Биохимические особенности ингибирования меланогенеза шерсти у овец

Табл. 3. Характер ингибирования меланогенеза в постнатальном онтогенезе ягнят таджикской породы

Окраска ягнят	Номер биопсии	Количество меланоцитов на 1 фолликул	Количество фолликул без мелано-цитов, %	Содержание меланосом, Баллов
				в мелано-цитах	в керати-ноцитах
		ость	пух	ость	пух	ость	пух	ость	пух
темно- бурая и бурая	1	6,4	1,8	10,2	57,3	3,5	2,0	2,1	1,6
	2	5,7	1,4	19,8	69,7	3,3	2,4	2,1	1,2
	3	4,1	1,4	24,5	69,8	3,1	2,0	1,1	0,7
	4	4,4	1,0	39,3	93,2	3,2	2,1	1,1	0,0
темно- рыжая и рыжая	5	6,0	1,7	14,9	62,1	3,3	2,9	1,9	1,3
	6	3,7	2,7	53,6	49,4	3,6	2,5	1,2	1,5
	7	4,0	1,1	69,2	71,5	2,9	1,6	1,6	1,4
	8	1,6	1,2	84,3	95,2	2,9	2,1	0,5	0,0
светло- рыжая и палевая	9	3,1	1,5	51,2	75,6	2,5	2,1	0,5	0,6
	10	1,6	1,0	82,5	92,3	2,3	2,2	0,3	0,3
	11	3,3	1,2	85,4	91,0	1,9	2,1	0,2	0,0
	12	2,5	0,0	92,3	100,0	2,8	2,0	0,0	0,0

Действительно, данные, представленные в таблице 4, позволяют выявить важную закономерность, которая не могла быть установлена без проведения вычислительного эксперимента. Особи с более интенсивным меланогенезом отличаются двумя принципиальными особенностями: они обладают более развитым комплексом биохимических параметров, необходимых для осуществления пигментогенеза и одновременно наиболее эффективно реализуют потенциальные возможности этих параметров.

Так, уравнение множественной регрессии, соответствующее группе черных «рецессивных» ягнят так «преобразовало» входные параметры ягнят других генотипов, что концентрация гранул в волосах повысилась в 1,5-2 раза, при этом рыжая окраска превратилась в бурую, темно-рыжая в темно-бурую. В то же время уравнение множественной регрессии рыжих ягнят неэффективно «преобразовывает» входные параметры и превращает все окраски, в том числе черную, в рыжую.

Табл. 4. Эффективность процесса меланогенеза при различных комбинациях входных параметров и уравнений множественной регрессии

Входные параметры	Тип фолликула	Уравнение регрессии
		черно-рыжие	темно-бурые	бурые	Темно рыжие	рыжие	все особи
черно-рыжая	1	347	157	140	189	70	230
	2	569	255	271	415	138	178
	3	756	427	408	628	177	670
темно- бурая	1	167	120	78	130	69	131
	2	352	334	190	127	178	143
	3	487	400	299	444	170	430
бурая	1	200	147	70	120	81	141
	2	327	255	148	200	104	228
	3	351	330	168	238	122	244
темно- рыжая	1	191	138	76	120	77	130
	2	218	127	144	168	100	200
	3	236	350	203	241	140	271
рижая	1	150	21	83	130	64	90
	2	163	78	100	141	100	110
	3	121	81	104	118	119	80
светло- палевая	1	203	121	89	128	70	140
	2	337	210	165	238	109	259
	3	407	300	220	318	124	317

Примечания: 1 - пух, 2 - переходный волос, 3 - ость.

Анализ полученных нами результатов показывает, что наибольшее влияние на результат процесса меланогенеза оказывают такие параметры, как содержание гранулы пигмента меланина в цитоплазме меланоцитов, число меланоцитов в области сосочка и количество митозов пигментных клеток. Глубокое всестороннее изучение механизма меланогенеза обнаруживает существование некоторых своеобразных особенностей у отдельных особей этой породы овец. Показано, что гены-модификаторы и другие гены, определяющие повешение однородности, густоты, интенсивности и равномерности роста шерсти, ингибируют меланогенез у таджикской породы овец. Можно с уверенностью сказать, что обстоятельный и детальный анализ этих вопросов даст возможность выявить влияние внешних и внутренних факторов на шерстную продуктивность этой породы овец. А также можно дать интерпретацию работы других генов, контролирующих окраску шерстного покрова у овец этой породы.

Анализ результатов этого графика убедительно свидетельствует о том, что некоторые различия в относительном содержании отдельных фракций пуха, переходного волоса и ости в основном является случайными. Можно лишь отметить тенденцию к уточнению пуха и некоторому снижению содержания ости в шерсти палевых ягнят. Из рисунка видно, что лишь единичные пуховые волокна пигментированы. Количество переходных и остевых волос, сохранивших пигмент к пятимесячному возрасту, явно намного больше среди черных и бурых образцов по сравнению со рыжими и палевыми. В образцах всех окрасок закономерно возрастает относительное содержание пигментированных волос по мере увеличения их диаметра. Например, значительная часть бурых, темно-рыжих, рыжих и светло-рыжих волос самого большего диаметра (65-100 мкм) остаётся окрашенной при первой стрижке. Следовательно, гипотеза о том, что оттенки буро-рыжей окраски шерсти новорожденных ягнят таджикской породы определяются главным образом генами, контролирующими меланогенез, верна.

Изучение механизма заполнения меланосом меланоцитами и включения их в волосяные фолликулы ягнят различных пород овец

Проведенное нами исследование срезов волос под световым микроскопом показало, что активный процесс включения меланоцитов в волосы не является уникальным свойством для таджикской породы, а вполне закономерен для волосяных фолликулов ягнят обеих изученных пород и генотипов.

Причем ярко выражена связь между количеством мигрирующих в волосах меланоцитов и интенсивности пигментогенеза у черных ягнят обоих генетических вариантов, число пигментных клеток в волосах на порядок выше, чем у бурых или тем более рыжих и коричневых ягнят. Следует обратить внимание на то, что в рис. 9 представлены данные о количестве меланоцитов, включающихся в волос длиной всего лишь 1 мм - на такую величину вырастают остевые волосы ягнят за 1-3 дня (в зависимости от природы). Очевидно, что в фолликулах всех генотипов должен существовать механизм, компенсирующий потерею пигментных клеток. В противном случае весь запас меланоцитов, локализованных на сосочке, очень быстро бы истощился и снабжение волоса пигментом прекратилась бы. Для правильной интерпретации данного явления важно учитывать, что на гистологических срезах волос или тем более на просветленных специальной обработкой (целых) волосах включенные пигментные клетки выглядят, как скопление гранул. Но на полутонких срезах хорошо видна структура меланоцитов и их несложно идентифицировать - это крупные клетки, существенно большие по сравнению с кератиноцитами.

