуроновой кислоты (81-82 %) позволяют считать данный продукт пищевым высокоэтерифицированным пектином, соответствующим лучшим зарубежным аналогам: фирмы «Даниско» (Дания) и «Хербстрайт энд фокс» (Германия).

Установлена высокая комплексообраующая способность никоэтерифицированных пектинов, полученных с использованием микробной пектинэстеразы из культуры Aspergillus awamori в рациональных режимах. Уровень связывания стронция достигает 81 %.

Нерастворимые ПВ

Данные ФТС свидетельствуют о наибольшей ВУС экспериментальных ПВ из свекловичных и тыквенных ВСР - 8,0 и 7,9 г/г соответственно. По показателю ЖУС преимущество имеют ПВ из пшеничных отрубей (7,0 г/г).

Сравнительные показатели качества опытно-промышленных ПВ, полученных по новой биокаталитической технологии, в основном соответствуют зарубежным аналогам: яблочной клетчатке AF 400 и препарату Витацель.

Не имеющие аналогов препараты ПВ, полученные из солодовых и тыквенных ВСР, по показателям качества схожи с экспериментальными препаратами из яблочных и свекловичных ВСР.

ОСНОВНЫЕ РЕЗУЛЬТАТЫ И ВЫВОДЫ

1. Разработана параметрическая модель направленного биокатализа, учитывающая основные управляющие и управляемые параметры процесса. Научно обоснована концепция и методология направленного биокатализа, определены пути их реализации в технологии продуктов и ингредиентов белковой и полисахаридной природы.

2. Изучен субстратный состав нетрадиционного сырья и ВСР - источников пищевых продуктов и ингредиентов.

3. Скрининг МФП позволил выбрать наиболее активные по действию:

· на белковые субстраты - Нейтраза (продуцент Bacillus subtilis) и Промальт (продуцент acillus subtilis и Penicillium emersonii при их совместном культивировании);

· на полисахариды растений: пектинтрансэлиминазы Bacillus macerans и Bacillus subtilis, амилаза Bacillus licheniformis, целлюлаза Trichoderma reesei, ксиланаза Trichoderma viride, в-глюканаза Bacillus subtilis;

· на гликозиды растений - в-глюкозидазы из культур Aspergillus awamori и Clostridium thermofillum (генно-инженерный препарат).

4. Охарактеризованы кинетические параметры и каталитические свойства МФ:

· наибольшее сродство к глюкану ячменя отмечено у глюканазы Bacillus subtilis (К_м = 4,4 мг/см³); к высокоэтерифицированному пектину - у ПТЭ Bacillus macerans (К_м = 27,0 мг/см³);

· среди протеаз высокое сродство к белковым субстратам впервые выявлено у препарата из культуры Bacillus subtilis: К_м = 23,0 мг/см³ и 27,0 мг/см³ для соевого и горохового белка соответственно.

5. Показана высокая субстратная специфичность в-глюкозидазы Clostridium thermofillum, полученной генно-иженерным способом, и препарата из культуры Aspergillus awamori (45-кратная очистка, в гомогенной форме) к выделенным из эфиромасличной розы флавоноидам, нарингину из цитрусовых плодов и рутину из культуры чая. Механизм действия гомогенной в-глюкозидазы Aspergillus awamori на глюкозиды эфиромасличной розы проявляется в отщеплении глюкозы от ароматического агликона. Установлен синергизм в действии в-глюкозидазы и целлюлолитических ферментов (эндо- и экзо-целлобиогидролазы) в процессе выделения эфирного розового масла.

6. Хроматографически идентифицированы продукты гидролиза полисахаридных фракций, подтверждающие связь пектиновых веществ с арабано-галактановым комплексом, а также продукты протеолиза белков бобовых и зерновых культур: наличие фракции пептидов с ММ 14-36 кДа в препарате соевого белка и ММ 20-29 и 45-66 кДа пшеничного и солодового белка соответственно свидетельствует о гидролизе белковых субстратов до растворимых форм.

