Вирусы и вакцинация

Размещено на http://www.allbest.ru/

Контрольная работа

по вирусологии и биотехнологии

ВИРУСЫ И ВАКЦИНАЦИЯ

Иркутск, 2015 год



Содержание

1. Структурные и неструктурные белки вирусов

2. Пути проникновения вирусов в организм животного и барьеры на этих путях

3. Требования к идеальной вакцине

4. Вирус 3КРС.

5. Семейство Herpesviridae



1. Структурные и неструктурные белки вирусов

Структурные белки входят в состав зрелых внеклеточных вирионов и выполняют ряд функций:

1) защиту нуклеиновой кислоты от внешних повреждающих воздействий;

2) взаимодействие с мембраной чувствительных клеток в ходе первого этапа заражения;

3) взаимодействие с вирусной нуклеиновой кислотой в ходе и после ее упаковки в капсид;

4) способность к разрушению в ходе освобождения нуклеиновой кислоты и др.

В зависимости от расположения того или иного белка в вирионе выделяют следующие группы белков:

1) капсидные;

2) вирусной суперкапсидной оболочки. Имеются у вирусов, выходящих из клеток путем почкования (пара-, орто-, коронавирусы и др.);

3) матриксные. Это белки промежуточного слоя вирионов, расположенного сразу под суперкапсидной оболочкой некоторых вирусов;

4) белки вирусных сердцевин, представлены в основном ферментами.

Неструктурные белки - это белки, кодируемые вирусным геномом, но не входящие в вирион, их делят на пять групп:

1) регуляторы экспрессии вирусного генома;

2) предшественники вирусных белков;

3) нефункциональные пептиды;

4) ингибиторы клеточного биосинтеза и ингибиторы разрушения клеток;

5) вирусные ферменты.

Вирусология - наука о вирусах, субмикроскопических внутриклеточных паразитов.

Впервые существование вируса (как нового типа возбудителя болезней) доказал в 1892 году русский учёный Д.И. Ивановский. После многолетних исследований заболеваний табачных растений, в работе, датированной 1892 годом, Д.И. Ивановский приходит к выводу, что мозаичная болезнь табака вызывается «бактериями, проходящими через фильтр Шамберлана, которые, однако, не способны расти на искусственных субстратах». На основании этих данных были определены критерии, по которым возбудителей заболеваний относили к этой новой группе: фильтруемость через «бактериальные» фильтры, неспособность расти на искусственных средах, воспроизведения картины заболевания фильтратом, освобождённым от бактерий и грибов. Возбудитель мозаичной болезни называется Д.И. Ивановским по-разному, термин «вирус» ещё не был введён, иносказательно их называли то «фильтрующимися бактериями», то просто «микроорганизмами». Пять лет спустя, при изучении заболеваний крупного рогатого скота, а именно - ящура, был выделен аналогичный фильтрующийся микроорганизм. А в 1898 году, при воспроизведении опытов Д. Ивановского голландским ботаником М. Бейеринком, он назвал такие микроорганизмы «фильтрующимися вирусами». В сокращённом виде это название и стало обозначать данную группу микроорганизмов. В 1901 году было обнаружено первое вирусное заболевание человека - жёлтая лихорадка. Это открытие было сделано американским военным хирургом У. Ридом и его коллегами. В 1911 году Фрэнсис Раус доказал вирусную природу рака - саркомы Рауса (лишь в 1966 году, спустя 55 лет, ему была вручена за это открытие Нобелевская премия по физиологии и медицине).

2. Пути проникновения вирусов в организм животного и барьеры на этих путях

Вирусные болезни передаются от больных животных здоровым различными путями. Например, аэрогенно передаются вирусы инфекционного бронхита кур, инфекционного ринотрахеита крупного рогатого скота, оспы. Алиментарно, т. е., с кормом, с водой, передаются вирусы ящура, вирусной диареи крупного рогатого скота, гриппа птиц.

Контактно, т. е., прямым соприкосновением, или непрямым контактом - через инфицированные предметы ухода, передается вирус оспы. Около 40% вирусов передается трансмиссивно, т. е., насекомыми.

Например, вирус инфекционной анемии лошадей переносится комарами, клещевого энцефалита - клещами, с укусом передается вирус бешенства. И наконец, трансовариально передается вирус инфекционного бронхита кур, трансплацентарно - вирус инфекционного гастроэнтерита свиней, вирусной диареи крупного рогатого скота.

Большая часть вирусов проникает в организм хозяина через барьеры слизистых оболочек дыхательных путей и пищеварительного тракта.

Поверхность слизистых оболочек защищена от вирусов комплексом факторов: неспецифическими ингибиторами, протеолитическими ферментами, слизью, солями желчных кислот, лизоцимом, Е-киллерами.

Заражение произойдет, если вирус окажется резистентен к названным факторам. Вирусы оспы способны проникать через неповрежденную кожу, а вирус классической чумы свиней, инфекционной анемии лошадей - через поврежденную кожу с укусом членистоногими, вирус иммунодефицита человека - при переливании крови.

Нахождение вируса на месте внедрения называют первичной локализацией вируса, которая может быть в эпителии кожи или слизистых оболочек, в регионарных лимфатических узлах, в клетках тканей.