Рис. 10. Количество меланоцитов в волосе длиной 1мм ягнят различных окрасок.

П р и м е ч а н и е: количество меланоцитов в ости (ряд 1), количество меланоцитов в пухе и переходном волосе (ряд 2)

Меланосомы обычно локализуются на периферии и в отростках, причем их концентрация в несколько раз выше, чем в окружающих кератиноцитах часто можно наблюдать ядрышки, и даже дендриты-атрибуты, свидетельствующие о том что данная структура является пигментной клеткой, а не конгломератом гранул непонятной природы, формирование которого в фолликуле маловероятно также в цитофизиологическом и физико-механическом аспектах.

Результаты наших экспериментов позволяют существенно продвинуться в направлении понимания роли митотического деления меланоцитов в процессе меланогенеза.

Установлено, что у изученных ягнят значительная часть меланина приносится в волосы мигрирующими меланоцитами. Чрезвычайно высокая частота митозов мы наблюдали у доминантных черных гиссарских и таджикских ягнят с наиболее интенсивным меланогенезом.

Надо отметит, что целью данной главы была установление типа и механизма миграции меланоцитов у ягнят таджикской и гиссарской пород различных генотипов окраски. Нам удалось с помощью метода ВЖХ и ЭПР спектроскопии достаточно точно установить содержание в волосах эумеланина и феомеланина, что не позволял сделать ранее ни один из существующих методов.

Изучение ингибирующего влияния на меланогенез генов, определяющих высокую шерстную продуктивность овец

Как было сказано выше, характерные свойства овец таджикской породы заключаются в том, что, по достижении ими 8-9 месячный возраст в волосяных фолликулах (около 96%) приостанавливается синтез пигмента меланина.

Несомненно, что весьма перспективным является глубокое изучение биохимических, молекулярных и морфофизиологических основ жизнедеятельности меланоцитов с кератиноцитами первичных и вторичных фолликул овец полугрубошерстных и грубошерстных пород в разные фазы роста волоса. Очевидно, что активность меланоцитов в волосяных фолликулах различных животных частично зависит от влияния различных внешних и внутренних факторов.

В вычислительных экспериментах имеется возможность более четко продемонстрировать эффекты разнообразных изменений в типе шерстного покрова, моделировать влияние на меланогенез генов-модификаторов, обусловливающих совокупность характеристик шерстного покрова овец различных пород. меланосома гибридизация ингибирование баран

Данные натурных экспериментов свидетельствуют о том, что черные “рецессивные” и доминантные особи Аа/Аа и ЕD/ЕD при любой структуре шерстного покрова остаются черными, поскольку меланогенез у них весьма интенсивен и гены модификаторы не оказывают заметного влияния. Прежде всего, следует определить, как изменяется пигментогенез в волосяных фолликулах в случае уменьшения диаметра пуха и огрубления ости. Здесь точкой отечета могут служить пуховые и остевые волосы у наиболее детально изученной нами таджикской породы.

В таблице 10 представлены результаты вычислительного эксперимента, в котором исследуется влияние изменения объема луковиц на пигментогенезе.

Изменение объема осуществляется в двух направлениях: в сторону уменьшения объема пуховых фолликулов таджикских ягнят или увеличения остевых, в обоих случаях в 2 и 4 раза (это изменение вполне реально, например пуховые и остевые фолликулы различаются по объему в 10 и более раз).

Рис. 11. Моделирование меланогенеза и составление уравнения регрессии в волосяных фолликулах таджикской и гиссарской породы овец. Примечание: пух (ряд 1), переходный волос (ряд 2), ость (ряд 3), мертвый волос (ряд 4).

Данные этого эксперимента представляют большой интерес. Свойства довольно неожиданного результата заключаются в том, что не произошло заметного уменьшения содержания гранул пигмента в волосах при существенном уменьшении объема луковиц фолликулов так как уменьшение диаметра пуховых волос не приводит к изменению их окраски.

Табл. 5. Моделирование ингибирования меланогенеза в постнатальном онтогенезе ягнят таджикской породы

Густота шерсти, волос/см2	Скорость роста, см/месяц	Показатели фракций волос	Уравнение регрессии (окраски ягнят)
средние показатели при рождении
1800	1,25	1 2 3 4	120 137 400 темно-бурая	71 151 170 бурая	121 180 230 темно- рыжая	61 100 121 рыжая
показатели ягнят в возрасте 5 мес, худших по шерстным качествам
1800	2,00	1 2 3 4	45 130 155 рыжая	27 58 65 с-рыж	45 71 95 рыжая	25 40 45 полевая
показатели ягнят в возрасте 5 мес, средних по шерстным качествам
2500	2,50	1 2 3 4	16 45 60 светло рыжая	10 25 27 белая	16 25 34 полевая	10 15 17 белая
показатели ягнят, выдающихся по шерстным качествам
3500	3,50	1 2 3 4	4 13 12 белая	3 6 7 белая	6 9 10 белая	3 5 6 белая

Примечания: 1-пух, 2 - переходный волос, 3 -ость; 4-окраска животных.

Из таблицы 5 видно, что моделирование выявило достаточно очевидную биологическую закономерность, то есть уменьшение объема луковицы ниже определенного уровня (того, при котором сосочек уже не имеет капилляров), и снабжение пигментных клеток осуществляется через корневые влагалища фолликула не должно приводить к снижению эффективности меланогенеза, так как для этого действительно нет морфо-физиологических причин.

Другой результат эксперимента мог прогнозироваться априори,но он тем не менее весьма важен: при возрастании объема луковицы в 2-4- раза в 1,5 - 3 раза увеличивается удельная концентрация меланосом в остевых волосах. Это оказывает непосредственное влияние на окраску, превращая темно-бурые и темно-рыжие волосы в черные, бурые в темно-бурые и т.д. Эти данные объясняют результаты наблюдений над окраской гиссарских овец у которых при общем буро-рыжем тоне часто встречаются волосы черного и темно-бурого цвета. Очевидно, у особей одного генотипа окраски, цвет волос является функцией их диаметра. В этом свете становится ясной довольно однородная по всему туловищу окраска животных с полугрубой шерстью и весьма неординарная - у грубошерстных, особенно диких овец - это является, бесспорно, отражением гораздо большего разнообразия в диаметре остевых волос.

