Эритроцитарный гомеостаз у сельскохозяйственной птицы при адаптации к стрессорам

Особенность регуляторных механизмов, складывающихся в эритроне на 9-32-е сут, - их направленность на удержание в пределах контрольных величин стандартных гематологических показателей, объёма эритроцитарной массы, снижение микровязкости эритроцитов (понижение MCH и MCHC), включение перераспределительных реакций, повышение коэффициента гемоконцентрации (К) и разжижение крови, поддерживающих её реологические свойства на минимальном для процессов жизнедеятельности уровне. Снижение ПЭМ, СКХ и стабилизацию мембран гормонами стресса (Перцева М.Н., 1989; Resnitzky P. et al., 1972), способствующих увеличению времени циркуляции эритроцитов в кровяном русле, рассматриваем как адаптивную реакцию.

При моделировании стресса отмечена высокая вариабельность выраженности стресс-реакции. Индивидуальные проявления динамики количественно-качественных параметров эритроцитарного гомеостаза были более выражены у птиц, подвергнутых хроническому стрессу. Например, у петуха № 3.3-3 на 3-и сут кислотный гемолиз завершался на 3,5 мин. (рис. 9), а на 9-е сут продуцировались эритроциты двух популяций, разрушающихся на 2-й (50%) и 2,5-й (50%) минутах гемолитического процесса.

Рис. 9. Дифференциальные кислотные эритрограммы петуха № 3.3-3

На 25-е сут максимальная скорость гемолиза наблюдалась на 2-й мин. (80%), а через 2,5 мин. все эритро-циты были разрушены. На 32-е сутки в кровотоке присутствовали исключительно клетки низкой стойкости (до 100%), разрушающиеся на 2-й минуте.

Следовательно, при затяжном стрессе в течение 2-32-х суток сохраняется дисбаланс эритроцитарного гомеостаза, обусловленный в первые сутки поступлением в кровоток депонированной крови, а затем малогемоглобинизирован-ных макроцитов-сфероцитов пониженной резистентности. Прибавка ретикулоцитов в периферической крови в первую неделю стрессирования достигается посредством сокращения времени их созревания, а восполнение возросших потребностей организма в кислороде при низкой резервной мощности эритропоэза - за счёт увеличения длительности циркуляции эритроцитов в кровотоке.

Для выявления закономерностей динамических перестроек в эритроне птицы при хроническом стрессе применён метод корреляционного анализа. В первую неделю достоверные статистические связи имели место преимущественно между показателями, отражающими кинетику эритропоэза и интенсивность гемолиза. В ходе второй недели (9-е сут) были обнаружены статистические зависимости, связанные с деструктивными процессами в эритроне и степенью интоксикации организма, например, между значениями ВЭГ и СЕЭ (r = 0,85). На 18-25-е сут выявлялись корреляционные зависимости исключительно между параметрами, отражающими кинетику эритропоэза, и лишь на 32-е сутки был обнаружен эффект преобладания зависимостей между значениями морфологических параметров клетки и стандартных гематологических, актуализируя значимость изучения функциональной морфологии эритроцитов в дифференциальной диагностике состояния особи в естественных и измененных условиях жизнедеятельности.

1.4 Влияние экспериментально смещенного гликемического гомеостаза на картину красной крови

Выпаивание птице раствора глюкозы вызывало максимальную гипергликемию в первые сутки (11,56±0,31 против 8,79±0,16 ммоль·л^-1 в контроле; p<0,01). Гипергликемическая фаза сохранялась в течение двух недель. На 15-, 23- и 29-е сут отмечено снижение уровня глюкозы в крови соответственно на 3,58; 8,41 и 14,93% (p<0,05) по сравнению с контролем. После отмены глюкозной нагрузки восстановление гликемии наблюдалось на 36-е сут (8,71±0,12 ммоль·л^-1). В первые сутки на фоне гипергликемии отмечено снижение КЕК, общего гемоглобина, содержания и концентрации гемоглобина в единичном эритроците соответственно на 16,044; 3,66; 14,01 и 9,66 % (рис. 10).

Установлено что средние габариты эритроцита были несущественно выше контроля, коэффициент гемоконцентрации (К) в пределах контрольных величин - (1,640±0,090)·10^-13л и (1,698±0,15)·10^-13л соответственно. Все характеристики крови имели высокие коэффициенты вариации. На 3-и сут на фоне гипергликемии при сниженном числе эритроцитов и показателя гематокрита достоверный прирост гемоглобина в крови, содержания и концентрации гемоглобина в отдельном эритроците составил соответственно 8,59; 44,56 и 19,55%. Полагаем, что гипоксия и снижение КЕК инициировали поступление в сосуды депонированной крови. Повышение КЕК (на 8,60%), появление в кровотоке гиперхромных эритроцитов, а также увеличение среднего объёма и поверхности мембраны клеток отражают развитие процесса адаптации в эритроне. На 7-е сут качественные характеристики эритроцитов, КЕК и МСНС были близки к контролю; выявлены достоверный прирост среднего объёма и площади поверхности эритроцита. Снижение удельной поверхности (на 15,87%; p<0,01), продукция гиперхромных эритроцитов-макроцитов и повышение гематокрита вызваны омоложением популяции, новообразованием клеток со сниженными реологическими свойствами. Повышение коэффициента гемоконцентрации до (2,020±0,216)·10¹³л (в контроле (1,670±0,079)·10^-13л) и разжижение крови частично компенсируют негативную сторону адаптации. Обнаружено, что через две недели выпаивания глюкозы (15-е сутки) при «формальной» нормогликемии идет омоложение эритроцитарного пула гипохромными микроцитами, не способными понизить гипоксию (см. рис. 10), тем не менее установленные особенности важны для повышения текучести крови, достигаемой продукцией большого числа эритроцитов-микроцитов (5,03±0,47·10¹²л^-1) с удельной поверхностью, приближающейся к контролю.

