Термин "витамин" (буквально "амин жизни") предложен Функом, выделившим фракцию из водного экстракта рисовых отрубей, обладающую выраженными основными свойствами (1911-1912). В 1934 г. Вильяме из 1 т рисовых отрубей выделил несколько граммов витамина В12 а в 1936 г. доказал его строение.

Витамин B6 (пиридоксин) используется прежде всего как стимулятор в обмене веществ. Он является коферментом белков, которые участвуют в переработке аминокислот и регулируют усвоение белка. Пиридоксин принимает участие в производстве кровяных телец и их красящего пигмента - гемоглобина и участвует в равномерном снабжении клеток глюкозой.

Витамин B1. В организме в результате процессов фосфорилирования превращается в кокарбоксилазу, которая является коферментом многих ферментных реакций.

Играет важную роль в углеводном, белковом и жировом обмене, а также в процессах проведения нервного возбуждения в синапсах. Защищает мембраны клеток от токсического воздействия продуктов перекисного окисления.

Тиамин является двукислотным основанием и поэтому образует 2 рода солей - хлориды и гидрохлориды (бромиды и гидробромиды). Фосфотиамин и кокарбоксилаза - сложные эфиры тиамина и фосфорной кислоты, т.е. коферменты.

Эти препараты - белые порошки с характерным запахом, хорошо растворимы в воде, имеют кислую реакцию среды (как соли слабых органических оснований с сильными минеральными кислотами).

витамин тиамин производное оксиметилпиридин

1. Обзор литературы

Процесс превращения может идти в обратном направлении

Основным лекарственным веществом витаминов группы В₆ является пиридоксина гидрохлорид. Сравнительно несложная химическая структура позволила осуществить синтез пиридоксина из алифатических соединений. Известно много различных вариантов синтеза. Наиболее эффективный из них основан на циклизации N-формил-D,L-аланина в производное оксазола, последующей его циклоконденсации с эфиром 1,4-бутендионовой кислоты. Полученный бицикл в кислой среде расщепляется и дегидратируется в производное пиридина, которое гидрируют до пиридоксина:

Применяют также фосфорный эфир пиридоксина - пиридоксаль фосфат, являющийся коферментной формой пиридоксина.

Основная биологическая функция пиридоксиновых витаминов в животном организме - они в составе коферментов выполняют роль катализаторов важнейших процессов азотного обмена.

При участии витамина В₆ в организме осуществляются различные превращения аминокислот. Установлено, что в организме главным образом действуют продукты превращения пиридоксола: пиридоксаль и пиридоксамин, поэтому пиридоксол является провитамином витамина В₆.

Витамин В₆ был получен впервые в кристаллическом виде из дрожжей в 1937 году.

Витамины группы В₆ термостабильны и устойчивы к кислотам и щелочам, но неустойчивы к окислителям. Свет способствует процессам окисления, что следует учитывать при их хранении. [13]

1.1.1 Классификация витаминов группы В₆

Описание.

Белый мелкокристаллический порошок без запаха, горько-кислого вкуса.

Физические свойства

Растворимость. Пиридоксина гидрохлорид трудно растворим в этаноле, легко растворим в воде, практически нерастворим в эфире.

Температура плавления.Т. пл = 203-206⁰С (с розложением). Скорость подъема температуры 5⁰С в минуту.

Химические методы установления подлинности

Химические свойства витамина обусловлены, с одной стороны, свойствами пиридинового цикла, с другой - свойствами имеющихся в пиридиновом ядре заместителей. Так, третичный азот в молекуле обусловливает реакции осаждения пиридоксина гидрохлорида комплексными кислотами - фосфорновольфрамовой и кремневольфрамовой кислотами, реактивом Драгендорфа и другими общеалкалоидными реактивами.

1. Фенольный гидроксил подтверждается реакциями:

1.1 с раствором FeCl₃ (красное окрашивание, исчезающее при добавлении нескольких капель разведённой серной кислоты

Методика.0,01г препарата растворяют в 10мл воды очищенной. К 0,1мл этого раствора прибавляют несколько капель хлорида окисного железа; появляется красное окрашивание. [5]

+ FeCl₃

1.2 с 2,6-дихлорхинонхлоримидом (образуется индофеноловый краситель голубого цвета).

