Цикличность влияния актиномицина D на рост колеоптилей ячменя

Размещено на http://www.allbest.ru/

Кубанский государственный аграрный университет

ЦИКЛИЧНОСТЬ ВЛИЯНИЯ АКТИНОМИЦИНА D НА РОСТ КОЛЕОПТИЛЕЙ ЯЧМЕНЯ

Плотников Владимир Константинович

Репко Наталья Валентиновна

Салфетников Анаталий Алексеевич

Зрелые семена содержат весь метаболический аппарат транскрипции и трансляции, а также долгоживущие РНК, функционирующие при набухании. При замачивании семян на растворах специфических ингибиторов синтеза РНК (актиномицин D, б-аманитин и др.), осуществляемого ДНК-зависимыми РНК-полимеразами, семена растений наклёвываются, и происходит рост корней и проростков за счет долгоживущей РНК семени. Замачивание семян на растворе актиномицина D, по сути предоставляет возможность по косвенным показателям первых часов роста колеоптиля и корней проростков судить о сортоспецифической гетерогенности свойств долгоживущей РНК зрелых семян. Подобная работа была выполнена ранее с сортами озимой мягкой пшеницы. Актиномициновая блокада транскрипции в замачиваемых семенах приводила к снижению интенсивности роста проростков. В наибольшей степени снижался рост корней проростка. Однако действие актиномицина D было не стабильно и сильно варьировало от опыта к опыту. Вероятно, это связано с тем, что скорость поступления актиномицина D в сухое зерно зависит не только от температуры, освещения и влажности (эти условия были стабильны в термостатированных чашках Петри), но и от атмосферного давления, которое менялось неконтролируемо.

Вместе с тем, в ходе этих исследований был отмечен парадоксальный эффект актиномицина D: в концентрации 20 мкг/мл актиномицин не подавлял рост колеотилей (а иногда и корней), а наоборот - стимулировал.

Впервые парадоксальный эффект действия актиномицина D был описан ещё в 1969 году. Гордон Томкинс и др., изучая действие глюкокортикоидов на регуляцию синтеза тирозинаминотрансферазы (ТАТ) в клетках печени, показали, что индукция ТАТ стероидными гормонами не только не снижается, но даже резко стимулируется при блокаде транскрипции актиномицином D.

Эти данные послужили основанием для гипотезы о посттранскрипционном механизме индукции ТАТ глюкокортикоидами, согласно которой предполагается наличие в цитоплазме клеток нестабильного репрессора, синтезируемого особым регуляторным геном. Репрессор препятствует тем или иным способом осуществлению функции мРНК, вызывая, например, её быструю деградацию.

Индукция синтеза фермента стероидными гормонами становится возможной благодаря связыванию ими репрессора. Актиномицин D, блокируя синтез мРНК, приводит к снижению внутриклеточного содержания нестабильного репрессора и вследствие этого к ускоренному синтезу специфического белка. Этот феномен был назван Г. Томкинсом и соавторами «спасением» мРНК, или супериндукцией.

Многочисленные литературные данные о парадоксальном действии актиномицина D во многих случаях индукции синтеза ферментов, увеличения трансляционной активности полирибосом и мРНК в животных и растительных клетках позволяет полагать, что описанная система регуляции имеет широкое распространение. Сообщения об открытии разнообразных ингибиторов трансляции, возможно, имеют отношение к гипотетическому репрессору. И совершенно новую теоретическую трактовку гипотеза Томкинса получает в связи с открытием явления РНК-интерференции, с открытием большого количества малых некодирующих РНК, основная функция которых - инициировать распад ген-специфических мРНК.

Ингибитор синтеза РНК - антибиотик актиномицин D, интеркалируя в ДНК по G-C парам, механически останавливает деятельность всех РНК-полимераз. В первую очередь (в наименьшей концентрации) - РНК-полимеразу 1, осуществляющую синтез рибосомной РНК, так как гены этой РНК особенно богаты G-C парами.

В экспериментах на пшенице было выдвинуто предположение, что распад РНК, гены которой обогащены G-C и потому наиболее чувствительны к блокаде транскрипции актиномицином D, снимает ингибирующее действие на рост проростков пшеницы по той причине, что помимо рРНК, в составе этой группы РНК, могут быть и мРНК белков - ингибиторов роста. Для блокады транскрипции мРНК, гены которых, как правило, обогащены A-U парами, необходима более высокая концентрация актиномицина D и она достигалась при концентрации 40 мкг/мл. Этот феномен интересен с точки зрения сопряжения регуляции экспрессии генов и регуляции роста растений, с которым связаны все основные биологические особенности растения: стрессоустойчивость, фотопериодичность и др.

