Імунний та антиоксидантний статус у поросят раннього постнатального віку за дії хрому

Дослідження впливу перорального введення хрому на імунний та антиоксидантний статус, морфофункціональний стан крові, обмін білків в організмі поросят раннього віку. Стимулювальна дія хлориду хрому на активність систем клітинного і гуморального імунітету.

Рубрика Биология и естествознание
Вид автореферат
Язык украинский
Дата добавления 14.08.2015
Размер файла 220,7 K

Отправить свою хорошую работу в базу знаний просто. Используйте форму, расположенную ниже

Студенты, аспиранты, молодые ученые, использующие базу знаний в своей учебе и работе, будут вам очень благодарны.

Размещено на http://www.allbest.ru/

Інститут біології тварин НААН

УДК: 636.4:546.7:57.083.3:678.048

03.00.04 - біохімія

АВТОРЕФЕРАТ

дисертації на здобуття наукового ступеня

кандидата ветеринарних наук

ІМУННИЙ ТА АНТИОКСИДАНТНИЙ СТАТУС У ПОРОСЯТ РАННЬОГО ПОСТНАТАЛЬНОГО ВІКУ ЗА ДІЇ ХРОМУ

Юрків Ольга Ярославівна

Львів - 2011

Дисертація є рукописом.

Робота виконана в Інституті біології тварин Національної академії аграрних наук України.

Науковий керівник - доктор біологічних наук, професор, академік НААН, заслужений діяч науки і техніки України Снітинський Володимир Васильович, Львівський національний аграрний університет, ректор.

Офіційні опоненти:

- доктор ветеринарних наук, професор Стояновський Володимир Григорович, Львівський національний університет ветеринарної медицини та біотехнологій імені С.З. Ґжицького Міністерства аграрної політики і продовольства України, завідувач кафедри нормальної та патологічної фізіології;

- доктор ветеринарних наук, старший науковий співробітник Чумаченко Володимир Володимирович, завідувач науково-навчального відділу Державного науково-контрольного інституту біотехнології і штамів мікроорганізмів Державної ветеринарної та фітосанітарної служби України.

Захист дисертації відбудеться "20" вересня 2011 р. о 10 годині на засіданні спеціалізованої вченої ради Д 35.368.01 в Інституті біології тварин НААН за адресою: 79034, м. Львів, вул. Стуса, 38.

З дисертацією можна ознайомитись у бібліотеці Інституту біології тварин НААН за адресою: м. Львів, вул. Стуса, 38.

Автореферат розісланий "18" серпня 2011 р.

Вчений секретар спеціалізованої вченої ради О.І. Віщур

Анотації

Юрків О.Я. Імунний та антиоксидантний статус у поросят раннього постнатального віку за дії хрому. - Рукопис.

Дисертація на здобуття наукового ступеня кандидата ветеринарних наук за спеціальністю 03.00.04 - біохімія. Інститут біології тварин НААН. - Львів, 2011.

Робота присвячена дослідженню впливу перорального введення хрому на імунний та антиоксидантний статус, морфофункціональний стан крові, обмін білків в організмі поросят раннього віку. З'ясовано стимулювальну дію хлориду хрому на активність систем клітинного та гуморального імунітету. Показано позитивний вплив цього мікроелемента на кількість і функціональний склад Т- і В- лімфоцитів та їх субпопуляцій, показники неспецифічної резистентності (фагоцитарна активність нейтрофілів, КАСК, ЦІК). Введення тривалентного хрому супроводжується послабленням процесів пероксидного окиснення ліпідів (зменшується концентрація ТБК-активних продуктів та гідропероксидів ліпідів) і посиленням ферментативної ланки системи антиоксидантного захисту (збільшується активність супероксиддисмутази, каталази, глутатіонпероксидази) в крові новонароджених тварин. Пероральне введення поросятам хрому у дозі 150 мкг сприяє поліпшенню білкового обміну в організмі, про що свідчить вміст загального білка, альбумінів, в-глобулінів, б1-глобулінів, г-глобулінів, середньодобові прирости підвищуються на 12 %. Визначено оптимальну дозу хрому для поросят раннього віку, яка відповідає 150 мкг тварині.

Розроблено спосіб підвищення резистентності новонароджених поросят у виробничих умовах і дано наукове та економічне обґрунтування застосування перорального введення хлориду хрому в практиці ветеринарної медицини з метою профілактики захворювань молодняка свиней.

Ключові слова: поросята, тривалентний хром, ріст, резистентність, імунна система, антиоксидантні ферменти, білковий обмін.

Юркив О.Я. Иммунный и антиоксидантный статус у поросят раннего постнатального возраста при действии хрома. - Рукопись.

Диссертация на соискание ученой степени кандидата ветеринарных наук по специальности 03.00.04 - биохимия. - Институт биологии животных НААН. - Львов, 2011.

Работа посвящена исследованию влияния перорального введения различных доз хрома на иммунный и антиоксидантный статус, морфофункциональное состояние крови, обмен белков в организме поросят раннего возраста. Установлено стимулирующее действие хлорида хрома на активность систем клеточного и гуморального иммунитета. Под действием хрома у поросят увеличивалось число эритроцитов и лейкоцитов. Показано положительное влияние данного микроэлемента на количество и функциональный состав Т- и В-лимфоцитов и их субпопуляций, что свидетельствует о повышении иммунного потенциала иммунокомпетентных клеток.

Установлено, что введение поросятам раннего возраста хрома способствует достоверному возрастанию комплементарной активности сыворотки крови, содержания циркулирующих иммунных комплексов и проявляет тенденцию к увеличению фагоцитарной активности нейтрофилов.

Введение трехвалентного хрома сопровождается ослаблением интенсивности процессов пероксидного окисления липидов (уменьшалась концентрация ТБК-активних продуктов и гидропероксидов липидов) и усилением активности ферментативного звена системы антиоксидантной защиты (увеличивается активность супероксиддисмутазы, каталазы, глутатионпероксидазы) и восстановленного глутатиона в крови новорожденных животных.

Во время проведения исследований по изучению действия хлорида хрома в организме животных наблюдалось повышение синтеза общего белка плазмы и его фракций (альбуминов, б1-глобулинов, в-глобулинов и г-глобулинов). Пероральное введение хрома в организм поросят сопровождалось увеличением активности аланинаминотрансферазы и аспартатаминотрансферазы, снижением концентрации мочевины и глюкози, среднесуточные привесы повышаются на 12 %. Установлено оптимальную дозу хрома для свиней раннего возраста.