7. Обоснована и экспериментально подтверждена эффективность использования МФП при действии на природные субстраты используемого сырья: эфиромасличного, чайного, цитрусового, морских водорослей, проявляющаяся в увеличении выхода продукции и/или улучшении её качества. Усовершенствованы на основе биокатализа технологии: эфирных масел, различных видов чая, цитрусовых соков, пищевых экстрактов, агара.

8. Разработана биокаталитическая технология белка из бобовых и зерновых культур:

· установлена перспективность использования для получения белка из ВСР - солодовой дробины и пшеничных отрубей;

· методом математического планирования найдены оптимальные дозы и соотношение Нейтразы, Промальта и Целлюкласта в композиции, обеспечивающей максимальный выход соевого белка до 39,5 % к СВ; а также Нейтразы и Ксилокома для увеличения выхода белка: из пшеничных отрубей на 10 %, из солодовой дробины на 15 % к СВ;

· рациональные режимы биокатализа при выделении белка бобовых культур и зерновых ВСР - для Нейтразы 50 °С, для Промальта 70 °С, доза - 0,25-0,5 ед/г сырья, рН естественный для сырья (6,5-7,0), ГМ 1:8-1:10, продолжительность процесса - 2-6 ч.

9. Представлена биокаталитическая технология высоко- и низкоэтерифицированных пектинов:

· наиболее перспективным нетрадиционным пектинсодержащим сырьем для России являются тыквенные ВСР наряду с традиционными - яблочным и свекловичным жомом;

· технологически обоснована эффективность замены кислотного гидролиза на ферментативный: увеличение выхода пектина составляет до (35±5) %;

· создана энзимная композиция на основе ПТЭ (основного фермента) и карбогидраз, позволяющая достичь максимального выхода высокоэтерифицированного яблочного пектина с сохранением его природных желирующих свойств: 150 °SAG, СЭ - 80 %;

· рациональные режимы биокатализа: t=45 °С для ПТЭ, 70 °С для Промальта и 55 °С для Целлюкласта; рН - естественный для сырья (5,2-6,0), гидромодуль 1:12-1:14;

· экспериментально обосновано получение низкоэтерифицированных пектинов с заданной СЭ (20-30 %), обусловленное использованием микробной пектинэстеразы.

10. Разработана новая биотехнология ПВ:

· установлена технологическая эффективность использования в качестве источника ПВ: традиционных для зарубежного производства пшеничного и яблочного сырья, и нетрадиционных - тыквенных и солодовых ВСР;

· состав и содержание продуктов гидролиза белков и полисахаридов ВСР свидетельствуют о предпочтительном выборе Термамила и Вискозима для яблочных, тыквенных, пшеничных ВСР и Бирзима для получения солодовых ПВ;

· установлена определяющая роль биокатализа в технологии ПВ, основанная на гидролизе крахмала и белка до растворимых форм с последующим удалением продуктов гидролиза и получение очищенной формы нерастворимых ПВ;

· показана эффективность использования энзимной композиции, включающей Термамил и Вискозим, для обработки яблочных и пшеничных ВСР - достигается увеличение выхода ПВ на 50-58 %. Рациональные режимы биокатализа - t для: Термамила - 70 °С, Вискозима - 50 °С; дозы для: Термамила - 0,02 %, Вискозима - 0,03 % к массе ВСР, продолжительность процесса - 2 ч.

11. Разработаны принципиальные схемы получения и ТД на производство препаратов белка, пектина и нерастворимых ПВ.

12. Представленые данные апробации полученных ингредиентов свидетельствуют о целесообразности их использования: белковых препаратов в составе мясных продуктов (вареные колбасы), пектина в составе молочных продуктов (йогурты, пудинги) и кондитерских изделий (желейные десерты), нерастворимых пищевых волокон - в производстве вареных колбас и пшеничного хлеба.

СПИСОК РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ

Монографии

1. Румянцева Г.Н. Целлюлазы микроорганизмов, р. «Очистка и характеристика двух типов в-глюкозидаз; целлобиазы и арилглюкозидазы» / Г.Н. Румянцева, Н.А. Родионова. - М.: Наука, 1981. - 344 с.

