Диагностика инфекций, вызываемых тогавирусами. Диарея крупного рогатого скота

Размещено на http://www.allbest.ru/

Размещено на http://www.allbest.ru/

Федеральное государственное бюджетное образовательное

Учреждение высшего образования

«Национальный исследовательский Мордовский государственный

университет им. Н. П. Огарёва»

Аграрный институт

Кафедра морфологии, физиологии и ветеринарной патологии

РЕФЕРАТ

«Диагностика инфекций, вызываемых тогавирусами. Диарея крупного рогатого скота»

А.С. Моисеева

СОДЕРЖАНИЕ

• ВВЕДЕНИЕ
• 1. Характеристика семейства тогавирусов
• 2. Методы лабораторной диагностики тогавирусов
• 3. Специфическая профилактика тогавирусных инфекций
• 4. Диарея крупного рогатого скота
• ЗАКЛЮЧЕНИЕ

СПИСОК ИСПОЛЬЗУЕМОЙ ЛИТЕРАТУРЫ

ВВЕДЕНИЕ

Вирусы появились на земле гораздо раньше человека и постоянно «сопровождали» его на всем протяжении эволюции.

Достаточно вспомнить оспу, наводившую ужас на средневековую Европу, или, например, полиомиелит. Слово «эпидемия» знакомо каждому. Оно ассоциируется у нас с катастрофическими морами прошлого, а с экранов нас ежегодно предупреждают об очередном нашествии вируса гриппа. Как считают специалисты, грипп был известен людям с глубокой древности. Признаки «лихорадки», схожей с гриппом, описывали еще Гиппократ, Тит Ливии и Диодор. Первые сведения о широком распространении инфекции датированы 1179 годом XVI--XVIII веков, на протяжении которых страны Европы сотрясала «итальянская лихорадка». После пандемии 1780--1782 годов заболевание стали называть «инфлюэнца» (от лат. influere -- «проникать», «распространяться») и «гриппом» (от франц. gripper -- «схватывать»). И это не удивительно. В 20-х годах прошлого века от «испанки» погибло от 20 до 40 миллионов человек.

Свежи в нашей памяти и события последнего времени - птичий грипп, «свинной» грипп, лихорадка Эбола, новая коронавирусная инфекция. Вирус постоянно мутирует и надо создавать все новые вакцины. Не удалось человечеству побороть и СПИД, хотя в последнее время и появляются сообщения об испытаниях различных вакцин и противовирусных препаратов. В последнее время всё чаще говорят о «новых» эпидемиях, вызванных ранее неизвестными или несвойственными человеку болезнями.

В данном реферате речь пойдет о семействе тогавирусов, которое мы можем знать по таким известным болезням как краснуха и различные лихорадки.

1. Характеристика семейства тогавирусов

Семейство Togaviridae (от лат. toga -- плащ) - семейство вирусов, состоящее из родов Alphavirus, Flavivirus, Rubivirus и Pestivirus. Вирусы содержат однонитчатую РНК с мол. м. 3-4 X106 дальтон, линейной формы, которая является инфекционной. Вирионы диаметром 50-70 нм. (альфавирусы), 40-50 нм. (флавивирусы), 70 нм. (рубивирусы), 40 нм. (пестивирусы). Для капсида альфавирусов свойствен икосаэдральный тип симметрии. Сборка вирионов происходит в цитоплазме клеток на мембранных структурах. У флавивирусов в составе вириона имеются 3 структурных белка, у альфавирусов 2-3. При репликации в клетках вирусы обоих родов индуцируют образование РНК-зависимой РНК полимеразы. Вирусы чувствительны к действию жирорастворителей. Альфа- и флавивирусы способны к репликации как в клетках позвоночных животных, так и членистоногих. Переносчики (комары, москиты, мокрецы, клещи) осуществляют не только биологическую трансмиссию этих вирусов (поэтому они относятся к группе арбовирусов), но могут быть и их резервуаром в природных очагах. Для рубивирусов и пестивирусов беспозвоночные не являются хозяевами.