Как видно из рис. 10 наиболее грубошерстные гиссарские овцы при том же генотипе окраски будут заметно темнее таджикских полугрубошерстных овец, ость которых тоньше-то есть подтверждается высказываемая идея о том, что гены, обусловливающие характеристики шерстного покрова, являются модификаторами, влияющими на характер проявления генов, контролирующих меланогенеза.

Причиной ингибирования пигментогенеза является ярко выраженное развитие шерстных качеств в постнатальном онтогенезе ягнят. Оно заключается в возрастании густоты и скорости роста шерсти.

Из рис. 10 следует, что у лучших по шерстным характеристикам ягнят происходит абсолютное ингибирование пигментогенеза. Среди большинства ягнят, характеризующихся средним для породы развитием шерстного покрова, если они темно-бурые или темно-рыжие, полного подавления меланогенеза не достигается, худшие же по шерстным качеством ягнята остаются пигментированными в различные оттенки рыжей и палевой окраски.

Это надо понимать следующим образом: после первой стрижки (в возрасте 4,5- месяцев) в шерстном покрове ягнят сохраняется некоторое количество пигментированных остевых и переходных волос, которые и могут создать эффект чало-рыжей окраски, в случные светло-рыжей и палевой окрасок пигментация практически не заметна.

Изучение влияния генов-модификаторов на меланогенез у ягнят таджикской породы

Овцы полугрубошерстных пород (в частности таджикская порода) могут рождаться как пигментированными, так и белыми. Очевидно, ингибирующий эффект генов-модификаторов в постнатальном онтогенезе определяет постепенную в течение нескольких недель или даже месяцев депигментацию шерстного покрова.

Ягнята таджикской породы являются великолепным объектом для изучения влияния генов-модификаторов на окраску шерстного покрова овец. Овцы таджикской породы наглядно иллюстрируют характер меланогенеза у новорожденных ягнят. Эти ягнята имеют широчайший спектр буро-рыжих окрасок.

Важнейшим здесь является то, что у ягнят таджикской породы можно наблюдать и изучать переходный этап, когда начинается активный рост пуховых и переходных волос, обусловливающий включение механизимов, угнетающих пигментацию. Этот критический момент может быть исследован на самых разных уровнях: от визуальной оценки волос до цитологического, биохимического и молекулярного изучения процессов, происходящих в клетках меланомы, в меланоцитах, кератиноцитах и других клетках волосяного фолликула.

Исследование образцов шерсти таджикских ягнят показало существование тонких постепенных переходов, стирающих грани между черной, темно-бурой, бурой, светло-бурой, темно-рыжей, рыжей, светло-рыжей и палевой окрасками.

В литературе имеются данные, объясняющие характер действия генов, имеющих плейотропный эффект их влияния на различных этапах онтогенеза, а также форма взаимодействия генов- модификаторов с генами, контролирующими течение меланогенеза (Коновалов В.С. 2004; Конюхов Б.В. 2001; Корочкин Л.И. 2003; Tamate Hidetochi В et. al., 2004). Имеются также данные о том, что гены, контролирующие пигментацию шерстного покрова у полугрубошерстных пород овец, могут с различной эффективностью ингибировать меланогенез (Алиев Г.А. и др., 1987). В связи с этим была поставлена цель установить, только ли аллели генов АА и ЕЕ определяют окраску при рождении у ягнят таджикской породы, или гены-модификаторы также вносят свой вклад в формирование оттенков уже в пренатальном онтогенезе, когда формируются остевые и переходные волосы (пух, тонкий переходный волос), которые начинают интенсивно расти только после рождения ягнят и не вносят вклад в окраску при рождении. Для решение этого вопроса была детально проанализирована структура шерстного покрова 55 ягнят различных окрасок. Изучались образцы шерсти, полученные с бочков животных перед первой стрижкой. Для анализа шерсти была использована общепринятая методика. Препараты с волосами изучались на микроскопах ВН-2 и MPI-5.

При изучении образцов шерсти установлено также, что четкая закономерность, характер депигментации тесно связаны с окраской волос при рождении - чем светлее волосы, тем раньше и полнее осуществляется подавление меланогенеза. Ингибирующая эффективность генов-модификаторов у различных ягнят различна, что вызвано заметными индивидуальными колебаниями в характере шерстного покрова.

Рис. 12. Относительное содержание пигментированных волос во фракциях пуховых, переходных и остевых волос у 5-месячных ягнят таджикской породы

П р и м е ч а н и е: Пух, диаметр волос 10,0 - 29,9 мкм (ряд. 1), переходный волос, диаметр волос 30,0 - 44,9 мкм (ряд. 2), ость, диаметр волос 45,0 - 100 мкм (ряд 3)

Анализ проводили в депигментированной зоне образцов, то есть исследовали проксимальный участок косицы. Из полученных результатов видно, что к 5- месячному возрасту почти все пуховые и большая часть переходных волос депигментированы. Количество переходных и остевых волос, сохранивших пигмент, явно намного больше в бурых образцах по сравнению с рыжими и светло-рыжими, палевые образцы совершенно не содержат цветных волокон.

В образцах шерсти животных всех окрасок, (кроме палевой) закономерно, по мере увеличения их диаметра, возрастает относительное содержание пигментированных волос.

Таких толстых остевых волос в шерстном покрове таджикских овец немного (0,5- 4,0%), поэтому они мало заметны, а депигментация в первые недели и месяцы постнатального онтогенеза выражена четко. Закономерное возрастание числа пигментированных волос по мере увеличения интенсивности окраски особенно заметна при рассмотрении второго и третьего столбца рисунка 11, где показано содержание окрашенных волос во всех фракциях шерсти. Если у палевых ягнят пигментированных волос нет вообще, у светло-рыжих их лишь 2, 91%, то у бурых содержится уже 7,27% окрашенных волос. Для сравнения приведены результаты анализа образцов шерсти черных ягнят, у которых 96,7% волос пигментированы, то есть меланогенеза очень интенсивен.

Ингибирующее влияние на меланогенеза генов, определяющих высокую шерстную продуктивность овец, до настоящего времени никем не исследовано. В литературе лишь имеются косвенные данные об изучении данного вопроса. В данной главе мы впервые частично излагаем данные о влиянии хозяйственно-производственных факторов на процесс пигментации волос.