Некоторые вирусы, например гриппа, в месте первичной локализации уже размножаются.

Тогда в ответ на размножение вируса в организме синтезируется интерферон как фактор естественной видовой и неспецифической резистентности.



3. Требования к идеальной вакцине

Основное требование, которое предъявляется к вакцинам, состоит в том, что они должны иметь нормальные "рабочие" качества. Это может быть достигнуто только в том случае, если в процессе транспортировки, хранения и реализации вакцина содержалась в надлежащих условиях. Поэтому специалисты не рекомендуют использовать для приобретения вакцин "сомнительные" источники.

Наиболее надежные источники вакцин - ветеринарные аптеки и клиники (в клинике можно и привить собаку). Если заводчики, у которых вы купили щенка, занимаются собаками серьезно, то можно взять вакцину у них. Третьим возможным местом покупки вакцины может быть торговая фирма, но в этом случае вы должны быть уверены в ее добросовестности.

Метод вакцинации (от лат. vacca - корова), разработан в конце XVIII в. английским врачом E. Jenner. Он обратил внимание на тот факт, что доярки, а так же работницы, ухаживавшие за больными животными, иногда заболевали в крайне слабой форме оспой коров, но при этом никогда не болели натуральной оспой. Подобное наблюдение давало исследователю реальную возможность борьбы с болезнью людей.

В 1796 г. E. Jenner решился апробировать метод вакцинации коровьей оспой. Он заметил, что если ввести содержимое оспины коровы, в котором присутствуют болезнетворные бактерии, в кожный надрез человеку, то вакцинированный не заболеет натуральной оспой. Эксперимент прошел успешно, с тех пор способ вакцинации по E. Jenner нашел широкое применение во всем мире. Для борьбы с большинством инфекционных заболеваний сельскохозяйственных животных и птиц ветеринарные работники вооружены соответствующими вакцинами, специфическими сыворотками и химиотерапевтическими средствами. Для диагностики скрытых форм заболевания (сапа, туберкулёза, бруцеллёза) с успехом применяют аллергические методы диагностики и ряд серологических реакций (реакцию связывания компонента (РСК), реакцию агглютинации (РА), преципитации и пр.).

При использовании методов специфической профилактики, терапии и диагностики инфекционных заболеваний каждый практический ветеринарный работник должен, исходя из общей эпизоотологической обстановки, уяснить себе, как правильно и наиболее эффективно применить рекомендуемые методы. Практические работники должны иметь полное представление о биопрепаратах, о принципах их изготовления, дозировке, способе введения, о противопоказаниях при прививках, об эффективности их в смысле длительности и напряжённости иммунитета и пр.

В этой статье последовательно указано, как организовать и провести прививки биопрепаратами и лечение химиотерапевтическими средствами, описаны препараты, по применению которых утверждены специальные наставления. Статья рассчитана на широкий круг ветеринарных работников, занятых диагностикой заразных заболеваний, их профилактикой и лечением, и содержит также описание методов постановки серологических реакций в лаборатории (РСК, РА, реакции преципитации).

Около двух тысяч лет назад Варром было высказано предположение о живой природе возбудителей заразных заболеваний. В дальнейшем эти мысли высказывались неоднократно, однако состояние лабораторной техники того времени не давало наглядных и убедительных доказательств. Кирхнер (1601-1680) при помощи изготовленной им лупы впервые наблюдал микроорганизмы в мясе, молоке, сыре. Несколько лет спустя Левенгук сконструировал микроскоп, позволявший ему наблюдать и описать бактерии зубного налёта, плесневые грибки, дрожжи.

Вполне ясно и точно было сформулировано предположение о живой природе заразного начала в 40-х годах прошлого столетия Генле. Позже это предположение было подтверждено блестящими опытами Пастера. При многих известных нам заболеваниях человека, сельскохозяйственных животных и птиц были найдены возбудители-микробы растительного и животного происхождения или вирусы. Микробы и простейшие организмы, паразитирующие в теле животного, могут быть получены в чистом виде при культивировании их на специальных средах или в животном организме.

Вирусы представляют собой инфекционное начало, природа которого ещё окончательно не установлена. По величине - это крайне ничтожные частицы, невидимые в микроскоп и способные проходить через фильтровальные свечи. Одновременно существуют переходные по величине формы между микробами и вирусами (возбудитель повального воспаления лёгких крупного рогатого скота), которые удаётся видеть с помощью микроскопа только при очень большом увеличении. Различают патогенные и апатогенные микроорганизмы. Под патогенностью микроба следует понимать его болезнетворность и способность к жизни и размножению в животном организме. Не все патогенные микроорганизмы способны вызывать инфекционный процесс. Необходимо, чтобы, патогенный микроорганизм одновременно обладал также и вирулентностью для данного вида животных. Вирулентность-это качество патогенности у определённого вида микроорганизма, обусловливающее способность его проникать в организм животного и размножаться в нём. Вирулентность меняется от характера течения эпизоотии и от условий выращивания и хранения того или иного микроорганизма на искусственных питательных средах.

В результате жизнедеятельности микроорганизмов накапливаются как в питательных средах, так и в животном организме продукты их жизнедеятельности-токсины и агрессины.