Тогавирусы обладают способностью к гемагглютинации гусиных эритроцитов. Род альфавирусов включает 20 вирусов; важнейшие из них - вирусы Поражения протекают по типу системных лихорадоквосточного, западного и венесуэльского энцефаломиелитов лошадей, лихорадок Мукамбо, Маяро, Синдбис, О'Ньонг Ньонг, Росс Ривер, леса Семлики (в СССР известны природные очаги вирусов Синдбис, леса Семлики, Кызыл Агач). Род флавивирусов включает 57 вирусов, из них ряд вирусов, имеющих значение в ветеринарной и медицинской патологии, - энцефалитов клещевого, японского, долины Муррея, Сент Луис, Повассан, Западного Нила, менингоэнцефалита индюков Израиля, шотл. энцефаломиелита овец, омской геморрагической лихорадки, лихорадок жёлтой, Денге, Зика, Ильеус, Банзи, Буссуквара, Вессельброн, Уганда С, Спондвени, Усуту, Кунджин, Киасанурской лесной болезни (в СССР известны природные очаги вирусов клещевого, японского, западно-нильского, Повассан энцефалитов, омской геморрагической лихорадки, Карши, Сокулук, Тюленей). К роду рубивирусов относятся возбудители краснухи и, возможно, артериита лошадей, к роду пестивирусов - возбудители диареи коров (комплекс), лихорадки свиней, lactic dehydrogenase и, возможно, геморрагической лихорадки обезьян. Альфа- и флавивирусы обладают многими общими экологическими (арбовирусы) и биологическими свойствами, патогенны для мышей-сосунков при их заражении в мозг (используются для изоляции) и для многих диких и домашних животных. Сельскохозяйственные животные - важное звено в развитии эпизоотии и эпидемических вспышек при японском энцефалите (свиньи, лошади), восточном, западном и венесуэльском энцефаломиелитах (лошади). В эпизоотологии многих альфа- и флавивирусов большую роль играют дикие, синантропные и домашние птицы.

2. Методы лабораторной диагностики тогавирусных инфекций

Выделение вирусов из крови и цереброспинальной жидкости проводят путем заражения новорожденных белых мышей интрацеребрально, а также заражения культур клеток, где они оказывают цитопатическое действие, и бляшек под агаровым покрытием. Идентификацию вирусов проводят в РН на мышах или культурах клеток, в РТГА с эритроцитами гусей, РСК, РИФ и ИФА.

Серодиагностика основана на обнаружении антител в парныхсыворотках с помощью РН, РСК, РТГА, РРГ, РНГА, РИФ, ИФА.

Экспресс-диагностика альфавирусных инфекций основана на обнаружении антигенов в исследуемом материале с помощью РНГА, РИФ, ИФА, а также использовании молекулярно-генетических методов исследования (молекулярная гибридизация нуклеиновых кислот, ПЦР).

Лабораторная диагностика краснухи основана на выделении вируса из смывов со слизистой оболочки носа и зева, крови, мочи, реже испражнений, а также внутренних органов погибших детей и обнаружении антител в парных сыворотках и цереброспинальной жидкости при врожденной краснухе и ПКПЭ, а также постановке ПЦР. Так как вирусологический метод сложен и трудоемок, основной комплекс методов диагностики краснухи включает определение специфических антител к вирусу в ИФА: обнаружение специфических IgM или нарастание IgG в парных сыворотках, определение индекса авидности IgG и выявление РНК вируса краснухи.

Лабораторная диагностика основана на выделении вирусов путем интрацеребрального заражения мышей, культур клеток, куриных эмбрионов и заражения комаров, а также обнаружении антител в парных сыворотках. Материалом при проведении вирусологического исследования служат кровь, взятая в первые дни заболевания и в период повторного приступа лихорадки, цереброспинальная жидкость, секционный материал (мозг, печень, селезенка, лимфатические узлы), внутренние органы погибших диких животных, переносчики - клещи, комары, москиты, а также молоко коз, коров и овец (вирус клещевого энцефалита), озерная вода, в которой находились тушки павших животных (вирус омской геморрагической лихорадки). Индикация вирусов проводится на основании гибели мышей и куриных эмбрионов, в культурах клеток с помощью РГА с эритроцитами гусей, по обнаружению цитопатического действия и бляшкообразованию. Идентификация проводится с помощью РН, РТГА, РСК, РНГА, РИД, РИФ, ИФА. По сравнению с

РСК и РТГА РН наиболее специфична при работе с арбовирусами, позволяет осуществлять их типовую дифференциацию.