Исследование меланогенеза у таджикской полугрубошерстной породы овец, а также изучение литературы привело нас к твердому убеждению, что гены-модификаторы оказывают на меланогенез весьма существенное влияние. Особенно велика их модифицирующая роль при различных комбинациях аллелей генов АА и ЕЕ, определяющих у грубошерстных овец оттенки рыжей и бурой окрасок. Овцы таджикской породы унаследовали этот ген от овец гиссарской породы. Согласно гипотезе академика Алиева Г.А., аллели гена АА угнетают меланогенез с различной эффективностью, а аллели гена ЕЕ, наоборот, способствуют нормальному его течению, блокируя действие аллелей гена АА (Алиев Г.А. и др., 1989, 1995). Результат их «борьбы» обуславливает абсолютное и относительное содержание эумеланиновых и феомеланиновых гранул в волосе, то есть его окраску.

Анализ полученных данных показывает, что один из главных путей, видимо, является резкое повышение концентрации аминокислоты, цистеина в составе корма, необходимой для синтеза пигмента кератина шерсти, и содержание сульфгидрильной группы, связывающей медь, необходимую для активации основного фермента меланогенеза тирозиназы. Возрастание конкуренции между активно функционирующими и размножающимися кератиноцитами и локализованными в пространствах между ними меланоцитами также оказывает угнетающее действие на функционирование меланоцитов.

На основе опытов Алиева Г.А. и Косимова Р.Б., проведенных на культуре клеток меланоцитов, полученных у ягнят таджикской породы, доказано, что подавление митозов в волосяном фолликуле обуславливает переход меланоцитов от синтеза феомеланина к синтезу эумеланина, то есть повышает их активность (Алиев Г.А. и др., 1989).

Очевидно, что даже при сохранении нормальной активности меланоцитов концентрация гранул в клетках волос должна снижаться только за счет ускорения их роста, так как меланоциты, работающие с постоянной интенсивностью, просто не будут успевать снабжать кератиноциты гранулами в том же количестве.

Анализ полученных результатов показывает, что поступление в меланоциты предшественников меланина, необходимых для нормального течения метоболических процессов, затруднено в мелких фолликулах. В пуховые и переходные волосы, у которых сосочки слабо развиты, затруднено поступление гранул меланина. Так как сосочек играет роль «ворот» для поступления биохимического сырья, (аминокислоты, соль тяжелых металлов и др.) лишь в крупных фолликулах с развитой системой сосудов поступление этих веществ облегчено. Мелкие молекулы аминокислоты и молекулы тяжелых металлов поступают в клетки через влагалища. Очевидно, при этом пигментные клетки, локализованные на поверхности сосочка, оказываются в менее благоприятных условиях. Правильность такой трактовки подтверждается тем, что у гиссарской породы овец пух всегда намного светлее ости, лишь у черных овец генотипа Ed(E) или генотипа аа пух тоже растет черным.

В натурном эксперименте, проведенном нами на ягнятах таджикской породы, различающихся по густоте шерстного покрова, было выявлено четко выраженное ингибирующее влияние на меланогенез структуры и скорости роста шерсти, а также на возрастание густоты шерстного покрова. Анализ полученных данных свидетельствует в том, что увеличение скорости роста волос имеет тот же эффект, угнетающий пигментогенез.

Биохимические основы изучения меланогенеза в волосяном покрове овец

В литературе отсутствует более или менее удовлетворительная информация о том, в чем на биохимическом уровне заключается принципиальные различия в комплексе процессов меланогенеза, приводящие к столь существенным различиям в количестве и качестве пигментных гранул в волосяном покрове овец черной, бурой, коричневой, рыжей и палевой окрасок. Очевидно, что основную роль здесь играют пигментные клетки, взаимодействующие с кератиноцитами, формирующими волос.

Джимбов К с соавторами (Jimbow К., et al., 2006) утверждают, что дифференцированные меланоциты могут митотических делиться. Они подчеркивают, что митотическое деление меланоцититов было найдено в коже человека и лабораторных крыс, а также в развивающихся фолликулах цыпленка и мыши. Авторы обращают внимание на то, что присутствие в клетках таких функций свидетельствует о дифференцировке этих клеток. Меланосомы и тирозиназа не препятствуют делению меланоцитов in vivo при нормальных физиологических условиях без внешних стимулов. Быстрое увеличение меланиновой пигментации связано с размножением меланоцитов так же, как с интенсификацией меланогенеза в каждом меланоците. Авторы подчеркивают, что пока не известно, какие биохимические механизмы или процессы связывают митозы с меланогенезом.

Светооптический метод изучения меланогенеза в постнатальном онтогенезе ягнят различных окрасок дает возможность составить посильную биохимическую картину процессов, происходящих в волосяных фолликулах в переходный момент, когда под влиянием генов-модификаторов подавляется пигментация. Меланоциты покидают сосочек и включаются в волос у ягнят всех окрасок, они сохраняются лишь в редких наиболее крупных фолликулах. Установлена совершенно четкая закономерность: чем светлее окраска ягненка при рождении, тем раньше меланоциты освобождают фолликул.

Проведенное исследование срезов волос под световым микроскопом показало, что активный процесс включения меланоцитов в волосы не является уникальным свойством таджикской породы, а вполне закономерен для волосяных фолликулов ягнят гиссарской породы. Причем ярко выражена связь между количеством мигрирующих в волосе меланоцитов и интенсивностью пигментогенеза у черных ягнят обеих пород.

Основным фактором, обуславливающим постепенное ослабление и затем полное прекращение поступления пигмента в волосы, является закономерный, четко наблюдаемый под световым микроскопом уход меланоцитов из зоны обычной их локализации на вершине сосочка фолликула и включение их в строящийся волос.