2. Румянцева Г.Н. Биокаталитические технологии пищевых белков и полисахаридов: монография. - М.: МГУПБ, 2007. - 233 с.

3. Румянцева Г.Н. Научные и практические аспекты использования ферментативного катализа в пищевой промышленности: монография / Г.Н. Румянцева, Н.И. Дунченко. - М.: МГУПБ, 2007. - 101 с.

Учебные издания

4. Румянцева Г.Н. Биотехнология биологически активных веществ: учебное пособие. Раздел «Использование биокатализа для получения пектина» / Г.Н. Румянцева, А.А. Свитцов; под ред. И.М. Грачевой, Л.A. Ивановой. - М.: Элевар, 2006.- 453 с.

Обзоры

5. Ревишвили Т.О. Эффективность ферментативного катализа чая в технологии чая / Т.О. Ревишвили, Р.Н. Гребешова, Г.Н. Румянцева, Г.О. Гегечкори // Обзор. Серия «Пищевая промышленность» - Тбилиси: ГрузНИИНТИ, 1987. вып. 1. - 32 с.

6. Гребешова Р.Н. Использование в-глюкозидазы в производстве эфирных масел / Р.Н. Гребешова, Г.Н. Румянцева. - М.: ВНИИСЭНТИ, 1994. - 36 с.

Изобретения

7. Авторское свидетельство РСФСР №907060 Способ получения розового масла / Румянцева Г.Н., Гребешова Р.Н., Калунянц К.А., Артемьева З.В., Ломакина Р.Д.

7.1. Патент США № 403010251, Способ получения розового масла / Румянцева Г.Н., Гребешова Р.Н., Калунянц К.А., Артемьева З.В., Ломакина Р.Д.

7.2. Патент Турции № 20678, 1983 Способ получения розового масла / Румянцева Г.Н., Гребешова Р.Н., Калунянц К.А., Артемьева З.В., Ломакина Р.Д.

7.3. Патент Болгарии № 46387, 1983 Способ получения розового масла / Румянцева Г.Н., Гребешова Р.Н., Калунянц К.А., Артемьева З.В., Ломакина Р.Д.

7.4. Патент Франции № 2448567, 1983 Способ получения розового масла / Румянцева Г.Н., Гребешова Р.Н., Калунянц К.А., Артемьева З.В., Ломакина Р.Д.

7.5. Патент Италии № 197669 A/BD,1983 Способ получения розового масла / Румянцева Г.Н., Гребешова Р.Н., Калунянц К.А., Артемьева З.В., Ломакина Р.Д.

7.6. Патент Марокко № 64/1749, 1983 Способ получения розового масла / Румянцева Г.Н., Гребешова Р.Н., Калунянц К.А., Артемьева З.В., Ломакина Р.Д.

7.7. Патент Алжира № 5744, 1983 Способ получения розового масла / Румянцева Г.Н., Гребешова Р.Н., Калунянц К.А., Артемьева З.В., Ломакина Р.Д.

8. Авторское свидетельство №1069215 Способ производства лао-ча / Ревишвили Т.О., Хоперия P.M., Кутателадзе Л.Ш., Гребешова Р.Н., Румянцева Г.Н., Гегечкори Г.О., Хинвели Т.Г. - 1982.

9. Авторское свидетельство СССР №1115264 Способ производства черного чая / Ревишвили Т.О., Харебава Л.Г., Кутателадзе Л.Ш., Гребешова Р.Н., Гегечкори Г.О., Румянцева Г.Н. - 1985.

10. Авторское свидетельство СССР №1188931 Способ производства пектина / Ревишвили Т.О., Гребешова Р.Н., Румянцева Г.Н., Сурманидзе Д.А. -1986.

11. Авторское свидетельство СССР №1717072 Способ получения гидролизата из форменных элементов крови / Зырина Л.К., Веретова Т.В., Кракова В.З., Румянцева Г.Н. - 1991.