Хром в организме входит в состав так называемого белка хроммодулина, который способствует улучшению связывания специфического клеточного мембранного рецептора с инсулином. Инсулин в свою очередь влияет на уровень глюкозы, способствует лучшему проникновению ее в клетки и снижению концентрации в кров. Глюкоза подвергается катаболизму с высвобождением энергии. Эта энергия идет на синтез новых структурных компонентов организма. Известно, что хром в наибольших концентрациях содержится в ядрах клеток и тем самым улучшает синтез РНК, на основе которой синтезируются необходимые клетке пептиды.

Проведенные исследования дают возможность рекомендовать с целью повышения сохранности и резистентности новорожденных поросят пероральное введение хлорида хрома в дозе 612 мкг (доза хрома составляет 150 мкг), предварительно растворенного в физиологическом растворе, с пятисуточным интервалом, начиная с 5-х суток жизни до 30-ти суточного возраста. Разработан способ повышения резистентности новорожденных поросят в производственных условиях. Дано научное и экономическое обоснование применения перорального введения хлорида хрома в практике ветеринарной медицины с целью профилактики заболеваний молодняка свиней.

Ключевые слова: поросята, трехвалентный хром, рост, резистентность, иммунная система, антиоксидантные ферменты, белковый обмен.

Yurkiv O.Ya. Тhe immune and antioxidant status of sucking pigs under different doses of chromium - Manuscript.

Thesis for candidate degree of veterinary sciences by speciality 03.00.04 - Biochemistry - Institute of animal biology NAAS, Lviv, 2011.

The dissertation deals with the influence of oral administration of different chromium doses on the immune and antioxidant status, morphofunctional state of blood, exchange of proteins in the body of piglets.

A stimulating effect of chromium chloride on the activity of the cellular and humoral immunity systems was found. The positive influence of this microelement on the quantity and composition of functional T- and B-lymphocytes their subpopulations, nonspecific resistance indices were shown.

Introduction of trivalent chromium is accompanied with decreasing of intensity of lipid peroxidation and increasing the level of enzymatic antioxidant system (increased superoxide dismutase activity, catalase, glutathione peroxidase) in the blood of newborn animals.

Oral administration of chromium in the body of piglets associated with an increased the intensity of protein metabolism, such as increased the levels of total protein, albumin, в-globulin, б1-globulins, г-globulin, average daily gain increased by 12%. An optimal dose of chromium for pigs early age was elaborated.

Developed a method of increasing the resistance of newborn piglets in a production environment. Given the scientific and economic feasibility of oral administration of chromium chloride in the practice of veterinary medicine to prevent diseases of young pigs.

Key words: piglets, trivalent chromium, growth, resistance, immune system, antioxidant enzymes, protein metabolism.

Загальна характеристика роботи

Актуальність теми. Однією з основних передумов підвищення збереженості та резистентності поросят є їх забезпечення в усіх елементах живлення, насамперед, в оптимальних кількостях і співвідношеннях мінеральних речовин (Пшанчин М.М., 2001; Харитонова И.П., 1999; Сологуб Л.І., 2004). З багатьох необхідних організму мікроелементів на сьогодні майже відсутні дані стосовно біологічної ролі Хрому, хоча дослідження останніх років дають підставу вважати, що він може бути одним з лімітуючих компонентів резистентності та продуктивності тварин (Сологуб Л.І. зі співавт., 2007).

На сьогодні біологічна роль Хрому та молекулярні механізми його впливу на функції організму тварин ще остаточно не вивчено. Не з'ясовані також оптимальні дози Хрому в раціонах сільськогосподарських тварин (Снітинський В. В., 1999; Сологуб Л.І., 2007).

Ознаками дефіциту Хрому в ссавців є зменшення толерантності глюкози, пригнічення процесу рецепції інсуліну клітинами та зменшення кількості рецепторів гормону, що супроводжується гіперглікемією, глюкозурією, збільшенням вмісту в крові холестеролу і тріацилгліцеролів, порушенням гуморальної імунної відповіді та процесів росту організму (Anderson R. A. et al., 1999). Як відомо, Хром бере участь у регуляції активності геному клітин, впливаючи на процеси реплікації і транскрипції. Отримано експериментальні докази щодо безпосередньої взаємодії іонів Хрому з молекулою ДНК та активації елементом процесів синтезу РНК, що вказує на роль Хрому в метаболізмі цих біополімерів (Moonsie-Shageer S. et al., 1993).

До важливої дії Хрому належить позитивний вплив на функціональну активність імунної системи, підвищення стійкості тварин до захворювань (Вurton et al., 1995).

Зважаючи на вище сказане, Хром можна розглядати як один з важливих факторів у живленні поросят раннього віку, що сприяє підвищенню їх життєздатності та резистентності.

Зв'язок роботи з науковими програмами, планами, темами. Дисертаційна робота є фрагментом програми № 28 "Фізіолого-біохімічні основи збереження здоров'я та високої продуктивності тварин", яка виконувалася в лабораторії живлення свиней Інституту біології тварин УААН у 2006-2009 рр. за завданням "Вивчити фізіолого-біохімічні механізми регуляції адаптаційних і метаболічних процесів в організмі тварин і розробити способи їх корекції в критичні періоди онтогенезу" (28.01/014-02 № держреєстрації 0106U003043). Автор вивчала процеси пероксидного окиснення ліпідів (ПОЛ) і стан системи імунного та антиоксидантного захисту, білковий обмін у поросят за дії різних доз Хрому.

Мета дослідження. З'ясувати вплив перорального введення різних доз хлориду Хрому на імунний статус, процеси ПОЛ, формування системи антиоксидантного захисту (САЗ) й білковий обмін у поросят та на основі отриманих даних обґрунтувати та розробити оптимальну схему його застосування з метою підвищення життєздатності та резистентності поросят раннього віку.

Завдання дослідження:

-- вивчити вплив перорального введення різних доз хлориду Хрому на формування імунної системи у поросят раннього віку;

-- дослідити вміст продуктів пероксидного окиснення ліпідів та стан системи антиоксидантного захисту в крові поросят за дії хлориду Хрому в різних дозах;

-- дослідити вплив тривалентного Хрому на білковий спектр крові, активність АлАТ, АсАТ, вміст сечовини та глюкози в крові поросят;

-- розробити оптимальну дозу Хрому для застосування її з метою підвищення збереження та резистентності поросят.