Рис. 13. Митотическая активность меланоцитов и клеток матрикса в фолликулах ягнят различных генотипов

Из рисунки 12 видно, что высокая митотическая активность меланоцитов локализованных на сосочке волосяного фолликула, закономерна для ягнят большинства изученных генотипов в фолликулах всех категорий. Чрезвычайно высока частота митозов у «доминантных» черных гиссарских ягнят с наиболее интенсивным меланогенезом, селекционируемых по выраженности черной окраски. У «рецессивных» черных ягнят таджикской породы методическая активность пигментных клеток также весьма высока, по мере ослабления интенсивности процесса меланогенеза закономерно понижается митотическая активность пигментных клеток, что довольно четко проявляется при сравнении черных, темно-бурых, бурых и темно-рыжих ягнят. У светло-рыжих и палевых ягнят таджикской породы митозов, меланоцитов не выявлено. Биохимические характерные ферменты из числа пигментов клеток в волосах на порядок выше у черных, чем у бурых или тем более у рыжих. Меланогенная активность начинается в меланоцитах, «активированных» ультрафиолетовыми лучами раньше пролиферации, что означает не только совместимость дифференцированного состояния с митотическим делением, но и то, что эти процессы могут быть связаны каким-то образом. Можно допустить мысль о том, что при формировании новых фолликулов перед началом новой фазы роста популяция меланоцитов может восстановиться за счет митотического деления зрелых меланоцитов, сохранившихся в фолликулах.

Генетико-селекционные подходы улучшения качества шерсти у овец таджикской породы.

После того как мы изучили биохимические и клеточные механизмы ингибирования синтеза пигмента меланина у овец таджикской породы, целесообразно было использовать эти результаты для проведения селекционных работ с целью улучшения качества шерсти овец. Проведённое исследование, на наш взгляд, имеет достаточно важное значение. С одной стороны, такого рода исследование важно в генетическом отношении для выяснения закономерностей наследственной передачи качеств и структур шерсти. С другой стороны изучение шерсти имеет большой практической интерес, так как может дать рекомендации овцеводческим хозяйствам для получения доброкачественной однородной шерсти пригодной для промышленных потребностей.

У овец таджикской породы ягнята рождаются с различными окрасками шерстного покрова-от черно-бурого до светло-рыжего. Степень депигментации после первой стрижки у отдельных животных достигает 96%, но у ягнят, имеющих черную окраску шерсти, степень депигментации волос после первой стрижки очень незначительна. Почти у всех ягнят таджикской породы, родившихся с рыжими оттенками шерстного покрова, после первых 2-3 месяцев поступление пигмента в волосяные фолликулы почти во всех волокнах кроме кроющих волос головы и ног, прекращается. У бурых и черных ягнят этот процесс наступает несколько позднее, то есть у этих ягнят шерсть и после первой, второй и третьей стрижки имеет сероватый оттенок.

Обратимся к результатам исследования, проведенного нами по изучению влияния генотипа барана-производителя, имеющего светлую окраску кроющего волоса, а также коэффициент наследуемости генотипов баранов-производителей по отношению к их потомкам. Следует отметить, что нами также было исследовано влияние условия содержания и кормления на окраску шерсти и шерстной продуктивности овец. Исследование проводили в опытных группах и в условиях естественного содержания животных, то есть в экспериментальных условиях в хозяйстве лаборатории генетики и селекции овец в совхозе имени Калинина Ленинского района (ныне дехканские хозяйства имени Таджикистана Рудакинского района).

По нашим наблюдениям, у ягнят палевых окрасок белая шерсть начинает расти уже через несколько недель после рождения, а у ягнят, родившихся бурыми, шерсть остается слегка сероватой. Депигментация не затрагивает кроющие волокна головы и ног и наиболее толстые остевые волосы, то есть чем толще волосы, тем менее интенсивен процесс торможения меланогенеза. Так у ягнят бурой окраски содержание пигментированных волос после первой стрижки колеблется от 0,15% до 10,76%, которые постепенно уменьшается.

В опытных группах были сформированы 3 подгруппы по 50 голов ярок и баранчиков 7 месячного возраста и 1 подгруппа ярок 18 месячного возраста таджикский породы овец. В период эксперимента их кормили по нормам ВИЖ для мясо-шерстных ягнят со средней живой массой на 20-25 кг превышающей аналогичные величины у контрольных животных, выращенных в обычных хозяйственных условиях.

В своих опытах в основном мы брали бараны-производителей, которые имели кроющие волосы в области головы и ног палевого или светло-рыжего оттенка. Разделение овцематок по окраске кроющего волоса головы не производили. Другой важной особенностью рассматриваемых окрасок, является то, что у ягнят таджикской породы в течение первых недель - месяцев жизни постепенно ослабляется пигментация шерсти и после первой стрижки у большинства ягнят растет белая шерсть. Причем процесс депигментации находится в непосредственной связи с окраской ягнят при рождении: чем светлее ягненок при рождении, тем раньше у него начинается рост депигментированной шерсти и тем она белее у взрослого животного.



Рис. 14. Годовой настриг шерсти (кг) и степень пигментации волокон шерсти (%) у овец таджикской породы

В опытных группах от овец племенного ядра таджикской породы получали довольно высокий настриг шерсти у которой уровень депигментации после первой стрижки у отдельных животных, имеющих более светлые кроющие волосы, достигал 97,8 %.

Для выявления настрига шерсти от овцематок таджикской породы различных возрастов мы отобрали 5 групп животных разного возраста. Полученные данные свидетельствуют о том, что шерстная продуктивность овец таджикской породы подвержена возрастным изменениям. Наиболее высокая шерстная продуктивность отмечена у молодых овцематок 2,5-3,5-летного возраста.

Динамика изменения шерстной продуктивности позволяет говорить о наличии тенденции к снижению величины этого показателя. У более старых животных 6,5-7,5-летнего возраста, наблюдается подтверждённое опытным путём снижение шерстной продуктивности и ухудшение ее качества. Результаты этих исследований позволяют считать, что у таджикских овец величина этого хозяйственно - полезного признака зависит также и от половозрастных изменений, от условий кормления и содержания овец.

Овец таджикской породы, как известно, стригут два раза в год. Структура шерстного покрова во многом однотипна: 72,4% пух и менее 2,7% окрашенные волосы это переходные волосы и ости. Для изучения шерстной продуктивности был проведен индивидуальный учет настрига весенней и осенней шерсти более чем у 700 голов животных (таб. 10).

Наивысший настриг шерсти и наименее пигментированные волосы отмечены у годовалых баранов, выращенных в улучшенных условиях кормления и содержания. Необходимо особо отметить, что условия кормления оказывают существенное влияние на шерстную продуктивность.

Многочисленные данные соответствующей научной литературы свидетельствуют, о том, что в овцеводстве успех в генетическом улучшении стада или породы на 80-90% зависит от целенаправленного отбора и подготовки баранов производителей (Алиев и др., 1987). Объясняется это тем, что для племенных целей отбирают самых лучших производителей с консолидированной наследственностью, стойко передающих свои породные, племенные и хозяйственно-полезные продуктивные качества потомству.

