Проведение судебно-химического (химико-токсикологического) анализа

Размещено на http://www.allbest.ru/

Государственное бюджетное образовательное учреждение

высшего профессионального образования

«Новосибирский государственный медицинский университет»

Министерства здравоохранения Российской Федерации

(ГБОУ ВПО Минздрава России)

Кафедра Фармацевтической химии

КОНТРОЛЬНАЯ РАБОТА № 1

по дисциплине «Токсикологическая химия»

Выполнила:

студентка фармацевтического факультета,

заочной формы обучения,

5 курса, 2 группы,

Щелокова Екатерина Дмитриевна

8-950-261-6998

kr194kat@yandex.ru

Новосибирск

2015г.

Вопросы к контрольной работе №1

Общие вопросы

1. Привести объекты судебно-химического (химико-токсикологического) анализа. Дать понятие «вещественным доказательствам». Значение наружного осмотра объектов исследования и проведение предварительных проб в СХА (ХТА).

Объектами ХТА, подлежащими исследованию на наличие ядовитых веществ, могут быть органы трупов, моча и кровь трупов, рвотные массы, экскременты, волосы, ногти, промывные воды желудка, остатки пищи, напитки, пестициды, части растений, обработанные пестицидами, вода водоемов, пробы воздуха промышленных предприятий, почва, предметы домашнего обихода, одежда, а также связанные с отравлением вещественные доказательства: лекарственные препараты, растительные объекты, органические растворители, средства бытовой химии, остатки пищи, неизвестные жидкости и др.

Объекты, направляемые судебно-следственными органами в лаборатории для судебно-химического исследования, называются вещественными доказательствами.

Вещественные доказательства, которые подлежат исследованию судебными медиками, можно подразделить на два вида:

- вещественные доказательства, которые способствуют установлению причины смерти, вида насилия, а также выяснению механизма травмы. Например, пуля, извлеченная из тела погибшего, является вещественным доказательством и может способствовать судебно-медицинскому эксперту в установлении причины смерти, характера повреждения

- объекты биологического происхождения. Обычно при исследовании таких объектов выясняется их природа (например, кровь, волосы, сперма), происхождение от человека или животных, возможность их принадлежности каким-то конкретным лицам.

Химико-токсикологический анализ (ХТА) - это совокупность научно обоснованных методов, применяемых на практике для обнаружения и количественного определения ядовитых и сильнодействующих веществ, их метаболитов в биопробах живых лиц, в трупном материале и в вещественных доказательствах отравления.

Наружный осмотр объектов исследования включает в себя:

- Наличие инородных включений. При осмотре содержимого желудка невооруженным глазом, а затем с помощью лупы или микроскопа в нем могут быть обнаружены фарфоровидные крупинки оксида мышьяка (III), призматические кристаллы нитрата стрихнина, семена или кусочки ядовитых растений и др. Обнаруженные подозрительные инородные включения отбирают пинцетом и производят их исследование. Исследование отобранных инородных включений растительного происхождения должны производить лица, имеющие познания в области фармакогнозии.

- Запах объектов исследования. Иногда специфический запах содержимого желудка может указывать на наличие определенного вещества, вызвавшего отравление. Так, например, запах горького миндаля указывает на возможное отравление цианидами. Содержимое желудка, имеющее запах пиридиновых оснований, указывает на возможное отравление денатурированным спиртом. При отравлении фенолом содержимое желудка имеет запах этого вещества. Запах внутренних органов, в том числе и содержимого желудка, можно определять тогда, когда эти объекты не подверглись гнилостным изменениям. Запах вещества, вызвавшего отравление, в загнивших объектах маскируется запахом продуктов гниения (сероводорода, аммиака и др.).

- Окраска объекта. Определение окраски объектов исследования (главным образом окраски содержимого желудка) имеет определенное значение для предположительного заключения о наличии вещества, вызвавшего отравление:

· Желтая окраска объектов указывает на возможное отравление пикриновой кислотой, акрихином, хроматами, азотной кислотой, которая дает окраску с белками стенок желудка, некоторыми анилиновыми красителями и др.

· Зеленая окраска указывает на возможное отравление солями меди, соединениями мышьяка (парижская зелень), некоторыми красителями и др.

· Черная окраска слизистой желудка указывает на возможное отравление концентрированной серной кислотой.

· Розовая окраска содержимого желудка может быть после приема внутрь сулемы, окрашенной эозином.