Этот реактив реагирует лишь с теми фенолами, у которых n-положение является незамещённым:

В присутствии борной кислоты образование индофенольного красителя не происходит, так как пиридоксин связывается в боратный комплекс:

1.2 Получение азокрасителя с различными диазосоединениями

А.М. Алиевым предложен способ идентификации и определение пиридоксина с помощью реакции образования азокрасителя. В качестве реактива использована стабилизированная хлоридом цинка соль диазония. Образование металлокомплекса пиридоксина с азокрасителем происходит по схеме:

2. Идентификация третичной аминогруппы

2.1 С кремневольфрамовой (реактив Бертрана) и фосфорноволфрамовой (реактив Шейблера) гетерополикислотами; они образуют белые осадки кремневольфрамата и фосфоровольфрамата пиридоксина

HCl + AgNO₃ AgCl + HNO₃

AgCl + 2NH₃*H₂O [Ag(NH₃)₂]Cl +2H₂O

Испытания на чистоту

ТОНКОСЛОЙНАЯ ХРОМАТОГРАФИЯ (ТСХ), вариант хроматографии, основанный на различии в скорости перемещения компонентов смеси в плоском тонком слое (толщина 0,1-0,5 мм) сорбента при их движении в потоке подвижной фазы (элюента). Последняя представляет собой, как правило, жидкость, однако осуществлен и газовый вариант ТСХ. В качестве сорбентов используют мелкозернистые силикагель, Аl₂О₃, целлюлозу, крахмал, полиамид, иониты и другие. Суспензиями этих сорбентов покрывают пластинки из стекла, фольги или пластика.

Элюентами служат обычно смеси органическими растворителей, водных растворов кислот, солей, комплексообразующих и других веществ. В зависимости от выбора хроматографичь системы (состава подвижной и неподвижной фаз) в разделении веществ основную роль могут играть процессы адсорбции, экстракции, ионного обмена, комплексообразования.

В зависимости от положения пластинки и направления потока элюента различают восходящую, нисходящую и горизонтальную ТСХ. По технике работы выделяют фронтальный анализ (когда подвижной фазой служит анализируемая смесь) и обычно используемый элюционный вариант.

После завершения процесса пластинку вынимают из камеры, высушивают и обнаруживают разделенные зоны по собственной окраске или после опрыскивания их растворами реагентов, образующих окрашенные или флуоресцирующие пятна с компонентами разделяемой смеси. [4]

· Пиридоксин устанавливают методом ТСХ (на пластинках Силуфол УФ-254) наличие примеси пиридоксаля (не более 1%).

Прозрачность и цветность

Раствор 0,5 г препарата в 5мл воды должен быль прозрачным и бесцветным.

Кислотность.2,5-3,2 (1% водный раствор).

Потерят в массе при высушивании.

Около 0,5г препарата (точная навеска) сушат при температуре 100-105⁰С до постоянной массы. Потеря в массе не должна превышать 0,5%

Сульфатная зола и тяжелые металлы

Сульфатная зола из 0,5г препарата не должна превышать 0,1% и должна выдерживать испытания на тяжелые металлы (не более 0,001% в препарате).

Количественное определение.

1способ. Метод неводного титрования.

Основное преимущество этого метода заключается прежде всего в том, что он позволяет титровать с достаточной четкостью не только сильные кислоты и основания, но также сла­бые, очень слабые кислоты, основания, их соли и многокомпонентные смеси часто без их предварительного разделения. Так, этот метод позволяет определять физиологически активную часть в солях алкалоидов. Кроме того, методом неводного титрования можно определять вещества, плохо растворимые в воде. Нахождение точки конца титрования в неводных средах может осуществляться индикаторным, потенциометрическим, "кондуктометрическим, амперометрическим и другим методами.

К преимуществам этого метода относится также и то, что титрование можно проводить как бесцветных, так и окрашенных растворов. Метод неводного титрования дает более точные результаты по сравнению с точностью титрования водных растворов, так как вследствие небольшого, как правило, поверхностного натяжения органических растворителей размеры капель неводных жидкостей меньше размеров капель водных растворов.

В теории неводного титрования большое значение имеет влияние характера растворителя и природы растворенного вещества на взаимодействие между ионами и молекулами растворителя и растворенного в нем вещества.

