Современные биотехнологические процессы и иммунологические методы при промышленном производстве ветеринарных препаратов

Предложенный способ апробирован с положительными результатами в производственных условиях на Армавирской биофабрике.

Разработку способа получения гипериммунной сыворотки против гемофилеза, стрептококкоза и пастереллеза свиней, включающего приготовление антигена из инактивированных и концентрированных культур Pasterella multocida серовариантов А, В и Д и Haemophilus pleuropneumoniae сероваров I и II, Streptococcus suis серовара II (штамм Касли), грундиммунизацию и гипериммунизацию возрастающими дозами антигена с последующим крововзятием и выделением целевого продукта, отличающегося тем, что в качестве продуцентов использовали волов, при этом гипериммунизацию проводили 7-10-кратными внутримышечными инъекциями в общей дозе каждого антигена 1800-2400 миллиардов микробных тел с интервалом 2-3 дня, а грундиммунизацию осуществляют подкожно в разные участки тела двукратно сначала по 10-15 млрд микр. тел, а через 14 дней по 20-25 млрд микр. тел с добавлением 10 см³ гидроокиси алюминия. Промышленные серии лечебных сывороток на волах имели следующую активность, гарантирующую высокую лечебную эффективность.

Титры антител зависели от антигена и индивидуальных особенностей продуцентов. Средние титры антител в РА в отношении H. Pleuropneumoniae (шт. 5870 и ГУ-19) и Str. suis (Касли) составили 1:474 (1:80-1:640); 1:640 (1:320-1:1280) и 1:200 (1:100-1:400), соответственно.

Наибольший титр в РПГА наблюдался в сыворотках в отношении П. мультоцида серовариантв В 1:700 (1:320-1:1600). Титры антител в отношении П. мультоцида серовариантоа А и Д были 1:130 (1:40-1:256) и 1:139 (1:64-1:240), соответственно.

В процессе эксплуатации 10 продуцентов было получено 3 сыворотки-сырца, которые были объеденены в одну опытную серию объемом 75 л.

В таблице 12 представлены титры антител в РА и РПГА опытной серии сыворотки в сравнении с показателями ТУ.

Таблица 12. Титры антител в РА и РПГА опытной серии

Опытная серия сыворотки была стерильна и безвредна.

Таким образом, контроль сыворотки показал, что по показателям стерильности, безвредности, активности полученная опытная серия сыворотки соответствует ТУ на препарат.

Динамика изготовления диагностических наборов в промышленных условиях

В течение последних 7 лет по нашим разработкам во ВНИТИБП были изготовлены и выпущены диагностикумы, представленные в таблице 13.

Таблица 13. Объем выпуска диагностикумов за 2001-2007 гг.

Экономический и экологический эффект

Улучшение экологической обстановки происходило за счет уменьшения опасности распространения инфекционного материала с учетом усовершенствования промышленных технологий изготовления биопрепаратов и своевременной улучшенной диагностики, приводившей к более быстрому и точному диагнозу инфекций ИРТ, ПГ-3, бешенства, хламидиоза, и за счет проведения своевременных срочных ветеринарно-санитарных мероприятий, а также при лечении животных с использованием ассоциированной лечебной сыворотки против пастереллеза, гемофилеза и стрептококкоза.

Экономический эффект расчитывали при промышленном производстве биопрепаратов с учетом способа, описанного в монографии И.В. Тихонова (2007 г.), и расчитанного по методу М.г. Таршиса Т.А. Ломакиной (1991 г.) и составил 12 млн руб. в год.

Выводы

Усовершенствованы и разработаны с использованием современного оборудования и технических средств механизации и автоматизации биотехнологические процессы культивирования микроорганизмов, клеток животных и вирусов производства высокоэффективных диагностикумов в ИФА для нужд ветеринарии.

Использование современных автоматизированных биореакторов и методов оптимизации позволило при суспензионном культивировании культур клеток ПТ-80 и ВНК-21/13 получать их в концентрации до 3 млн кл в мл, а при псевдосуспензионном на 1-2 порядка выше.

