Репродуктивна функція корів у зв’язку з поліморфізмом систем білків та ензимів крові
Тривалість тільності, час першого осіменіння після отелення - одні з основних критеріїв оцінки репродуктивної функції корів. Дослідження частоти алелів та фенотипів досліджених поліморфних систем білків та ензимів сироватки крові піддослідних корів.
Рубрика | Сельское, лесное хозяйство и землепользование |
Вид | статья |
Язык | украинский |
Дата добавления | 25.02.2020 |
Размер файла | 2,3 M |
Отправить свою хорошую работу в базу знаний просто. Используйте форму, расположенную ниже
Студенты, аспиранты, молодые ученые, использующие базу знаний в своей учебе и работе, будут вам очень благодарны.
Размещено на http://www.allbest.ru
Размещено на http://www.allbest.ru
Покращення репродуктивної функції корів, зменшення частоти акушерських і гінекологічних захворювань можливе за умов ефективних способів їх прогнозування і профілактики, раціонального лікування, спрямованого відбору тварин у ранньому віці з певними фізіологічними і біохімічними показниками та імуногенетичними ознаками, серед яких заслуговують великої уваги поліморфні системи білків (ензимів). Переваги останніх перед іншими показниками у тому, що вони формуються у період внутрішньоутробного розвитку плода, не змінюються з віком тварин і під впливом зовнішніх факторів.
Дослідження, які проводяться в багатьох країнах світу, свідчать, що найбільш вагомою причиною та основним чинником стійкості корів до захворювань, серед безлічі інших, є генетична детермінованість цієї ознаки, а ступінь резистентності певним чином залежить від спадкових властивостей батьків [1-5].
Цим зумовлений інтерес до генетичних маркерів, застосування яких дає змогу здійснювати маркер-асоційовану селекцію і прогнозувати здоров'я тварин та їх господарсько-корисні якості [7, 8].
Зв'язок між сприйнятливістю навіть до однієї і тієї самої хвороби, але в різних порід тварин, не носять постійного характеру, тобто не має того самого генетичного маркера, що може бути пов'язаний з відсутністю генетичного зчеплення за полігенного успадкування хвороб, тому пошук генетичних маркерів хворих і здорових тварин набуває особливого практичного значення для створення стад, стійких до хвороб, особливо акушерсько-гінекологічних [9].
Метою досліджень було провести оцінку репродуктивної здатності поголів'я тварин, визначити в сироватці крові поліморфні системи білкових макромолекул та ензимів та встановити їх зв'язок з показниками репродуктивної функції, резистентністю до акушерсько-гінекологічної патології у корів. Головна стратегія наведених результатів досліджень полягає у вивченні можливості використання молекулярно-генетичного аналізу великої рогатої худоби для виявлення імуногенетичних маркерів з метою теоретичного обґрунтування їх застосування для формування високопродуктивного та резистентного до акушерсько-гінекологічної патології дійного стада корів.
Матеріали і методи. Дослідження проведені на 65 коровах української чорно-рябої молочної породи (західний внутрішньопородний тип) віком 5-9 років, живою масою 550600 кг в ДІЇ «ДГ «Оброшино» Інституту сільського господарства Карпатського регіону НААН.
Акушерсько-гінекологічну диспансеризацію корів проводили за методикою М. В. Косенка та співавт. [3].
Критерієм оцінки репродуктивної функції корів були: тривалість тільності, час першого осіменіння після отелення, сервіс-період, індекс осіменіння; запліднюваність після першого осіменіння, всього запліднених (загальна кількість запліднених тварин за період досліджень), народження близнят.
Резистентність корів до акушерської і гінекологічної патології визначали за частотою захворювань і ускладнень, а саме: до акушерської патології, %: в час тільності (аборти); родів (неправильні розміщення плода, слабкі потуги і перейми, затримання посліду); післяродовий період (субінволюція, випадіння матки, післяродові ендометрити); до гінекологічної патології, %: гострі і хронічні ендометрити; персистентне жовте тіло, кісти (атрофія) яєчників. Для об'єктивного визначення частоти акушерської і гінекологічної патології у піддослідних тварин, встановлення вірогідності відхилень, проведення дисперсного аналізу використовували розроблені коефіцієнти резистентності з врахуванням фізіологічних періодів: тільності, отелення, після отелення [12].