12. Авторское свидетельство СССР №1763440 Способ получения агара из водорослей / Румянцева Г.Н., Гребешова Р.Н., Девлишева Д.А., Вилке Б.А. - 1992.

13. Авторское свидетельство СССР №1658437 Способ производства пектина / Румянцева Г.Н., Гребешова P.Н., Папунидзе Г.Р., Романенко Е.Н.-1993.

14. Патент СССР № 1806194 Штамм Aspergillus awamori-18 - продуцент внеклеточной в-глюкозидазы / Зуева Р.В., Павлова Н.М., Румянцева Г.Н. и др. - 11.06.1994.

15. Патент № 218151 Способ производства пектиновых препаратов / Румянцева Г.Н., Бравова Г.Б., Артемова Л.Г. - 27.04.2002.

16. Патент на изобретение РФ № 2262865 Способ производства пектина / Румянцева Г.Н., Черников Д.Л. - 27.10.2005.

17. Решение о выдаче патента № 2007133464/20 (036554) от 28.04.2008 Способ получения белка и масла из бобовых культур / Румянцева Г.Н., Осадько М.И. Заявл. 07.09.2007.

18. Решение о выдаче патента № 2007133465/20 (036555) от 28.04.2008 Способ получения растительных пищевых волокон / Румянцева Г.Н., Макурина С.В. Заявл. 07.09.2007.

Статьи в журналах, рекомендованных ВАК РФ

19. Румянцева Г.Н. Свойства в-глюкозидазы из целлюлолитического гриба Geotrichum candidum / Г.Н. Румянцева, Н.А. Родионова // Биохимия /Академии наук СССР. - 1982. - №1. - С. 108-114.

20. Румянцева Г.Н. Влияние ферментных препаратов на выход экстракта чая / Г.Н. Румянцева, Т.О. Ревишвили., Р.Н. Гребешова, Г.О. Гегечкори // Прикладная биохимия и микробиология. - 1984. - т. ХХ. - вып. 4. - С. 556-559.

21. Ревишвили Т.О. Ферменты при изготовлении чая / Т.О. Ревишвили, Г.Н. Румянцева, Р.Н. Гребешова, Г.О. Гегечкори // Пищевая промышленность. - 1988. - №9. - С. 6.

22. Румянцева Г.Н. Мацерация растительных видов пищевого сырья / Г.Н. Румянцева, Р.Н. Гребешова, Д.А. Заранян // Пищевая промышленность. - 1991. - №5. - С. 69-72.

23. Румянцева Г.Н. Использование амилолитических ферментов в технологии мальтозных сиропов / Г.Н. Румянцева, Р.Н. Гребешова, Д.А. Заранян, И.Л. Подольная // Пищевая промышленность. - 1993. - №3. - С. 50-55.

24. Румянцева Г.Н. Использование ферментов в пищевой промышленности: обзор / Г.Н. Румянцева // Пищевая промышленность. - 1994. - №1-3. - 18 с.

25. Румянцева Г.Н. Модифицированный пектин радиопротекторного действия: получение и свойства / Г.Н. Румянцева // Хранение и переработка сельхозсырья. - 1998. - № 12. - С. 30-33.

26. Румянцева Г.Н. Экстракция пектина из тыквенного жома с помощью отечественных ферментных препаратов / Г.Н. Румянцева, О.А. Маркина, Н.М. Птичкина // Хранение и переработка сельхозсырья. - 2002. - №6. - С. 33-35.

27. Румянцева Г.Н. Технологические режимы биокатализа в процессе выделения пищевого пектина / Г.Н. Румянцева, О.А. Варфоломеева // Хранение и переработка сельхозсырья. - 2004. - № 4. - С. 30-32.

28. Румянцева Г.Н. Влияние карбогидраз и лиаз микробного происхождения на субстраты пектинсодержащего сырья / Г.Н. Румянцева, О.А. Варфоломеева // Хранение и переработка сельхозсырья. - 2004. - № 8. - С. 30-33.

