Особливості мікробіологічних досліджень під час випробувань гемотрансфузійних препаратів на стерильність

Размещено на http://www.Allbest.Ru/

ДУ «Інститут гематології та трансфузіології НАМН України»

Особливості мікробіологічних досліджень під час випробувань гемотрансфузійних препаратів на стерильність

В.В. Любич

Київ

Резюме

Мета - провести аналіз результатів випробувань на стерильність препаратів донорської крові під час первинного і подальшого контролю якості.

Матеріали і методи. Дослідження препаратів донорської крові (розчин альбуміну 5%, розчин альбуміну 10%, імуноглобулін людини нормальний, імуноглобулін людини антистафілококовий, імуноглобулін людини антирезус RHo(D), імуноглобулін людини протиправцевий, інфузамін) відповідно до вимог Державної Фармакопеї України та аналітичної нормативної документації.

Результати. Проаналізовані результати досліджень стерильності препаратів донорської крові за 2011-2013 рр. За зазначений період під час первинного контролю виявлена одна серія нестерильного препарату, під час подальшого державного - нестерильних препаратів не виявлено.

Ключові слова: препарати донорської крові, мікробна контамінація, контроль стерильності, валідація.

Аннотация

Особенности микробиологических исследований при испытании гемотрансфузионных препаратов на стерильность

В.В. Любич, ГУ «Институт гематологии и трансфузиологии НАМН Украины», Киев

Цель - провести анализ результатов испытаний на стерильность препаратов донорской крови во время первичного и последующего контроля качества.

Материалы и методы. Исследование препаратов донорской крови (раствор альбумина 5%, раствор альбумина 10%, иммуноглобулин человека нормальный, иммуноглобулин человека антистафилококковый, иммуноглобулин человека антирезус RHo (D), иммуноглобулин человека противостолбнячный, инфузамин) согласно требованиям Государственной Фармакопеи Украины и аналитической нормативной документации.

Результаты. Проанализированы результаты исследований стерильности препаратов донорской крови за 2011-2013 гг. За указанный период при первичном контроле обнаружена одна серия нестерильного препарата, во время дальнейшего государственного - нестерильных препаратов не выявлено.

Ключевые слова: препараты донорской крови, микробная контаминация, контроль стерильности, валидация.

Summary

Features of microbiological studies during the test of haemotransfusion preparations for sterility

V.V. Lyubych, SI «Institute of Haematology and Transfusiology of NAMS of Ukraine», Kyiv

The aim - to analyze the test results for sterility of donor blood preparations during the primary and the subsequent control of quality.

Materials and methods. Research of quality of donor blood preparations (albumin solution 5%, albumin solution 10%, normal human immunoglobulin, human immunoglobulin antistaphylococcal, human immunoglobulin аntirhesus RH0(D), tetanus human immunoglobulin, infuzamin) as required by the State Pharmacopoeia of Ukraine and analytical and normative documents.

Results. There have been analyzed the results of studies of sterility of donor blood preparations in Ukraine for the 2011-2013. During that period the primary control revealed a series of non-sterile preparation, during the subsequent state control - non-sterile preparations were not found.

Key words: donor blood preparations, microbial contamination, control of sterility, validation.

Постановка проблеми

Мікробна контамінація донорської крові, її компонентів і препаратів є однією з актуальних проблем виробничої трансфузіології. Ризик мікробної контамінації існує на всіх етапах виготовлення гемотрансфузійних середовищ, тому під час оцінки їхньої якості особлива увага приділяється мікробіологічним дослідженням, зокрема випробуванням на стерильність.

Випробування на стерильність - це єдиний аналітичний метод, що дозволяє оцінити стерильність лікарського засобу, виготовленого за асептичних умов. Стерильність гемотрансфузійних препаратів обумовлена як чистотою вихідної сировини, так і умовами виробництва. Особливого значення набуває вибір методів і режимів стерилізації готової продукції.

Виробництво трансфузійних препаратів передбачає застосування різних видів стерилізації, що мають гарантувати збереження їхньої стерильності. Це парова, сухожарова, радіаційна, газова стерилізація, використання фільтрів, що здатні затримувати мікроорганізми, та виробництво за асептичних умов. Однак відомо, що процес інактивації мікроорганізмів фізичними і хімічними методами підпорядкований експоненціальному (логарифмічному) закону, отже, завжди існує ймовірність виживання мікроорганізмів у процесі стерилізації. Ця ймовірність залежить від величини популяції, виду та стійкості мікроорганізмів, які потрапили в трансфузійне середовище під час його виготовлення. Тому необхідно звести до мінімуму біозабруднення вихідної сировини перед інактивацією чи стерилізацією та використовувати інгредієнти з допустимими межами мікробного забруднення [1-4].

