Необходимо отметить сенсибилизацию организма антигенами гельминта и возникающие при этом аллергические реакции, развивающиеся в ответ на инвазию. Местное механическое повреждение тканей гельминтами само по себе не существенно, но продукты деструкции тканей хозяина ведут к развитию аутоаллергии. А, так как, тело гельминта и его секреты биологически активны, то они вступают в реакции с компонентами тканей животного, нарушают целостность клеток, образуют иммунные комплексы, привлекают к себе фагоцитов, прямо и косвенно воздействуют на нервные рецепторы, которые по цепочке мобилизуют всю нервную, а через нее н эндокринную систему, тесно связанные с кроветворными, иммунекомпетентными органами. Последние, таким образом, оказываются под непосредственным и косвенным влиянием аллергенов гельминта и разрушенных ими тканей хозяина. В процессе дегельминтизации аллергическое состояние животных повышается за пределы гиперэргии как продуктами распавшегося гельминта, так и самим антигельминтиком, развивается перенапряжение и даже истощение компенсаторных и приспособительных механизмов, что ведет к снижению сопротивляемости организма.

Для гельминтов характерна многофакторность иммунного ответа и одновременное участие в нем как клеточных, так и гуморальных механизмов. Подтверждено это при фасциолезе в опытах на крысах-донорах, которым вводили одновременно сыворотку или лимфоидные клетки иммунных доноров, при этом действие клеточного иммунитета проявлялось позднее, чем гуморального (Филиппов, 1988) [33].

Гельминты имеют не только множество собственных различных антигенов и их вариантов, но и свою иммунную систему, направленную на подавление сопротивления к нему хозяина.

Развитию паразита в организме хозяина способствует такой феномен, как иммунологическая индукция. Она заключается в способности гельминтов изменять процесс синтеза белка в зависимости от особенностей протеиногенеза у промежуточного и окончательного хозяев с образованием общих белковых антигенов (Structural antigenique..., 1968).

Явления молекулярной мимикрии и иммунологической индукции позволяют считать, что полиморфизм белков организма хозяина должен играть существенную роль в эволюции системы хозяин - паразит, а, следовательно, и оказывать влияние па основные патогенетические механизмы при гельминтозах (Озерецковская, 1975). Выявлена способность тканевых гельминтов выделять иммунодепрессивные вещества, способствующие развитию паразита в организме хозяина [37].

Таким образом, у паразита развиваются определенные свойства, позволяющие ослабить защитные реакции хозяина. К ним относится имитирование антигенов хозяина (молекулярная мимикрия), способность к быстрому изменению антигенов, опережающее развитие эффекторных механизмов иммунной системы, выделение иммунодепрессивных факторов, явление нммунологической индукции, задержка передачи информации об антигенах иммуно-компегептным клеткам блокирующими антителами или электростатическим и барьерами.

Эти специфические особенности объясняют тот факт, что иммунитет при гельминтозах бывает, как правило, неярко выражен, он характеризуется слабым напряжением и кратковременным действием.

J.K. Dineen (1963); R.T. Damian (1964) предложили гипотезу о приобретении в процессе эволюции толерантности на основе уподобления антигенов паразита химическим структурам тканей хозяина: такие паразиты, с «замаскированными» антигенами, естественно, не вызывают иммунологических реакций и поэтому недосягаемы для защитных мер (антител) хозяина [38,39].

Известно, что под действием некоторых лекарственных препаратов угнетается ряд гуморальных и клеточных показателей резистентности и специфического иммунитета после вакцинации при инфекционных болезнях. Также известно иммунодепрессивное действие медикаментозных средств (Ковальчук, 1980), в частности, антибиотиков (Карпуть, 1976) [40, 41].

По данным Э.Х. Даугалиевой (1989) урсовермит снижает иммунный статус животных, поэтому необходимо избегать частых дегельминтизаций, т.к. эти дегельминтизации не дают нужного профнлакгического эффекта в связи с тем, что в последующем увеличивается восприимчивость животных к заражению [42].

О.И. Мамыкова (1988) в опытах на белых мышах установила, что дегельминтизация ивомеком вызывает супрессию Т- и В-лимфоцитов, снижение Ig G-антител, при одновременном увеличении сывороточных иммуноглобулинов Ig М-класса, персистенцню высоких концентраций иммунных комплексов [43].

Химиотерапевтическое вмешательство в патологический процесс при паразитарных болезнях даже при высокой эффективности лечения способствует иммунологическим сдвигам (Озерецковская, 1975; 1987) [44].

Дегельминтизация коров альбамелином при фасциолезе (Абрамов, 2000) вызывает незначительные колебания в гематологической картине в день применения препарата и через 5 суток; к 10 суткам количество эритроцитов и лейкоцитов восстанавливается, эозинофилия отмечалась до 5 суток [1].

Применение коровам вермитана при фасциолезе (Кольцов, 2002) в рекомендуемых дозах вызывает незначительное снижение а-глобулинов сыворотки крови (до 11%) на фоне увеличения у-глобулиновой фракции (до 42%) на 5-й день дачи препарата [29].

Поэтому антгельминтные препараты, кроме того, что должны быть высокоэффективными, дешевыми и малотоксичными, должны быть с иммуностимулирующим эффектом. Необходимо определять влияние антгельминтиков на физиологические, биохимические процессы в органах и тканях, а также на иммунобиологические показатели, характеризующие состояние иммунной системы организма.

1.10 Обзор антгельминтиков, используемых при терапии фасциолеза

Одной из основных мер борьбы с фасциолезом является дегельминтизация животных, которая широко применяется как с лечебной, так и профилактической целью. От наличия достаточного ассортимента высокоэффективных и малотоксичных средств борьбы с гельминтозами во многом зависит успех профилактики фасциолеза животных (Филиппов, 1981).

Ниже представлен обзор препаратов, предложенных для борьбы с фасциолезом у крупного рогатого скота.

Четыреххлорисгый углерод: Предложен R.F. Monlgomerie (1929) для терапии животных при фасциолезе. Ш.А. Азимов (1970) применял четыреххлористый углерод в смеси с перекаленным хлопковым маслом, экстенсэффективность при фасциолезе крупного рогатого скота составила 82,1%. Хорошие результаты применения четыреххлористого углерода получены Б.Г. Гариевым (1984); А.Л. Сапуновым, Б.Л. Гаркави, Ю.И. Щербаха (1986) [46, 47, 48].

В настоящее время четыреххлористый углевод не применяется из-за высокой токсичности (Истамов, 1970) и наличия других эффективных менее токсичных препаратов.

Гексихол (гетол, хлоксил): лекарственная форма гексахлорпараксилола за счет более тонкого измельчения и добавления до 1% поверхностно-активных веществ.

В нашей стране впервые определили эффективность гетола при фасциолезе мелкого и крупного рогатого скота Н.В. Демидов, B.C. Кривоносой, B.C. Штольба (1962), успешно применяли этот препарат при фасциолезе Е.Ш. Шакиев, A.M. Солдатченко (1984) [50, 51].

