Размещено на http://www.allbest.ru/

Введение

Галогенесодержащне органические соединения, многие из которых являются канцерогенными веществами [311], относятся к наиболее распространенным загрязнителям атмосферного воздуха. При этом в последние годы опасность загрязнения окружающей среды этими веществами постоянно увеличивается в связи со все возрастающими масштабами развития производства этих соединений в виде пестицидов, винилхлорида, поливинилхлорида, фторуглеродсодержащих хладагентов (фреонов), ракетного топлива и хлорсодержащих растворителей (трихлорэтилен, дихлорэтан, хлороформ и др.).

Глава 1. Галогенсодержащие соединения. Хлорорганические пестициды в атмосферном воздухе

хлорорганический пестицид продукт разложение

Галогенсодержащие органические соединения, многие из которых являются канцерогенными веществами [311], относятся к наиболее распространенным загрязнителям атмосферного воздуха. При этом в последние годы опасность загрязнения окружающей среды этими веществами постоянно увеличивается в связи со все возрастающими масштабами развития производства этих соединений в виде пестицидов, винилхлорида, поливинилхлорида, фторуглеродсодержащих хладагентов (фреонов), ракетного топлива и хлорсодержащих растворителей (трихлорэтилен, дихлорэтан, хлороформ и др.). Мировое производство хлорфторуглеводородов (в основном это хлорфторметаны, CCI3F и CCI2F2, на долю которых приходится около 90% всех фреонов) составляет несколько миллионов тонн в-год, причем две трети этого количества применяют в качестве носителей в различных бытовых аэрозолях [312], Основным источником поступления этих соединений в атмосферу являются рефрижераторные установки и всевозможные бытовые аэрозоли. В 1975 г. 85% хлорфторметанов было выброшено в атмосферу и лишь остальные 15% использовали в холодильных установках и кондиционерах [312]. Вследствие высокой химической инертности и малой растворимости в воде CF2CI2 и CFCb способны долгое время находиться в атмосфере без изменений. Наиболее важным химическим превращением этих веществ является их фотодиссоциация под действием УФ-раднации солнца (длина волны 200 нм), сопровождающаяся образованием атомов хлора и потреблением атмосферного озона [313]. Поскольку содержание хлорфторметанов в тропосфере и стратосфере постоянно возрастает, эти фотохимические реакции могут привести к нарушению равновесного содержания озона и к уменьшению его количества в стратосфере, что приведет к существенному изменению климата нашей планеты не менее важна и проблема загрязнения окружающей среды пестицидами группы хлорированных углеводородов [315]. К этим очень устойчивым химическим соединениям относят хлорпроиз-водные полиядерных углеводородов (ДДТ), циклопарафинов (гек-сахлорциклогексан), соединений диенового ряда (гсптахлор, альдрин), терпенов (полихлорпинен, полихлоркамфен) и др. Проблемы попадания пестицидов в атмосферу и их превращения в атмосферном воздухе, а также проблемы отбора проб и анализа паров и аэрозолей пестицидов в воздухе подробно рассмотрены в монографии [315JL Пестициды поступают в воздух в результате ветровой эрозии почвы, при сжигании сельскохозяйственных отходов и испарений с поверхности почвы и водоемов и попадают в атмосферу в виде паров, капель жидкости и твердых частиц. Некоторая часть хлорсодержащих пестицидов быстро испаряется с поверхности почвы, однако затем этот процесс резко замедляется. Длительность пребывания пестицидов в атмосфере зависит от их растворимости в воде. Так, линдан, например, быстро поглощается дождевыми каплями, а ДДТ и другие хлорсодержащие пестициды сорбируются на поверхности пылевых частиц и могут оставаться в атмосфере до 6 месяцев [316, 317].

Как и фреоны, хлорсодержащие пестициды активно участвуют в фотохимических реакциях, протекающих в атмосфере [315]. В результате атмосфера загрязняется как самими хлоруглеводородами, так и продуктами их превращения и взаимодействия с другими загрязнителями воздуха, и анализ подобных композиций вредных химических веществ достаточно сложен. Аналогично ведут себя в атмосфере и другие галогенсодержащие органические соединения. Так, под действием солнечной радиации бромбензол, бромистый пропил и неорганические соединения брома и фтора (в присутствии загрязняющих воздух оксидов азота, углеводородов и кислородсодержащих веществ) превращаются в свободный бром, альдегиды, спирты, кислоты, нитросоединения, циклические соединения и другие вещества, которые по токсичности часто значительно превосходят исходные соединения [318].

Галогенуглеводороды

Загрязненный галогенсодержащими органическими соединениями воздух производственных помещений не является таким трудным для анализа объектом, как атмосферный воздух, в котором происходит превращение галогенуглеводородов в результате фотохимических реакций.

Стандартные способы определения в воздухе следов некоторых летучих хлорированных алифатических углеводородов приведены в работе [319]. Чаще всего легкие галогенуглеводороды концентрируют из воздуха в коротких колонках с графитированной сажей [320] или активным углем. Кипячение 12 г угля с 50 мл 1 н. соляной кислоты в течение 2 ч предотвращает разложение сконцентрированных на нем хлоруглеводородов, которое может происходить в ловушке с необработанным углем [322].

Наилучшими неподвижными фазами для разделения хлоруглеводородов являются, на наш взгляд, полэтиленгликоль 1500 (на графитированной саже, используемой в качестве твердого носителя) [323] и дибутилфосфат (на хроматоне) [324], а наиболее селективными и чувствительными детекторами для хроматографического анализа микропримесей галогенсодержащих углеводородов служат КУЛД и ЭЗД [325, 326]. Из этих детекторов последний является идеальным детектором для анализа большинства галогенсодержащих веществ. Чувствительность ЭЗД к некоторым органическим соединениям хлора достигает 8,5-10~"% [327]. Это позволяет определять примеси галогенированных углеводородов в воздухе без предварительного обогащения пробы. В то же время при анализе более высоких концентраций (Ю-4--10~5%) в воздухе рабочей зоны для этих целей достаточно и чувствительности пламенно-ионизационного детектора, особенно если в процесс отбора происходит еще и одновременное концентрирование пробы. Этот универсальный и наиболее распространенный детектор успешно применяют при определении в заводском воздухе хлоропре-на и сопутствующих ему легких хлоруглеводородов (дихлорбутадиена, дихлорбутена и трихлорбутена) [328--330], хлористогоаллила [331] и его смеси с четыреххлористым углеродом, 1,2-дихлорпропаном, эпихлоргидрином и тетрахлорэтиленом [332], хлороформа [333], трихлорэтилена [334], дихлорэтана [335], моно-хлорпропенов и других легких хлоруглеводородов [336], хлорбензола и о-дихлорбензола [337] и изомеров нитрохлорбензола [338]. С помощью ПИД можно определять в воздухе и микропримеси четыреххлористого углерода и паров других растворителей [339, 34Q], но гораздо более удобно использовать для этой цели ЭЗД, чувствительность которого к СС14 на несколько порядков выше, чем у ПИД [341]. Однако необходимо отметить, что так дело обстоит далеко не всегда, поскольку чувствительность ЭЗД в общем случае пропорциональная числу атомов галогена в молекуле де тектируемого соединения. В данном случае (4 атома хлора в молекуле ССЦ) чувствительность достаточно велика, а в случае апализа винилхлорида, метилхлорида и подобных им соединений (один атом хлора) она даже ниже, чем у ПИД.