Об'єкт дослідження - стан імунної системи, процеси ПОЛ, активність ферментів САЗ, білковий обмін в організмі поросят за дії різних доз хлориду Хрому.

Предмет дослідження - показники імунної та антиоксидантної системи, продукти пероксидного окиснення ліпідів, метаболіти білкового обміну.

Методи дослідження: клінічні, морфологічні, імунологічні, біохімічні, зоотехнічні, статистичні.

Наукова новизна одержаних результатів. Уперше комплексно досліджено вплив перорального введення хлориду Хрому на імунний статус, процеси ПОЛ і стан САЗ, обмін білків у поросят раннього постнатального віку. Показано, що введення поросятам per os тривалентного Хрому у дозі 150 мкг тварині стимулююче впливає на показники клітинного та гуморального імунітету з одночасним зниженням у плазмі продуктів пероксидного окиснення ліпідів, а саме, гідропероксидів ліпідів та ТБК-активних продуктів. В еритроцитах поросят під впливом Хрому підвищується вміст відновленого глутатіону та активність ферментів антиоксидантного захисту, зокрема супероксиддисмутази, каталази, глутатіонпероксидази. Показано, що введення per os новонародженим поросятам хлориду Хрому зумовлює збільшення концентрації у крові загального білка, вмісту альбумінів, -глобулінів, -глобулінів, підвищення активності АлАТ, АсАТ. При цьому зменшується вміст сечовини та знижується концентрація глюкози в плазмі крові дослідних груп тварин. Пероральне введення хлориду Хрому з 5-ї по 30-ту доби життя у дозі 150 мкг тварині сприяє підвищенню життєздатності поросят, приростів маси тіла та їх збереження.

Практичне значення отриманих результатів. На основі теоретичних узагальнень та проведених досліджень розроблено спосіб підвищення резистентності новонароджених поросят через застосування перорального введення хлориду Хрому. Отримані результати мають важливе теоретичне та практичне значення для ветеринарної медицини і для з'ясування біохімічних та імунологічних механізмів дії Хрому на організм поросят раннього віку. Їх можна рекомендувати для введення у навчальні програми низки дисциплін на ветеринарних і біолого-технологічних факультетах вищих навчальних закладів.

Особистий внесок здобувача. Автор самостійно здійснила пошук і аналіз літератури за темою дисертації, організувала досліди та виконала весь обсяг запланованих досліджень, самостійно провела статистичну обробку отриманих результатів, їх інтерпретацію й виклала у вигляді наукових положень дисертаційної роботи. Аналіз та узагальнення наукових положень і висновків дисертаційної роботи здійснено за допомогою наукового керівника.

Апробація результатів дисертації. Матеріали дисертаційної роботи доповідались: на звітних сесіях вченої ради Інституту біології тварин УААН (2006-2009); на VII науково-практичній конференції молодих науковців і спеціалістів Інституту біології тварин УААН "Актуальні проблеми біології, тваринництва та ветеринарної медицини" (Львів, 2008 р.); на міжнародній науково-практичній конференції "Інноваційність розвитку сучасного аграрного виробництва", присвяченій 550-річчю з часу заснування Львівського національного університету ВМ та БТ ім. С.З. Гжицького та початків ветеринарної медицини в Україні (Львів, 2008 р.); на міжнародній науково-практичній конференції "Наукове забезпечення інноваційного розвитку аграрного виробництва в Карпатському регіоні" (Берегове, 2009 р.); на VIII науково-практичній конференції молодих науковців і спеціалістів Інституту біології тварин УААН "Актуальні проблеми біології, тваринництва та ветеринарної медицини" (Львів, 2009 р.); на міжнародній науково-практичній конференції "Актуальні проблеми сучасної біології, тваринництва та ветеринарної медицини", присвяченій 50-річчю з дня заснування Інституту біології тварин та 110-річчю з дня народження професора С.З. Гжицького (Львів, 2010 р.).

Публікації. За матеріалами дисертаційної роботи опубліковано 9 наукових праць, із них 6 статей у фахових виданнях (2 у науково-теоретичних журналах, 1 у науково-практичному журналі, 3 у науково-технічних бюлетенях), які входять до переліку ВАК України, 2 тези у збірниках матеріалів наукових конференцій та 1 патент України на корисну модель.

Структура і об'єм дисертації. Дисертація складається зі вступу, огляду літератури, матеріалів і методів, власних досліджень, аналізу та узагальнення результатів, висновків, пропозицій виробництву, списку використаних джерел, який містить джерел 315, в тому числі латиною 168, додатків (4). Загальний обсяг дисертації - 140 сторінок (основна частина - 113 сторінок), у тому числі 28 таблиць на 17 сторінках.

Основний зміст роботи

Огляд літератури. Складається з 5 підрозділів, у яких наведено і проаналізовано дані літератури, що стосуються стану імунної, антиоксидантної системи, особливостей процесів пероксидного окиснення ліпідів, білкового обміну в організмі поросят раннього віку та біологічної ролі Хрому.

Вибір напрямів досліджень, матеріал і методи досліджень. Дослідження за темою дисертаційної роботи виконані в 2006-2009 рр. відповідно до планів науково-дослідних робіт лабораторії живлення свиней Інституту біології тварин УААН.

Експериментальну частину роботи виконано на базі навчально-науково-виробничого центру "Комарнівський" Львівського національного університету ветеринарної медицини та біотехнологій імені С.З. Ґжицького. Проведено виробничу перевірку на поросятах великої білої породи.

Для досліджень за принципом аналогів було підібрано чотири групи клінічно здорових поросят: контрольна і три дослідні, по десять голів у кожній. Починаючи з 5-ї доби життя поросята отримували престартерний комбікорм фірми "Sano". Дослідним групам поросят per os задавали Хром у вигляді хлориду, розчиненого у фізіологічному розчині, з п'ятидобовим інтервалом, починаючи з 5-ї по 30-ту добу включно. Перша дослідна група тварин отримувала Хром у дозі 50 мкг, друга - 150 мкг, третя - 250 мкг. Досліди були проведені поетапно.