- Определение pЗ среды. Кислотность и щелочность среды объектов исследования определяют индикаторами. В качестве индикаторов применяют лакмус (интервал рН перехода красной окраски в синюю 5,0--8,0), конго красный (интервал рН перехода сине-фиолетовой окраски в красную 3,0--5,2), фенолфталеин (интервал рН перехода бесцветного раствора в красный 8,2--10,0). При использовании этих индикаторов в основном применяются не их растворы, а полоски бумажек, пропитанных соответствующими растворами индикаторов.

С помощью индикаторных бумажек, пропитанных фенолфталеином, лакмусом и конго красным, можно установить только реакцию среды. Однако эти индикаторы не позволяют ответить на вопрос: какой рН имеют исследуемые объекты? Поэтому определение кислотности и щелочности среды с помощью бумажек, пропитанных универсальным индикатором, имеет преимущество перед определением среды с помощью бумажек, пропитанных лакмусом, конго красным и фенолфталеином.

Для определения рН среды небольшое количество исследуемого объекта измельчают, вносят в пробирку, прибавляют дистиллированную воду и хорошо взбалтывают. Водную вытяжку отделяют от твердого осадка. В полученной водной вытяжке определяют кислотность или щелочность среды с помощью индикаторных бумажек.

Определение рН исследуемого объекта позволяет включить минеральные кислоты, едкие щелочи и аммиак в план химико-токсикологического анализа или исключить их из этого плана.

- Наличие консервантов в объектах. Консервирование объектов химико-токсикологического анализа формалином и фенолом не допускается, так как эти вещества относятся к числу ядов, на наличие которых должно производиться исследование биологического материала при отравлении неизвестными соединениями. Поэтому, приступая к химико-токсикологическому анализу, необходимо знать, есть ли в объектах анализа консерванты и какие?

По ряду причин консервирование биологического материала этиловым спиртом тоже является нежелательным. Этиловый спирт может быть причиной отравления. При консервировании биологического материала этим спиртом исключается возможность определения его как вещества, вызвавшего отравление. Кроме этого, наличие в биологическом материале этилового спирта как консерванта мешает разрушению биологического материала при исследовании его на наличие металлических ядов. Поэтому перед разрушением таких объектов необходимо освобождать их от этилового спирта.

Проведение предварительных проб в СХА

Для исследования биологического материала, поступившего в химико-токсикологические (судебно-химические) лаборатории, на каждое вещество потребовалось бы много времени и очень большое количество анализируемых объектов. Чтобы рационально расходовать биологический материал, химик-токсиколог (судебный химик) должен составить хорошо продуманный план исследования и исключить многие вещества из этого плана.

Для составления плана ХТА большое значение имеют результаты предварительных проб на наличие токсических веществ в исследуемых объектах. На основании результатов предварительных проб можно исключить ряд веществ из плана химико-токсикологического анализа и предположить, какие вещества могут быть в биологическом материале.

Пробы проводят на наличие ряда токсических веществ в моче, крови или в плазме. К числу этих веществ относятся: метиловый и этиловый спирты, хлороформ, производные алифатических углеводородов, барбитураты, салициловая кислота, кодеин, аминазин, диазепам, ноксирон и др.

Предварительные пробы на наличие токсических веществ в моче и крови являются чувствительными, но не специфическими. Ввиду высокой чувствительности этих проб в биологических жидкостях можно обнаружить не только токсические, но и терапевтические дозы принятых веществ. На все эти вещества в качестве предварительных проб предложены цветные реакции. К числу предварительных проб относятся и результаты обнаружения токсических веществ методом микродиффузии, а также результаты осмотра объектов исследования и определения некоторых их свойств.

Положительный результат предварительных проб указывает на то, что в исследуемом объекте может быть предполагаемое вещество или группа веществ, которые дают такие же реакции. При положительных результатах предварительных проб на определенные вещества исследование этих веществ включается в план химико-токсикологического анализа.

При отрицательном результате предварительных проб на соответствующие вещества дальнейшее исследование их не проводят и не включают в план химико-токсикологического анализа. Таким образом, предварительные пробы в химико-токсикологическом анализе имеют определенное значение только при их отрицательном результате.