В нашу задачу входило изучение генотипа баранов-производителей путем целенаправленной селекции с использованием метода искусственного осеменения производителей потомства с наибольшим количеством пуха и наименьшим количеством пигментации, переходного волоса и ости. Для этой цели мы подбирали в основном бараны, имеющих более светлее, то есть палевые, светло-палевые и рыжие кроющие волосы в области головы и ног.

Для опыта нами были предварительно оценены 8 молодых 1,5- летних и 3 взрослых барана-производителя, имеющих более светлую окраску шерсти кроющего волоса головы и ног, которые были использованы для искусственного осеменения овцематок 6 отар.

Взрослые бараны и молодые производители были оценены биохимическими тестами по происхождению, собственной продуктивности и по качеству их потомства. Все бараны были отнесены к элите. Средняя живая масса взрослых баранов- производителей составляла 125,2 кг с колебаниями от 120 до 128 кг. Годовой настриг шерсти у взрослых баранов в среднем был равен 4,18 кг с колебанием от 4,0 до 4,7 кг. Процент пигментированных волос составлял 2,7 - 3,2%. Степень депигментации шерсти составлял 97,3 - 96,8 % соответственно.

Установлено, что высокие потенциальные возможности овец таджикской породы стойко наследуются потомством и могут быть использованы для улучшения шерстных качеств низкопродуктивных грубошерстных овец. От годовалых ярок и баранов, которые содержались в осеннее-зимне-весенние периоды в улучшенных условиях кормления, получен более высокий настриг шерсти (на 0,42 и 0,72 кг соответственно), чем от их аналогов по возрасту и полу, находившихся в обычных хозяйственных условиях.

Особенно большое различие в настриге шерсти обнаружено у 2,5- летних и взрослых маток, находившихся в разных условиях кормления. Опытные овцематки 2,5-летного возраста, по годовому настригу шерсти превышали контрольных овец на 1,37 и на 2,12 кг соответственно. Взрослые овцематки контрольной группы дали на 2,20 кг меньше шерсти, чем их аналоги по возрасту в опытных группах.

Установлено, что высокие потенциальные возможности овец таджикской породы стойко наследуются потомством и могут быть использованы для улучшения шерстных качеств низкопродуктивных грубошерстных овец. Выявлено, что коэффициент изменчивости настрига шерсти у овец таджикской породы колеблется от 19,98 до 24,06 %, что свидетельствует о наличии довольно значительных потенциальных возможностей улучшения этого хозяйственно- полезного признака.

Мы считаем необходимым подчеркнуть, что все эти выводы не носят абсолютный характер, они лишь основываются на результатах наших экспериментов над ягнятами изучаемых генотипов (рассматривается взаимодействие аллелей генов А и Е) и относятся только к этим генотипам.

Обобщая вышеприведенные результаты, можно прийти к такому выводу, что факторы, влияющие как ингибиторы меланогенеза шерсти у овец, могут быть как биохимическими, так и генетико-селекционными.

ПРЕДЛОЖЕНИЯ ПРОИЗВОДСТВУ

1. Разработанные биохимические и генетико-селекционные подходы изучения механизма ингибирования меланогенеза у полугрубошерстных и грубошерстных овец могут быть широко использованы в овцеводстве с целью повышения эффективности селекции по шерстной продуктивности и получения однородной качественной шерсти для нужд промышленности.

2. Установлено, что высокие потенциальные возможности овец таджикской породы стойко наследуются потомством и могут быть использованы для улучшения шерстных качеств низкопродуктивных грубошерстных овец.

3. Разработана методика устранения цветных волокон, встречающихся в шерсти таджикской породы овец, которая имеет практическую значимость для селекции.

4. Материалы диссертации могут быть использованы во время разработки рекомендаций для создания популяции овец таджикской породы, в шерсти которых отсутствовали бы цветные волокна в овцеводческих хозяйствах Республики Таджикистан и других соседних странах

ВЫВОДЫ

1. Впервые дана биохимическая, молекулярная и генетико-селекционная интерпретация процесса ингибирования шерсти овец. Научно интерпретирован механизм депигментации шести у полугрубошерстных (таджикская) и грубошерстных (гиссарская) пород овец.

2. На модели гетерокарионов выявлена природа клеточных факторов, блокирующих синтез пигмента меланина у отдельных особей таджикской породы овец, имеющих более светлую окраску шерсти. Установлено угнетающее влияние клеточных факторов на различные стадии клеточного цикла и на синтез пигмента меланина.

3. В цитоплазме клеток меланина установлено наличие белковых факторов, блокирующих репликацию в клетках партнера и выявлены внутриклеточные механизмы, препятствующие репликации при их терминальной дифференцировке.

4. Установлено, что клетки меланосом после утраты способности синтезировать пигмент меланин синтезируют факторы, препятствующие синтезу ДНК в ядре клеток партнера. Выявлены негативные регуляторы клеток меланосомы, которые эффективно блокируют репликацию в ядрах незлокачественных клеток. Установлено, что трансформация незлокачественных клеток малигнизирующим онкогеном c-Ki-ras и myc снижает эффект подавления клетками меланосом синтеза ДНК в ядре клеток партнера.

5. Установлено, что некоторые биохимические показатели сыворотки крови в сочетании с общепринятыми зоотехническими методами могут быть использованы в селекционно-племенной работе с целью получения полугрубой белой шерсти у овец таджикской породы. Выявлен комплекс биохимических и генетических характеристик пигментных клеток, тесно коррелирующих с содержанием меланина в волосах. Взаимосвязи отобранных параметров между собой и каждого из них с концентрацией гранул меланина в волосах имеют существенные особенности в волосяных фолликулах, формирующих пуховые, переходные и остевые волосы. Характеры линий регрессии и уравнений множественной регрессии, отражающих эффективность процесса меланогенеза, специфичны для каждого генотипа окраски.

6. Открыто ранее неизвестное, наблюдаемое у ягнят большинства генотипов окраски явление, - регулярное митотическое деление меланоцитов, локализованных в зоне сосочка волосяного фолликула. Доказано, что митотическая и меланогенная активность, характер пролиферации и миграции пигментных клеток в волосы тесно сопряжены и принципально различаются у ягнят исследованных генотипов окраски.