При соприкосновении животного организма с инфекционным началом - паразитом и при проникновении последнего в организм животного наступает ряд биологических изменений, известных под названием инфекции.

Возможность возникновения инфекции и характер её течения обусловлены вирулентностью микроба, а также степенью устойчивости микроорганизма. В отдельных случаях микробы-паразиты могут находиться в организме здоровых животных и не вызывать заболевания. При этом животные способны значительное время сохранять в своём организме заразное начало. По характеру течения инфекционного процесса различают явную и скрытую инфекцию. Чем менее восприимчив данный вид животного к определённой инфекции, тем чаще встречается она в скрытой форме и, наоборот, чем более он восприимчив, тем чаще она принимает острую форму. Между скрытой инфекцией и бациллоносительством не всегда возможно провести резкую грань. Скрыто больные или выздоровевшие животные могут долгое время оставаться бациллоносителями. а иногда и вирусовыделителями. Наиболее часто бациллоносительство и выделение вируса встречается при хронических заболеваниях (сап, туберкулёз, паратуберкулёз, бруцеллёз). В борьбе со скрытой инфекцией в ветеринарии имеется ряд диагностических препаратов и лабораторных методов, с помощью которых удаётся диагносцировать то или другое хроническое инфекционное заболевание. Состояние невосприимчивости животного организма к микроорганизмам или чужеродным веществам (антигенам) известно под названием иммунитета. Наука о подобной невосприимчивости называется (иммунологией, а способы, с помощью которых достигается эта невосприимчивость - иммунизацией).

Для создания иммунитета большое значение имеет характер антигена, вводимого в животный организм. Антигеном может быть всякий живой возбудитель или белковое вещество (убитые возбудители), на введение которого организм реагирует выработкой ряда антител, создающих в совокупности состояние невосприимчивости-иммунитета.

От характера антигена зависят сила иммунитета и его продолжительность. Различают два вида иммунитета: иммунитет абсолютный и относительный.

Под абсолютным иммунитетом понимают невосприимчивость животных к патогенным микроорганизмам или невосприимчивость одних видов животных к болезнетворным микробам, поражающим другие виды. Например, человек невосприимчив к вирусу чумы рогатого скота, к вирусу чумы свиней, к культуре перипневмонии крупного рогатого скота, животные невосприимчивы к венерическим болезням человека. Примером относительного иммунитета может служить невосприимчивость кур к сибирской язве в естественной обстановке. Но если искусственно понизить у кур нормальную температуру тела, то они заражаются сибирской язвой.

По происхождению иммунитет разделяют на врожденный и индивидуально приобретённый.

Врождённый, наследственно передающийся иммунитет является признаком, свойственным определённым видам животных, поэтому его иначе называют видовым иммунитетом: невосприимчивость к сапу отдельных видов животных (крупного рогатого скота, свиней и пр.), невосприимчивость к чуме свиней, рогатого скота, собак и др.

Индивидуальный иммунитет приобретается животными в процессе их жизни и разделяется на активно приобретённый и пассивно приобретённый. Активный иммунитет возникает в организме животного в результате благополучно перенесённой инфекции или при искусственной вакцинации соответствующей вакциной. Он наступает обычно через 8-14 дней после переболевания или прививки и отличается длительностью, продолжающейся при некоторых инфекциях десятки лет, но по наследству он не передаётся. Правда, в отдельных случаях потомство активно иммунизированных животных может быть иммунным, но здесь имеет место передача пассивного иммунитета в утробе матери через плаценту от матери к плоду.

Пассивно приобретённый иммунитет может быть у молодняка при кормлении молоком активно иммунизированных матерей (например, при дизентерии ягнят).

При введении в организм животного сыворотки от переболевших животных или от животных, специально иммунизированных специфическим антигеном (вакциной), также создаётся пассивный иммунитет. Пассивный иммунитет обычно наступает через несколько часов после введения сыворотки и сохраняется в животном организме непродолжительное время - от 10 до 15 дней. Особо следует отметить создание в организме иммунитета против вирусных заболеваний (противовирусный иммунитет).

Известно, что при многих инфекционных заболеваниях, вызванных микроорганизмами, можно с успехом вакцинировать животных культурами, убитыми нагреванием. Вакцинация же животных убитыми нагреванием вирусами либо совершенно не удаётся либо создаёт крайне слабый иммунитет. За последние годы стали с положительными результатами применять формалинизированные вирусные вакцины (при ящуре, оспе овец, при чуме крупного рогатого скота).

Правда, нельзя считать доказанным, что здесь речь идёт о вполне убитом вирусе. Возможно, что формалин меняет активность вируса, уплотняя белковую тканевую среду, в которой он находится. Для практических целей иммунизации против большинства видов вирусных заболеваний используют вирус в живом виде, патогенные свойства которого ослаблены разными методами. При этом иммуногенные свойства вируса сохраняются. В отношении действия антивирусных сывороток следует отметить, что они оказываются эффективными в животном организме только при профилактическом их применении.

Лечебное же действие и крайне ничтожно и отдельные сообщения в отношении эффективности некоторых антивирусных сывороток, применяемых с лечебной целью, остаются спорными.

