Структурно-функціональні зміни фібронектину при патологічних станах
Застосування критеріїв діагностики та прогнозування захворювань. Визначення рівня фібронектину в плазмі крові. Дослідження його деградації та спектру під дією протеолітичних ензимів. Аналіз фрагментованості, лектин-зв'язуючої активності та експресії.
| Рубрика | Биология и естествознание |
| Вид | автореферат |
| Язык | украинский |
| Дата добавления | 25.07.2015 |
| Размер файла | 311,6 K |
Отправить свою хорошую работу в базу знаний просто. Используйте форму, расположенную ниже
Студенты, аспиранты, молодые ученые, использующие базу знаний в своей учебе и работе, будут вам очень благодарны.
Диссертация на соискание ученой степени кандидата биологических наук по специальности 03.00.04 - биохимия. - Институт биохимии им. А.В. Палладина НАН Украины, Киев, 2010.
В диссертационной работе исследованы содержание, фрагментированность, микрогетерогенность, функциональная активность фибронектина (ФН), а также локализация этого гликопротеина в клетках крови при хронических миелопролиферативных заболеваниях крови, сердечно-сосудистых заболеваниях и заболеваниях печени.
Выявлено, что содержание фибронектина в плазме снижается при истинной полицитемии (эритремии) и сублейкемическом миелозе по сравнению с нормой и составляет 240,72±12,97мкг/мл, 237,85±10,99 мкг/мл и 324,56±14,62 мг/мл соответственно. Функциональная активность фибронектина снижается при хронических миелопролиферативных заболеваниях крови, хронических гепатитах, но увеличивается при остром инфаркте миокарда. Выявлено положительную корреляционную связь между концентрацией фибронектина в крови и его функциональной активностью при истинной полицитемии (r=0,849, при р<0,01) и сублейкемическом миелозе (r=0,746, при р<0,05).
Показано, что в норме в плазме циркулируют фрагменты ФН с молекулярной массой от 230 до 98 кДа. Фрагментированность ФН увеличивалась при истинной полицитемии, сублейкемическом миелозе и атеросклерозе. При атеросклерозе выявлены фрагменты ФН с молекулярной массой 72-60 кДа, при эритремии количество фрагментов ФН с молекулярной массой 120 кДа снижалось почти в 2 раза по сравнению с нормой.
В экспериментах с протеолической деградацией ФН было показано, что наиболее глубокую деградацию ФН осуществляют трипсин, химотрипсин и коллагеназа с образованием фрагментов с молекулярной массой от 190 до 17,5 кДа, причем с увеличением времени инкубации снижается количество высокомолекулярных фрагментов. Матриксные металлопротеиназы-2 и -9 оказывают умеренный протеолиз ФН, под их воздействием образуются практически одинаковые фрагменты с молекулярной массой от 94 до 42 кДа. Сравнительный анализ спектров фрагментов ФН, образующихся при инкубации ФН с сериновыми и цинковими протеиназами и циркулирующих фрагментов ФН в плазме крови больных позволил определить наиболее характерные для действия каждого фермента и заболевания фрагменты ФН. При хронических миелопролиферативных заболеваниях крови увеличивалось количество фрагментов с молекулярной массой 165 кДа, 58 кДа, 190 кДа, 28 кДа, характерных для деградации ФН трипсином, химотрипсином, коллагеназой и тромбином, а при атеросклерозе дополнительно увеличивалось количество фрагментов, которые могут образовываться под действием ММП-2 и ММП-9. В модельном эксперименте на крысах с доксорубицин-индуцированной кардиопатией также выявлено увеличение фрагментированности ФН в крови с появлением фрагментов, характерных для действия названных протеиназ.
Показано, что дегликозилирование антител к ФН не влияет на их антиген-связывающую активность. Методом лектин-ферментного анализа выявлено, что гликозилированность ФН изменяется при исследуемых патологических состояниях и зависит от типа заболевания. Так, при истинной полицитемии и сублейкемическом миелозе увеличивается содержание коровой фукозы N-гликанов, а содержание б(1>2) фукозы О-гликанов увеличивается в первом случае и снижается во втором. При хронических гепатитах содержание терминальной фукозы О-гликанов увеличивается почти втрое, а содержание сиаловых кислот снижается. При остром инфаркте миокарда выявлено снижение содержания как коровой фукозы N-гликанов, так и сиаловых кислот в составе олигосахаридных цепей ФН. Содержание полиантенных структур увеличивается при всех исследуемых патологиях.
Выявлено увеличение количества лимфоцитов с поверхностной и внутриклеточной локализацией ФН при хронических миелопролиферативных заболеваниях крови, сердечно-сосудистых заболеваниях и заболеваниях печени. Показано, что при истинной полицитемии этот гликопротеин может быть экзогенного (захватываться с плазмы) и эндогенного (синтезироваться самими клетками) происхождения. Доказано, что количество лимфоцитов с внутриклеточной локализацией ФН при истинной полицитемии увеличивается за счет повышения экспрессии мРНК фибронектина-1 в этих клетках.