Матеріалом для генетико-біохімічних досліджень була кров корів. Поліморфізм білків сироватки крові - трансферинів, постальбумінів визначали методом диск-електрофорезу в поліакриламідному гелі за удосконаленою нами системою приготування розділяючих гелів (и. Laemmli, 1970), яка забезпечує економію часу і реактивів для приготування гелів [10]. Для оцінки фракційного складу білків сироватки крові їх поліморфізму викорстовували метод типізації за В. М. Холодом [12].
Ізоформи ензимів (%) антиоксидантного захисту визначали методом електрофорезу: каталази [6, 15, 20] та пероксидази [14, 17] у 7,5 % ПААГ, супероксиддисмутази [17, 18] - у 10 % ПААГ.
Генетичну частоту алелів поліморфних систем білків і ферментів сироватки крові визначали за формулою Харді-Вайнберга. Аналіз показників репродуктивної функції корів з урахуванням поліморфних систем білків і ферментів сироватки крові, частоти акушерської і гінекологічної патології проведено за розробленою в лабораторії Інституту програмою для ІВМ-сумісних персональних комп'ютерів (СУБД “CLIPPER”). Статистичний аналіз одержаних результатів виконаний з використанням методів варіаційної статистики за М. О. Плохінським [16].
Результати й обговорення. У відібраному матеріалі (проби крові від 65 корів) для генетико-біохімічних досліджень визначали поліморфні системи білків: постальбуміни; трансферини; гаптоглобуліни та ізоформи ензимів: каталази, пероксидази та супероксиддисмутази.
Генетичну частоту алелів поліморфних систем білків і ферментів сироватки крові визначали за формулою Харді-Вайнберга.
Генетична частота досліджених поліморфних систем білків і ферментів сироватки крові корів у різних стадах не однакова. Частота алеля А трансферинового локуса у корів менша, а алеля D більша на 0,11 одиниці (табл. 1). Корів-гомозигот із типом трансферину АО на 24,6 % і 35,4 %, відповідно більше, ніж гомозигот АА та ОО. Корів гетерозигот із типом трансферину АЕ та ОЕ - однакова кількість - 1,5 %, частота алеля Е - 0,01.
Вивченням постальбумінів та їх фенотипів виявлено, що у корів частота алелів А і В постальбумінового локуса не однакова, частота алеля В вища на 0,08 одиниці.
Табл. 1. Частота алелів та фенотипів досліджених поліморфних систем білків та ензимів сироватки крові піддослідних корів (п =65)
Фенотипи трансфеину |
Алелі трансферину |
|||||||
AA |
DD |
ЛБ |
ЛЕ |
БЕ |
||||
п |
п |
п |
п |
п |
Л |
Б |
Е |
|
% |
% |
% |
% |
% |
||||
18 |
11 |
34 |
1 |
1 |
0,55 |
0,44 |
0,01 |
|
27,7 |
16,9 |
52,3 |
1,5 |
1,5 |
||||
Фенотипи постальбуміну |
Алелі постальбуміну |
|||||||
AA |
AB |
ВВ |
- |
- |
Л |
В |
- |
|
9 |
42 |
14 |
- |
- |
0,46 |
0,54 |
- |
|
13,8 |
64,6 |
21,5 |
||||||
Фенотипи гаптоглобіну |
Алелі гаптоглобіну |
|||||||
АА |
АВ |
ВВ |
А |
В |
- |
|||
33 |
26 |
6 |
0,71 |
0,29 |
||||
50,8 |
40,0 |
9,2 |
||||||
Фенотипи каталази |
Алелі каталази |
|||||||
К-АА |
К-АВ |
- |
- |
- |
К-А |
К-В |
- |
|
52 |
13 |
0,9 |
0,1 |
|||||
80,0 |
20,0 |
репродуктивний корова поліморфний
За типами гаптоглобулінів корови-гомозиготи АА переважали гетерозигот АВ та гомозигот ВВ - на 41,6 %. Відповідно, і частота алеля А у корів становила 0,71, що більше, ніж алеля В на 0,42 одиниці.
