Разработка методики количественного определения суммы флавоноидов в Artemisia subviscosae herba

Размещено на http://www.allbest.ru/

Байкальский институт природопользования

Бурятский государственный университет имени Доржи Банзарова

Разработка методики количественного определения суммы флавоноидов в artemisia subviscosaeherba

Преловская Саяна Зориктоевна старший преподаватель

Рандалова Туяна Эрдэмовна кандидат фармацевтических наук, доцент

Раднаева Лариса Доржиевна доктор химических наук, профессор, заведующая лабораторией химии природных систем

Россия

Аннотация

В статье представлены результаты исследования по разработке методики количественного определения суммы флавоноидов в надземной части полыни клейковатой методом УФ-спектрофотометрии. Снят полный спектр спиртового извлечения в комплексе с хлоридом алюминия, максимум поглощения при длине волны 400 нм испытуемого раствора соответствует максимуму поглощения спектра лю- теолин-7-гликозида с хлоридом алюминия. Подобраны оптимальные условия экстракции: тип экстрагента -- спирт этиловый 40%-ный, степень измельченности сырья -- 1 мм, соотношение сырье -- экстрагент -- 1:50, температура -- кипящая водяная баня, время экстракции 30 мин, двукратно. В качестве комплексообразователя использовали 2 мл 2%-ного раствора хлорида алюминия, комплекс образуется в течение 45 мин. Содержание суммы флавоноидов в пересчете на лютеолин-7-гликозид в A. subviscosa herba составляет 2,03±0,04%. Относительная ошибка предложенной методики не превышает 5%.

Ключевые слова: Asteraceae, Artemisia L., Artemisia subviscosa, фенольные соединения, флавоноиды

Abstract

DEVELOPMENT OF A METHOD FOR QUANTITATION OF THE TOTAL FLAVONOIDS CONTENT IN ARTEMISIA SUBVISCOSAE HERBA

Sayana Z. Prelovskaya

Senior Lecturer,

Dorzhi Banzarov Buryat State University

Tuyana E. Randalova

Cand. Sci. (Chemistry), A/Prof.,

Dorzhi Banzarov Buryat State University

Larisa D. Radnaeva

Dr. Sci. (Chemistry), Prof.,

Head of Laboratory of Natural Systems Chemistry Baikal Institute of Nature Management

Head of Pharmacy Department,

Dorzhi Banzarov Buryat State University

The article presents a method for quantitation of the total flavonoids content in the aerial part of Artemisia subviscosa by UV-spectrophotometry. We have collected full spectral data on alcoholic extraction in a complex with aluminum chloride; the absorption maximum at a wavelength of 400 nm of the test solution corresponds to the absorption maximum of the spectrum of luteolin-7-glycoside with aluminum chloride. We have determined the optimal extraction conditions: type of extractant -- 40% ethyl alcohol, grinding degree of raw materials -- 1 mm, ratio of raw materials to extractant -- 1:50, temperature -- boiling water bath, extraction time -- 30 min, twice. Aluminum chloride was used as a com- plexing agent (2 ml of a 2% solution); the complex was formed within 45 minutes. The total flavonoids content equivalent to luteolin-7-glycoside in A. subviscosa herba is 2.03 ± 0.04%. The relative error of the proposed method does not exceed 5%.

Keywords: Asteraceae, Artemisia L., Artemisia subviscosa, phenolic compounds, flavonoids

Введение

Природные соединения, содержащиеся в растениях, обладают широким спектром фармакологической активности, малой токсичностью или отсутствием таковой, а мягкость воздействия определяет возможность их длительного применения. Богатым источником фенольных и терпеновых соединений являются растения рода Artemisia L., широко применяемые в народной и традиционной медицине разных стран в качестве противовоспалительных, капилляроукрепляющих, желчегонных, противоопухолевых, и антиоксидантных средств [1]. Artemisia subviscosa Turcz. ex Bess. -- ксерофитный полукустарничек, эндемик, произрастает в степях Баргузинской долины и на северо-западном побережье Байкала. Сложная орография местности, сочетание широтной и высотной поясности, влияние озера Байкал, низкая сельскохозяйственная освоенность горных и предгорных территорий позволяют предположить, что в эндемичных видах растений данного региона можно обнаружить уникальные биологически активные вещества [2]. Известны только данные химического состава эфирных масел этого вида [3-5].

Материалы и методы. Материалом для исследования служили образцы надземной части полыни клейковатой, собранные в 2018 г. в Баргузинском районе Республики Бурятия (окрестности с. Улюн и Ярикта) в фазе цветения. Количественное определение флавоноидов проводили методом УФ- спектрофотометрии на спектрофотометре ПЭ-5400 УФ (Экохим) в кварцевых кюветах с толщиной поглощающего слоя 10 мм в пяти повторностях. Снят полный спектр водно-спиртового извлечения A. subviscosae herba в комплексе с 2%-ным раствором хлорида алюминия, максимум поглощения отмечен при 400 нм, что соответствует максимуму поглощения ГСО лютеолин-7-гликозида с хлоридом алюминия (рис. 1).