Поэтому представляло несомненный интерес выяснить, как повлияют разные концентрации актиномицина D на процессы роста проростков разных сортов озимого ячменя, отличающегося от пшеницы по целому ряду вышеупомянутых особенностей, в ходе хранения зерна.

Материал и методы.

Исследования проводили на этиолированных проростках ряда сортов озимого ячменя (Hordeum vulgare L.). Актиномицин D использовали в концентрации от 20 до 60 мкг/мл по 12 мл. на чашку Петри (9 см. в диаметре) и 100 семян ячменя. В каждом эксперименте 2 чашки Петри контрольные (дистиллированная вода) и 2 чашки опытные, каждого сорта. Поскольку актиномицин D обладает фотодинамическим эффектом, все эксперименты проводили в темноте, при 25°С в течение 3-х или 4-х суток.

Результаты и их обсуждение.

В первых двух экспериментах, проведённых в декабре 2013 года, использовалась концентрация 40 мкг/мл при замачивании семян четырёх сортов озимого ячменя урожая этого года. Как и у озимой мягкой пшеницы при этой концентрации актиномицина D подавлялся рост корней на 40-50%, но, в отличие от пшеницы, подавление роста колеоптелей было не достоверно. Увеличение экспозиции семян на растворе актиномицина D до четырёх суток на фоне более выраженного роста увеличивало подавление роста корней до 50-60%, но изменение роста колеоптилей также было недостоверно. В аналогичном эксперименте на 3-х суточных проростках в феврале 2014 года рост корней снижался на 40-50%, как и в первом эксперименте, но актиномицин D вызвал вполне достоверный рост колеоптилей на 23-44%, аналогично тому, как это наблюдалась у пшеницы при концентрации 20 мкг/мл. Рост колеоптилей контрольного варианта в этом эксперименте был самым слабым из всей серии опытов. Всхожесть семян, как в контроле, так и в опыте, была на уровне 30-50% у всех сортов. Следовательно, актиномицин D в концентрации 40 мкг/мл не влиял на всхожесть. На примере сорта Кондрат было изучено влияние разных концентраций актиномицина D. Только концентрация 40 мкг/мл определяла достоверное усиление роста колеоптилей. Действие концентрации 20 мкг/мл было недостоверным, а при концентрации актиномицина D 60 мкг/мл наблюдалась тенденция к подавлению роста колеоптелей. При этом рост корней ступенчато снижался: чем выше концентрация актиномицина D, тем эффективнее подавление роста корней. На всхожесть семян актиномицин D не влиял и в этой концентрации (60 мкг/мл).

В марте концентрация 60 мкг/мл уверенно подавляла рост колеоптилей на 16-36% у всех сортов, взятых в исследование. При этом действие актиномицина D на проростки ячменя сорта Кондрат было более выраженным, чем в феврале. Это относится как к колеоптелям (91% в феврале против 64% в марте), так и к корням (34% против 23%).

В мае 2014 года актиномицин в концентрации 60 мкг/мл достоверно подавлял рост проростков.

Полученные при изучении зерна ячменя, урожая 2014 года. В октябре 2014 года актиномицин D в концентрации 40 мкг/мл вполне достоверно снижал рост как корней, так и колеоптилей.

В это время происходило полное лунное затмение. Вероятно, этим объясняется то, что всхожесть в среднем была только около 10%. Однако проросшие семена росли весьма интенсивно. Это был единственный эксперимент, когда концентрация актиномицина D 40 мкг/мл эффективно подавляла рост колеоптилей всех четырёх сортов ячменя, взятых в исследование. Изложенные выше экспериментальные данные позволяют полагать, что, по мере хранения семян, требуется все большая концентрация актиномицина D, чтобы обеспечить эффект подавление роста.

Как известно, пока зерно живой организм, оно дышит, при этом в основном расходуются углеводы. Следовательно, при хранении количество углеводов уменьшается, за счёт этого вначале возможно даже относительное увеличение белков, среди которых имеются специфические ингибиторы прорастания семян и роста проростков.