Использование гибких и блочно-модульных систем культивирования позволяет получать в высоких концентрациях вирусы (бешенство - в титрах 10^8-9ТЦД₅₀, ИРТ - 10⁸ТЦД₅₀) и микроорганизмы (пастереллы, гемофилы и стрептококки до 20-40 млрд кл в мл).

Использование высокоэффективных методов и аппаратов (жидкостных сепараторов и осадительно-фильтрующих центрифуг на бесприводной основе с высокими технико-экономическими показателям) для разделения, очистки и концентрирования вирусов и микроорганизмов методами сепарирования, центрифугирования, фильтрования и ультроцентрифугирования позволяет получать очищенные специфические антигены при промышленном производстве биопрепаратов (диагностикумы, лечебные сыворотки и др.).

Разработан высокоэффективный способ оценки токсичности масляных адъювантов и других компонентов с использованием первичнотрипсинизированных и перевиваемых культур клеток в 10-100 раз по чувствительности выше, чем с использованием белых мышей, что позволило повысить эффективность биопрепаратов при их применении при промышленном производстве лечебных сывороток и диагностикумов (бешенство, ИРТ, хламидиоз, респираторно-синцитиальная инфекция, ящур, болезнь Марека и другие) в процессе изготовлении гипериммунных сывороток.

Установлено, что наиболее сложным и определяющим является четвертый период сперматогенеза в культуральной системе. С целью создания трансгенных свиней к оптимизации параметров культивирования для получения живых клеток, включая сперматогонии, необходимы дальнейшие исследования.

Теоретически обосновано и практически подтверждено наличие гепототического объема гибели клеток линии ВНК 21/13 в биореакторах при суспензионном культивировании в зависимости от уровня аэрации, размера пузырьков, силиконового пеногасителя (пропинол Б-400), а также при культивировании на микроносителях и установлена константа гибели клеток, которая в зависимости от времени культивирования колебалась от 2,7х10^-6 сек^-1 до 22,3х10^-6сек^-1.

Разработаны методы очистки, инактивации и концентрирования вирусов бешенства и инфекционного ринотрахеита и изучены их биологические свойства, которые сохранялись при получении специфических антигенов, используемых для получения гипериммунных сывороток при промышленном производстве диагностикумов.

Усовершенствованы способы получения и очистки специфических антител и моноклональных антител при промышленной технологии разработки и производства для практического применения диагностикумов.

Практические предложения

1. Разработан способ оценки токсичности масляных адъювантов и других компонентов с использованием первичнотрипсинизированных и перевиваемых культур клеток (2002), утвержденный А.М. Смирновым в отделе ветеринарной медицины РАСХН.

2. За период с 2001 по 2007 гг. выпущены для практического применения в АПК России диагностикумы против вирусов ИРТ ИФА - 500, бешенства РДП - 3500, РИФ - 4000 и хламидиоза РСК - 15000 наборов.

3. Разработаны и утверждены:

- Инструкция по изготовлению диагностикума ИФА против вируса ИРТ (2007), утвержденная директором ВНИТИБП.

- Инструкция по изготовлению диагностикума РДП против вируса бешенства (2001), утвержденная директором ВНИТИБП.

- Дополнение к инструкции по изготовлению диагностикума РИФ против вируса бешенства (2004), утвержденная директором ВНИТИБП и согласованная с Руководителем Департамента ветеринарии и директором ВГНКИ.

- Инструкция по изготовлению набора для диагностики хламидиоза сельскохозяйственных животных в РСК и РДСК (2002), утвержденная директором ВНИТИБП.

- Инструкция по изготовлению ассоциированных лечебных сывороток против пастереллеза, гемофилеза и стрептококкоза свиней (2007), утвержденная директором ВНИТИБП.

Список работ, опубликованных по теме диссертации

1. Эрнст Л.Н., Моисеева Н.А., Самуйленко С.А. Особенности иммунной системы у трансгенных свиней. // Международная конференция, посвященная 80-летию Московской государственной академии ветеринарной медицины и биотехнологии им. К.И. Скрябина. - Москва. - 1999.-с. 67.