Рис. 10. Влияние глюкозной нагрузки на состояние эритроцитарного гомеостаза у петухов. Контроль n = 15, опыт n = 17. Обозначения, как на рис. 7

В результате сопоставительного анализа морфофункциональных показателей красных клеток с месячной динамикой отдельных биохимических характеристик крови было установлено, что изменения в эритроне у петухов подопытных групп сопряжены с фазной динамикой количественного и качественного состава липидов и белков крови. Так, в 1-, 3-, 7-е сут при повышении концентрации глюкозы в крови происходило снижение содержания общих липидов и достоверное повышение холестерола и триацилглицеролов. Направленность динамики активности аспартат- и аланинаминотрансфераз отражала угнетение метаболизма белка и повышение проницаемости клеточных мембран. Инициируемые нарушением гликемического гомеостаза угнетение метаболизма белков и фазные колебания концентрации общих липидов и липидных метаболитов, в сочетании с гипоксией и нарушением кислородного режима в тканях, ускоряют процессы ПОЛ, СРО мембран, которые ведут к их деструкции и стрессовым изменениям в мембранно-рецепторном комплексе. Таким образом, флуктуации уровня глюкозы в крови служат толчком к возникновению цепной биохимической реакции, вызывая фазные колебания состава крови и свойств эритроцитов. Это положение находится в согласии с известными теоретическими данными (Владимиров Ю.А., Арчаков А.И., 1972; Галенок В.А. и соавт., 1987; Бондарь Т.П. и соавт., 2003; Baynes W., 1991; Ceriello A., Giugliano D., 1991; Jarret R.J., 1992).

На 23-и сутки гипогликемии сопутствуют эритроцитоз, повышение концентрации общего (на 19,91%), внутриклеточного (на 47,43%) гемоглобина и КЕК (на 19,86%). Отмечены также существенные структурные изменения клеток - продуцируются микроциты-планоциты; при сниженном объёме эритроцит приобретает значительный запас площади поверхности (S/V = 2,290±0,16; p<0,05). На 29-е сутки сохраняется гипогликемия, вновь понижается КЕК - на 18,44% (p<0,01) по сравнению с предыдущими сутками и на 5,25% - в сопоставлении с показателями контрольной группы. В этих условиях реакцию птицы на системном уровне рассматриваем с позиции адаптации к гипоксии: эритроцитоз, снижение количества общего и внутриклеточного гемоглобина, продукция микроцитов, а также перераспределительные реакции в организме и разжижение крови (повышение коэффициента К до (2,143±0,188)Ч10^-13л; p<0,05) способствуют снижению гипоксической нагрузки на организм.

По результатам фоновых исследований установлено, что стандартные показатели, формирующие реакцию периферического звена эритрона в норме, - число эритроцитов, гематокрит и уровень глюкозы в крови - образуют множественные корреляционные связи со структурно-функциональными характеристиками эритроцитов. В первые сутки повышение концентрации глюкозы в крови сопряжено с понижением числа достоверных корреляций и образованием новых тесных положительных связей с объёмом (r = 0,83), площадью поверхности мембраны (r = 0,84) и отрицательных - с числом эритроцитов (r = -0,92), средним диаметром (r = -0,91), концентрацией общего гемоглобина (r = -0,95) и КЕК (r = -0,95). На 3-и сут наибольшее число достоверных связей формируют эритроциты: положительные с индексом сферичности, средним диаметром, удельной поверхностью клетки, КЕК и отрицательные - с уровнем гликемии, средним объёмом, коэффициентом гемоконцентрации. По-прежнему в адаптивном оптимальном поиске системы крови велика роль гликемии (9,86±0,25 ммоль·л^-1; p<0,01). Показано, что положительный функциональный результат третьих суток адаптивного периода - увеличение КЕК и снижение гипоксической нагрузки на организм птицы. В 7-15-е сут напряжение в эритроне отражают снижение (до 20-28) числа достоверно коррелирующих связей, преимущественно с качественными характеристиками эритроцитов, способствующих устранению гипоксии. На 23-и, 29-е сут на фоне затянувшегося смещения гликемического гомеостаза статистические связи устанавливаются исключительно в зоне структурных параметров эритроцитов, следовательно, в рамках геометрии адаптивного изменения биосистемы. Таким образом, глюкоза и гипергликемия в 1-7-е сут - сильные стресcфакторы, инициирующие в организме птицы нарушения эритроцитарного гомеостаза по типу хронического стресса: снижение числа эритроцитов, гематокрита, концентрации общего и внутриклеточного гемоглобина и удержание КЕК на уровне значений, близких к контролю. Гипогликемическая фаза (15-, 23-, 32-е сут) обусловливает включение гомеостатических механизмов, направленных на адаптацию к гипоксии: эритроцитоз, продукция микроцитов, понижение гематокрита и содержания гемоглобина в отдельном эритроците, а также повышение удельной поверхности и разжижение крови (при низких значениях КЕК).

1.5 Влияние полиминеральной добавки «Экос» на структурно-функциональный статус эритроцитов крови утят, цыплят-бройлеров и кур-несушек

Установлено, что введение в рацион утят «Экос» (150 мг·кг^-1 массы тела) обеспечило увеличение числа эритроцитов и гемоглобина (табл. 2). Объём крови и эритроцитарной массы возрастали соответственно до 184,88±4,07 и 84,51±4,24 мл против 161,46±4,42 и 72,17±1,30 мл в контроле, а обеспеченность утят гемоглобином - до 10,39±0,73 г·кг^-1 (в контроле 8,92±0,93 г·кг^-1; p<0,05), что способствовало повышению КЕК и созданию резерва кислорода в организме, необходимого для интенсивного роста и обслуживания напряжённого метаболизма. При значительной ригидности ядерных эритроцитов в поддержании кислородного гомеостаза существенное значение имеет объём плазмы, отражающий состояние гидратации / дегидратации тканей, в том числе эритроцитов. У птицы, получавшей «Экос», разжижение крови (повышение количества плазмы до 100,39±2,10 мл и значения коэффициента гемоконцентрации до (2,50±0,08)Ч10¹³л^-1; в контроле соответственно 89,25±2,11 мл и (2,20±0,05)Ч10¹³л^-1) - важная адаптивная реакция, предупреждающая сгущение крови и нарушение микроциркуляции.

