Изучение фармакологической активности препарата фитосомин на цыплятах-бройлерах

Размещено на http://www.allbest.ru/

Изучение фармакологической активности препарата фитосомин на цыплятах-бройлерах

О.И. Василиади, аспирант

Е.В. Кузьминова, М.П. Семененко, Е.П. Долгов

Study of the pharmacological activity of phytosomin in broiler chickens

O.I. Vasiliadi,

E.V. Kuzminova,

M.P. Semenenko,

E.P. Dolgov

Summary

The article presents data on the study of the pharmacological activity of the drug phytosomin in experimental modeling of transport stress in broiler chickens. Phytosomin contains plant components - dihydroquercetin and silymarin, as a phospholipid base - soy lecithin. The drug has an innovative dosage form - a phytosome, which has a high solu-bility in lipid and aqueous media, allows increasing the bioavailability of the drug in the body, ensures its targeted delivery, which significantly increases the effectiveness of the pharmacological action, while reducing the therapeutic dosage. According to the results of the study, it was determined that the drug phytosomin exhibits significant pharmaco-logical activity in broiler chickens during transport stress. Preventive introduction of the drug into the diet of poultry during the periods, accompanied by the impact of negative factors, allows increasing the adaptive capabilities of the body of broiler chickens, reduc-ing the clinical manifestations of the stress reaction, improving body weight dynamics and optimizing blood counts.

Abstract

Introduction. At the present time there is a clear trend towards an increase in the pathology of the hepatobiliary system among animals. In industrial poultry farming, the problem is aggravated by the fact that, as a result of targeted selection for high productivity specialized crosses are used, which are characterized by high production yields, but lower resistance to various stress factors compared to traditional breeds. One of the target organs sensitive to stress is the liver. Taking this in account, an urgent task of modern veterinary pharmacology is the development and implementation of effective hepatoprotective drugs in the practice of poultry farming that additionally have adaptogenic activity. Object. The object of the study is the drug phytosomin, which includes dihydroquercetin and silymarin, as a phospholipid base soy lecithin was used. Materials and methods. For the experiment 30 broiler chickens of the ROSS 308 cross at the age of 23 days were selected by the method of paired analogues, which were divided into 3 groups of 10 heads each: group 1 received phytosomin at the dose of 10 g / kg of feed for 14 days (7 days before transportation and a week after); poultry of groups 2 and 3 were kept on a normal diet without the use of drugs. Chickens of groups 1 and 2 were subjected to stress by transporting livestock for 2 hours at a speed of 60 km/h over a distance of 100 km (in containers with air access, without water and feed, in a crowded state). An additional stressful effect was a high ambient temperature of +30 °C. The poultry of the 3rd intact group did not participate in the modeling of transport stress. Before transportation and immediately after it, the physiological parameters of chickens (temperature and respiration) were measured, as well as body weight was determined. For biochemical and general blood analysis, blood was taken from 5 chickens from each group two hours later, on the third and on the seventh day after transportation. Laboratory blood tests were performed using automated analyzers - biochemical Vitalab Flexor and hematological Mythic 18 vet. The obtained digital data were processed by the methods of variation statistics with the determination of the significance of values according to the Student's t- test and the level of significance of differences in indicators by groups. Results and conclusions. It has been determined that the drug phytosomin exhibits significant pharmacological activity in broiler chickens during transport stress. Preventive introduction of the drug into the diet of poultry during periods accompanied by the impact of negative factors allows increasing the adaptive capabilities of the body of broiler chickens, reducing the clinical manifestations of a stress reaction, improving body weight dynamics and optimizing blood counts.

