Размещено на http://www.allbest.ru/

18

Размещено на http://www.allbest.ru/

СОДЕРЖАНИЕ

1. Растительная клетка как осмотическая система. Связь между осмотическим давлением и концентрацией клеточного сока

2. Передвижение воды по растению, общее понятие о восходящем потоке. Роль сил межмолекулярного сцепления воды

3. История изучения фотосинтеза. Значение работ к. А. Тимирязева. Фотосинтез как окислительно-восстановительный процесс

4. Субстраты дыхания. Значение дыхательного коэффициента при различных субстратах. Приведите примеры химических реакций

5. Превращение азотистых веществ в растении

6. Основные этапы органогенеза растений

Список использованной литературы

1. Растительная клетка как осмотическая система. Связь между осмотическим давлением и концентрацией клеточного сока

Растительная клетка представляет собой осмотическую систему. Клеточная целлюлозная оболочка хорошо проницаема как для воды, так и для растворенных веществ. Однако плазмалемма и протопласт обладают полупроницаемостью, пропускают воду и слабо проницаемы, а в некоторых случаях совсем непроницаемы для растворенных веществ. В этом можно убедиться, рассмотрев явления плазмолиза и тургора. Если поместить клетку в раствор более высокой концентрации, чем в клетке, то под микроскопом видно, что протоплазма отстает от клеточной оболочки. Это особенно хорошо проявляется на клетках с окрашенным клеточным соком. Клеточный сок остается внутри вакуоли, а между протоплазмой и оболочкой образуется пространство, заполненное внешним раствором. Явление отставания протоплазмы от клеточной оболочки получило название плазмолиза. Плазмолиз происходит в результате того, что под влиянием концентрированного внешнего раствора вода выходит из клетки, тогда как растворенные вещества остаются в клетке. При помещении клеток в чистую воду или в слабо концентрированный раствор, вода поступает в клетку. Количество воды в клетке увеличивается, объем вакуоли возрастает, клеточный сок давит на цитоплазму и прижимает ее к клеточной оболочке. Под влиянием внутреннего давления клеточная оболочка растягивается, в результате клетка переходит в напряженное состояние (тургор).

Наблюдения за явлениями плазмолиза и тургора позволяют изучить многие свойства клетки. Явление плазмолиза показывает, что клетка жива и протоплазма сохранила полупропицаемость. По скорости и форме плазмолиза можно судить о вязкости протоплазмы. Наконец, явление плазмолиза позволяет определить величину осмотического давления (плазмолитический метод). Этот метод основан на подборе изоосмотического, или изотонического, раствора, т. е. раствора, имеющего осмотическое давление, равное осмотическому давлению клеточного сока. Окружающий раствор, который вызывает плазмолиз данной клетки, а следовательно имеет более высокое осмотическое давление, называется гипертоническим. Раствор, при котором в клетке начался плазмолиз, имеет осмотическое давление, примерно равное осмотическому давлению клетки. Зная концентрацию этого наружного раствора в молях, можно вычислить по формуле Клапейрона его осмотическое давление, а следовательно, осмотическое давление клетки.

Формула Клапейрона p = RTC, где R - газовая постоянная, равная 0,8821, Т - абсолютная температура (°С) и С - концентрация в молях.

Необходимо учесть, что эта формула справедлива, если для определения осмотического давления был взят раствор неэлектролита, например сахарозы. В том случае, когда для определения осмотического давления берется раствор электролита, например какой-либо соли, в формулу определения осмотического давления необходимо вводить дополнительный изотопический коэффициент (i). Это связано с тем, что осмотическое давление пропорционально числу частиц, находящихся в определенном объеме раствора. При диссоциации число частиц, естественно, возрастает, следовательно, в этом случае осмотическое давление нужно рассчитывать по формуле

фотосинтез межмолекулярный сцепление вода

p = RTCi.

Определение осмотического давления может быть основано и на прямом определении концентрации клеточного сока. В большинстве случаев при этом клеточный сок выжимается. Наиболее точно концентрация клеточного сока может быть определена криоскопическим методом по понижению его точки замерзания или по повышению точки кипения. Известно, что если к воде прибавить некоторое количество растворимых веществ, то давление ее паров уменьшается.