Таблица 2. Показатели дыхательной функции крови при включении в рацион «Экос»

Примечание: ¹ - показатели 30-суточных утят - в знаменателе; ² - показатели кур-несушек при дозировке «Экос»1000 мг·кг^-1 - в знаменателе. RBC - эритроциты; HCT - гематокрит; HGB - гемоглобин; MCHC - концентрация гемоглобина в единичном эритроците; КЕК - кислородная емкость крови; G - средний диаметр эритроцита; MCV_э - средний объём эритроцита; MCV_я - средний объём ядра; S_э - средняя площадь поверхности эритроцита. Достоверность различий с контролем (критерий Стьюдента), р: ^* - <0,05; ^** - <0,01

Средние габариты клеток у всей обследованной птицы находились в пределах нормы (см. табл. 2), но «Экос» способствовал снижению среднего объёма, а следовательно, повышению скорости поглощения кислорода гемоглобином, т.е. при прочих равных условиях эритроциты утят, получавших минеральную добавку, имели преимущества в осуществлении дыхательной функции.

Функциональная активность поверхности эритроцита обусловлена присутствием гемоглобина. Применение «Экос» вызывало снижение площади поверхности клетки, но повышало содержания гемоглобина на единицу ее поверхности до (21,89±1,95)Ч10¹⁴·г^-1 - против (18,23±1,82)Ч10¹⁴ г^-1 в контроле. Коэффициент элонгации эритроцитов выше у молодой птицы, его значения увеличивались под влиянием «Экос» у всех подопытных утят, делая клетки более эффективными в выполнении дыхательной функции. На процессы оксигенации крови заметное влияние оказывает концентрация гемоглобина в отдельном эритроците: она понижалась с возрастом, но повышалась при скармливании минеральной добавки.

Кариометрический анализ позволил выявить увеличение средних габаритов и объёма ядер эритроцитов у 30-суточной птицы всех подопытных групп, у 60-суточных - при использовании добавки в дозировке 200 мг·кг^-1 массы тела. Известно, что ядра претерпевают функциональные изменения («отеки», набухание, ретракции), обусловленные флуктуациями клеточного метаболизма. Изменение объёма ядер интегрально отражает напряжённость клеточных функций и адаптивный резерв кроветворных органов.

В рационе цыплят-бройлеров «Экос» (100 мг·кг^-1 массы тела) способствовал увеличению в крови числа эритроцитов и гемоглобина (см. табл. 2). Линейные размеры клеток были в пределах нормы, но во II группе отмечено снижение средних габаритов и объёма, выявлены также незначительные изменения гематокрита. При кратном включении в рацион минеральной добавки отмечены повышение гематокрита и несущественный прирост числа и объёма клеток. Поверхность мембраны единичного эритроцита недостоверно снижалась у бройлеров II и не изменялась - III группы. Понижение морфометрического профиля клеток при параллельном увеличении их числа в единице объёма крови обеспечивало рост общей дыхательной поверхности соответственно на 38,11 и 40,20% (p<0,01) во II и III группах. При кратном дозировании «Экос» прослеживалась тенденция к увеличению дыхательной поверхности; содержание гемоглобина в единичном эритроците не изменялось у цыплят II, но повышалось у цыплят III группы.

Включение в рацион цыплят-бройлеров «Экос» не вызвало изменений в величине цветового индекса, но прирост концентрации гемоглобина в отдельном эритроците у цыплят опытных групп (p<0,01) указывает на усиление гемоглобинсинтетических процессов. Снижение коэффициента элонгации на 12,0% (p<0,01) во II и на 4,09% (p>0,05) в III группах и увеличение удельной поверхности эритроцита положительно сказываются на текучести крови у цыплят подопытных групп.

На основе анализа осмотических эритрограмм установлено омоложение эритроцитарного пула в группах цыплят, получавших с кормом «Экос». Эритроциты были также более устойчивы к колебаниям осмоляльности плазмы, а следовательно, и более эффективны в выполнении функций в широком диапазоне изменений осмоляльности среды.

В рационе кур-несушек «Экос» (250 мг·кг^-1 массы тела) не вызвал изменения числа эритроцитов при одновременном приросте (на 8,82 %; p<0,01) содержания гемоглобина в крови. Морфометрические показатели были в пределах нормы (см. табл. 2), но для эритроцитов кур подопытных групп характерно снижение средних габаритов: ядра (на 15,77%; p<0,01) и объёма (на 6,07 %; p<0,05). Достоверное повышение числа эритроцитов и концентрации гемоглобина в группе кур с дозировкой «Экос» 1 г·кг^-1 массы тела сопровождалось снижением показателей гематокрита и геометрического профиля клеток. Снижение площади поверхности эритроцита у кур подопытных групп не отразилось на показателе их общей дыхательной поверхности.

Среднее содержание и насыщенность клеток гемоглобином были выше в группе кур, получавших «Экос». Можно предположить, что в базофильных и полихроматофильных предшественниках эритроцитов кур подопытных групп синтез гемоглобина протекает более интенсивно. Количество гемоглобина, приходящееся на единицу поверхности эритроцита, у подопытных несушек выше на 17,70% (p<0,01), выше также значения цветового показателя. Снижение коэффициента элонгации и удельной поверхности эритроцита свидетельствует о том, что в эритроцитарном пуле подопытных кур значительна доля старых клеток. При тестировании была обнаружена низкая устойчивость эритроцитов несушек подопытных групп к гипотоническим растворам хлорида натрия, особенно в интервале концентраций от 0,60 до 0,15 %; эритроциты подвергались гемолизу также в 0,60 % NaCl. В растворах равной осмоляльности эритроциты кур, которым скармливали 250 мг·кг^-1 «Экос», были менее стойки. Эффективность функционирования эритрона у кур подопытных групп достигается активацией эритропоэза продуктами гемолиза деструктивных форм.

