Аскорбиновая кислота

Размещено на http://www.allbest.ru/

Аскорбиновая кислота

Введение

Аскорбиновая кислота впервые выделена в чистом виде Сцент-Гиорги в 1928 г. под названием гексуроновая кислота. В 1933 г. рядом исследователей установлена ее структура.

Рис 1. г-лактон-2,3-дегидро-L-гулоновой кислоты или (5R)-5-[(1S)-1,2-Дигидроксиэтил]-2,3-дигидроксифуран-2(5H)-он

Синтез ее осуществлен впервые Рейхштсйном в Швейцарии, Гевортом в Англии, Хеуорзом и Хирстом с сотр. также в Англии.

Значение витамина С для организма человека очень велико.

Аскорбиновая кислота принимает активное участие в окислнтельно-восстановительных процессах в организме и входит в состав ряда сложных ферментов, обусловливающих процессы клеточного дыхания. Витамин С участвует в процессах углеводного и белкового обмена, повышает сопротивляемость организма к инфекционным заболеваниям, регулирует холестериновый обмен, участвует в нормальном функционировании желудка, кишечника и поджелудочной железы; совместно с витамином Р обеспечивает нормальную эластичность стенок кровеносных капилляров, обезвреживает действие ряда лекарственных веществ и ядов. Аскорбиновая кислота применяется при лечении цинги, инфекционных заболеваний, ревматизма, туберкулеза, язвенной болезни, при гепатитах, шоковом состоянии и др.

При недостаточности аскорбиновой кислоты развивается гиповитаминоз, в тяжелых случаях -- авитаминоз (цинга, скорбут). При цинге наблюдается утомляемость, сухость кожи, расшатываются и выпадают зубы, наблюдаются боли в конечностях, снижается сопротивляемость к инфекциям. В конечном итоге, цинга приводит к летальному исходу.

В терапевтических дозах аскорбиновая кислота хорошо переносится и побочных эффектов не вызывает. При введении в больших дозах и в течение длительного времени она может повреждать островковый аппарат поджелудочной железы и опосредованно почки.

Примерная суточная доза составляет 50--100 мг. В то же время, в некоторых случаях (тяжелые физические нагрузки, простудные заболевания) показаны увеличенные (ударные) дозы аскорбиновой кислоты (до 0,5-1,0 г и более на прием). Активным пропагандистом этих воззрений является известный американский химик, лауреат Нобелевской премии Л. Полинг.

1.Источники и способы получения

Аскорбиновая кислота содержится в значительных количествах в овощах (салат, капуста), плодах, ягодах, хвое, шиповнике, в листьях черной смородины. Растениями она синтезируется из галактозы. В организме человека и большинства животных аскорбиновая кислота не синтезируется, они получают её с пищей.

Промышленный способ получения аскорбиновой кислоты может быть основан на получении её из моносахаридов D- или L-ряда.

Известно несколько методов ее синтеза.

1. Бензоиновый метод. В основе лежит конденсация-- треозы и этилглиокислота в присутствии KCN. Метод неперспективен из-за дефицитности сырья, низкого выхода.

2. Циангидриновый метод. Аскорбиновую кислоту получают, исходя из L-ликсозы или L-ксилозы. Практического применения не имеет из-за отсутствия сырья, синтез которого из D-глюкозы очень сложен.

3. Получение аскорбиновой кислоты из свекловичного «жома» (отходы производства сахара из свеклы). Метод предложен американцами в 1904 г. Метод нуждается в значительном усовершенствовании: из 100 кг жома получают всего 2,5 кг аскорбиновой кислоты.

4. Частично микробиологический метод получения аскорбиновой кислоты из D-глюкозы. Включает 5 стадий, в т. ч. 3 химических. В основе метода лежит окисление D-глюкозы уксуснокислыми бактериями до кальциевой соли 5-кето-0-глюконовой кислоты, которую превращают в L-аскорбиновую кислоту. Метод привлекает внимание ограниченным применением химических реагентов. Однако выход продукта низок, а процессы микробиологического синтеза трудно управляемы.

5. Метод Рейхштейиа. Синтез L-аскорбиновой кислоты из 2-кето-L-гексоновой кислоты. Основное сырье (D-глюкоза) и вспомогательные реагенты, применяемые для синтеза, используются в пищевой и химической промышленности. Метод нашел применение во многих странах, в т. ч. СССР. Усовершенствован во ВНИХФИ, в настоящее время отдельные стадии его совершенствуются в НПО «Витамины».