29. Румянцева Г.Н. Влияние ферментных препаратов протеолитического действия на белоксодержащее сырье // Г.Н. Румянцева, М.Н. Евсеичева // Хранение и переработка сельхозсырья. - 2005. - № 7 - С. 31-32.

30. Румянцева Г.Н. Сохранение желирующей способности пектина в процессе его выделения из яблочных выжимок / Г.Н. Румянцева, О.А. Варфоломеева, Н.А. Киндра // Хранение и переработка сельхозсырья. - 2006. - № 7. - С. 25-28.

31. Румянцева Г.Н. Роль микробных ферментов при получении соевого белка / Г.Н. Румянцева, М.И. Осадько // Хранение и переработка сельхозсырья. - 2007. - № 2. - С. 53-54.

32. Осадько М.И. Режимы ферментативной обработки сырья при получении соевого белка / М.И. Осадько, Г.Н. Румянцева // Хранение и переработка сельхозсырья. - 2007. - № 3. - С. 46-48.

33. Румянцева Г.Н. Биокаталитический способ получения пищевых волокон из растительного сырья / Г.Н. Румянцева, С.В. Макурина // Хранение и переработка сельхозсырья. - 2007. - №8. - С. 48-52.

Другие основные опубликованные работы

34. Румянцева Г.Н. Ферменты для получения пектина: механизм действия и применение / Г.Н. Румянцева // Вестник Агропрома. - 1993. - Вып. 3. - С. 17-22.

35. Румянцева Г.Н. Микробные ферментные препараты в производстве пектина: механизм действия и эффективность применения / Г.Н. Румянцева // Вестник РАСХН. - 1993. - №12. - 25-32.

36. Румянцева Г.Н. О природе загрязнений мембран в процессе концентрирования пектиновых экстрактов / Н.В. Горячий, А.А. Свитцов, М.М. Марданян, Г.Н. Румянцева, О.А. Варфоломеева // Мембраны, серия: критические технологии. - 2003. - № 2. - С. 40-44.

37. Румянцева Г.Н. Свойства белков сои и гороха, полученных биотехнологическим способом / Г.Н. Румянцева, М.И. Осадько // Мясная индустрия. - 2005. - №2. - С. 44-45.

38. Свитцов А.А. Новая технология производства пектина / А.А. Свитцов, Н.В. Горячий, Г.Н. Румянцева // Экономика и производство. - 2005. - № 1. - С. 57-61.

39. Макурина С.В. Сравнительная характеристика функционально-технологических свойств пищевых волокон / Г.Н. Румянцева, С.В. Макурина // Мясная индустрия. - 2006. - №6. - С. 28-29.

40. Румянцева Г.Н. Использование ферментов - новое направление в эфиромасличной промышленности / Г.Н. Румянцева // Основные направления научных исследований по интенсификации эфиромасличного производства: материалы IV симпозиума по эфиромасличным растениям и маслам. - Симферополь, 1985. - С. 57-59.

41. Румянцева Г.Н. Субстратная специфичность ферментов, предназначенных для чайной промышленности / Г.Н. Румянцева // Научно-технический прогресс и проблемы его ускорения в чай-продуктовом подкомплексе страны: материалы Всесоюзной конференции. - Махарадзе-Анасеули, 1987. - С. 12-14.

42. Румянцева Г.Н. Новая область применения ферментов - технология чая / Г.Н. Румянцева // Ферменты народному хозяйству: материалы Всесоюзной научно-практической конференции. - Черновцы, 1990. - С. 108-109.

43. Румянцева Г.Н. Биотехнологические способы получения пектиновых веществ / Г.Н. Румянцева // Научные и практические пути решения проблемы производства пектина: материалы 3 Всесоюзного научно-технического семинара с Международным участием. - Краснодар, 1993. - С. 102-107.

44. Румянцева Г.Н. Биокатализ в производстве биологически активных и функциональных ингредиентов пищи / Г.Н. Румянцева // Биотехнология: состояние и перспективы развития: материалы IV Московского Международного конгресса. - М., 2007. - С. 210.