Установлено, что гемопоэтическое действие «Экос» способствовало поддержанию кислородного гомеостаза и оптимальных условий для жизнедеятельности: активации ростовых процессов, повышения сохранности, продуктивности и качества мяса цыплят и утят; у кур - инициации биосинтетических процессов, повышения яичной продуктивности, массы яйца, кальцификации скорлупы. В подопытных группах птицы повышение КЕК на возросший кислородный запрос в связи с напряженным метаболизмом и высокой продуктивностью осуществляется по единой стратегии: активация эритроидного ростка кроветворения (увеличение числа эритроцитов, концентрации общего гемоглобина, насыщенности им эритроцитов) и снижение габаритов, объёма и площади поверхности мембраны. Изменения в составе красной крови носили адаптивный характер и не превышали пределов индивидуальных колебаний.

Выводы

1. Многопиковые (полимодальные) эритрограммы статистического распределения по размерам диаметров эритроцитов отражают структурную, функциональную и кинетическую гетерогенность клеток, формирующих циркулирующий эритроцитарный пул, и являются специфической особенностью эритрона птицы.

2. Трехсуточная инверсия светотемнового цикла (12С-12Т), скученность при клеточном содержании птицы и экспериментальное смещение гликеми-ческого гомеостаза вызывают у петухов состояние стресса, проявляемого эозинопенией, изменениями в лейкоцитарной формуле, фазовой динамикой концентрации глюкозы в крови, нарушениями естественного поведения, моторики, перьевого покрова, а также снижением массы тела при росте потребления корма.

3. Типовая неспецифическая реакция системы эритрона птицы в первые сутки не зависит от первичного фактора, инициирующего стресс, проявляется как дисбаланс эритроцитарного гомеостаза, отмеченный количественными сдвигами стандартных гематологических показателей. Структурная дезоргани-зация циркулирующей эритроцитарной популяции имеет гемолитическую природу - пополнение эритроцитарного клона депонированными клетками и деструктивными стрессорными формами de novo, подвергающимися гемолизу.

4. Процессы регенерации красной крови включают активацию красного ростка костного мозга и зависят от вида, интенсивности и длительности воздействия стрессогенного фактора. После отмены инверсии светотемнового цикла - активация эритропоэза (7-е сут), истощение красного ростка костного мозга и возврат базовых характеристик эритрона (через фазу избыточного гомеостатирования) к уровню контроля (равновесное состояние, 15-е сут), дизадаптация (23-и сут, состояние внутреннего десинхроноза) и начальная ресинхронизация (29-е сут) функциональной системы крови; в условиях скученности на фоне истощения пластической функции костного мозга - вялая активация эритропоэза (3-, 5-е сут) и монотонное угнетение в последующие 9-32-е сутки.

5. Показатели кинетики эритропоэза: число ретикулоцитов в крови и степень их зрелости, средняя длительность жизненного цикла эритроцитов, скорость элиминации, суточная продукция эритроцитов и резервная мощность эритропоэза, отражают уровень активности эритропоэза и зависят от интенсивности стрессора. Интегральный показатель повышения активности костного мозга и развития репаративных процессов в эритроне птицы на стрессорную гипоксическую стимуляцию - увеличение числа ретикулоцитов и ретикулоцитарного индекса.

6. Ключевое звено в реализации адаптации системы красной крови к экстремальному воздействию - структурно-функциональная лабильность эритроцитов. При коротком жизненном цикле клеток красной крови постоянно перестраивается структура циркулирующего эритроцитарного пула, её динамика служит маркёром стрессового состояния птицы.

7. Из маркёров стресса в ходе адаптивного периода близки к восстановлению число эритроцитов, концентрация гемоглобина, гематокрит; морфометрические характеристики (средний объём, сферический индекс, толщина эритроцита) не восстанавливаются; длительный период восстановления имеют показатели, отражающие кинетику эритропоэза (количество, скорость созревания ретикулоцитов; длительность жизненного цикла эритроцитов и суточная продукция; резервная мощность эритропоэза).

8. Изменения в центральном и периферическом звеньях эритрона, направленные на устранение гипоксии, реализуются двумя путями стрессорной перестройки. При остром стрессе повышение КЕК достигается прибавкой общей поглотительной поверхности крови для контакта гемоглобина с кислородом посредством выброса депонированной крови, развития гемоконцентрационного эритроцитоза и последующей активацией красного ростка костного мозга. При затяжном стрессе сглаживание гипоксии происходит через включение регуляторных механизмов адаптации к ней (без повышения КЕК) посредством продукции качественно новых эритроцитов, сохраняющих активность в условиях высокого кислородного запроса на фоне перераспределительных гомеостатических реакций, удлинения клеточного цикла и перевода эритрона на «экономный режим» при высоком напряжении функциональных систем организма. Обязательный этап стрессорной структурной перестройки эритроцита - включение клеточных регуляторных механизмов и изменение объёма.

9. В ходе реабилитационного периода структурно-функциональные свойства эритроцитов и гематологические профили высоко реактивны к флуктуации уровня гликемии; специфическая сопряженность гипо- и гипергликемических состояний с отдельными характеристиками эритроцитов имеют определенную динамику.

10. Продолжительное введение глюкозы способствует развитию гипер-гликемии в 1-, 3-, 7-е сут и гипогликемии в 15-, 23-, 29-е сут. Гипергликемия (или глюкоза) в первые две недели как сильные стрессогенные факторы инициируют нарушения эритроцитарного гомеостаза в организме птицы по типу затяжного стресса: снижение числа эритроцитов, гематокрита, концентрации общего и внутриклеточного гемоглобина и удержание КЕК на уровне значений контрольной птицы. Развитие гипогликемической фазы (15-, 23-, 32-е сут) обусловливают включение регуляторных механизмов, направленных на улучшение микроциркуляции и адаптацию к гипоксии (понижение гематокрита, эритроцитоз, продукция гипохромных эритроцитов-микроцитов, увеличение удельной поверхности и разжижение крови).