Тератогенное, эмбриотоксическое и мутагенное действие гексихола изучала Л.И. Хрусталева (1985), на основании ее данных реализацию мяса и молока от дегельминтизированных гексихолом животных можно проводить практически без ограничений [52].

СИ. Мамержанов, Л.Е. Енин (1986) установили экстенсэффективность гексихола при фасциолезе крупного рогатого скота после однократной обработки 68%, а при условии повторной обработки через 30 дней неосвободившихся от фасциол животных - 100% [53].

Восстановительные процессы в организме животных после дегельминтизации гексихолом изучала И.Б. Сорокина [11].

По данным И.А. Архипова (1998) гексихол в дозе 0,3г/кг для крупного рогатого скота показал 93-98% эффективность при фасциолезе [54].

После первой дегельминтизации гексихолом освобождается от фасциол 96,5% крупного рогатого скота, после второй - 100%.

В.В. Кузьмичев (1998) изучал влияние дегельминтизации с использованием гексихола на микрофлору печени и кишечника. После применения гексихола в печени постепенно снижается количество бактерий, а в кишечнике уменьшается количество протея и клостридий при одновременном увеличении лактобацилл, непатогенных кокковых форм и кишечных палочек, к 150 дню после дегельминтизации все еще сохраняется дисбактериоз кишечника [55].

Гексихол С (политрем): является лекарственной формой 1,4-бис-трихлорметилбензола. Разработан в ВИГИСе за счет внесения в технолошческий процесс сульфата натрия. Доза политрема для крупного рогатого скота составляет при фасциолезе 0,2 г/кг. Положительными свойствами политрема являются широкий спектр трематоцидного действия, возможность применения на беременных животных, отсутствие выраженных побочных эффектов. Восстановительные процессы в печени после дегельминтизации животных гексихолом С изучала Е.П.Чарыева (1988). М.В. Дорошина (1989) изучала параметры острой и хронической токсичности гексихола С [56, 57].

Гексихол С обладает более высокой фасциолоцидной активностью в отношении половозрелых фасциол, чем гексихол. Гексихол С в дозе 0,3 г/кг массы, примененный коровам симментальской породы с концентрированным кормом однократно, показал экстенеэффектнвность 93,3%, интенеэффективность 93,5% [58].

М.В. Глухова (1994); М.В. Глухова, Т.П. Веселова (1995) рекомендуют применять селенит натрия в дозе 100 мкг/кг массы тела, как надежное специфическое терапевтическое средство при токсикозах, возникающих после применения фасциолоцидов, в частности политрема и гексихола.

Е.П. Чарыева, Т.П. Веселова (1992) после лечения полнтрсмом рекомендуют применять поливитамины (витакол) [56].

Куприхол: представляет собой новую лекарственную форму гексахлорпараксилола с внесением фталцианина меди.

И.А. Архипов, ТЛ. Веселова, М.Б. Мусаев (1995) установили, что при фасциолезе крупного рогатого скота интенеэффективность куприхола в дозе 0,15 г/кг составляет 85,6 и 80,0% (по данным 2 опытов). Те же авторы получили 94,7% эффективность куприхола в дозе 0,2 г/кг при фасциолезе крупного рогатого скота [57].

A.M. Биттиров (1999) рекомендует для лечения смешанной инвазии у крупного рогатого скота (в том числе и фасциолез) применять брикеты-лизунцы «Полиант-менэл» на бентонитовой основе, их экстенсэффективность составляет 58,2-66,8% при интенсэффективности 74,5-81,3% [61].

Тетраксихол: создан на основе парабистрихлорметилбензола в комбинации с производными дифенилсульфидов.

По данным И.А. Архипова (1998) тетраксихол в дозе 0,2 г/кг проявил 97-98% эффективность при фасциолезе крупного рогатого скота. Тетраксихол не влияет на репродуктивную систему животных и может применяться беременным. Из организма животных он выделяется в течение 7-16 дней [54].

Поданным Д.Н. Шемякова (1999) тетракснхол при фасциолезе крупного рогатого скота в дозе 0,2 г/кг оказывает 97,4% эффективность. Тетраксихол можно применять групповым методом с кормом, в терапевтических дозах на клинико-гематологические показатели животных не влияет. Однако препарат на неполовозрелых фасциол обладает недостаточным действием [62].

Антитрем: создан стерлитамакским заводом «Каустик» совместно с ИИ «Синтез» на основе парабистрихлорметилбензола с добавлением новых компонентов. И.А. Архипов, Н.М. Меланич, Н.И. Кошеваров (2001) испытали данный препарат и установили, что эффективность антитрема против фасциол в дозе 0,2 г/кг составляет 94,38%, в дозе 0,3 г/кг - 99,79% и в дозе 0,4 г/кг -100%. При этом авторы рекомендуют дозу препарата 0,2 г/кг как терапевтическую [54].

Битионол (актопер, битин, левацид): представляет собой 2,2-дигид-рокси-3,3,5,5тетрахлордифенил сул ьфид.

В опытах Н. Ueno, S. Watanabe, Y. Fujita (1960) битин оказался эффективным при фасциолезе.

J. Horak (1965) отмечал, что битионол в дозе 100 мг/кг оказал 100% эффект против 21дневных трематод крупного рогатого скота [63].

Битионол был ресинтезирован в ВИГИСе и испытан при фасциолезе А.Е. Журавцом (1968). В.И. Ткач (1968) изучил влияние битионола на двигательную активность фасциол. М.В. Дорошина, Л.И. Хрусталева, Э.А. Брагина (1987) изучали эмбриотоксическое и тератогенное действие битионола. Подтверждают высокую фасциолоцидную активность битионола Х.В. Аюпова, Г.З. Хазиева (1974); Р.Т. Сафиуллина, А.С. Вечеркина (1997) [64, 65, 66, 67].

Сульфен (сульфоксид): в химическом отношении представляет собой 2"2'-диокси3'3\5,5 -тетрахлордифенил сульфоксид.

Ж.Г. Райхер (1974) установил терапевтическую дозу сульфена 0,05 г/кг при фасциолезе крупного рогатого скота, в смеси с кормом, однократно, при этом экстенсэффективность сульфена составила 93,4 - 100%, а интенсэффективность 99,66 - 100%.

Фасциолоцидные свойства сульфоксида и его кинетический обмен в организме животных изучал И.Л. Бабонас (1975). [64].

По данным М.А. Белоусова (1976) сульфен не обладает кумулятивным и аллергенным действием, оказывает тормозящее действие на антитоксическую функцию печени. Введенный перорально в терапевтических дозах крупному рогатому скоту (50 мг/кг) не вызывает токсического действия [65].

