Водорастворимые и жирорастворимые витамины

Размещено на http://www.allbest.ru/

Лабораторная работа

Водорастворимые и жирорастворимые витамины



Задача 1. Качественная реакция на витамин В₁ (тиамин)

Описание работы:

В тканях организма витамин В₁ превращается в пирофосфорный эфир - тиаминпирофосфат, являющийся коферментом. Наиболее активна в молекуле тиамина его тиазоловая часть. Реагируя с диазобензолсульфоновой кислотой, он образует соединение, окрашенное в розовый или красный цвет.

Оборудование и химреактивы:

1. Основной раствор диазореактива: 0,9г сульфаниловой кислоты растворить в 9 мл концентрированной соляной кислоты в мерной колбе на 100 мл и довести объем раствора до метки.

2. 5% раствор NaNO₂, приготовленный в день определения.

3. Рабочий раствор диазореактива: в колбе на 50мл на холоду к 1,5 мл основного раствора прилить 1,5 мл свежеприготовленного 5% раствора NaNO₂, затем через 5 минут прилить еще 6 мл 5% раствора NaNO₂ и через 1-2 минуты довести до метки охлажденной дистиллированной водой.

4. 4% раствор NaOH.

5. 5,76% раствор NaHCO₃.

6. Карбонатно-щелочной раствор (КЩР): перед определением смешать 4% раствор NaOH и 5,76% раствор NaHCO₃ в объемном соотношении 1:1.

Исследуемый материал:

Тиаминбромид в порошке.

Ход работы:

к 2 мл карбонатно-щелочного раствора добавить 1 мл диазореактива и 1-2 мг порошка тиаминбромида (на кончике скальпеля, см. таблицу 13). Появляется желтое окрашивание, которое через 1-2 минуты переходит в розовое или красное.

Оформление работы:

Результаты опыта оформить в таблице 14

Задача 2. Качественная реакция на витамин В₂ (рибофлавин)

Описание работы:

Нейтральные и слабокислые растворы рибофлавина (рН 6,5-7,2), реагируя с азотнокислым серебром, дают соединение, окрашенное в розовый и красный цвет.

Оборудование и химреактивы:

Пробирки, пипетки, штативы.

0,1% раствор азотнокислого серебра.

Исследуемый материал:

0,015% раствор рибофлавина.

Ход работы:

К 1 мл раствора рибофлавина добавить 0,5 мл раствора азотнокислого серебра (см. таблицу 13). Появляется розовое или красное окрашивание (интенсивность окраски зависит от концентрации рибофлавина в растворе).

Оформление работы:

Результаты опыта оформить в таблице 14.

Задача 3. Качественная реакция на витамин В₆ (пиридоксин)

Описание работы:

Группа витамина В₆ - пиродоксол, пиридоксаль, пиридоксамин - являются производными пиридоксина и обладают активностью витамина В_6.



Цветная реакция на витамин B₆ обусловлена образованием окрашенной в красный цвет комплексной соли витамина B₆ с хлорным железом.

Оборудование и химреактивы:

Пробирки, штативы, пипетки.

1% раствор хлорного железа.

Исследуемый материал:

1% раствор витамина В_6.

Ход работы:

К 1 мл 1% раствора витамина В₆ прилить 1 мл 1% раствора хлорного железа и перемешать (см. таблицу 13). Развивается красное окрашивание.

Оформление работы:

Результаты опыта оформить в таблице 14.

Задача 4. Качественная реакция на витамин РР (никотиновая кислота)

Описание работы:

Никотиновая кислота образует с CuSO₄ в щелочной среде труднорастворимую в воде медную соль, выпадающую в виде осадка синего цвета. Реакция протекает в стехиометрических соотношениях и нередко используется для количественного анализа:

2(C₆H₅O₇N) + CuSO₄ + 2NaOH > (C₆H₅O₇N)₂Cu + Na₂SO₄ + 2H₂O

Оборудование и химреактивы:

Пробирки, штативы, пипетки.