11. Количественным и структурным сдвигам со стороны показателей красной крови под влиянием десинхронизирующих факторов предшествуют перестройка физико-химических свойств мембран, изменение функционального статуса и развитие эритроцитарных расстройств: в адаптивном периоде после отмены инверсии светотемнового цикла в 1-, 3-, 7, 15-е сут - понижение устойчивости к кислотному и гипоосмотическому гемолитикам, повышение проницаемости (ПЭМ) и снижение сорбционной ёмкости (СЕЭ) на фоне прироста ВЭГ, доли разрушенных эритроцитов и гипергликемии; на 23-, 29-е сут - тенденция к восстановлению измененных мембранных свойств при высоких значениях коэффициента вариации, отражающих хаотичную ситуацию в эритроне. В условиях затяжного стресса высокая повреждаемость мембран (увеличение ПЭМ, ВЭГ, СКХ, доли гемолизированных клеток и сокращение времени кислотного гемолиза) отмечена на 18-, 25- и 32-е сут адаптивного периода. Динамика СЕЭ отражает развитие глубокой интоксикации в организме подопытной птицы.

12. Полиминеральная добавка «Экос», полученная на основе гидроалюмосиликатов месторождений Белгородской области, в рационе птицы оказывает гемопоэтическое действие: установлены положительная перестройка функциональной морфологии эритроцитов (уменьшаются линейные размеры, объём и площадь поверхности, увеличивается коэффициент элонгации), прирост в крови числа эритроцитов, гемоглобина и его внутриклеточной концентрации; увеличение объём крови, плазмы, эритроцитарной массы, КЕК. Влияние «Экос» на систему эритрона отражает компенсаторную смену фонового эритропоэза и стабилизацию параметров красной крови в пределах верхних значений физиологической нормы.

13. Оптимальные дозы «Экос» в рационе откормочных цыплят - 100 мг·кг^-1, утят - 150 мг·кг^-1, кур - 250 мг·кг^-1 массы тела. Применение «Экос» в рационе утят, цыплят-бройлеров и кур-несушек положительно влияет на метаболизм, активирует рост, повышает резистентность и продуктивность. Улучшаются диетическая ценность и экологическая чистота продукции.

14. Разработанные способы изучения клеток крови сельскохозяйственной птицы, обобщающие известные подходы, применяемые в клинической гематологии, позволяют осуществлять комплексное исследование эритроцитарного гомеостаза, а также направление его дезорганизации под влиянием стрессоров разной природы. Они могут быть применены при тестировании адаптивного потенциала птицы в научных исследованиях и в ветеринарной практике.

Практические предложения

1. Ветеринарным лабораториям, специализирующимся на диагностике болезней птицы, рекомендованы методики оперативной оценки функционального состояния организма и прогнозирования развития адаптационного или патологического процессов, протекающих в организме птицы.

2. Для улучшения физиологического состояния, инициации эритропоэза, повышения физиологического статуса и общей резистентности организма, сохранности поголовья, улучшения качества и экологической чистоты мяса птицы и яиц рекомендовано скармливать «Экос» в качестве полиминеральной добавки к сбалансированным рационам молодняка птицы, выращиваемой на мясо, и курам-несушкам. Оптимальные дозы «Экос» в рационе откормочных цыплят - 100 мг·кг^-1, утят - 150 мг·кг^-1, кур - 250 мг·кг^-1 массы тела.

3. Установленные физиологические особенности эритроцитарного гомео-стаза птицы, и на их основе разработанные способы исследования красной крови, рекомендовано использовать в фундаментальных исследованиях при изучении мембранных механизмов регуляции клеточного гомеостаза, а также в учебном процессе при подготовке студентов по специальностям «Биология», «Ветеринарная медицина», «Зоотехния».

Список научных работ, опубликованных по теме диссертации

1. Липунова Е.А. О механизме действия инсулина на секрецию желудочного сока у кур / Е.А. Липунова // Физиологический журнал СССР. - 1972. - Т. 58, № 10. - С. 1603-1608.

2. Липунова Е.А. Влияние инсулина на желудочную секрецию у кур / Е.А. Липунова // Вопросы физиологии человека и животных. - Минск: Изд-во БГУ, 1972. - Вып. 3. - С. 111-117.

3. Липунова Е.А. Адаптация физиологических процессов у кур к введению инсулина / Е.А. Липунова // Механизмы адаптации и компенсации физиологических функций в экстремальных условиях. Тр. Западно-Сибирского объединения физиологов, биохимиков и фармакологов. - Томск: Изд-во ТГУ, 1977. - С. 180-181.

4. Липунова Е.А. Изменение картины крови у птиц и млекопитающих под влиянием инсулина / Е.А. Липунова // Вопросы эволюционной физиологии: VII науч. совещание по эволюционной физиологии, посвященное памяти Л.А. Орбели. - Л.: Изд-во АН СССР, 1978. - С. 139.

5. Липунова Е.А. Реактивность системы крови на введение инсулина в ряду позвоночных животных / Е.А. Липунова, П.В. Полетаев // Проблемы общей и возрастной физиологии в педагогических вузах страны: материалы Всесоюзной конф.:
в 2 ч. - Ставрополь: Изд-во СГПИ, 1983. - Ч. 2. - С. 153-154.

6. Липунова Е.А. Влияние инсулина на работу сердца у стрессируемых кур / Е.А. Липунова, Е.Г. Яковлева, Т.А. Погребняк // Фармакологические и токсикологические аспекты применения лекарственных веществ в животноводстве: сб. науч. тр. Московской ветеринарной академии им. К.И. Скрябина. - М, 1992. - С. 43-44.