Keywords: broiler chickens, transport stress, phytosomin, pharmacological activity, dihydroquercetin, silymarin, phytosome

Аннотация

Актуальность. На сегодняшний день существует отчетливая тенденция к увеличению патологий гепатобилиарной системы среди животных. В промышленном птицеводстве проблема усугубляется и тем, что вследствие направленной селекции на высокую продуктивность используются специализированные кроссы, отличающееся высокими показателями выхода продукции, но более низкой, по сравнению с традиционными породами, устойчивостью к различным стресс - факторам. Одним из органов-мишеней, чувствительных к стрессирующему воздействию, является печень. С учетом этого актуальной задачей современной ветеринарной фармакологии является разработка и внедрение в практику птицеводства эффективных гепатопротекторных препаратов, дополнительно обладающих адаптогенной активностью. Объект. Объект исследования - препарат фитосомин, в состав которого входят дигидрокверцетин и силимарин, в качестве фосфолипидной основы использован соевый лецитин. Материалы и методы. Для опыта методом парных аналогов было отобрано 30 цыплят-бройлеров кросса РОСС 308 в возрасте 23 дней, которых разделили на 3 группы по 10 голов в каждой: 1 группа получала фитосомин из расчета 10 г / кг корма в течение 14 дней (7 дней до транспортировки и неделю после); птица 2 и 3 групп содержалась на обычном рационе без применения препаратов. Цыплята 1 и 2 групп подвергались стрессирующему воздействию посредством транспортировки поголовья в течение 2 часов со скоростью 60 км/ч на расстояние 120 км (в контейнерах с доступом воздуха, без воды и корма, в скученном состоянии). Дополнительным стрессирующим фактором являлась высокая температура окружающей среды + 30 °С. Птица 3 интактной группы не участвовала в моделировании транспортного стресса. Перед транспортировкой и сразу после нее измеряли физиологические показатели цыплят (температура и дыхание), а также определяли массу тела. Для проведения биохимического и общего анализа крови отобрали кровь у 5 голов из каждой группы через два часа, на третий и на седьмой день после транспортировки. Лабораторные исследования крови проводили при помощи автоматизированных анализаторов - биохимического Vitalab Flexor и гематологического Mythic 18 vet. Полученные цифровые данные обработаны методами вариационной статистики с определением достоверности значений по t-критерию Стьюдента и уровня достоверности различий показателей по группам. Результаты и выводы. Установлено, что препарат фитосомин проявляет значительную фармакологическую активность при транспортном стрессе у цыплят-бройлеров. Превентивное введение препарата в рацион сельскохозяйственной птицы в периоды, сопровождаемые воздействием негативных факторов, позволяет увеличить адаптационные возможности организма цыплят-бройлеров, снизить клинические проявления стрессовой реакции, улучшить динамику массы тела, а также оптимизировать показатели крови.

Ключевые слова: цыплята-бройлеры, транспортные стрессы цыплят, фитосомин, дигидрокверцетин, силимарин, транспортировка цыплят.

Введение

В настоящее время главной задачей агропромышленного комплекса Российской Федерации является обеспечение продовольственной безопасности страны. Птицеводство способно в короткие сроки увеличить производство продовольственной продукции, однако применяемые интенсивные технологии при промышленном выращивании птицы предусматривают использование специализированных кроссов, отличающихся высокой продуктивностью, но более низкой, по сравнению с традиционными породами, устойчивостью к различным стресс-факторам. Дополнительно концентрация большого поголовья в ограниченном пространстве, нарушение параметров микроклимата, автоматизация производственных процессов и многое другое усугубляют состояние стрессовой дезадаптации птицы [2, 4, 10, 14].

Известно, что стрессовая нагрузка способна вызывать широкий спектр морфофункциональных изменений в организме. Одним из органов-мишеней, чувствительных к действию негативных факторов, является печень. Стресс может способствовать развитию дегенеративных и деструктивных изменений, застойных явлений, холестаза в печеночной ткани, нарушению репаративных процессов в гепатоцитах и др. Болезни печени у сельскохозяйственной птицы снижают продуктивность и сохранность поголовья, что приводит к значительным экономическим потерям в отрасли [1, 5, 7]. бройлер стрессовый фитосомин

С учетом этого актуальной задачей современной ветеринарной фармакологии является разработка и внедрение в практику птицеводства эффективных гепатопротекторных препаратов, дополнительно обладающих адаптогенной активностью.