Для быстрого определения в атмосфере метилхлорида в качестве детектора применяли масс-спектрометр [342]. Газовую хроматографию использовали для определения в воздухе сложных смесей хлоруглеводородов [343--345], анализа смеси хлорацетилхлорида и хлоруксусной кислоты [346], определения хлоруглеводородов в выдыхаемом воздухе [347]! и анализа отходящих газов мусоросжигательных заводов [348]. Эти выбросы в атмосферу содержат различные токсичные соединения неорганической и органической природы, поскольку около 15% всего мусора (отходов) в мире сжигается, и состав этих отходов весьма разнообразен. В частности, сжигается большое количество пластмасс, продукты горения которых богаты сильно токсичными газами (фосген, хлор, синильная кислота и др.) и вредными веществами органического происхождения.

Для анализа фтор- и бромпроизводных углеводородов используют те же приемы, что и для определения микропримесей хлорированных углеводородов, а для фиксирования микроколичеств этих загрязнителей в основном также применяют ЭЗД [349]. Описано хроматографическое определение фторированных углеводородов в атмосфере [350], анализ примесей фторорганических кислот [351], продуктов пиролиза тефлона, среди которых обнаружены высокотоксичные тетрафторэтилен, гексафторпропилен и перфторизобутилен [352], метод определения тетрафтордибромэтапа и бромистого этила в атмосфере шахт [353], фторотана, применяемого для ингаляционного наркоза [354], и определение в воздухе канцерогенного 1,2-дибромэтана, добавляемого к бензину [355]. В последнем случае пробу отбирали в ловушку с хромосорбом 102 и анализировали на хроматографе с ЭЗД.

Глава 2. Токсикологические свойства хлоорганических пестицидов

Хлорорганические соединения включают вещества, относящиеся к различным химическим группам: ДДТ (CgHsCU), гексахлоран С6Н6С1 (изомеры), алдрин (Ci2H8Cl6), дилдрин (С12Н8С1бО), гептахлор (CioH5Cl7), хлориндан (СюН6С18), хлор-фен (CioHiaCls), эфирсульфонат (C^HsSOsCU), хлортен (производное терпенов), гексахлорбензол (производное бензола). Большинство соединений являются твердыми веществами, хорошо растворимыми в жирах. Применяются в сельском хозяйстве главным образом в качестве инсектицидов (в виде дустов, эмульсий, растворов в органических растворителях). В организм .поступают преимущественно ингаляционным путем, а также пероральяо, через кожу. Выделяются желудочно-кишечным трактом, почками, молочными железами. Хлорорганические соединения обладают кумулятивным действием. Накапливаются они преимущественно в паренхиматозных органах, в липоидоеодержащих тканях. Оказывают влияние на -процессы окисления и фосфорилирования, блокируют функцию дыхательных ферментов, нарушают обмен веществ (углеводный и другие). По токсическому действию хлорорганические соединения относятся к паренхиматозным, нервным ядам. По возрастающей токсичности они могут быть распределены в следующем порядке: хлориндан, гаптахлор, ДДТ, хлорфен, хлортен, гексахлоран, алдрин. При контакте с хлорорганичеакими соединениями наблюдаются острые и хронические интоксикации, эффект кумуляции. Хроническое отравление хлорорганическими соединениями сопровождается функциональным нарушением нервной деятельности (астено-вегетативный синдром), а также изменением функции внутренних органов (печени, почек, сердечно-сосудистой системы, желудочно-кишечного тракта, поджелудочной железы и желез внутренней секреции). Могут быть начальные явления энцефалополиневрита. Хлорорганические соединения вызывают профессиональный дерматит.

Хлорорганические соединения наиболее широко применяются в сельском хозяйстве для борьбы со многими вредителями сельского хозяйства, обладают широким спектром действия. Все хлорорганичеекие ядохимикаты плохо растворимы в воде, хорошо растворимы в органических растворителях и маслах. Обладают сродством к жирам и липоидам, в связи с чем концентрация их в органах и тканях организма пропорциональна содержанию в последних жиролипоидных веществ. Хлорорганические соединения задерживаются в нервной ткани и липоидах паренхиматозных органов, нарушая в них процессы окисления и фосфор'Шшрования. Отмечены нарушения углеводного обмена. Хлорорганические соединения обладают блокирующим действием на дыхательные ферменты клеток, угнетают потребление кислорода и тормозят цитохромоксидазную активность тканей. Они относятся к ядам политропного действия с преимущественным поражением -центральной нервной системы и паренхиматозных органов, в частности печени. Отравления ими в основном характеризуются поражением центральной и периферической нервной системы, печени, почек, нарушением функций эндокринной, сердечно-сосудистой системы, .кроветворения. Хлорорганические пестициды могут обусловить 'как острые, так и хронические отравления. Некоторые из «их (эндрин, изодрин, дилдрин и др.) представляют большую опасность острых отравлений. Все хлор-органические препараты представляют опасность хронического отравления. У многих представителей этой группы инсектицидов резко выражено кумулятивное действие -- способность накапливаться в организме. Имеется обширная информация из многих стран, которая указывает на накопление пестицидов в организме людей как у отдельных профессиональных групп, так и у всего населения. Наиболее часто в тканях и женском молоке определяются такие соединения, ,как ДДТ, ДДЗ, ДДД, линдан, дилдрин, алдрин, гептахлорэпоксид и др. Хотя основное количество хлорорганических соединений обнаруживается в жировой ткани, их определяют также в печени, головном мозгу, в липоидах костного мозга. По мнению зарубежных исследователей, основным источником поступления в организм хлорорганических пестицидов являются пища, вода, контакт в быту и садоводстве. Значительное количество поступает с мясом и животными.