2. Передвижение воды по растению, общее понятие о восходящем потоке. Роль сил межмолекулярного сцепления воды

Вода, поглощенная клетками корня, под влиянием разности водных потенциалов, которые возникают благодаря транспирации, а также силе корневого давления, передвигается до проводящих элементов ксилемы. Согласно современным представлениям, вода в корневой системе передвигается не только по живым клеткам. Еще в 1932 г. немецкий физиолог Мюнх развил представление о существовании в корневой системе двух относительно независимых друг от друга объемов, по которым передвигается вода,- апопласта и симпласта. Апопласт - это свободное пространство корня, в которое входят межклетные промежутки, оболочки клеток, а также сосуды ксилемы. Симпласт - это совокупность протопластов всех клеток, отграниченных полупроницаемой мембраной. Благодаря многочисленным плазмодесмам, соединяющим между собой протопласт отдельных клеток, симпласт представляет единую систему. Апопласт, по-видимому, не непрерывен, а разделен на два объема. Первая часть апопласта расположена в коре корня до клеток эндодермы, вторая - по другую сторону клеток эндодермы, и включает в себя сосуды ксилемы. Клетки эндодермы благодаря пояскам Каспари представляют как бы барьер для передвижения воды по свободному пространству (межклетникам и клеточным оболочкам). Для того чтобы попасть в сосуды ксилемы, вода должна пройти через полупроницаемую мембрану и протоплазму клеток эндодермы. Передвижение воды по коре корня идет главным образом по апопласту и лишь частично по симпласту. Однако в клетках эндодермы передвижение воды идет, по-видимому, по симпласту. Далее вода поступает в сосуды ксилемы. По вопросу о причинах, вызывающих секрецию воды в сосуды ксилемы, имеются различные суждения. Согласно одной гипотезе (Д. А. Сабинин), это вызвано противоположными изменениями в процессах обмена с разных сторон клеток. Согласно другой, это следствие секреции солей в сосуды ксилемы, в результате чего там создается повышенное осмотическое давление. Дальнейшее передвижение воды идет по сосудистой системе корня, стебля и листа. Проводящие элементы ксилемы состоят из сосудов (трахей) и трахеид.

Опыты с кольцеванием показали, что восходящий поток воды по растению движется в основном по ксилеме. В сосудах ксилемы вода встречает незначительное сопротивление, что, естественно, облегчает передвижение воды на большие расстояния. Правда, в настоящее время признается, что некоторое количество воды передвигается и вне сосудистой системы. Однако по сравнению с ксилемой сопротивление движению воды других тканей значительно больше (не менее чем на три порядка). Это приводит к тому, что вне ксилемы движется всего от 1 до 10% общего потока воды.

Из сосудов стебля вода попадает в сосуды листа. Вода движется из стебля через черешок или листовое влагалище в лист. В листовой пластинке водопроводящие сосуды расположены в жилках. Жилки, постепенно разветвляясь, становятся все более мелкими. Чем гуще сеть жилок, тем меньшее сопротивление встречает вода при передвижении к клеткам мезофилла листа. Именно поэтому густота жилкования листа считается одним из важнейших признаков ксероморфной структуры - отличительной чертой растений, устойчивых к засухе.

Иногда мелких ответвлений жилок листа так много, что они подводят воду почти к каждой клетке. Вся вода в клетке находится в равновесном состоянии. Иначе говоря, в смысле насыщенности водой, имеется равновесие между вакуолью, цитоплазмой и клеточной оболочкой, их водные потенциалы равны. В связи с этим, как только в силу процесса транспирации возникает ненасыщенность водой клеточных стенок паренхимных клеток, она сейчас же передастся внутрь клетки, водный потенциал падает, сосущая сила возрастает. Вода передвигается от клетки к клетке благодаря градиенту сосущей силы. По-видимому, передвижение воды от клетки к клетке в листовой паренхиме идет не по симпласту, а в основном по клеточным стенкам, где сопротивление значительно меньше.