Объект исследования - препарат фитосомин, в состав которого входят дигидрокверцетин и силимарин, в качестве фосфолипидной основы использован соевый лецитин. Препарат имеет инновационную лекарственную форму - фитосому.

Фитосома - это флавоноидная молекула, связанная по крайней мере с одной молекулой фосфатидилхолина, которая обладает высокой растворимостью в липидной и в водной средах, позволяет увеличивать биодоступность в организме лекарственного вещества, обеспечивает его направленную доставку, что значительно повышает эффективность фармакологического действия при снижении дозы [3, 9].

Растительные компоненты, входящие в состав препарата, обладают преимущественно гепатопротекторным действием, а также антиоксидантными и метаболическими свойствами, что позволяет применять фитосомин не только для лечения заболеваний печени, но и для повышения адаптационного потенциала организма.

Дигидрокверцетин является биофлавоноидом природного происхождения, который обладает мощным антиоксидантным действием, гепатопротекторными, антитоксическими, противоотечными, ангиопротекторными свойствами, способствует уменьшению проницаемости и ломкости капилляров, снимает спазмы гладкой мускулатуры. Благодаря своей структуре способствует снижению подвижности липидов, входящих в состав мембраны клеток и тем самым стабилизирует мембраны в условиях окислительного стресса [8, 12].

Силимарин оказывает стабилизирующее воздействие на мембрану гепатоцитов, активизирует синтез белков и ферментов, тормозит проникновение токсинов в клетку, ингибирует дистрофические и потенцирует регенеративные процессы в печени, обладает антиоксидантной, противовоспалительной и антиаллергической активностью [6, 11, 13].

Цель исследований - изучение фармакологической активности препарата фитосомин при экспериментальном транспортном стрессе у цыплят-бройлеров.

Материалы и методы. Фармакологическую активность препарата фитосомин изучали на модели острого транспортного стресса, экспериментально воспроизведенного на сельскохозяйственной птице. Опыт проводился на цыплятах-бройлерах кросса РОСС 308, которых в двухнедельном возрасте разместили в условиях вивария Краснодарского НИВИ, где птица содержалась в одноярусных клеточных батареях с сетчатым полом, желобковыми (наружными) кормушками, вакуумными и ниппельными поилками. Условия содержания и кормления - световой и температурный режим, влажность, плотность посадки, полнорационные комбикорма - соответствовали рекомендациям ВНИТИП (2005).

После акклиматизационного периода в возрасте 23 дней методом парных аналогов было сформировано 3 группы птицы по 10 голов в каждой: 1 группа получала фитосомин из расчета 10 г / кг корма в течение 14 дней (7 дней до транспортировки и неделю после); птица 2 и 3 групп содержалась на стандартном рационе без применения препаратов. Препарат вводили с кормом используя технологию многоступенчатого смешивания.

В месячном возрасте цыплята 1 и 2 группы подвергались модельному стрессирующему воздействию посредством транспортировки поголовья в течение 2 часов со скоростью 60 км/ч на расстояние 120 км (в контейнерах с доступом воздуха, без воды и корма, в скученном состоянии). Дополнительным стресс-фактором являлась высокая температура окружающей среды + 30 °С. Птица 3 интактной группы не участвовала в моделировании транспортного стресса. Схема опыта представлена в таблице 1.

Таблица 1 - Схема опыта по изучению фармакологической активности препарата фитосомин при транспортном стрессе у цыплят -бройлеров

Перед транспортировкой и сразу после нее измеряли физиологические показатели цыплят (температуру и дыхание), а также определяли массу тела. Для проведения биохимического и общего анализа крови отобрали кровь у 5 голов из каждой группы через два часа, на третий и на седьмой день после транспортировки.

