Главная Коллекция "Otherreferats" Биология и естествознание Физиолого-биохимические адаптационные показатели азовской тарани Rutilus rutilus (L.) на разных этапах жизненного цикла

Физиолого-биохимические адаптационные показатели азовской тарани Rutilus rutilus (L.) на разных этапах жизненного цикла

Морфофизиологические и биохимические особенности годовых циклов азовской тарани. Исследование воспроизводства рыб на примере рода Rutilus в водоемах южных широт России. Оценка изменений содержания общего белка и холестерина у рыб в преднерестовый период.

Рубрика Биология и естествознание
Вид статья
Язык русский
Дата добавления 03.08.2022
Размер файла 1,8 M

Отправить свою хорошую работу в базу знаний просто. Используйте форму, расположенную ниже

Студенты, аспиранты, молодые ученые, использующие базу знаний в своей учебе и работе, будут вам очень благодарны.

Страница:

Размещено на http://allbest.ru

18

Всероссийский научно-исследовательский институт рыбного хозяйства и океанографии

Азово-Черноморский филиал

Физиолого-биохимические адаптационные показатели азовской тарани Rutilus rutilus (L.) на разных этапах жизненного цикла

Светлана Григорьевна Сергеева, Леонид Анатольевич Бугаев,

Анна Владимировна Войкина, Марина Анатольевна Цыбульская

Ростов-на-Дону, Россия

Аннотация

Обобщены результаты многолетних исследований по изучению ряда показателей, используемых для оценки физиологического состояния популяции азовской тарани Rutilus rutilus (L, 1758). Определены среднемноголетние значения и референсный диапазон изменений, так называемый «коридор нормы», содержания влаги, белка и общих липидов в тканях и органах тарани, белка, холестерина и липидов, веществ, характеризующих трофическую составляющую крови. Показано, что многие из этих показателей имеют определенную сезонную динамику и зависят от пола рыб и стадии зрелости гонад. Результаты исследований состояния азовской тарани на основании изучения ее биохимического статуса позволили определить физиологическую норму для этого объекта в современных условиях. Снижение жирности мышц (< 3%) и печени (<8%) в преднерестовый период сказывается на обеспечении нормального процесса созревания рыб и в дальнейшем благополучного хода эмбриогенеза. Содержание белка в мышцах тарани - достаточно стабильный показатель, оптимальные значения его составляют 130-170 мг/г. В сыворотке крови уровень белка ниже 30 г/л, холестерина ниже 2,6 ммоль/л (100 мг%), липидов ниже 0,50 г/л является сигналом неблагоприятных условий обитания. Оптимальные значения содержания белка в зрелой икре самок тарани находятся в интервале 150250 мг/г, а жира - не менее 7-8%.

Ключевые слова: тарань Rutilus rutilus, жизненный цикл, белок, влага, липиды, холестерин, гонады, стадия зрелости

Summary

Physiological and biochemical adaptation indicators of the Azov sea roach Rutilus rutilus (L.) at various stages of its life cycle

Svetlana G. Sergeeva, Leonid A. Bugaev, Anna V. Voykina, Marina A. Tsybul'skaya. Russian Federal Research Institute of Fisheries and Oceanography, Azov-Black Sea Branch, Rostov-on-Don, Russian Federation

The roach, inhabiting the Azov Sea, is a semi-anadromous form of the species Rutilus rutilus (L., 1758) that holds major commercial importance. This study has been aimed at the investigation of long-term dynamics exhibited by some characteristics of metabolic activity in roach.

The samples for various stages of its life cycle, including spawning, fattening, and wintering states, have been collected during sea trips, through catches of coastal stationary seines in various areas of the Azov Sea, and upon the breeders approaching to the spawning and rearing farms (hatcheries) of the Azov-Kuban Region. Around 3000 matured roach indaviduals aged 3-5 years have been investigated. Average long-term and reference intervals have been established, which limited 80% of the sample; the content of moisture, protein and total lipids in the tissues and organs of roach, as well as protein, cholesterol and lipids in blood, and the elements indicating its trophic quality has been identified. Table 1 shows the results obtained for determining the content of protein and lipids in gonads, liver and muscles, protein, cholesterol and lipids in blood serum. The data are presented in the form of a mean and a mean error (M ± mM). We found out that the investigated characteristics have high variability showing seasonal dynamics and associated with metabolic features of fish individuals with the gonad differing in maturity. During the fattening season that covers the end of spring, summer and autumn, the synthesis of lipids and protein and their deposition in muscle tissue and liver is taking place, their content in blood serum increases, and after this, a relatively fast gonadogenesis begins. Wintering starts with the developed reproductive products at the 4th maturity stage in females and at the 3rd-4th maturity stage in males. After winter depletion of depot fat used for maintaining catabolism and formative processes, their further reduction ensues. After spawning, content of these elements drops to their minimum. In female gonads, in the course of oocyte maturation from the 2nd to the 4th maturity stage, considerable accumulation of fat and protein takes place. Protein content in muscles is normally maintained at a constant level. The dynamics of the studied indicators is shown in Figures 2-8.

Results of the investigation of the physiological status of the Azov Sea roach have made it possible to determine a physiological norm for this fish species for the present time. The fat content varies by season from 5.7 to 10.2% in muscles, and from 10.2 to 50.4% in liver. Its decrease during pre-spawning (down to less than 3% in muscles and less than 8 % in liver) affects the normal course of fish maturation and, later on, interferes with successful embryogenesis. The protein content in roach muscles is relatively stable; its optimal values lie within the range 130-170 mg/L. The protein content in muscles that is lower than 100 mg/g is considered critical. Optimal values of the protein content in ripe eggs of roach females range between 150 and 250 mg/g, and for the fat content they are no lower than 7-8%. High content of protein (58-100 g/L), lipids (2.0-3.8 g/L) and cholesterol (5.9-15.9 mmol/L) is recorded in blood serum during fattening; in the pre-spawning season, their amount decreases. Total protein content in the blood serum of roach females being higher than 80 g/L during the pre-spawning season indicates the beginning of resorption processes in reproductive products, which is supported by the data collected during histological surveys. The content of protein lower than 30 g/L, of lipids lower than 0.50 g/L, and cholesterol lower than 2.6 mmol/L is indicative of emaciation in fish, and attests to the unfavorable environment.

The paper contains 8 Figures, 1 Table and 61 References.