Сульфен высокоэффективен при фасциолезе крупного рогатого скота в дозе 50-100 мг/кг, не вызывает осложнений у дойных коров (Демидов, 1977; 1978). Использование препарата в комплексе мер борьбы с фасциолезом крупного рогатого скота в Калининградской области показало, что его эффективность равна 99,8% [50].

Днамфенетид (корибан, дифеннд, ацемидофен, ацетпикол): представляет 2,2бис(р-ацегиламинофенокси) диэтилэфир.

S. Dickerson, М. Hareenest, Р.А. Kingsbury (1971) впервые установили фасциолоцидный эффект диамфенетида. Авторами установлена 85-100% эффективность препарата в дозе 80-100 мг/кг против 1-6-недельных фасциол, а в дозе 80-120 мг/кг 85-95%ная активность против 8-недельных фасциол.

По данным J.C. Wood (1971) эффективность корибана в дозе 10 мг/кг по ДВ была равной 100% против 1-3-недельных фасциол, 99,3% против 5-недельных, 86,0% против 7недельных и 65% против 10-недельных фасциол.

С высоким антгельминтным эффектом применял диамфеннтид J.Whitehead (1976).

Диамфенетид был ресинтезирован в нашей стране в ВИГИСе под названием ацемидофен (в настоящее время не производится) и в ВГНКИ под названием дифенид. Высокую эффективность ацимидофсна при фасциолезе подтверждают АЛО. Вишняускас, Е.Н. Василевич (1983) [72].

И.А. Нисенбаум (1985) установил, что после лечения ацемидофеном в печени происходит постепенное ослабление регрессивных изменений, вызванных острым миграционным фасциолезом, отмечаются заживление травматических повреждении, уменьшение клеточной реакции и соединительнотканных разрастаний, нормализация гистохимических сдвигов, появляются фолликул оподобные образования [73].

Гепатотропное влияние ацемидофена установили Х.Г. Нурхаметов, В.Н. Байматов, Г.Р. Шакпрова (1992) [74].

А.Ю. Вишняускас, K.Ю. Бараускас, А.А. Вишняускас (1988) установили, что aцидoфeн при однократном введении в дозе 40 мг/кг не проявляет фасциолоцидной активности, но длительное ежедневное назначение его в таких дозах показало высокую эффективность [75].

По данным В.В. Кузьмичева (1998) после дегельминтизации животных ацемидофеном резко снижается активность кишечных ферментов (энтерокиназы и щелочной фосфотазы), их уровень приходит в норму только к 60-150 дню после проведенного лечения [55].

Ацетвикол показал высокую эффективность при фасциолезе в дозе 150 /кг массы животного [76].

Билевон предложен при фасциолезе K.L. Kuttler, N.J. Mattews, D.W. Marble (1963). Испытан билевенол при фасциолезе в разных странах (Badania nad trapia..., 1964). Препарат в дозе 4 мг/кг по ДВ оказал высокий фасциолоцидный эффект. Высокую эффективность бнлевона при фасциолезе подтвердил К. Исмаилов (1973) [77, 78].

В.К. Чернуха, В.П. Ревуцкий (1984) установили, что наиболее эффективным антгельмннтиком при фасциолезе крупного рогатого скота в сравнении с гексахлорпараксилолом оказался венгерский препарат дертил Б. По данным эксперимента, его экстенеэффективность составила 100%, гексахлор параксилола - 90%. Интенеэффективность дертила также была значительно выше. При применении указанных препаратов в производственных условиях показатели экстенеэффективности дертила Б были несколько ниже и колебались в пределах 97,5-100%. Лечебное действие гексахлорпараксилола проявлялось у 93% дегельминтизированных животных, а у части больных сохранялась фасциолезная инвазия при относительно высокой ее интенсивности (два-три яйца в кале пробы) [79].

Высокую эффективность дертила при фасциолезе подтверждает А.Ю. Вишняускас (1987) [72].

В.Г. Москалев, М.Ш. Акбаев (1989) сравнили эффективность различных лекарственных форм дертила Б. Экстенеэффективность дертила Б в форме таблеток в дозе 3 мг/кг (задавали на корень языка) составила 66,7-96,0%, а в дозе 4,5 мг/кг в виде водной суспензии - 95,8%, в смеси с комбикормом 91,7%. Исходя из полученных результатов, авторы рекомендуют для применения в условиях Нечерноземья (при хроническом фасциолезе) дертил Б в дозе 4,5 мг/ кг массы тела в измельченном виде с комбикормом [80].

Многолетние исследования показали, что после первой обработки дертилом Б освобождаются от фасциол только 75% животных, после второй -94,6% и лишь после третьей дегельминтизации достигается 100%-ная эфективность (Особенности эпизоотологии..., 1989).

Ниттроксинил (довеникс, тродакс, фасциолид, днемносикс): в химическом отношении представляет собой - 4-окси-3-йод-5-ннтробешотрил.

Впервые о фасциолоцидном действии нитроксинила в дозе 8 мг/кг сообщали М. Davis (1966); М. Davis, J. Rosenbaum, D.E. Wiigh (1969). [81].

Эффективность нитроксинила при фасциолезе установлена также в опытах Y.M. Lucas (1967); С. Chirol, R. Demeure, М. Desmoulins (1969). По мнению этих авторов эффект препарата повышается с увеличением его дозы, а также с возрастом фасциол. Ннтрокснкнл показал 100% эффективность против 6 и 10-недельных фасциол в дозе соответственно 20 и 10 мг/кг.

J. Reuss (1971) применял довеникс для лечения фасциолеза крупного рогатого скота в дозе 10 мг/кг. При этом у животных, подвергавшихся двукратному лечению, доля выделявших яйца фасциол снизилась с 76, 4 до 4,8%, а среди однократно леченых коров с 88,9 до 11,1%. Лечение довениксом лактирующих коров вызывало через один день после аппликации снижение удоя примерно на 1 л. [82].

Применение нитроксинила не оказывает отрицательное влияние на физиологическое состояние животных в период беременности. Использовать молоко от дегельминтизированных животных в течение трех дней или направлять их на убой ранее 30дневного срока не.

Высокую антгельминтную эффективность нитроксинила подтвердили в своих исследованиях W. Foreyt, A. Todd (1976).

Е.Б. Бакина, С.Н. Белозеров (1999) применяли дисмиоксис для лечения фасциолеза крупного рогатого скота в дозе 0,8 мл/25 кг массы (это на 0,2 мл ниже рекомендуемой по инструкции дозы), подкожно. При этом экстенеэффективность препарата составила 100%.

Установлено, что экстенсэффективность дисмиоксиса (10мг/кг массы тепа по действующему веществу подкожно, однократно) составляет 89,9%.

Занил (оксиклозанид, диплин, метилин, салинид, дистодин, залинокс): 3,3,3,5,6петахлор-2-гидроксисалициаланилид оказался эффективным при фасциолезе, о чем сообщал W.H. Jones (1966). Им испытан препарат в дозе 10-20 мг/кг и получен 100%-ный эффект при фасциолезе [84].

