Дезінвазійна ефективність препарату вітчизняного виробництва Дезсан щодо яєць Нематод роду Trichuris, виділених від овець

Размещено на http://www.allbest.ru/

Полтавський державний аграрний університет

Львівський національний університет ветеринарної медицини та біотехнологій імені С. З. Ґжицького

ДЕЗІНВАЗІЙНА ЕФЕКТИВНІСТЬ ПРЕПАРАТУ ВІТЧИЗНЯНОГО ВИРОБНИЦТВА ДЕЗСАН ЩОДО ЯЄЦЬ НЕМАТОД РОДУ TRICHURIS, ВИДІЛЕНИХ ВІД ОВЕЦЬ

В.В. Мельничук, В.О. Євстаф'єва,

І.Д. Юськів, О.С. Жулінська

м. Полтава, м. Львів, с. м. т. Асканія-Нова

Annotation

DISINVASIVE EFFICACY OF THE DOMESTIC DRUG DEZSAN AGAINST EGGS OF NEMATODES OF THE GENUS TRICHURIS ISOLATED FROM SHEEP

V. Melnychuk, V. Yevstafieva Poltava State Agrarian University, Poltava

Yuskiv Stepan Gzhytskyi National University of Veterinary Medicine and Biotechnologies Lviv, Lviv

O. Zhulinska “Ascania-Nova” Institute of Animal Breeding in the Steppe Regions named after M. F. Ivanov - National Scientific Selection-Genetics Center for Sheep Breeding, Ascania-Nova, Chaplinka district, Kherson region

The paper presents the results of experimental studies to determine the disinvasive efficacy of the chemical chlorine-containing agent of domestic production Dezsan RPF «Brovapharma» (Ukraine). The research was carried out on the basis of the Laboratory of Parasitology of the Department of Parasitology and Veterinary and Sanitary Examination of Poltava State Agrarian University. Noninvasive and invasive test cultures of eggs of nematodes of the genus Trichuris of pathogens of sheep trichurosis (Trichuris ovis, T. skrjabini and T. globulosa) were used in the experiments. Tests of Dezsan on helminth eggs were performed at concentrations of 0.5, 1.0, 1.5 and 2.0 % at exposures of 10, 30 and 60 minutes. Studies have shown that the studied disinfectant has disinvasive properties against non-invasive and invasive test culture of nematode eggs of Trichuris ovis, T. skrjabini and T. globulosa. The unequal resistance of eggs of trichuris of different species to the action of the test agent in experiments in vitro has been proved. Dezsan showed a high level of disinvasive efficiency in relation to non-invasive and invasive test cultures of eggs: T. ovis in 1.0-2.0 % concentrations at exposures of 10-60 min (DE - 92.94-100.00 %) and 1.0 and 1.5-2.0 % concentrations at exposures of 30, 60 min and 10-60 min, respectively (DE - 90.63-100.00 %); for test cultures of T. skrjabini eggs in 0.5 and 1.0-2.0 % concentrations at exposures of 60 min and 10-60 min, respectively (DE - 91.03-97.44 %) and 1.0-2.0 % concentrations for all exposures (DE - 91.01-100.00 %); for test cultures of T. globulosa eggs in 0.5 % and 1.0-2.0 % concentrations at exposures of 30 and 10-60 min, respectively (DE - 91.30-100.00 %) and 1.0 % and 1.5-2.0 % concentrations at exposures of 30-60 min, and 10-60 min (DE - 90.91-100.00 %). It was found that the domestic product Dezsan had a detrimental effect on the eggs of trichurises and led to their death due to the destructive action of the components of the drug on the shell, the embryo of parasites, the caps of eggs of trichurises. The data obtained by us allow us to recommend Dezsan as a disinfectant for the control and prevention of trichurosis in sheep farms, regardless of the type of helminths that parasitize animals.

Key words: disinvasion, disinvasive efficacy, test culture of eggs, trichurises, Dezsan.