У корів, тестованих за ізоформами ензиму каталази плазми крові, виявлено два фенотипи: одноалельний К-ВВ і двоалельний К-АВ. Частота фенотипу ВВ становила 80,0 %, ВВ - 20 %, а генетична частота алелів В і А становила, відповідно, 0,9 і 0,1.
Фенотипи ізоформ глютатіонпероксидази та супероксиддисмутази при їх поділі в ПААГ були мономорфні - характеризуються однією суцільною ізоформою та за характером візуальної оцінки нагадують фракцію альбуміну сироватки крові великої рогатої худоби - звичайно при його виявлені на фореграмі ПААГ (рис. 1, 2).
Рис. 1
Наведені дані (табл. 2) показників репродуктивної функції: тривалість тільності, час першого осіменіння після отелення, сервіс-період, індекс осіменіння; запліднюваність після першого осіменіння, народження близнят, а також коефіцієнти частоти захворювань і ускладнень під час отелення та після отелення корів свідчать про те, що репродуктивна здатність тварин, тестованих за поліморфними системами білків (ензимів) крові не однакова.
Табл. 2
Фенотипи поліморфних систем білків і ензимів |
Досліджувані показники |
|||||||
Трансферин |
||||||||
АА |
280,9+1,73 |
58,7+2,85 |
86,9+5,93 |
1,64+0,10 |
59,4 |
87,6 |
5,6 |
|
ББ |
279,2+1,65 |
66,4+3,23 |
99,4+5,29 |
1,82+0,09 |
51,1 |
82,2 |
- |
|
ЛБ |
282,3+0,88 |
61,3+2,41 |
95,7+3,81 |
1,83+0,06 |
49,1 |
83,0 |
- |
|
АЕ |
279,0+0,0 |
57,0+0,0 |
71,0+0,0 |
2,0+0,0 |
- |
100 |
- |
|
БЕ |
279,0+0,0 |
61,0+0,0 |
130,0+002 |
3,0+0,0 |
- |
100 |
- |
|
Постальбумін |
||||||||
АА |
278,9+ 1,61 |
66,6+4,07 |
99,4+6,7 |
1,67+0,1 |
53,9 |
84,0 |
- |
|
АВ |
280,9+0,99 |
60,5+1,76 |
93,3+3,19 |
1,83+0,06 |
42,2 |
83,9 |
2,4 |
|
ВВ |
283,7+1,10 |
63,2+4,87 |
97,9+7,17 |
1,81+0,10 |
50,9 |
83,7 |
- |
|
Гаптоглобулін |
||||||||
АА |
281,2+0,81 |
61,4+2,19 |
93,7+3,58 |
1,78+0,06 |
53,7 |
81,2 |
3,0 |
|
АВ |
281,2+1,55 |
64,7+2,62 |
100,9+4,53 |
1,88+0,08 |
45,5 |
87,0 |
- |
|
ВВ |
279,3+1,14 |
52,1+4,73 |
76,5+8,96 |
1,53+0,15 |
56,7 |
96,8 |
- |
|
Каталаза |
||||||||
К-АА |
280,8+0,69 |
62,8+1,81 |
96,4+2,97 |
1,80+0,05 |
51,3 |
84,3 |
1,92 |
|
К-АВ |
283,3+2,78 |
58,6+3,49 |
89,7+6,7 |
1,78+0,11 |
49,4 |
81,4 |
- |
У корів, тестованих за поліморфізмом ізоформ білків трансферину, постальбуміну, гаптоглобуліну та ензиму каталази тривалість тільності перебувала в межах фізіологічної норми та становила 279 -289 днів.