Keywords: Azov roach Rutilus rutilus, life cycle, protein, moisture, lipids, cholesterol, gonads, maturity stage

Введение

Каждый период жизненного цикла рыб характеризуется специфическими особенностями метаболизма, без которых невозможно нормальное осуществление жизненных процессов в популяции [1]. Метаболические процессы являются одним из инструментов реализации адаптационных возможностей организма на абиотические (температура, гидрохимические особенности водоема) и биотические (качество и доступность кормовой базы, наличие тех или иных инвазий) факторы среды. Наиболее распространенными биохимическими тестами функционального состояния рыб в аспекте реализации адаптационного потенциала особи на разных этапах цикла являются определения таких биологических параметров, как содержание влаги, белка и липидов в тканях и органах. Биологическая ценность и информативность этих показателей подтверждены большим количеством теоретических и экспериментальных работ [2-6]. Достаточно информативными являются и индексы жизненно важных органов рыб, динамика которых порой зависит от зрелости гонад и сезонных изменений метаболизма [7].

Для диагностики состояния организма особую важность приобретает знание нормы, диапазона значений исследуемых показателей, характеризующих эту «норму», позволяющих нормальному протеканию всех жизненно важных процессов организма, связанных с репродукцией и поддержанием жизнеспособности организма в изменяющихся условиях среды [8, 9].

Тарань представляет собой полупроходную форму плотвы Rutilus rutilus (L, 1758), которая эволюционно возникла в условиях относительно рас- пресненного Азовского моря. Это важный промысловый вид Азовского моря, основные нерестилища тарани находятся в Азово-Кубанском и Азово-Донском районах. Распространение азовской популяции тарани в морской части ареала неравномерно и зависит от солености воды и продуктивности кормовых площадей [10]. В настоящее время ареал тарани занимает прибрежную зону восточной и северо-восточной части Азовского моря. Распределение тарани в прибрежной зоне моря ограничивается глубинами 4-8 м. Изогалина 11%о - это верхняя граница оптимальной солености для тарани. В результате зарегулирования стока Азовского моря в середине 1970-х гг. соленость вод увеличилась до критических значений и составила в среднем 13,8%. В этот период было отмечено снижение численности и ухудшение качества рыб в популяции азовской тарани [11]. В 1990-е гг. соленость вод менялась от 10,6 до 11%, т.е. была сопоставимой с величинами, отмечавшимися в годы естественного режима стока рек бассейна [12]. В дальнейшем отмечалось незначительное снижение солености, к 2006 г. она достигла 9,3%. Период 2000-2013 гг. характеризовался распреснением Азовского моря до значений, свойственных естественным условиям [13]. С 2013 г. вследствие климатических и антропогенных преобразований материкового стока в Азовское море, особенно стока р. Дон, отмечена тенденция роста этого показателя. В 2018 г. значение среднегодовой солёности незначительно превысило 13,8%, а в 2020 г. значения этого показателя достигли максимальных значений для периода наблюдений 1960-2019 гг. и составили 14,5% [14]. Таким образом, до 2018 г. соленость Азовского моря была на оптимальном для популяции тарани уровне. Все описанные гидрохимические флуктуации оказывали существенное влияние на динамику тарани, так как в значительных пределах изменялась площадь нагульной части ареала как для взрослых особей, так и для молоди. В ответ на снижение благоприятности среды обитания отмечались общее уменьшение размерно-массовых характеристик производителей, идущих на нерест, уменьшение на один год сроков первого созревания особей [15]. Все это находит отражение в изменении показателей метаболизма рыб.

Результаты мониторинга физиологического состояния нерестовой части популяции тарани в разные периоды жизненного цикла, проводимого нами с 1991 г., позволяют определить количественные границы содержания запасных и лабильных веществ в организме рыб, характерные для современного (благополучного для тарани) состояния экосистемы Азовского моря. В дальнейшем такие данные должны учитываться при оценке «нормальности» или «ненормальности» состояния организма в изменяющихся условиях среды [9].

Цель данного исследования - анализ многолетних данных по динамике содержания белка и общих липидов в мышцах, печени и гонадах тарани, общего белка, альбуминов, глобулинов, холестерина и липидов сыворотки крови, индекса печени, определение референсных диапазонов этих показателей.

Материалы и методики исследования

Представленные нами материалы получены за более чем двадцатипятилетний период исследования (с 1991 по 2020 г.) современного состояния популяции азовской тарани.

В разные периоды жизненного цикла, включающие нерестовое, нагульное и зимовальное состояние, проводился сбор проб в морских рейсах, из уловов береговых ставников в разных районах

Азовского моря, а также в период подходов производителей к нерестововыростным хозяйствам (НВХ) Азово-Кубанского района. Ежегодно в каждый сезон для анализа отбирали по 20 самок и 10 самцов. Исследовано более 3 000 половозрелых особей в возрасте 3-5 лет.

Сбор материала осуществляли согласно стандартной методике И.Ф. Правдина (1966) [16]. Каждую особь измеряли с точностью до 0,1 см и взвешивали с точностью до 0,05 г.

Для определения возраста использовали чешую. По внешнему виду гонад определяли половую принадлежность и стадию зрелости половых продуктов в соответствии со шкалой зрелости, предложенной В.А. Мейен (1940) [17]. Пробы мышц вырезали из большой боковой мышцы тела рыбы выше боковой линии. Кровь собирали из каудальной вены с помощью стерильного пластикового шприца объемом 2 см3, помещали в сухую пластиковую пробирку Эппендорфа (Eppendorf Russia & CIS).

Отделение жидкой части (сыворотки) от клеток крови осуществляли методом центрифугирования с использованием центрифуги СМ-12-08 (Россия) в течение 10 мин при 4 500 об/мин.

Полученную сыворотку хранили при -18 °С [18]. После забора крови рыбу вскрывали, выделяли печень, взвешивали с точностью до 0,001 г для расчета гепатосоматического индекса (М печени / М тела х 100).

Затем каждую рыбу осматривали для выявления внешних и внутренних аномалий или поражений.

Определение влаги проведено весовым методом [19]. Для определения массовой доли липидов в образцах ткани осуществляли непрерывную экстракцию по методу Сокслета [19] с использованием полуавтоматического анализатора содержания жиров FA-46 (Bioevopeak Co., Ltd, China).

Метод основан на экстракции жира органическим растворителем (эфир диэтиловый) из сухой навески и последующим определении его массы взвешиванием. Содержание белка в тканях определяли по методике Лоури [20] с использованием бычьего сывороточного альбумина в качестве стандарта.

