Виготовлення експериментальних зразків інактивованої концентрованої вакцини проти інфекційного ринотрахеїту великої рогатої худоби для внутрішньошкірного застосування з використанням ад'юванту

Размещено на http://www.allbest.ru/

Виготовлено експериментальні зразки інактивованої концентрованої вакцини проти інфекційного ринотрахеїту великої рогатої худоби для внутрішньошкірного застосування з використанням ад'юванту (на основі нанотехноогій) Montanide Gel. Антигенну активність зразків вакцини та визначення оптимальних строків проведення ревакцинації вивчали на кролях. Встановлено, що індукція антитіл на введення дослідних зразків вакцини залежить від інтервалу між введеннями та відсотковою часткою ад'юванту.

Інфекційний ринотрахеїт великої рогатої худоби (ІРТ) є проблемою світового масштабу, яка обумовлена широким розповсюдженням збудника інфекції та значними економічними збитками, які завдає це захворювання галузі тваринництва. Основною заходів боротьби з цім захворюванням в неблагополучних країнах є профілактична вакцинація. На сьогоднішній день ведеться постійний пошук ефективних і безпечних вакцин, а також способів імунізації. Вирішення цих задач досягається за рахунок удосконалення технічних аспектів з напрацювання і збереження біомаси вірусу, методів очистки та концентрування, інактивації та оптимізації складу вакцини, підбору ефективних ад'ютантів.

Важливе значення при формуванні імунної відповіді має спосіб імунізації. Традиційні способи внутрішньом'язового та підшкірного введення вакцини забезпечують створення системного імунітету, аерозольний - спочатку локального, а пізніше системного. Останнім часом приділяється особлива увага внутрішньошкірному способу вакцинації. Це пов'язано з морфологічними особливостями будови шкіри, яка виконує різні імунологічні функції, створюючи напружену імунну відповідь на введення мінімальних об'ємів вакцини.

Матеріали та методи. Антигенну активність зразків інактивованої концентрованої вакцини проти інфекційного ринотрахеїту великої рогатої худоби для внутрішньошкірного застосування з використанням ад'юванту Montanide Gel та визначення схеми введення вивчали на кролях. Для цього було сформовано 9 груп кролів по 5 голів в кожній. Тваринам першої - восьмої групи вводили досліджуваний препарат дворазово в дозі 0,4 см3, група під номером дев'ять - інтактні тварини.

1 група - досліджуваний препарат складався з 20% ад'юванту, 80% інактивованого антигену вірусу ІРТ, який вводили тваринам з інтервалом у 21 добу;

2 група - досліджуваний препарат складався з 15% ад'юванту, 85% інактивованого антигену вірусу ІРТ, який вводили тваринам з інтервалом у 21 добу;

3 група - досліджуваний препарат складався з 10% ад'юванту, 90% інактивованого антигену вірусу ІРТ, який вводили тваринам з інтервалом у 21 добу;

4 група - досліджуваний препарат складався з 20% ад'юванту, 80% середовища 199, який вводили тваринам з інтервалом у 21 добу;

5 група - досліджуваний препарат складався з 20% ад'юванту, 80% інактивованого антигену вірусу ІРТ, який вводили тваринам з інтервалом у 14 діб;

6 група - досліджуваний препарат складався з 15% ад'юванту, 85% інактивованого антигену вірусу ІРТ, який вводили тваринам з інтервалом у 14 діб;

7 група - досліджуваний препарат складався з 10% ад'юванту, 80% інактивованого антигену вірусу ІРТ, який вводили тваринам з інтервалом у 14 діб;

8 група - досліджуваний препарат складався з 20% ад'юванту, 80% середовища 199, який вводили тваринам з інтервалом у 14 діб;

9 група - інтактні тварини.

Експериментальні зразки вакцини виготовляли за методикою запропонованою фірмою виробником ад'юванту (Seppic). Антигенну активність визначали за титром специфічних віруснейтралізуючих антитіл до ІРТ в сироватці крові піддослідних кролів. Зразки крові у кролів відбирали до щеплення та через 14, 21, 30 та 60 діб після імунізації.

Рівень нейтралізуючих антитіл до вірусу ІРТ залежав від схеми введення препарату (табл. 1).

Таблиця 1 - Результати визначення антигенної активності зразків інактивованої концентрованої вакцини проти інфекційного ринотрахеїту для внутрішньошкірного застосування з використанням ад'юванту Montanide Gel на лабораторних тваринах (кролях)

Він був значно вищий в групах тварин, яким препарат вводили через 21 добу (1 - 3 групи) ніж в групах з інтервалом введення 14 діб (7 - 9 група). В 1 - 3 групі тварин максимальний підйом антитіл спостерігали на 30 добу після щеплення. Серед цих трьох груп найбільший рівень віруснейтралізуючих антитіл (8,0±0,32) log2 виявляли в другій групі тварин, яким вводили вакцину з 15% ад'юванту.

Висновки

ринотрахеїт збудник антитіло лабораторний

Введення інактивованої концентрованої вакцини проти інфекційного ринотрахеїту великої рогатої худоби для внутрішньошкірного застосування з використанням ад'юванту Montanide Gel стимулює продукцію віруснейтралізуючих антитіл у лабораторних тварин, оптимальний склад вакцини складається з 15% ад'юванту Montanide Gel та 85% антигену інактивованого вірусу ІРТ, а інтервал між введеннями вакцини - 21 доба.

Размещено на Allbest.ru