У корів гетерозигот АА за трансфериновим локусом показники репродуктивної функції були кращі, ніж у гомозигот ББ та гетерозигот АБ, відповідно перше осіменіння після отелення у них проводили на 7,7 та 2,6 дні швидше, сервіс період був менший на 12,5 та 8,8 днів, індекс осіменінь нижчий на 0,18: 0,19 одиниці, заплідненість вища на 5,4 %. Окрім того, у вищевказаної групи корів спостерігали високе число народження близнят - 5,6 %.
При проведені акушерсько-гінекологічної диспансеризації у корів з фенотипом трансферину АА в однієї тварини було виявлено затримання посліду та ендометрит, у гомозигот ББ - у двох корів післяродовий ендометрит та мастит, а у гетерозигот АО - дві корови мали затримання посліду та гнійно-катаральний ендометрит. У корови з фенотипом трансферину БЕ також виявлено ендометрит та дисфункцію яєчників.
Результати досліджень свідчать, що у корів тестованих за постальбуміновим локусом суттєвої різниці за показниками репродуктивної функції не виявлено, частота акушерсько- гінекологічних захворювань також була однаковою. У гетерозигот АВ встановлено народження близнят - 2,4 %.
Кращі результати репродуктивної здатності встановлено у корів гомозигот ВВ, тестованих за гаптоглобуліновим локусом. Так, перше осіменіння після отелення у них проводили швидше, у порівнянні з гомозиготами АА, на 9,3 дні та з гетерозиготами АВ - відповідно, сервіс-період у них був менший на 17,2 та 24,4 днів, індекс осіменінь нижчий на 0,25 і 0,35 одиниць, заплідненість вища - на 15,6 та 9,8%. Частота захворювань на акушерсько-гінекологічну патологію була вищою у корів гетерозигот з фенотипом гаптоглобуліну АВ на 7-12 %, у порівнянні з гомозиготами. У гомозигот АА спостерігали народження близнят.
У корів гомозигот та гетерозигот, тестованих за ізоформами каталази, суттєвої різниці за досліджуваними показниками репродуктивної функції не встановлено, народження близнят спостерігали у гомозигот К-АА.
ВИСНОВКИ
1. У корів, тестованих за поліморфними системами білків сироватки крові - гетерозигот АА за трансфериновим локусом показники репродуктивної функції були кращі, ніж у гомозигот DD та гетерозигот АБ, відповідно перше осіменіння після отелення у них проводили на 7,7 та 2,6 дні швидше, сервіс період був менший на 12,5 та 8,8 днів, індекс осіменінь нижчий на 0,18: 0,19 одиниці, заплідненість вища на 5,4 та 4,6%. Окрім того, у вищевказаної групи корів спостерігали народження близнят - 5,6 %.
2. Кращі результати репродуктивної здатності встановлено у корів гомозигот ВВ, тестованих за гаптоглобуліновим локусом. Так, перше осіменіння після отелення у них проводили швидше у порівнянні з гомозиготами АА на 9,3 дні та з гетерозиготами АВ на
12.6 дні, відповідно, сервіс-період у них був менший на 17,2 та 24,4 днів, індекс осіменінь нижчий на 0,25 і 0,35 одиниць, заплідненість вища - на 15,6 та 9,8%. Частота захворювань на акушерсько-гінекологічну патологію була вищою у корів гетерозигот з фенотипом гаптоглобуліну АВ на 7-12% у порівнянні з гомозиготами. У гомозигот АА спостерігали народження близнят.
3. Фенотипи ізоформ глютатіонпероксидази та супероксиддисмутази при їх поділі в ПААГ були мономорфні - характеризуються однією суцільною ізоформою. У корів гомозигот та гетерозигот, тестованих за ізоформами каталази, суттєвої різниці за досліджуваними показниками репродуктивної функції не встановлено, народження близнят спостерігали у гомозигот К-АА.
4. Отримані дані аналізу показників репродуктивної здатності корів з урахуванням поліморфних систем білків, ензимів сироватки крові свідчать про доцільність їх використання для ведення цілеспрямованої селекції з метою створення високорезистентного до акушерсько-гінекологічних захворювань молочного стада корів.