Обнаружение антител в парных сыворотках проводят с помощью РТГА, РТНГА, РСК, РРГ, РН, РнИФ, ИФА. Диагностическим считается нарастание титров антител более чем в 4 раза. Обнаружение IgM свидетельствует о свежем инфицировании. При энцефалитах важную роль играет обнаружение антител в цереброспинальной жидкости, так как их раннее обнаружение свидетельствует о текущей инфекции.

Экспресс-диагностика флавивирусных инфекций осуществляется на основании обнаружения антигенов с помощью РНГА, РИФ, ИФА и РИА. Из молекулярно-генетических методов диагностики применяют молекулярную гибридизацию нуклеиновых кислот и ПЦР.

Лабораторная диагностика клещевого энцефалита основана на обнаружении вируса и его антигенов в исследуемом материале, постановке ПЦР, а также обнаружении антител. Вирус выделяют из крови и цереброспинальной жидкости больных, а также внутренних органов и мозга умерших путем интрацеребрального заражения новорожденных белых мышей и культур клеток. Идентификацию вируса проводят в РТГА, РН и РСК, в монослое культур клеток в РИФ. Обнаружение антител в парных сыворотках и цереброспинальной жидкости проводят с помощью РСК и РТГА. Для обнаружения специфических IgM и IgG к белку E ВКЭ применяют ИФА. Разработана лантанидная иммунофлюоресцентная система для выявления специфических антител классов M и G, а также антигенов ВКЭ. Обнаружение антигенов в исследуемом материале, в том числе в клещах, снятых с укушенных людей, проводят с помощью ИФА-Е.

Экспресс-диагностика клещевого энцефалита основана на обнаружении вирусного антигена в крови с помощью РНГА и ИФА, выявлении IgM-антител на первой неделе заболевания в цереброспинальной жидкости и обнаружении РНКвируса с помощью ПЦР в крови и цереброспинальной жидкости.

3. Специфическая профилактика тогавирусных инфекций

При проведении вакцинопрофилактики для создания активного искусственного приобретенного иммунитета применяют в основном убитые формалином вакцины, за исключением живой вакцины против желтой лихорадки.

Для лечения и экстренной профилактики клещевого энцефалита применяют специфический гомологичный донорский иммуноглобулин против клещевого энцефалита. При отсутствии данного препарата назначают специфический гетерологичный лошадиный иммуноглобулин. При невозможности введения иммуноглобулина используют индуктор интерферона (йодантипирин). Серотерапию необходимо начинать не позднее 3-4-го дня заболевания. Для вакцинации лиц, проживающих на эндемичных по клещевому энцефалиту территориях, а также выезжающих на эти территории в весенне-летний период используют убитые культуральные вакцины. тогавирус инфекция диарея энцефалит

Для исключения пищевого пути заражения в природных очагах клещевого энцефалита необходимо потреблять только кипяченое молоко.

Первоочередной задачей профилактики является защита беременных от внутриутробного инфицирования плода, а не предохранение от краснухи детских контингентов. С этой целью применяют живую вакцину из аттенуированных штаммов. Иммунитет у привитых сохраняется в течение 20 лет. Заболевание краснухой в I триместре беременности является показанием к прерыванию беременности.

4. Диарея крупного рогатого скота

Возбудитель вирусной диареи крупного рогатого скота относится к роду Pestivirus семейства Флавивирусов (от лат. flavus - жёлтый).

Морфология и химический состав вирусов. Вирионы имеют сферическую форму, диаметр 35-60 нм. Они состоят из нуклеоида, представленного однонитевой РНК с молекулярной массой 4-106Д, капсидной оболочки с кубическим типом (икосаэдр) симметрии, состоящей из 92 капсомеров и двухслойной липопротеидной оболочки, на поверхности которой есть 64 ворсинки. Вирус содержит белок - 57-66%, липиды - 17-31, углеводы - 6-9 и РНК - 3-8%.