Высокая эффективность заняла в дозе 15 мг/кг при фасциолезе жвачных животных получена Р.Н. Kelsey (1966); J.K. Walley (1966); G. Froyd (1968). Отмечено, что с возрастом фасциол активность занила повышается. Следует отметить то, что препарат быстро выделяется из организма леченых животных, а в молоке коров уже через 2 дня после лечения препарат не обнаруживается.

Ж.Г. Райхер (1974) установил, что занил в форме суспензии в дозе 30 мл/100кг живого веса, но не более 100 мл на животное при фасциолезе крупного рогатого скота экстенсэффективен на 93,3% и интенсэффсктивен на 99,64%.

В опытах получена 99-100% эффективность оксиклозанида (Effectivitad dedas..., 1981). [85].

В дозе 12,5 мг/кг занил на крупном рогатом скоте проявил фасциолоцидный эффект на уровне 70% интенеэффективности (Рудайтис, 1983). [86].

Занил под названием салинид был ресинтезирован в ВИГИСе. Д.А.Пакятурене (1989) установила терапевтическую дозу салинида при хроническом фасциолезе крупного рогатого скота 15 мг/кг живого веса. При этом интенсэффективность составляет 99%.

Рафоксаинд (рапид, флуканид, дисалан, урсовермит, дисалар, афасцил): 3,5дийодо-3'-хлор-4'-(п-хлорфенокси)-салициланилид.

Впервые был предложен и испытан при фасциолезе П. Mrozik. В опытах рафоксанид оказывал 99%-ный эффект на взрослых фасциол в дозе 7,5 мг/кг живой массы тела. С уменьшением возраста снижается эффективность препарата, в такой же дозе 4-недельные гельминты погибали на 50%, а 6-недельныс на 90%.

Высокая эффективность рафоксанида при фасциолезе была получена в опытах J.

Guilhon, G. Jolivet, R.L. Caillier (1970) [87].

Рафоксанид был ресинтезирован в нашей стране Л.П. Хитенковой, В.Б. Писковым, В.Ш. Полуэктовым (1976). Против взрослых фасциол эффективность препарата в дозе 15 мг/кг составила 100% [88].

А.В. Поникаров (1989); Ю. Анакина (1995) рекомендуют для борьбы с фасциолезом крупного рогатого скота использовать дисалаи. Он предложен для применения в форме суспензии, болюсов, лечебных кормосмесей, растворов. Как при пероральном. так и при внутримышечном введении растворы дисалана значительно эффективнее суспензий. Более чем 90% фасциол уничтожается при введении 2,5 мг на 1 кг живой массы 5%-ного раствора дисалана или 10 мг/кг 5% суспензии.

По данным Ю.Ф. Петрова (1991) дегельминтизация животных в хронической стадии болезни (на 90-120 сутки инвазии) с помощью дисалана хотя и вызывает улучшение функций органов эндокринной системы, но они до нормы практически не восстанавливаются. Поэтому у переболевших животных продуктивность остается низкой, они теряют племенные качества.

В последние годы новую лекарственную форму рафоксанида - дисалар (инъекционный раствор) подробно изучил и внедрил в ветеринарную практику страны А.С. Пушкарей (1998; 1999). По данным этого автора дисалар в дозе 2,5 мг/кг по действующему веществу показал 98-100% эффект против имагинальных фасциол.

По данным И.В. Кольцова (2002) эффективность дисалара в дозе 2,5 мг/ кг массы тела по действующе^ веществу составила 100%. Введение дисалара приводит к увеличению содержания у-глобулинов к 10 дню (до 45%) на фоне стабильно низкого количества аглобулинов (на 2-3% ниже нормы). Введение коровам диеалара в рекомендуемых дозах приводит к профессирующему снижению к 10 дню титруемой кислотности молока на 1,7°Т.

А.С. Пушкарев (1999) установил, что эффективность дисалара при фасциолезе крупного рогатого скота составляет 92-98,5%. Однако препарат снижает иммунобиологическую реактивность организма в течение 10 дней с последующим ее повышением [90].

По данным В.Н. Савельева (1981) высокой фаецнолоцидной активностью обладают рафоксанид в дозе 10 мг/кг, дертил из расчета 3 мг/кг и дисалан в дозе 10-15 мг/кг. Экстенеэффективность их составила 80%, интенеэффективность соответственно 98,2%, 99,7% и 99,2%.

По данным Д.А. Азимова, ЕЛИ. Шакнева, М.К. Кожабаева (1991) экстенсэффективность урсовермита при фасциолезе составляет 90%, а интенеэффективность 93,7%.

А.Х. Волков, Р.Т. Сафиуллин (2000) определяли эффективность урсовермита при фасциолезе. Экстенеэффективность урсовермита (7,5 мг/кг внутрь однократно) составила 90% [31].

С.В. Березкина, Т.Д. Черкасова, В.А. Юркин (2004) рекомендуют использовать афасцил против половозрелых фасциол в дозе 1 мл/40 кг (2,5 мг/кг по ДВ), против неполовозрелых фасциол в дозе 1 ыл/20 кг (5,0 мг/кг по действующему веществу) массы тела, но не более 5 мл в одно место. В рекомендуемых дозах афасцил не обладает эмбриотоксическими, тератогенными, иммунотоксическимп и аллергенными свойствами. Убой на мясо крупного рогатого скота и использование молока разрешается не ранее, чем через 20 дней после лечения [31].

К.А. Хромов (2005) установил 100% эффективность афасцила против фасциол крупного рогатого скота в дозе 2,5 мг/кг по действующему веществу подкожно однократно.

Клозантел (роленол, фасковерм, флукивер, клосантел, клозантекс, сан тел): N-5хлор-4-(4-хлорфенил) цианометил-2-метилфенил-2-гндрокси-3,5-дн йодобензамид.

Н. Van-Canteren, J. Vanderbergc (1985) в своих исследованиях при первичной оценке переносимости клозантела у крупного рогатого скота, овец и коз в дозах 5-30 мг/кг подкожно, внутримышечно и через рот наблюдали припухлость в месте введения при внутримышечном и подкожном введении и кашель у овец при введении через рот, серьезных побочных реакций не наблюдали. Также была научена острая и подострая токсичность клозантела при назначении крупному рогатохгу скоту и овцам при различных путях введения. При введении препарат в дозах 40 и 35 мг/кг внутримышечно однократно отмечали гибель животных. По данным этих же авторов при пероральном введении клозантела в дозе 82,5 мг/кг не была токсична для крупного рогатого скота, а доза 70 мг/кг привела к смерти двух из трех овец. При вскрытии у животных было обнаружено набухание эпидермиса, но значительных аномалий не наблюдали.

Полностью уничтожила половозрелых фасциол у коров инъекция клозантела однократно подкожно в дозе 2,5 мг/кг в опытах [91].