Умови утримання тварин відповідали загальноприйнятій технології: параметри мікроклімату приміщення були в межах зоогігієнічних норм. Контроль за ростом і розвитком поросят проводили зважуванням їх на початку та наприкінці досліду. Перед і під час досліджень оцінювали загальний стан організму тварин, вимірювали основні фізіологічні показники (температуру тіла, частоту пульсу і дихання) загальноприйнятими методами та спостерігали за їх поведінкою хронометражним методом (активність, рухливість, споживання корму). У період досліджень поросята були клінічно здорові, а господарство благополучним щодо гостроінфекційних і паразитарних хвороб. Для виявлення гельмінтоносійства у тварин впродовж досліду проводили копрологічні дослідження.

Дослідження проводили з дотриманням біоетичних вимог стосовно тварин, що відповідають Закону України "Про захист тварин від жорстокого поводження" від 28. 03. 2006 р. та "Європейській конвенції на захист хребетних тварин" від 13. 11. 1987 р. (протокол № 15 засідання комісії з біоетичної експертизи дисертаційних досліджень Інституту біології тварин НААН від 14 грудня 2010 р).

Зразки стабілізованої гепарином крові одержано з краніальної порожнистої вени з подальшою первинною обробкою і консервацією. Матеріалом для морфологічних, імунологічних і біохімічних досліджень слугували цільна кров, сироватка, плазма і еритроцити.

Зразки крові відбирали у 5-ти поросят за принципом аналогів від кожної групи до ранкової годівлі на 5-, 10-, 15-, 20-, 25- і 30-ту доби життя.

У крові підраховували кількість еритроцитів та лейкоцитів (у камері з сіткою Горяєва), лейкограму (Кондрахин И.П. с соавт., 1985), проводили поділ еритроцитів у градієнті густини сахарози (Сизова І. зі співавт., 1980).

Загальну кількість Т-лімфоцитів (Е-РУК) визначали в реакції спонтанного розеткоутворення з еритроцитами вівці (Jondal M. et al., 1972), їх субпопуляції - Т-хелпери (теофелінрезистентні Т-лімфоцити; Суровас В.М. с соавт., 1980); число "активних" РУК (Wansbrough-Jones M. et al., 1979); кількість Т-клітин із переважно супресорною активністю (ТФЧ Т-лімфоцити) - відніманням кількості теофілін-резистентних Т-клітин (ТФР) від загального числа Т-лімфоцитів, імунорегуляторний індекс обчислювали за співвідношенням ТФР/ТФЧ Т-лімфоцитів, кількість В-лімфоцитів (ЕАС-РУК) - у реакції комплементарного розеткоутворення з еритроцитами вівці (Чернушенко Е.Ф. с соавт., 1979). Підраховуючи число Т- і В-лімфоцитів та їх регуляторних субпопуляцій на фіксованих і фарбованих мазках крові, визначали кількість лімфоцитів із низькою, середньою та високою щільністю рецепторів, функціональну активність Т-лімфоцитів - за реакцією бластної трансформації з фітогемаглютиніном (ФГА; Болотников И.А. с соавт., 1987).

У плазмі крові визначали: вміст глюкози (Kingley G.K., 1960), сечовини (Збарский Б.И. с соавт., 1972), загального білка (Lowry О.Н., 1951) та співвідношення його окремих фракцій у поліакриламідному гелі (Davis B.I., 1964), гідропероксидів ліпідів (Мирончик В.В., 1984), ТБК-активних продуктів (Стальная И.Д., Гаришвили Т.Г., 1977), активність АлАТ (КФ 2.6.1.2) і АсАТ (КФ 2.6.1.1; Reitman S., Frankel S., 1957).

У гемолізаті еритроцитів визначали активність ферментів супероксиддисмутази (КФ 1.15.1.1; Чевари С. с соавт., 1998), глутатіонпероксидази (КФ 1.11.1.9; Моин В.М., 1986), каталази (КФ 1.11.1.6; Королюк М.А. с соавт., 1988) та вміст відновленого глутатіону (Батлер З. с соавт., 1963).

Одержані результати досліджень опрацьовували біометрично з використанням t-критерію Стьюдента і визначали рівень вірогідності різниці (р) між досліджуваними показниками в крові поросят контрольної і дослідних груп (Лакін Г. Ф., 1990).

Результати досліджень та їх обговорення

Клінічний стан організму новонароджених поросят та їх поведінка. Візуальні спостереження за загальним станом і поведінкою тварин упродовж досліду показали, що поросята були адекватними для даного виду тварин, рухливими, активно споживали корм і воду. Клінічні показники організму поросят відповідали нормі: температура тіла 39,4-40,0°С, пульс 95-122 ударів/хв, дихання 15?20 дихальних рухів/хв.

Стан імунної системи поросят раннього віку за умов перорального введення хлориду Хрому. У формуванні та регуляції імунної відповіді в організмі тварин велике значення надається лімфоцитам як головним клітинам імунної системи (Стоянов З.Е., 1995; Osmond D.G., 1990). Результати проведених досліджень показали (рис. 1), що введення хлориду Хрому в даних дозах позитивно впливає на кількість Т-загальних лімфоцитів у крові дослідних поросят. Вірогідно більшу кількість Т-загальних лімфоцитів виявлено у поросят першої дослідної групи на 15-ту та 25-ту доби життя на 9,4-2,7 % та на 15-ту та 25-ту доби у поросят другої дослідної групи - на 7,5-10,1 % відносно контрольної групи тварин. Таке підвищення загальної кількості Т-лімфоцитів відбувалось за рахунок вірогідного збільшення низькоавідних форм лімфоцитів порівняно з контролем. Отже, введення поросятам хлориду Хрому чинить імуностимулювальний вплив на кількісний склад загальних Т-лімфоцитів.

Виявлено збільшення кількості Т-активних лімфоцитів у крові поросят на 15-ту і 30-ту доби життя після введення їм тривалентного Хрому у досліджуваних дозах. Кількість Т-активних лімфоцитів у крові поросят зростала за рахунок лімфоцитів із низькою та середньою щільністю рецепторів (р<0,01), що свідчить про вплив хрому на функціональну активність Т-лімфоцитів.

Т-хелпери беруть участь у розпізнаванні чужорідної генетичної інформації, а також стимулюють диференціацію та проліферацію В-лімфоцитів (Кохан І., 1994; Кетлинський С.А., 2002; Werkmeister J. 1983).