Сыворотка крови без следов гемолиза использована для определения количества общего белка, альбумина и глобулинов, холестерина и липидов.

Анализ состава сыворотки крови проведен с помощью автоматического биохимического анализатора Stat Fax 4500 (Awareness Technology, USA) наборами реагентов компании Абрис+ (Санкт-Петербург, Россия).

Массив данных обрабатывали статистически с использованием 1-критерия Стьюдента, отличия считались статистически значимыми при p < 0,05.

Для установления референсных значений использовали интерде- цильный размах, содержащий в себе центральные 80% наблюдений, т.е. те наблюдения, которые располагаются между 10-м и 90-м процентилями. Для количественной оценки тесноты связи между исследованными показателями использовали коэффициент корреляции CR.

Данные в таблице и на рисунках представлены в виде средней и ошибки средней (M ± тМ).

Статистическая обработка полученных данных и построение графических изображений (гистограммы) осуществлялись с использованием стандартного пакета программ Microsoft Office Excel 2010, StatSoft Statistica 12 for Windows.

Результаты исследования и обсуждение

У тарани в соответствии с периодами жизненного цикла происходят изменения яичников и семенников, которые связаны с присутствием в них определенных комплексов половых клеток, находящихся на разных фазах развития. Стадия II у половозрелых особей начинается после окончания VI стадии (посленерестовый период), т.е. с мая, и продолжается по июнь-июль. Этот процесс может продолжаться до 1,5 месяца. Продолжительность созревания гонад III стадии длится 1-1,5 месяца (до конца августа). Это период активного нагула тарани (летний и осенний нагул). Стадия зрелости IV у самок тарани наступает с октября и продолжается до марта-апреля.

Всю зиму яичники находятся в IV стадии зрелости (зимовальный период). Гонады самцов в этот период менее зрелые (стадии III--IV). Ранней весной переход гонад из IV (преднерестовый период) в V стадию совершается быстро, в течение нескольких дней. Затем наступает нерест.

Анализ многолетней динамики физиологических показателей тарани свидетельствует об их высокой зависимости от периода жизненного цикла и, соответственно, от стадий зрелости половых продуктов. Средние величины некоторых показателей и их референсные значения приведены в таблице.

Печень - один из ведущих органов в процессах метаболизма, поэтому кроме показателей обмена мы использовали и такой показатель, как индекс печени. В значительной мере состояние печени определяется экологическим качеством внешней среды, однако эти проблемы в рамках данной статьи не рассматриваются.

Важная функция этого органа - синтез и депонирование запасных веществ (белков, липидов, углеводов в виде гликогенов) [2]. Поэтому от количества накопления этих резервных веществ в гепатоцитах зависят и размеры органа.

Многолетние данные по физиологическим показателям тарани в разные периоды цикла [Long-term data on the physiological parameters of roach in different periods of the cycle], M ± Шм

Показатель [Indicator]

Летний нагульный период [Summer feeding period]

Осенний нагульный период [Autumn feeding period]

Зимовальный период [Wintering period]

Нерестовый период [Spawning period]

9

3

9

3

9

3

9

3

Липиды гонад [Gonadal lipids], % *

61,3±1,5

56,7±1,

16,1±0,8

41,2±2,8

9,9±0,5

18,5±0,5

8,6±0,4

21,4±0,4

Референсные значения, [The reference values], % *

42--75

40--69

6--30

28--60

6--14

8--27

5--4

9--35

Липиды печени [Liver lipids], % *

50,4±1,3

50,2±1,1

29,3±2,4

33,7±3,2

19,7±3,6

19,9±5,2

10,1±0,5

10,9±0,8

Референсные значения [The reference values], % *

40--61

43--56

20--50

20--55

11--24

10--32

5--16

5--17

Липиды мышц [Muscle lipids], % *

7,1±1,1

9,2±0,8

8,1±0,5

10,2±0,7

6,3±0,4

9,3±0,6

5,7±0,2

6,0±0,4

Референсные значения [The reference values], % *

5--20

5--13

5--12

7--16

4--11

4--14

3,5--11

4--14

Белок гонад, мг/г [Gonadal protein, mg/g]

115±6

64±3

202±7

82±4

217±8

80±5

203±4

84±5

Референсные значения, мг/г [The reference values, mg/g]

65-166

48-104

140-264

59-104

151-284

56-118

131-270

68-121

Белок печени, мг/г [Liver protein, mg/g]

161±6

166±6

156±6

136±8

124±8

149±4

148±3

132±7

Референсные значения, мг/г [The reference values, mg/g]

112-211

127206

105-206

92-180

92-136

104-157

104-213

91-173

Белок мышц, мг/г [Muscle protein, mg/g]

154±4

148±7

157±5

161±6

156±5

148±6

142±3

144±4

Референсные значения, мг/г [The reference values, mg/g]

119-189

114-183

118-195

122-199

111-200

107-189

102-187

100-189

Количество исследованных рыб, экз. [The number of fish studied, pcs.]

360

270

220

180

180

150

530

380

Белок сыворотки крови, г/л [Blood serum protein, g/l]

-

-

81,1±5,5

82,0±7,8

-

-

65,7±1,4

63,9±1,9

Референсные значения [The reference values, g/l]

-

-

58,5-110,0

64,1-99,7

-

-

45,1-87,2

36,4-87,1

Холестерин сыворотки крови [Blood serum cholesterol],

mmol/l

-

-

10,7± 1,3

13,4± 1,4

-

-

9,0±0,5

8,8±0,6

Референсные значения, г/л [The reference values, mmol/l]

-

-

5,9-13,1

10,115,9

-

-

5,4-11,9

4,0-12,1

Липиды сыворотки крови, г/л [Blood serum lipids, g/l]

-

2,2±0,1

2,6±0,0,3

-

1,8±0,3

2,0±0,1

Референсные значения, г/л [The reference values, g/l]

-

-

1,8-3,2

2,0-3,8

-

-

0,8-2,4

1,1-2,5

Количество исследованных рыб, экз. [The number of fish studied, pcs.]

-

-

250

180

-

-

320

270

* Содержание жира на сухое вещество [* Fat content per dry substance].

В период нагула у рыб с гонадами II- III стадии зрелости индекс печени максимальный, так как идет активное питание рыб (1,66% у самок и 1,61% у самцов), различия по полу отсутствуют (р = 0,63).

