Критерии пригодности аналитического метода (специфичность, точность, сходимость, воспроизводимость, правильность, чувствительность)

Размещено на http://www.Allbest.Ru/

Критерии пригодности аналитического метода

Количественные аналитические методы клинических лабораторных исследований

Качество результата лабораторного исследования зависит от многих факторов (качества реактивов, оборудования, квалификации лаборантов), важное значение имеет также и качество метода. Для объективной оценки аналитических качеств метода рекомендуется оценка его аналитической надежности.

В отличие от системы контроля качества работы лабораторий, которая должна давать ежедневную информацию о качестве получаемых в лаборатории результатов, оценка аналитической надежности метода - продолжительный процесс, во время которого постепенно накапливается информация об аналитических качествах метода. При оценке надежности метода задача состоит в выявлении погрешностей, зависящих от метода; поэтому важно оценку надежности метода проводить не в одной, а в нескольких точно работающих (референтных) лабораториях с соблюдением всех указаний по применению метода.

Количественные аналитические методы клинических лабораторных исследований разнообразны и используются для определения различных веществ, поэтому описываемые способы оценки надежности метода могут быть пригодны не для всех методов. Оценке аналитической надежности должны подвергаться методы, рекомендуемые для официального утверждения, новые и существенно модифицированные методы.

Критерии, характеризующие аналитическую пригодность методов

Существует 4 группы аналитических методов:

1. Дефинитивные - методы признанные не имеющими источников ошибок. Очень дорогие и сложные методы.

2. Референтные методы 1-го уровня - методы правильность которых оценивается при сравнении с дефинитивными методами. Выполняются более доступным оборудованием. Аналитическая погрешность не более 1%.

3. Референтные методы 2-го уровня - методы имеющие аналитическую ошибку, как и 1-го уровня, но это достигается за счет тщательного выполнения всех этапов исследования.

4. Рутинные методы - методы правильность которых установлена; способы исследования, характеризующиеся известным отклонением, выявленным в процессе оценки надежности; методы правильность которых не установлена; методы, аналитические свойства которых ранее не изучались.

Лабораторное исследование, реализованное с помощью любого метода, включает следующие этапы:

1. Преданалитический: подготовка пациента, взятие биологического материала, его подготовка, транспортировка и хранение.

2. Аналитический: контроль процедуры дозирования, проведения реакции (перемешивание, термостатирование), расчет результатов.

3. Постаналитический: правильность оформления бланка с результатами, интерпретация, доведение информации до врача.

Необходимо использовать контрольный материал для реализации внутрилабораторного контроля.

Виды контрольных материалов:

1. Слитая сыворотка: в лаборатории каждый день собирают сыворотки от проб пациентов. Ее собирают неделю в одну посуду и хранят при t = 20°С. Когда накопится 2 л. ее оттаивают на водяной бане, перемешивают, фильтруют и разливают в пузырьки по 5, 10, 15 мл.

2. Коммерческий контрольный материал: выпускаются в жидком либо сухом виде. Более удобны жидкие. Они могут быть изготовлены из человеческого материала или взятого у животного. Могут быть аттестованными и неаттестованными.

Желательно в качестве контрольного использовать референтный материал - вещество, концентрация определенных ингредиентов в котором хорошо установлена.

К критериям, характеризующим аналитическую пригодность метода относятся воспроизводимость, правильность, специфичность, чувствительность, сходимость, точность.

Воспроизводимость - соответствие результата повторных определений в одном и том же материале. Определяется степенью разброса результатов измерений, используется для выявления случайных ошибок.

Правильность метода определяет правильность результатов, полученных этим методом, и зависит от наличия систематических погрешностей. Правильность лабораторного теста оценивается соответствием определенного результата к истинному его значению. Это соответствие среднего значения результатов повторных измерений одного и того же материала номинальной величины. Правильность не имеет числовой величины количественно определятся неправильностью. Неправильность - то, что отличает характеризующий его показатель от истинного значения.

Правильность результатов - соответствие среднего значения результатов повторных определений одного и того же материала должной (номинальной) величине. Правильность не имеет числовой величины, она определяется неправильностью.

Правильность аналитической методики выражает близость между принятым истинным (опорным) значением и полученным значением.

Статистическим критерием правильности является среднеарифметическая величина и степень ее отклонения от номинального значения. пригодность аналитический клинический лабораторный

Способы определения правильности:

1. Способ добавки: в биологическую жидкость добавляют точно взвешенное количество анализируемого вещества и определяют правильность с помощью исследуемого метода.