45. Румянцева Г.Н. Получение и свойства гомогенной в-глюкозидазы / Г.Н. Румянцева, Н.А. Родионова / /Материалы IV Всесоюзного биохимического съезда. - Рига, 1979. - С. 201-204.

46. Румянцева Г.Н. Влияние микробных ферментных препаратов на выход и качество розового масла / Г.Н. Румянцева, Р.Л. Гребешова // Материалы конференции по эфирным маслам. - Тбилиси, 1980. - С. 89-91.

47. Румянцева Г.Н. Применение ферментов, расщепляющих полисахариды, в отраслях промышленности / Г.Н. Румянцева, Р.Н. Гребешова, Н.А. Родионова // Материалы Международного симпозиума по биоконверсии растительного сырья. -Рига, 1982. - С. 57-60.

48. Гегечкори Г.О. Результаты производственного испытания технологии черного чая с применением комплексных ферментных препаратов / Г.О. Гегечкори, Т.О. Ревишвили, Г.Н. Румянцева // Улучшение качества чая и разработка новых видов чайной продукции: тезисы научно-технической конференции. - Махарадзе-Анасеули, 1985. - С. 21-23.

49. Гегечкори Г.О. Применение гидролитических ферментных препаратов для получения лао-ча / Г.О. Гегечкори, Р.Н. Гребешова, Г.Н. Румянцева // Улучшение качества чая и разработка новых видов чайной продукции: тезисы научно-технической конференции. - Махарадзе-Анасеули, 1985. - С. 44-46.

50. Румянцева Г.Н. Применение протеолиза при получении пищевого белка / Г.Н. Румянцева, Р.Н. Гребешова, Э. Юришова // Новые источники пищевого белка: сборник докладов Всесоюзной конференции. - Кобулети, 1986. - С. 97-99.

51. Румянцева Г.Н. Биотехнологические приемы переработки сырья и отходов производства в процессах получения пищевого белка / Г.Н. Румянцева, Р.Н. Гребешова, Э. Юришова // Разработка процессов получения комбинированных продуктов питания: материалы III Всесоюзной конференции. - М., 1988. - С. 67-69.

52. Румянцева Г.Н. Очистка и характеристика двух типов в-глюкозидаз: целлоюиазы и арил-в-глюкозидазы / Г.Н. Румянцева, Н.А. Родионова, Л.И. Мартинович // Сборник докладов Всесоюзного симпозиума по инженерной энзимологии. - Вильнюс, 1988. -С. 83-93.

53. Румянцева Г.Н. Субстратная специфичность препарата в-глюкозидазы Clostridium thennofullum, синтезируемой в клетках E.coli / Г.Н. Румянцева, Р.Н. Гребешова, М.А. Могутов // Материалы Международного симпозиума по генной инженерии. - М., 1989. - С. 95-97.

54. Румянцева Г.Н. Энзиматический способ получения и свойства цитрусового пектина / Г.Н. Румянцева, Р.Л. Гребешова, Г.Р. Папунидзе // Химия пищевых веществ. Свойства и использование биополимеров в пищевых продуктах: материалы Всесоюзной конференции. - Могилев, 1990. - С. 34-37.

55. Румянцева Г.Н. Биотехнологические способы получения функциональных компонентов / Г.Н. Румянцева, А.И. Жаринов // Пища, экология, человек: материалы I Международной научно-технической конференции. - М.: МГУПБ, 1996. - С. 25.

56. Румянцева Г.Н. Комплексная переработка семян гороха с использованием биокатализа / Г.Н. Румянцева, Н.Г. Кроха, Н.И. Агаларова, В.Т. Дианова // Пища, экология, человек: материалы II Международной научно-технической конференции. - М.: МГУПБ, 1997. - С.32-34.

57. Румянцева Г.Н. Совместное действие протеаз и целлюлаз при получении пищевого белка / Г.Н. Румянцева, В.Н. Даниленко // Пищевой белок и экология: материалы Международной конференции. - М.: МГУПБ, 2000. - С. 37-39.