Слід враховувати можливість контамінування вихідної сировини, інгредієнтів та препаратів мікроорганізмами, які у відповідь на стресові умови (стерилізація, опромінення, дія дезінфектантів, особливості технологічних процесів тощо) втратили здатність росту на штучних живильних середовищах. Однак завдяки перебудові свого генетичного апарату за допомогою сенсорних і регуляторних механізмів залишилися здатними до активного метаболізму. Це так звані дормантні форми мікроорганізмів (англ. dormant - дрімотний, сплячий). У разі зміни несприятливих умов існування вони можуть «рекультивуватись», тобто знову набувати здатності до розмноження і росту на звичайних для них живильних середовищах. Здатність до переходу в стан спокою виявлена для багатьох видів умовно- патогенних і патогенних бактерій. Не виключено, що дормантні форми мікроорганізмів після попадання в організм людини під час трансфузій можуть реверсувати у вегетативний стан і викликати відповідну негативну реакцію - пірогенну, токсичну або сепсис.

Виявлення формантних форм мікроорганізмів - це складний процес. Їх важко ідентифікувати класичними мікробіологічними методами дослідження. Найперспективнішим при цьому є застосування полімеразної ланцюгової реакції, яка дає можливість виявити в досліджуваному матеріалі специфічний, характерний тільки для даного виду бактерії фрагмент нуклеїнової кислоти і далі ампліфікувати цей фрагмент [5]. Однак в умовах виробництва препаратів нині це здійснити неможливо. Тому нагальною проблемою під час виготовлення гемотрансфузійних препаратів є забезпечення належних умов, які виключали б можливість бактеріального забруднення на всіх етапах виробництва.

Мета. Провести аналіз результатів первинного контролю якості білкових препаратів крові, що проводився у відділах з контролю якості (ВКЯ) Центрів крові (ЦК), обласних станцій переливання крові (ОСПК) і станцій переливання крові (СПК) України, і подальшого випробування у Центральній лабораторії державного контролю за якістю білкових препаратів плазми крові, компонентів та кровозамінників (ДУ «Інститут гематології та трансфузіології НАМН України») за період від 2011р. по 2013 р.

Матеріали і методи досліджень. Впродовж 2011-2013 рр. відповідно до «План-завдань» у Центральну лабораторію державного контролю за якістю білкових препаратів плазми крові, компонентів та кровозамінників із ЦК (ОСПК) та СПК України на подальший контроль було надіслано наступі препарати: розчин альбуміну 5%; розчин альбуміну 10%; імуноглобулін людини нормальний, рідкий; імуногло- булін людини антистафілококовий, рідкий; імуноглобулін людини антирезус Rh0(D), рідкий; імуноглобулін людини протиправцевий, рідкий; інфузамін. Після первинного контролю препаратів донорської крові у відділах з контролю якості ЦК (ОСПК), СПК у Центральній лабораторії державного контролю проведено подальший контроль у таких напрямках: визначення фізико-хімічних властивостей; біологічні випробування на стерильність і специфічну активність; біологічні випробування на відсутність пірогенності та токсичності; випробування на інфекційну безпечність.

Державний контроль якості білкових препаратів донорської крові, зокрема випробування препаратів на стерильність, проводили відповідно до вимог Державної Фармакопеї України, Настанов з якості медичних імунобіологічних препаратів [6-10], аналітично-нормативної документації виробника (АНД), чинної Інструкції з контролю стерильності [11] з використанням методик, що регламентовані нормативними документами, та класичних мікробіологічних методів досліджень. У роботі використовували державні та галузеві стандарти.

контроль якість стерильність білковий плазма донорський кров

Результати та їх обговорення

За період 2011-2013 рр. у Центральній лабораторії державного контролю проконтрольовано 202 серії білкових препаратів донорської крові (табл. 1), при цьому проведено 19712 аналізів, зокрема:фізико-хімічні дослідження - 10319; бактеріологічні - 6598; визначення специфічної активності імунних препаратів - 1216; біологічний контроль - 1579.

Таблиця 1