Перспективи досліджень. На перспективу планується проведення оцінки репродуктивної здатності стада корів з урахуванням зв'язку генеалогічної належності, досліджених поліморфних систем протеїнів, ензимів крові, лактоглобулінів та казеїнів молока, для встановлення об'єктивної тест-системи високої продуктивності та резистентності до акушерсько-гінекологічних захворювань у тварин.
Література
1. Ахметов Т. М. Использование методов маркервспомогательной селекции в молочном скотоводстве Республики Татарстан: дис. доктора биол. наук / Т. М. Ахметов. - Казань, 2009. - 277 с.
2. Генетичний компонент біорізноманіття великої рогатої худоби / Глазко Т. Т., Зубець М. В., Кушнир А. В. та ін. - Київ: КВИЦ, 2005. - 200 с.
3. Косенко М. В., Відтворення молочного поголів'я / Косенко М. В., Чухрій Б. М., Чайковська О. І. // НВФ «Українські технології». - 2005. - 228 с.
4. Репродуктивна функція і диспансеризація бугаїв / Косенко М. В., Чухрій Б. М., Коцюмбас І. Я. та ін. // НВФ «Українські технології». - 2007. - 186 с.
5. Копилов К. В. Комплексний аналіз тварин великої рогатої худоби білоголової української та української чорно-рябої молочної порід за різними ДНК-маркерами / Технологія виробництва і переробки продукції тваринництва // Копилов К. В., Копилова К. В., Арнаут К. О., Боярська А. В. - Біла Церква., 2010. - Вип. 2 (70). - С. 71-72.
6. Королюк М. А. Метод определения активности каталазы / М. А. Королюк , Л. И. Иванова, Майорова И.Г., В. Е. Токарев // Лаб. дело. - 1991. - № 12. - С. 9 - 10.
7. Созинов А. А. Полиморфизм белков и его значение в генетике и селекции. - М.: Наука, 1985. - 272 с.
8. Луценко М. М. Перспективні технології виробництва молока: Монографія / М. М. Луценко, В. В. Іванишин, В. І. Смоляр. - К.: Видавничий центр “Академія”, 2006. - 192 с.
9. Біотехнологічні і молекулярно-генетичні основи відтворення тварин // В. А. Яблонський, С. П. Хомин, В. І. Завірюха та ін. - Львів: Афіша, 2009 - 217 с.
10. Каплінський В. В. До методики визначення білкових макромолекул організму тварин у поліакриламідному гелі // Науково-технічний бюлетень Інституту біології тварин і Державного науково-дослідного контрольного інституту ветпрепаратів та кормових добавок. - 2014. - Вип. 15, № 2-3. - С. 282-286.
11. Каплінський В. В.. Репродуктивна здатність корів у зв'язку з генеалогічною належністю / В. В. Каплінський // НТБ ДНДКІ ветпрепаратів та кормових добавок і Інституту біології тварин. - 2016. - Вип. 17, № 2. - С. 251-254.
12. Холод В. М. Белки сыворотки крови в клинической и экспериментальной ветеринарии / В. М. Холод. - Минск: Ураджай. - 1983. - 77 с.
13. Чевари С. H. Определение антиоксидантних параметров крови и их диагностическое значение в пожилом возрасте / С. Н. Чевари, Т. А. Андян, Я. И. Штренгер // Лаб. дело. - 1991. - № 10. - С. 9-13.
14. Моим В. М. Простой и специфический метод определения глутатионпероксидазы в эритроцитах / В. М. Моим // Лаб. дело. - 1986. - № 12. - С.16 - 19.
15. Лабораторні методи досліджень у біології тваринництві та ветеринарній медицині: довідник / В. В. Влізло, Р. С. Федорук, І. Б. Ратич та ін.; За ред. В. В. Влізла. -- Львів: СПОЛОМ, 2012. - 764 с.
16. Плохинский Н. А. Биометрия. - М.: Изд-во Моск. гос. ун-та. - 1970. - 366 с.
17. Influence of Various Bio- Stimulants on the Biochemical and Hematological Parameters in Porcine Blood Plasma/ N. Karagodina, Y. Kolosov, A. Usatov [et al.] // World Applied Sciences Journal. - 2014. - No. 30. - Р. 723-726.