Таким образом, по сосудам вода движется благодаря присасывающей силе транспирации и создающемуся в силу этого градиенту водного потенциала. Однако ни один всасывающий насос не может поднять воду на высоту больше 10 м (соответствующую 0,1 МПа нормального давления). Между тем есть деревья, у которых вода поднимается па высоту более 100 м. Объяснение этому дает теория сцепления, выдвинутая русским ученым Е. В. Вотчалом и английским физиологом Е. Диксоном. Для лучшего понимания этой теории рассмотрим следующий опыт. В чашку со ртутью помещают заполненную водой трубку, которая заканчивается воронкой из пористого фарфора. Вся система лишена пузырьков воздуха. По мере испарения воды ртуть поднимается по трубке. При этом высота подъема ртути превышает 760 мм. Это объясняется наличием сил сцепления между молекулами воды и ртути, которые в полной мере проявляются при отсутствии воздуха. Сходное положение, только еще более ярко выраженное, имеется в сосудах у растений.

Вся вода в растении представляет единую взаимосвязанную систему. Поскольку между молекулами воды имеются силы сцепления, (когезия), вода поднимается на высоту значительно большую 10 м. Сила сцепления увеличивается, так как молекулы воды обладают большим сродством друг к другу. Силы сцепления существуют и между водой и стенками сосудов. Стенки проводящих элементов ксилемы эластичны. В силу этих двух обстоятельств даже при недостатке воды связь между молекулами воды и стенками сосудов не нарушается. Это подтверждается исследованиями по изменению толщины стебля травянистых растений. Определения показали, что в полуденные часы толщина стебля травянистых растений уменьшается. Если перерезать стебель, то сосуды сразу расширяются и воздух врывается в них. Степень натяжения водных нитей в сосудах зависит от соотношения процессов поглощения и испарения воды. Все это позволяет растительному организму поддерживать единую водную систему и не обязательно восполнять каждую кашпо испаряемой воды.

В том случае, если в отдельные членики сосудов попадает воздух, они, по-видимому, выключаются из общего тока проведения воды. Таков путь воды по растению и его основные движущие силы.

Современные методы исследования позволяют определить скорость передвижения воды по растению. Согласно полученным данным, скорость движения воды в течение суток изменяется. В дневные часы она значительно больше. При этом разные виды растений отличаются по скорости передвижения воды. Если скорость передвижения у хвойных пород обычно не превышает 0,5-1 см/ч, то у лиственных она значительно выше. У дуба, например, скорость передвижения составляет 43,6 см/ч. Скорость передвижения воды мало зависит от напряженности обмена. Изменение температуры, введение метаболических ингибиторов не влияют на передвижение воды. Вместе с тем этот процесс, как и следовало ожидать, очень сильно зависит от скорости транспирации и от диаметра водопроводящих сосудов. В более широких сосудах вода встречает меньшее сопротивление. Однако надо учитывать, что в более широкие сосуды скорее могут попасть пузырьки воздуха или произойти какие-либо иные нарушения тока воды.

3. История изучения фотосинтеза. Значение работ К. А. Тимирязева. Фотосинтез как окислительно-восстановительный процесс

Фотосинтез как физиологический процесс был открыт в 1771 г. английским ученым Джозефом Пристли. Он обратил внимание на изменение состава воздуха вследствие жизнедеятельности животных. В присутствии зеленых растений воздух вновь становился пригодным как для дыхания, так и для горения. В дальнейшем работами ряда ученых (Ингенхауз, Сенебье, Соссюр, Буссенго) было установлено, что зеленые растения из воздуха поглощают СO₂, из которого при участии воды на свету образуется органическое вещество. Именно этот процесс в 1877 г. немецкий ученый Пфеффер назвал фотосинтезом.

Большое значение для раскрытия сущности фотосинтеза имел закон сохранения энергии, сформулированный Р. Майером. В 1845 г. Р. Майер выдвинул предположение, что энергия, используемая растениями, - это энергия Солнца, которую растения в процессе фотосинтеза превращают в химическую энергию. Это положение было развито и экспериментально подтверждено в исследованиях замечательного русского ученого К. А. Тимирязева, который изложил их в своей докторской диссертации «Об усвоении света растением» (1875).Тимирязев использовал в работе очень узкие щели и помещал в полоски монохроматического света тонкие пробирки с высечками из листьев. Для этих опытов ему пришлось разработать очень чувствительные методы газового микроанализа. В результате было установлено, что интенсивность ассимиляции СОмаксимальна при освещении листьев красным светом, т. е. тем светом, который в наибольшей степени поглощается хлорофиллом.