Пестициды -- вещества из различных классов органических и неорганических соединений: хлорорганические соединения, производные триа-зина, производные галогенобензойных кислот, амиды и нитрилы кислот, нитрофенолы, производные арилкарбаминовых и алкилкарбаминовых кислот, производные мочевины, органические соединения фосфора и т. д.

Малолетучие сложные эфиры, как, например, эфиры кислот фосфора и фтора, которые являются весьма опасными из-за их высокой токсичности, сочетающейся со способностью проникать через кожу, а также высокотоксичные хлорзамещенные углеводороды, такие как хлорорганические соединения диенового синтеза и др.

Кроме того, химические вещества выделяются из организма с грудным молоком - некоторые неэлектролиты, инсектициды, хлорорганические соединения, металлы.

Женское бесплодие отмечается в возрасте 15-24 лет в 4,1 % случаев, в возрасте 25-34 лет -- в 13,1 %, 35-44 лет -- в 21,4 %. Риск спонтанного выкидыша в возрасте 20-29 лет равен 10 %, в возрасте 45 лет и более -- 50 %. Нарушение выражается в нарушении их овариально-менструальной функции женских половых желез. К веществам, обладающим выраженным гонадотропным действием, относятся циклические углеводороды (бензол и его производные), хлорорганические соединения, некоторые металлы (никель, марганец) и др.

Хлорорганические соединения, ПХБ и углеводороды. 1. Болезнь Юшо (Ю-Чеиг, болезнь рисового масла) возникала у употреблявших в пищу рис, загрязненный трансформаторным маслом (в Японии 1800 чел. и на о.Тайвань 2000 чел.). Ранними признаками заболевания были увеличение и гиперсекреция мейбомиевых желез глаз, набухание век, пигментация ногтей и слизистых оболочек, слабость, тошнота, рвота. За этими симптомами обычно следовали гиперкератоз и потемнение кожи с появлением хлоракне (угреватая сыпи), часто осложнявшихся вторичной стафилококковой инфекцией. У некоторых больных отмечался отек рук и ног. У некоторых лиц с болезнью Юшо отмечались чувство онемения в руках и ногах, замедление проведения нервных импульсов в периферических чувствительных нервах. Дети, родившиеся у матерей с болезнью Юшо, имели пониженную массу и длину тела. Нейротоксическое действие на плод проявилось в снижении интеллекта, гиперактивности, нарушении поведения.

Глава 3. Анализ хлоорганических пестицидов в воздухе. Методика определения хлорорганических пестицидов и продуктов их разложения

Метод основан на извлечении определяемых соединений из воды н-гексаном, очистке полученного экстракта концентрированной серной кислотой с последующим определением с помощью последовательного сочетания газожидкостной и тонкослойной хроматографии. Последовательное сочетание хроматографических методов используется для повышения надежности идентификации определяемых соединений в результате анализа аликвоты конечного экстракта пробы сначала с помощью газожидкостной, а затем с помощью тонкослойной хроматографии. Кроме того, для повышения надежности идентификации при определении с помощью газожидкостной хроматографии используется анализ на двух неподвижных фазах различной полярности.

Повышение надежности идентификации при определении с помощью тонкослойной хроматографии достигается хроматографированием в следующих системах подвижных растворителей: 1) н-гексан; 2) гексан - ацетон (6:1);

3) 1-процентный раствор ацетона в н-гексане и при использовании различных проявляющих реактивов для обнаружения соединений на хроматограммах (азотнокислое серебро, о-толуидин). Совпадение объемов удерживания и величин R определяемых соединений с этими же величинами для стандартных соединений позволяет значительно повысить достоверность идентификации.

Условия разделения как в случае газожидкостной, так и в случае тонкослойной хроматографии позволяют провести раздельное определение 8-ми соединений при их нахождении в смеси в одной анализируемой пробе.

Для повышения представительности анализа и снижения пределов обнаружения (при определении хлорорганических пестицидов в подземных водах, водоемах рыбохозяйственного назначения и т.п.) концентрирование анализируемых соединений осуществляется с помощью экстракционного извлечения из 5 - 10 л воды бензолом, находящимся в сополимере стирола с 2% дивинилбензола, помещенном в стеклянную колонку.

Метрологическая характеристика метода. Минимально детектируемые количества анализируемых соединений с помощью газожидкостной хроматографии составляют: альфа-изомер ГХЦГ, гамма-изомер ГХЦГ, гептахлор, альдрин - 0,01 нг, кельтан, 4,4'-ДДТ, 4,4'-ДДД, 4,4'-ДДЭ - 0,02нг. Линейный динамический диапазон детектирования находится в пределах 0,01 - 1,7 нг

Пробу воды (250 мл) помещают в делительную воронку и извлекают хлорорганические пестициды тремя порциями н-гексана (3 х 30 мл). Продолжительность одной операции экстрагирования 3 минуты. К объединенному гексановомуэкстракту приливают 10 мл серной кислоты, насыщенной безводным сернокислым натрием, и осторожно несколько раз встряхивают. Кислотный слой отбрасывают. Обработку гексанового слоя кислотой повторяют до тех пор, пока кислота не станет бесцветной. Очищенный гексановый экстракт промывают несколькими порциями (около 10 мл) дистиллированной воды до нейтральной реакции промывных вод, сушат безводным сернокислым натрием (10 - 15 г) и удаляют растворитель на ротационном испарителе до объема 0,3 - 0,5 мл, а затем досуха на воздухе. Сухой остаток растворяют в 1 мл н-гексана и вводят в хроматограф 3 - 5 мкл.

При необходимости определения пестицидов в пробах на уровне 0,01 - 1,0 мкг/л и ниже пробу воды (5 - 10 л) пропускают со скоростью 80 - 100 мл/мин. через колонку, подготовленную следующим образом: 20 г сополимера стирола с 2% дивинилбензола, предварительно отмытого бензолом от продуктов, не вошедших в реакцию сополимеризации, и набухшего в бензоле, переносят с водой в стеклянную колонку (длина 40 см, внутренний диаметр 2,15 см) с краном на конце. Для набухания сополимер помещают в делительную воронку на 250 мл и заливают избытком бензола на 1,5 - 2 часа. Высота слоя сополимера в колонке - 21 см, количество бензола, связанное сополимером, - 44 - 46 мл. Сверху и снизу слой сополимера ограничивают тампонами из стекловаты. После окончания пропускания воды оставшуюся воду в колонке отсасывают с помощью вакуумного водоструйного насоса, затем на 40 - 60 минут заливают чистым бензолом и собирают 100 мл бензольного элюата, содержащего концентрируемые пестициды, со скоростью 2 мл/мин. С полученным бензольнымэлюатом поступают так, как это описано выше.