18. Beauchamp C. Superoxide dismutase: Improved assays and an assay applicable to acrylamide gels / Beauchamp C., Fridovich I. // Anal. Biochem. - 1971. - Vol. 44. - P. 276 - 287.
19. Misra Hara P., Fridovich I. Superoxide Dismutase and Peroxidase: A Positive Activity Stain Applicable to Polyacrylamide Gel Electropherograms // Archives оf Biochemistry аnd Biophysics - 1977. - 183. - P. 511-515.
20. Wodbury W. An improved procedure using ferricyanide for detecting catalase isozymes / Wodbury W., Spencer A. K., Stahmann M. A. // Analyt. Biochem. - 1971. - Vol.44, N1. - P. 301-305.
Размещено на Allbest.ru
Подобные документы
Основи ведення господарства та охорона праці. Молочна продуктивність корів. Фактори, які впливають на неї: тривалість сухостійного та сервіс-періоду у корів; морфологічні та функціональні властивості вим'я; вплив віку та живої маси при першому осіменінні.
курсовая работа [234,8 K], добавлен 01.12.2013Годівля корів у перші дні після отелення. Організація повноцінної годівлі дійних корів з використанням преміксів та балансуючих кормових добавок. Норми введення преміксів протягом виробничого циклу. Спосіб приготування комбікорму для молочних корів.
реферат [29,2 K], добавлен 03.11.2014Організаційні форми штучного осіменіння корів і телиць. Годівля великої рогатої худоби та свиней, добовий раціон для дійних корів. Вирощування ремонтного молодняку худоби та птиці. Економічні показники ефективності тваринництва. Утримання коней.
учебное пособие [351,0 K], добавлен 20.07.2011Продуктивні якості корів української чорно-рябої молочної породи. Характеристика господарсько-корисних ознак корів української чорно-рябої молочної породи. Технологічні особливості вим’я корів. Оцінка корів за придатністю їх до машинного доїння.
дипломная работа [68,5 K], добавлен 28.11.2010Забезпечення високої репродуктивної здатності корів і тривалого продуктивного використання як проблеми молочного скотарства. Зв’язок між продуктивністю, репродуктивною функцією, підвищення резистентності тварин до акушерських, гінекологічних захворювань.
статья [39,5 K], добавлен 18.08.2013Організація годівлі корів, корми, їх підготовка до згодовування, засоби роздавання. Водопостачання і поїння тварин. Доїння корів та обробка молока. Видалення гною на фермі. Вирощування ремонтного молодняку. Розрахунок потреби в кормах для поголів’я.
курсовая работа [69,8 K], добавлен 18.03.2014Технологія ведення м'ясного скотарства. Районовані породи великої рогатої худоби. Осемінення корів і телиць, визначення тільності. Приміщення для утримання худоби. Осемінення шприцом-катетером через піхвове дзеркала. Мано-цервікальний метод осемінення.
курсовая работа [41,1 K], добавлен 14.10.2010Поняття повноцінної годівлі тільних корів у сухостійний період, вплив цього фактору на їх фізіологічний стан та продуктивність. Зоотехнічні вимоги до якості кормів. Симптоми та профілактика отруєнь корів. Технологія заготівлі кормів, аналіз раціону.
курсовая работа [75,3 K], добавлен 23.11.2014Підготовка робочого місця, інструментів, приладів і самок до осіменіння, його час і кратність. Ректо-цервікальний або цервікальний спосіб осіменіння корів з ректальною фіксацією шийки матки. Осіменіння свиней фракційним способом. Штучне осіменіння птиці.
методичка [8,2 M], добавлен 24.04.2016Попереднє знайомство з твариною. Фізіологічні властивості шкіри. Дослідження серцево-судинної системи, дихання, органів травлення, сечової та нервової систем. Отримання сироватки крові. Визначення каротину в сироватці крові і його клінічне значення.
курсовая работа [42,9 K], добавлен 11.02.2013