В конце осеннего периода, когда происходят значительные траты на созревание гонад (IV стадия зрелости у самок и III стадия зрелости у самцов), индекс печени уменьшается до 1,21% у самок и 1,29% у самцов, причем здесь не наблюдалось статистически значимых различий в зависимости от пола (р = 0,69). В период зимовки относительные размеры печени минимальные - 1,07% как у самок, так и самцов.

Весной перед нерестом отмечается увеличение индекса до 1,36 у самок и 1,39 у самцов, что свидетельствует об активизации деятельности печени (различия по полу отсутствуют, р = 0,22). После нереста, когда тарань начинает питаться, относительные размеры печени увеличиваются. Таким образом, изменения этого показателя не зависят от пола, а определяются периодом жизненного цикла, достигая максимального значения в период активного нагула (рис. 1).

Ресурсы, поступающие в организм, идут, с одной стороны, на соматический рост, поддерживающий обмен, и на формирование репродуктивных тканей. Важное место в этом процессе занимают липиды (суммарный жир).

У рыб липиды могут находиться в печени, в мышцах, висцеральной жировой ткани; места хранения, так называемые жировые депо, зависят от вида рыб [21, 22]. Содержание липидов у представителей разных видов рыб значительно изменяется по сезонам [23-26]. Особенности и периодичность липидного обмена в значительной степени определяют характер созревания рыб и время вступления их в процесс нереста [27, 28]. Особенно активно используются липиды на заключительной стадии созревания ооцитов [25], а также в период нерестовых миграций [27, 29].

Рис. 1. Индекс печени (%) самок и самцов тарани в разные периоды [Fig. 1. Liver Index (%) of female and male roach in different periods] (M ± тм)

Известно, что у особей одного поколения, в организме которых не достигнут определенный уровень содержания резервных органических веществ, ооциты протоплазматического роста (II стадия зрелости) не переходят в период трофоплазматического роста (III стадия зрелости) [30]. При дефиците липидов созревание рыб не только замедляется, в критических ситуациях их половые продукты резорбируются [31-33].

У половозрелой тарани в нагульный период, который охватывает конец весны, лето и осень, происходит интенсивное накопление липидов, и только после этого начинается довольно быстрый гонадогенез. В зиму тарань уходит со сформированными половыми продуктами IV стадии зрелости. Основная часть жировых запасов у тарани сосредоточена в так называемом висцеральном жире, в том числе на поверхности гонад. Жир буквально обволакивает гонады как самок, так и самцов.

В нагульный летний период различия в содержании общих липидов в гонадах у самок и самцов невысокие (р < 0,05). По многолетним данным, количество липидов гонад достигает у самок 61,3%, у самцов 56,7%. В конце осеннего периода, когда у самок уже сформированы зрелые гонады (IV незавершенная стадия зрелости), содержание общих липидов снижается до 16,1%. У самцов, у которых в этот период гонады III стадии зрелости, их содержание остается еще высоким - 41,1% (различия по полу статистически значимые, р < 0,0001).

В зимний период содержание общих липидов в гонадах снижается до 9,9% у самок и 18,5% у самцов (р < 0,0001). Самое большое падение количества общих липидов отмечается в нерестовый период, когда его запасы у самок истощены (рис. 2).

Рис. 2. Содержание общих липидов в гонадах самок и самцов тарани в разные периоды [Fig. 2. The content of total lipids in the gonads of female and male roach in different periods] (M ± тм)

В это время определяется только жир, содержащийся непосредственно в зрелой икре в виде жировой капли (среднемноголетнее значение 8,6%). Референсный диапазон содержания общих липидов в зрелых гонадах самок перед нерестом составляет 5-14%, содержание общих липидов ниже 4% для самок является критическим.

У самцов в гонадах содержание липидов высокое (до 21,4%), жир рассредоточен в строме семенников в виде жировых вакуолей. Различия по полу статистически значимые, р < 0,0001.

Такие различия являются следствием более высокого темпа накопления в яйцеклетках нелипидных веществ (прежде всего, белков), что сильно увеличивает общее содержание сухих веществ в гонадах, достигающее почти 50% у самок и 25% у самцов. При сравнении содержания общих липидов в гонадах в сезонном аспекте отмечены различия между всеми сезонами. К примеру, для самок по оси «зима-лето» р < 0,0001, «весна-лето» р < 0,0001. Таким образом, различия по содержанию липидов в гонадах тарани зависят как от пола, так и от сезона.

Физиолого-биохимические сдвиги в организме созревающих рыб сказываются на состоянии печени, занимающей главное место в промежуточном обмене веществ. Во время зимовки липиды, запасенные в печени, используются на поддержание энергетического обмена и на формообразовательные процессы [28].

Максимальное содержание липидов в печени отмечается в период летнего нагула и осенью и составляет в среднем 50,4% у самок и 50,2% у самцов (различия по полу отсутствуют, р = 0,907).

Перед зимовкой у самок со зрелыми гонадами IV стадии зрелости содержание липидов снижается до 29,3%, у самцов (III стадия) - до 33,7% (при более высоких значениях у самцов, р < 0,05). В зимний период отмечается снижение содержания общих липидов в печени, различия по полу отсутствуют (р = 0,898). Минимальные значения этого показателя отмечаются в нерестовый период и в среднем составляют 10,1% у самок и 10,9% у самцов (р = 0,340). Референсный диапазон для производителей в преднерестовый период составляет 5-17%, содержание липидов в печени ниже 4% свидетельствует об истощенности рыб. По содержанию общих липидов в печени отмечаются статистически значимые различия в зависимости от сезона как у самок, так и у самцов («зима-весна» р < 0,0001; «весна-лето» р < 0,00001) (рис. 3).

Рис. 3. Содержание общих липидов в печени самок и самцов тарани в разные периоды [Fig. 3. The content of total lipids in the liver of female and male roach in different periods] (M ± тм)

Тарань по содержанию общих липидов в мышцах относят к группе среднежирных рыб. Динамика содержания жира в мышцах половозрелой тарани имеет такую же направленность, как в гонадах и печени, однако его количество в мышечной ткани гораздо ниже. Если для гонад и печени содержание липидов от максимальных значений в нагульный период до минимальных в нерестовый снижается в 5-6 раз, то для мышц эта величина изменяется на 20-30%.

При сравнении зависимости количества общих липидов в мышцах от пола рыб отдельно во все исследованные периоды были отмечены статистически значимые различия в летний, осенний и зимовальный период (р < 0,05, р < 0,005 ир < 0,0002).