2. Способ смешивания проб: берется биологическая жидкость с низкой и высокой концентрацией исследуемого вещества и смешивается в различных соотношениях.

3. Исследование контрольного материала с известным содержанием компонента: использование той методики определения концентрации вещества, которая указана в аннотации к контрольному материалу.

Правильность должна быть установлена для всего диапазона применения аналитической методики. Могут быть использованы несколько способов оценки правильности:

а) применение аналитической методики к анализируемой субстанции с известной степенью чистоты (например, к стандартному материалу);

b) сравнение результатов анализа, полученных с использованием валидируемой аналитической методики, и результатов, полученных с помощью хорошо охарактеризованной методики, правильность которой известна и (или) установлена;

с) заключение о правильности можно сделать после установления прецизионности, линейности и специфичности.

Специфичность - способность аналитической методики однозначно оценивать определяемое вещество независимо от других веществ (примеси, продукты деградации, вспомогательные вещества, матрица (среда) и др.), присутствующих в испытуемом образце. Недостаточная специфичность одной аналитической методики может быть компенсирована использованием одной или нескольких дополнительных аналитических методик. Специфичность для различных видов испытаний означает следующее: в испытании на идентификацию - подтверждение того, что методика позволяет идентифицировать именно определяемое вещество; в испытании на примеси - подтверждение того, что методика позволяет правильно распознать примеси в образце (например, испытание на родственные соединения, тяжелые металлы, содержание остаточных растворителей и т.д.); в количественных испытаниях - подтверждение того, что методика позволяет установить содержание или активность именно определяемого вещества в образце. Низкая специфичность приводит к получению неправильных результатов и должна быть указана в описании метода. Оценка специфичности не имеет завершения поскольку любое вещество может повлиять на результат. Для оценки аналитической специфичности следует использовать примеси, которые, исходя из химической структуры, являются репрезентативными представителями тех групп веществ, которые с физиологической точки зрения имеют практическое значение. Противоположным показателем специфичности является интерференция - факторы, мешающие определению нужного компонента.

Способ влияния на определение компонента в результате интерференции может быть очень разным. Различают внешние интерферирующие факторы (прием лекарств, курение) и внутренние (могут быть обусловлены влиянием некоторых анормальных биологических состояний на саму процедуру анализа определяемых компонентов).

Чувствительность определяется его способностью выявлять наименьшие различия между двумя концентрациями исследуемого вещества. Оценивается величиной отношения разности между показаниями прибора к разности величин измеренных концентраций. Чем больше величина этого отношения, тем выше чувствительность метода.

Предел чувствительности - концентрация исследуемого вещества, соответствующая наименьшему результату определения еще отличимому от холостой пробы.

В процессе калибровки устанавливается диапазон линейности калибровочной кривой, что является частью аналитической характеристики метода. В диапазоне линейности аналитическая чувствительность определяется наклоном калибровочной кривой.

Систематическая погрешность может быть обусловлена следующими причинами: неспецифичностью метода или неправильным способом построения калибровочной кривой; использованием недостаточно чистого калибровочного материала; неправильной постановкой холостой пробы.

Точность метода. Точность аналитической методики выражает степень близости (степень разброса) между сериями измерений, полученных на многих пробах одного и того же гомогенного образца в указанных условиях. Точность можно рассматривать на трех уровнях: воспроизводимость, внутрилабораторная точность и сходимость.

Точность следует исследовать, используя гомогенные, подлинные образцы. Однако, если нельзя получить гомогенный образец, можно провести исследование, используя искусственно приготовленные образцы или раствор образца.

Точность аналитической методики обычно выражается как отклонение, стандартное отклонение или коэффициент разброса серии измерений.

Сходимость аналитической методики оценивают по независимым результатам, полученным в одинаковых регламентированных условиях в одной лаборатории (один и тот же исполнитель, одно и то же оборудование, один и тот же набор реактивов) в пределах короткого промежутка времени.

Литература

1. ISO/IEC 17025:2005 General requirements for the competence of testing and calibration laboratories, ISO Geneva

2. ISO 15189:2012 Medical laboratories - Requirements for quality and competence, ISO Geneva

3. ISO 15195:2003 Laboratory medicine - Requirements for reference measurement laboratories, ISO Geneva.

Размещено на allbest.ru