Метод Рейхштейна состоит из 6 стадий, включая 1 стадию микробного синтеза:

1 стадия. Получение D-сорбbта из D-глюкозы методом каталитического восстановления водородом.

2 стадия. Получение L-сорбозы из D-сорбита путем его глубинного аэробного окисления уксуснокислыми бактериями.

3 стадия. Получение диацетон-L-сорбозы из L-сорбозы путем ее ацетонирования.

4 стадия. Получение гидрата диацетон-2-кето-L-гулоновой кислоты путем окисления диацетон-L-сорбозы.

5 стадия. Получение L-аскорбиновой кислоты из гидрата диацетон-2-кето-L-гулоновой кислоты (деацетонирование --> этерификация --> «енолизация» --> «лактонизация»).

6 стадия. Получение медицинской аскорбиновой кислоты. Перекристаллизация технической аскорбиновой кислоты.

Выход продукта в пересчете па глюкозу составляет в целом до 54%.

Рис 2. D-сорбит L-сорбоза



Рис 3. 2-оксогулоновая к-та

Рис 4. аскорбиновая кислота

2.Строение и физико-химические свойства аскорбиновой кислоты

Аскорбиновая кислота (Acidumascorbinicum) - это белые кристаллы с резким кислым вкусом. Молекулярная масса = 176,13. Температура плавления аскорбиновой кислоты составляет 192°С (при нормальных условиях).

Растворимость аскорбиновой кислоты (грамм на 100 мл растворителя): 33,3 H₂O, 2 EtOH. Аскорбиновая кислота практически нерастворима в диэтиловом эфире, хлороформе, бензоле, петролейном эфире. Водные растворы аскорбиновой кислоты имеют pH ~ 3 (pKa = 4,17); действует как моноосновная кислота. Аскорбиновая кислота мощный восстановитель, легко окисляется многими окислителями.

Водные растворы аскорбиновой кислоты устойчивы при отсутствии кислорода. На воздухе растворы аскорбиновой кислоты устойчивы при pH 5-6, очень неустойчивы при щелочном pH. [5]

Плотность 5% раствора аскорбиновой кислоты = 1,0180 г/мл

Ультрафиолетовый спектр поглощения 0,001% раствора раствора Аскорбиновая кислота в 0,1 М растворе хлористоводородной кислоты в области от 230 до 300 нм должен иметь максимум при 243 нм.{гф 12}

Удельное вращение 2% водного раствора от +22 ^о до +24^о {Гф 11}; 10% раствора от +20,5 ^о до +21,5 ^о.

Таблица. Показатели преломления (n²⁰_D) и факторы показателей преломления (F) растворов кислоты аскорбиновой

Концентрация, %	Показатели преломления, n20D	Факторы показателей преломления, F
1	1,3349	Для всех концентраций 0,00185
2	1,3367
3	1,3386
4	1,3404
5	1,3423
6	1,3441
7	1,3460
8	1,3478

Из-за наличия двух асимметрических атомов (в 4 и 5 положениях) существуют четыре энантиомера аскорбиновой кислоты. Две условно именуемые L- и D- формы хиральны относительно атома углерода в фурановом кольце.

Рис 5. Оптические изомеры аскорбиновой кислоты:

1a-- L-аскорбиновая кислота,

2a-- L-изоаскорбиновая кислота,

1b-- D-изоаскорбиновая кислота,

2b-- D-аскорбиновая кислота

Биологически активной является L-(+)-форма. Д-(--)-форма является антивитамином и не существует в природе. Принятое строение аскорбиновой кислоты подтверждается рентгеноструктурным анализом. Кислотность обусловлена фенольной НО-группой. Аскорбиновая кислота легко отщепляет протон гидроксила в положении Сз кольца и по силе не уступает карбоновым кислотам:



Рис.6

Аскорбиновая кислота является двухосновной, однако, ее считают практически одноосновной, поскольку pK_I=4 12 а рК_II =11,57.

Аскорбиновая кислота легко образует соли -- наиболее известна ее натриевая соль (аскорбинат натрия).