Тимирязев постулировал, что при ассимиляции СО хлорофилл служит оптическим сенсибилизатором (т. е. веществом, увеличивающим чувствительность к свету) и что он непосредственно участвует в процессе фотосинтеза, необратимо переходя из восстановленного состояния в окисленное. Он сформировал также идею о космической роли фотосинтеза: фотосинтез - единственный процесс, с помощью которого космическая солнечная энергия улавливается и остается на Земле, трансформируясь в другие формы энергии. Тимирязев писал, что в хлоропласте лучистая энергия солнечного света превращается в химическую энергию углеводов. Крахмал, клейковина и другие соединения, консервирующие солнечную энергию, служат нам пищей. Освобождаясь в нашем теле в процессе дыхания, эта энергия солнечного луча согревает нас, приводит в движение, поддерживает мышление.

Таким образом, фотосинтез является основным источником на Земле. Фотосинтез - это процесс превращения солнечной энергии с помощью хлорофилла и с участием углекислого газа и воды в потенциальную химическую энергию. Фотосинтез как процесс жизнедеятельности зеленого растения - единственный процесс в биосфере, связанный с накоплением энергии от внешнего источника - солнца. Это явление природы составляет одно из основных звеньев биологического круговорота веществ. Обычно процесс фотосинтеза выражают элементарным уравнением

6СО+ О+12НО СНО + 6НО +6О

Углекислый газ поступает в растения из воздуха, превращаясь с помощью лучистой энергии солнца в сложные высокоэнергетические органические соединения, которыми питается животный мир. Животные, используя потенциальную энергию органических веществ, снова освобождают углекислый газ.

Согласно современным представлениям, приведенное выше уравнение фотосинтеза можно изобразить в виде схемы:

Свет 2НО О

Акцептор

СО АСОФГК[H]Триозофосфаты Полисахариды

Фосфоглицериновая кислота

[A]

Б В

Взаимопревращение сахаров

Следовательно, фотосинтез состоит из двух сопряженных реакций: окисления воды до кислорода и восстановления углекислого газа водородом воды до полисахаридов.

4. Субстраты дыхания. Значение дыхательного коэффициента при различных субстратах. Приведите примеры химических реакций

В качестве основного субстрата дыхания растения используют углеводы - наиболее распространенные важные в энергетическом отношении соединения, причем в первую очередь окисляются свободные сахара. Если растения испытывают в них недостаток, субстратами окисления могут быть запасные полимерные вещества - полисахариды и белки, а также жиры, но лишь после их гидролиза. Поли- и дисахариды гидролизуются до моносахаридов, жиры до глицерина и жирных кислот, белки - до аминокислот.

Функцию запасных углеводов у растений выполняют крахмал (картофель, кукуруза), инулин (георгины, топинамбур), гемицеллюлозы. Микроорганизмы и некоторые высшие растения окисляют многоатомные спиты , образующиеся при восстановлении гексоз. Например, сорбит служит субстратом дыхания хранящихся плодов груш.

Запасные жиры расходуются на дыхание проростков, развивающихся из семян, богатых жирами (подсолнечник, лен, конопля и др.) Жиры гидролизуются липазой до глицерина и жирных кислот. Глицерин фосфорилируется и затем окисляется до 3-фосфоглицеринового альдегида, который включается в обмен углеводов. Жирные кислоты окисляются с образованием ацетил-СоА.

Запасные белки используются для дыхания в результате гидролиза до аминокислот и последующей их окислительной деградации до ацетил-СоА или кетокислот, которые участвуют в цикле Кребса.

Полное окисление всех рассмотренных субстратов осуществляется до СОи воды с освобождением энергии окисляемых веществ.

Дыхательный коэффициент (ДК)- это объемное или молярное отношение СО₂, выделившегося в процессе дыхания, к поглощенному за это же время О₂.

При нормальном доступе кислорода величина коэффициента зависит от субстрата дыхания. Если используются углеводы, то коэффициент равен 1:

СНО + 6О 6СО + 6НО; ДК = 6СО/ 6О=1.