58. Румянцева Г.Н. Полиуронидные комплексообразователи радиопротекторного действия / Г.Н. Румянцева, Н.Г. Кроха, В.Т. Дианова, Е.Е. Браудо // Пища, экология, человек: материалы VI Международной научно-технической конференции. - M.: МГУПБ, 2001. - С. 26-31.

59. Румянцева Г.Н. Использование отечественных ферментных препаратов для получения пектина из жома тыквы / Г.Н. Румянцева, О.А. Маркина, Н.М. Птичкина // Биотехнология. Состояние и перспективы развития: материалы Международного конгресса. - М., 2002. - С. 250-251.

60. Румянцева Г.Н. Сравнительное действие различных ферментных препаратов при получении яблочного пектина / Г.Н. Румянцева, О.А. Варфоломеева // Материалы Международной научно-практической конференции ГУ ВНИТИ ММС и ППЖ РАСХН. - Волгоград, 2003. - С. 35-36.

61. Румянцева Г.Н. Биотехнологический метод получения пищевых добавок на основе полисахаридов / Г.Н.Румянцева, О.А. Варфоломеева // Биотехнология: состояние и перспективы развития: материалы II Московского Международного конгресса. - М., 2003. - С. 125.

62. Горячий Н.В. Бескислотно-бесспиртовая технология производства пектина / Н.В. Горячий, А.А. Свитцов, Г.Н. Румянцева, О.А. Варфоломеева, Д.Б. Кулифеев, М.Л. Минкин // Материалы II съезда общества биотехнологов России. - М., 2004. - С. 90-91.

63. Варфоломеева О.А. Исследование взаимодействия низкоэтерифицированного пектина и кальция и изучение свойств полученных гелей / О.А. Варфоломеева, Г.Н. Румянцева // Значение биотехнологии для здорового питания и решения медико-социальных проблем: материалы научно-практической конференции. - Калининград, 2005. - С. 68.

64. Румянцева Г.Н. Влияние режимов протеолиза на выход белка из растительных источников / Г.Н. Румянцева, М.Н. Евсеичева // Биотехнология-2005: материалы научно-практической конференции. - Пущино, 2005. - С. 109-110.

65. Румянцева Г.Н. Получение дополнительных продуктов из сырья сои / Г.Н. Румянцева, А.А. Свитцов, М.И. Осадько // Биотехнология-2005: материалы научно-практической конференции. - Пущино, 2005. - С. 112-114.

66. Румянцева Г.Н. Сравнительные данные о ферментных препаратах, катализирующих протеолиз белков из бобовых культур / Г.Н. Румянцева, М.И. Осадько // Значение биотехнологии для здорового питания и решения медико-социальных проблем: тезисы научно-практической конференции. - Калининград, 2005. - С. 84-85.

67. Румянцева Г.Н. Биотехнологический способ получения изолятов белка бобовых культур / Г.Н. Румянцева, М.И. Осадько // Биотехнология. Состояние и перспективы развития: материалы III Московского Международного конгресса. - М., 2005. - С. 150-152.

68. Румянцева Г.Н. Изучение зернового сырья как источника получения пищевого белка / Г.Н. Румянцева, М.Н. Евсеичева // Биотехнология. Состояние и перспективы развития: материалы III Московского Международного конгресса. - М., 2005. - С. 125-126.

69. Румянцева Г.Н. Получение ПВ из растительного сырья / Г.Н. Румянцева, С.В. Макурина // Биотехнология. Состояние и перспективы развития: материалы III Московского Международного конгресса. - М., 2005. - С. 147-148.

70. Румянцева Г.Н. Возможность использования ферментных препаратов при получении пищевых волокон / Г.Н. Румянцева, С.В. Макурина // Биотехнология. Состояние и перспективы развития: материалы IV Московского Международного конгресса. - М., 2007. - С. 211.

71. Ptichkina N.M. Pectin extraction from pumpkin with the aid of microbial enzymes / N.M. Ptichkina, O.A. Markina, G.N. Rumyantseva // Food Hydrocolloids, 2008 - Vol. 22, issue 1. - P.192-195.