При нагревании со щелочами аскорбиновая кислота легко гидролизуется, превращаясь в соль 2-кето-L-гулоновой кислоты:

Рис.7

Аскорбиновая кислота очень легко окисляется и обладает сильной восстановительной способностью. Процесс окисления аскорбиновой кислоты протекает сложно, начальной стадией его является образование т. н. дегидроаскорбиновой кислоты под влиянием кислорода воздуха или других окислителей. Этот процесс является обратимым:

Рис.8

При рН<7 в процессе окислительного и гидролитического расщепления дегидроаскорбиновая кислота, например, превращается в 2,3-дикето-L-гулоновую кислоту. Последняя под влиянием повышенной температуры декарбоксилируется и превращается в L-ксилозон-2. Ксилозон восстанавливается аскорбиновой кислотой в L-ксилозу, которая циклизуется в фурфурол путем дегидратации:

Рис.9

Известно, что фурфурол легко вступает в реакции присоединения, образуя полимеры, а также легко окисляется с раскрытием цикла и образованием янтарной и других органических кислот и смолистых веществ.

Указанные процессы протекают даже в присутствии кислорода воздуха, образуя цикл каталитического разложения аскорбиновой кислоты. Поэтому желательно исключить воздействие кислорода на растворы аскорбиновой кислоты и ее препараты в производстве и при хранении.

Естественно, что в присутствии более сильных окислителей и, особенно, ионов тяжелых металлов (медь, магний, железо) аскорбиновая кислота окисляется с деструкцией цикла и образованием в итоге различных органических кислот (L-трео-новая, глицериновая, щавелевая и др.). Все процессы окисления идут легче в щелочной среде.

Из других свойств аскорбиновой кислоты следует отметить ее способность к образованию простых и сложных эфиров. Наиболее известен пальмитат аскорбиновой кислоты, который используют для витаминизации пищевых продуктов:

Рис.10

3.Оценка качества лекарственных средств

3.1 Определение подлинности

химический аскорбиновый кислота

При определении подлинности используют восстановительные и кислотные свойства аскорбиновой кислоты. Фармакопейный препарат кислота аскорбиновая идентифицируют по температуре плавления, удельному вращению.

При взаимодействии аскорбиновой кислоты с раствором нитрата серебра протекает не обменная реакция, а окисление аскорбиновой кислоты до дегидроаскорбиновой. При этом ионы серебра восстанавливаются до элементного состояния (реакция серебряного зеркала):

Рис.11

При добавлении к 0,1 % раствору препарата (1:1000) по каплям окрашенного в синий цвет раствора 2,6-дихлороиндофенола (реактив Тильманса ) наблюдается обесцвечивание раствора за счет образования неокрашенного продукта восстановления:



Рис. 12

Аналогичную реакцию кислота аскорбиновая дает с раствором метиленового синего.

Аскорбиновая кислота обесцвечивает йод, раствор перманганата калия, взаимодействует с реактивом Фелинга, восстанавливает нитраты до нитритов, арсенаты до арсенитов, фосфорно-молибденовую кислоту до продуктов, окрашенных в синий цвет.

Идентификацию аскорбиновой кислоты можно осуществлять спектрофотометрически: л_mах = 243 нм для водного раствора в присутствии 0,1М НС1. Спектр снимают немедленно после приготовления раствора (ЕФ). ИК-спектроскопия также может быть использована. Полученный спектр сравнивают со спектром СО аскорбиновой кислоты (ЕФ).

3.2 Испытания на чистоту

В качестве допустимых примесей рассматривают сульфатную золу (не более 0,1 %) и тяжелые металлы (не более 0,001 %). Содержание органических примесей определяют после добавления к препарату концентрированной серной кислоты: окраска раствора через 30 мин не должна превышать окраску эталонного раствора, разведенного в соотношении 1:2 (ГФ). Обязателен тест на щавелевую кислоту (возможный продукт окисления).

3.3 Количественное определение

Количественно кислоту аскорбиновую определяют, используя в качестве титранта-окислителя раствор йодата калия с c(l/z) = 0,1 моль/л в присутствии йодида калия:

Рис. 13

Избыток титрованного раствора йодата калия приводит к образованию избытка йода, который окрашивает крахмал в синий цвет. ЕФ описывает прямую йодометрию.

Следует иметь в виду, что в препаратах аскорбиновой кислоты в качестве стабилизатора применяют натрия гидросульфит, который взаимодействует с окислителем, из-за чего результаты титрования получаются завышенными. В этом случае перед титрованием добавляют альдегид для связывания сульфита или используют другой метод количественного определения.