Анотація

дезсан яйце трихурис дезінвазійний

У роботі наведено результати експериментальних досліджень з визначення дезінвазійної ефективності хімічного хлорвмісного засобу вітчизняного виробництва Дезсан НВФ «Бровафарма» (Україна). Дослідження здійснені на базі лабораторії паразитології кафедри паразитології та ветеринарно-санітарної експертизи Полтавського державного аграрного університету. У дослідах було використано неінвазійні та інвазійні тест-культури яєць нематод роду Trichuris збудників трихурозу овець (Trichuris оvis, T. skrjabini та Т. globulosa). Випробування препарату Дезсан на яйцях гельмінтів здійснювали в концентраціях 0,5, 1,0, 1,5 та 2,0 % за експозицій 10, 30 та 60 хвилин. Проведеними дослідженнями встановлено, що досліджуваний дезінфектант володіє дезінвазійними властивостями щодо неінвазійної та інвазійної тест-культури яєць нематод видів Trichuris оvis, T. skrjabini та Т. globulosa. Доведено неоднакову стійкість яєць трихурисів різних видів до дії випробовуваного засобу у дослідах in vitro. Високий рівень дезінвазійної ефективності препарат Дезсан проявляв відносно неінвазійних та інвазійних тест-культур яєць: T. оvis в 1,0-2,0 % концентраціях за експозиції 10-60 хв (ДЕ - 92,94-100,00 %) та 1,0 й 1,5-2,0 % концентраціях за експозицій 30, 60 хв й 10-60 хв відповідно (ДЕ - 90,63-100,00 %); щодо тест-культур яєць T. skrjabini в 0,5 й 1,0-2,0 % концентраціях за експозиції 60 хв й 10-60 хв відповідно (ДЕ - 91,03-97,44 %) та 1,0-2,0 % концентраціях за всіх експозицій (ДЕ - 91,01-100,00 %); щодо тест-культур яєць Т. globulosa в 0,5 % й 1,0-2,0 % концентраціях за експозицій 30 й 10-60 хв відповідно (ДЕ - 91,30-100,00 %) та 1,0 % й 1,5-2,0 % концентраціях за експозицій 30-60хв, й 10-60хв (ДЕ - 90,91-100,00 %). Встановлено, що засіб вітчизняного виробництва Дезсан згубно діяв на яйця трихурисів і призводив до їх загибелі за рахунок деструктивної дії складових компонентів препарату на оболонку, сам зародок паразитів, кришечки яєць трихурисів. Отримані нами дані дозволяють рекомендувати Дезсан як дезінвазійний засіб для боротьби та профілактики трихурозу у вівчарських господарствах незалежно від виду гельмінтів, що паразитують у тварин.

Ключові слова: дезінвазія, дезінвазійна ефективність, тест-культура яєць, трихуриси, Дезсан.

Вступ

Незважаючи на значний асортимент ветеринарних препаратів на сучасному ринку лікарських засобів, інвазійні захворювання сільськогосподарських тварин продовжують набувати все більшого поширення у господарствах як України, так й інших держав світу [1-6]. Не виключенням стали й вівцегосподарства різної форми власності. Серед найбільш поширених паразитарних захворювань овець визнано нематодози шлунково-кишкового каналу [8-9]. Така тенденція пояснюється циклом розвитку більшості нематод, який відбувається прямим шляхом без участі проміжних живителів [10, 11].

Відомо, що найкращими умовами для розвитку ембріональних та постембріональних форм розвитку нематод до інвазійної стадії є поверхневі шари ґрунту, підстилка, підлога, куди збудник потрапляє з фекаліями під час акту дефекації. Вищевказане підтверджується численними дослідженнями науковців, які доводять, що ґрунт є одним з об'єктів навколишнього середовища найбільш схильних до контамінації інвазійними елементами, в тому числі, й яйцями капіляріїд та трихурат [12-16]. Забруднені пропагативними стадіями паразитів об'єкти довкілля мають важливе значення у поширенні та довготривалому зберіганні екзогенних стадій розвитку нематод [17, 18].

З метою ліквідації та попередження забруднення навколишнього середовища інвазійними елементами існує чітко розроблена система оздоровчих заходів, що поєднує дегельмінтизацію тварин та дезінвазію об'єктів довкілля [19, 20]. Як показує досвід, основним та найбільш дієвим серед наявних методів дезінвазії є хімічний, що передбачає застосування препаратів на основі різних хімічних сполук. Згідно літературних даних, найбільш ефективними вважаються полікомпозиційні препарати, що у складі мають декілька активно діючих речовин [21, 22].

Враховуючи вже існуючі дані досліджень, що вказують на стійкість яєць трихурат до дії хімічних засобів, актуальним для науковців, дослідників і фахівців ветеринарної медицини залишається питання пошуку та апробації сучасних дезінвазійних засобів вітчизняного виробництва з метою впровадження їх у виробництво [16, 18].

Тому метою нашої роботи було вивчити в лабораторних умовах дезінвазійні властивості полікомпозиційного препарату вітчизняного виробництва Дезсан щодо яєць нематод роду Trichuris, паразитуючих у овець.

Матеріали і методи досліджень

Дослідження проводилися на базі лабораторії кафедри паразитології та ветеринарно-санітарної експертизи Полтавського державного аграрного університету. В якості тест-культур для дослідження дезінвазійних властивостей засобу Дезсан Серія: 001 Експ., виготовлений 17.10.2017 (НВФ «Бровафарма», Україна) використовували тест-культури неінвазійних та інвазійних (попередньо культивували до появи в них інвазійної рухливої личинки) яєць нематод видів яєць Trichuris avis, T. skrjabini, Т. globulosa. Яйця нематод отримували безпосередньо з кінцевих відділів матки самок гельмінтів. Отриману суміш яєць змивали дистильованою водою в окремі чашки Петрі. Препарат випробовували в концентраціях 0,5 %; 1,0 %; 1,5 % та 2,0 % за експозицій 10, 30 та 60 хв.

До попередньо підготовленої суміші яєць нематод додавали такий самий об'єм розчину препарату певної концентрації. Після відповідної експозиції суміш яєць чотириразово відмивали в дистильованій воді. Чашки Петрі із сумішшю яєць гельмінтів поміщали в термостат за температури 27 °С і вели спостереження, розглядали під мікроскопом (х 10, х 40, х 100), відзначали ступінь розвитку яєць, враховуючи зміни оболонки, деформацію зародків та стан розвитку личинок або їх пошкодження.