Характер растворителя особенно сказывается на кислотно-основных свойствах растворенного вещества. [2]

Методика

Около 0,15г препарата (точная навеска) растворяют в 20мл безводной уксусной кислоты при слабом нагревании. Раствор охлаждают, прибавляют 5мл ацетата окисной ртути и титруют 0,1н. раствором хлорной кислоты до появления изумругно-зеленого окрашивания (индикатор-кристаллический фиолетовый).

Параллельно проводят контрольный опыт.

1мл 0,1н. раствора хлорной кислоты соответствует 0,02056г пиридоксина хлорида, которого в пересчете на сухое вещество должно быть не менее 99,0%.

Содержание пиридоксина хлорида в % вычислить по формуле:

(Vк-Vo) KT100

Х= a

Vo - объём NaOH, пошедшего на титрование анализируемой пробы, мл

Vк - объем NaOH, пошедшего на титрование контрольного опыта, мл

K - поправочный коэффициент

T - 0,02056г/мл

a - объём препарата, взятый для исследования, мл

2 способ. Заключается в нейтрализации связанной хлороводородной кислоты.

Нейтрализации метод - объемный (титриметрический) метод определения концентрации кислот (ацидиметрия) и щелочей (алкалиметрия) в растворах.

В основе метода нейтрализации лежит использование реакции нейтрализации, т.е. соединения водородных и гидроксильных ионов: Н+ + ОН - =Н20.

При определении концентрации кислоты к точно отмеренному пипеткой объему исследуемого раствора постепенно приливают из бюретки рабочий раствор щелочи (обычно NaOH) известной концентрации, пока не изменится окраска индикатора, предварительно добавленного к титруемому раствору. Объем рабочего раствора, пошедший на взаимодействие с кислотой, отсчитывают по шкале бюретки. Определение концентрации щелочи производят аналогичным путем, только в качестве рабочего раствора в этом случае используют раствор кислоты (обычно HCl). Концентрацию кислоты или щелочи вычисляют по формуле:

где V и Vp - объемы, а Н и Hp - нормальные концентрации анализируемого и рабочего растворов соответственно.

Методика.

Около 0,1г препарата (точная новеска) растворяют в воде в мерной колбе емкостью 50мл и доводят объем раствора до метки. К 20мл полученного раствора прибавляют 2-3капли раствора бромтимолового синего и титруют из микробюретки 0,1н. раствором едкого натра до первого появления голубой окраски.

1мл 0,1н. раствора едкого насра соответствуют 0,003545 г Cl, которого в пересчете на сухое вещество должно быть не менее 17,1% и не более 17,35%.

Содержание кислоты хлороводородной в % вычислить по формуле:

VKT100

Х= a

V - объём NaOH, пошедшего на титрование, мл

K - поправочный коэффициент

T - 0,003545 г/мл

a - объём препарата, взятый для исследования, мл [12]

Биологическая роль

Описание

Витамин B6 (пиридоксин) используется прежде всего как стимулятор в обмене веществ. Он является коферментом белков, которые участвуют в переработке аминокислот и регулируют усвоение белка. Пиридоксин принимает участие в производстве кровяных телец и их красящего пигмента - гемоглобина и участвует в равномерном снабжении клеток глюкозой.

Первые признаки нехватки пиридоксина

· повышенная утомляемость;

· депрессивное состояние;

· выпадение волос;

· трещины в уголках рта;

· нарушение кровообращения;

· онемение конечностей;

· артрит;

· мышечная слабость.

Рекомендации по применению витамина B6

Осторожно следует назначать пиридоксин при тяжелых поражениях печени, язвенной болезни желудка и двенадцатиперстной кишки, ишемической болезни сердца. Потребность в витамине B6 (пиридоксин, пиридоксаль, пиридоксамин) повышена у больных, особенно, лихорадящих и инфекционных. По данным ряда авторов, пиридоксиновая недостаточность отмечается у большинства больных коронарным атеросклерозом. В связи с тем, что фтивазид и тубазид являются антагонистами витамина B6, больные туберкулезом при лечении этими препаратами нуждаются в повышенном обеспечении витамином B6 (пиридоксин, пиридоксаль, пиридоксамин). Противозачаточные таблетки, антибиотики и курение увеличивают потребность организма в витамине B6.