72. Rumyantseva G.N. Cultivation of asporogen stamme of microbial fungus genus Fusarium on cellulolytic waste / G.N. Rumyantseva // Abstract II Inter. Sugars and Reed Derived Seminar. - Cuba, Havana, 1990. - С. 125-130.

73. Rumyantseva G.N. Microbial preparation of cellulose and new aspect of application / G.N. Rumyantseva, К.А. Каlunyants, R.N. Grebeshova // Abstract VI Inter. Fermentation Symposium. - Canada, 1980. - Р. 215-217.

74. Rumyantseva G.N. Modified food protein production from plant waste materials / G.N. Rumyantseva // Abstract Inter. Conference «Protein -89». - Varna, 1989. - P. 202-205.

75. Ptichkina N.M. Pectin extraction from pumpkin with the aid of microbial enzymes / N.M. Ptichkina, O.A. Markina, G.N. Rumyantseva // 8^th Int. Hydrocolloids Conference. - Trondheim, Norway, 2006. - P. 18-20.

76.-126. Тезисы докладов на Всероссийских, Международных конференциях и симпозиумах и 6 Методических указаний для студентов.

Выражаю благодарность научному консультанту, первому проректору МГУПБ, акад. РАЕН, проф. Н.И. Дунченко, зав. кафедрой «Химия пищи и пищевая биотехнология» проф. А.И. Жаринову, акад. РАСХН, проф. И.А. Рогову - руководителю государственной целевой научно-технической программы «Технология живых систем», акад. РАСХН, проф. Е.И. Титову - руководителю программы «Создание обогащенных продуктов питания, корректирующих витаминно-минеральный статус организма школьников первой возрастной группы». Благодарю директора НТЦ «Лекбиотех» Г.Б. Бравову, зав. лабораторией Н.М. Павлову за предоставление опытно-промышленных образцов ферментных препаратов, генерального директора ООО «Зеленые линии» Черникова Д.Л., директора НПФ «Гелла-ТЭКО» А.А. Свитцова за организацию работ по получению опытно-промышленных партий пектина, белка и ПВ, зам. директора по научной работе ГосНИИ хлебопекарной промышленности Р.Д. Поландову и зав. лабораторией ВНИИ мясной промышленности А.А. Семенову за организацию испытаний пищевых ингредиентов в составе хлебо- и мясопродуктов, к.т.н. О.А. Варфоломееву, к.т.н. М.Н. Евсеичеву, к.т.н. М.И. Осадько, к.т.н. С.В. Макурину за помощь в совместной экспериментальной работе. Выражаю благодарность директору Батумского института аграрных биотехнологии и бизнеса Папунидзе Г.Р., директору НИИ чая, субтропических культур и чайной промышленности Абхазии Ревишвили Т.О., а также Юришову Э. - ведущему специалисту Объединения крахмальных предприятий Дольна Крупа (Словакия) за организацию работ по внедрению биокаталитических технологий на предприятиях отрасли.

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ, ИСПОЛЬЗУЕМЫХ В РАБОТЕ

ВИС - Вискозим ВСР - вторичные сырьевые ресурсы ГЖХ - газожидкостная хроматография ИСС - исходное содержание в сырье ИЭТ - изоэлектрическая точка ККГ - критическая концентрация гелеобразования Мм - молекулярная масса МФ - микробный фермент МФП - микробный ферментный препарат НТ - нейтраза ПААГ - полиакриламидный гель ПВ - нерастворимые пищевые волокна ПМ - Промальт ПТЭ - пектинтрансэлиминаза п-НФГ - пара-нитрофенил-в-D- глюкопиранозид	ПЭ - пектинэстераза СВ - сухие вещества СЭ - степень этерификации пектина ТМ - Термамил ФТС - функционально-технологические свойства ЦА - целлюлолитическая активность ЦК - Целлюкласт эндо-ПГ - эндополигалактуроназа E/S - количественное соотношение фермент/субстрат Кm - константа Михаэлиса °SAG - единица измерения желирующей способности пектина ф - продолжительность процесса Vmax - максимальная скорость гидролиза

Размещено на Allbest.ru