Встановлено, що пероральне введення поросятам раннього віку Хрому в дозах 50, 150 та 250 мкг зумовлює вірогідне збільшення у крові поросят першої дослідної групи загальної кількості Т-хелперів на 20-ту добу життя на 20,6 %, другої - на 20-ту і 30-ту доби на 17,5-18,1 % та третьої - на 12,2 % на 10-ту добу стосовно контролю. Збільшення хелперних клітин відбувається за рахунок збільшення Т-лімфоцитів із низькою щільністю рецепторів у тварин першої та третьої (р<0,01) дослідних груп та з середньою щільністю рецепторів - у поросят другої дослідної групи (р<0,05) порівняно з контролем. Ці дані свідчать про високу функціональну активність цієї популяції імунокомпетентних клітин.

Серед інших результатів, одержаних у цьому досліді, слід вказати зменшення кількості Т-супресорів та індексу супресії в крові дослідних поросят під впливом Хрому впродовж досліду. Кількість цих клітин крові у тварин першої дослідної групи була меншою на 25-ту добу життя на 24,9 % (р<0,05), другої - на 10-ту добу життя на 25,5 % (р<0,05) відносно тварин контрольної групи. Індекс супресії був вірогідно нижчий на 27,5 % у крові поросят другої дослідної групи на 30-ту добу життя, що свідчить про імуностимулювальний вплив хлориду Хрому.

Як бачимо з отриманих даних (рис. 2), при пероральному введенні поросятам хлориду Хрому посилюється імунна відповідь лімфоцитів до бластної трансформації на фітогемаглютинін. Вірогідне збільшення кількості бластних клітин у крові поросят другої дослідної групи на 16,2 % на 30-ту добу життя і в третьої - на 10,8 % на 25-ту добу стосовно контролю свідчить про те, що під дією Хрому відбувається активація процесів клітинної проліферації, посилення мітогенезу лімфоцитів і підвищення їх функціональної активності (Вurton et al., 1995).

При дослідженні кількісного стану В-лімфоцитів за дії Хрому у вказаних дозах, констатовано вірогідне збільшення загальної кількості цих клітин крові у поросят першої дослідної групи на 20-ту добу життя на 30,4 % і другої групи - на 29,8-32,9 % на 20-ту і 30-ту доби стосовно контролю. В-лімфоцити є попередниками клітин, що продукують антитіла, отже збільшення їх кількості в крові поросят у період становлення імунної системи є ознакою підвищеної здатності їх організму до активного синтезу антитіл (Маслянко Р.П., 1992).

Пероральне введення поросятам дослідних груп хлориду Хрому сприяє збільшенню впродовж досліду в їх крові відносної кількості Т-лімфоцитів (загальних, активних, теофілін-резистентних Т-лімфоцитів-хелперів) та В-лімфоцитів. Зміни відбувалися, головним чином, за рахунок збільшення малорецепторної та із середньою щільністю рецепторів субпопуляції Т- і В-лімфоцитів. Ці дані свідчать про стимулювальний вплив Хрому на функціональну активність імунокомпетентних клітин крові у поросят, зокрема, на збільшення кількості та синтез рецепторів на плазматичній мембрані лімфоцитів.

Проведені нами дослідження засвідчили вірогідне підвищення комплементарної активності в сироватці крові (КАСК) тварин другої дослідної групи, яким перорально вводили Хром у дозі 150 мкг, на 42,4-51,5 % на 10-ту, 20-ту і 25-ту доби життя та у поросят третьої дослідної групи (доза хрому 250 мкг) - на 30,0 % на 20-ту добу щодо контролю (табл. 1).

Як бачимо з отриманих результатів, кількість циркулюючих імунних комплексів (ЦІК) у сироватці крові поросят була вірогідно більшою у період з 20-ї по 30-ту добу життя на 13,5-19,1 % у тварин другої дослідної групи та на 13,1-22,7 % у поросят третьої дослідної групи на 10-ту та 25-ту доби порівняно з контрольною групою. Така динаміка ЦІК у крові досліджуваних поросят свідчить про формування високого рівня імунобіологічної реактивності та наступну елімінацію цих комплексів.

Таблиця 1. Вміст циркулюючих імунних комплексів та комплементарна активність сироватки крові поросят (М±m, n=5)

Період досліджень, доби

Групи тварин

контрольна

перша дослідна

друга дослідна

третя дослідна

Комплементарна активність сироватки крові, ум. од.

5

0,026±0,003

0,024±0,002

0,026±0,001

0,027±0,005

10

0,033±0,003

0,040±0,010

0,050±0,005*

0,035±0,005

15

0,033±0,003

0,037±0,003

0,043±0,003

0,033±0,003

20

0,033±0,003

0,040±0,005

0,047±0,003*

0,043±0,003*

25

0,037±0,003

0,043±0,003

0,053±0,003**

0,043±0,003

30

0,040±0,005

0,043±0,003

0,057±0,005

0,050±0,006

Циркулюючі імунні комплекси, мМ/мл

5

72,00±6,44

71,70±2,45

67,89±3,88

72,02±4,84

10

73,33±4,41

80,55±2,50

87,50±3,50

90,00±2,00*

15

74,00±3,21

80,67±3,48

84,66±2,85

87,50±4,50

20

81,00±2,08

90,67±2,96

92,50±4,50*

88,33±4,41

25

81,00±1,53

91,33±3,85

92,00±1,53**

91,66±1,76**

30

82,66±1,20

94,00±4,05

98,50±2,50**

89,33±2,66

Посилення комплементарної активності сироватки крові та збільшення вмісту ЦІК під впливом тривалентного Хрому у наведених вище дозах можна пояснити його дією на гормон інсулін, що сприяє поліпшенню його зв'язування з рецепторами мембрани клітин.

Ці результати узгоджуються з наявними в літературі даними про стимулювальний вплив тривалентного Хрому на функцію імунної системи (Burton et al., 1995; Chang et al., 1996).

Вплив перорального введення хлориду Хрому на інтенсивність ПОЛ і активність ферментів САЗ в організмі поросят. Останніми роками рівень процесів ПОЛ широко застосовують у діагностиці різних патологій тварин. Із табл. 2 видно, що пероральне введення поросятам дослідних груп Хрому сприяло зниженню концентрації первинних і кінцевих продуктів ПОЛ у їх крові. Так, концентрація ТБК-активних продуктів у плазмі поросят першої дослідної групи була вірогідно меншою на 22,3-49,6 % на 10-ту, 25-ту і 30-ту доби життя, у тварин третьої дослідної групи - на 40,8 % на 15-ту, 25-ту і 30-ту доби стосовно контролю.