Лабораторные исследования крови проводили при помощи автоматизированных анализаторов - биохимического Vitalab Flexor и гематологического Mythic 18 vet.

Полученные цифровые данные обработаны методами вариационной статистики с определением достоверности значений по t-критерию Стьюдента и уровня достоверности различий показателей по группам.

Результаты. При транспортировке птица подвергалась воздействию шума, вибрации, высокой температуры окружающей среды, перевозка осуществлялась в клетках при скученном состоянии, без воды и корма, что клинически проявлялось сильным угнетением цыплят-бройлеров. Сразу после транспортировки у птицы 2 группы (без применения препаратов) были зафиксированы наиболее выраженные признаки стрессового состояния: бледность гребешка, анемичность слизистых оболочек, учащенное дыхание через открытый клюв, мышечная дрожь. У цыплят 1 группы отмечалось только учащенное дыхание через открытый клюв и незначительная бледность гребешка.

Измерением физиологических показателей установлено, что птица 1 группы, превентивно получавшая фитосомин, была лучше приспособлена к стрессовым нагрузкам. Так, температура тела у этих цыплят после транспортировки практически не увеличилась, разница с интактной группой составила 1 %, а во 2 группе повысилась на 1,9 %. Частота дыхательных движений в 1 группе увеличилась в сравнении с 3 группой на 44,3 %, а во 2 группе - на 65,9 %. Достоверная разница между 1 и 2 группами составляет 14,9 %. Результаты представлены в таблице 2.

Таблица 2 - Влияние препарата фитосомин на физиологические показатели цыплят-бройлеров при моделировании транспортного стресса (M±m; n=10)

Степень достоверности: * p < 0,05 по отношению ко 2 группе

Анализ данных динамики массы тела цыплят показал, что в 1 опытной группе от начала эксперимента и после 7-дневного применения фитосомина на момент транспортировки был зафиксирован наибольший показатель привесов, составивший 27,2 %, в то время как во 2 группе масса тела бройлеров увеличилась на 15,3 %, а в контроле - на 17,8 %. Данный фармакологический эффект препарата связан не столько с входящими в его состав липидными компонентами, сколько с положительным влиянием на функцию печени, что улучшает метаболизм организма птицы в целом и способствует эффективному набору массы тела. Сразу после моделирования транспортного стресса у опытной птицы отмечалась потеря массы тела: в 1 группе - на 2,3 %; во 2 группе - на 3,8 %. Затем в течение 7 дней во всех группах зарегистрирован положительный прирост массы тела поголовья: на 14 день опыта привес по 1 группе за весь период исследований составил 74,3 %; по 2 группе - 56,2 %; в контрольной группе - 68,9 %. Результаты представлены в таблице 3.

Таблица 3 - Влияние препарата фитосомин на динамику массы тела цыплят-бройлеров при моделировании транспортного стресса. (M±m; n=10)

При воздействии стресс-факторов организм проявляет ответную адаптационную реакцию, которая влечет за собой сдвиги в клеточном составе крови, что нашло подтверждение в результатах общего анализа крови (таблица 4).

Таблица 4 - Влияние препарата фитосомин на гематологические показатели крови цыплят-бройлеров при экспериментальном моделировании транспортного стресса (M±m; n=5)

Степень достоверности: * р<0,05; ** p < 0,01 по отношению к контролю

Так, через 2 часа после транспортировки в опытных группах отмечалось снижение количества эозинофилов и лимфоцитов на фоне увеличения содержания моноцитов, базофилов и гетерофилов в сравнении с интактным контролем. В 1 группе разница в уровне эозинофилов составила 18,2 % и лимфоцитов - 18,9 %.

Во 2 опытной группе снижение по эозинофилам составило 37,5 %, лимфоцитам - 28,6 %. Как известно, по изменениям в показателях белой крови можно косвенным методом оценивать функциональное состояние желез внутренней секреции. Так, снижение количества эозинофилов указывает на активацию деятельности коры надпочечников.