2. Эрнст Л.К., Самуйленко С.А., Соловьев Б.В., Самуйленко А.Я. Об использовании клеточных систем поддержания и культивирования сперматогониев in vitro. // Всероссийская научно-практическая конференция «Научные основы производства ветеринарных биопрепаратов», посвященная 30-летию Всероссийского научно-исследовательского и технологического института биологической промышленности. - Щелково. - 2000.-с. 118-119.

3. Эрнст Л.К., Самуйленко С.А., Зиновьева Н.А. Оценка эффективности использования ретровирусных векторов для переноса генов у сельскохозяйственных животных in vivo. // Всероссийская научно-практическая конференция «Научные основы производства ветеринарных биопрепаратов», посвященная 30-летию Всероссийского научно-исследовательского и технологического института биологической промышленности. - Щелково. - 2000.-с. 119-120.

4. Самуйленко С.А. Достижения биотехнологии в области создания трансгенных животных. // Всероссийская научно-производственная конференция «Разработка и освоение производства нового поколения лекарственных средств для животных и их применение в ветеринарной практике» в Федеральном государственном унитарном предприятии «Ставропольской биофабрике». - Ставрополь. - 2000.-с. 63.

5. Бобровская И.В., Самуйленко С.А. Перспективы использования полимеразной цепной реакции (ПЦР) для типирования вируса болезни Марека. // Международная научно-практическая конференция «Диагностика, профилактика и меры борьбы с особо опасными, экзотическими и зооантропонозными болезнями животных» во Всероссийском научно-исследовательском институте ветеринарной вирусологии и микробиологии. - Покров. - 2000.-с. 221-224.

6. Самуйленко А.Я., Рубан Е.А., Гунин М.А., Самуйленко С.А. Исследование гибели клеток в процессе аэрации при глубинном культивировании в биореакторе. // Международная научно-практическая конференция «Диагностика, профилактика и меры борьбы с особо опасными, экзотическими и зооантропонозными болезнями животных» во Всероссийском научно-исследовательском институте ветеринарной вирусологии и микробиологии. - Покров. - 2000.-с. 199-203.

7. Эрнст Л.К., Рубан Е.А., Самуйленко А.Я., Еремец В.И., Самуйленко С.А. Культуры микроорганизмов и клеток животных-продуцентов биологически активных веществ. // Международная научная конференция «Биотехнология в растениеводстве, животноводстве и ветеринарии» во Всероссийском научно-исследовательском институте сельскохозяйственной биотехнологии. - Москва. - 2000.

8. Рубан Е.А., Соловьев Б.В., Самуйленко С.А., Самуйленко А.Я., Клюкина В.И. Некоторые проблемы глубинного культивирования клеток животных в биореакторах. // Биологическая научно-практическая конференция ВГНКИ. - Москва. - 2000.

9. Самуйленко А.Я., Самуйленко С.А., Клюкина В.И., Рубан Е.А. Технология производства генноинженерных вакцин. // Биологическая научно-практическая конференция ВГНКИ. - Москва. - 2000.

10. Самуйленко А.Я., Еремец В.И., Скичко Н.Д. Яковлев А.Е., Самуйленко С.А., Казаков М.А. Получение противоящурных гипериммунных сывороток на использованных морских свинках. // Науковий вiсник Национального аграрного унiверситету. - Киев. - 2001.-с. 264-265.

11. Кузнецов Д.П., Самуйленко А.Я., Белоусов В.И., Кузнецова С.В., Самуйленко С.А. Тест-система для ранней иммуноферментной диагностики инфекционного ринотрахеита крупного рогатого скота. // Науковий вiсник Национального аграрного унiверситету. - Киев. - 2001.-с. 269-271.

12. Самуйленко С.А., Кузнецов Д.П. Функция лимфоцитов и макрофагов в клеточноопосредованном иммунитете при инфекционном ринотрахеите КРС. // Материалы международной конференции молодых ученых. - Щелково. - 2001.-с. 15-18.