Вирусная диарея крупного рогатого скота (болезнь слизистых оболочек, Diarrhea viralis bovum) - острая контагиозная болезнь, характеризующаяся лихорадкой, эрозийно-язвенным воспалением слизистых оболочек пищеварительного тракта и дыхательных путей, сопровождается кровавой диареей, конъюнктивитом и ринитом. У коров могут быть аборты. Вирусной диареей болеет крупный рогатый скот обычно с двухмесячного возраста до 2 лет (чаще 5-6 мес.). Заражение происходит алиментарным и аэрогенным путями, внутриутробно, возможно через инфицированную сперму. Болезнь чаще протекает в виде эпизоотических вспышек, в основном в холодное время года. Может поражаться от 2 до 100% животных, а летальность достигает 50%. Инкубационный период при вирусной диарее составляет от 2 до 14 дней.

Болезнь начинается с повышения температуры тела до 40,5-42,0 °С, сопровождается гиперемией слизистых оболочек носовой полости и слизистыми истечениями из носовых отверстий. На слизистой оболочке ротовой полости обнаруживают покрасневшие участки, эрозии, язвы, покрытые сероватыми наложениями. Возможно образование язв на носовом зеркале, слизистой оболочке носа и влагалища. Через несколько дней появляется изнуряющий понос, со зловонными каловыми массами, примесью слизи, крови и пузырьков воздуха. В отдельных случаях в области межкопытной щели обнаруживают язвы и эрозии, что приводит к хромоте и неохотному передвижению животных.

Патологоанатомические изменения характеризуются истощением, обезвоживанием, наличием на слизистых оболочках пищеварительного тракта язв и эрозий неправильной формы, особенно на деснах, твердом небе и сычуге. Слизистая оболочка тонкого отдела кишечника набухшая, с кровоизлияниями, содержимое водянистое, зловонное, с примесью слизи и крови. Печень увеличена, охряного цвета с серыми очагами. Почки набухшие, с кровоизлияниями под капсулой. Кровоизлияния также могут быть под эпи- и эндокардом. У некоторых животных в легких отмечают пневмонию.

Устойчивость вируса. Вирус чувствителен к эфиру, хлороформу и трипсину. Быстро инактивируется теплом и в кислой среде, но обладает высокой устойчивостью при +40С, -200С, -400С и в лиофилизированном состоянии; в крови, лимфоузлах, селезёнке и в другом патматериале при -15 °С сохраняется до 6 мес. Антигенные свойства вируса. В структуре вируса установлено 8 вирусспецифических белков: VP1-VP8. Все штаммы в антигенном отношении идентичны, но различаются по вирулентности, тропизму и цитопатогенному действию. В организме животных вирус индуцирует образование вируснейтрализующих, преципитирующих и комплементсвязывающих антител. Вирус диареи крупного рогатого скота имеет родство с вирусом чумы свиней. Экспериментальная инфекция легко воспроизводится на телятах в возрасте от 2 до 6 мес. при внутривенном, интраназальном, внутрибрюшинном и 65 подкожном введении вируссодержащего материала, а также контактным путём. Есть сообщения о возможности экспериментального заражения овец, коз, поросят и кроликов. Локализация и выделение вируса. В организме больных животных вирус локализуется в слизистой оболочке желудочно-кишечного тракта, в крови, лимфатических узлах, паренхиматозных органах. Он выделяется с калом, мочой, слюной, носовыми и глазными секретами, а также с экссудатом местных очагов поражения. Вирусоносительство может быть до 200 дней и более. Культивирование вируса осуществляют в первичных культурах клеток почки эмбриона крупного рогатого скота, семенников телёнка или ягнёнка, перевиваемой культуре клеток селезёнки эмбриона крупного рогатого скота, в макрофагах и лимфоцитах, культивируемых in vitro. Цитопатические изменения наступают на 2-5-е сут. и характеризуются мелкозернистой инфильтрацией, округлением и отторжением клеток; есть нецито- патогенные штаммы вируса. Некоторые штаммы вируса после адаптации можно культивировать в куриных эмбрионах при заражении в желточный мешок: на 3-6-е сут. около половины эмбрионов погибает.