Перед нерестом значения этого показателя у самок и самцов близкие. Более существенные различия для самок и самцов были отмечены при сезонном сравнении (р < 0,005). В период интенсивного нагула среднемноголетние значения содержания общих липидов составляют для самок 8,1% (референсные значения 512%), для самцов 10,2% (референсные значения 7-16%), в нерестовый период их количество снижается до 5,7% (референсные значения 3,5-11%) и 6,0% (референсные значения 4-14%) соответственно (рис. 4).

Рис. 4. Содержание общих липидов в мышцах самок и самцов тарани в разные периоды [Fig. 4. The content of total lipids in the muscles of female and male roach in different periods] (M ± тм)

В последние годы у азовской тарани отмечается значительное снижение содержания общих липидов в тканях.

Так, в 2019 г. по результатам обследования производителей тарани из нерестово-выростных хозяйств, относящихся в ФГБУ «Бейсугское НВХ», в нерестовый период содержание общих липидов в мышцах рыб всех возрастов варьировало от 2,4 до 8,2% (среднее значение 5,0%) у самок и от 5,3 до 7,6% (среднее значение 6,5%) у самцов. Причем доля самок с критически низкими значениями этого показателя (менее 3,5%) составляла 20%.

Наибольшее снижение содержания липидов отмечено в 2020 и 2021 гг. Содержание общих липидов в мышцах самок (3,2%) и самцов (2,8%) перед нерестом ниже среднемноголетних значений для этого периода (р < 0,001). В печени самок их содержание составляло 8,7%, самцов - 8,9%, что также гораздо ниже среднемноголетних значений (10,1% для самок и 10,5% для самцов).

Аналогичная картина отмечается и для воблы Волжского бассейна. Уровень общих липидов в мышцах воблы в последние годы был настолько низким, что большую часть производителей можно отнести к категории истощенных рыб [34, 35].

По сравнению с началом 2000-х гг. содержание липидов в мышцах в осенний период снизилось в 2,5-4,0 раза, в гонадах - в 3-4 раза [33]. Расход липидов за зимовку и при переходе в нерестовое состояние у каспийской воблы достигает в среднем 50%, поэтому снижение показателей нагула влияет на качество нерестовых мигрантов. По оценкам исследователей, в период нереста отмечается до 40% рыб с дефицитом общих липидов в мышцах [31, 35, 36].

Для азовской тарани одной из причин существенного снижения жирности мышц является катастрофическое повышение солености азовоморских вод, наблюдаемое с 2018 г. [14]. В ряде работ по изучению влияния солености на обмен веществ у рыб отмечается, что с увеличением солености воды в мышцах рыб содержание белка увеличивается, а содержание общих липидов снижается. Изменение минерализации воды сопровождается изменением нагрузки на системы обеспечения осмотического, ионного и кислотно-щелочного баланса организма [37-39]. На содержание жира в мышечной ткани рыб влияет и такой важный фактор, как кормовые ресурсы [40-42].

Увеличение солености существенно изменило видовой и количественный состав животного планктона и бентоса Азовского моря и Таганрогского залива, в том числе видов, являющихся основными кормовыми организмами для тарани [43, 44]. Этот вопрос требует особого внимания и будет рассмотрен авторами в дальнейших публикациях.

Содержание белка в гонадах самок тарани зависит от стадии зрелости. Наименьшее его количество (30-40 мг/г) отмечается после нереста, когда в гонадах II стадии зрелости присутствуют только ооциты протоплазматиче- ского роста (резервный фонд). В летний период по достижении гонадами III стадии зрелости (фаза первоначального накопления желтка) содержание белка увеличивается более чем в два раза (среднемноголетнее значение 115 мг/г). Перед зимовкой у тарани в гонадах IV незавершенной стадии зрелости (фаза накопления желтка) количество белка в среднем достигает 200 мг/г, т.е. отмечается двукратное увеличение по сравнению с гонадами III стадии зрелости (р < 0,0001). В зимний период и до начала нереста, когда гонады имеют IV завершенную и IV-V стадии зрелости, содержание белка в икре практически не изменяется (р = 0,874) (рис. 5). Референсные значения содержания белка в зрелой икре находятся в интервале 131-- 270 мг/г. Количество белка ниже 100 мг/г свидетельствует о низком качестве икры.

Рис. 5. Содержание белка в гонадах самок тарани разной стадии зрелости [Fig. 5. The protein content in the gonads of female roach at different stages of maturity] (M ± тм)

У самцов содержание белка в гонадах невысокое и по сезонам изменяется незначительно. Сразу после нереста белок в гонадах практически не определяется. В период летнего нагула, когда семенники имеют II стадию зрелости, количество белка достигает 64 мг/г, а затем оно увеличивается, к периоду нереста (IV стадия) составляет в среднем 84 мг/г (референсные значения 68--121 мг/г) (рис. 6).

Рис. 6. Содержание белка в гонадах самцов тарани разной стадии зрелости [Fig. 6. The protein content in the gonads of male roach different stages of maturity] (M ± тМ)

Содержание белка в печени самок и самцов в меньшей степени зависит от стадии зрелости гонад. Наибольшее количество белка отмечается летом и осенью в период активного нагула, в зимний период у самок отмечается достаточно резкое (до 20%) снижение количества белка (р < 0,005) (рис. 7), что происходит на фоне увеличения количества белка в гонадах (см. рис. 5).

Рис. 7. Содержание белка в печени самок и самцов тарани в разные периоды [Fig. 7. The protein content in the liver female and male of roach in different periods] (M ± m^)

Содержание белка в мышцах в течение года характеризуется близкими значениями как у самок, так и у самцов. Лишь в нерестовый период отмечается незначительное снижение его количества, которое коррелирует с содержанием жира (CR = -0,528). В конце нагульного периода содержание белка в мышцах самок составляет 157 мг/г, самцов - 161 мг/г, а к началу нереста - 142 (референсные значения 102-187) и 144 (референсные значения 100-189) мг/г соответственно (рис. 8).

Рис. 8. Содержание белка в мышцах самок и самцов тарани в разные периоды [Fig. 8. The protein content in the muscles female and male of roach in different periods] (M ± тМ)

Такая динамика содержания белка в мышцах характерна и для других видов рыб [9, 29, 36]. Потери белка во время зимовки и созревания половых продуктов у представителей рода Rutilus, как правило, не превышают 10-30% от их количества осенью [45, 46]. Снижение уровня белка мышц является результатом неудовлетворительного состояния рыбы в период формирования и созревания половых продуктов.