Количество кислорода, необходимое для окисления субстрата в процессе дыхания, находится в обратной зависимости от содержания его в молекуле субстрата: чем меньше атомов кислорода в молекуле субстрата, тем больше его тратиться на окисление. Поэтому если субстратом дыхания являются более бедные кислородом (по сравнению с углеводами) жирные кислоты, то ДК будет меньше единицы. Примером может служить окисление стеариновой кислоты:

СНО + 26О18СО + 18НО; ДК = 18СО/ 26О=0,69

На окисление более окисленных, чем углеводы, органических кислот требуется меньше кислорода, что увеличивает дыхательный коэффициент, как видно из реакции окисления щавелевой кислоты:

2СНО + О4СО + 2НО; ДК = 4СО/ О=4

Однако величина дыхательного коэффициента определяется не только свойствами окисляемого субстрата. Она также зависит от снабжения тканей кислородом. При его недостатке (например, в маристеме кончиков корней и т. д.) усиливается брожение и ДК возрастает. Если в результате недоокисления продуктов в тканях накапливаются органические кислоты, а количество выделяемого СО снижается, ДК падает.

Таким образом, хотя степень окисленности дыхательного субстрата и может влиять на ДК, величина его скорее отражает особенности процесса дыхания данной ткани, органа, находящихся на определенной стадии онтогенеза при действии конкретных внешних условий.

5. Превращение азотистых веществ в растении

Азот входит в состав важнейшей части живого организма, а именно в состав запасных белков и белков цитоплазмы. В составе золы азота нет, так как при сжигании растений он образует газообразные окислы. В сухом веществе растения содержится в среднем 1,5% азота. Добывание азота представляет для растения наибольшие трудности, так как азот не входит в состав минералов и его накопление и превращение в почве полностью связано с жизнедеятельностью организмов.

В почве доступный для растения азот находится в основном в форме нитратов аммонийных солей.

Нитраты представляют собой окисленную форму азота и должны быть восстановлены растением до NH₂, после чего они могут войти в состав аминокислот, а затем белка. Можно считать, что восстановление нитратов идет двумя путями:

1) восстановление за счет химической энергии дыхания;

2) фотохимическое восстановление в хлоропластах.

Восстановление нитратов идет этапами: сначала до азотистой кислоты HNO, после до гипонитрита (HNO)_2, затем до гидроксиламина NHOH и, наконец, до аммиака NH. Восстановление нитратов до NH-и NH-гpyпп осуществляется с помощью фермента нитратредуктазы, в состав кофермента которой входит молибден. Ниже приводиться схема восстановления нитратов в растении:

HNO₃ HNO₂ (HNO)₂ NH₂OH ? HN₃

Восстановленный азот нитратов или непосредственно поглощенный ион аммония, соединяясь с продуктами превращения углеводов, образует аминокислоты, а затем белки. Аммиак, реагируя с некоторыми органическими кислотами, может образовать аминокислоты. Так, например, аммиак, реагируя с пировиноградной кислотой, образует аминокислоту аланин:

HN₃ + СНСОСООН + 2Н СНСНNHСООН + НО

Образовавшиеся белковые вещества подвергаются превращениям в теле растения. Животный организм все время выводит азот из своего тела в виде мочевины и отчасти мочевой кислоты. В отличие от животных растение очень бережно относится к азоту, не теряя его.

При прорастании семян расщепляются запасные белки, а количество конституционных белков не только не уменьшается, а все время увеличивается. Затем происходит накопление белков в связи с переходом растения к автотрофному питанию. При восстановлении нитратов, а также при дезаминировании аминокислот (т.е. отщеплении от них аммиака) в растениях может накопляться аммиак, который ядовит для большинства из них. В растении аммиак обезвреживается, так как он связывается аспарагиновой или глутаминовой кислотой, образуя соответственные амиды (аспарагин, глутамин). Особенно легко аммиак реагирует с щавелевоуксусной и -кетоглутаровой кислотами:

1) НООС СОСHСООН + HN + 2Н НООС СНСНNH СООН + НО

Щавелевоуксусная кислота аспарагиновая кислота

2) НООС СH СHСО СООН + HN + 2Н

-кетоглутаровая кислота

НООС СH СH СНNH СООН + НО

глутаминовая кислота

Пировиноградная, щавелевоуксусная и -кетоглутаровая кислоты - важнейшие продукты превращения углеводов в организме растений и животных. Поэтому реакция образования аминокислот прямым аминированием кетокислот аммиаком имеет большое значение как путь, действительно связывающий обмен углеводов с обменом аминокислот и белков. Эта тесная связь определяется еще и тем, что дикарбоновые аминокислоты могут передавать свои аминные группы кетокислотам с помощью ферментативного переаминирования. Реакция переаминирования была открыта в 1937 г. Советскими биохимиками А. Е. Браунштейном и М. Г. Крицман. Она заключается в межмолекулярном переносе аминогрупп с аминокислоты на кетокислоту, катализируется ферментами, которые называются аминотрансферазами. Обязательное условие действия аминотрансфераз - участие в реакции аминокислоты (аспарагиновой, глутаминовой и др.) и кетокислот (щавелевоуксусной,