Витамин B6 и нервная система

Витамин B6 (пиридоксин, пиридоксаль, пиридоксамин) помогает эффективно использовать глюкозу в клетке, предохраняя организм от резких колебаний уровня глюкозы в крови, при которых из надпочечников выбрасывается адреналин и резко повышается уровень сахара в крови. Психофизиологи считают, что частые проявления агрессивности - это подсознательный механизм, интуитивный способ человека путем выброса адреналина увеличить доступность для клеток энергетического материала. Витамин B6 (пиридоксин, пиридоксаль, пиридоксамин) улучшает метаболизм в тканях мозга, так как является главным катализатором обмена аминокислот, синтеза большинства нейромедиаторов нервной системы. Таким образом, витамин B6 повышает работоспособность мозга, способствует улучшению памяти и настроения. Поэтому нормальное распределение глюкозы с помощью витамина B6 (пиридоксин, пиридоксаль, пиридоксамин) оказывает благоприятное действие на центральную и периферическую нервные системы, повышает умственную, физическую работоспособность, укрепляет нервную систему. Недостаточность витамина B6 приводит к нарушению глютаминового обмена, в результате чего возникают нарушения со стороны центральной нервной системы (судороги и др.). Витамин B6 (пиридоксин, пиридоксаль, пиридоксамин) оказывает регулирующее влияние на нервную систему, в частности на трофическую иннервацию. При тепловой обработке продуктов значительная часть витамина теряется.

Биологические функции пиридоксина

· принимает участие в образовании эритроцитов;

· участвует в процессах усвоения нервными клетками глюкозы;

· необходим для белкового обмена и трансаминирования аминокислот;

· принимает участие в обмене жиров;

· оказывает гипохолестеринемический эффект;

· оказывает липотропный эффект, достаточное количество пиридоксина необходимо для нормального функционирования печени.

Источники

Витамин B6 (пиридоксин, пиридоксаль, пиридоксамин) содержится во многих продуктах. Особенно много витамина B6 содержится в зерновых ростках, в грецких орехах и фундуке, в шпинате, картофеле, моркови, цветной и белокочанной капусте, помидорах, клубнике, черешне, апельсинах и лимонах. Витамин B6 содержится также в мясных и молочных продуктах, рыбе, печени, яйцах, крупах и бобовых. Витамин B6 (пиридоксин, пиридоксаль, пиридоксамин) синтезируется в организме кишечной микрофлорой.

Суточная потребность в витамине B6 (пиридоксине)

Суточная потребность в витамине B6 (пиридоксин, пиридоксаль, пиридоксамин) у взрослого человека равна 1,1-5 мг, для беременных и кормящих женщин - 2-2,2 мг, для детей первого года жизни - 0,3-0,6 мг.

Гипервитаминоз

Развивается при длительном употреблении в больших дозах. Характеризуется снижением содержания белка в мышечной ткани и внутренних органах. На ранних стадиях могут появиться высыпания на коже, помутнение сознания и головокружение, судороги. Лечение: ограничение препарата, симптоматическое.

Синонимы:

· Адермин,

· Бецилан,

· Бедоксин,

· Бенадон,

· Гексабеталин,

· Гексабион,

· Гексавибекс,

· Пиривитол,

· Пиридобене и др.

Форма выпуска.

Порошок; таблетки с риской по 0,002 г в упаковке по 50 штук для детей; таблетки с риской по 0,01 г в упаковке по 50 штук; ампулы по 1 мл в упаковке по 10 штук 1% раствора, 2,5% раствора и 5% раствора.

Пиридоксина гидрохлорид также входит в состав препаратов гепастерил-А, гепастерил-Б, липостабил, магне Бб, пернексин эликсир, эссенциале и др.

Условия хранения. В прохладном, защищенном от света месте.

2.2 Витамины пиримидинтиазолового ряда и их производные

2.2.1 Соли тиамина

Основу химической структуры тиамины составляют два гетероцикла - пиридин и тиазол:

Они связаны между собой в молекуле метиленовой группой, поэтому тиамин относят пиримидинтиазоловым или пиримидилметилтиазолиевым витаминам.

Тиамин содержится в отрубях хлебных злаков (особенно в рисовых отрубях), дрожжах.