2% раствор NaOH, 10% раствор CuSO_4.

Исследуемый материал:

3% раствор витамина РР.

Ход работы:

К 1 мл 3% раствора витамины РР добавить 5 мл 2% раствора NaOH и 1 мл 10%-ного раствора CuSO₄ (см. таблицу 13). Выпадает осадок синего цвета.

Оформление работы:

Результаты опыта оформить в таблице 14.

Задача 5. Качественная реакция на витамин Е (токоферол)

Описание работы:

Взаимодействие б-токоферола с концентрированной азотной кислотой приводит к окрашиванию реакционной смеси в красный цвет. Это обусловлено тем, что продукт окисления б-токоферола имеет хиноидную структуру:

Оборудование и химреактивы:

Пробирки, штативы, пипетки, водяная баня.

Концентрированная HNO_3.

Исследуемый материал:

0,1% спиртовой раствор витамина Е.

Ход работы:

В сухую пробирку вносят 5 капель 0,1% спиртового раствора витамина Е и добавляют 2-3 капли концентрированной азотной кислоты (см. таблицу 13). Пробирку интенсивно встряхивают, нагревают 5 минут на водяной бане при температуре 30°С и наблюдают постепенное появление красного окрашивания.



Таблица 13

Инкубационные смеси

1 пробирка (В1)	1 пробирка (В2)	2 пробирка (В6)	3 пробирка (РР)	4 пробирка (Е)
2 мл КЩР	1 мл 0,015% В2	1 мл 1% В6	1 мл 3% РР	5капель 0,1% Е
+ 1мл диазореактива	+0,5мл 0,1% AgNO3	+ 1мл 1% FeCl3	+ 5мл 2% NaOH	+2-3 капли конц. HNO3
+ 1-2мг тиаминбромида (на кончике скальпеля)			+ 1мл 10% CuSO4	5минут при t=30°C

Оформление работы:

Результаты опыта оформить в таблице 14.

Таблица 14. витамин азотный кислота инкубационный

Результаты качественных реакций на витамины.

№	Название витамина	Состав реакционной смеси	Условия проведения реакции	Окраска раствора (осадка)	Чем обусловлена реакция?
1	В1
2	В2
3	В6
4	РР
5	Е

Задача 6. Количественное определение содержания витамина С в овощах и фруктах

Описание работы:

Определение аскорбиновой кислоты методом Тильманса основано на её способности окисляться 2,6-дихлорфенолиндофенолом в дигидроаскорбиновую кислоту:

Определение производят путем титрования исследуемой жидкости 0,001н раствором 2,6- дихлорфенолиндофенола.

Оборудование и химреактивы:

Лабораторные весы с набором разновесов, скальпели, ступки и пестики, пробирки, штативы, воронки, фильтры, бюретки, колбочки для титрования.

2% раствор HCl; раствор 2,6- дихлорфенолиндофенола.

Исследуемый материал:

Овощи и фрукты.

Ход работы:

1. Взвесить шесть навесок трех разных овощей и фруктов по 1 г (на каждый овощ или фрукт по 2 навески).

2. Одну навеску овоща/фрукта растереть с 10 мл дистиллированной Н₂О, а другую того же овоща/фрукта - с 10 мл 2% раствора HCl.

3. Все пробы отфильтровать в отдельные пробирки.

4. В колбочку для титрования отмерить 5 мл полученной вытяжки.

5. Содержимое колбочки титровать 0,001н раствором 2,6- дихлорфенолиндофенола до появления розового окрашивания, не исчезающего в течение 30 секунд.

6. Расчет.