Отсутствие лечебного эффекта при применении антивирусных сывороток объясняется многими авторами тем, что вирусные частицы связаны с живыми клетками (внутриклеточные паразиты) и являются недоступными для специфической антивирусной сыворотки.

Для распознавания инфекции и для выяснения степени иммунитета в диагностической практике используют аллергические реакции.

Под аллергией принято понимать повышенную или пониженную чувствительность организма к специфическому аллергену. В ветеринарной практике широко используются аллергические реакции для диагностики сапа у однокопытных, туберкулёза и бруцеллёза, а также паратуберкулёза.

При повторном введении животному инородного белка может развиться состояние повышенной реактивной чувствительности (анафилаксия), выражающейся в том, что у животного наступает тяжёлое или смертельное заболевание (анафилактический шок). Состояние анафилаксии развивается не сразу, и между первым и вторым введением антигена должен пройти промежуток в 10-12 дней. Достаточно бывает однократно ввести антиген, чтобы создать в организме состояние анафилаксии на всю жизнь. Анафилаксия наступает при любом способе введения антигена, но чаще всего при внутривенном. Различные животные не одинаково чувствительны к одним и тем же антигенам. Наиболее чувствительны к анафилаксии овцы, козы и лошади, слабее - крупный рогатый скот и свиньи.

Картина анафилаксии у различных животных также неодинакова как по силе проявления, так и по клиническим данным. Чаще всего у большинства животных, спустя короткое время после повторного введения антигена, явления анафилаксии начинаются с раздражения слизистых оболочек, почёсывания. Появляются судорожные вздрагивания, которые в тяжёлых случаях переходят в параличи. Наступает усиленное отделение пота, мочи и кала вследствие расслабления сфинктеров.

Артериальное давление понижается, дыхание учащённое, а к концу приступа оно становится медленным, сопровождаясь редкими спазматическими приступами. В большинстве случаев при явлениях анафилаксии наступает выздоровление, и через 30-45 минут все описанные явления проходят. В тяжёлых случаях наступает смерть.

Хотя смертельный шок от анафилаксии-явление сравнительно редкое среди животных, но практические работники, проводящие прививки, должны всегда о нём помнить. Чтобы предотвратить явления анафилаксии при повторном лечебном или профилактическом применении сыворотки, необходимо проводить десенсибилизацию. Для этого при введении животным сыворотки впрыскивают сначала незначительную дозу её, а через некоторое время (через 30-40 минут при внутреннем вливании и через 3-4 часа - при подкожном введении - необходимую полную дозу. При этом у животного не наступает анафилактического шока, а развивается состояние антианафилаксии. Анафилактический шок у животных можно также предупредить, наркотизируя животных эфиром, однако на практике такое мероприятие проводят сравнительно редко.

4. Вирус 3КРС

Парагрипп-3 (ПГ-3) крупного рогатого скота (транспортная лихорадка) - острая контагиозная болезнь главным образом телят, характеризующаяся лихорадкой и поражением органов дыхания.

Впервые вирусная природа болезни установлена в США в 1959 г. В СССР это заболевание было обнаружено в 1968 г. Болезнь зарегистрирована во всех странах мира, в том числе в России.

Характеристика возбудителя. Вирус относится к семейству Paramyxoviridae, подсемейству Paramyxoviridae, роду Respirovirus.

Вирионы вируса плеоморфные, но чаще сферической или нитевидной формы, диаметр 150 нм и более. Состоят из нуклеокапсида спиральной симметрии и липопротеидной оболочки, на поверхности которой имеются характерные выступы. Геном представлен единой односпиральной линейной молекулой минус-РНК.

В естественных условиях вирус ПГ-3 вызывает заболевание у крупного рогатого скота, поражая до 90-100% животных. Болеют телята не старше одного года. Имеются сообщения о выделении вируса от буйволов, овец, лошадей. Антитела к вирусу ПГ-3 обнаружены у 60-100% клинически здоровых телят, овец, коз, верблюдов, собак, крыс. Отмечено, что у буйволов и ягнят вирус ПГ-3 может быть причиной поражения органов дыхания и желудочно-кишечного тракта.

Устойчивость к физико-химическим воздействиям. Вирус чувствителен к многократному замораживанию и оттаиванию, быстро погибает под действием УФ-излучения, воздействие жирорастворителями (эфир, хлороформ) ведет к полной потере инфекционной активности. Низкие значения pH губительно действуют на вирус, он хорошо сохраняется при pH 6,8-7,5. Прогревание при 50°С в течение 80 мин. ведет к его полной инактивации. Обработка 0,4%-ным раствором формалина и 1%-ным раствором (в-пропиолактона уничтожает инфекционность вируса. Воздействие 0,4%-ным этиленимином в течение 20 ч. не действует на гемагглютинирующую активность, но уничтожает инфекционность вируса. Вирус хорошо переносит лиофилизацию.

Антигенная структура. В вирионах обнаружено шесть полипептидов (L, P, NP, М, HN, F), три из которых (L, P, NP) связаны с нуклеокапсидом и три (М, HN, F) входят в состав липопротеидной оболочки;два из них (HN, F) являются гликопротеинами, которые образуют выступы наружной оболочки. Они ответственны за гемагглютинирующую, нейраминидазную активность, адсорбцию вирионов на клеточной поверхности и за слияние клеток.

