Очистка, биофизическая и биохимическая характеристика вирусов
Процесс экстракции вирусов из растений, методы их очистки и концентрирования. Методы изучения биофизических свойств вирусов, определения типа, содержания и размера нуклеиновой кислоты вирусных частиц, числа и молекулярной массы индивидуальных белков.
| Рубрика | Биология и естествознание |
| Вид | курсовая работа |
| Язык | русский |
| Дата добавления | 30.08.2009 |
| Размер файла | 437,0 K |
Отправить свою хорошую работу в базу знаний просто. Используйте форму, расположенную ниже
Студенты, аспиранты, молодые ученые, использующие базу знаний в своей учебе и работе, будут вам очень благодарны.
1. Приготовление диссоциирующего буфера: 10-кратный буфер для электрофореза -- 5 мл 10%-ный ДДС-Na -- 10 мл 10 М мочевина -- 7,5 мл 2-меркаптоэтанол -- 0,5 мл сахароза --4,5 г Раствор делят на порции и хранят в замороженном виде.
2. К суспензии вируса добавляют равный объем диссоциирующего буфера. Для выделения нуклеиновой кислоты раствор прогревают 10 мин при 50--60°С, для выделения белка раствор прогревают 2 мин при 100 °С. К раствору добавляют 1/5 объема 0,06%-ного бромфенолового синего, наносят на гель и проводят электрофорез.
3. В результате получают нуклеиновую кислоту в нативном состоянии. Если необходима денатурация, следует воспользоваться одним из описанных выше методов.
3.6 Гель-электрофорез вирусных частиц
Электрофорез в геле можно использовать для определения изоэлектрической точки и разделения по размерам и поверхностному заряду мелких изометрических и некоторых палочковидных вирусов. Разделение лучше всего проводить в поли-акриламидных гелях, хотя для некоторых вирусов можно использовать и агарозные гели. Так, например, для разделения изометрических вирусных частиц диаметром около 30 нм подходит 3%-ный полиакриламидный гель. рН такого геля доводят буферным раствором, содержащим трис и лактат кальция. При этом необходимо приготовить два исходных раствора:
1. 0,6 М трис, рН которого доведен молочной кислотой до 4,0--6,0 или какодиловой кислотой до 6,0--7,5. Для получения рН 7,5--8,5 нужно использовать 0,6 М молочную кислоту, рН которой доводят трисом.
2. 60 мМ лактат кальция, который получают, доводя рН Саг до необходимого значения молочной или какодиловой кислотой. При смешивании этих растворов в отношении 1: 1 получают 20-кратный буфер для приготовления геля и проведения электрофореза.
Подобные документы
История открытия вирусов, их детальное исследование после изобретения микроскопа. Характеристика вирусов: свойства, формы существования, строение, химический состав и процесс размножения. Гипотеза о происхождении вирусов из "беглой" нуклеиновой кислоты.
презентация [553,5 K], добавлен 18.01.2014Открытие вирусов, их размеры, особенности строения и жизненный цикл. Синтез компонентов вирусной частицы - нуклеиновой кислоты и белков капсида. Вирусы растений, животных и человека как возбудители различных заболеваний. Эволюционное развитие вирусов.
контрольная работа [433,8 K], добавлен 15.03.2014Микроорганизмы, имеющие более простое строение по сравнению с клетками животных и растений. Размеры, внутренние и поверхностные структуры бактерий и вирусов. Соединения белка и нуклеиновой кислоты, способные размножаться только в пораженной клетке.
презентация [2,0 M], добавлен 26.09.2011Понятие мутации вирусов и мутагенов. Частота мутаций вирусов и механизмы их возникновения. Модификации, вызываемые хозяином. Изменчивость вирусов при пассажах. Изменчивость вирусов, возникающая в процессе пассажей при пониженных и повышенных температурах.
реферат [32,0 K], добавлен 10.11.2010Понятие, история открытия, происхождение, культивация, формы существования и свойства вирусов. Общая характеристика и сравнение вирусов животных, растений и бактерий. Механизмы инфицирующего и летального воздействия ВИЧ на клетки организма человека.
реферат [25,5 K], добавлен 23.01.2010Характеристика вирусов как очень маленьких живых организмов, вызывающих болезни у растений и животных. Особенности строения вирусных ДНК, РНК, их внешний вид, размеры компонентов, вызываемые заболевания. Размножение и основные стадии репродукции вирусов.
презентация [1,6 M], добавлен 20.01.2012Эволюционное происхождение. Свойства вирусов. Природа вирусов. Строение и классификация вирусов. Взаимодействие вируса с клеткой. Значение вирусов. Вирусные заболевания. Особенности эволюции вирусо на соременном этапе.
реферат [299,2 K], добавлен 22.11.2005Свойства вирусов, особенности их строения и классификация. Взаимодействие вируса с клеткой. Процессы, связанные с размножением вируса. Описание основных вирусных заболеваний. Эволюция вирусов на современном этапе. Влияние загрязнения внешней среды.
реферат [466,4 K], добавлен 24.03.2011Облигатные внутриклеточные паразиты. Морфология, строение вирусов. Сложно устроенные вирусы. Продуктивный тип взаимодействия вируса с клеткой. Представители однонитевых ДНК-вирусов. Культивирование, индикация вирусов. Внутриклеточная репродукция вирусов.
презентация [2,4 M], добавлен 23.02.2014Общая характеристика вирусов как неклеточных биологических объектов. Внеклеточная и внутриклеточная морфологические формы вирусов. Строение и химический состав простого и сложноустроенного вириона. Смешанный или сложный тип симметрии (бактериофаги).
презентация [1,6 M], добавлен 25.10.2013