2. Изолирование из биоматериала по Грусц-Харди

Метод Е. Грусц-Харди - изолирование смесью спирта и хлороформа

Схематично метод можно представить из следующих этапов:

* Настаивание измельчённого с сульфатом аммония объекта с водой, подкисленной 20% раствором серной кислоты до рН=2-3, в течение двух часов. Вода берётся в количестве 1:2 по отношению к навеске объекта Водное извлечение филыруется. Операция повторяется двукратно.

* Очистка водного извлечения от белковых соединений путём насыщения его аммония сульфатом, настаивания в течение часа и фильтрования образовавшегося осадка.

* Очистка фильтрата от жиров, смол, пигментов путём экстракции эфиром. Эфирное извлечение отбрасывают.

* Подщелачивание водного извлечения 20% раствором натрия гидроксида и экстрагирование веществ основного характера хлороформом при рН=9-10 (трёхкратная экстракция), отделение органической фазы и концентрирование полученного извлечения упариванием.

Разработанный вначале для алкалоидов, метод применим и для изолирования других азотсодержащих веществ основного характера (синтетических лекарственных средств).

Метод достаточно быстрый. Преимуществом является хорошая очистка извлечений от соэкстрактивных веществ.

3. Судебно-химический анализ этаминала-натрия

Этаминал-натрий (нембутал, пентобарбитал-натрий, пентал) -- 5-этил-5-(2-амил)-барбитурат натрия -- представляет собой белый порошок, растворимый в воде и этиловом спирте, практически не растворимый в диэтиловом эфире. Этаминал экстрагируется органическими растворителями из кислых водных растворов.

ОБНАРУЖЕНИЕ ЭТАМИНАЛ-НАТРИЯ

1. Этаминал-натрий дает фиолетовую окраску с солями кобальта и изопропиламином.

Выполнение реакции. К 2 мл хлороформного раствора исследуемого вещества прибавляют 0,3 мл 1%-го раствора ацетата кобальта в безводном этиловом спирте и 1 мл 5%-го раствора изопропиламина в этиловом спирте. При наличии барбитуратов появляется фиолетовое окрашивание. Вместо этилового спирта можно использовать метиловый спирт.

2. Этаминал-натрий дает реакцию образования мурексида.

Выполнение реакции.

Реактив - Соль Мора (раствор). К 0,1 г соли Мора прибавляют 0,5 мл 25 %-го раствора соляной кислоты, а затем воду до 100 мл. К 5 мл полученного раствора прибавляют 4 г хлорида аммония и воду до 100 мл.

Реакция - В фарфоровую чашку к сухому остатку, полученному после выпаривания вытяжек из биологического материала, или к небольшому количеству сухого вещества прибавляют 3 капли 3 %-го раствора пероксида водорода и 3 капли реактива, содержащего соль Мора и хлорид аммония. Содержимое чашки выпаривают, сухой остаток нагревают до появления белых паров. После охлаждения прибавляют 3 капли 6 н. раствора аммиака. При наличии этаминал-натрия появляется розовая окраска.

Мурексиную реакцию дают барбамил, барбитал, фенобарбитал, этаминал-натрий и тиопентал. Не дают этой реакции гексенал, гексобарбитал и циклобарбитал.

3. Этаминал-натрий дает оранжево-красную окраску с родамином 6Ж.

Выполнение реакции. В делительную воронку вносят 0,1 мл раствора исследуемого вещества, прибавляют 0,2 мл 0,1%-го раствора родамина 6Ж и 1мл четыреххлористого углерода. Смесь взбалтывают в течение 1 мин. При наличии солей барбитуратов слой четыреххлористого углерода приобретает светло-оранжевую или оранжево-красную окраску.

Эта реакция пригодна для обнаружения барбамила, гексенала и этаминал-натрия в фармакопейных препаратах и в лекарственных смесях.

4. Выделение кислотной формы барбитуратов.

Выполнение реакции. На предметное стекло наносят несколько капель раствора этаминал-натрия в хлороформе, который выпаривают при комнатной температуре. После выпаривания исследуемого раствора на то же место наносят следующую каплю этого раствора, который также выпаривают досуха. Сухой остаток растворяют в одной капле концентрированной серной кислоты. Через 3--5 мин после охлаждения раствора рядом с ним наносят каплю воды. Затем эти капли соединяют при помощи капилляра. Через 10--20 мин (а при малых количествах барбитуратов через 1--2 ч) появляются кристаллические осадки. Для каждого барбитурата кристаллы имеют определенную форму. Кристаллы этаминал-натрия выглядят следующим образом:

5. При взаимодействии этаминал-натрия с хлорцинкиодом образуется коричневый или оранжево-коричневый кристаллический осадок (призмы или сростки из них).