Антигенная вариабельность. В антигенном отношении все штаммы вирусов ПГ-3, выделенные в различных странах, идентичны и соответствуют прототипному штамму SF-4, выделенному в США. Установлены некоторые различия в гемагглютинирующей, нейраминидазной и синцитийобразующей активности. Установлено сходство (но не идентичность) между штаммами вируса ПГ-3 крупного рогатого скота и овец.

Близкое антигенное родство вируса ПГ-3 крупного рогатого скота имеет с вирусом парагриппа человека третьего серотипа.

Антигенная активность. Вирус ПГ-3 обладает выраженной антигенной активностью. Как при естественной, так и при искусственной иммунизации появляются специфические антитела, которые обнаруживаются в РТГА, PH, РСК и РДП. Первыми выявляют антигемагглютинины, которые обнаруживаются на значительном уровне (1:64-1:256) в течение 6 мес.

Культивирование вируса. Для размножения вируса ПГ-3 можно успешно применять первичные культуры клеток почек эмбриона крупного рогатого скота (ПЭК), почек, легких телят (ПТ, ЛТ) и тестикул бычков (ТБ). Кроме того, вирус ПГ-3 размножается и в перевиваемых линиях клеток: Таурус 1, МДВК, ПС (почки сайги), ПЛЭК, ВНК-21 и др.

Все штаммы вируса вызывают сходное цитопатическое действие, характеризующееся образованием синцития и вакуолей. Сроки проявления гемадсорбции и ЦПД зависят не от штамма, а от вида культуры клеток. Вирус ПГ-3 размножается также в развивающихся куриных эмбрионах, однако зараженные эмбрионы не погибают.

Гемагглютинирующие свойства. Вирус хорошо агглютинирует эритроциты морской свинки и с меньшей активностью - эритроциты кролика, свиньи, коровы, обезьяны, мыши, буйвола, голубя, овцы, козы, не агглютинирует эритроциты лошади.

Данные об агглютинации эритроцитов кур противоречивы. Свежевыделенные штаммы вируса лучше агглютинируют эритроциты при 4°С, чем при 37°С. Гемагглютинирующая активность вируса повышается значительно после обработки эфиром и твином.

Гемадсорбирующие свойства. Клетки, инфицированные вирусом ПГ-3, приобретают свойство адсорбировать на своей поверхности эритроциты морской свинки и слабее - эритроциты других видов животных. Вирус вызывает диффузную адсорбцию эритроцитов. Важно отметить, что гемадсорбция проявляется раньше, чем цитопатическое действие в инфицированных клетках.

Экспериментальную инфекцию можно воспроизвести на телятах при отсутствии у них специфических антител. Лабораторные животные к вирусу невосприимчивы. Некоторым исследователям удалось вызвать экспериментальную инфекцию у ягнят, поросят и мышей-сосунов.

Клинические признаки. Инкубационный период болезни длится 1-2 дня. Клиническая болезнь проявляется по-разному: от легких ринитов и бронхитов до тяжелой бронхопневмонии. Течение болезни обусловлено многими предрасполагающими стрессовыми факторами (нарушения кормления и содержания, транспортировка, скученность и т. д.), иммунным и физиологическим состоянием животных, способом заражения, дозой и вирулентностью вируса.

Раньше ПР-3 называли «транспортной лихорадкой».

У животных отмечают повышение температуры тела до 41-42°С в течение 1-2 нед., угнетение, одышку, серозно-слизистые истечения из носа, глаз, иногда развивается диарея, отказ от корма. Если нет осложнений секундарной бактериальной микрофлорой, то через 2-3 нед. животные выздоравливают. При тяжелом течении болезни наблюдают сильный кашель, интенсивные выделения из носа, глаз, ротовой полости, появление эрозий на слизистой оболочке рта. У телят при подостром и хроническом течениях отмечают слизисто-гнойные выделения из носа и глаз, признаки плеврита, пневмонии, иногда энтерита. У взрослых животных инфекция, как правило, не сопровождается симптомами респираторного заболевания, однако у стельных коров она может привести к внутриутробному заражению плода, абортам или рождению нежизнеспособных телят.

На исход болезни влияют многие осложняющие стрессовые факторы, вирулентность циркулирующего штамма вируса, одновременное инфицирование животных другими вирусами (аденовирусы, вирусы инфекционного ринотрахеита, диареи и др.), хламидиями и пастереллами.

Патологоанатомические изменения.

В основном находят в органах дыхания: катаральное воспаление слизистой носа, гиперемия слизистой и слизисто-гнойный экссудат в трахее, бронхах, уплотненные очаги в легких, признаки эмфиземы.

Заглоточные и бронхиальные лимфатические узлы отечные, с кровоизлияниями. На плевре, брюшине, эпикарде - точечные кровоизлияния. На слизистой сычуга - кровоизлияния, эрозии и язвы. Слизистая кишечника отекшая, с кровоизлияниями.

Локализация вируса. Вирус ПГ-3 быстро размножается в клетках респираторного тракта и других органов. Через 1-10 дней после заражения его можно выделить из экскретов респираторного тракта, гортани, трахеи, легких, регионарных лимфатических узлов, селезенки, печени, надпочечников. Изолируют также из тестикул телят и быков и довольно часто из спермы быков-производителей.