-кетоглутаровой и др.), например:

НООС СH СH СНNH СООН + НООС СОСHСООН

глутаминовая кислота Щавелевоуксусная кислота

НООС СH СHСО СООН + НООС СНСНNH СООН

-кетоглутаровая кислота аспарагиновая кислота

Так же происходит переаминирование глутаминовой и пировиноградной кислот под влиянием аминотрансферазы и образование аланина и -кетоглутаровой кислоты; аспарогиновая и пировиноградная кислоты образуют аланин и щавелевоуксусную кислоту.

6. Основные этапы органогенеза растений

Развитие каждого растительного организма проходит ряд этапов. Эти этапы характеризуются морфологическими и физиологическими признаками. Физиологические критерии этапов развития изучены слабо. При выделении этапов используют главным образом морфологические признаки.

Для семенных растений можно выделить следующие этапы развития (М. X. Чайлахян): 1) эмбриональный - от оплодотворения яйцеклетки до прорастания зародыша. Этот этап можно разделить на два периода: а) эмбриогенез - период, в котором эмбрионы находятся на материнском растении; б) покой - период от конца формирования семени до его прорастания; 2) молодости (ювенильный) - от прорастания зародыша до закладки цветочных зачатков, характеризующийся усиленным ростом; 3) зрелости - от момента закладки цветочных зачатков до оплодотворения (появления новых зародышей); 4) размножения - от оплодотворения до полного созревания семян; 5) старости - от периода созревания семян до отмирания.

Поликарпические растения этапы эмбриональный и молодости проходят один раз, однако часто эти этапы характеризуются большой продолжительностью (несколько лет), этапы зрелости и размножения наступают один раз, но осуществляются многократно. Этап старости у поликарпических растений также может продолжаться несколько лет. И. В. Мичурин для многолетних поликарпических растений выделил следующие этапы: 1) семенной - от оплодотворения яйцеклетки до прорастания семян; 2) молодости - от прорастания до первого цветения (длительность этого этапа колеблется и может продолжаться до 10 лет); 3) возмужания - первые 3-5 лет цветения; 4) взрослого состояния - последующие годы плодоношения; 5) старения.

На протяжении каждого из перечисленных этапов развития в растении возникают новые органы. Процесс формирования этих органов называют органогенезом. Этот процесс можно изучить путем микроскопических наблюдений за дифференциацией верхушечных меристем и изменениями в формирующихся органах. Такие исследования, проведенные в лаборатории МГУ, позволили Ф. М. Куперман выделить для одно- и двулетних растений 12 последовательных этапов органогенеза. При этом па I и II этапах происходит дифференциация вегетативных органов, па III и IV - дифференциация зачаточного соцветия, на V-VIII - формирование цветков, на IX - оплодотворение и образование зиготы, па X-XII - рост и формирование семян.

На протяжении каждого из этапов развития растения проходят физиолого-биохимические и морфологические изменения (появление новых структур). Основой морфологических, структурных изменений является изменение физиолого-биохимических процессов. Именно поэтому, как правило, внутренние физиолого-биохимические изменения предшествуют морфологическим. Однако проявляется и обратная зависимость. Вновь появившиеся структуры, органы оказывают влияние на уровень и направленность процессов метаболизма.

Таким образом, можно считать, что есть единый процесс физиолого-биохимических и морфологических изменений. При этом физиолого-биохимические изменения, определяющие наступление последующего этапа, происходят в структурах, образовавшихся на предыдущем этапе развития организма.

Список использованной литературы

Лебедев С. И. Физиология растений.-М.: Агропромиздат, 1988

Полевой В. В. Физиология растений.-М.: Высшая школа, 1989

Якушкина Н.И. Бахтенко Е.Ю. Физиология растений.-М.: Владос, 2005

Размещено на Allbest.ru