13. Самуйленко С.А., Бобровская И.В., Кузнецов Д.П. Очистка индивидуальных гликопротеинов вируса инфекционного ринотрахеита с помощью моноклональных антител. // Материалы международной конференции молодых ученых. - Щелково. - 2001.-с. 35-37

14. Романенко М.Н., Бирюков А.Г., Клюкина В.И., Самуйленко С.А. Современное состояние диагностики и типирования лиссавирусов. // Материалы международной конференции молодых ученых. - Щелково. - 2001.-с. 174-176.

15. Самуйленко С.А., Бобровская И.В., Кузнецов Д.П. Исследование иммуногенных свойств отдельных гликопротеинов вируса ИРТ КРС. // Материалы международной конференции молодых ученых. - Щелково. - 2001.-с. 38-41.

16. Романенко М.Н., Клюкина В.И., Бирюков А.Г., Самуйленко С.А. Получение и применение альбумин-родамина конъюгата в диагностике бешенства животных методом флюоресцирующих антител. // Материалы международной конференции молодых ученых. - Щелково. - 2001.-с. 50-52.

17. Яковлев А.Е., Самуйленко С.А., Еремец В.И., Самуйленко А.Я., Скичко Н.Д., Казаков М.А., Большакова М.В. Получение афтозного материала от морских свинок, зараженных вирусом ящура типов А, О и С. // Материалы международной конференции молодых ученых «Научные основы производства ветеринарных биологических препаратов». - Щелково. - 2001.-с. 182-184.

18. Тетеричев В.И., Самуйленко А.Я., Рубан Е.А., Белоусов В.И., Бирюков А.Г., Самуйленко С.А. Эпизоотическая ситуация по бешенству в Тульской области и смежных областях Российской Федерации. // Материалы международной научно-практической конференции «Нейроинфекции: бешенство, гупкообразная энцефалопатия крупного рогатого скота, Крейтфелдта-Якоба и другие прионные болезни; листериоз, болезнь Ауески, болезнь Тешена». - Покров. - 2001.-с. 10-14.

19. Тетеричев В.И., Самуйленко А.Я., Белоусов В.И., Солодилов А.Н., Бирюков А.Г., Самуйленко С.А., Рубан Е.А., Иванов В.С. Современное состояние заболеваемости бешенством домашних и диких животных в Тульской области. // Материалы международной научно-практической конференции «Нейроинфекции: бешенство, гупкообразная энцефалопатия крупного рогатого скота, Крейтфелдта-Якоба и другие прионные болезни; листериоз, болезнь Ауески, болезнь Тешена». - Покров. - 2001.-с. 14-17.

20. Самуйленко А.Я., Албулов А.И., Уша Б.В., Бирюков А.Г., Фролов Ю.Д., Моисеев А.В., Самуйленко С.А., Моисеева Н.А., Зацерковная Е.Б., Ершов П.Б., Шинкарев С.М. Разработка новых технологий и расширение сферы применения биологически активных препаратов (БАП) из гидробионтов. // Материалы шестой международной конференции «Новые перспективы применения хитозана и хитина». - Москва. - 2001.-с. 56.

21. Самуйленко С.А., Самуйленко А.Я., Еремец В.И., Рубан Е.А., Соловьев Б.В., Бирюков А.Г., Албулов А.И., Большакова М.В., Васенина Т.И., Дадасян А.Я. «Способ определения токсичности и реактогенности масляных адъювантов и их составляющих компонентов». Патент №2184568 от 10.07.2002 г.

22. Яковлев А.Е., Самуйленко С.А., Самуйленко А.Я., Еремец В.И., Скичко Н.Д., Казаков М.А. Активность и специфичность в РСК гипериммунных сывороток, полученных высокоэффективным способом. // Материалы международной научно-практической конференции «Биолого-экологические проблемы заразных болезней диких животных и их роль в патологии сельскохозяйственных животных и людей». - Покров. - 2002.-с. 323-324.