7. Липунова Е.А. Влияние натрия аскорбината на напряженность вакцинального иммунитета к болезни Ньюкасла у кур / Е.А. Липунова, Е.Г. Яковлева // Фармакологические и токсикологические аспекты применения лекарственных веществ в животноводстве: сб. науч. тр. Московской ветеринарной академии им. К.И. Скрябина. - М., 1992. - С. 44-45.

8. Липунова Е.А. Влияние натрия аскорбината на содержание общего белка и глобулинов в сыворотке крови цыплят / Е.А. Липунова, Е.Г. Яковлева, Т.И. Соколовская // Болезни сельскохозяйственных животных и меры борьбы с ними: межвуз. сб. науч. тр. - Белгород: Изд-во БГСХИ, 1992. - С. 47-52.

9. Липунова Е.А. Исследование сердечной деятельности у птиц при введении инсулина на фоне стрессовых воздействий / Е.А. Липунова // Материалы IV Междунар. симпозиума по сравнительной электрофизиологии. - Сыктывкар: Изд-во Коми АН СССР, 1977. - С. 201.

10. Липунова Е.А. Влияние многократного введения инсулина на динамику содержания глюкозы в крови и гликогена в тканях кур / Е.А. Липунова //Актуальные проблемы экологии на рубеже третьего тысячелетия и пути их решения: материалы Междунар. науч.-практ. конф. (Брянск, 15-17 июня 1999 г.). - Ч. 1. - Брянск: Изд-во БГСХА, 1999. - С. 248-253.

11. Липунова Е.А. Влияние гидроалюмосиликатного сорбента на элиминацию тяжёлых металлов и накопление витаминов в организме птицы /Е.А. Липунова, А.А. Беляева // Миграция тяжёлых металлов и радионуклидов в звене: почва - растение (корм, рацион) - животное - продукт животноводства - человек: материалы Первого Междунар. симпозиума (Великий Новгород, 28-30 марта 2000 года). - В. Новгород: Изд-во «Виконт», 2000. - С. 99-102.

12. Липунова Е.А. Реакция системы эритрона сельскохозяйственной птицы на введение в рацион гидроалюмосиликатного сорбента / Е.А. Липунова // Научные ведомости Белгородского государственного университета. Сер. Экология. - 2000. - № 3 (12). - С. 70-76.

13. Липунова Е.А. Влияние гидроалюмосиликатного сорбента на общую резистентность кур-несушек / Е.А. Липунова, А.А. Беляева // Экологическая безопасность и здоровье людей в XXI веке: материалы VI Всерос. науч.-практ. конф. (г. Белгород, 10-12 октября 2000 г.). - Белгород: Изд-во БелГУ, 2000. - С. 10-12.

14. Липунова Е.А. Эффективность применения гидроалюмосиликатного сорбента для снижения уровня тяжёлых металлов в организме кур-несушек / Е.А. Липунова, А.А. Беляева // Миграция тяжёлых металлов и радионуклидов в звене: почва - растение (корм, рацион) - животное - продукт животноводства - человек: материалы II Междунар. симпозиума (Великий Новгород, 28-30 марта 2001 г.). - В. Новгород: Изд-во «Виконт», 2001. - С. 197-201.

15. Липунова Е.А. Цитокинетические показатели эритроцитарного баланса у птиц в физиологических условиях / Е.А. Липунова, М.Ю. Скоркина // Физиология организмов в нормальных и экстремальных состояниях: сб. статей / под ред. В.И. Гридневой. - Томск: Изд-во ТГУ, 2001. - С. 31-33.

16. Липунова Е.А. Динамические сдвиги в системе эритрона у птиц при экстремальных воздействиях / Е.А. Липунова, М.Ю. Скоркина // Научные ведомости Белгородского государственного университета. Сер. Медицина. - 2002. - № 1 (16). - С. 101-106.

17. Липунова Е.А. Устойчивость эритроцитарных мембран в условиях хронического стресса / Е.А. Липунова, М.Ю. Скоркина // Приспособления организмов к действию экстремальных экологических факторов: материалы VII Междунар. науч.-практ. конф. (г. Белгород, 5-6 ноября 2002 г.). - Белгород: Изд-во БелГУ, 2002. - С. 44-47.

18. Липунова Е.А. Регенерация системы красной крови у птиц при стрессировании / Е.А. Липунова, М.Ю. Скоркина // Актуальные проблемы медицины и биологии: сб. науч. работ / под ред. Н.Н. Ильинских. - Томск: Изд-во СГМУ, 2003. - Вып. 2. - С. 25-30.

19. Скоркина М.Ю. Эритрокинетика у птиц в условиях хронического стресса / М.Ю. Скоркина, Е.А. Липунова // Науки о человеке: сб. статей по материалам IV Междунар. конгресса молодых ученых и специалистов / под ред. Л.М. Огородовой, Л.В. Капилевича. - Томск: Изд-во СГМУ, 2003. - С. 175-177.

20. Использование природного гидроалюмосиликата в животноводстве и ветеринарии: метод. рекомендоции. Переработанные и дополненные / А.А. Шапошников, Н.А. Мусиенко, А.И. Везенцев, Г.И. Горшков, Е.А. Липунова и др. - Белгород: Изд-во БГСХА, 2003. - 22 с.

21. Липунова Е.А. Оценка функционального состояния эритроцитарных мембран у птиц в условиях напряженного эритропоэза / Е.А. Липунова, М.Ю. Скоркина // Актуальные проблемы биологии, медицины и экологии: сб. науч. работ / под ред. Н.Н. Ильинских. - Томск: Изд-во СГМУ, 2004. - Т. 3, №1. - С. 142-144.

22. Липунова Е.А. Влияние полиминеральной кормовой добавки «Экос» на обмен кальция и фосфора в организме кур-несушек / Е.А. Липунова, С.Д. Чернявских // Вестник БГТУ им. В.Г. Шухова. - 2004. - № 8, Ч. 2. - С. 94-96.

23. Липунова Е.А. Биоэлектрическая активность мозга и сердца у птиц при адаптации к стрессу / Е.А. Липунова, Т.А. Погребняк // Российский физиологический журнал им. И.М. Сеченова. - 2004. - Т. 90, № 8. - С. 208.