Мысль о том, что в прорастающих семенах могут существовать замаскированные, или долгоживущие, формы матричной РНК, возникла в связи с необходимостью объяснить сходство между ранними метаболическими изменениями, происходящими при прорастании семян и на ранних стадиях эмбриогенеза у многих животных. Так, при оплодотворении яйца морского ежа происходит активация синтеза белка. Этот процесс наблюдается и в присутствии актиномицина D.

Это значит, что мРНК уже присутствует в яйце и что оплодотворение стимулирует скорее её трансляцию, чем транскрипцию. Стабильность мРНК зависит как от гена, копией которого она является, так и от условий окружающей среды. Индивидуальные мРНК значительно различаются по времени жизни, которое варьирует от нескольких минут до нескольких недель. Примером мРНК с относительно продолжительным периодом полужизни у животных является мРНК синтеза кератина пера. Синтез этого белка начинается с 13-го, интенсивно происходит уже на 15-й день развития цыплят при инкубации. После актиномициновой блокады в конце 13 дня синтез белка в коже зародыша полностью прекращается в пределах 24 часов. Однако синтез кератинов продолжается до 15 дня.

Эти данные показывают, что мРНК, кодирующая синтез кератина в 15-дневном зародыше, синтезировалась ранее и хранилась в клетках кожи, что свидетельствует о ее высокой стабильности. Другим примером роли стабильности мРНК может служить глобиновая мРНК, составляющая 90% суммарной мРНК ретикулоцитов у млекопитающих. После потери ядра и в отсутствии транскрипции генов, происходящей во время созревания ретикулоцитов, они длительное время (до 3-х суток) сохраняют гемоглобиновые мРНК и синтез гемоглобина. Запасённая в ретикулоцитах гемоглобиновая мРНК постепенно разрушается, и в зрелых эритроцитах синтез гемоглобина не происходит. В животных и растительных клетках идентифицировано много частиц и предшественников (информосом), которые содержат запасную мРНК и синтез белка на ранних стадиях прорастания зерна регулируется упорядочным превращением предшественников в активные полисомы.

Возможно, этому процессу способствует удаление специфического ингибитора, препятствующего связыванию мРНК с рибосомами, или в результате изменений в самих рибосомах, благодаря которым они приобретают способность связываться с РНК.

По крайней мере, в зародышах пшеницы через 16 часов набухания включение радиоактивно меченой аминокислоты в белок возрастало почти в 130 раз. При этом актиномицин D не подавлял активацию синтеза белка и увеличение числа полисом, но пуромицин, ингибитор функции рибосом, подавляет эти процессы. Сходные данные об увеличении числа полисом во время прорастания были получены в опытах с семенами арахиса, сосны смолистой, гороха и белого клёна, а также в опытах с прорастающими пыльцевыми зёрнами, спорами грибов и бактерий.

Актиномицин D (дактиномицин, актиномицин С1) - антибиотик с молекулярным весом 1255. Достоверно неизвестны какие-либо химические реакции, кроме синтеза РНК на матрице ДНК, на которые воздействовал бы актиномицин D, что позволяет говорить о высокой специфичности его действия. Однако в последнее время появились медицинские данные, позволяющие полагать, что актиномицин D способен связываться с белками. В частности, актиномицин ингибирует дыхание и образование АТФ в лейкоцитах человека, больного лейкимией. Вместе с тем, исходя из аналогии семени растений и половой клетки животных можно ожидать наличия малых РНК в зрелом зерне, подобно тем, что обнаружены у плодовых мушек (дрозофилл). Стерильность или фертильность дрозофил определяется не только информацией, записанной в ДНК, но и наличием или отсутствием короткой молекулы РНК (РНК-интерференции) в материнской яйцеклетке. Эта РНК блокирует передвижение транспозонов (мобильных генетических элементов), способных самостоятельно перемещаться по геному, встраиваясь в различные участки. Такие передвижения приводят зачастую к мутациям, и, как следствие, к нарушению нормального функционирования клеток. Это позволяет предполагать, что актиномицин D может приобретать способность частично связываться с ингибиторами роста растений (белковой или РНК-овой природы) в результате изменения их свойств в ходе хранения зерна, что стимулирует рост колеоптилей при концентрации 20 мкг/мл у озимой мягкой пшеницы и при 40 мкг/мл у озимого ячменя, что подтверждает имеющееся в научной литературе наблюдения видовой специфичности действия актиномицина D. Вероятно, это говорит о том, что семена озимого ячменя содержат существенно больше ингибитора роста по сравнению с семенами озимой мягкой пшеницы. Сложен вопрос о концентрациях актиномицина D. Большая часть данных получена на животных объектах. Так, на культуре тканей животных показано, что концентрация в 1-2 мкг/мл почти полностью подавляет синтез РНК. Концентрация 0,05-0,2 мкг/мл используют для избирательного подавления синтеза рРНК (синтез мРНК при этом тоже значительно подавляется). На яйцах морского ежа для подавления синтеза РНК необходимы концентрация порядка 20-25 мкг/мл. Эти же величины были получены, когда в качестве критерия действия служила остановка развития на средней бластуле: заметный эффект обнаруживался уже при 3-5 мкг/мл, но максимальное действие достигалось при 20 мкг/мл и не изменялось при дальнейшем повышении концентрации до 100-200 мкг/мл. Наконец, на амёбе полное и быстрое подавление синтеза РНК достигалось только при концентрации порядка 1000 мкг/мл.