Дезінвазійну ефективність (ДЕ) розчинів препаратів визначали за формулою:

ДЕ = 100 - (Yi / Y2) х 100,% = 100, %

де, Yi - кількість живих яєць у дослідній культурі;

Y2 - кількість живих яєць у контрольній культурі.

Оцінку дезінвазійної ефективності проводили за показниками: високий рівень ефективності - 90100 %, задовільний - 60-89 %, незадовільний - до 60 %.

Мікрофотографування здійснювали за допомогою цифрової камери до мікроскопу Sigeta M3CMOS 14000 14.0 MP (China).

1. Дезінвазійна ефективність препарату Дезсан щодо яєць нематод Trichuris ovis (n=100), %

Встановлено, що задовільний рівень дезінвазійної ефективності зафіксовано при дії препарату на яйця трихурисів виду T. ovis в 0,5 та 1,0 % концентрації за експозицій 10, 30, 60 хв, та 10 хв відповідно (ДЕ - 78,13 %, 79,17 %, 81,25 % та 83,33 % відповідно). Збільшення експозиції та концентрації засобу підвищувало його показник дезінвазійної ефективності. Так, високий рівень ефективності зареєстровано за використання 1,0 та 1,5 й 2,0 % концентрації засобу й експозиції 30, 60 хв та 10-60 хв відповідно (ДЕ від 90,63 до 100,00 %).

При проведенні визначення дезінвазійної ефективності засобу Дезсан на дослідних тест-культурах яєць нематод виду T.skrjabini встановлено, що засіб володіє вираженою дезінвазійної здатністю щодо неінвазійної та інвазійної тест-культур яєць нематод даного виду (табл. 2).

Так за визначення дезінвазійної дії засобу щодо неінвазійних яєць T. skrjabini встановлено, що найвищими показниками дезінвазійної активності (ДЕ - 100,00 %) препарат володіє за використання його в 1,0 % концентрації та експозиції 60 хв, а також в 1,5 та 2,0 % концентрації за всіх запропонованих експозицій. Високий рівень дезінвазійної ефективності (91,03-97,44 %) зареєстровано за використання засобу в 0,5 та 1,0 % концентрації за експозиції 60 хв та 10 і 30 хв відповідно. Використання 0,5 % концентрації засобу за експозицій 10 і 30 хв призводило до задовільного рівня дезінвазійної ефективності (ДЕ - 82,05 й 88,46 % відповідно).

2. Дезінвазійна ефективність препарату Дезсан щодо яєць нематод Trichuris skrjabinis (n=100), %

Вивчаючи дію засобу Дезсан щодо інвазійної тест-культури яєць Trichuris skrjabini встановлено, що препарат проявляє найвищі показники дезінвазійної активності (ДЕ - 100,00 %) за використання 1,5 % й 2,0 % концентрацій за всіх експозицій.

Задовільний рівень дезінвазійної ефективності встановлено за використання 0,5 % розчину препарату Дезсан за експозицій 10-60 хв (ДЕ від 80,90 до 84,27 %). В той же час, високий рівень ефективності засобу відносно яєць нематод виду T. skrjabini було зареєстровано за використання розчинів 1,0, 1,5 та 2,0 % концентрацій за всіх експозицій (ДЕ від 91,01 до 100,00 %).

Варто відмітити, що позитивну динаміку також було відмічено при використання препарату Дезсан щодо яєць нематод виду T. globulosa. Зокрема, препарат проявляв високий рівень дезінвазійної ефективності щодо неінвазійної культури яєць трихурисів у концентрації 0,5 % за експозицій 30 та 60 хв (ДЕ - 91,30-93,48 %) та в 1,0, 1,5 й 2,0 % концентрації за всіх запропонованих експозицій (ДЕ - 97,53-100,00 %) (табл. 3).

3. Дезінвазійна ефективність препарату Дезсан щодо яєць нематод Trichuris globulosa (n=100), %

Водночас, використання засобу в 0,5 % концентрації за експозицій 10-60 хв й 1,0 % концентрації заа експозиції 10 хв мало задовільний рівень ефективності щодо інвазійної культури інвазійних яєць нематод T. globulosa (ДЕ - 82,95-89,77 %). При використання засобу в 1,0 % концентрації за експозиції до 30-60 хв, та за концентрації 1,5--2,0 % за всіх запропонованих експозицій зафіксовано підвищення рівня дезінвазійної ефективності засобу до високого (ДЕ - 90,91-100,00 %).

Експериментальними дослідженнями встановлено, що використання препарату Дезсан в якості дезінвазійного засобу призводить до загибелі яєць нематод роду Trichuris, паразитуючих у овець, як наслідок деструктивної дії складових компонентів препарату на оболонку, кришечки яєць та їх зародки (рис.).

Рис. Деструктивні зміни в яйцях нематод роду Trichuris, виділених з гонад самок гельмінтів, після застосування дезінфікуючих засобів (х 100)