Источник инфекции - больные животные. Заражение происходит воздушно-капельным путем и, возможно, перорально с молоком больных коров. Не исключается возможность передачи возбудителя половым путем, так как его обнаруживают в сперме, вагинальных выделениях, тканях абортированных плодов.

Диагностика. Диагноз ставят на основании эпизоотологических данных, симптомов болезни, патологоанатомических изменений и лабораторных исследований.

ПГ-3 диагностируют с использованием набора диагностикумов, выпускаемых биологической промышленностью. Ее обычно проводят параллельно с исследованием материала на аденовирусную, респираторно-синцитиальную инфекции, инфекционный ринотрахеит и вирусную диарею крупного рогатого скота.

Предварительный диагноз на ПГ-3 ставят в течение 2-3 дней на основании положительных результатов обнаружения вирусного антигена в патологическом материале в РИФ с учетом эпизоотологических данных, клинических признаков и патологоанатомических изменений.

Окончательно болезнь диагностируют в течение 10-30 дней на основании совпадения результатов РИФ с выделением и идентификацией вируса, обнаружения 4-кратного и более прироста антител в парных пробах сывороток крови. Взятие и подготовка материала. Такие же, как при аденовирусной инфекции.

Лабораторная диагностика. Обнаружение вирусного антигена в патологическом материале (мазках-отпечатках) проводят с помощью РИФ, вирусную нуклеиновую кислоту определяют с помощью полимеразной цепной реакции (ПЦР). Изоляцию вируса из патологического материала проводят в первичной культуре клеток ПЭК, ЛЭК, ПТ, ТБ или в перевиваемых линиях клеток Таурус 1, ПЛЭК и др. Вирус считают выделенным, если он вызывает стабильное однотипное ЦПД и положительную (РГАд) с эритроцитами морской свинки.

Вирус ПГ-3 можно выделять и на куриных эмбрионах, которые лучше заражать в амниотическую полость. Выделение вируса на естественно-восприимчивых животных не проводят вследствие дороговизны и большой трудности в подборе телят, не имеющих специфических антител. Лабораторные животные нечувствительны к вирусу ПГ-3.

Идентификацию выделенного вируса проводят в серологических реакциях: РТГАд, РИФ, РТГА, PH, ИФА. Наиболее быстрый метод идентификации выделенного вируса, обладающего гемадсорбирующими свойствами, - РТГАд с эритроцитами морской свинки.

Ретроспективная диагностика. Для этой цели исследуют парные сыворотки крови, взятые не менее чем от 10-15 животных с интервалом 2-3 нед. Сыворотки исследуют в серологических реакциях: РТГА (чаще), ИФА, PH. Предложена очень чувствительная и простая реакция непрямой гемагглютинации (РНГА). Кроме исследования парных сывороток крови при серодиагностике ПГ-3 рекомендуется метод выявления секреторных антител в РТГА. Для этого берут пробы носовых секретов от 10-15 животных, проявивших клинические признаки болезни, и повторно - через 6-8 дней. Положительным результатом исследования на ПГ-3 считают в случае выявления антител во второй пробе носовых секретов в титре 1:16 и выше или в случае установления 4-кратного и более увеличения титра антител во второй пробе по сравнению с первой.

Дифференциальная диагностика. Лабораторными исследованиями исключают ряд болезней, протекающих клинически сходно: аденовирусную, респираторно-синцитиальную инфекции, инфекционный ринотрахеит, вирусную диарею, хламидиоз, хотя эти инфекции очень часто протекают в различных ассоциациях.

Иммунитет и специфическая профилактика. Переболевшие животные в течение 3-4 мес. невосприимчивы к повторному заражению. Важный фактор иммунитета - локальная невосприимчивость клеток слизистой оболочки респираторных органов, вызванная образованием секреторных антител и интерферона, чаще выявляемых в более высоком титре после интраназальной вакцинации живым вирусом, чем после подкожной вакцинации инактивированным вирусом. Гуморальные антитела после вакцинации сохраняются у животных в течение 6-12 мес.

В защите против парагриппа-3 преобладают гуморальные факторы, но хорошо выражен также клеточный иммунитет. Телята, родившиеся от иммунных коров, получают антитела с молозивом. Продолжительность колострального иммунитета составляет 1,5-2 мес.

Однако некоторые исследователи считают, что молозивные антитела предохраняют около 50% телят месячного возраста.

Вакцинация телят более эффективна в период угасания материнских антител, так как колостральные антитела препятствуют активной продукции сывороточных антител в связи с блокированием вакцинного антигена, поэтому рекомендуют прививать телят интраназально. Для специфической профилактики парагриппа-3 применяют в основном живые вакцины из аттенуированных штаммов вируса.

Все чаще применяют живые комбинированные вакцины, содержащие аттенуированные штаммы вирусов ПГ-3, ИРТ, ВД и инактивированные пастереллы и хламидии.