23. Яковлев А.Е., Бирюков А.Г., Фролов Ю.Д., Самуйленко С.А., Самуйленко А.Я., Еремец В.И., Скичко Н.Д., Казаков М.А. Оценка комплемент связывающей активности (РСК) вируса ящура типов А, О и С, репродуцированного в различных биологических системах, с использованием экспериментальных серий гипериммунной сыворотки. // Материалы второй научной конференции с международным участием «Проблемы инфекционной патологии в регионах Сибири, Дальнего Востока и Крайнего Севера». - Новосибирск. - 2002.-с. 169.

24. Самуйленко С.А., Кузнецова С.В., Кузнецов Д.П. Получение очищенных и концентрированных препаратов вируса бешенства. // Материалы международной конференции молодых ученых «Научные основы производства ветеринарных биологических препаратов. - Щелково. - 2002.-с. 25-27.

25. Самуйленко А.Я., Сюрин В.Н., Воронин Е.С., Ямникова С.С., Сапегина Е.П., Соловьев Б.В., Фомина Н.В., Белоусова Р.В., Белоусов В.И., Еремец В.И., Самуйленко С.А., Моисеев А.В., Фомин К.Ю. Инфекционная патология животных. Хламидиозы (том V). - Монография. - Москва. - 2003.

26. Кузнецов Д.П., Самуйленко А.Я., Белоусов В.И., Кузнецова С.В., Самуйленко С.А. «Набор для ранней иммуноферментной диагностики инфекционного ринотрахеита». Патент №2196336 от 10.01.2003 г.

27. Эрнст Л.К., Самуйленко А.Я., Рубан Е.А., Соловьев Б.В., Самуйленко С.А., Еремец В.И. «Способ размножения стромальных клеток тестикул (семенников), мужских половых зародышевых клеток, сперматогоний, сперматоцитов и сперматозоидов». Патент №2196820 от 20.01.2003 г.

28. Кузнецов Д.П., Самуйленко А.Я., Белоусов В.И., Кузнецова С.В., Самуйленко С.А. «Набор для ретроспективной иммуноферментной диагностики инфекционного ринотрахеита животных». Патент №2196609 от 20.01.2003 г.

29. Самуйленко С.А. Использование флюоресцирующих моноклональных антител для выявления вируса бешенства. // Материалы международной научно-практической конференции «Научные основы производства ветеринарных биологических препаратов». - Щелково. - 2003.-с. 51-53.

30. Самуйленко С.А., Яковлев А.Е., Самуйленко А.Я., Казаков М.А. Анализ эффективности противоящурных вакцин по дополнительному показателю с помощью ИФА. // Материалы международной научно-практической конференции «Научные основы производства ветеринарных биологических препаратов». - Щелково. - 2003.-с. 56-58.

31. Самуйленко С.А., Рубан Е.А., Самуйленко А.Я. Влияние концентрации парциального давления СО₂ на жизнедеятельность микроорганизмов и клеток животных. // Материалы Международной научно-практической конференции «Научные основы производства ветеринарных биологических препаратов». - Щелково. - 2003.-с. 80-85.

32. Самуйленко А.Я., Рубан Е.А., Самуйленко С.А. Влияние растворенного кислорода на рост культур микроорганизмов и клеток животных. // Материалы Международной научно-практической конференции «Научные основы производства ветеринарных биологических препаратов». - Щелково. - 2003.-с. 77-80.

33. Истомина С.В., Кузнецова С.В., Сазанова Э.Я., Кузнецов Д.П., Маслов Е.В. Тест-система для индикации вируса бешенства и антирабических антител методом ИФА. // XI Московский международный ветеринарный конгресс. - Москва. - 2003.-с. 244-245.

34. Истомина С.В., Сазанова Э.Я., Кузнецова С.В., Кузнецов Д.П. Гемагглютинин вируса бешенства. // XI Московский международный ветеринарный конгресс. - Москва. - 2003.-с. 245-246.

35. Самуйленко С.А., Истомина С.В., Сазанова Э.Я., Кузнецова С.В., Кузнецов Д.П. Инактивирующее действие bete-пропиолактона на вирус бешенства. // XI Московский международный ветеринарный конгресс. - Москва. - 2003.-с. 247-2468.