В некоторых ЛФ содержание кислоты аскорбиновой определяют методом нейтрализации, используя кислотные свойства ее растворов. При действии разбавленных растворов щелочей аскорбиновая кислота ведет себя как одноосновная кислота (рК_а = 4,2). В этих условиях не происходит разрыва лактонного цикла, а образуются нейтральные растворимые однозамещенные соли:

Рис. 14

Широко применяют фотоколориметрические способы, основанные на цветных реакциях с 2,6-дихлороиндофенолом, фосфорно-молибденовой кислотой и другими реактивами.

Содержание аскорбиновой кислоты в препарате должно быть не менее 99,00 %.{7}

4.Рассмотрим методы идентификации и количественного анализа на примере рецептуры аптеки №9/249

Раствор кислоты аскорбиновой 5% (концентрированный раствор)

Определение подлинности

1. К 4-5 каплям р-ра прибавляют 2-3 капли р-ра нитрата серебра; образуется металлическое серебро в виде серого осадока.

2. К 4-5 каплям р-ра прибавляют 1-2 капли р-ра хлорида окисного железа и р-ра феррицианида калия ; появляется синее окрашивание.

3. К 4-5 каплям р-ра прибавляют 0,5 мл 1-2 капли 0,1 н. р-ра йода;р-р йода обесцвечивается.

Количественное определение

1. К 0,5 мл р-ра прибавляют 2 мл воды и титруют 0,1 н. р-ром йода до желтого окрашивания.

1 мл 0,1 н. р-ра йода соответствует 0,0088 г к-ты аскорбиновой

2. К 1 мл р-ра прибавляют 2 мл воды, 7 капель р-ра фенолфталеина и титруют 0,1 н. р-ром едкого натра до розового окрашивания.

1 мл 0,1 н. р-ра едкого натра соответствует 0,0176 г к-ты аскорбиновой.

Кислота аскорбиновая 0,1

Глюкозы 0.5

Определение подлинности

Глюкоза

Рис.15

Глюкоза проявляет как окислительные, так и восстановительные свойства, благодаря альдегидной группе.

Она дает реакцию серебряного зеркала:

Рис. 16

Реакции со свежеполученным гидроксидом меди (II) при нагревании:

.

Рис. 17

Восстановление альдегидной группы в соответствующий спирт:

.

Рис. 18

Методика определения подлинности: К 0.01 г порошка прибавляют 0,01 г тимола, 5-6 капель конц. серной кислоты; появляется красно-фиолетовое окрашивание.



Рис. 19

Кислота аскорбиновая

1. К 0,03 г порошка прибавляют 2-3 капли р-ра нитрата серебра; образуется серый осадок.

2. К 0,03 г порошка прибавляют 1-2 капли р-ра феррицианида калия и р-ра хлорида окисного железа; появляется синее окрашивание

Количественное определение

Кислота аскорбиновая

1. 0,05 г порошка растворяют в 2 мл воды и титруют 0,1 н. р-ром йода до желтого окрашивания.

1 мл 0,1 н. р-ра йода соответствует 0,0088 г к-ты аскорбиновой

2. 0,05 г порошка растворяют в 2 мл воды, прибавляют 6-7 капель р-ра фенолфталеина и титруют 0,1 н. р-ром едкого натра до розового окрашивания.

1 мл 0,1 н. р-ра едкого натра соответствует 0,0176 г к-ты аскорбиновой.

Глюкоза

0,1 г порошка помещают в сухую пробирку, точно пипеткой прибавляют 1 мл воды, перемешивают до растворения порошка и оставляют стоять около рефрактометра на 3о минут. Далее определяют показатель преломления воды (n₀) и полученного раствора (n) с применением рефрактомектра.

Расчет содержания глюкозы в одном порошке в граммах (Х) производят по формуле:

 (n-n₀) х Р х (а+1) - 100 х а х (F₁ x P₁ ) (n-n₀)x 0,6x1,1 - 100 x 0,1x (0,00160 x P₁); где

Х= F₂ x a x 100 = 0,00145 x 0,1 x 100

n- показатель преломления полученного раствора (а_г + 1 мл), при 20^оС;

n₀- показатель преломления воды при 20^оС ( 0,3330);

Р-вес порошка по прописи, г;

а-навеска порошка, взятая для анализа, г;

(а_г + 1 мл) - вес полученного раствора, в граммах (0,1 г порошка + 1 г воды =1,1г);

Р₁ - содержание кислоты аскорбиновой в одном порошке, найденное химическим методом, г;

F₁ - фактор показателя преломления раствора кислоты аскорбиновой с весовой концентрацией (а_г + 1 мл), (0,00160);

F₂ - фактор показателя преломления растворов глюклзы с весовой концентрацией (а_г + 1 мл), (0,00145).