Один из путей синтеза пиримидинового цикла основан на конденсации ацетамидина и цис-формы б-ацетооксиметилен-в-этоксипропионитрила:

Тиазоловый цикл синтезируют из тиоформамида и бромацетопропилацетата:

Связывают пиримидиновую и тиазоловую части в одну молекулу сплавлением полученных продуктов при 100-120⁰С либо нагревают в органическом растворителе, например в бутиловом спирте:

2.2.2 Классификация витаминов пиримидинового ряда

1. Соли тиамина

Thiamine Bromide-Тиамина бромид:

Thiamine Chloride-Тиамина хлорид:

Тиамимн (витамин B1; старое название - аневрин) - водорастворимый витамин, соединение, отвечающее формуле C12H17N4OS. Бесцветное кристаллическое вещество, хорошо растворимое в воде, нерастворимое в спирте. Разрушается при нагревании.

Известный как витамин B1 тиамин играет важную роль в процессах метаболизма углеводов и жиров. Вещество необходимо для нормального протекания процессов роста и развития и помогает поддерживать надлежащую работу сердца, нервной и пищеварительной систем. Тиамин, являясь водорастворимым соединением, не запасается в организме и не обладает токсическими свойствами.

3. Фосфорные эфиры тиамина и его производных

Описание.

Белый или белый со слегка желтоватым оттенком порошок со слабым характерным запахом.

Физические свойства

Растворимость. Легко растворим в воде и метиловом спирте, трудно растворим в этиловом спирте, практически нерастворим в эфире.

Химические методы установления подлинности

Специфическая общегрупповая реакция подлинности тиамина и его препаратов - образование тиохрома. Сущность испытания заключается в постепенном окислении тиамина в щелочной среде (всего затрачивается 3 эквивалента щелочи) с образованием трицикличе-ского производного тиамина (тиохрома), способного давать синюю флюоресценцию в среде бутанола или изоамилового спирта при УФ-облучении.

Методика.0,05 г препарата растворяют в 25 мл воды. К 5 мл раствора приливают 1 мл раствора феррицианида калия, 1 мл раствора едкого натра, 5 мл бутилового или изоамилового спирта, хорошо встряхивают и дают отстояться. В верхнем слое возникает наблюдаемая в ультрафиолетовом свете синяя флюоресценция, исчезающая при подкислении и вновь возникающая при подщелачивании раствора.

Реакция идет в несколько стадий. [4]

На 1-й стадии происходит частичная нейтрализация препарата, как соли галогеноводородной кислоты (1-й эквивалент щелочи):

На 2-й стадии образовавшийся тиамина хлорид нейтрализуется (2-м эквивалентом щелочи) как соль четвертичного аммониевого основания до тиамина гидроксида:

Образовавшийся тиамина гидроксид изомеризуется в псевдооснование тиамина:

При действии 3-го эквивалента щелочи происходит раскрытие тиазолового кольца с образованием тиольной формы тиамина, которая при дегидратации превращается в циклическую форму тиаминтиола.

Окисление последнего приводит к образованию тиохрома:

Тиохром образуют также фосфотиамин и кокарбоксилаза, но не бенфотиамин. [7]

Как соли азотистых оснований препараты тиамина взаимодействуют с общеалкалоидными осадительными реактивами (реактивы Вагнера, Драгендорфа, Майера, гетерополикислотами - кремневоль-фрамовой, пикриновой, танином и др.) с образованием характерно окрашенных осадков.

Как и другие третичные амины, тиамин на водяной бане с уксусным ангидридом и кристаллами уксусной кислоты приобретает красное окрашивание. При пиролизе тиамина вследствие наличия в его молекуле первичной аминогруппы происходит конденсация:

Реакция на бромид-ион с раствором сульфата меди, появляется черный осадок:

2Br ^- + CuSO₄ + H₂SO₄ CuBr2 + 2SO₄^2-

Испытания на чистоту

Прозрачность и цветность раствора. Раствор 0,6 г препарата в 10 мл воды должен быть бесцветным и по мутности не должен превышать эталон № 4.

Кислотность. рН 2,7-3,4 (6% водный раствор, потеншометрически).

Сульфаты.10 мл раствора препарата 1: 50 должны выдерживать испытание на сульфаты (не более 0,05% в препарате).