После проведения определения методом газожидкостной хроматографии оставшуюся часть экстракта пробы наносят на хроматографическую пластинку на расстоянии 1,5 см от ее края с помощью шприца или микропипетки в одну точку так, чтобы диаметр пятна не превышал 1 см. Справа и слева от пробы наносят стандарты анализируемых соединений в количестве 1, 2, 4 мкг. Затем пластинку помещают в камеру для хроматографирования, в которую за 30 минут до проведения хроматографирования налит подвижный растворитель. При использовании пластинок с тонким слоем окиси алюминия или силикагеля хроматографирование проводят в н-гексане или смеси н-гексана и ацетона (6:1) (для соединений, у которых величина R в гексане ниже 0,3). При использовании пластинок "Силуфол" в качестве подвижного растворителя используют 1% раствор ацетона в н-гексане. После того, как фронт растворителя поднимется на 10 см, пластинку извлекают из камеры, отмечают границу фронта растворителя и сушат на воздухе в вытяжном шкафу. Затем пластинку обрабатывают проявляющим реактивом и подвергают действию УФ-света в течение 10 - 15 минут.

Методические указания по определению в одной пробе фосфорорганических и хлорорганических пестицидов, применяемых на томатах, хроматографическими методами

Краткая характеристика препаратов. На томатах применяют фосфорорганические пестициды (ФОП) - актеллик, базудин, ДДВФ, карбофос, трихлорметафос-3, фозалон, фосфамид, хлорофос, хостаквик, а также хлорорганические пестициды (ХОП) - дилор и кельтан. Физико-химические свойства препаратов приведены в Унифицированной методике.

МДУ актеллика, фозалона, дилора составляет 0,2 мг/кг; базудина, карбофоса - 0,5; хлорофоса, хостаквика - 0,1; фосфамида - 0,4; трихлорметафоса - 3; кельтана - 1,0 мг/кг.

Принцип метода. Метод основан на извлечении смеси ХОП и ФОП из единой пробы томатов или томатной пасты водным ацетоном, перераспределении в хлороформ, разделении экстракта на 2 равные части, в одной из которых определяют ФОП, в другой - ХОП путем сочетания методов ТСХЭ, ГЖХ, ТСХ и различных способов очистки экстрактов.

Избирательность метода. Применение различных способов очистки экстрактов, а также сочетание хроматографических методов с использованием различных фаз, детекторов и проявляющих реагентов позволяют идентифицировать при совместном присутствии ФОП и ХОП, применяемые на томатах.

Реактивы и растворы. Ацетон ч. н-Гексан ч., х.ч. Четыреххлористый углерод х.ч., ч.д.а. Хлороформ ч.д.а. Безводный сульфат натрия ч.д.а. свежепрокаленный.Вата гигроскопическая, обезжиренная эфиром. Фильтры бумажные "красная лента". Серная кислота концентрированная. Уголь активированный ОУ-А. Реактивы для ТСХЭ см. в Унифицированной методике.

Неподвижные фазы: 5% SE-30 на хроматоне N-AW-HMDS (0,16 - 0,20 мм); 3% OV-17 на хромосорбе WHP (100 - 120 меш); 1,5% OV-17 + 1,95% SE-30 на хроматоне N-AW-HMDS (0,16 - 0,20 мм). Азот особой чистоты. Водород из баллона. Воздух из баллона или нагнетаемый компрессором. Пластинки "Силуфол". Нитрат серебра х.ч. Водный аммиак 25-процентный ч.д.а. 4-(п-нитробензил) пиридин ч. Тетраэтиленпентамин ч. (ТЭПА).

Проявляющие реагенты: N 1: а - 1-процентный раствор 4-(п-нитробензил) пиридина в ацетоне; б - 10-процентный раствор тетраэтиленпентамина в ацетоне; N 2 - 0,5 г нитрата серебра растворяют в 5 мл дистиллированной воды, прибавляют 0,5 мл аммиака и доводят ацетоном до 100 мл. Все реагенты готовят перед употреблением.

Фосфорорганические пестициды: актеллик, базудин, ДДВФ, карбофос, хостаквик, трихлорметафос-3, фозалон, фосфамид, хлорофос х.ч. Хлорорганические пестициды: дилор, кельтан х.ч.

Основные стандартные растворы каждого пестицида в ацетоне 1000 мкг/мл. Хранят в холодильнике в течение 6 мес.

Из основных стандартных растворов готовят рабочие смеси ФОП и ХОП для ТСХ и ГЖХ:

N 1 - рабочая смесь ФОП для ТСХ - 2,5 мл из основного стандартного раствора каждого пестицида вносят в мерную колбу на 25 мл и доводят объем раствора до метки ацетоном. Содержание каждого пестицида в смеси 100 мкг/мл;

N 2 - рабочая смесь ФОП для ГЖХ - к 0,5 мл рабочей смеси ФОП N 1 добавляют 0,5 мл ОСР фосфамида, 0,5 мл основного стандартного раствора карбофоса и доводят объем смеси растворов ацетоном до 100 мл. Содержание в смеси актеллика, базудина, ДДВФ, трихлорметафоса-3, фозалона, хлорофоса - 0,5 мкг/мл каждого, содержание фосфамида и карбофоса - 5,5 мкг/мл каждого;

N 3 - рабочая смесь ХОП для ТСХ - 0,5 мл основного стандартного раствора дилора и кельтана вносят в мерную пробирку и доводят объем раствора до 10 мл н-гексаном. Содержание каждого пестицида 50 мкг/мл;

N 4 - рабочая смесь ХОП для ГЖХ - 0,2 мл смеси ХОП N 3 и доводят до 100 мл н-гексаном. Содержание каждого пестицида 0,1 мкг/мл;

N 5 - стандарт ТХМ-3 (для ТСХ анализа ХОП) - 0,5 мл основного стандартного раствора ТХМ-3 и доводят объем раствора до 10 мл н-гексаном, переносят в мерную пробирку.

Приборы и посуда. Хроматограф марки "Цвет" или аналогичный с ДПР (ДЭЗ) и ТИД. Прибор для отгонки растворителей - ротационный вакуумный испаритель. Аппарат для встряхивания колб. Колбы: мерные вместимостью 25, 50, 100 мл; конические на 50, 100, 250 мл; грушевидные на 50 мл. Воронки: химические; делительные на 50, 250, 500 мл. Пробирки мерные на шлифах вместимостью 5 мл. Пипетки на 0,1; 0,2; 1; 5; 10 мл. Микрошприцы на 10 мкл.