Ключевые слова: фибронектин, фрагменты фибронектина, микрогетерогенность, функциональная активность, локализация, экспрессия.
SUMMARY
Kulinich A.O. Structional and functional changes of fibronectin during pathological states. - Manuscript.
Thesis for Philosophy Doctor (PhD) degree in Biology, speciality - 03.00.04 - biochemistry. - Palladin Institute of Biochemistry of NAS of Ukraine, Kyiv, 2010.
Fibronectin level, its fragmentation, microheterogenity, functional activity and rearrangement of blood cells on fibronectin localization in myeloproliferative diseases of blood, heart and liver diseases were investigated.
It was established that functional activity of fibronectin decreased in proliferative blood diseases and chronic diseases of liver and increased in acute myocardial infarction. Positive correlative connection between fibronectin concentration in blood and its functional activity in myeloproliferative diseases was revealed.
It was established that under the treatment of proteolytic enzymes such as trypsine, chymotrypsine and matrix metalloproteinase-2 appeared greater amount of fibronectin fragments than was indicated by others researchers. It pointed out the presence of additional sites, which are perceptible to investigated proteinases. Spectrum of fibronectin fragments in blood of patients with erythremia, subleukemic myelosis and atherosclerosis was defined. It was wider than in norm and reflected the type of pathological process.
Patterns of structural changes of fibronectin glycanes were revealed in investigated diseases. Connection between structure of carbohydrate compound of fibronectin and its functional activity was proved.
Increase of lymphocytes amount with surface- and intracellular localization of fibronectin in investigated diseases was shown. It was proved that amount of lymphocytes with intracellular localization of fibronectin in erythremia was connected with the increase of fibronectin-1 expression in these cells.
Key words: fibronectin, fibronectin fragments, microgeterogenity, functional activity, localization, expression.
Размещено на Allbest.ru
Подобные документы
Розвиток ендокринології та вивчення ролі гормонів в пристосувальних реакціях організму. Структурно-функціональні особливості та патологічні стани наднирників у ембріонів та дітей, їх дослідження в процесі старіння у зрілих людей та осіб похилого віку.
дипломная работа [1,6 M], добавлен 12.02.2011Біологічне значення стомлення, методи його дослідження. Вивчення біохімічних основ стомлення у підлітків та його діагностування доступними засобами. Виявлення зміни в активності слини учнів внаслідок стомлення під час фізичних та розумових навантажень.
курсовая работа [116,8 K], добавлен 21.01.2017Внутрішнє середовище та його особливості. Функції, кількість і склад крові, її ферментні елементи. Групи крові, резус-фактор, резус-конфлікт і групова несумісність. Переливання крові та використання крові з лікувальної метою, розвиток донорства.
реферат [33,5 K], добавлен 29.11.2009Вивчення ембріогенезу легень та періодизації їх формування на основі даних макро-, мікро морфологічного і гістохімічного аналізів. Основні етапи розвитку легень у людини в постнатальному періоді, їх функціональні зміни. Легені на пізніх етапах онтогенезу.
курсовая работа [56,0 K], добавлен 06.11.2010Вектор pREP4 - розроблений для конститутивної експресії високого рівня, завдяки промотору CMV або RSV. Схема, яка використовується для клонування. Структура полілінкера. Вектор pBudCE4.1, який служить для експресії двох генів у клітинних ліній ссавців.
реферат [768,7 K], добавлен 15.12.2011Поняття і рівні регуляції експресії генів. Їх склад і будова, механізм формування і трансформування. Транскрипційний рівень регуляції. Приклад індукції і репресії. Регуляція експресії генів прокаріот, будова оперону. Огляд цього процесу у еукаріот.
презентация [1,7 M], добавлен 28.12.2013Фізіологічні та біологічні характеристики крові. Кількість крові у тварин. Значення депонованої крові, механізми перерозподілу крові між депонованої і циркулюючої. Еритроцити як дихальні пігменти, які здійснюють перенесення кисню і діоксиду вуглецю.
реферат [15,5 K], добавлен 12.11.2010Відкриття та дослідження молекули інсуліну, її хімічна будова. Біосинтез інсуліну, регуляція його секреції, функції та перетворення в організмі, властивості та біологічна дія. Методи визначення інсуліну, його застосування для виготовлення препаратів.
реферат [2,7 M], добавлен 09.01.2010Управління обміном вуглеводів. Математичний аналіз системи регуляції рівня кальцію в плазмі. Основна модель регуляції обміну заліза у клітинах. Управління обміном білків, жирів і неорганічних речовин. Баланс тепла в організмі. Регуляція температури тіла.
реферат [25,9 K], добавлен 09.10.2010Вміст цинку у земній корі і грунті. Концентрації і значення цинку у живій речовині. Характеристика проявів патологічних змін від нестачі та надлишку вмісту кальцію в організмах людини та рослин. Передозування цинку у кормах тварин і його наслідки.
курсовая работа [5,7 M], добавлен 05.05.2015