Рибофлавина 0,002

Калия йодида 0,3

Раствор глюкозы 2% - 10,0

Определение подлинности

Рибофлавин

Рис.20

1. Р-р желтого цвета с желто-зеленой флюоресценцией.

4.5 Кислота аскорбиновая

1. К 0,5 мл р-ра прибавляют 1 каплю 0,1 н. р-ра йода;р-р йода обесцвечивается. Калия йодид

1. К 1-2 каплям р-ра прибаляют 1 мл р-ра виннокаменной кислоты, 1 мл р=Ра ацетата натрия, охлаждают и сильно встряхивают; постепенно выпадает белый кристаллический осадок, растворимый в разведенных минеральных кислотах и растворах едких щелочей.

Рис. 21

2. Графитовую палочу, смоченную раствором, вносят в бесцветное пламя горелки; пламеня горелки окрашивается в фиолетовый цвет

3. К 1-2 каплям р-ра прибавляют 2-3 капли уксусной к-ты и 2-3 капли р-ра кобильтинитрита натрия; образуется желтый кристаллический осадок.

2К⁺ + Na⁺ + [Co(NO₂)₆] ^CH3COOH> K₂Na[Co(NO₂)₆]

4. К 2-3 каплям р-ра прибавляют по 3-5 каплям разведенной серной кислоты и р-ра нитрита натрия , 1 мл хлороформа и взбалтывают; хлороформный слой окрашивается в фиолетовый цвет.

2I^- + 2NO₂^- + 4H^{+ хлороформ}> I₂ + 2NO + 2H₂O

Глюкоза

1. 0,5 мл р-ра выпаривают в фарфоровой чашке на водяной бане досуха. После охлаждения к остатку прибавляют 0,01 г тимола; 5-6 капель канц. серной кислоиы и 1-2 капли воды; появляется фиолетовое окрашивание.

Количественное определение

Кислота аскорбиновая

1. К 1 мл р-ра прибавляют 6-7 капель р-ра фенолфталеина и титруют 0,02 н. р-ром едкого натра до оранжево-розового окрашивания. 1 мл 0,02 н. р-ра едкого натра соответствует 0,00352 к-ты аскорбиновой.

Калия йодид

1. К 0,5 мл р-ра прибавляют 0,5 мл разведенной уксусной к-ты, каплю р-ра эозина натрия и титруют 0,1 н. р-ра нитрата серебра до перехода окраски осадка от желтой до розовой.

Рис. 22

КI + AgNO₃ ^CH3COOH> AgI + KNO₃ + AgI ^CH3COOH> анион эозина после достижения точки эквивалентности адсорбируется осадком AgI (метод Фаянса)

1 мл 0,1 н. р-ра нитрата серебра соответствует 0,0166 гкалия йодида.

Глюкоза

Определяют показатель преломления р-ра с применением рефрактометра.

Расчет содержания глюкозы в процентах проводят по формуле:

 [(n-n₀)- (F₁xC₁+F₂xC₂)]x100

Где X= Fx100

C₁, C₂ - концентрации кислоты аскорбиновой и калия йодида в испытуемом р-ре, найденные химическим методом, %;

F₁- фактор показателя преломления р-ра к-ты аскорбиновой (0,00160);

F₂- фактор показателя преломления р-ра калия йодида (0,00130);

F - фактор показателя преломления р-ра безводной глюкозы (0,00142).

Примечание: 0,02% концентрация рибофлавина в р-ре практически не влияет на показатель преломления р-ра.

Рибофлавина 0,002

Кислоты аскорбиновой 0,02

Тиамина бромида

Кислоты никотиновой по 0,03

Раствор глюкозы 2% - 10,0

Натрия хлорида 0,043 (изотонический эквивалент кислоты аскорбиновой по натрию хлориду = 0,18 ). Определение подлинности

Рибофлавин

1. Р-р окрашен в желтый цвет.

Кислота аскорбиновая

1. 0,5 мл р-равыпаривают в фарфоровой чашке на водяной бане досуха. после охлаждения к остатку прибавляют 2 капли р-ра феррицианида калия и 1-2 капли 3% р-ра хлорида окисного железа; тотчас же появляется синее окрашивание. Тиамина бромид

Рис.23

1. 0,5 мл р-ра выпаривают в фарфоровой чашке на водянй бане досуха. После охлаждения к остатку прибавляют несколько кристалликов сульфата меди и 2-3 капли конц. серной кислоты; образуется черное окрашивание, исчезающее при добавлении 2-3 мл воды.