Мышечные белки являются структурными веществами и входят в качестве важнейших компонентов в состав тканевых оболочек, клеточных и субклеточных мембран, отсюда ясно значение поддержания белка в организме на постоянном уровне [1]. Ориентируясь на референсные значения этого показателя (коридор нормы) в разные сезоны жизненного цикла самок и самцов тарани, мы можем говорить о том, что содержание белка в мышцах ниже 100 мг/г может свидетельствовать об ухудшении физиологического состояния особей. биохимический белок холестерин тарань

Информативным индикатором состояния организма является кровь, биохимический состав которой чутко реагирует на воздействие факторов среды [47]. Показатели белково-липидного комплекса сыворотки крови отражают такие биологические процессы, как степень нагула, истощение, процессы, связанные с созреванием или дегенерацией икры [48]. Достаточно важный показатель физиологического состояния рыб - содержание белка в сыворотке крови.

Снижение его уровня отмечается при истощении, которое может быть биологически нормальным, обусловленным созреванием гонад, или быть вызванным неблагоприятными условиями обитания. В преднерестовый период и во время нереста содержание белка в сыворотке крови составляет у самок в среднем 65,7 г/л (референсные значения 45,1-87,2 г/л), у самцов - 63,9 г/л (референсные значения 36,4-87,1 г/л) (различия по полу отсутствуют, p = 0,418). После нереста (стадии зрелости VI-II) содержание сывороточного белка снижается до 35-45 г/л, а затем к лету оно увеличивается. Максимальных величин значения этого показателя достигают в конце нагульного периода (гонады IV стадии зрелости).

Для тарани нормой содержания белка считаются величины порядка 60100 г/л, среднее значение для самок составляет 81,1 г/л, для самцов - 82,0 г/л (р = 0,0382). То есть содержание белка в крови тесно связано со стадией развития гонад и не зависит от пола.

Под термином «общий белок» понимают суммарную концентрацию альбумина и глобулинов, находящихся в сыворотке крови. Для тарани характерно незначительное преобладание альбуминовой фракции. У тарани соотношение количества альбумина к количеству глобулинов, или белковый коэффициент, варьирует от 1,2 в нагульный период до 1,07 в преднерестовый период. Снижение количества альбумина связано как с усилением катаболизма, так и со снижением его синтеза, что зависит от его расходования на пластические и энергетические нужды при созревании половых продуктов [47, 49]. Достоверное повышение уровней белка и, в частности, альбумина у тарани согласуется с результатами, полученными у других видов рыб [50-52].

Содержание общего белка в преднерестовый период 80 г/л и выше свидетельствует о начинающихся процессах резорбции половых продуктов, что подтверждается нашими данными гистологических исследований [32]. Снижение этого показателя в стадии зрелости IV до 20-30 г/л говорит об истощенности организма.

Наши многолетние наблюдения показали, что доля рыб в составе нерестовой части популяции тарани с высоким содержанием белка в сыворотке крови не превышает 10%, что укладывается в норму реакции. Однако количество рыб с изменением уровня суммарного количества сывороточного белка в сторону гипопротеинемии по годам изменяется значительно - от 0 до 20%, что является следствием неудовлетворительных условий нагула, зимовки и, в том числе, нестабильной экологической обстановки.

Характерной особенностью рыб считается высокое содержание липидов в крови, изменение их содержания происходит в зависимости от физиологических потребностей организма [53]. Резкое увеличение содержания липидов, в частности, фосфолипидов, холестерина и его производных, в сыворотке самок многих видов рыб происходит в период созревания половых продуктов [54-56]. Это объясняется тем, что в процессе генеративного синтеза происходит физиологическая перестройка организма, что находит выражение в усилении транспорта кровью липидных компонентов [57]. Направленность метаболизма общих липидов крови тарани в процессе созревания идентична белковому обмену. Перед нерестом содержание общих липидов невысокое и в среднем составляет 1,8 г/л (референсные значения 0,8-2,4 г/л) у самок и 2,0 г/л (референсные значения 1,1--3,0 г/л) у самцов. После нереста содержание липидов в крови тарани составляет 0,51,0 г/л. В осенний период после длительного нагула содержание общих липидов сыворотки крови тарани значительно увеличивается и составляет в среднем у самок 2,2 г/л (референсные значения 1,8-3,2 г/л), у самцов - 2,6 г/л (референсные значения 2,0-3,8 г/л).

Отмеченные различия по полу (р < 0,05) можно объяснить тем, что у самок идет более интенсивный расход липидов, так как для формирования икры в процессе онтогенеза требуется гораздо больше энергетических и пластических веществ, чем при сперматогенезе [57]. Для тарани, имеющей в этот период уже сформированные половые продукты, это нормальный процесс. Еще один фактор, который влияет на уровень липидов в крови, связан с тем, что в зимний период падает интенсивность питания, а перед нерестом большинство производителей тарани не питается.

Холестерин, как и фосфолипиды, относится к мембранным компонентам и является наиболее распространенным стероидным метаболитом. Расходуется холестерин в разные периоды жизни рыб по-разному. У взрослых рыб холестерин главным образом используется на пищеварительные и репродуктивные процессы (метаболический фонд), приблизительно 8% его содержания в организме приходится на кровь, выполняющую транспортную роль при переносе холестерина [58]. Значительная часть холестерина, поступающего из печени, расходуется для синтеза половых гормонов (андрогенов и эстрогенов), а также кортикостероидов, которые выбрасываются в кровь при различных стрессовых состояниях организма [57].

К концу созревания гонад у тарани, как и у большинства рыб, количество холестерина в сыворотке крови значительно снижается. В осенний период, когда гонады уже сформированы (IV стадия зрелости), количество холестерина в сыворотке крови самок тарани составляет в среднем 10,7 ммоль/л (референсные значения 5,9-13,1 ммоль/л), а непосредственно перед нерестом, когда процессы созревания ооцитов уже завершены, его содержание снижается в среднем до 9,0 ммоль/л (референсные значения 5,4-11,9 ммоль/л) (р < 0,05). У самцов значения этого показателя осенью (гонады III стадии зрелости) составляют в среднем 13,4 ммоль/л (референсные значения 10,1-15,9 ммоль/л), а весной перед нерестом они существенно снижаются - 8,8 ммоль/л (4,0-12,1 мг%) (р < 0,001). Это может быть связано с тем, что созревание половых продуктов у самцов - достаточно быстрый процесс, и расход холестерина на выработку андрогенов происходит к моменту созревания.