36. Самуйленко А.Я., Яковлев А.Е., Самуйленко С.А., Казаков М.А. Использованеи иммуноферментного анализа для изучения поствакцинального иммунитета при ящуре. // Статья в журнале «Ветеринарная патология», №1 (5). - Москва. - 2003.-с. 96-97.

37. Самуйленко С.А., Сазанова Э.Я., Кузнецова С.В., Кузнецов Д.П. Гликопротеин вируса бешенства и протеин Ф (Staphylococcus aureus) в титровании методом ИФА антирабических антител. // Статья из сборника научных трудов, посвященная 75-летию Научно-исследовательского института микробиологии Московской области Российской Федерации. - Киров. - 2003.-с. 113-114.

38. Самуйленко С.А., Сазанова Э.Я., Кузнецова С.В., Кузнецов Д.П. Температура в инактивации вируса бешенства. // Статья в журнале «Вестник РАСХН», №1. - Москва. - 2004.-с. 61-63.

39. Самуйленко С.А., Сазанова Э.Я., Кузнецова С.В., Кузнецов Д.П. Влияние фенола на биологические свойства вируса бешенства. // Статья в журнале «Вестник РАСХН», №4. - Москва. - 2004.-с. 78-80.

40. Самуйленко С.А., Сазанова Э.Я., Кузнецова С.В., Кузнецов Д.П. Действие -пропиолактона на гемагглютинин и РНК вируса бешенства. // Статья в журнале «Вестник РАСХН», №6. - Москва. - 2004.-с. 68-70.

41. Акиньшина Т.В., Сазанова Э.Я., Самуйленко С.А., Кузнецова С.В., Кузнецов Д.П. Некоторые аспекты инактивации вируса бешенства химическими агентами. // Статья в материалах Международной научно-практической конференции молодых ученых «Научные основы производства ветеринарных биологических препаратов». - Щелково. - 2004.-с. 6-11.

42. Гринь С.А., Кузнецова С.В., Кузнецов Д.П., Сазанова Э.Я., Акиньшина Т.В. Гуморальный иммунитет при вакцинации культуральной антирабической вакциной. // Статья в журнале «Ветеринария и кормление», №5. - Москва. - 2005.-с. 14-15.

43. Гринь С.А., Сазанова Э.Я., Кузнецов Д.П., Кузнецова С.В., Акиньшина Т.В. Клеточный иммунитет при культуральной антирабической вакцинации. // Статья в журнале «Вестник РАСХН», №2. - Москва. - 2004.-с. 76-78.

44. Клюкина В.И., Кочетов А.И., Гринь С.А. Изучение фракционного состава антирабических ФИТЦ-конъюгатов методом хроматографии. // Статья в материалах Международной научно-практической конференции «Научные основы производства ветеринарных биологических препаратов». - Щелково. - 2005.-с. 92-94.

45. Акиньшина Т.В., Гринь С.А., Кузнецов Д.П., Кузнецова С.В., Сазанова Э.Я. Поликлональные антиидиотипические антитела к антигенам культурального вируса бешенства. // Статья в материалах Международной научно-практической конференции «Научные основы производства ветеринарных биологических препаратов». - Щелково. - 2005.-с. 261-266.

46. Матвеева И.Н., Гринь С.А., Кузнецов Д.П., Мальгин Ю.А., Мальгина Т.А., Попова В.М. Выделение биологически активного протеина А для использования в биологических исследованиях. // Материалы международной научно-практической конференции, посвященной 35-летию института «Научные основы производства ветеринарных биологических препаратов». - Щелково. - 2005. - с. 421-423.

47. Матвеева И.Н., Гринь С.А., Кузнецов Д.П., Мальгин Ю.А., Мальгина Т.А., Попова В.М. Получение биологически активного протеина А для золотистого стафилококка. // Материалы международной научно-практической конференции, посвященной 35-летию института «Научные основы производства ветеринарных биологических препаратов». - Щелково. - 2005. - с. 423-425.

48. Самуйленко А.Я., Рубан Е.А., Дадасян А.Я., Гринь С.А. Перспектива развития биотехнологии прозводства ветеринарных препаратов. // Статья в журнале «Ветеринария и кормление» - 2005. - №2.-с. 12-13.