Ход анализа. Экстракция. К 100 г измельченных томатов (20 г пасты) прибавляют 100 или 50 мл смеси ацетон - вода (1:1) и экстрагируют в течение 30 мин. на аппарате для встряхивания. Экстракт сливают в делительную воронку, фильтруя через вату, остаток в колбе дважды промывают смесью ацетон - вода (1:1) порциями по 20 мл и присоединяют к экстракту. К экстракту добавляют 50 мл воды и трижды экстрагируют хлороформом порциями по 40 мл, осторожно встряхивая. Хлороформные экстракты сливают через фильтр "красная лента" с насыпанным на него слоем безводного сульфата натрия. Экстракт разделяют на две равные части. Одна служит для определения ФОП, другая - ХОП.

Определение фторорганических пестицидов. Предварительная идентификация. Экстракт (1/2 часть) упаривают до 0,5 мл под вакуумом на ротационном испарителе при температуре бани не более 45 °C. Остаток упаривают досуха при комнатной температуре. Остаток растворяют в 5 мл ацетона и предварительно идентифицируют ФОП хроматоэнзимным методом. Если хроматоэнзимным методом установлено наличие ФОП, анализ проводят далее.

Очистка экстракта. Ацетон (5 мл) из экстракта упаривают досуха. К сухому остатку прибавляют 2 мл смеси бензол - ацетон (1:3) и 0,1 г угля ОУ-4, встряхивают 2 - 3 мин., отфильтровывают через фильтр "красная лента", промывают уголь несколько раз смесью растворителей бензол - ацетон (1:3), общий объем 30 мл. Экстракт упаривают до 0,5 мл и доводят объем раствора точно до 1 - 5 мл ацетоном.

Метод ГЖХ при определении ФОП. Условия хроматографирования.

Определение хлорорганических пестицидов. Очистка экстракта. Экстракт (1/2 часть) упаривают под вакуумом на ротационном испарителе при температуре бани не более 45 °C. Остаток упаривают досуха при комнатной температуре. Сухой остаток переносят в делительную воронку с помощью 10 мл н-гексана, в воронку добавляют 5 мл концентрированной серной кислоты и осторожно встряхивают несколько раз. Органический слой отделяют и повторяют обработку серной кислотой до тех пор, пока кислота не станет бесцветной. Экстракт дважды промывают дистиллированной водой по 10 мл. н-Гексановый экстракт переносят в колбу для отгонки растворителей, сливая через слой безводного сульфата натрия на воронке. Дважды слой промывают на воронке н-гексаном порциями по 5 мл, смывы присоединяют к экстракту. Растворитель упаривают на ротационном испарителе при температуре бани не более 45 °C до 0,5 мл, доводят точно до 1 - 2 мл н-гексаном. Изисследуемых ФОП после очистки серной кислоты остается в экстракте ТХМ-3.

Хроматографическое определение хлорорганических пестицидов. Тщательно промытую хромовой смесью, раствором соды, дистиллированной водой и высушенную пластинку протирают этиловым спиртом или эфиром и покрывают сорбционной массой. Массу готовят следующим образом:

а) 50 г просеянной через сито 100 меш. окиси алюминия смешивают в фарфоровой ступке с 5 г сернокислого кальция, прибавляют 75 мл дистиллированной воды и перемешивают в ступке или колбе до образования однородной массы. На пластинку 9 x 12 см наносят 10 г сорбционной массы (на пластинку 13 x 18 см - 20 г) и, покачивая, равномерно распределяют по всей пластинке. Пластинки сушат при комнатной температуре 18 - 20 часов, можно сушить их 20 минут при комнатной температуре, а затем 45 минут в сушильном шкафу при температуре 110 град. C.

б) 35 г силикагеля КСК, просеянного через сито 100 меш., смешивают с 2 г сернокислого кальция и 90 мл дистиллированной воды и перемешивают в ступке или колбе до однородной массы. Наносят на пластинки и сушат, как указано выше. Порция рассчитана на 10 пластинок.

Если пластинки с тонким слоем силикагеля темнеют после облучения УФ-светом, силикагель перед употреблением следует очистить от примесей. Для этого силикагель заливают на 18 - 20 часов разбавленной соляной кислотой (1:1), кислоту сливают, промывают силикагель водой и кипятят в круглодонной колбе 2 - 3 часа с разбавленной азотной кислотой (1:1), промывают проточной водопроводной, затем дистиллированной водой до нейтральной реакции промывных вод, сушат в сушильном шкафу 4 - 6 часов при температуре 130 град. Силикагель дробят и просеивают через сито 100 меш.

Пластинки для хроматографии "Силуфол" UV-254 производства ЧССР перед использованием импрегнируют о-толидином. Для этого каждую пластинку опускают на 0,5 см в 0,1% раствор о-толидина в ацетоне, налитый в камеру для хроматографирования. После того как фронт растворителя поднимется до верхнего края пластинки, ее вынимают и высушивают на воздухе, избегая прямого солнечного света. После этого пластинки готовы к употреблению. Пластинки, импрегнированные о-толидином, хранят в эксикаторе. Используют при анализе кормов.

Пластинки "Силуфол" UV-254 производства ЧССР предварительно промывают дистиллированной водой в хроматографической камере, высушивают на воздухе и непосредственно перед использованием активизируют в сушильном шкафу при температуре 65 град. в течение 4 минут.

Подготовка хроматографических колонок для очистки экстрактов

Хроматографическая колонка для очистки от молочного жира. В нижнюю часть хроматографической колонки (размером 20 x 400 мм) помещают стекловату или 500 мг обезжиренной ваты. Затем засыпают в колонку силикагель АСК (75 мл для очистки экстрактов из проб свиного жира и 70 мл для всех остальных проб) и уплотняют силикагель постукиванием по колонке. Колонку промывают 50 мл н-гексана илипетролейного эфира, и прошедший через нее растворитель отбрасывают. После этого колонка готова для хроматографической очистки экстрактов из проб рыбы, мяса и мясопродуктов, молока и молокопродуктов, меда, яиц и т.д.

Хроматографическая колонка для очистки экстрактов из проб шротов (необогащенных липидами) и лузги.

Хроматографическую колонку заполняют на высоту 1 см стеклянной ватой, затем в колонку вносят просеянную окись алюминия (I) слоем 2,5 см или окись кремния - 3,5 см. Далее засыпают, не утрамбовывая, комочки окиси алюминия (кремния), пропитанные серной кислотой, высота слоя (II) 2,5 см. Каждый слой последовательно промывают гексаном (всего 20 - 30 мл).

Для анализа жмыхов и шротов, обогащенных липидами, слои окиси алюминия следует увеличить до 5 см (I) и 3 см (II) соответственно, в случае использования окиси кремния - 6 см (I) и 3 см (II).