24. Липунова Е.А. Влияние гипоосмотической нагрузки на устойчивость эритроцитарных мембран /Е.А. Липунова, М.Ю. Скоркина, А.С. Зеленцова // Современные наукоёмкие технологии. - 2004. - № 1. - С. 94-95.

25. Липунова Е.А. Регуляция эритроцитарного баланса у птиц в условиях острого стресса / Е.А. Липунова, М.Ю. Скоркина // Успехи современного естествознания. - 2004. - № 3. - С. 34-35.

26. Липунова Е.А. Морфофункциональная характеристика эритроцитов утят при использовании в рационе полиминеральной кормовой добавки / Е.А. Липунова // Проблемы природопользования и экологическая ситуация в Европейской России и сопредельных странах: материалы Междунар. науч. конф. (г. Белгород, 13-16 сент. 2004 г.). - М.; Белгород: Изд-во БелГУ, 2004. - С. 31-33.

27. Липунова Е.А. Особенности эритропоэза у птиц при адаптации к хроническому стрессу / Е.А. Липунова, М.Ю. Скоркина // Актуальные проблемы сохранения устойчивости живых систем: материалы VIII Междунар. науч. экол. конф. (г. Белгород, 27-29 сентября 2004 г.). - Белгород: Изд-во БелГУ, 2004. - С. 113-115.

28. Липунова Е.А. Дыхательная функция крови при включении в рацион утят полиминеральной кормовой добавки / Е.А. Липунова // Сорбенты как фактор качества жизни и здоровья: материалы Всерос. науч. конф. с междунар. участием (г. Белгород, 11-14 октября 2004 г.). - М. ; Белгород: Изд-во БелГУ, 2004. - С. 79-87.

29. Липунова Е.А. Неспецифические реакции эритроцитов птиц в условиях напряженного эритропоэза / Е.А. Липунова, М.Ю. Скоркина // Российский физиологический журнал им. И.М. Сеченова. - 2004. - Т. 90, № 8. - С. 235.

30. Липунова Е.А. Система красной крови. Сравнительная физиология: моногр. / Е.А. Липунова, М.Ю. Скоркина. - Белгород: Изд-во БелГУ, 2004. - 216 с. ISBN 5-9571-0113-3.

31. Липунова Е.А. Способ идентификации субпопуляций эритроцитарной системы / Е.А. Липунова, В.М. Никитин, Н.А. Чеканов, М.Ю. Скоркина // патент на изобретение № 2234701 RU С 1. Белгородский гос. ун-т. - 2002134029; заявл. 17.12.02; опубл. 20.08.2004. - Бюл. № 23. - 12 с.

32. Скоркина М.Ю. Способ определения ретикулоцитов в инкубированной крови птиц / М.Ю. Скоркина, Е.А. Липунова // патент на изобретение
№ 2227280 RU С 2. Белгородский гос. ун-т. - 2002119253; заявл. 16.07.2002; опубл. 20.04.2004. - Бюл. № 11. - 14 с.

33. Липунова Е.А. Способ визуализации форменных элементов крови птиц на одном мазке / Е.А. Липунова, М.Ю. Скоркина // патент на изобретение
№ 2224235 RU С2. Белгородский гос. ун-т. - 2002112129; заявл. 06.05.2002; опубл. 20.02.2004. - Бюл. № 05. - 7 с.

34. Липунова Е.А. Полиминеральная добавка для кур-несушек / Е.А. Липунова, С.Д. Чернявских // Зоотехния. - 2004. - № 7. - С. 20-22.

35. Липунова Е.А. Влияние новой полиминеральной кормовой добавки на морфофункциональное состояние эритроцитов крови утят / Е.А. Липунова // Успехи современного естествознания. - 2004, № 8. - С. 120.

36. Липунова Е.А. К методике оценки функционального состояния системы эритрона лягушек / Е.А. Липунова, М.Ю. Скоркина, А.С. Зеленцова // Бюллетень сибирской медицины. - 2005. - Т. 4. - Приложение 1. - С. 37.

37. Липунова Е.А. Функциональная характеристика эритроцитов крови птиц при глюкозной нагрузке / Е.А. Липунова, М.Ю. Скоркина // Бюллетень сибирской медицины. - 2005. - Т. 4. - Приложение 1. - С. 39.

38. Липунова Е.А. Морфометрическая классификация эритроцитарной популяции лягушек / Е.А. Липунова, М.Ю. Скоркина // Бюллетень сибирской медицины. - 2005. - Т. 4. - Приложение 1. - С. 38-39.

39. Липунова Е.А. Морфометрический анализ печени при включении в рацион кур-несушек кремнийсодержащей кормовой добавки / Е.А. Липунова, С.Д. Чернявских // Успехи современного естествознания. - 2005. - № 11. - С. 49-50.

40. Липунова Е.А. Способ оценки активности эритропоэза / Е.А. Липунова, В.М. Никитин, М.Ю. Скоркина, А.С. Зеленцова // патент на изобретение № 2268463 RU C 1. Белгородский гос. ун-т. - 2004111098; заявл. 12.04.2004; опубл. 20.01.2006. - Бюл. № 02.-9 с.

41. Липунова Е.А. Особенности азотистого обмена у кур-несушек при введении в рацион полиминеральной кормовой добавки / Е.А. Липунова, С.Д. Чернявских // Сорбенты как фактор качества жизни и здоровья: материалы II науч. конф. с междунар. участием, посвящённой 130-летию Белгородского гос. ун-та (г. Белгород, 18-23 сентября 2006 г.). - М. ; Белгород: Изд-во БелГУ, 2006. - С. 138-142.

42. Липунова Е.А. Влияние полиминеральной кормовой добавки на дыхательную функцию крови кур-несушек / Е.А. Липунова // Сорбенты как фактор качества жизни и здоровья: материалы II науч. конф. с междунар. участием, посвящённой 130-летию Белгородского гос. ун-та (г. Белгород, 18-23 сентября 2006 г.). - М. ; Белгород: Изд-во БелГУ, 2006. - С. 142-146.

