Изучение острой токсичности и физиологической активности соединения Mn(HCOO)2•2NH(CONH2)2•H2O

Размещено на http://www.allbest.ru/

Шайкиева Н.Т., Ахматова Ж.Т., Арзыбаев М.А., Исаев М.А.

ИЗУЧЕНИЕ ОСТРОЙ ТОКСИЧНОСТИ И ФИЗИОЛОГИЧЕСКОЙ АКТИВНОСТИ СОЕДИНЕНИЯ MN(HCOO)₂•2NH(CONH₂)₂·H₂O

Аннотация: в статье приведены результаты исследования биологической активности комплексного соединения Mn(HCOO)₂•2NH(CONH₂)₂•H₂O. Определены параметры острой токсичности и изучено влияние на организм животных.

Ключевые слова: токсичность, комплексное соединение, максимальная доза, белые мыши.

Abstract: this article presents the results of the study of the biological activity of the complex compound Mn(HCOO)₂ 2NH(CONH₂)₂ H₂O. The parameters of acute toxicity were definedand the effect on the animal organism was studied.

Keywords: toxicity, complex compound, the maximum dose, white mice.

В настоящее время активно развивается направление по получению координационных металлоорганических соединений, обладающих биологическими активными свойствами.

Известно, что марганец, будучи микроэлементам необходим для правильного развития клеток, постоянно присутствующий в живых организмах и необходимый для их полноценной жизнедеятельности [1]. Животным и растениям марганец необходим для нормального роста и размножения. Он активирует ряд ферментов, участвует в процессах дыхания, фотосинтеза, влияет на проветривание и минеральный обмен. В организме взрослого здорового человека содержится примерно 10-15 мг марганца [2].

С целью синтеза новых комплексов, включающих микроэлементы и биурет, нами изучена система Mn(HCOO)₂ - NH(CONH₂)₂ - H₂O. Установлено образование нового комплексного соединения состава Mn(HCOO)₂•2NH(CONH₂)₂·H₂O, которое индивидуальность подтверждена разными методами физикохимического анализа [3].

Данная работа посвящена изучению безвредности и биологической активности соединения Mn(HCOO)₂•2NH(CONH₂)₂·H₂O.

Определение острой токсичности гидрата дибиурет формиата марганца проводили по общепринятой методике [4-6].

Для определения показателей острой токсичности исследуемого вещества Mn(HCOO)₂ 2NH(CONH₂)₂ H₂O в качестве тест-объекта использовали клинически здоровых белых мышей, 21 самку и 21 самца с живой массой 18 - 20 г, полученных из вивария Кыргызского научно - исследовательского института ветеринарии и прошедших карантин в течение 14 суток.

Препарат вводили мышам при помощи шприца с металлическим зондом в виде 10 %-ного водного раствора через рот (peros) в желудок натощак, в дозах 600, 800, 1000, 1200, 1400 и 1600 мг/кг живой массы. Группа мышей из 6 голов служила контролем и получила соответствующий объем физраствора NaC?.

В расчетах использовали, метод пробит - анализа по Литчфилду - Вилкоксону в модификации З. Рота с использованием обычной миллиметровой бумаги [7-8].

В течение двух недель после однократного введения препарата производилось наблюдение за экспериментальными животными. Во время наблюдения учитывалось общее состояние, особенности поведения, подвижность, аппетит, координация движений и характер судорог, время возникновения интоксикации, клиника химического токсикоза и гибель мышей. Чтобы выявить патологию внутренних органов невыживших мышей их подвергали вскрытию. Все полученные результаты были подвегрнуты статистической обработке [9-10].

При пероральном введении гидрата дибиурета формиата марганца через 25 - 35 минут у белых мышей проявлялась картина клинического отравления и острой токсичности. При наблюдении за исследуемыми животными обнаружилось беспокойство мышей, частая дефекация и мочеиспускание, метеоризм, количество дыхательных движений в несколько раз усилилось, повысилась тактильная чувствительность кожи.

Белые мыши забивались в угол, также наблюдалось ограничение подвижности у некоторых мышей, которое сопровождалось отказом принимать воду и корм. Значительного температурного изменения от исследуемого вещества не наблюдалась. Через некоторое время животные начинали потеть, наблюдалось обильное слюноотделение и фибриллярное сокращение скелетных мышц. Отравленные животные ложились на бок, запрокинув голову. В течение первых дней отравления при сильных клоникотонических судорогах наступает смерть исследуемых мышей. Не подвергшиеся отравлению некоторые мыши с легкой степенью токсикоза не погибают и начинают, есть корм и пить воду через день.

Данные исследований по острой токсичности представлены в табл. 1. Параметры острой токсичности гидрата дибиурета формиата марганца для белых мышей характеризовались следующими показателями: максимальная переносимая доза (ЛД₀) - 800 мг/кг; среднелетальная доза (ЛД₅₀) - 1130 (926,2 ч 1378,6) мг/кг; абсолютно смертельная доза (ЛД₁₀₀) - 1600 мг/кг живой массы.