Проведение определения. Вода, вино. 200 мл пробы помещают в делительную воронку и экстрагируют пестициды, встряхивая в течение 3-х минут н-гексаном илипетролейным эфиром тремя порциями по 30 мл или диэтиловым эфиром тремя порциями по 50 мл. В объединенные экстракты насыпают 10 г безводного сернокислого натрия или фильтруют через воронку, заполненную на 2/3 сернокислым натрием. Экстракты переносят в прибор для отгонки растворителей и отгоняют растворитель до объема 0,2 - 0,3 мл. В случае необходимости экстракт чистят серной кислотой.

Овощи, фрукты. 20 г измельченной пробы помещают в колбу с притертой пробкой и проводят экстрагирование пестицидов трижды в течение 15 минут на аппарате для встряхивания н-гексаном или петролейным эфиром порциями по 30 мл. Объединенные экстракты сушат безводным сернокислым натрием, переносят в прибор для отгонки растворителей, отгоняют растворитель до объема 0,2 - 0,3 мл и наносят на пластинку.

Зерно, грибы. Из измельченных проб отбирают 20 г зерна, 50 г сырых или 10 г сухих грибов и помещают в колбы с притертыми пробками. Экстракцию пестицидов проводят трижды на приборе для встряхивания н-гексаном или петролейным эфиром порциями по 30 мл. Объединенные экстракты переносят в делительную воронку, прибавляют 10 мл насыщенного раствора безводного сернокислого натрия в серной кислоте и осторожно встряхивают несколько раз. Отделяют органический слой и повторяют обработку до тех пор, пока кислота не станет бесцветной. Экстракт промывают дистиллированной водой, сушат безводным сернокислым натрием и отгоняют растворитель.

Яблоки, капуста, трава, сено. 20 г измельченных яблок, 20 г капусты, 40 г травы и 20 г сена заливают 100 мл ацетона в колбе с притертой пробкой. Встряхивают 2 - 3 минуты, прибавляют 20 мл дистиллированной воды и охлаждают на льду 30 минут. Экстракт сливают и фильтруют холодным, экстракцию повторяют. Из объединенных водно-ацетоновых экстрактов отгоняют ацетон, а из водного остатка экстрагируют препараты н-гексаном тремя порциями по 10 мл в течение 10 минут. Гексановые экстракты очищают серной кислотой, насыщенной безводным сернокислым натрием. Сушат безводным сернокислым натрием. Отгоняют растворитель до небольшого объема и наносят на пластинку. Если очистка неполная (после испарения растворителя на колбе остается белый налет), экстракт испаряют досуха, остаток смывают холодным ацетоном 3 раза порциями по 0,2 мл и сразу наносят на пластинку.

Комбикорма. Для исследования берут навеску 40 г, увлажняют ее в колбе 60 мл дистиллированной воды. Увлажненную навеску оставляют на ночь в колбе, закрытой пробкой. Экстракцию пестицидов проводят дважды 50 - 100 мл смеси гексан - ацетон 1:1 при встряхивании в течение 2 часов. Экстракты объединяют в делительной воронке на 500 мл, прибавляют дважды по 50 мл дистиллированной воды и, после разделения слоев, нижний водный слой сливают в другую делительную воронку и экстрагируют пестициды 40 мл гексана. Водный слой сливают. Гексановые экстракты объединяют, фильтруют через воронку с бумажным фильтром, заполненным на 2/3 безводным сернокислым натрием. Экстракты упаривают на ротационном испарителе до объема 20 - 30 мл или досуха, растворяя затем сухой остаток в 20 - 30 мл гексана или петролейного эфира. Экстракт переносят в делительную воронку и производят очистку серной кислотой, как описано выше. Шрот, лузга, жмых. Навески: 15 г обогащенного липидами шрота или жмыха; 20 г не обогащенного липидами шрота или лузги делят на равные части и помещают в колбы емкостью 100 - 250 мл с притертыми пробками, заливают гексаном (три объема гексана на одну весовую часть шрота), встряхивают на приборе для встряхивания 30 минут. Экстракт фильтруют через воронку Бюхнера, не перенося осадок на воронку. В колбу повторно заливают указанное количество гексана, встряхивают 30 минут, фильтруют, количественно переносят осадок на воронку Бюхнера с помощью 30 мл гексана (3 раза по 10 мл). Полученный экстракт выпаривают до 30 мл на ротационном испарителе или в токе воздуха при температуре не выше 40 град., остаток делят на две равные части и помещают в морозильную камеру холодильника на 1 час (не менее). Каждую часть пропускают через отдельную колонку с окисью алюминия со скоростью 2 мл/минуту, промывают колбу и колонку 50 мл охлажденной смеси этилового эфира с гексаном (15:85). Эту операцию необходимо проводить без перерыва, не оставляя на следующий день. Очищенные экстракты объединяют и упаривают до объема 1 мл. Остаток из колбы переносят количественно микропипеткой с помощью резиновой груши в пробирку на 1 мл, колбу и микропипетку 2 - 3 раза промывают небольшим количеством гексана (всего 0,3 - 0,5 мл), сливая его в ту же пробирку. Затем осторожно выпаривают гексан из пробирки на водяной бане при температуре 50° почти досуха (конечный объем приблизительно 2 - 3 капли). Если общий объем экстракта и промывной жидкости превышает 1 мл, то сначала выпаривают экстракт, постепенно прибавляя к нему промывную жидкость. При наличии в упаренном экстракте белого мазеобразного осадка в пробирку добавляют 5 - 6 капель гексана и помещают ее на 15 - 20 минут в морозильную камеру холодильника, затем деканируют дважды таким же количеством гексана и снова упаривают до конечного объема 2 - 3 капли.

Параллельно с исследуемыми образцами готовят два модельных экстракта. Каждый экстракт получают из одного грамма шрота, не содержащего пестицидов (соотношение сухого вещества и пестицида то же, что и в исследуемых образцах). В один из экстрактов перед очисткой на колонках вносят микрошприцем (микропипеткой) определяемые пестициды в количестве 3 мкг, в другой - 0,75 мкг.

Упаренные исследуемые и модельные экстракты с помощью микропипетки или микрошприца количественно наносят на пластинку, трижды смывая пробирку небольшим количеством гексана.