Выполнение реакции.

Реактив - хлорцинкиод. В первой склянке растворяют 2 г хлорида цинка в 10 мл воды (раствор А). В другой склянке растворяют 2,1 г иодида калия в 5 мл воды. В полученной жидкости растворяют 0,1 г дважды сублимированного иода (раствор Б). К раствору А прибавляют по каплям при перемешивании раствор Б. К смеси растворов А и Б прибавляют несколько кристаллов дважды сублимированного йода. Через сутки прозрачную жидкость переносят в склянку из оранжевого стекла.

Реакция - На предметное стекло наносят несколько капель хлороформного раствора исследуемого вещества и выпаривают досуха. К сухому остатку прибавляют 1 каплю раствора хлорцинкиода. Через 10--15 мин под микроскопом наблюдают форму образовавшихся кристаллов. Предел обнаружения: 4 мкг этаминал-натрия в пробе. При наличии барбитуратов (барбамил, барбитал, бутобарбитал, этаминал) в исследуемом растворе появляются кристаллические осадки. Кристаллы этаминал-натрия в данном случае выглядят следующим образом:

6. Этаминал-натрий со смесью хлорида железа (III) и иодида калия дает кристаллический осадок коричневого или оранжево-коричневого цвета (призмы и сростки из них).

Выполнение реакции:

Реактив - хлорид железа (III) (раствор, содержащий иодид калия). Для его приготовления к 3 мл 10%-го раствора хлорида железа (III) прибавляют 1 мл концентрированной соляной кислоты и 3 г иодида калия, а затем прибавляют воду до 10мл. Через сутки реактив сливают с осадка и сохраняют в склянке из темного стекла.

Реакция - На предметное стекло наносят несколько капель раствора исследуемого вещества в хлороформе. Этот раствор выпаривают досуха. К сухому остатку прибавляют каплю реактива. Через 10-- 15 мин под микроскопом наблюдают форму образовавшихся кристаллов, которые появляются при наличии ряда барбитуратов (барбамил, бутобарбитал, фенобарбитал, этаминал). Предел обнаружения: 0,5 мкг этаминал-натрия в пробе. Кристаллы этаминал-натрия в данном случае выглядят следующим образом:

судебный химический анализ токсикологический

8. Обнаружение этаминал-натрия по УФ- и ИК-спектрам.

Выполнение реакции. К сухому остатку, полученному при выпаривании вытяжек из биологического материала или лекарственных форм, прибавляют 5 мл воды. После растворения сухого остатка полученный раствор фильтруют, затем к фильтрату прибавляют 1 каплю 2 н. раствора аммиака (рН~10) и снимают спектр поглощения. Этаминал-натрия имеет максимум поглощения при длине волны около 240 нм. Если к этому раствору прибавить 1--2 капли 2н. раствора серной кислоты (рН~2), то максимум поглощения исчезает. После прибавления к раствору 1--2 капель 4 н. раствора гидроксида натрия (рН~13) появляется максимум поглощения при 255 нм. В ИК-области спектра этаминал (диск с бромидом калия) имеет основные пики при 1685, 1719 и 1744 см -1.

9. Обнаружение этаминал-натрия методом хроматографии.

На хроматографической пластинке, покрытой закрепленным тонким слоем силикагеля, отмечают линию старта, на которую наносят каплю хлороформной вытяжки из биологического материала или каплю хлороформного раствора исследуемого вещества. Правее на расстоянии 2 см от нее на линию старта наносят каплю раствора «свидетеля» (0,01 %-й раствор препарата в метиловом спирте). Пятна на пластинке подсушивают на воздухе, а затем пластинку вносят в камеру для хроматографирования, насыщенную парами растворителей (хлороформ -- бензол -- ацетон в соотношении 70:15:15). После того как система растворителей поднимется на 10 см выше линии старта, пластинку вынимают из камеры, подсушивают на воздухе, а затем опрыскивают смесью, состоящей из 0,25 г безводного сульфата меди, 1,5 мл диэтиламина и 48,5 мл метилового спирта. Пластинку дополнительно опрыскивают насыщенным раствором нитрата ртути (I).