Создаётся впечатление, что эти различия связаны только с разной проницаемостью этих клеток для актиномицина и что внутриядерная концентрация, необходимая для одинакового подавления транскрипции, также одинакова. Однако экспериментальных данных такого рода нет. В семянах хлопчатника актиномицин D в концентрации 20 мкг/мл в течении 16 часов на 63% подавлял включение 32Р в РНК, но не оказывал никакого влияния на включение 14С-аминокислот в растворимый белок и не менял соотношения моносом и полисом, а также профиль полисом при центрифугировании в сахарозном градиенте.

Обработка семядолей прорастающего гороха актиномицином D в концентрации 5 мкг/мл приводила к снижению включения трития в суммарную РНК, но содержание ген-специфической мРНК легумина, одного из запасных белков, оказывалось выше, чем в контрольной РНК из семядолей не обработанных актиномицином D. Автор исследования считает, что это проблема обусловлена низкой концентрацией актиномицина.

Однако, поскольку количество индивидуальной ген-специфической мРНК определяли методом молекулярной гибридизации с соответствующим ген-специфическим олигонуклеотидом, увеличение содержания мРНК легумина может быть артефактом, связанным с тем, что при частичном деаденилировании мРНК в ходе её распада в условиях блокады транскрипции происходит частичная утрата вторичной структуры мРНК. В связи с этим большее количество мРНК оказывается доступно к молекулярной гибридизации (при условии недостаточной денатурации РНК при молекулярной гибридизации).

Другими словами, имеет место мнимый эффект, противоположный тому, что наблюдается у суммарной мРНК проростков озимой мягкой пшеницы при закаливающих температурах: увеличение полиаденилирования мРНК в этих условиях приводит к гипохромному эффекту и снижению эффективности молекулярной гибридизации. Создаётся впечатление, что закаливающая температура снижает количество РНК. На самом деле это не так. Введение актиномицина D в созревающий початок кукурузы (20 день после опыления) в количестве 0,4-0,5 мг., что соответствует приблизительно концентрации 10-20 мкг/мл, приводило к значительному превалированию распада мРНК над синтезом. На 30-й день от опыления в первые 6-8 часов блокады транскрипции активность свободных полисом в бесклеточной системе синтеза белка (in vitro) повышалась в 4 раза, но практически не изменилась активность мембраносвязанных полисом, которая была исходно в два раза выше, чем у свободных полисом. Это свидетельствует о том, что актиномицин стимулировал образование свободных полирибосом из имеющихся в зерне белков рибосом, рРНК и мРНК, в то время как формирование фракции мембраносвязанных полисом уже было завершено. Вместе с тем, подобный эффект усиления трансляционной активности in vitro наблюдался для полирибосом, выделенных из зелёных четырёхсуточных проростков озимой мягкой пшеницы и озимого ячменя в первые 6-8 часов действия закаливающей температуры (4°С), а также при засолении и обезвоживании, что обычно сопровождается повышением активности ферментов РНК-аз (возможен избирательный распад коротко живущих РНК, подобно актиномициновой блокаде транскрипции).