Рыба, мясо и мясопродукты. Мясо, мясопродукты пропускают через мясорубку. Рыбу очищают от чешуи, внутренних органов и тоже пропускают через мясорубку. 20 г пробы перемешивают с безводным сернокислым натрием и помещают в колбу с притертой пробкой. Пестициды экстрагируют дважды смесью гексан - ацетон или петролейный эфир - ацетон в соотношении 1:1 порциями по 50 мл в течение 1,5 часов при встряхивании. Экстракт фильтруют через воронку с бумажным фильтром, заполненным на 2/3 безводным сернокислым натрием, затем растворитель отгоняют, сухой остаток растворяют в 20 мл н-гексана и вносят его в колонку с силикагелем АСК. После впитывания экстракта в сорбент пестицид элюируют 110 мл смеси бензола с гексаном в соотношении 3:8 порциями по 25 - 30 мл. Элюат собирают в круглодонную колбу со шлифом емкостью 250 - 300 мл. Через 10 минут после впитывания последней порции растворителя сорбент отжимают с помощью груши. Элюат отгоняют до объема 0,1 мл и наносят на хроматографическую пластинку.

В том случае, если пробы мяса или рыбы содержат большое количество жира, после испарения первого экстрагента (смеси ацетона сгексаном) и растворения сухого остатка в гексане следует провести очистку гексанового экстракта серной кислотой, а затем колоночную очистку, как описано выше.

Животный жир, яйца, яичный порошок. Жир измельчают на мясорубке, яичный порошок тщательно перемешивают, яйца - отделяют желток от белка, взвешивают желток и белок, а для анализа берут только желток. Конечный результат о содержании хлорорганических пестицидов в яйце приводят на все яйцо. Желток тщательно перемешивают.

25 г подготовленного образца заливают 50 мл ацетона, перемешивают и нагревают на горячей водяной бане до закипания растворителя. Колбу охлаждают, добавляют в нее 10 мл охлажденного 2% раствора сернокислого натрия, перемешивают и охлаждают 45 минут на ледяной бане. Затем сливают ацетоновый слой в круглодонную колбу через слой обезжиренной ваты. Экстракцию ацетоном с последующим вымораживанием жира повторяют еще два раза. Из объединенных экстрактов отгоняют ацетон на ротационном испарителе или в приборе для отгонки растворителей (температура бани не более 70 град. +/- 2 град.) и трижды экстрагируют петролейным эфиром порциями 20, 10 и 10 мл. Продолжительность первой экстракции 1 час, последующих - 15 минут. Петролейный эфир переносят в делительную воронку с 40 мл 2% водного раствора сернокислого натрия, перемешивают содержимое в течение 2-х минут, дают слоям разделиться и водную фазу отбрасывают. Для улучшения разделения слоев можно добавить несколько мл насыщенного раствора сернокислого натрия. Операцию промывки экстракта повторяют еще два раза, после чего петролейный эфир сливают в стакан с 20 г безводного сернокислого натрия, споласкивают делительную воронку дважды 5 мл петролейного эфира. Подсушенный экстракт количественно переносят в мерный цилиндр на 50 мл и доводят объем раствора петролейным эфиром до 30 мл. Далее наносят 30 мл экстракта в колонку с силикагелем АСК, как указано выше. Для проб свиного жира насыпают 75 мл силикагеля АСК, для всех остальных проб - 70 мл. Очистку экстрактов проводят, как описано для проб мяса. Элюат собирают в круглодонную колбу на 150 мл, растворитель упаривают до объема нескольких капель и наносят нахроматографическую пластинку.

Мед. 30 г меда смешивают с 3 г безводного сернокислого натрия и трижды экстрагируют пестициды гексаном порциями по 30 мл каждый раз по 15 минут, тщательно растирая мед стеклянной палочкой в узком химическом стакане. Экстракты объединяют и отгоняют гексан до объема 30 мл или до меньшего объема, далее доводя экстракт до 30 мл гексаном. 30 мл экстракта вносят в хроматографическую колонку с силикагелем АСК и проводят очистку экстракта и испарение растворителя, как описано выше.

Сахар. Из навески 50 г сахара, предварительно растворенного в воде, пестициды экстрагируют в делительной воронке на 250 мл н-гексаном. Экстракцию пестицидов проводят трижды по 50, 25 и 25 мл растворителя каждый раз встряхивая по 5 минут. Объединенныегексановые экстракты очищают от коэкстрактивных веществ (красящие, аминокислоты, липиды) сернокислотным способом.

Молоко и молочные продукты. Для подготовки проб можно использовать один из приведенных способов.

Первый способ. Сливки, сметана, молоко и др. цельномолочные продукты. Для анализа берут 20 г сливок и сметаны, предварительно разведенных равным объемом дистиллированной воды, 50 мл молока, кефира и т.п., прибавляют концентрированную серную кислоту (30 - 40 мл) до полного почернения пробы. Охлажденный до 10 - 15 град. раствор переносят в делительную воронку и экстрагируют препаратыгексаном 2 раза порциями по 25 мл. Для полного извлечения воронку встряхивают 2 минуты, затем оставляют ее на 30 минут до полного разделения слоев. Если образуется эмульсия, прибавляют 1 - 2 мл этилового спирта. К объединенным экстрактам в делительной воронке прибавляют 10 мл концентрированной серной кислоты, насыщенной сернокислым натрием, и осторожно встряхивают несколько раз. Очистку продолжают до получения бесцветной серной кислоты.

Творог, сыр. 50 г творога или 10 г измельченного на терке сыра заливают 40 мл гексана или петролейного эфира, непрерывно встряхивают 2 - 3 минуты и оставляют на 30 минут. Экстракцию повторяют. Объединенные экстракты в делительной воронке очищают серной кислотой, как указано выше.

Второй способ. Молоко, кефир, простокваша, кумыс и другие цельномолочные продукты. 25 мл продукта помещают в делительную воронку на 300 мл, приливают по 5 мл щавелевокислого калия и насыщенного раствора хлористого натрия, перемешивают, приливают 100 мл ацетона, встряхивают 2 минуты. Приливают 100 мл хлороформа и встряхивают 2 мин. Воронку оставляют до полного разделения слоев. Верхнюю фазу отбрасывают, а нижнюю выливают в круглодонную колбу со шлифом и испаряют растворитель досуха. Остаток смывают 30 млгексана.

Сгущенное молоко, 10 - 20% сливки. К 10 г продукта прибавляют 10 мл насыщенного раствора хлористого натрия и выливают в делительную воронку вместимостью 150 мл. К смеси приливают 40 мл ацетона, встряхивают 2 минуты, приливают 60 мл хлороформа, встряхивают 2 - 3 минуты и оставляют до разделения фаз. Далее поступают, как при определении пестицидов в молоке.