Таблиця 2. Вміст продуктів ПОЛ у плазмі крові поросят (М±m, n=5)

Період досліджень, доби

Групи тварин

контрольна

перша дослідна

друга дослідна

третя дослідна

Гідропероксиди ліпідів, ОЕ/мл

5

0,56±0,08

0,62±0,15

0,58±0,20

0,61±0,09

10

0,72±0,09

0,90±0,023

0,66±0,07

0,73±0,02

15

0,74±0,03

0,72±0,05

0,61±0,08*

0,82±0,12

20

1,25±0,05

0,85±0,03***

0,53±0,06***

0,65±0,02***

25

0,63±0,01

0,56±0,05

0,57±0,01**

0,7±0,07

30

0,84±0,13

0,81±0,07

0,24±0,06**

0,82±0,07

ТБК-активні продукти, нМ/мл

5

3,55±0,15

3,50±0,20

3,61±0,17

3,57±0,12

10

3,17±0,09

2,21±0,20**

3,35±0,22

3,44±0,19

15

3,55±0,25

3,52±0,27

3,47±0,10

2,83±0,10*

20

2,53±0,12

2,51±0,06

2,53±0,10

2,35±0,16

25

2,73±0,18

2,12±0,16*

2,61±0,28

1,62±0,37*

30

2,62±0,21

1,32±0,22**

2,26±0,06

1,55±0,16**

Вміст гідропероксидів ліпідів у плазмі крові був менший в поросят усіх дослідних груп на 20-ту добу життя(р<0,001) відносно контролю.

Проведені нами дослідження показали (табл. 3), що активність супероксиддисмутази в еритроцитах під впливом хлориду Хрому вірогідно підвищувалась у всіх дослідних групах поросят в період з 10-ї по 30-ту добу життя відносно тварин контрольної групи. Ці результати досліджень узгоджуються з наявними в літературі даними про стимулювальний вплив Хрому на активність СОД у крові молодняку та дорослих свиней (Максимович І. Я., 2008).

Визначено вірогідно вищу активність каталази в еритроцитах поросят усіх дослідних груп за дії хрому щодо контролю в період з 15-ї по 30-ту доби життя. Активність глутатіонпероксидази в еритроцитах дослідних груп поросят вірогідно зростала відносно контролю. У поросят першої дослідної групи вона була вірогідно вища на 17,1-27,1 % на 15-ту, 20-ту і 30-ту доби життя, у другій дослідній групі - на 30,0-32,7 % у період з 15-ї по 30-ту доби та у третій - на 25,1-44,9 % на 15-ту і 30-ту доби життя тварин.

Підвищення активності каталази та глутатіонпероксидази під впливом хлориду Хрому в наведених дозах можна пояснити його дією через білок хроммодулін на гормон інсулін, що сприяє поліпшенню зв'язування цього гормону з рецепторами клітин.

Таблиця 3. Активність ферментів САЗ в еритроцитах поросят (М±m, n=5)

Період досліджень, доби

Групи тварин

контрольна

перша дослідна

друга дослідна

третя дослідна

Супероксиддисмутаза, ум.од./мг білка

5

26,39±0,76

26,34±0,62

26,45±0,84

26,40±0,56

10

26,07±1,51

33,87±1,05**

28,63±1,44

29,74±1,72

15

28,53±1,53

34,20±0,58*

33,04±0,92

34.23±1.09*

20

38,29±0,92

43,86±1,86

45,26±2,11*

45,66±1,71*

25

46,93±1,71

48,29±3,03

50,52±0,53

48,95±1,58

30

45,79±0,40

51,58±1,50**

49,21±0,79*

53,82±3,82

Каталаза, мкМоль/хв мг білка

5

1,125±0,028

1,084±0,054

1,115±0,021

1,097±0,027

10

0,922±0,014

1,047±0,047

0,988±0,026

1,033±0,045

15

1,002±0,017

1,121±0,051

1,107±0,016**

1,298±0,097**

20

1,120±0,049

1,21±0,042

1,232±0,025*

1,288±0,012*

25

1,106±0,043

1,271±0,02*

1,210±0,034

1,280±0,009**

30

1,208±0,016

1,22±0,019

1,279±0,012**

1,323±0,028**

Глутатіонпероксидаза, мкМоль/хв мг білка

5

21,68±1,59

21,42±1,13

20,87±0,87

21,05±1,12

10

19,53±1,73

20,95±0,39

19,78±0,56

20,00±1,16

15

20,50±0,55

25,73±1,87*

23,06±0,87*

25,66±1,77**

20

21,20±0,17

24,84±1,22**

23,76±0,67**

25,87±1,75

25

21,13±0,26

25,13±0,87

27,48±0,49***

24,56±1,81

30

19,70±0,67

25,05±1,02**

26,14±1,66**

28,55±0,75***

Інсулін у свою чергу виступає в організмі як антагоніст гормону кортизолу, під впливом якого посилюються процеси пероксидації, внаслідок чого спостерігається зниження інтенсивності накопичення продуктів ПОЛ, а отже, підвищення активності ферментів системи антиоксидантного захисту.

Вплив перорального введення Хрому на вміст загального білка плазми крові та співвідношення його фракцій. Показано, що введення Хрому в дозах 50, 150 та 250 мкг зумовлює вірогідне підвищення концентрації загального білка плазми крові у всіх дослідних групах тварин щодо контролю (рис 3).

Це можна пояснити інтенсивнішим синтезом білків під впливом інсуліну, завдяки поліпшенню зв'язувальної здатності цього гормону з рецепторами клітин за допомогою пептиду хроммодуліну, до складу якого входить тривалентний Хром.

Під впливом перорального введення новонародженим поросятам хлориду Хрому у досліджуваних дозах в їх крові вірогідно зростає концентрація альбумінів на 25-ту і 30-ту доби життя порівняно з тваринами контрольної групи. Це пояснюється тим, що під впливом Хрому посилюються анаболічні процеси в організмі поросят і відповідно збільшується потреба у транспортуванні попередників макроструктур до органів і тканин організму.