Сульфатная зола и тяжелые металлы. Сульфатная зола из 0,5 г препарата не должна превышать 0,1% и должна выдерживать испытание на тяжелые металлы (не более 0,001% в препарате) [5]

Методы количественного определения

Химическая структура лекарственных веществ, производных витамина В1, позволяет применить различные методы их химического и физикохимического количественного определения:

1) кислотно-основное титрование (в водной и неводной средах);

2) осадительное титрование (аргентометрия);

3) физико-химические методики (спектрофотометрические, ФЭК, нефелометрические);

4) гравиметрия.

кислотно-основное титрование

1. В водной среде основано на нейтрализации гидробромида, и последующим аргентомитрическим титрованием суммы бромид-ионов:

2. В неводной среде. В качестве растворителя используют муравьиную кислоту, безводную уксусную кислоту (5: 65), титрантом служит хлорная кислота 0,1М.

Титруют в присутствии ацетата ртути (II) устанавливая эквивалентную точку потенциометрически со стеклянным и коломельным электродом:

Известен меркуриметрический метод определения солей тиамина в азотнокислой среде с индикатором дифенилкарба - зидом или дифен илкарбазоном. Титрантом служит 0,1 М раствор нитрата ртути (II):

Гравиметрия.

Около 0,05 г препарата (точная навеска) растворяют в 100 мл воды, прибавляют 4 мл концентрированной соляной кислоты, быстро нагревают до кипения, к кипящему раствору приливают по каплям 4 мл 10% раствора кремневольфрамовой кислоты и кипятят 4-5 минут. Образовавшийся осадок отфильтровывают при разрежении на предварительно высушенный до постоянного веса стеклянный фильтр № 4 диаметром 2-4 см. Осадок промывают на фильтре 50 мл горячей разбавленной (1: 20) соляной кислоты, 10 мл воды и ацетоном дважды по 5 мл. Фильтр с осадком высушивают до постоянного веса при 100-105°, охлаждают в эксикаторе над пяти - окисью фосфора и взвешивают. Вес осадка, умноженный на 0,25, соответствует количеству Ci₂Hi₇BrN₄OS НВг V₂H₂O, которого в препарате должно быть не менее 98,0%.

+2SiO₂* 12WO₃

*2SiO₂*12WO₃

Хранение. Соли тиамина хранят в герметически закрытой таре, предохраняющей от действия света, без контакта с металлами. Недопустимость такого контакта обусловлена возможностью постепенного разл ожения тиамина до дигидротиамина:

Биологическое значение

Тиамина бромид - препарат витамина В1. В организме человека витамин В1 (тиамин) не образуется и поступает только в готовом виде с пищей. Наиболее богаты этим витамином зерна злаков, дрожжи, печень, почки.

В организме тиамин превращается в кокарбоксилазу, которая участвует в образовании ряда ферментов, регулирующих углеводный обмен и процессы освобождения энергии из углеводов. Последнее особенно важно для деятельности интенсивно функционирующих систем организма: нервной, сердечно-сосудистой, мышечной. Кроме того, тиамин оказывает влияние на обмен белков, регуляцию водного баланса и способствует выработке медиатора нервной системы - ацетилхолина.

Суточная потребность взрослого человека в тиамине составляет 2-2,5 мг.

Возникновению В1-гиповитаминоза способствуют длительная углеводная диета и состояния, связанные с нарушением усвоения тиамина или с повышенной потребностью в нем (беременность, инфекционные заболевания, сахарный диабет, хронический алкоголизм и др.). Признаки В1-гиповитаминоза проявляются головной болью, повышенной утомляемостью, бессонницей, нарушением чувствительности кожи и другими расстройствами со стороны нервной системы. Помимо этого, наблюдаются одышка, сердцебиение, мышечная слабость, снижение аппетита, запоры.

Авитаминоз В1 (болезнь бйри-бйри) протекает с поражениями нервных стволов (полиневриты), параличами, поражениями сердца, отеками и истощением.

Помимо использования для лечения и профилактики гипо - и авитаминоза, тиамина бромид применяется в терапии ряда заболеваний: радикулита, невралгий, невритов и полиневритов. Лечебный эффект отмечается при назначении этого препарата при некоторых болезнях сердца, спазмах периферических сосудов, а также при язвенной болезни желудка и двенадцатиперстной кишки.

Формы выпуска: таблетки и драже по 0,00258 г, таблетки по 0,00645 и 0,0129 г, ампулы по 1 мл 3 % и 6 % раствора. [11]

4. Экспериментальная разработка и совершенствование способов определения лекарственных веществ