43. Илющенко В.П. К вопросу о возможности создания селективного энтеросорбента / В.П. Илющенко, Е.А. Липунова // Сорбенты как фактор качества жизни и здоровья: материалы II науч. конф. с междунар. участием, посвящённой 130-летию Белгородского гос. ун-та (г. Белгород, 18-23 сентября 2006 г.). - М. ; Белгород: Изд-во БелГУ, 2006. - С. 92-95.

44. Липунова Е.А. Проницаемость и сорбционная способность мембран эритроцитов крови птиц при фотодесинхронозе / Е.А. Липунова, М.Ю. Скоркина // Вестник Томского государственного университета.- 2006. - Приложение № 21. - С. 89-90.

45. Скоркина М.Ю. Показатели костно-мозгового кроветворения у птиц при экстремальных воздействиях / М.Ю. Скоркина, Е.А. Липунова // Вестник Томского государственного университета.- 2006. - Приложение № 21. - С. 137-138.

46. Воронин И.М. Имплантат для биомедицинского применения и способ стимуляции регенеративного процесса в области повреждения кости / В.М. Воронин, В.М. Никитин, Е.А. Липунова, М.В. Воронин / патент на изобретение № 2336046 RU A. ООО «ВМВ Медицина». - Заявка № 2006143972; заявл. 12.11.2006; опубл. 20.06.2008. - Бюл. № 29. - 11 с.

47. Липунова Е.А. К методике определения цитокинетических показателей эритроцитарного баланса крови птиц /Е.А. Липунова, М.Ю. Скоркина // Научные ведомости Белгородского государственного университета. Сер. Естественные науки. - 2007. - № 5 (36), вып. 2. - С. 68-71.

48. Скоркина М.Ю. Структурная лабильность эритроцитарных мембран и регуляторные процессы при адреналиновой нагрузке in vitro / М.Ю. Скоркина, Е.А. Липунова, А.С. Зеленцова // Научные ведомости Белгородского государственного университета. Сер. Естественные науки. - 2007. - № 5 (36). - С. 72-74.

49. Lipunova E.A. General adaptation reaction of erythrocytic blood Population of birds at photodesynchronose /E.A. Lipunova // European Journal of Natural History, 2007. - №2. - P. 69-70.

50. Skorkina M.Yu. The method of determining the functional cjndition of erythropoesis in frogs / M.Yu. Skorkina, E.A. Lipunova // European Journal of Natural History, 2007. - №2. - P. 64.

51. Липунова Е.А. Использование природных полиминеральных добавок для получения экологически чистого мяса утят и цыплят-бройлеров /Е.А. Липунова // Экология и здоровье: материалы саттелитного симпозиума XX Съезда физиологов России (9 июня 2007 года). - М.: РУДН, 2007. - С. 95-97.

52. Липунова Е.А. Гематологические профили и морфофизиология крови птиц при глюкозной нагрузке / Е.А. Липунова, М.Ю. Скоркина // Гемореология и микроциркуляция (от молекулярных мишеней к органным и системным изменениям): материалы Междунар. конф. (10-13 июня 2007 г. Ярославль). - Ярославль: Изд-во ЯрГПУ им. К.Д. Ушинского, 2007. - С. 141.

53. Липунова Е.А. Физиология крови: монограф. исслед. / Е.А. Липунова,
М.Ю. Скоркина. - Белгород: Изд-во БелГУ. - 2007.- 324 с. ISBN 9785-9571-0305-9

54. Липунова Е.А. Способ определения реактивности эритроцитов крови / Е.А. Липунова, В.М. Никитин, М.Ю. Скоркина. Патент на изобретение № 2350952 RU А. Белгородский гос. ун-т. Заявка № 2007124991, приоритет от 03.09.2007, опубл. 27.03.2009. - Бюл. № 9. - 12 с.

55. Липунова Е.А. Использование природных полиминеральных добавок для получения экологически чистой продукции птицеводства // Проблемы региональной экологии. - 2007. - № 6. - С. 154-156.

56. Lipunova E.A. Metabolic disorders in elderly diabetes patients / Lipunova E.A. // European Journal of Natural History, 2008. - №2. - P. 75.

57. Липунова Е.А. Регуляция формы и объёма эритроцитов в условиях гипоосмии при блокаде Ca²⁺ каналов верапамилом / Е.А. Липунова, М.Ю. Скоркина // Эффективные и безопасные лекарственные средства: материалы Первого Междунар. конгресса ветеринарных фармакологов. - (СПб., 21-23 мая 2008). - СПб., 2008. - С.44.

58. Липунова Е.А. Влияние кальциевой нагрузки на величину ж-потенциала эритроцитов / Е.А. Липунова, М.Ю. Скоркина, Р.В. Деркачёв // Микроэлементы в медицине. - 2008. - Т. 9. - Вып. 12. - С. 21.

59. Липунова Е.А. Влияние природной полиминеральной добавки на структурно-функциональный статус эритроцитов крови утят-бройлеров / Е.А. Липунова // Проблемы региональной экологии. - 2009. - № 1. - С. 141-146.

60. Скоркина М.Ю. Система крови как скриннинг-тест экологического состояния окружающей среды / М.Ю. Скоркина, Е.А. Липунова // Проблемы региональной экологии. - 2009. - № 1. - С. 147-151.

Примечание: жирным шрифтом выделены статьи, опубликованные в литературных источниках по списку ВАК.

Список сокращений

ВЭГ - внеэритроцитарный гемоглобин

К - коэффициент гемоконцентрации

КЕК - кислородная емкость крови

ПЭМ - проницаемость эритроцитарных мембран

СЕЭ - сорбционная емкость эритроцита

СКХ - средняя клеточная хрупкость

СПС - средний процент гемолиза

S/V - удельная поверхность эритроцита

Размещено на Allbest.ru