Результати досліджень показали, що введення тривалентного Хрому супроводжується вірогідним збільшенням вмісту в-глобулінів у крові поросят другої дослідної групи на 30-ту добу стосовно контролю. Підвищення концентрації в-глобулінів пояснюється наявністю у цій фракції білків групи трансферинів.

При дослідженні фракцій загального білка плазми крові зафіксовано вірогідно вищий вміст б1-глобулінів у поросят першої та другої дослідних груп, що отримували Хром в дозах відповідно 50 та 150 мкг, стосовно контролю.

Суттєвим виявився вплив Хрому і на масову частку г-глобулінів. Так, у поросят першої дослідної групи вірогідно зростав їх вміст у плазмі крові на 25-ту добу життя на 26,9 % (р<0,05), а у тварин другої дослідної групи - на 20-ту та 30-ту доби на 31,9-40,9 % (р<0,05; р<0,01) відносно контролю.

Наведені вище результати досліджень узгоджуються з наявними в літературі повідомленнями (Okada S., 1989) про збільшення вмісту г-глобулінів під впливом Хрому в плазмі крові тварин. Це пояснюється збільшенням концентрації імуноглобулінів за рахунок поліпшення реплікації РНК з ДНК в ядрах клітин, за умови збільшення в них вмісту Хрому.

Ріст і збереженість поросят. Пероральне введення тривалентного Хрому в дозі 150 мкг тварині у виробничих умовах сприяло збільшенню середньодобового приросту маси тіла поросят (табл. 4) на 12 % (р<0,05) та їх збереженості на 7 % відносно тварин контрольної групи.

Таблиця 4. Вплив Хрому на прирости маси тіла та збереження поросят (Mm; n=20)

Показники

Контрольна

Перша дослідна

Друга дослідна

Третя дослідна

середньодобові прирости, г

185,0±6,4

190,7±8,4

208,3±6,9*

205,1±7,6

збереженість, %

88

89

95

93

Висновки

хром антиоксидантний імунітет хлорид

У дисертації, відповідно до поставленої мети і завдань досліджень, отримано нові дані, які розкривають механізми впливу перорального введення хлориду хрому на імунний статус, процеси ПОЛ, стан САЗ та білковий обмін новонароджених поросят. З'ясовано, що введення поросятам Хрому посилює їх адаптаційну здатність, що супроводжується поліпшенням стану клітинного та гуморального імунітету і біохімічного профілю крові. Доведено й науково обґрунтовано зростання рівня резистентності та збереження поросят раннього віку за введення хлориду хрому у дозі 150 мкг тварині.

1. При дослідженні морфологічних показників крові дослідних поросят, яким вводили хлорид хрому у дозі 50 мкг (перша дослідна група), 150 мкг (друга дослідна група) та 250 мкг (третя дослідна група), встановлено вірогідно більшу кількість еритроцитів на 7,5-21,7 % та лейкоцитів на 30,3-77,7 % у період з 10-ї по 30-ту добу життя тварин.

2. Константовано, що введення поросятам раннього віку хрому у вказаних дозах сприяє вірогідному зростанню комплементарної активності сироватки крові на 30-51,5 %, вмісту циркулюючих імунних комплексів - на 13,2-22,7 % у період з 10-ї по 30-ту добу та виявляє тенденцію до зростання фагоцитарної активності нейтрофілів.

3. Додаткове введення поросятам хлориду хрому сприяє вірогідному збільшенню в крові тварин кількості Т-загальних лімфоцитів на 7,47-12,77 % у період з 15-ї по 25-ту добу, Т-активних лімфоцитів - на 17,6-37,7 % на 15-ту і 30-ту доби, Т-хелперів - на 12,2-20,6 % на 10-ту, 20-ту і 30-ту доби, В-лімфоцитів - на 29,8-32,9 % на 20-ту та 30-ту доби та бластних клітин на 25-ту і 30-ту доби, а також зменшенню кількості Т-супресорів на 10-ту і 25-ту доби та індексу супресії - на 30-ту добу.

4. Виявлено, що введення тривалентного хрому, вірогідно знижує вміст ТБК-активних продуктів на 22,3-49,6 % та гідропероксидів ліпідів - на 17,6-57,6 % у плазмі крові дослідних тварин, починаючи з 10-ї доби життя.

5. Введення новонародженим поросятам хлориду хрому сприяє вірогідному зростанню в еритроцитах активності СОД - на 7,4-29,9 % і вмісту відновленого глутатіону - на 12,5-37 % на 10-ту, 15-ту, 20-ту і 30-ту доби, каталази - на 5,90-29,5 % та глутатіонпероксидази - на 12,0-44,9 % у період з 15-ї по 30-ту доби життя тварин.

6. Пероральне введення поросятам вказаних дозах хрому зумовлює вірогідне зростання у плазмі крові вмісту загального білка на 10-ту, 15-ту, 20-ту і 30-ту доби на 8,7-24,2 %, збільшення вмісту альбумінів на 12,7-24,7 % на 25-ту і 30-ту доби, б 1-глобулінів - на 16,3-26,6 % на 20-ту та 25-ту доби, в-глобулінів - на 13,2 % на 30-ту добу, вмісту г-глобулінів - на 26,9-40,9 % у період з 20-ї по 30-ту добу, підвищення активності АлАТ на 8-13,7 % на 15-ту добу та АсАТ - на 6-18,3 % на всіх етапах досліджень, зменшення концентрації сечовини на 12,1-33,5 % та глюкози - на 11,8-18,1 % у період з 20-ї по 30-ту добу життя.

7. Додаткове введення поросятам тривалентного хрому сприяло підвищенню приросту маси тіла на 12,6 % та збереження - на 7 %. При аналізі та узагальненні результатів досліджень визначено оптимальну дозу Хрому - 150 мкг тварині.

Пропозиції виробництву:

З метою підвищення життєздатності новонароджених поросят резистентності їх організму та збереження поголів'я рекомендується вводити їм per os хлорид Хрому в дозі 612 мкг (доза хрому становить 150 мкг тварині), попередньо розчиненого в фізіологічному розчині, з п'ятидобовим інтервалом, починаючи з 5-ї доби життя до 30-добового віку.

Список опублікованих праць за темою дисертації

1. Юрків О.Я. Показники білкового обміну у поросят за дії різних доз Хрому / О.Я. Юрків, В. В Снітинський, Р.Я. Іскра, І. Я. Максимович // Таврійський науковий вісник. - Херсон, 2008. - Вип. 58, № 2. - С. 327-332.