Содержание холестерина в сыворотке крови может увеличиться при нарушении жирового обмена. Отмечено, что при длительном пребывании рыб в неблагоприятных условиях происходит дегенерация гонад, в результате чего увеличивается не только содержание холестерина, но и белка и липидов в сыворотке крови [59].

Большая роль отводится холестерину в регуляции обмена при понижении температуры воды. Как правило, в такой ситуации происходит увеличение содержания холестерина в сыворотке крови. Увеличение содержания холестерина относительно общих липидов сигнализирует о неудовлетворительных условиях обитания рыб [59].

Разнокачественность физиологического состояния тарани определяет различный темп созревания. Первыми созревают рыбы с повышенной интенсивностью обменных процессов.

Поскольку белок и липиды в преднерестовый период интенсивно расходуются на генеративный синтез, при отсутствии достоверных различий по накоплению запасных веществ у разновозрастных производителей можно говорить о высоком качестве нагула тарани и хорошей подготовленности к нересту. Различия по содержанию общих липидов и белка в сезонном аспекте определяются температурным режимом [39, 60]. Именно температура определяет сезонные колебания метаболизма, сказывается на кормовой базе рыб, на их пищевой активности и, соответственно, на изменении скорости и направлении реакций метаболизма [39]. Механизм таких изменений довольно сложен, но известно, что важную роль в процессах тепловой адаптации играют липидные и белковые компоненты клеток [61].

В отдельные годы у тарани на фоне аномально теплой зимовки отмечались максимальные траты резервных веществ, в результате чего зрелые рыбы всех возрастных групп весной характеризовались крайне низкими показателями резервных веществ по сравнению с благоприятными годами. В такой ситуации отмечался очень слабый и растянутый ход производителей тарани на нерест. При низких зимних температурах, когда обмен замедлен, наблюдается обратная реакция.

Заключение

Для азовской тарани наблюдаются четко выраженные сезонные колебания запасных питательных веществ. После зимнего снижения жировых запасов происходит их дальнейшее уменьшение за счет развития половых продуктов, после нереста содержание этих веществ падает до минимума. В период нагула происходит синтез и депонирование жира в мышечных тканях, печени. У незрелых рыб содержание общих липидов в мышцах в среднем в полтора-два раза выше, чем у рыб в четвертой стадии зрелости.

Анализ результатов исследований позволил определить физиологическую норму для этого объекта в современных условиях. Снижение жирности мышц (менее 3%) и печени (менее 8%) в преднерестовый период сказывается на обеспечении нормального процесса созревания рыб и в дальнейшем благополучного хода эмбриогенеза.

Содержание белка в мышцах тарани - достаточно стабильный показатель, оптимальные значения его составляют 130-170 мг/г. В сыворотке крови уровень белка ниже 30 г/л, холестерина ниже 1,3 ммоль/л, липидов ниже 0,50 г/л является сигналом неблагоприятных условий обитания. Оптимальные значения содержания белка в зрелой икре самок тарани должны находиться в интервале 150-- 250 мг/г, а жира -- не менее 7--8%.

Список источников

1. Шульман Г.Е. Принципы физиолого-биохимических исследований годовых циклов рыб // Биология моря. 1978. Вып. 46. С. 90--99.

2. Шульман Г.Е. Физиолого-биохимические особенности годовых циклов рыб. М. : Пищ. пром-сть, 1972. 368 с.

3. Шатуновский М.И. Экологические закономерности обмена веществ морских рыб. М., 1980. 288 с.

4. Кривобок М.Н., Тарковская О.И. Определение сроков нерестовых миграций салаки на основании изучения ее жирового обмена // Тр. ВНИРО. М., 1960. Т. XLII. С. 171--188.

5. Сторожук А.Я. Морфофизиологические и биохимические особенности созревания сайды (Pollachius virens L.) Северного моря // Тр. ВНИРО. М., 1977. Т. СХХІ. C. 58-65.

6. Сидоров В.С. Экологическая биохимия рыб. Липиды. Л. : Наука, 1983. 240 с.

7. Шихшабеков М.М., Рабазанов Н.И., Федоненко Е.В., Абдулаева Н.М., Марен- ков О.Н. Особенности воспроизводства рыб на примере рода Rutilus в водоемах южных широт // Біологічний вісник МДПУ. 2013. № 13. С. 2о3-221.

8. Пронина Г.И., Корягина Н.Ю. Референсные значения физиолого-иммунологических показателей гидробионтов разных видов // Вестник Астраханского государственного технического университета. Серия: Рыбное хозяйство. 2015. № 4. С. 103-108.

9. Бугаев Л.А., Войкина А.В., Ружинская Л.П., Ложичевская Т.В. Референсные значения некоторых показателей пиленгаса Liza haematocheilus (Temminck & Schlegel,1845) Азово-Черноморского бассейна на разных этапах репродуктивного цикла // Водные биоресурсы и среда обитания. 2019. Т. 2, № 1. С. 27-46.

10. Чередников С.Ю., Власенко Е.С., Жердев Н.А., Кузнецова И.Д., Лукьянов С.В. Лимитирующие факторы абиотической среды и биологические особенности важнейших промысловых мигрантов Азовского моря // Водные биоресурсы и среда обитания. 2020. Т. 3, № 1. С. 2-41.

11. Агапов С.А. Тенденции изменения численности популяции азовской тарани // VI Всерос. конф. по проблемам промыслового прогнозирования : материалы науч. конф. 1995. Мурманск : Из-во ПИНРО, 1995. С. 6-7.

12. Куропаткин А.П. Изменение солености и вертикальной устойчивости вод Азовского моря в современных условиях // Основные проблемы рыбного хозяйства и охраны рыбохозяйственных водоемов Азово-Черноморского бассейна : сб. науч. тр. Аз- НиИрХ. Ростов н/Д : Изд-во АзНИИРХ, Полиграф, 1998. С. 23-30.

13. Матишов Г.Г., Гаргопа Ю.М., Бердников С.В., Дженюк С.Л. Закономерности экоси- стемных процессов в Азовском море. М. : Наука, 2006. 304 с.

14. Жукова С.В., Шишкин В.М., Карманов В.Г., Подмарева Т.И., Безрукавая Е.А., Бурлачко Д.С., Лутынская Л. А., Фоменко И.Ф. Новые рекорды солёности Азовского моря // Актуальные проблемы изучения черноморских экосистем : тез. докл. Всероссийской онлайн-конф., 19-22 октября 2020 г. Севастополь : ФИЦ ИнБЮМ, 2020. С. 104.