При наличии этаминал-натрия в пробе на желтом фоне хроматографической пластинки появляются черные пятна (Rf = 0,58-0,62).

4. Судебно-химический анализ отравления димедролом

Димедрол - (N,N-диметил-2-(дифенилметокси)-этиламина гидрохлорид) - белый мелкокристаллический порошок горького вкуса; вызывает на языке чувство онемения. Гироскопичен. Легко растворим в воде, очень легко - в спирте. рН=9,0.

Димедрол образует осадки с реактивами группового осаждения алкалоидов.

Реакция с концентрированной серной кислотой.

К сухому остатку на фарфоровой чашке добавляют 1 каплю конц.серной кислоты, наблюдают лимонно-желтое окрашивание, исчезающие при добавлении 2-3 капель воды.

Оксониевая соль (лимонно-желтое окрашивание)

1. Реакция с реактивом Марки.

К сухому остатку на фарфоровой чашке добавляют 1 каплю реактива Марки, наблюдают лимонно-желтое окрашивание, переходящее при нагревании в красное и коричневое.

2. Реакция с реактивом Эрдмана.

К сухому остатку на фарфоровой чашке добавляют 50мкл реактива Эрдмана, наблюдают розовое окрашивание.

3. Реакция с концентрированной азотной кислотой.

Изменения не наблюдаются.

4. Реакция со смесью концентрированных серной и азотной кислот (1:9).

К сухому остатку на фарфоровой чашке добавляют смесь кислот, появляется красное окрашивание, которое после прибавления по каплям (при помешивании и охлаждении) воды переходит в коричневое, желтое, а затем в оранжевое. При последующем взбалтывании с хлороформом его слой приобретает фиолетовую окраску.

5. Реакция с реактивом Фреде.

К сухому остатку на фарфоровой чашке добавляют каплю реактива Фреде, появляется желтое окрашивание, переходящее при нагревании в красное.

6. Реакция с индигокармином.

Сухой остаток на предметном стекле растворяют в 1кап. 0,1 М раствора хлористоводородной кислоты, добавляют 1 кап. 0,3% раствора индигокармина. Через 3-5минут наблюдают кристаллы в виде сфероидов синего цвета. Открываемый минимум 10мкг.

7. Реакция с хлороводородной кислотой.

При кипячении с разведенной хлороводородной кислотой происходит процесс гидролиза с образованием бензгидрола:

8. Обнаружение димедрола методом ТСХ.

Извлечение: щелочное, хлороформом

ТСХ системы:

А) n-бутанол - метанол (4:6)

Б) метанол - аммиак (100:1,5)

В) хлороформ - ацетон - аммиак (12:24:1)

Проявитель: реактив Драгендорф - пятна оранжево-коричневого цвета.

Реактив Эрдмана - пятна вишневого цвета

Rf составляет 0,67-0,68

9. Обнаружение димедрола методомУФ-спектроскопии.

Используют УФ-спектр 0,05%-раствора в этаноле. Он имеет в области от 240 до 280нм максимумы поглощения при 253, 258 и 264нм и минимумы поглощения при 244, 255, 263нм (во всех случаях допускаются отклонения + 2нм). Удельные показатели поглощения у них сравнительно небольшие (12-16), что не дает возможности выполнять прямое спектрофотометрическое определение с достаточной точностью.

5. Судебно-химический анализ отравления нитразепамом

Нитразепам (радедорм, эуноктин, могадон, неозепам и др.) -- светло-желтый или светло-желтый с зеленым оттенком кристаллический порошок. Практически нерастворим в этиловом спирте и хлороформе.

Метаболизм. Метаболитами нитразепама являются 7-амино-метаболит, 7-ацетиламино-метаболит. В течение 48 ч из организма выделяется около 23 % принятой дозы нитразепама. В неизмененном виде с мочой выделяется около 5 % этого препарата. Свыше 8 % нитразепама выделяется с мочой в виде 7-амино-метаболита и около 10%--в виде 7-ацетиламино-метаболита. Часть неизмененного нитразепама может быть обнаружена в кале.

Выделение нитразепама из биологического материала.