Е.Б. Бакина, С.Н. Белозеров (1999) применяли роленол в дозе 0,4 мл/10 кг массы тела животных однократно (это на 0,1 мл меньше инструктивной дозы) для крупного рогатого скота против фасциолеза. При этом экстенесффективноегь роленола составила 96-100% [83].

Экстенсэффективность роленола в дозе 0,5 мл на 10 кг массы тела, внутримышечно составляет 71% (Эпизоотология фасциолеза..., 2000).

Фасковерм обладает эффективностью при подкожном и внутримышечном введении в дозе 2,5 мг/кг при фасциолезе крупного рогатого скота (Act-ividad antmelmmtica..., 1983).

А.И. Ятусевич (1991) при испытании фасковерма на крупном рогатом скоте, спонтанно зараженном фасциолами, получил 97-99%-ную эффективность [92].

В.Г. Москалев, М.Ш. Акбаев (1989) показали экстенсэффективность фасковерма 91,7%, доза фасковерма 2,5 мг/кг массы тела животного [80].

Эффективность против фасциол крупного рогатого скота фасковерма в виде болюсов в дозе 5 мг/кг составляет 98,1%. Из 25 леченых животных 22 полностью освободились от трематод. Мясо и молоко от леченных животных можно использовать в пищу, соответственно, через 28 и 14 дней после введения фасковерма. Препарат хорошо переносится животными и в терапевтических дозах безопасен даже беременным (Фасковерм в виде..., 1998).

Эффективность фасковерма (Особенности эпизоотического..., 1989) высока. Так, после первой дегельминтизации данным препаратом освобождаются от фасциол 98-99,5% крупного рогатого скота, после второй - 100%.

Сантел в дозе 5 мг/кг внутримышечно и перорально обеспечивает 99,2-99,5%-ную эффективность при фасциолезе крупного рогатого скота (Спектр противопаразитарного..., 1998).

Р.Т. Сафиуллин, Н. Бурмистров, А.Х. Волков (1999) в опытах показали, что при фасциолезе крупного рогатого скота сантел 10%-ный в дозе по действующему веществу 5мг/кг внутримышечно однократно обеспечивает 100%-ную экстенеэффективность, в производственных же условиях экстенсэффективиость саптела при фасциолезе равнялась 97,62% [9].

Аверзантел и Авсрсект плюс: действующим веществом данных препаратов является природный авермектиновый комплекс, полученный на основе продуктов жизнедеятельности почвенного гриба Streptomyces avermitilis. B.C. Зубков (2002) при изучении эффективности аверзантела и аверсект плюс при фасциолезе крупного рогатого скота установил, что более удобен в применении аверсект плюс (введение перорально), для него показана эффектвная минимальная доза 28 мг/кг перорально, однократно, при этом экстенеэффективность составила 100%. Эффективная минимальная доза для аверзантела сосоставила 0,03 мг/кг подкожно, однократно, при этом экстенеэффективность была также 100% [93].

Также препараты аверзантсл и аверсект плюс оказались эффективными при микстинвазиях (фасциолез - стронтилятозы пищеварительного тракта) экстенеэффективность - 100%.

Тегалид: представляет собой 3,5-дибром-3-(4-хлорбензонл)-4-хлорсалициланилид, был синтезирован в ИМПиТМ им. Марциновского.

Тегалид в дозе 20 и 30 мг/кг массы тела при индивидуальной однократной даче вовнутрь в виде суспензии вызывает изгнание 100% половозрелых фасциол. При групповом применении в смеси с кормом в дозе 30 мг/кг экстенеэффективность тегалида составляет 93,4% при иитенеэффективности -99,7% (Токсикологическая оценка..., 1986).

И.Б. Сорокина, А.В. Шорыгин, А.Ю. Большакова (1991) установили 100% эффективность мелкодисперсного тегалида в дозах 12,5 и 20 мг/кг [40].

Триклабендазол (фазинекс): 2,3-дихлорфенокси-2-метилтиобензими дазол при испытании на крупном рогатом скоте показал фасциолоцидный эффект (Chemoprophylaxic of fasc'ioliasis..., 1981). Фазинекс в дозе 5 мг/кг проявил 91, 98 и 100%-ный эффект, соответственно, против 4, 8 и 12-недельных фасциол, а в дозе 10 мг/кг 75, 95 и 100%-ную эффективность, соответственно, против 1,4 и 6- недельных фасциол.

Т.М. Graig, R. Hucy (1984) установили 100%-ную эффективность триклабендазола в дозе 0,006 и 0,012 г/кг против фасциол у крупного рогатого.

Фазинекс в дозе 10 мг/кг массы животного при подостром течении фасциолеза обеспечил 100%-ную эффективность, при острой форме интенеэффективность равнялась 99,92%, а экстенеэффективность - 87,03%. Фазинекс в дозе 5 мг/кг массы животного при хронической форме фасциолеза был эффективен на 98%. В настоящее время фирмапроизводитель пересмотрела дозировку антгельминтика и рекомендует при хроническом течении заболевания применять его в дозе 10 мг/кг живой массы; Фазинекс в. дозе 12 мг/кг массы животного, при хроническом течении фасциолеза крупного рогатого скота проявил эффективность 92,8-100%. Слабые животные хорошо переносили фазинекс. который не вызывал осложнений (Эффективность фазинекса..., 1986). Экстенсэффективность триклабендазола в форме 10%-ного гранулята фазинекса в дозе 0,006 г/кг (по действующему веществу) при хроническом фасциолезе молодняка крупного рогатого скота составила 92,9% (Применение фазинекса..., 1987).

Но данным A.M. Атаепа (1990) экстенсэффективность фазинекса в дозе 10 мг/кг живой массы при остром фасциолезе составила 94%, при хроническом фасциолезе - до 97%.

По данным R.M. Waruiru, Е.Н. Weda (1994) препарат вызывал 95,9 -- 100%-ное снижение количество яиц гельминтов в фекалиях коров естественно инвазированных фасциолами.

Снижение периода между обработками повышает эффективность борьбы с фасциолезом (Kinelics off egg..., 1999). Достичь 100% и 85,7%-ную экстенсэффективность можно в том случае, если применять триклабендазол с периодичностью 56 дней и через 112 дней, соответственно.

По данным И.А. Архипова, М.Б. Мусаева (2004) против молодых фасциол триклабендазол эффективен в дозе 5,0 мг/кг, а против взрослых в дозе 12,0 мг/кт.

А. Вильявиченко (2006) изучил эффективность 3 препаратов против фасциолеза крупного рогатого скота: триклабендазол в дозе 12 мл/кг живой массы, однократно перорально; рикобендазол в форме 15% раствора в дозе 1 мл/40 кг живой массы, внутримышечно; альбендазол в форме 10% раствора в дозе 10 мл/100 кг живой массы, внутримышечно. Экстенсэффективность триклабендазола составила 80%, рикобендазола - 40% и альбендазола - 10%.