2. Юрків О.Я. Показники антиоксидантної системи у поросят за дії різних доз Хрому / О.Я. Юрків, В. В Снітинський, Р.Я. Іскра, І. Я. Максимович // Науковий вісник Львівського національного університету ветеринарної медицини ім. С.З. Гжицького. - Львів, 2008. - Т. 10, № 3 (38). - Ч. 2. - С. 291-295.

3. Юрків О.Я. Антиоксидантний статус у поросят раннього постнатального віку за дії різних доз Хрому / О.Я. Юрків, В.В. Снітинський, Р.Я. Іскра, І. Я. Максимович // Науково-технічний бюлетень Інституту біології тварин та ДНДКІ ветпрепаратів та кормових добавок. - Львів, 2008. - Вип. 9, № 4. - С. 112-116.

4. Юрків О.Я. Деякі показники імунного статусу у поросят раннього постнатального віку за дії різних доз Хрому / О.Я. Юрків, Р.Я. Іскра, І. Я. Максимович // Науково-технічний бюлетень Інституту біології тварин та ДНДКІ ветпрепаратів та кормових добавок. - Львів, 2009. - Вип. 10, № 1-2. - С. 416-419.

5. Юрків О.Я. Формування клітинного імунітету у поросят раннього постнатального віку за дії різних доз Хрому / О.Я. Юрків // Науково-технічний бюлетень Інституту біології тварин та ДНДКІ ветпрепаратів та кормових добавок. - Львів, 2010. - Вип. 11, № 1. - С. 264-268.

6. Юрків О.Я. Динаміка змін показників білкового обміну у поросят за дії різних доз Хрому / О.Я. Юрків, В. В Снітинський, І. Я. Максимович // Науково-технічний бюлетень Інституту біології тварин та ДНДКІ ветпрепаратів та кормових добавок. - Львів, 2010. - Вип. 11, № 2-3. - С. 85-90.

7. Пат. на корисну модель № 45491, Україна, МПК А 23 К 67/02. Спосіб підвищення збереженості новонароджених поросят / Юрків О.Я., Снітинський В. В., Іскра Р. Я., Максимович І. Я.; винахідник і власник Інститут біології тварин УААН. - № u 2009 06115 ; заявл. 15. 06. 2009 ; опубл. 10. 11. 2009, Бюл. № 21, 2009. - 4 с.

8. Сборник трудов 16-й международной научно-практической конференции ГГАУ "Пути интенсификации отрасли свиноводства в странах СНГ" (Гродно, 26?27 августа 2009 г.) / Юркив О.Я., Искра Р.Я. - Гродно, 2009. - С. 248-250.

9. Материалы 5-й международной конференции, посвященной 50-летию ВНИИФБиП "Актуальные проблемы биологии в животноводстве" (Боровск, 14?16 сентября 2010 г.) / Юркив О.Я. - Боровск, 2010. - С. 120-121.

Размещено на Allbest.ru


Подобные документы

  • Вільні амінокислоти у регуляторних і адаптаційних процесах організму. Надходження важких металів і кадмію та пошкодження макромолекул та надмолекулярних компонентів клітини. Вплив кадмію сульфату на азотний і вуглеводний обмін в організмі щурів.

    автореферат [46,9 K], добавлен 09.03.2009

  • Особливості окисно-відновних реакцій в організмі людини. Відмінність окисно-відновних реакцій в живій та неживій природі. Взаємозв’язок енергетичного та пластичного обміну: розкладання вуглеводів в організмі, обмін тригліцеридів, окиснення білків.

    курсовая работа [1,9 M], добавлен 21.09.2010

  • Обмін речовин як основна функція життя. Роль білків у обміні речовин. Значення жирів та вуглеводів у організмі. Водний і мінеральний обмін. Значення води в процесі росту і розвитку дитини. Класифікація та призначення витамінів. Норми та режим харчування.

    реферат [34,8 K], добавлен 29.11.2009

  • Накопичення продуктів вільнорадикального окислення ліпідів і білків. Ефективність функціонування ферментів першої лінії антиоксидантного захисту. Вільнорадикальні процеси в мозку при експериментальному гіпотиреозі в щурів при фізичному навантаженні.

    автореферат [84,7 K], добавлен 20.02.2009

  • Аналіз сутності, складу, будови, особливостей структури білків - складних високомолекулярних природних органічних речовин, що складаються з амінокислот, сполучених пептидними зв'язками. Порівняльні розміри білків та пептидів. Функції білків в організмі.

    презентация [357,5 K], добавлен 10.11.2010

  • Визначення терміну життя білків в організмі. Будова протеасоми як спеціального білкового утворення. Роль убіквіну в процесі утилізації білків. Методи виявлення злоякісних утворень або ослаблення імунної системи клітин. Функціональне призначення лізосоми.

    презентация [111,1 K], добавлен 24.09.2014

  • Головні напрями палеоантропологічних досліджень. Визначення біологічного віку, показник віку людини. Зміни, якi відбуваються на довгих трубчастих кістках. Статеві відмінності (диморфізм) виражені в будові таза, та морфології довгих трубчастих кісток.

    реферат [15,1 K], добавлен 29.09.2010

  • Управління обміном вуглеводів. Математичний аналіз системи регуляції рівня кальцію в плазмі. Основна модель регуляції обміну заліза у клітинах. Управління обміном білків, жирів і неорганічних речовин. Баланс тепла в організмі. Регуляція температури тіла.

    реферат [25,9 K], добавлен 09.10.2010

  • Будова, фізичні та хімічні властивості білків. Для виявлення білків у різних матеріалах застосовують кольорові реакції, найважливішими з яких є ксантопротеїнова і біуретова. Елементарний склад, молекулярна маса білків. Застосування білків у промисловості.

    реферат [296,8 K], добавлен 09.11.2010

  • Загальний біоморфологічний опис Gіnkgo bіloba. Поширення рослини в Україні. Орфографічні та кліматичні умови міста Львова. Фармакологічні властивості, будова і функції білків в рослинному організмі. Аналіз методів дослідження і характеристика обладнання.

    дипломная работа [3,9 M], добавлен 09.06.2014

Работы в архивах красиво оформлены согласно требованиям ВУЗов и содержат рисунки, диаграммы, формулы и т.д.
PPT, PPTX и PDF-файлы представлены только в архивах.
Рекомендуем скачать работу.