Биологический материал трижды настаивают с новыми порциями насыщенного водного раствора щавелевой кислоты (рН=1). Через 1 ч после каждого настаивания вытяжки отделяют от биологического материала центрифугированием. Объединенный кислый центрифугат трижды взбалтывают со смесью (1:1) хлороформа и этилацетата (по 20, 15 и 15 мл). Затем кислый центрифугат подщелачивают до рН = 10 и трижды взбалтывают с новыми порциями (20, 15 и 15 мл) смеси хлороформа и этилацетата (1:1). Полученные при этом вытяжки подвергают исследованию на наличие нитразепама.

Предварительные пробы на наличие нитразепама в моче.

Нитразепам можно обнаружить в моче в неизмененном виде и в виде 7-амино- и 7-ацетиламино-производных, являющихся метаболитами этого препарата: 5мл мочи подщелачивают аммиаком до рН=10 и прибавляют 250 г дитионита натрия (Na 2 S 2 O 4 ). Смесь взбалтывают в течение 10 мин, затем нагревают при 50°С в течение часа и охлаждают. Охлажденную жидкость 10 мин взбалтывают с 10 мл смеси, состоящей из равных объемов метиленхлорида и этилацетата. После этого от водной фазы отделяют слой смеси органических растворителей. Слой взбалтывают с 10 мл 5%-го раствора буры. Водную фазу отделяют от фазы органических растворителей. К фазе органических растворителей прибавляют 5 мл 0,2н. раствора соляной кислоты и взбалтывают. После этого отделяют фазу органических растворителей. 4 мл кислой водной фазы охлаждают в ледяной воде и прибавляют 0,2мл 0,4н. раствора нитрита натрия. Через 5 мин к кислому раствору прибавляют 0,2мл 2%-го раствора сульфамината аммония. Жидкость хорошо перемешивают и оставляют на 5 мин, а затем прибавляют 0,2 мл 0,4 %-го раствора N-1-нафтилэтилендиамина дигидрохлорида. При наличии нитразепама в моче появляется вишнево-красная окраска (А = 555 нм).

Выделение метаболитов нитразепама из мочи.

Выделение этих соединений из мочи проводят так же, как и при обнаружении нитразепама, находящегося в моче в неизмененном виде. Однако при исследовании метаболитов в процессе их выделения из мочи к ней не прибавляют дитионит натрия. Выделенные из мочи метаболиты нитразепама обнаруживают методом хроматографии.

Обнаружение нитразепама и его метаболитов методом хроматографии.

Исследуемый раствор наносят на хроматографическую пластинку, покрытую тонким закрепленным слоем силикагеля (на пластинку 9х12см наносят суспензию, состоящую из 2,6г силикагеля, 0,2г гипса и 7мл 0,1М раствора гидросульфата калия, высушивают) или на пластинку «силуфол». Для развития хроматограммы на пластинке применяют систему растворителей, являющуюся смесью этилацетата, метилового спирта и 25%-го аммиака (85:10:5). Пятна нитразепама и его метаболитов на пластинках проявляются реактивом Драгендорфа.

Обнаружение нитразепама по УФ- и ИК-спектрам.

Раствор нитразепама в этиловом спирте имеет максимумы поглощения при 218 и 260 нм, в 0,1м. растворе серной кислоты имеет максимум поглощения при 277нм и изгиб около 340нм; нитразепам в ИК-области спектра (диск с бромидом калия) имеет основные пики при 1692, 1615, 1352 и 702 см-1.

АКТ

судебно-химического исследования

№311

Исследование начато «08» августа 2015 г.

Исследование окончено «11» августа 2015 г.

На основании направления государственного судебно-медицинского эксперта ГБУЗ КО ОТ НКБСМЭ от «08» августа 2015 года в судебно-химическом отделении судебно-химической лаборатории ГБУЗ КООТ «Новокузнецкое клиническое бюро судебно-химической экспертизы», студенткой 5 курса 2 группы Щелоковой Екатериной Дмитриевной на кафедре фармацевтической химии НГМУ 08.08.2015года начато судебно-химическое исследование биологических материалов гражданина Синькина Степана Александровича 1992г.р., с целью обнаружения нитразепама

ОБСТОЯТЕЛЬСТВА ДЕЛА: В направлении судебно-медицинского эксперта указано: «В ГКБ №1. Выпил 50 таблеток Нитразепама. DS: Отравление нитразепамом»