15. Куцын Д.Н. Структура нерестового стада и темпы роста азовской тарани (Rutilus rutilus heckeli Nordman, 1840) восточной части Таганрогского залива // Вестник Астраханского государственного технического университета. Серия: Рыбное хозяйство. 2013. № 3. С. 46-54.

16. Правдин И.Ф. Руководство по изучению рыб. М. : Пищевая промышленность, 1966. 267 с.

17. Мейен В. А. Годовой цикл изменений яичников воблы Северного Каспия // Тр. ВНИРО. 1940. Т. XI, ч. II. С. 99-114.

18. Биохимические методы исследования в клинике / под ред. А. А. Покровского. М. : Медицина, 1969. 652 с.

19. ГОСТ 7636-85. Рыба, морские млекопитающие, морские беспозвоночные и продукты их переработки. Методы анализа. М. : Стандартинформ, 2010. С. 38-123.

20. Lowry O., Rosebrough N., Farr A., Randall R. Protein measurment with the folin phenol reagent // J. Biol. Chem. 1951. Vol. 193. PP. 265-270.

21. Corraze G., Kaushik S. Les lipids des poisons marins et d'eau douce / OCL: Oleagineux, corps gras. lipides. 1999. Vol. 6, № 1. PP. 111-115. doi: 10.1051/ocl.2010.0322

22. Sheridan M.A. Lipid dynamics in fish: aspects of absorption, transportation, deposition and mobilization // Comp. Biochem. Physiol. 1988. Vol. 90 B, № 4. PP. 679-690. doi: 10.1051/ocl.2010.0322

23. Jensen B.H., Taylor M.H. Lipid transport in female Fundulus heteroclitus during the reproductive season // Fish Physiol. and Biochem. 2002. Vol. 25. PP. 141-151. doi: 10.1046/j.1365-2621.2002.00604.x

24. Grigorakis K., Alexis M.N., Taylor K.D.A., Hole M. Comparison of wild and cultured gilthead sea bream (Sparus aurata); composition, appearance and seasonal variations //

International Journal of Food Science and Technology. 2002. Vol. 37. PP. 477-484. doi: 10.1046/j. 1365-2621.2002.00604.x

25. Grigorakis K., Alexis M.N., Taylor K.D.A., Hole M. Comparison of wild and cultured gilthead sea bream (Sparus aurata); composition, appearance and seasonal variations // International Journal of Food Science and Technology. 2002. Vol. 37. PP. 477-484. doi: 10.1046/j.1365-2621.2002.00604.x

26. Gandotra R., Sharma M., Kumari R. Studies on the seasonal variations in proximate composition of Labeo boga // International Journal of Scientific Research and Modern Education (IJSRME). 2017. Vol. 2, № 2. PP. 1269-1278. doi: 10.13140/rg.2.2.22736.81926

27. Yeganeh S., Shabanpour B., Hosseini H., Imanpour M. R., Shabani A. Comparison of farmed and wild common carp (Cyprinus carpio): Seasonal variations in chemical composition and fatty acid profile // CJFS. 2012. Vol. 30, №. 6. PP. 503-511. doi: 10.17221/455/2011-CJFS

28. Venkatesan V., Gandhi V., Zacharia P.U. Observations on the utilization of the biochemical constituents during maturation of the butterfish Scatophagus argus (L. 1766) from Palk Bay, south east coast of India // Ind. J. Marine Sci. 2013. Vol. 42, №. 1. PP. 75-81. doi: 10.15406/jamb.2015.02.00041

29. Kurita Y. Energetics of reproduction and spawning migration for Pacific saury (Cololabis saira) // Fish Physiol. and Biochem. 2003. Vol. 28. PP. 271-272. doi: 10.1023/B:FISH.0000030550.48016.37

30. Шатуновский М.И., Белянина Т.Н. Созревание и плодовитость рыб в пределах поколения в связи с их физиологической неоднородностью // Обмен веществ и биохимия рыб. М. : Наука, 1967. С. 38-44.

31. Матишов Г.Г., Балыкин П.А., Гераскин П.П. Результаты ихтиологических исследований на Нижней Волге / под ред. Г.Г. Матишова. Ростов н/Д : Изд-во ЮНЦ РАН, 2015. 72 с.

32. Сергеева С.Г., Корниенко Г.Г. Морфофизиологические особенности созревания азовской тарани Rutilus rutilus L. // Ветеринарная патология. 2016. № 3 (57). С. 71-79.

33. Корниенко Г.Г., Бугаев Л.А., Сергеева С.Г., Ружинская Л.П., Дудкин С.И., Цема Н.И., Войкина А.В. Физиологические аспекты роста, полового цикла и созревания пиленгаса (Liza haematocheilus, Temminck & Shlegel) в Азово-Черноморском бассейне // Ветеринарная патология. 2020. № 1 (71). С. 78-90 doi: 10.25690/VET PET.2020.1.71.011

34. Металлов Г.Ф., Гераскин П.П., Кушнаренко А.И., Аксенов В.П., Ветлугина Т.А., Файзулина Д. Р. Многолетняя динамика липидного и белкового обменов у каспийской воблы // Комплексный подход к проблеме сохранения и восстановления биоресурсов Каспийского бассейна: материалы докл. междунар. практич. конф. Астрахань : Изд-во КаспНИИРХ, 2008. С. 244-247.

35. Гераскин П.П., Файзулина Д.Р., Металлов Г.Ф., Дубовская А.В., Аксенов В.П., Галактионова М.Л. Особенности физиологического состояния воблы (Rutilus rutilus caspicus) Волго-Каспийского бассейна в период нерестовой миграции // Сборник тезисов Международной конференции «Экологические исследования Казахского сектора Каспийского моря и прибрежной зоны». Казахстан, Алмааты : Изд-во ТОО «КАПЭ», 2011. С. 40-45.

36. Файзулина Д. Р., Гераскин П. П. Физиолого-биохимическая характеристика воблы (Rutilus rutilus caspicus) и леща (Abramis brama) в современных экологических условиях Волго-Каспийского бассейна // Вопросы рыболовства. 2011. Т. 12, № 3 (47). С. 535-542.

Страница:


Подобные документы

Работы в архивах красиво оформлены согласно требованиям ВУЗов и содержат рисунки, диаграммы, формулы и т.д.
PPT, PPTX и PDF-файлы представлены только в архивах.
Рекомендуем скачать работу.

© 2000 — 2023, ООО «Олбест» Все права защищены