Люксабендлзол: представляет собой 5,4-флуорфенилсульфбензимидазол-2-карбамат.

Люксабендазол в дозе 10 мг/кг показал 95,2 и 95,0%-ную эффективность, соответственно, против молодых и взрослых фасциол (Efficacy of luxabendazoli..., 1987).

Альбендазол (валбазен, альбамелнп, альбамел, альбедазен 10%, альбен, альвет, вермитан, синвермин, агазол): представляет собой 5-пропил-тио-1 -бензимидазол-2карбамат.

Альбендазол в дозе 10 мг/кг показал 93-100%-ныЙ эффект при фасциолезе крупного рогатого скота (Anthelmintic activity..., 1976).

Но препарат не рекомендуется применять лакгирующим коровам; молоко которых используется в пищу людям, а мясо не используют в пищу в течение 14 дней после лечения животных. Вследствие наличия у препарата эм-бриогропных свойств он не рекомендуется для применения животным в период беременности (Theodorides, 1977).

Есть сообщения, что в дозе 15 мг/кг препарат обладает недостаточной эффективностью при фасциолезе крупного рогатого скота, и она составила только 54% (Herlich, VJ. Theodorides, J.E. Freeman (1980) получили хороший анттельминтный эффект от применения альбендазола в дозе 5-10 мг/кг, в том числе и против фасциолеза крупного рогатого скота [94].

По данным R.E. Bradley, W.F. Randell, D.A. Armstrong (1981) даже при повышении дозы до 75 мг/кг ныв не было получено должного эффекта при фасциолезе крупного рогатого скота.

Т.С. Новик (1992) изучала способы снижения эмбриотоксического, тератогенного и антимитотического действия альбендазола.

В ВИГИСе была создана новая микрокапсулированная форма альбендазола, не обладающая эмбрнотропным действием, которая при испытании в дозе 7,5 мг/кг оказала выраженное фасциолоцидное действие (Архипов, Шемяков, 1999).

B.C. Зубков (2002) установил эффективность альбендазола при фасциолезной инвазии 33,3%.

Альвет (20%-ный гранулят) в дозе 10 мг/кг по действующему веществу однократно с кормом показал ингенеэффективность 95,63% при экстенеэффективпости 86,7% (Препараты альбеидазола..., 2004).

В.Е. Абрамов (2000) приннмал участие в разработке и изучении нового противопаразитарного препарата на основе альбеидазола - альбамелина, этот порошок представляет собой смесь альбеидазола и цеолита в соотношении 10:90. Альбамслин задавали коровам перорально в дозе 7,5 мг/кг по ДВ.

Выявлена 100, 97,3 и 91,8% эффективность альбамелина против взрослых фасциол в дозе соответственно 125, ЮОи 75 мг/кг.

Е.Б. Бакина, С.Н. Бслозеров (1999) испытали вермитаи в виде 10% суспензии в дозе 10 мл/100 кг массы, перорально, и 20% гранулированного порошка в дозе 5 г/100кг массы, перорально, на крупном рогатом скоте, инва-зированном фасциолами. Обе лекарственные формы вермитана показали 100% экстенсэффективность в отношении фасциол.

Х. Волков (1999) установил, что от однократного применения вермитана в дозе 5г/100 кг живой массы при фасциолезе крупного рогатого скота ингенеэффективность равнялась 96, а экстенсэффективность - 78,5%.

Е. Абрамов (2000) установил эффективность вермитана против имагинальных фасциол в терапевтической дозе 10мг/кг по действующему веществу 94,5%.

И.В. Кольцов (2002) установил, что эффективность вермитана в дозе 7,5 мг/кг массы тела по действующему веществу составляет 96% против половозрелых форм фасциол. Введение коровам вермитана приводит к прогрессирующему снижению к 10-му дню титруемой кислотности молока на 2,9°Т.

Албент (смесь альбендазола 0,15 г/кг + бентоит 0,2 г/кг): По данным Л.И. Малкандуевой (2004) «Албент» в дозе 0,35 г/кг массы тела по отношению половозрелых фасциол у бычков показал эффективность 85,5-89,1%. Клозальбен: препарат на основе клозантела и альбендазола [95].

В.Е. Абрамов, И.А. Архипов, Н.И. Кошеваров (1999) установили, что клозальбен в дозе 6 мг/кг по ДВ эффективен на 95,4% при фасциолезе крупного рогатого скота [96].

По данным В.Е. Абрамова (2000) клозальбен в дозе 80 мг/кг массы животного высокоэффективен при фасциолезе крупного рогатого скота (эффективность - 97,7%) [96].

Иммунопаразитан: Иммунопаразитан, обладающий уникальной структурой, можно отнести к разряду полуспецифических иммуностимуляторов, так как он активирует специфические клоны иммунокомпетентных клеток (определенные клоны Т-лимфоцитов, эффекторы гиперчувствительности замедленного типа), ответственные за противопаразитарную защиту организма. По данным А.И. Федорова, В.И. Искандарова (2005) эффективность применения иммунопаразитана составляет более 90%. Использование иммунопаразитана у животных позволяет существенно повысить продуктивность (привесы увеличиваются на 5-15%, надои молока - на 15-25%.

Отмечено заметное повышение надоев молока, от 12 до 18%, в хозяйствах, где использовали иммунопаразитан, кроме этого снизилась выбраковка печени с 80 до 35%. При этом если корова убита до 5-6-й лактации, то в печени фасциол обнаружить невозможно. У старых коров регенерация печени идет медленнее, встречаются очаги петрификации и можно обнаружить единичных фасциол. Оказалось, что система применения нммунопаразнтана позволяет снизить и гибель новорожденного молодняка, уменьшить у коров количество гинекологических заболеваний и улучшить показатели по осеменяемости (Иммунопаразитан..., 2004).

Н.П. Сорокина (2004) рекомендует применение комплексной терапии, совместное применение этих препаратов позволяет получить более высокий антигельминтиый эффект по сравнению с их раздельным применением. Экстенсэффективность лечения при применении политрема и иммунопаразитана составила 90% и 80%, соответственно, при комплексном применении - 99%.

Ивомек плюс (ивомек Ф): является комбинированным препаратом. Соотношение действующих веществ в нем: 1% ивермектина и 10% клорсулона, назначают в дозе из расчета 1мл на 50 кг массы подкожно.

И.А. Архипов, Д.Р. Архипова (1990) испытали рекомендованную дозу препарата при остром и хроническом фасциолезе коров, и получили 62 и 98,7%-ную эффективность соответственно.

Спитомектин: содержит в качестве действующего вещества 0,5% ивермектина и 12,5% клозантела.

Фармако-токсикологическую характеристику и терапевтическую эффективность комплексного препарата «сантомектин» при паразитарных болезнях крупного рогатого скота изучал Сафиуллин (2003).