Лабораторная диагностика включает обнаружение антигена вируса диареи в РИФ (мазки - отпечатки, срезы), выделение возбудителя из патологического материала в культуре клеток и его идентификация в РН или РИФ, а также выявление антител в сыворотке крови больных и переболевших животных (метод парных сывороток) в РСК,РНГА и РН. В лабораторию направляют патологический материал от больных животных, взятый в первые 2-3 дня при выраженных симптомах болезни, или от животных, убитых с диагностической целью в острой стадии заболевания: смывы со слизистой оболочки носовой полости, соскобы с изъязвлённых и эрозированных участков слизистых оболочек, кровь, кусочки лёгких с бронхом, селезёнки, лимфоузлы, миндалины, поражённые участки слизистых оболочек.

Для специфической профилактики предложены живые (откормочные хозяйства) и инактивированные (Комбовак - инфекционный ринотрахеит, парагрипп-3, респираторно-синцитиальная, рота- и коронавирусные болезни телят) (репродуктивные хозяйства) вакцины. Продолжительность иммунитета в зависимости от вида вакцины от 1 до 5 лет.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

В заключении реферата хотелось бы выделить несколько основных тезисов из проделанной работы:

1. Тогавирусы - семейство РНК-содержащих вирусов, включающее в себя роды: Alphavirus, Flavivirus, Rubivirus и Pestivirus;

2. Репродукция тогавирусов происходит в цитоплазме; после созревания дочерние популяции отпочковываются от клеточной или внутриклеточных мембран, служащих местом сборки вирионов

3. Заболевания, вызываемые представителями семейства:восточный, западный, венесуэльский энцефаломиелит лошадей, лихорадка Мукамбо, Маяро, Синдбис, О'Ньонг-Ньонг, Росс Ривер, леса Семлики энцефалита клещевого, японского, долины Муррея, Сент-Луис, диареи коров (комплекс), лихорадки свиней, краснухи и др.; поражения протекают по типу системных лихорадок;

4. Выделение вирусов из крови и цереброспинальной жидкости проводят путем заражения новорожденных белых мышей интрацеребрально, а также заражения культур клеток и бляшек под агаровым покрытием;

5. Идентификацию вирусов проводят в РН на мышах или культурах клеток, в РТГА с эритроцитами гусей, РСК, РИФ и ИФА;

6. Серодиагностика основана на обнаружении антител в парных сыворотках с помощью РН, РСК, РТГА, РРГ, РНГА, РИФ, ИФА;

7. При проведении вакцинопрофилактики для создания активного искусственного приобретенного иммунитета применяют в основном убитые формалином вакцины, за исключением живой вакцины против желтой лихорадки; для лечения и экстренной профилактики клещевого энцефалита применяют специфический гомологичный донорский иммуноглобулин против клещевого энцефалита.

СПИСОК ИСПОЛЬЗУЕМОЙ ЛИТЕРАТУРЫ

1. Вирусология и биотехнология: краткий курс лекций для студентов 3 курса специальности 36.05.01 Ветеринария /Е.С. Красникова // ФГБОУ ВО Саратовский ГАУ.- Саратов, 2016.

2. Глотов А.Г. Вирусная диарея: значение в патологии воспроизводства крупного рогатого скота / А.Г.Глотов, Т.И.Глотова //Ветеринария. - 2015. - № 4. - С. 3-8.

3. Жидков С.А., Лебедев А.И., Белова Н.Б. Патогенез и формы инфекционного течения вирусной диареи - болезни слизистых оболочек крупного рогатого скота // Ветеринарная патология. 2005. №3 (14). С. 24-31.

4. Сергеев О.В. Иммунобиологические и патогенетические особенности вирусной диареи / О.В.Сергеев // Ветеринария Кубани.- 2009. -№ 5. -С. 23-26.

5. http://humbio.ru/humbio/vir1pdd/000b81a2.htm

6. http://www.sgau.ru/files/pages/27375/14695314406.pdf

7. http://zoovet.info/veterinarnyi-slovar/189-t/1414-togavirusy

8. https://veterinarua.ru/virusnye-infektsii/1224-togavirusnye-infektsii.html

Размещено на Allbest.ru