7. Выявлен новый механизм транспортирования меланосом, реализующийся в процессе митотического деления пигментных клеток, их миграции из зоны сосочка фолликула и включения в формирующиеся волосы. Установлены основные типы и механизмы миграции меланоцитов у ягнят таджикской и гиссарской пород овец различных генотипов окраски. Определена закономерность и регулярность митозов и миграции меланоцитов в растущие волосы, которая служит одним из нормальных механизмов снабжения их пигментом. Обнаружено, что значительная часть меланина приносится в волосы мигрирующими меланоцитами.

8. Показано, что плавность перехода от темно-бурой окраски к палевой осуществляется вследствие равномерного уменьшения концентрации меланосом в волосах и изменения их качественных характеристик, то есть определяется постепенным возрастанием эффективности супрессии процессов меланогенеза в результате взаимодействия аллелей генов А и Е.

9. Установлено, что взаимодействие аллелей генов А и Е, обуславливающих формирование многочисленных вариантов бурых и рыжих окрасок, определяет не непосредственный переход к синтезу феомеланина, как традиционно утверждалось ранее, а формирование смешанного типа меланогенеза, при котором в волосы поступают оба типа пигмента в различных соотношениях. В то же время, по мере уменьшения абсолютного количества пигмента, наблюдалось возрастание доли феомеланинового компонента.

10. В натурных и вычислительных экспериментах исследовано ингибирующее действие на меланогенез биохимических факторов и генов, определяющих уникальную структуру, густоту и скорость роста шерсти овец. У полугрубошерстных овец таджикской породы пигментогенез подавляется в первые недели-месяцы постнатального онтогенеза в процессе некомпенсируемой миграции меланоцитов в формирующиеся волосы. Ингибирование меланогенеза в результате преобразования структуры волосяного покрова овец в процессе селекции по шерстным характеристикам иллюстрирует механизм полного угнетения одной функции в результате гиперразвития другой.

11. Установлено, что гены-модификаторы, определяющие повышение однородности, густоты, интенсивности и равномерности роста шерсти, ингибируют меланогенез у овец полугрубошерстных пород. Показано, что ингибирование меланогенеза также происходит в результате преобразования структуры волосяного покрова в процессе селекции по шерстным характеристикам.

12. Экспериментально установлено, что селекция овец таджикской породы на увеличение размеров и живой массы окажет положительное влияние на настриг полугрубой шерсти. Установлено, что овцы таджикской породы, обладающие огромным генетически детерминированным потенциалом повышения шерстной (белой полугрубой шерсти) продуктивности, являются наиболее перспективными для производства по интенсивной промышленной технологии. У овец таджикской породы существует определенная коррелятивная связь между такими производственно-ценными признаками, как окраска и настриг шерсти. Эту взаимосвязь можно использовать в качестве эффективного теста для раннего прогнозирования возможности получения качественной белой однотонной шерсти.

13. Рекомендованы способы ликвидации пигментированных волокон в шерсти и генетические пути создания депигментированных пород. Установлено, что генотип баранов-производителей, имеющих светлые кроющие волосы, коэффициент наследуемости у их потомства и улучшение условий кормления и содержания положительно влияют на степень депигментации шерсти и шерстной продуктивности.

14. Выявлено, что коэффициент изменчивости настрига шерсти у овец таджикской породы колеблется от 19,98 до 24,06 % , что свидетельствует о наличии довольно значительных потенциальных возможностей улучшения этого хозяйственно-полезного признака. Данный потенциал стойко наследуется потомством и может быть использован для улучшения шерстных качеств низкопродуктивных грубошерстных пород овец. На наш взгляд, это один из неиспользуемых резервов таджикской породы, детерминированным в генотипе.

СПИСОК НАУЧНЫХ ТРУДОВ, ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ

Статьи в ведущих рецензируемых научных журналах и изданиях, определенных Высшей аттестационной комиссией:

1. Алиев Г.А. Оценка влияния окраски при рождении и характера шерстного покрова на процесс ингибирования меланогенеза в волосяных фолликулах ягнят. /Алиев Г.А., Косимов Р.Б., Рачковский М.Л., Черенков С.И. //Доклады ВСХАНИЛ, Москва, № 11, 1987, С. 33

2. Алиев Г.А. Особенности пигментации волосяного покрова овец таджикской породы в онтогенезе. /Алиев Г.А., Косимов Р.Б., Рачковский М.Л // Вестник сельскохозяйственной науки. Москва, № 4, 1989, С. 57 - 64.

3. Зеленин А.В. Исследование природы блока пролиферации в терминально дифференцированных клетках на модели гетерокарионов: различные типы отсутствия пролиферации в клетках при терминальной дифференцировке. /Зеленин А.В., Прудовский И.А., Косимов Р.Б., Гуменюк Р.Р., Егоров Е.Е., Капник Е.М., Федоров Ю.И. // Онтогенез, Москва, том 21, № 1, 1990, С. 32 - 39.

4. Косимов Р.Б.. Синтез ДНК в гетерокарионах, полученных при слиянии сегментоядерных лейкоцитов и клеток культур, обладающих различным пролиферативным потенциалом. / Косимов Р.Б., Сухарев С.И., Поспелова Т.В., Прудовский И.А., Зеленин А.В. //Москва, Цитология. Том 33, № 2, 1991, С. 48 - 55.

5. Прудовский И.А. Позитивная и негативная регуляция репликации в гибридных клетках. / Прудовский И.А., Косимов Р.Б., Егоров Е.Е., Гуменюк Р.Р, Ходяков А.Л., Онищенко Г.Е., Тсонг Т. //Москва, Молекулярная биология, Том 25, № 5, 1991, С. 57 - 64.

6. Косимов Р.Б. Изучение некоторых морфофизиологических параметров волосяных фолликул у овец. /Косимов Р.Б., Файзуллоев А.. А //Вестник Таджикского государственного национального университета, Душанбе, № 3, 2007, С. 170 - 177.

7. Косимов Р.Б., Изучение механизма заполнения меланосом меланоцитами и включения их в волосяные фолликулы ягнят различных пород овец. /Косимов Р.Б., Файзуллоев А.А //Доклады таджикской Академии сельскохозяйственных наук. Душанбе, 2007, № 3 (13).

8. Косимов Р.Б. Биохимические основы раннего прогнозирования однородности шерсти у овец таджикской породы. /Косимов Р.Б. //Вестник Таджикского государственного национального университета, Душанбе, «Сино» 2008, № 1 (42).