Сантомекган в дозе из расчета I мл на 50 кг массы обеспечил при спонтанном фасциолезе экстенсэффективность - 100% (Эффективность сантомек-тина, 2002).

По данным И.В. Кольцова (2002) эффективность нового антгельминт-ного препарата сантомектина в дозе 1 мл на 50 кг массы тела составляет 100% против половозрелых форм фасциол.

Тенназин: новый препарат, синтезирован в г. Казань. А.Х. Волков (1996) проводил испытания этого антгельминтика и установил, что эффективность тениазина при фасциолезе крупного рогатого скота в дозе 0,1 г/кг составляет 78%.

В.В. Кузьмичев (1998) разработал схемы лечения ассоциированной болезни, вызванной паразитированием фасциол и бактерий.

Первая схема. Вначале больных животных дегельминтизируют высокоэффективным фасциолоцидом; на 2-3-4 сутки после дегельминтизации животным дают препараты, приготовленные из облигатной микрофлоры (ацидофильные, пропионовокислые бактерии, азотобактер и т.д.). Такое лечение позволяет вылечить 99-100% животных, у последних печень быстро освобождается от бактерий, нормализуется микрофлора кишечника, восстанавливаются функции органов и систем на 60-90 сутки лечения.

Вторая схема. Вначале больных животных дегельминтизируют фасциолоцидом; после чего на 2-3-4 сутки им с кормом дают антибиотики, а на 6-7-8 сутки - препараты, приготовленные из облигатной микрофлоры. При применении этой схемы выздоравливают 98-100% животных, состав микрофлоры кишечника и печени у них нормализуется на 60-90 сутки.

Третья схема. Больным фасциолезом животным на 2-3-4 сутки после обработки антгельминтиком с кормом дают сульфаниламидные препараты, а на 6-7-8 сутки - препараты, приготовленные из облигатной микрофлоры. Применение данной схемы позволяет вылечить 98-100% животных, у них нормализуется микрофлора кишечника на 6090 сутки.

С.С. Липицкий (1991) установил, что более активно протекают восстановительные процессы в организме животных после дегельминтизации (при фасциолезе крупного рогатого скота), которым, кроме этиотропной терапии, применяли декстрановые препараты: микроанемин, содержащий микроэлементы, железо, медь, кобальт, или ДИФ, содержащий железо и йод, с последующим назначением метилмотионинсульфония хлорида [97].

Цель, задачи, объекты исследования и практическая база.

Целью исследований явилось изучение распространения фасциолеза, усовершенствование методов лечения фасциолеза сельскохозяйственных животных.

Задачи исследования:

Изучить организацию ветеринарно-санитарного надзора на рынке «Жетысу».

Изучить экстенсивность и интенсивность инвазии фасциолезом поступающих на рынок туш животных.

Изучить качественные показатели мяса животных, пораженных фасциолезом (органолептические и биохимические исследования).

Отработать технологию производства таблеток для дегельминтизации.

Вычислить экономический ущерб и экономический эффект при лечении фасциолеза.

Объекты исследования

Печень крупного рогатого скота, поступающая с тушами на рынок, на наличие фасциолеза, изучение технологии получения антигельминтного препарата, отработка методов лечения фасциолеза.

Практическая база

Сельскохозяйственное предприятие «Байсерке-Агро», рынок «Жетысу», кафедра «Биологическая безопасность» и лаборатория «Противопаразитарной биотехнологии» КазНАУ.



2. ОСНОВНАЯ ЧАСТЬ

2.1 Материал и методы исследований

Большая распространенность фасциолёза среди домашних животных приводит к потерям прироста живой массы, снижению продуктивности животных и выбраковки части туш и ливера.

В этих целях нами была проведена работа по изучению процентной заражённости туш, поступающих на рынок, изучение интенсивности инвазии печени, изучений влияния фасциолеза на качество мясной туши; разработка технологии изготовления таблеток для лечения фасциолеза, разработка лечебно-профилактических мероприятий при фасциолезе.

Исследования были проведены на базе рынка ТОО «Жетісу» города Алматы и на кафедре «Биологической безопасности» КазНАУ.

Процентная заражённость туш - экстенсивность инвазии, была выведена, из статистических данных, полученных из журналов учёта ф. 23 вет, рынка, взятых за три года: 2014, 2015, 2016.

Географическая распространенность была выведена также из вышеуказанных статистических данных.

Интенсивность инвазии исследовали методом полного гельминтологического вскрытия печени.

Изучение изменений в мясе проводили с помощью бактериологических, биохимических исследований и т.д.

Послеубойный осмотр туш и внутренних органов крупного рогатого скота

Послеубойный осмотр туш и внутренних органов крупного рогатого скота устанавливает следующие порядок исследования:

1) Исследование головы. Голову отделяют от туши, язык подрезают у верхушки и с боков так, чтобы он свободно выпадал из подчелюстного пространства. Осматривают и ощупывают губы, язык и слизистую оболочку ротовой полости. Язык фиксируют вилкой и очищают тыльной стороной ножа от кормовых масс и слюны. Если на языке нет видимых патологических изменений, его не разрезают. Вскрывают подчелюстные, заглоточные (средние и боковые), околоушные лимфатические узлы.

Осматривают и разрезают жевательные мышцы пластами на всю ширину, параллельно их поверхности (наружные - двумя разрезами, внутренние - одним) с каждой стороны (на цистицеркоз).

2) Исследование ливера. В состав ливера входят легкие с трахеей, сердце, печень с желчным пузырем, диафрагма и пищевод.

Легкие осматривают снаружи и прощупывают. Вскрывают средостенные краниальные, средние, каудальные и бронхиальные левый, правый, трахеобронхиальный лимфатические узлы. Осматривают трахею, бронхи и паренхиму легких путем продольного разреза каждого легкого по ходу крупных бронхов.

3) Исследование сердца. Вскрывают околосердечную сумку. Осматривают состояние перикарда и эпикарда. Затем по большой кривизне разрезают стенку правого и левого отделов сердца, с одновременным вскрытием желудочков и предсердий. Осматривают миокард, состояние эндокарда, клапанов сердца и крови. Проводят несколько продольных и поперечных несквозных разрезов мышц сердца (на цистицеркоз).

4) Исследование ечени. Печень осматривают и прощупывают с диафрагмальной и висцеральной сторон. В случае приращения диафрагмы к печени последнюю отделяют и осматривают паренхиму на наличие патологических изменений (абсцессы). Разрезают и осматривают портальные лимфатические узлы и делают с левой висцеральной стороны по ходу желчных протоков 2-3 несквозных разреза.

5) Исследование селезенки. Селезенку осматривают, а затем надрезают вдоль и определяют ее внешний вид и консистенцию пульпы.

6) Исследование почек. Почки извлекают из капсулы, осматривают и прощупывают, а в случае обнаружения патологических изменений разрезают, одновременно вскрывают почечные лимфатические узлы.