Допустим, на титрование 5 мл вытяжки израсходовано Z мл 0,001н раствора 2,6-дихлорфенолиндофенола. Известно, что 1 мл 0,001н раствора 2,6-дихлорфенолиндофенола соответствует 0,088 мг аскорбиновой кислоты. Составляем пропорцию:

1мл 0,001н 2,6- дихлорфенолиндофенола -- 0,088 мг аскорбата

Z мл 0,001н 2,6- дихлорфенолиндофенола -- x мг аскорбата

,

где x - содержание аскорбата (в мг) 5 мл вытяжки,

Z - количество 2,6-дихлорфенолиндофенола в мл, израсходованное на титрование исследуемых вытяжек.

Во всей вытяжке (10 мл) содержится 2*x аскорбиновой кислоты (в мг).

На приготовление 10 мл фильтрата израсходован 1г растительной ткани. Следовательно, в 100 г продукта содержится 100*2*х мг аскорбиновой кислоты. Эта величина соответствует содержанию вещества, выраженному в мг% (количество вещества в мг в 100 г ткани).

Оформление работы:

Результаты эксперимента внести в таблицу 15, сделать вывод о том, в каком овоще/фрукте содержание витамина С максимальное, в каком - минимальное, при каких условиях происходит наилучшая экстракция витамина С из исследованных растительных тканей.



Таблица 15.

Результаты определения содержания аскорбата в растительных тканях

Объект исследо-вания	Условия экстракции	Количество израсходованного 2,6-дихлорфенол-индофенола	Количество витамина С (мг) в 5 мл вытяжки	Количество витамина С в 1г ткани	Мг% витамина С
1)	1.Н2О
	2. 2% НСl
2)	1.Н2О
	2. 2% НСl
3)	1.Н2О
	2. 2% НСl

Задача 7. Количественное определение содержания витамина Р в чае

Описание работы:

Известны несколько соединений, оказывающих Р-витаминное действие (рутин и др.). В основе их лежит скелет флавона. Витамины Р и С действуют взаимсвязанно; они участвуют в окислительно-восстановительных процессах. Терапевтическое действие витамина С более эффективно в присутствии витамина Р. При недостатке в организме витамина Р у человека повышается проницаемость капилляров.

Рутин - кристаллическое вещество желто-оранжевого цвета. Содержится в тех продуктах, что и витамин С: в чае, фруктах, ягодах (бруснике, клюкве и др.). Количественное определение витамина Р проводят в вытяжке из чая.

Рутин способен окисляться перманганатом калия. В качестве индикатора применяется индигокармин, который вступает в реакцию с перманганатом калия после того, как окислится весь рутин. Экспериментально установлено, что 1 мл 0,1 н раствора перманганата калия окисляет 6,4 мкг рутина.

Оборудование и химреактивы:

Весы с набором разновесов, пробирки, пипетки, лабораторные стаканчики, колбочка для титрования, бюретка.

0,05н раствор перманганата калия, индигокармин.

Исследуемый материал:

Чай.

Ход работы:

1. Взвесить навеску чая 100 мг.

2. В стаканчике к 100мг чая прилить 50 мл горячей дистиллированной воды и экстрагировать в течение 5 минут

3. В колбочку для титрования отобрать 10 мл экстракта чая.

4. Добавить в экстракт чая 10 мл дистиллированной воды и 5 капель индигокармина (появляется синее окрашивание).

5. Титровать из бюретки 0,05 н раствором КМnO₄ до появления устойчивой желтой окраски.

Расчет.

Содержание рутина в чае проводят по следующей формуле:

, где

х - содержание витамина Р в препарате, %;

3,2 - стандартный коэффициент пересчета;

А - количество титранта, мл;

V1 - объем, в котором растворена взятая для анализа навеска, мл;

100 - общее количество вещества для расчета процентного содержания, г;

V2 - объем раствора, взятого для титрования, мл;

Р - навеска, мг;

1000 - перевод мкг в мг.

Оформление работы:

Расчет процентного содержания витамина Р в чае записать в тетрадь.

Размещено на Allbest.ru