Моноциты увеличились в 1 опытной группе на 8,5 %, а во 2 группе - на 12,6 %. Уровень базофилов повысился в 1 группе на 23,4 %, во 2 группе - на 51,7 %, а гетерофилов - на 46,4 и 69,3 % соответственно. При этом максимальные изменения в крови у опытной птицы отмечались в первые 2 часа после транспортировки.

К 3 дню наблюдений направленность лейкоцитарных сдвигов изменилась на противоположную сторону, отмечалось снижение общего количества моноцитов, базофилов, гетерофилов на фоне увеличения количества эозинофилов и лимфоцитов. На 7 день наблюдений показатели в 1 группе с применением препарата максимально приблизились к значениям контрольной группы, в то время как во 2 группе все еще были отмечены изменения.

Установлено, что во всех опытных группах наблюдалось увеличение показателей гематокрита, что свидетельствовало о сгущении крови. Данные изменения могут быть связаны с обезвоживанием организма на фоне стрессовой реакции, так как птица перевозилась в скученном состоянии в условиях отсутствия воды и еды, при высокой температуре окружающей среды. Так, в 1 группе гематокрит сразу после транспортировки был больше интактного контроля на 17,6 %, а во 2 опытной группе - на 28,1 %. Далее показатели гематокрита в обеих опытных группах снижались и приближались к показателям контроля, что связано с нормализацией общего состояния цыплят.

В результате проведенного биохимического анализа крови у птицы после транспортировки было зарегистрировано увеличение уровня АсАТ, АлАТ, глюкозы, также отмечалось снижение концентрации общего белка. Результаты исследования представлены в таблице 5.

Так, показатели АсАТ и АлАТ значительно увеличились на 3 день после транспортировки, и разница с контролем составила: в 1 группе 20,0 и 67,7 %, соответственно; во 2 группе - 37,1 и 181,2 %. К концу опыта активность ферментов стала снижаться и практически приблизилась к показателям контрольной группы в обеих опытных группах. Разница с интактной птицей на 7 день составила: по АсАТ в 1 группе - 1,4 %, во 2 группе - 10,0 %; по АлАТ в 1 группе 5,6 %, во 2 группе - 18,4 %. Изменения в показателях между опытными группами можно объяснить тем, что цыплята-бройлеры в группе без применения препарата имели более низкий адаптационный потенциал и были больше подвержены воздействию стресса. Отмечено значительное повышение глюкозы в сыворотке крови сразу после транспортировки, что свидетельствует о воздействии стрессовой реакции на организм птицы и активацию фазы тревоги или мобилизации (длительность 3-48 часов), вследствие чего повышается уровень адренокортикотропного гормона и кортикоидов, увеличивающих уровень глюкозы. В 1 группе сразу после транспортировки разница с контролем составила 43,6 %, во 2 группе - 81,2 %. Через 3 дня наступила фаза резистентности, характеризующаяся восстановлением биохимических показателей до пределов физиологической нормы, тем не менее, показатели глюкозы в 1 группе были больше контроля на 9,0 %, а во 2 группе - на 29,5 %.

Анализируя данные по содержанию общего белка в сыворотке крови цыплятбройлеров, зафиксировали снижение показателя на 3 день после транспортировки, что, повидимому, связано со снижением аппетита на фоне стрессового состояния птицы и нарушением протеинсинтетической функции печени. Так, показатели общего белка в 1 группе на 3 день после стрессовой нагрузки были ниже данных контрольной группы на 3,7 %, а во 2 группе - на 18,2 %. В дальнейшем его концентрация в 1 опытной группе увеличилась и приблизилась к показателям контроля, а во 2 группе разница составила 9,0 %.

Таблица 5 - Влияние препарата фитосомин на биохимические показатели крови цыплят-бройлеров при экспериментальном моделировании транспортного стресса (М±m; n=5)

Степень достоверности: * р<0,05; ** p < 0,01 по отношению к контролю

Выводы

По результатам проведенного исследования установлено, что препарат фитосомин проявляет значительную фармакологическую активность при транспортном стрессе у цыплят-бройлеров. Его применение птице обусловливало снижение клинических проявлений стрессовой реакции, улучшение динамики массы тела, а также оптимизации показателей крови.