7) Исследование вымени. Вымя тщательно ощупывают, делают 1-2 глубоких параллельных разрезов. Вскрывают поверхностные паховые лимфатические узлы.

8) Исследование желудка и кишечника. Их осматривают со стороны серозной оболочки. Разрезают несколько желудочных и брыжеечных лимфатических узлов. В случае необходимости вскрывают и осматривают слизистые оболочки.

9) Исследование матки, семенников, мочевого пузыря и поджелудочной железы. Их осматривают, а в случае необходимости - вскрывают.

10) Исследование туши. Тушуосматривают с поверхности и с внутренней стороны, обращая внимание на наличие отеков, кровоизлияний, новообразований, переломов костей и других патологических изменений. Определяют состояние плевры и брюшины. При необходимости осматривают лимфатические узлы с поверхности и на разрезе, а также разрезают отдельные мышцы (шеи, поясничные, анконеусы - на цистицеркоз).

11) Подлежат осмотру следующие основные лимфатические узлы туши: каудальные глубокие шейные, реберно-шейные, подкрыльцовые, первого ребра, собственно подкрыльцовые (подмышечные или подлопаточные), поверхностные шейные, краниальный грудной (парный или непарный), надгрудинные (грудные), межреберные, вентральные средостенные, дорзальные средостенные, лимфатические узлы коленной складки (надколенные), поясничные, наружные подвздошные (округлые подвздошные), медиальный подвздошные, латеральные подвздошные (передние тазовые), глубокие паховые, седалищные.

У телят осматривают также пуповину и вскрывают суставы конечностей (запястные и скакательные).

Послеубойный осмотр туш и внутренних мелкого рогатого скота

Внутренние органы и тушу осматривают так же и как у крупного рогатого скота. Для выявления казеозного лимфаденита осматривают лимфатические узлы поверхностношейный и коленной складки.

Метод полного гельминтологического вскрытия (ПГВ)

Измельчаем ткань печени на мелкие кусочки, помещаем в большую ёмкость и заливаем водой. Отстояв некоторое время, сливаем верхнюю часть жидкости. Так повторяем несколько раз. При этом кровянистая жидкость становится светлой, затем удаляют из неё ткани печени и соединяющую ткань, а оставшеюся жидкость 5 -7 минут отстаивают, затем осторожно сливают, после чего осадок отдельными порциями, тщательно исследуют невооруженным глазом или под лупой. Небольшая часть молодых фасциол всплывает вместе с мелкими частицами печени, которые находятся во взвешенном состоянии. Поэтому надосадочную жидкость также необходимо исследовать. Исследование проводим в кювете с чёрным дном или в бактериологической чашке, поставленной на чёрную бумагу. Молодые фасциолы на чёрном фоне дна кювета будут отчётливо различимы, они обычно представляют собой мелкие белые образования овальной или вытянутой формы, длиной от 4 до 36 мм и шириной от 1 до 4 мм.

У крупного рогатого скота интенсивность инвазии считается слабой - 30 фасциол, средней - 50, сильной - 100, очень сильной - 250 и более.

Метод бактериологических исследований

Бактериологическое исследование мяса и мясопродуктов проводят после изучения сопроводительного документа, осмотра упаковки, устанавливания патологоанатомических и органолептических признаков. Бактериологические исследования проводят для исключения или подтверждения сибирской язвы.

Бактериоскопия мазков-отпечатков.

Для исследования готовим мазки - отпечатки из каждой пробы мяса, лимфатических узлов и внутренних органов. Стерильными ножницами вырезаем кусочек мяса 2 - 3 см3 с предварительно обожжённой поверхности пробы мышечной ткани. Срезанными сторонами прикладываем к предметному стеклу. Приготовленные отпечатки высушиваем на воздухе, фиксируем трёхкратным проведением над пламенем горелки и окрашиваем по грамму. Для этого на фиксированные мазки - отпечатки накладываем полоску фильтрованной бумаги, пропитанной 1% спиртовым раствором генцианвиолета, на 2 минуты, после чего отпечатки обрабатываем раствором люголя - 2 минуты, обесцвечиваем йодированным спиртом 2 минуты, затем промываем и высушиваем на воздухе.

Подготовленные мазки - отпечатки микроскопируем при увеличении объектива 90. Просматриваем не менее 10 - 15 полей зрения.

Мясо от здоровых животных свободно от микроорганизмов. +В мясе больных, павших и убитых в агонии животных, могут быть обнаружены возбудители инфекционных заболеваний и высокая общая обсеменённость.

Также мясо считают свежим, если в поле зрения препарата видны единичные (до 10 кл) кокки, палочковидные бактерии и нет следов распада мышечной ткани.

Мясо считают сомнительной свежести, если находят не более 30 кокков или палочковидных бактерий, а также следы распада ткани: ядра мышечных волокон в состоянии распада, лечерченость волокон слабо различима.

Несвежим считают мясо, если выявляют свыше 30 кокков и палочковидных бактерий, наблюдают значительный распад ткани, почти полное исчезновение ядер и отсутствие исчерченности мышечных волокон.

Метод биохимических исследований

Биохимические исследования включают определение рН мяса, постановку качественной реакции на пероксидазу, а говядину исследуют реакцией с нейтральным формалином (формольная реакция).

Определение рН мяса

Для определения рН мяса готовим экстракт в соотношении 1:4, то есть берём 10 г, мелко измельчённого ножницами мяса и 40 мл дистиллированной воды и экстрагируем 15 минут. После этого фильтруем через бумажный фильтр. Дальше исследование проводим на лабораторном рН метре согласно инструкции. РН в светлом мясе от здоровых животных равна 5,9 - 6,5; в сомнительном - 6,6; в негодном - 6,7 - 6,9; при заболеваниях с хроническим течением 6,3 - 6,5; убитых при тяжёлых пат. процессах 6,6 и выше.

Определение амина - аммиачного азота

Для этого берём навеску мяса в 25 г, измельчаем ножницами, затем растираем в ступке с небольшим количеством дистиллированной воды. Полученную кашицу переносим в колбу. Количество воды приготовления кашицы и смыва ступки должно быть 100 мл. Колбу закрываем резиновой пробкой и взбалтываем 3 минуты. Затем отстаиваем 5- 10 минут и снова взбалтываем 2 минуты, после чего содержимое колбы фильтруем через три слоя марли. 40 мл фильтрата помещаем в мерную трубку на 100 мл и для осаждения белков, добавляем вначале 10% раствор алюминиевых квасцов, а затем насыщенный раствор едкого бария. Общий объём осадителей примерно равный или немножко больше объёма мясной вытяжки.

Соотношение насыщенного раствора едкого бария необходимо для нейтрализации нужного количества 10% раствора алюминиевых квасцов, установленным перед исследованием. Для этого берём 10 мл, 10% раствора алюминиевых квасцов добавляем 5 капель 1% раствора фенолфталеина и раствор квасцов оттитровываем насыщенным раствором едкого бария.