9. Косимов Р.Б., Изучение белкового полиморфизма и его связь с настригом шерсти и окраски шерстного покрова у таджикской породы овец. /Косимов Р.Б., Ибрагимова С.И //Вестник Таджикского государственного национального университета, Душанбе, «Сино» 2008 № 1 (42).

Книги и брошюры:

10. Методические указания и задания по определению генетического потенциала продуктивности животных и степени его реализации. /Косимов Р.Б. Душанбе. 1992. 12 с.

11. Методические указания к лабораторно-практическим занятиям по курсу «Генетики» для специальности 3107 -зоотехния и 3108 - ветеринарии. Часть I (на таджикском языке). /Косимов Р.Б., Норов А.Н. Душанбе. 1998. 9 с.

12. Методические указания к лабораторно-практическим занятиям по курсу «Генетики» для специальности 3107 -зоотехния и 3108 - ветеринария. Часть I I (на таджикском языке). /Косимов Р.Б., Амиршоев Ф.С. Душанбе. 1998. - 13 с.

13. Учебник «Генетика» (ирсиятшиносї). Учебные пособия для студентов сельскохозяйственных вузов (на таджикском языке) /Косимов Р. Б. Душанбе. «Маориф», 2000 г. 272 с.

14. Учебник «Генетика с основами биотехнологии». Учебные пособия для студентов сельскохозяйственных вузов (на таджикском языке) /Косимов Р. Б. Амиршоев Ф.С., Файзллоев А. А. Душанбе, «Маориф ва фарњанг», 2008 г. 296

15. Косимов Р. Б. Молекулярные и клеточные подходы изучения процесса ингибирования меланогенеза шерсти у овец. /Косимов Р.Б. монография Душанбе, «Маориф ва фарњанг», 2008. 122 с

Прочие публикации:

16. Алиев Г.А. Характер ингибирования меланогенеза у ягнят таджикской породы в первые месяцы постнатального онтогенеза. /Алиев Г.А.., Рачковский М. Л., Косимов Р.Б., Бурлаенко О.Е., Крымова М.А // Материалы конференции, посвященной 100 -летию со дня рождения Н.И. Вавилова. Душанбе, 1986, С. 7

17. Алиев Г.А. Пигментация различных типов шерстных волокон в онтогенезе ягнят таджикской породы. /Алиев Г.А.., Рачковский М.Л., Косимов. Р.Б., Алиев Б.А. // Материалы конференции, Вклад генетики в ускорение научно-технического прогресса в сельском хозяйстве Таджикистана. Душанбе, 1986, С. 27 -29.

18. Алиев Г.А. Характер депигментации шерсти ягнят таджикской породы и её помеси в связи со структурой шерстного покрова и окраской при рождении. /Алиев Г.А., Косимов Р.Б., Рачковский М.Л. // Тезисы докладов республиканской научно-теоретический конференции молодых ученых и специалистов Таджикской ССР, Душанбе, 1987, С. 26 - 28.

19. Косимов Р.Б. Позитивный и негативный контроль синтеза ДНК в сегментоядерных лейкоцитах (эксперименты на гетерокарионах). /Косимов Р.Б., Сухарев С.И., Прудовский И.А. //Тезисы Х Всесоюзного симпозиум «Структура и функции клеточного ядра». Гродно, Беларусия, 1990, С. 97 - 98.

20. Косимов Р.Б., Реактивация и ингибирование синтеза ДНК в гетерокарионах сегментоядерных лейкоцитов и клеток культур, обладающих различным пролиферативным потенциалом. /Косимов Р.Б. //Тезисы IV Всесоюзной школы-семинара молодых ученых «Перспективные направления и новые методы в молекулярной биологии». Рига, 1990, С. 97 - 98.

21. Косимов Р.Б. Автореферат кандидатский диссертации. 1991

22. Косимов Р.Б. Биохимические основы некоторых аспектов пигментации овец. // НПИ Центр № 96, 1997. С 18-24.

23. Косимов Р.Б. Синтез РНК в гетерокарионах эмбриональных фибробластах овец и клеток, обладающих различным пролиферативным потенциалом. //Экспресс-информация, серия «Генетическая инженерия», Душанбе, № 10,Серия 68,39, 1997 С. 17- 21.

24. Косимов Р.Б. Влияние доместикации и селекции на меланогенез у овец шерстных пород. // НПИ Центр № 89, 1998, С. 41-47.

25. Косимов Р.Б. Морфофизиологическое исследование ингибирующего влияния генов-модификаторов на меланогенез в онтогенезе овец таджикской породы. /Косимов Р.Б., Крымова М.А. // Материалы международной конференции генетиков. Душанбе, 1998, С. 54-56.

26. Косимов Р.Б. О механизмах формирования пигмента меланина и выявление регуляторных механизмов на модели гетерокарионов. //Научно-производственный журнал «Кишоварз», № 6, ТАУ, 1998, С. 34-37.

27. Косимов Р.Б. Пигментные клетки не тормозят вступление в синтез ДНК ядер незлокачественных пролиферирующих клеток в гетерокарионах. . /Косимов Р.Б., Крымова М.А. // НПИ Центр № 47, 2000, С. 31-36.

28. Косимов Р.Б. Исследование блока пролиферации у клеток меланомы методом клеточной гибридизации. /Косимов Р.Б., Крымова М.А. //Научно-производственный журнал «Кишоварз»,ТАУ, 2001, № 1(5), С. 52-57.

29. Косимов Р.Б. Торможение синтеза ДНК в ядрах злокачественных клеток при слиянии с меланомами. /Косимов Р.Б., Крымова М.А. // НПИ Центр № 26, 2001, С. 27-31.

30. Косимов Р.Б., Синтез ДНК в гетерокарионах меланомы и клеток обладающих различным пролиферативным потенциалом. //Сборник статей, посвященных 60-летию зооинженерного факультета ТАУ, Душанбе, 2003,С. 6

31. Косимов Р.Б. Изучение механизма заполнения меланосом меланоцитами и включение их в волосяные фолликулы ягнят различных пород овец. /Косимов Р.Б., Крымова М.А. //Научно-производственный Журнал «Кишоварз» ТАУ, 2004, № 3-5 (17), С. 5-8

32. Косимов Р.Б. Биохимические основы изучения меланогенеза в волосяном покрове овец. /Косимов Р.Б., Крымова М.А. //Научно-производственный журнал «Кишоварз», ТАУ, 2004, № 47. С. 42-46.