Рисунок 1. Спектр поглощения водно-спиртового извлечения A. subviscosae herba и СО лютеолин-7-гликозида

Таким образом, для разработки методики количественного определения суммы флавоноидов в A. subviscosae herba в качестве стандартного образца выбран лютеолин-7-гликозид, также необходимо определить условия выделения: тип экстрагента, размер частиц сырья, температуру нагревания, соотношение сырье -- экстрагент, длительность и количество экстракций, объем раствора хлорида алюминия, необходимого для комплексообразования, концентрация раствора хлорида алюминия, время, необходимое для образования комплекса.

Результаты и обсуждение. В ходе разработки методики экспериментально определены условия, обеспечивающие наибольший выход суммы флавоноидов из надземной части полыни клейковатой: экстрагент -- спирт этиловый 40%-ный, степень измельчения сырья (1 мм), соотношение сырье -- экстрагент (1:50), температура нагрева -- кипящая водяная баня (табл. 1). флавоноид полынь спиртовой экстракция

Таблица 1 Зависимость выхода суммы флавоноидов в пересчете на лютеолин-7-гликозид из A. subviscosae herba от условий экстракции

При определении оптимального времени экстрагирования A. subviscosae herba трехкратно экстрагировали в течение 15-90 мин с шагом 15 мин. После каждой экстракции жидкость отфильтровывали, проводили количественное определение суммы флавоноидов, после чего дважды экстрагировали отжатое сырье в тех же условиях. Двукратная экстракция в течение 30 мин способствует большему выходу суммы флавоноидов из полыни клейковатой травы (табл. 2). Зависимость содержания суммы флавоноидов в пересчете на лютеолин-7-гликозид из A. subviscosae herba от времени экстракции

Таблица 2

Для определения оптимальных параметров комплексообразования использовали раствор хлорида алюминия в различных концентрациях (1-5%) и объемах (1-5 мл), исследовали время, за которое образуется комплекс (15-90 мин). Выявлено, что оптимальной концентрацией хлорида алюминия является 2%-ный раствор объемом 2 мл, комплекс образуется в течение 45-60 мин (табл. 3).

Таблица 3 Зависимость содержания суммы флавоноидов в пересчете
на лютеолин-7-гликозид в A. subviscosae herba от концентрации
и объема хлорида алюминия, времени комплексообразования

Полученные параметры легли в основу методики количественного определения суммы флавоноидов полыни клейковатой травы. Метрологические характеристики методики количественного определения представлены в таблице 4.

Таблица 4 Метрологические характеристики результатов количественного определения суммы флавоноидов в пересчете на лютеолин-7-гликозид

Установлено, что содержание суммы флавоноидов в пересчете на лютеолин- 7-гликозид в надземной части полыни клейковатой составляет 2,03±0,04%. Относительная ошибка методики не превышает 5%.

Выводы. Таким образом, в результате проведенных исследований нами разработана методика количественного определения суммы флавоноидов в пересчете на лютеолин-7-гликозид в полыни клейковатой траве.

Литература

1. Асеева Т А., Блинова К. Ф., Яковлев Г. П. Лекарственные растения тибетской медицины. Новосибирск: Наука, 1985. 160 с. Текст: непосредственный.

2. Анатомо-диагностические признаки и числовые показатели полыни клейковатой травы / С. З. Цыбикова, С. В. Жигжитжапова, Л. Д. Раднаева, И. Р. Балданова // Здоровье и образование в XXI веке. 2018. № 2. С. 107-111. Текст: непосредственный.

3. Бодоев Н. В., Базарова С. В., Намзалов Б. Б. Химический состав эфирного масла полыни клейковатой Artemisia subviscosa Turcz // Химия растительного сырья. 2002. № 1. С. 81-84. Текст: непосредственный.

4. Жигжитжапова С. В., Рандалова Т. Э., Раднаева Л. Д. Эфирное масло полыни клейковатой Artemisia subviscosa (Turcz. ex Bess.) Krasnob // Бюллетень ВСНЦ СО РАН. 2015. № 2 (102). С. 133-135. Текст: непосредственный.

5. Компонентный состав эфирного масла Artemisia subviscosa Turcz. ex Bess. / С. З. Цыбикова, С. В. Жигжитжапова, Т. Э. Рандалова, Л. Д. Раднаева // Химия растительного сырья. 2019. № 4. С. 263-268. Текст: непосредственный.

Размещено на Allbest.ru