Сгущенные молочные продукты. 10 г продукта помещают в стаканчик, заливают 10 мл воды с температурой 45 - 50 град. C, перемешивают и переносят в делительную воронку на 150 мл, добавляют 5 мл щавелевокислого калия. Содержимое воронки перемешивают, приливают 80 мл ацетона и встряхивают 2 - 3 минуты. Добавляют 100 мл хлороформа и встряхивают 5 - 7 минут. После разделения фаз нижнюю фазу сливают в круглодонную колбу, растворители отгоняют, а сухой остаток растворяют в 30 мл петролейногоэфира.

Сухие молочные продукты. 3 г сухих молочных продуктов (сливок 2 г) высыпают в стаканчик, приливают 15 мл дистиллированной воды с температурой 40 - 45 град. C, размешивают и переносят в делительную воронку вместимостью 300 мл, приливают по 5 мл щавелевокислого калия и насыщенного раствора хлористого натрия. Содержимое воронки перемешивают, добавляют 80 мл ацетона и встряхивают 3 - 5 минут, приливают 100 мл хлороформа, встряхивают 5 минут и оставляют на 3 - 5 минут (до разделения фаз). Нижнюю фазу сливают в круглодонную колбу, растворитель отгоняют, а остаток смывают 30 мл гексана.

Сметана, 30 - 40% сливки. 5 г продукта отвешивают в стаканчик, приливают 10 мл насыщенного раствора хлористого натрия и переносят в делительную воронку вместимостью 150 мл.

Стаканчик обмывают 40 мл ацетона, смывы переносят в делительную воронку, которую встряхивают 2 - 3 минуты, добавляют 70 мл хлороформа и встряхивают 2 мин. Воронку оставляют на несколько минут до разделения фаз, нижнюю фазу сливают в колбу для отгонки растворителей, растворитель отгоняют, а остаток смывают 30 мл гексана.

Творог, сыр. 10 г творога или измельченного на терке сыра растирают с 10 мл насыщенного раствора хлористого натрия и переносят в делительную воронку на 250 - 300 мл.

Прибавляют 80 мл ацетона, встряхивают 2 минуты, приливают 100 мл хлороформа и вновь встряхивают. Нижнюю фазу используют для анализа после отгонки растворителей, растворив остаток в 30 мл гексана.

Далее проводят очистку экстрактов из проб молока и молочных продуктов от молочного жира, подготовленных по второму способу. Для этого 30 мл экстракта наносят в колонку с 70 мл силикагеля АСК. После впитывания экстракта в сорбент пестицид элюируют 110 мл смеси бензола с гексаном в соотношении 3:8 порциями по 25 - 30 мл. Элюат собирают в круглодонную колбу на 250 - 300 мл. Через 10 минут после впитывания последней порции растворителя сорбент отжимают с помощью резиновой груши. После очистки растворители отгоняют под вакуумом.

Сливочное масло. 20 г сливочного масла растапливают на водяной бане в круглодонной колбе, прибавляют 50 мл ацетона, тщательно перемешивают до растворения жира, прибавляют 10 мл ледяной дистиллированной воды и охлаждают на льду до затвердевания жира (примерно 30 минут). Сливают ацетоновый экстракт, и процедуру повторяют еще 2 раза. Из объединенных экстрактов в круглодонной колбе ацетон отгоняют на водяной бане. Пестициды экстрагируют из оставшегося водного экстракта гексаном тремя порциями по 10 мл в течение 5 минут. Объединенные гексановые экстракты в делительной воронке обрабатывают серной кислотой с сернокислым натрием. Очищенный экстракт сушат безводным сернокислым натрием и упаривают.

Почва. К навескам воздушно-сухой почвы (10 г), помещенным в конические колбы емкостью 250 мл, приливают 10 мл 1-процентного водного раствора хлористого аммония и оставляют на сутки закрытыми. Затем приливают смесь 30 мл ацетона и 30 мл гексана и встряхивают колбы в течение часа на встряхивающем устройстве. Содержимое колб переносят в центрифужные пробирки.

После центрифугирования жидкую часть сливают в конические колбы, почву с помощью 10 мл 1-процентного раствора хлористого аммония и 30 мл ацетона переносят в исходные конические колбы, добавляют 30 мл гексана и проводят экстракцию еще в течение 30 минут.

Затем экстракты объединяют. К объединенным экстрактам в делительной воронке приливают 180 мл дистиллированной воды, осторожно встряхивают в течение 5 - 7 минут, дают жидкостям расслоиться и нижний водный слой сливают в коническую колбу. Гексановый слой пропускают через безводный сульфат натрия (столовая ложка или 30 - 40 г сульфата натрия).

Из водно-ацетонового слоя экстракцию пестицидов проводят еще дважды 15 и 10 мл гексана, который затем сушат через тот же сульфат натрия. Гексановые экстракты объединяют.

Концентрирование экстрактов проводят либо на ротационно-вакуумном испарителе, либо при температуре бани не более 40 град. C и времени отгонки 9 - 11 минут, либо из колбочек с г-образным отводом при температуре водяной бани 72 - 75 град. C.

Очистку сконцентрированных гексановых экстрактов из проб почв проводят серной кислотой, как описано выше для других проб, и испаряют растворитель.

Табак и табачные изделия. 5 г табака помещают в стеклянный стакан на 500 мл, заливают 50 мл концентрированной серной кислоты и стеклянной палочкой тщательно размешивают до полного равномерного обугливания пробы. Спустя 10 - 15 минут в колбу добавляют 25 млгексана, тщательно размешивают содержимое и прибавляют 20 мл четыреххлористого углерода. Экстракцию пестицидов из пробы проводят в течение 15 минут трижды, после чего экстракт последовательно переносят в делительную воронку для однократной или двукратной дополнительной очистки серной кислотой.

Определение хлорорганических пестицидов. Очистка экстракта. Экстракт (1/2 часть) упаривают под вакуумом на ротационном испарителе при температуре бани не более 45 °C. Остаток упаривают досуха при комнатной температуре.

Сухой остаток переносят в делительную воронку с помощью 10 мл н-гексана, в воронку добавляют 5 мл концентрированной серной кислоты и осторожно встряхивают несколько раз. Органический слой отделяют и повторяют обработку серной кислотой до тех пор, пока кислота не станет бесцветной.

Экстракт дважды промывают дистиллированной водой по 10 мл. н-Гексановый экстракт переносят в колбу для отгонки растворителей, сливая через слой безводного сульфата натрия на воронке.

Дважды слой промывают на воронке н-гексаном порциями по 5 мл, смывы присоединяют к экстракту. Растворитель упаривают на ротационном испарителе при температуре бани не более 45 °C до 0,5 мл, доводят точно до 1 - 2 мл н-гексаном. Изисследуемых ФОП после очистки серной кислоты остается в экстракте ТХМ-3.