С целью изучения токсического действия комплексного соединения гидрата дибиурет формиата марганца в конце опыта сделали патологоанатомическое вскрытие трупов павших животных. При визуальном осмотре внутренних органов отмечались следующие изменения: катарально - геморрагическое воспаление слизистой оболочки желудка и тонкого отдела кишечника, печень увеличена, под ее оболочкой множественные точечные кровоизлияния, почки темно - коричневого цвета и при разрезе сочится пенистая кровь, на оболочке кровоизлияния.

Результаты опытов по изучению параметров острой токсичности гидрата дибиурет формиата марганца показало, что его среднелетальная доза (ЛТД₅₀) для белых мышей равна 1130 (926,2 ч 1378,6) мг/кг. Это подтверждает, что по классификации опасности химиотерапевтических препаратов по степени воздействия на организм (ГОСТ 12.1.007 - 76) новое синтезированное вещество гидрат дибиурет формиат марганца относится к III классу умеренной опасности для животных, что является высоким показателем безопасности веществ.

Таблица 1. Параметры острой токсичности Mn(HCOO)₂ 2NH(CONH₂)₂ H₂O для белых мышей при пероральном введении

С целью исследования физиологической активности и влияния на организм животных нового комплексного соединения Mn(HCOO)₂ 2NH(CONH₂)₂ H₂O опыты проводили на 30 головах молодняка белых крыс обоего пола с живой массой 32 - 34г.

Для этого, подопытных крыс по принципу аналогов разбили на 3 группы по 10 голов. Первую группу животных кормили измельченной зерносмесью с добавлением гидрата дибиурет формиата марганца из расчета 8 мг вещества на килограмм сухого корма. Вторая группа получала зерносмесь с добавкой пиридоксина в такой же дозе. Третья группа - контроль получала только зерносмесь.

Наблюдение за подопытными животными вели в течение 30 дней. На 31 день провели взвешивание крысят и забор крови для гематоголических исследований.

Результаты эксперимента подвергли статистической обработке по методу Фишера - Стьюдента с использованием критерия (t) Ермолова [11-12].

При особо тщательном наблюдении за подопытными и контрольными крысами, в течение месяца не обнаружено каких - либо аномалий от нормы в общем состоянии. У крыс, получивших исследуемый препарат, улучшился аппетит, и увеличилась активность.

Результаты опытов показывают, что за опытный период привес животных в первой группе составил 65,6 ± 4,1 г, во второй группе 61,1 ± 3,2 г, в третьей группе 59,2 ± 4,3 г.

Как видно из этих данных: добавление гидрата дибиурет формиата марганца в пищу повышал прирост крысят на 10,81 % больше, чем в контроле, а пиридоксин - всего на 3,20 %. Различие статистически достоверно (Р ? 0,05). Также отмечено заметное улучшение гематологических показателей крови у крысят под влиянием изучаемого вещества (табл. 2.). Однако, в этих опытах разница в показателях была статистически недостоверна (Р < 0,05).

Таблица 2. Влияние гидратадибиуретаформиата марганца на гематологические показатели у белых крыс

Результаты полученных данных показали, что гидрат дибиурет формиата марганца стимулирует рост и развитие молодняка белых крыс, увеличивает их привес и улучшает гематологические показатели крови.

В результате исследования можно сделать вывод, что гидрат дибиурет формиат марганца может быть использован для стимуляции роста и развития сельскохозяйственных животных.

Литература

1. Войнар А.И. Биологическая роль микроэлементов в организме животных и человека. М.: Высш. шк., 1960. 554 с.

2. Пейве Я.В. Металлы-микроэлементы и их роль в ферментативных процессах // Агрохимия. 1975. № 8. С. 148-156.

3. Шайкиева Н.Т., Ахматова Ж.Т., Кадыркулова С.О. Исследование фазовых в тройной водно-солевой системе Mn(HCOO)₂?NH(CONH₂)₂?H₂O ПРИ 25^ОС // Известия вузов. 2012. № 1. С. 69-72.

4. Першин Г.Н. Методы экспериментальной химиотерапии М.: Медицина, 1973. 541 с.

5. Litchfield J.T., Wilcoxon F. J. A simplified method of evaluating dose - effect experiments // Pharm.Exp.Ther. 1949. Vol. 96. P. 99-113.

6. Мельников Н. Б. Экспериментальные основы фармакологии и токсикологии. М.: Медицина, 1974. С. 232-235.

7. Кудрин А.Н., Пономарев Г.Т. Применение математики в экспериментальной и клинической медицине. М.: Мир, 1967. 356 с.

8. Roth Z. Physiologia Bogtmoslovenica. Praga, 1960. 128 р.

9. Berry W.T., Riggs J.K., Kunkel H. O. The Lack of toxicity of biuret to animals // Jorn.Animal Science. 1960. Vol. 15, № 2. Р. 123-127.

10. Юнкеров В. И., Григорьев С. Г. Математико-статистическая обработка данных медицинских исследований. СПб.: ВМедА. 2002. 266 с.

11. Новиков Д. А., Новочадов В. В. Статистические методы в медико-биологическом эксперименте. Волгоград: Изд-во ВолГМУ, 2005. 84 с.

12. Шевченко И.Т., Богатов О.П., Хрипкин Ф.П. Элементы математической статистики в медицине. Киев: Здоровье, 1970. 108 с.

Размещено на Allbest.ru