Кислота никотиновая

Рис.24

химический аскорбиновый кислота

1. К 2-3 каплям р-ра прибавляют 2-3 капли р-ра бихромата калия, 1 мл хлороформа и 2-2,5 мл р-ра пергидроля в ацетоне; при взбалтывании хлороформный слой окрашивается в сине-фиолетовый цвет.

Глюкоза

1. 0,5 мл р-ра выпаривают в фарфоровой чашке на водяной бане досуха. После охлаждения к остатку прибавляют 0,01 г тимола; 5-6 капель канц. серной кислоиы и 1-2 капли воды; появляется фиолетовое окрашивание.

Натрия хлорид

NaCI

1. Гафрированную палочку, смоченную р-ром, вносят в бесцветное пламя горелки; пламя окрашивается в желтый цвет.

2. К 1-2 каплям р-ра прибавляют 1-2 капли разведенной уксусной к-ты и 1-2 капли р-ра цинк-урасилацетата; образуется желтый кристаллтческий осадок:

Na⁺ + Zn²⁺ + 3UO₂²⁺ + 9CH₃COO^{- >} NaZn(UO₂) ₃(CH₃COO)₉ x9H₂O

К 3-5 каплям р-ра прибавляют по 3-5 капель разведенной азотной к-ты и и раствора нитрата серебра; образуется белый творожистый осадок, растворимый в растроре аммиака:

CI^- + 2AgNO₃ ^HNO3> AgCI v NO₃^-

AgCI + 2NH₃^- > [Ag(NH₃)₂]⁺ + CI^-

Количественное определение

Кислота аскорбиновая, кислота никотиновая и тиомина бромид

К 0,5 мл р-ра прибавляют 6-7 капель р-ра фенолфталеина и титруют 0,02 н. р-ром едкого натра до оранжево-розового окрашивания (А мл).

Кислота аскорбиновая. К оттитрованной жидкости прибавляют 3 капли р-ра крахмала и титруют 0,02 н. р-ром йода до синего окрашивания (Б мл).

1 мл 0,02 н. р-ра йода соответствует 0,00176 г к-ты аскорбиновой.

Разносттьь между количеством мл 0,02 н. р-ра едкого натра и количеством мл 0,02 н. р-ра йода, деленного на два - (А-Б/2)мл, рассчитывают на сумму тиамина бромида и кислоты никотиновой.

1 мл 0,02 н. р-ра едкого натра соответствует 0,003838 г суммы тиамина бромида и кислоты никотиновой.

Примечание. Б мл делится на 2, т.к. кол-во мл 0,1 н. р-ра йода на титрование к-ты аскорбиновой расходуется вдвое больше, чем 0,1 н р-ра едкого натра.

Тиамина бромид и натрия хлорид.

К 1 мл р-ра прибавляют 0,5 мл разведенной азотной кислоты, 15 капль р-ра железо-аммониевых квасцов, 2 мл 0,1 н. р-ра нитрата серебра и сильно взбалтывают до отстаивания осадка. Избыток 0,1 н. р-ра нитрата серебра оттитровывают 0,1 н р-ром роданида аммонои до желто-розового окрашивания.

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,1 н. р-ра нитрата серебра соответствует 0,0092 г суммы тиамина брмиба и натрия хлорида.

Глюкоза

Определяют показатель преломления р-ра с применением рефрактометра.

Расчет содержания глюкозы в процентах проводят по формуле:

[(n-n₀)- (F₁xC₁+F₂xC₂+F₃xC₃+F₄xC₄]x100

Где X= Fx100

C₁, C₂ - концентрации кислоты аскорбиновой, тиамида бромида, кислоты никотиновой, натрия хлорида в испытуемом р-ре, найденные химическим методом, %;

F₁- фактор показателя преломления р-ра к-ты аскорбиновой (0,00160);

F₂- фактор показателя преломления р-ра тиамина бромида (0,00200);

F₃- фактор показателя преломления р-ра к-ты никотиновой (0,00210);

F₄- фактор показателя преломления р-ра натрия хлорида (0,00173);

F - фактор показателя преломления р-ра безводной глюкозы (0,00142).

Примечание: 0,02% концентрация рибофлавина в р-ре практически не влияет на показатель преломления р-ра.

Размещено на Allbest.ru