Библиографический список

1. Анатомо-гистологические параметры печени бройлеров при стрессе / С.В. Козлова, Е.П. Краснолобова, С.А. Веремеева, Н.А. Череменина // Вестник КрасгАу. 2021. № 5 (170). С. 109-115.

2. Горковенко Л.Г., Осепчук Д.В., Петенко А.И. Ресурсосберегающие подходы к кормлению птицы // Политематический сетевой электронный научный журнал Кубанского государственного аграрного университета. 2016. № 115. С. 1-10.

3. Зверев Я.Ф., Рыкунова А.Я. Современные наноносители как фактор повышения биодостпности и фармакологической активности флавоноидов // Биотехнология. 2022. Т. 38. № 1. С. 47-68.

4. Кощаев А.Г., Щербатов В.И. Птицеводство: из прошлого - в будущее // Птицеводство.

5. № 5. С. 6-7.

6. Литвиненко А.Н., Зиновкин Д.А., угольник Т.С. Морфологические и морфометрические параметры ткани печени лабораторных животных после моделирования хронического стресса // Проблемы здоровья и экологии. 2018. № 4 (58). С. 56-60.

7. Оковитый С.В. Комбинированное применение гепатопротекторов // Лечащий врач.

8. № 8. С. 38-43.

9. Система фармакопрофилактики заболеваний печени у высокопродуктивного молочного скота / Е.В. Кузьминова, М.П. Семененко, С.И. Кононенко, Н.Н. Забашта // Известия Тимирязевской сельскохозяйственной академии. 2019. № 4. С. 121-132.

10. Сравнительный анализ антиоксидантной активности кверцетина и дигидрокверцетина при экспериментальном гипотиреозе / Ш.Т. Хайдаров, Ж. Туйчибоев, А. Жамолдинов, Г.М. Джаббарова, М.Р. Зарипова, У.Р. Юсупова // Universum: химия и биология: электрон. научн. журн. 2021. № 4 (82). https://7universum.com/ru/nature/archive/item/n506.

11. Фитосомы - инновационная технология доставки растительных компонентов / В.Ю. Жилкина, А.И. Марахова, П. Кезимана, Е.В. Блынская // Успехи современного естествознания. 2015. № 11-1. С. 31-34.

12. Эффективность адаптогумина при технологическом стрессе у кур-несушек / Е.В. Кузьминова, М.П. Семененко, Д.В. Осепчук, Н.А. Юрина, Д.В. Антипова, И.С. Жолобова // Комбикорма. 2020. № 7-8. С. 79-81.

13. Efficacy of silymarin-phospholipid complex in reducing the toxicity of aflatoxin B1 in broiler chicks / D. Tedesco, S. Steidler, S. Galletti, M. Tameni, O. Sonzogni, L. Ravarotto // Poult Sci. 2004. № 83 (11). P. 1839-1843.

14. Feeding dihydroquercetin to broiler chickens / V. Pirgozliev, C. Westbrook, S. Woods, M. R. Karagecili, F. Karadas, S. P. Rose, S. C. Mansbridge // Br Poult Sci. 2018. P. 1-5.

15. Hepatoprotective effects of silymarin on CCl4-induced hepatic damage in broiler chickens model / A. Baradaran, F. Samadi, S. S. Ramezanpour, S. Yousefdoust // Toxicol Rep. 2019. P. 788-794.

16. Transport-related stress and its resolution in turkey pullets: activation of a pro-inflammatory response in peripheral blood leukocytes / Y. Wein, Z. Geva, E. Bar-Shira, A. Friedman // Poult Sci. 2017. № 96 (8). P. 2601-2613.

Размещено на Allbest.ru