49. Самуйленко А.Я., Соловьев Б.В., Непоклонов Е.А., Воронин Е.С., Фомина Н.В., Гринь С.А., Белоусов В.И., Мельник Н.В., Рубан Е.А., Еремец В.И., Сапегина Е.П., Ямникова С.С., Цыбанов С.Ж. Инфекционная патология животных. - Монография (I и II том). - Москва. - 2006.

50. Матвеева И.Н., Кузнецов Д.П., Кочиш Т.Ю., Кочиш И.И., Гринь С.А. Изучение репродукции респираторно-синцитиального вируса крупного рогатого скота. // Статья в материалах международной научно-практической конференции «Актуальные проблемы инфекционной патологии и иммунологии животных». - Москва. - 2006.-с. 277-278.

51. Матвеева И.Н., Кузнецов Д.П., Гринь С.А. Промышленный способ получения биологически активного протеина А. // Статья в материалах международной научно-практической конференции «Актуальные проблемы инфекционной патологии и иммунологии животных». - Москва. - 2006.-с. 275-276.

52. Матвеева И.Н., Кузнецов Д.П., Кочиш Т.Ю., Кочиш И.И., Гринь С.А. Разработка тест-системы для детекции антител к респираторно-синцитиальному вирусу крупного рогатого скота. // Статья в материалах Международной научно-практической конференции «Актуальные проблемы инфекционной патологии и иммунологии животных». - Москва. - 2006.-с. 279-281.

53. Матвеева И.Н., Кузнецов Д.П., Кузнецова С.В., Гринь С.А. Разработка тест-системы для детекции антител к вирусу парагриппа-3 крупного рогатого скота. // Статья в материалах Международной научно-практической конференции «Актуальные проблемы инфекционной патологии и иммунологии животных». - Москва. - 2006.-с. 284-286.

54. Матвеева И.Н., Кузнецов Д.П., Кочиш Т.Ю., Кочиш И.И., Гринь С.А. Очистка и концентрирование респираторно-синцитиального вируса крупного рогатого скота. // Статья в материалах Международной научно-практической конференции «Актуальные проблемы инфекционной патологии и иммунологии животных». - Москва. - 2006.-с. 282-283.

55. Кузнецов Д.П., Кузнецова С.В., Сазанова Э.Я., Гринь С.А. Иммуногенные свойства отдельных гликопротеидов вируса инфекционного ринотрахеита крупного рогатого скота. // Материалы международной научно-практической конференции, посвященной 80-летию со дня рождения И.А. Хорькова «Научные основы производства ветеринарных биологических препаратов». - Щелково. - 2006. - с. 75-77.

56. Кузнецов Д.П., Кузнецова С.В., Сазанова Э.Я., Гринь С.А. Гибридомы, продуцирующие антитела к антигенам вируса инфекционного ринотрахеита крупного рогатого скота. // Материалы международной научно-практической конференции, посвященной 80-летию со дня рождения И.А. Хорькова «Научные основы производства ветеринарных биологических препаратов». - Щелково. - 2006. - с. 77-80.

57. Кочиш И.И., Самуйленко А.Я., Еремец В.И., Кочиш Т.Ю., Гринь С.А., Матвеева И.Н., Филиппов С.Ю., Чулков А.К., Кржижановская Е.В. Разработка тест-системы ИФА для диагностики респираторно-синцитиальной инфекции. // Материалы Международной научно-практической конференции «Актуальные проблемы молекулярной диагностики в ветеринарной медицине и биологии». - Крым. - 2007.-с. 116-119.

58. Кочиш И.И., Самуйленко А.Я., Еремец В.И., Кочиш Т.Ю., Гринь С.А., Матвеева И.Н., Филиппов С.Ю., Чулков А.К., Кржижановская Е.В. Тест-система ИФА для диагностики парагриппа-3. // Материалы Международной научно-практической конференции «Актуальные проблемы молекулярной диагностики в ветеринарной медицине и биологии». - Крым. - 2007.-с. 120-122.