Эти факты также свидетельствует в пользу предположения о наличие в зерне и в проростках относительно коротко живущего ингибитора формирования полирибосом. Есть данные о том, что актиномицин D увеличивает степень полиаденилирования поли-(А)-хвоста мРНК, энхансера (усилителя) трансляции, в первые часы блокады транскрипции, аналогичное увеличение поли-(А)-последовательности на 3'-конце мРНК наблюдается и при закаливающих стрессовых условиях среды. Эксперименты по изучению включения 3H-уридина во вновь синтезирущуюся РНК созревающего зерна кукурузы показали, что в РНК зерна опытных початков даже через 20 и 50 часов после введения ингибитора включалось только 30-35% меченого нуклеотида от уровня контроля. При этом был отмечен разный характер распада суммарной мРНК и зеин-специфической мРНК (зеин 22кДа): распад суммарной мРНК происходит относительно плавно, в то время как для зеин-специфической мРНК наблюдается ускоренный распад на первых этапах актиномициновой блокады транскрипции. Вероятно это связано с постепенностью вхождения актиномицина D в зерно и особенностью нуклеотидного состава разных генов. Как известно, белки-проламины, к которым относятся зеины, обогащены такими аминокислотами как пролин, глутаминовая и аспарагиновая кислоты. Соответственно кодонам этих аминокислот, гены зеинов обогащены парами оснований G:C, подобно генам рРНК, и потому их транскрипция подавляется в первую очередь и меньшими концентрациями актиномицина D по сравнению с генами не зеиновых белков. Кроме того, мРНК зеинов в созревающем зерне доминирует над остальными по количеству, а в популяции этих мРНК имеется большая группа относительно коротко живущих молекул.

Вместе с тем, актиномицин D эффективно нарушал превращение свободного лизина созревающего зерна кукурузы в другие аминокислоты и сохранял белковый комплекс (соотношение альбуминов, глобулинов и зеинов) ранних этапов развития зерна, когда был введен в початок антибиотик, что предположительно объясняется распадом короткоживущих регуляторных РНК или белков. Анализ научной литературы показывает, что в процессе прорастания семян также транскрибируются и новые мРНК. В основном это транскрипты кодирующие белки необходимые для нормального клеточного метаболизма, так называемые белки «домашнего хозяйства». Специальных белков прорастания не найдено. Известно, что в набухающем семени транскрипционная активность снижена в течение первых 16 часов прорастания. Доля новосинтезированных мРНК в трансляции белка в дальнейшем постепенно возрастает и далее полностью определяет рост проростка. Важность запасённой мРНК для белкового синтеза на ранних этапах прорастания семени была подтверждена в исследованиях на модельном объекте Arabidopsis thaliana с применением ингибитора транскрипции б-аманитина. Кроме этого было показано, что протеом прорастающего на б-аманитине семени, охарактеризованного по включению 35S-метионина в новосинтезированные белки, отличался от протеома семени прорастающего на воде и более напоминал созревающего семени, чем прорастающего. Таким образом, запасённая мРНК включает в себя транскрипты необходимые и в позднем эмбриогенезе и при прорастании. Переход от позднего эмбриогенеза к прорастанию имеет постепенный характер и поэтому эти две фазы сосуществуют. Это показано с помощью методов анализа экспрессии генов с использованием микрочипов. Был проанализирован профиль экспрессии генов в сухом и набухшем семени дикого типа A. thaliana. Репрезентативная выборка в микрочиповом анализе составила 22 476, из них 12 470 видов мРНК количественно определены в сухих семенах (запасённая РНК). Похожее количество транскриптов определено в 24 часовом набухшем семени (14395 генов). В среднем 2-3% генов (~500 генов) с высокой экспрессией активны в сухом семени. Это гены, определяют синтез и деградацию белка. Особенно заметны рибосомные белки, факторы инициации и элонгации трансляции, что отражает крайнюю необходимость синтеза белка на раннем этапе прорастания. Многочисленные виды мРНК ответственны не только за протеазы/пептидазы, но и также за белки родственные системе убиквитин/протеосома. Вовлечение селективного протеолиза в процесс раннего прорастания семени необходимо для масштабного разрушения белковых тел, содержащих запасные белки.