5. Семейство Herpesviridae

Герпесвирусная инфекция - самая распространенная среди людей и животных. В семейство входят вирусы поражающие ЦНС (энцефалит, миелит, энцефаломиелит), глаза (кератит, кератоконьюнктивит), слизистые оболочки (афтозные язвы, стоматит, поражение гениталий), кожные покровы (экзема, везикулярные воспаления). В семейство герпесвирусов входят вирусы вызывающие такие болезни животных как:

- болезнь Ауэски;

- болезнь Марека;

- вирус ИРТ КРС;

- ринопневмония лошадей;

- герпес лошадей;

- герпес собак и др.

Вирионы - частицы округлой формы, состоят из 4-х компонентов: неклеотида, капсида, окруженной содержащей липиды оболочкой и наружной оболочки. Диаметр вирусной частицы 120-150 нм. Геном представлен линейной 2-х нитчатой ДНК. Наружная оболочка вирионов имеет типичное строение и содержит многочисленные шипы длинной до 8 нм. Представители семейства Герпесвирусов разделены на три подсемейства:

1. Alphaherpesvirinae:

- Simplexvirus - герпесвирусы человека 1 и 2, вирус маммилита КРС;

- Varicellavirus - герпесвирус человека 3, свиней 1, лошадей 1 и 4, собак 1 и др.

2. Betaherpesvirinae;

3. Gammaherpesvirinae.

Подсемейство Alphaherpesvirinae включает группу вирусов простого герпеса. ДНК вирусов состоит из 120-180 тыс. пар нуклеотидов. Последовательности одного или обоих концов ДНК находятся внутри молекулы в инвертированной форме (D и Е типы генома). Поэтому вирионная ДНК представлена двумя или четырьмя изомерными формами. Спектр хозяев у разных представителей подсемейства варьирует в широких пределах. Вирусы подсемейства характеризуются относительно коротким репликативным циклом (менее 24 ч.), быстрым разрушением зараженных клеток и способностью существовать в латентной форме преимущественно в нервных ганглиях. Подсемейство Alphaherpesvirus состоит из двух родов:

1. Род Simplexvirus. В состав рода входят: герпесвирусы человека 1 (вирус простого герпеса 1 - прототипный вирус) и 2 (вирус простого герпеса 2), герпесвирус КРС 2 (вирус маммиллита КРС). ДНК состоит из 152 тыс. пар нуклеотидов, доля ГЦ составляет 67%. Последовательности обоих концов находятся внутри молекулы ДНК в инвертированной форме (Е-тип генома). Вирионная ДНК представлена четырьмя изомерными формами. В составе вирионов обнаружено более 30 белков, включая 8 гликопротеинов, из которых по крайней мере три индуцируют синтез ВНА;

2. Род aricellavirus. В Состав рода входят: герпесвирусы человека 3 (вирусы ветряной оспы, опоясывающего лищая - прототипный вирус), свиней 1 (вирус псевдобешенства - болезни Ауески), КРС 1 (вирус инфекционного ринотрахеита), лошадей 1 (вирус ринопневмонии, вирус аборта лошадей) и 4 (вирус респираторной болезни). К возможным представителям рода относятся герпесвирус циркопитек 1 (вирус В), герпесвирусы лошадей 3 (вирус половой экзантемы), кошек 1, собак 1. ДНК состоит из 125 тыс. пар нуклеотидов. Последовательности одного конца ДНК находятся внутри молекулы в инвертированной форме (D-тип генома). Вирионная ДНК представлена двумя изомерными формами.

Подсемейство Bethaherpesvirinae включает группу цитомегаловирусов. ДНК состоит из 180-250 тыс. пар нуклеотидов, доля ГЦ составляет 56%. Последовательности одного или обоих концов ДНК находятся внутри молекулы в инвертированной форме (D - и Е-типы генома). Спектр естественных хозяев узкий. Репродуктивный цикл продолжительный (более 24 ч.). Зараженные клетки часто увеличиваются в размере (цитомегалия). Тельца-включения, содержащие ДНК, образуются в ядре и цитоплазме клеток на поздней стадии инфекции. Вирус поддерживается в латентной форме в секреторных железах, лимфоретикулярных клетках, почках и других тканях. Подсемейство состоит из двух родов:

1. Род Cytomegalovirus. Включает только одного представителя - герпесвирус человека 5 (цитомегаловирус человека). ДНК состоит из 200 тыс. пар нуклеотидов. Хорошо размножается в фибробластоподобных клетках;

2. Род Muromegalovirus, В состав которого входит герпесвирус мышей 1 (цитомегаловирус мышей). ДНК состоит из 200 тыс. пар нуклеотидов. Возможными представителями рода являются герпесвирус свиней 2 (цитомегаловирус свиней), лошадей 2, семейства мышиных 2 (цитомегаловирус крыс), морских свинок 1 (цитомегаловирус).

Подсемейство Gammaherpesvirinae группа лимфопролиферативных вирусов. ДНК состоит из 170 тыс. пар нуклеотидов, оба конца молекулы содержат тандемно повторяющиеся последовательности (В-тип генома). Спектр естественных хозяев узкий и не изменяется при экспериментальном заражении.

Все вирусы подсемейства размножаются в лимфобластоидных клетках и некоторые из них вызывают литическую инфекцию.