ОПИСАНИЕ ОБЪЕКТОВ. Стеклянная банка емкостью 500мл, содержит часть стенки желудка с содержимым общей массой 250г. Стенка желудка розового цвета, запах без особенностей, рН=6 по универсальному индикатору. Содержимое желудка массой 50г, бурого цвета, запах без особенностей, рН=6 по универсальному индикатору. Банка закрыта полиэтиленовой пленкой, обвязана нить х/б. Этикета на банке соответствует содержимому и направлению эксперта.------------------------------------------------

ХИМИЧЕСКОЕ ИССЛЕДОВАНИЕ. 50г стенки желудка тщательно измельчали, заливали 100мл дистиллированной воды, подкисленной насыщенным раствором щавелевой кислоты до рН=2 по универсальному индикатору, и настаивали в течение двух часов при периодическом взбалтывании. Водное извлечение сливали с твердых частиц объекта, а последние вновь настаивали в течение одного часа с 50 мл дистиллированной воды, подкисленной насыщенным раствором щавелевой кислоты до рН=2 по универсальному индикатору. Водные вытяжки объединяла, процеживала через двойной слой марли, помещала в делительную воронку и экстрагировала 3 раза по 30мл диэтилового эфира в течение 5 минут (перемешивая фазы без энергичного встряхивания). Эфирные экстракты объединяла, фильтровали через небольшой слой безводного сульфата натрия и упаривала при комнатной температуре досуха. Кислую водную фазу, подщелачивала 25% водным раствором аммиака до рН=9-10 по универсальному индикатору и, дважды экстрагировала по 30мл хлороформа в течение 5минут (перемешивая фазы без энергичного встряхивания). Затем водную фазу подщелачивала 50% раствором гидроксида натрия до рН=13 по универсальному индикатору и вновь дважды экстрагировала по 30мл хлороформа в т ечение 5 минут (перемешивая фазы без энергичного встряхивания). Хлороформные экстракты объединяла и упаривала при комнатной температуре досуха. Сухие остатки кислого и щелочного экстрактов растворяли в 5 мл хлороформа (раздельно). Полученные извлечения исследовали. 1мл щелочного извлечения упаривали до минимального объема и наносили в одну точку на стартовую линию хроматографической пластинки «Сорбфил». В качестве метчиков на стартовую линию хроматографической пластинки настаивала 40мкл спиртового раствора основания нитразепама, диазепама, оксазепама, хлозепида с концентрацией 1мг/мл. Хроматографировала в системе этилацетата-метилового спирта-25%-го раствора аммиака (85:10:5). Фронт растворителя продвинулся на 9см. Пластинку высушивала и опрыскивала реактивом Драгендорфа, при этом в исследуемой зоне отмечала красно-оранжевое пятно с Rf=0,46. В зоне метчиков отмечала красно-оранжевое пятно с Rf=0,47 для нитразепама, Rf=0,21 для диазепама, Rf=0,07 для оксазепама, Rf=0,00 для хлозепида.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ: На основании проведенного судебно-химического исследования биологического материала (часть стенки желудка с содержимым) гражданина Синькина Степана Александровича (1992г.р.), направленного 08 августа 2015 года с целью обнаружения нитразепама, ОБНАРУЖЕНО: нитразепам. НЕ ОБНАРУЖЕНО: диазепам, оксазепам, хлозепид.

Студентка 5 курса 2 группы Щелокова Екатерина Дмитриевна------------

«11»августа 2015г--------------------------------------------------------------------

Использованная литература

1) Токсикологическая химия: учебник / Крамаренко В.Ф.: Выща шк. Головное изд-во, 1989. - 447с., 10ил., 9 табл. - Библиогр.: 29 назв.

2) Токсикологическая химия : учебник / М.Д. Швайкова - М. : «Медицина», 1975 - 380 с. Швайкова М.Д.

3) Фармацевтическая химия : учебник для вузов / В.Г.Беликов. - МЕДпресс-информ, 2007. - 624 с.

4) Денситометрическое определение некоторых наркотических средств и психотропных веществ в химико-токсикологических исследованиях / Кормишин В.А. - Автореферат диссертации - 14.04.02

5) Интернет ресурсы:

a. http://www.studmed.ru/docs/document15697/лекции-токсикологическая-химия

b. http://www.xumuk.ru/toxicchem/

c. http://kursak.net/gruppa-veshhestv-izoliruemyx-iz-biologicheskogo-materiala-ekstrakciej-i-sorbciej-neletuchie-yady-2/

d. http://kze.docdat.com/docs/201/index-1036471.html?page=5

Размещено на Allbest.ru