Изложенные в настоящей статье результаты исследований влияния актиномицина D на рост колеоптилей озимого ячменя и анализ научной литературы позволяют сделать вывод, что в ходе хранения семян происходит усиление сродства актиномицина D к гипотетическому ингибитору роста проростков, как уже имеющегося в зрелом зерне, так и в проростках. На первых этапах хранения семян (октябрь) актиномицин в концентрации 40 мкг/мл эффективно подавлял рост проростков, в дальнейшем эффективность падала (декабрь) или наблюдался обратный эффект - усиление роста колеоптилей (февраль). Это можно объяснить частичным связыванием актиномицина D с ингибитором роста проростков, а следовательно падением концентрации актиномицина ниже 40 мкг/мл. Увеличение исходной концентрации актиномицина D до 60 мкг/мл снимало эффект усиления роста. По-видимому, этой концентрации хватало и для связывания с ингибитором и для подавления роста проростков. Этот эффект менее свойственен для корней проростков, чаще всего рост корней снижался обратно пропорционально возрастанию концентрации актиномицина D. Таким образом, при закладке опытов по блокаде транскрипции генома семян озимого ячменя необходимо учитывать срок хранения семян.

Представляются перспективными дальнейшие исследования природы ингибитора роста колеотилей, его идентификации и выделения с целью управления ростом растения, что в свою очередь определяет стрессоустойчивость, фотопериодизм и другие важные свойства растительного организма. нуклеиновый актиномицин ингибитор

Литература

1. Детлаф Т.А., Бродский В.Я., Гаузе Г.Г. Методы биологии развития, М., Наука, 1974, 619 с.

2. Дэвидсон Э. Действие генов в раннем развитии, М.: Мир, 1972, 342 с.

3. Контроль активации ферментов во время прорастания семян, 2010 // (Электронный ресурс).

4. Киль В.И., Бибишев В.А., Плотников В.К. Неспецифический прирост трансляционной активности полисом проростков пшеницы и ячменя под действием стрессов // Физиология растений, 1991, т. 38, вып. 4, С. 730-735.

5. Классические представления о наследственности вновь пересмотрены.

6. Окон Е.А., Ненько Н.И., Яблонская Е.К., Насонов А.И., Кузембаева Н.А., Плотников В.К. Влияние препарата фуролан на гетерогенность свойств долгоживущей РНК зрелых семян пшеницы // Труды Кубанского государственного аграрного университета, 2008, 4(13), С. 154-160.

7. Плотников В.К., Рядчиков В.Г., Филичкин С.А., Неудачин В.П., Филипас Т.Б., Долгих Ю.Р. К выяснению причин перераспределения белковых фракций в эндосперме кукурузы опак-2 // Физиология и биохимия культурных растений, 1984, т. 16, С. 59-66.

8. Плотников В.К. Особенности нуклеиново-белкового обмена созревающего эндосперма кукурузы опак-2. Дисс. канд. биол.наук., Тбилиси, 1985, 172 с.

9. Плотников В.К., Киль В.И. Динамика синтеза зеина и зеина-2 в созревающем зерне обычной и опак-2 кукурузы под влиянием актиномицина и канаванина // Доклады ВАСХНИЛ, 1989, вып. 10, С. 8-10.

10. Плотников В.К., Киль В.И., Бибишев В.А., Новиков Б.Н. Влияние теплового шока на белоксинтезирующий аппарат зерна обычной и опак-2 кукурузы // Физиология растений, 1990, т. 37, вып. 2, С. 302-307.

11. Плотников В.К., Бакалдина Н.Б., Ефимов В.А. Стабильность мРНК зеина кукурузы в условиях нормальной и высокой температур // Физиология растений, 1991, т. 38, вып. 5, С. 981-990.

12. Плотников В.К., Бакалдина Н.Б. Посттранскрипционная регуляция экспрессии генов: изучение дифференциального распада мРНК растений in vivo и in vitro // Генетика, 1997, т. 33, №3, С. 343-349.

13. Плотников В.К. Биохимические признаки стабильности мРНК в связи с регуляцией синтеза белка в клетках злаков и их устойчивостью к стрессам с целью создания новых методов селекции. Автореф. дис. на соиск. уч. степени докт. биол. наук. - Краснодар, 1997. 42 с.

14. Плотников В.К., Бакалдина Н.Б., Новиков Б.Н., Алексеенко Ж.В. Посттранскрипционная регуляция экспрессии генов растений: ряды индексов стабильности специфических мРНК in vivo и in vitro // Генетика, 1998, т. 34., №7, С. 869-875.

Размещено на Allbest.ru