59. Самуйленко А.Я., Рубан Е.А., Гринь С.А., Кржижановская Е.В., Чулков А.К. Производство культуральной вакцины против гриппа птиц с использованием блочно-модульных гибких технологических линий. // Материалы научно-практической конференции «Грипп птиц: профилактика и меры борьбы». - Москва. - 2007.-с. 75-79.

60. Школьников Е.Э., Коломнина Г.Ф., Самуйленко А.Я., Гринь С.А., Шегидевич Э.А., Ставцева Л.Я., Сидоров М.А., Скородумов Д.И., Панин А.Н., Малик Е.В., Кржижановская Е.В., Чулков А.К. «Способ получения гипериммунной сыворотки против гемофилеза, стрептококкоза и пастереллеза свиней». Заявка на патент №2007123692 от 20.06.2007 г.

61. Скичко Н.Д., Гуславский А.И., Самуйленко А.Я., Школьников Е.Э., Красуткин С.Н., Чипиус Ю.Г., Висящая Т.Ф., Гринь С.А., Кржижановская Е.В., Чулков А.К. «Способ увеличения выхода культуры клеток из перепелиных эмбрионов». Заявка на патент №2007142025 от 15.11.2007 г.

62. Гринь С.А., Школьников Е.Э., Коломнина Г.Ф., Меньшенин В.В., Кржижановская Е.В., Чулков А.К., Скородумов Д.И., Старцева Л.Я., Малик Е.В. Изучение гипериммунной сыворотки против гемофилеза, стрептококкоза и пастереллеза свиней на продуцентах-свиньях. // Материалы Международной научно-практической конференции «Научные основы производства ветеринарных биологических препаратов».-Щелково-2007. с. 249-253.

63. Клюкина В.И., Гринь С.А., Рахманин П.В., Проничев А.Б. Получение и изучение иммунохимических свойств компонентов вируса бешенства. // Материалы Международной научно-практической конференции «Научные основы производства ветеринарных биологических препаратов».-Щелково-2007. с. 86-90.

64. Филиппов С.Ю., Гринь С.А., Кузнецов Д.П., Кузнецова С.В. Поверхностные антигены вируса парагриппа-3 крупного рогатого скота. Материалы Международной научно-практической конференции «Научные основы производства ветеринарных биологических препаратов».-Щелково-2007. с. 111-115.

65. Матвеева И.Н., Сивков Г.В., Гринь С.А., Кочиш И.И., Кочиш Т.Ю. Изучение репродукции вируса аденовирусной инфекции крупного рогатого скота. Материалы Международной научно-практической конференции «Научные основы производства ветеринарных биологических препаратов».-Щелково-2007. с. 110-121.

66. Матвеева И.Н., Сивков Г.В., Гринь С.А., Кочиш Т.Ю., Кочиш И.И., Кржижановская Е.В., Чулков А.К. Концентрирование и очистка вируса аденовирусной инфекции крупного рогатого скота. Материалы Международной научно-практической конференции «Научные основы производства ветеринарных биологических препаратов».-Щелково-2007. с. 122-125.

67. Сивков Г.В., Кочиш И.И., Кочиш Т.Ю., Гринь С.А., Матвеева И.Н., Кржижановская Е.В., Чулков А.К. Разработка компонентов тест-системы ИФА для определения уровня антител к возбудителю аденовирусной инфекции крупного рогатого скота. Материалы Международной научно-практической конференции «Научные основы производства ветеринарных биологических препаратов».-Щелково-2007. с. 125-130.

68. Самуйленко А.Я., Рубан Е.А., Еремец В.И., Гринь С.А. Клюкина В.И., Люлькова Л.С., Матвеева И.Н., Павленко В.С., Лехошерстова С.В. Современные биотехнологические процессы и иммунологические методы при промышленном производстве ветеринарных препаратов (диагностикумов). Материалы Международной научно-практической конференции «Научные основы производства ветеринарных биологических препаратов».-Щелково-2007. с. 5-6.

Размещено на Allbest.ru