Вирусы обладают тропизмом к В - или Т-лимфоцитам. В лимфоцитах инфекция часто останавливается на предлитической стадии или завершается гибелью и лизисом клеток, но без образования полных вирионов. Латентную инфекцию часто обнаруживают в лимфоидной ткани.

Подсемейство состоит из двух родов:

1. Род Lymphocryptovirus, В состав которого входят:

- герпесвирусы человека 4 (вирус Эпштейна - Барр - прототипный вирус);

- подтип 1 (герпесвирус шимпанзе);

- церко-питек 2 (герпесвирус павианов).

Вирусы специфичны для В-лимфоцитов. ДНК состоит из 170 тыс. пар нуклеотидов.

2. Род Rhadinovirus. В Состав рода входят: герпесвирусы ателе 4 (прототипный вирус) и саймири 1.

ДНК состоит из 105 тыс. пар нуклеотидов. Уникальная последовательность молекулы с обоих концов фланкирована повторяющимися последовательностями с высоким содержанием Г и Ц.

Многие герпесвирусы животных изучены недостаточно и пока не классифицированы по подсемействам и родам.

Отличие герпесвирусов от ретровирусов.

У некоторых вирусов геномом служит не ДНК, как обычно, а РНК. Такие вирусы были названы ретровирусами (ретро - обратный).

В 1970 г. Д. Балтимор и Х.М. Темин открыли механизм передачи информации от вирусной РНК к ДНК, т. е., наоборот тому, что имеет место в клетках высших организмов. Такой процесс получил название обратной транскрипции, а фермент, его осуществляющий, был назван обратной транскриптазой или ревертазой.

Ретровирусы - обширное семейство вирусов (Retroviridae), заражающих преимущественно позвоночных. Это РНК-содержащие вирусы, обладающие уникальным механизмом репродукции. Группа онкогенных РНК геномных вирусов. Вирионы сферической формы размером 80-100 нм, покрыты внешней липопротеиновой оболочкой, имеющей ворсинки длиной 8-10 нм. Внутри икосаэдрального капсида находится спиральный РНП.

Наружная оболочка, капсидная мембрана и нуклеопд на разрезе вириона расположены концентрически. У онковирусов типа С нуклеотид расположен в центре, у онковирусов типа В смещен.

Плавучая плотность в градиенте сахарозы 1,16-1,19 г/сма. Чувствительны к эфиру, термолабильны, относительно резистентны к УФ-лучам. Характерной чертой семейства является наличие в составе вириона РНК-зависимой ДНК-полимеразы, иначе называемой обратной транскриптазой. Это и послужило основой для названия семейства (от лат. retro - обратный). Вирионы имеют 6 структурных белков, из них 4 внутренних (капсидных) негликолизированных и 2 гликопротеина оболочки. Капсидные белки несут группоспецифические межвидовые антигены и являются основой для разделения вирусов на роды и подроды. Гликопротеиды являются типоспецифическими антигенами, участвуют в реакции нейтрализации. Геном ретровирусов представлен однонитчатой РНК с молекулярной массой 7 мегадалътон и состоит из двух копий, каждая из которых является полноценным геномом и содержит одинаковую генетическую информацию, однако неизвестно, обе ли они функциональны. Нуклеиновая кислота онковирусов имеет гомологию с клеточной ДНК своего вида хозяина.

Вирионная РНК неинфекционна. Вирусная РНК транскрибируется в ковалентно связанную двунитчатую ДНК, которая интегрируется с клеточной ДНК в виде ДНК-провируса. Провирус, экстрагированный из клетки, обладает инфекционностью. Многие вирусы этого семейства вызывают неопластические процессы, главным образом лейкемии и саркомы ряда видов животных. Нормальные клетки некоторых видов животных содержат интегрированные копии соответствующих видов онковирусов. Они могут никак не проявляться или активируются некоторыми физическими и химическими факторами, а возможно, и при инфекции другими онковирусами. Часто встречаются дефектные вирусы, размножающиеся с помощью вируса-помощника. вирус биологический вакцинация

Особенности псевдобешенства. Исключительно сильный зуд и расчесывание до кости (практически аутомутиляция), глюкозурия, эритропения, нейтрофилия, лимфопения, эозинопения, анеозинопения с появлением плазматических клеток, энцефаломиелит, сильнейший приступ (кратковременный), гиперэстезия (прогрессивно учащающаяся), спазматическое дрожание отдельных мускульных групп, паралитические явления, альбуминурия, паралич глотки, саливация, амавроз, депрессия, апатия. Особенности болезни Марека - является иммуносупрессия (ослабление иммунного ответа), способность вызывать латентную инфекцию. Вирус может длительно персистировать в организме переболевших свиней. Персистенция возбудителя болезни Ауески отмечается на четырех уровнях: генома клетки, клетки, свиньи или популяции свиней. У переболевших свиней болезнь Ауески переходит в латентную форму, при которой вирус может пожизненно персистировать в клетках ЦНС, миндалин и лимфоузлов. Вирусный геном интегрируется в геноме клетки хозяина и при определенных обстоятельствах способен реактивироваться, и инициировать новый цикл размножения вируса, провоцируя возникновение заболевания, выделение вируса во внешнюю среду, инфицируя при этом чувствительных животных.

Размещено на Allbest.ru