Тестирование передней и задней долей гипофиза сазана на самцах стерляди

Размещено на http://www.allbest.ru/

Тестирование передней и задней долей гипофиза сазана на самцах стерляди

В экспериментальных работах по тестированию гипофизов сазана Cyprinus carpio (Казанский, Персов, 1948) и севрюги Acipenser stellatus (Баранникова, 1949) было показано, что гормоны, вызывающие созревание и овуляцию икры у самок и спермиацию у самцов, содержатся в передней доле гипофизов этих рыб. При гипофизарных инъекциях производителям вводятся не только гонадотропные, но и другие гормоны, которые могут вызывать ряд нежелательных побочных эффектов (Гарлов, 1972; Бурлаков, 1978). Избавиться от негативных последствий инъекций суспензии гипофизов можно различными путями: применением очищенных гонадотропных гормонов (Баранникова и др., 1981), использованием гонадотропин-рилизинг гормонов и их аналогов (Гончаров, 1985; Баранникова и др., 1989) и др. Одним из путей частичного решения данной проблемы П.Е.Гарлов и соавторы (Гарлов, 1979; Гарлов и др., 1987) считают механическое разделение гипофизов на переднюю и заднюю доли.

При этом самкам вводится препарат, изготавливаемый из изолированной передней доли гипофиза (ИПД), свободный от значительной части нежелательных и балластных факторов, содержащихся в задней доле. Заднюю долю (ЗДГ) гипофиза было предложено использовать для стимуляции спермиации у самцов рыб (Гарлов и др., 1985). Однако попытка тестировать препараты ЗДГ на самцах бесхвостых амфибий оказалась безуспешной. Задняя доля гипофизов сазана, в отличие от передней, при широком диапазоне испытанных дозировок не вызывала реакцию спермиации у традиционно используемого в рыбоводстве тест-объекта - самцов озерной лягушки Rana ridibunda (Подушка, Куриличев, 1987). Поэтому представляло интерес провести тестирование на каком-либо другом объекте.

В опытах использовали ацетонированные гипофизы сазана, заготовленные весной 2000 г. в г. Астрахани. Разделение передней и задней долей гипофиза производили по методике, описанной в работе Б.Н. Казанского и Г.М. Персова (1948). Средняя относительная масса ЗДГ составила 22% от массы целого гипофиза. Тестирование проводили на самцах стерляди Acipenser ruthenus зимой 2002 г. в Кармановском рыбхозе. Рыб перевозили из садковой линии (температура воды 6°С) в бассейны инкубационного цеха, и в течение суток поднимали температуру воды до нерестовых значений (13-16°С). Необходимые дозы ЗДГ и ИПД отвешивали на торсионных весах и растирали пестиком в фарфоровой ступке. Из полученного порошка делали суспензию на дистиллированной воде. Различные концентрации суспензии получали путем последовательных разбавлений. Препарат инъецировали в мышцы спины. Средняя масса использованных самцов стерляди равнялась 1,0 кг.

Реакцию рыб оценивали через 12 и 24 часа после введения препарата. Результат считали нулевым, если самцы при изгибании тела и массировании брюшка не давали сперму или давали прозрачную жидкость, не содержащую сперматозоидов. Отреагировавшие на препарат самцы выделяли семенную жидкость со сперматозоидами. Определяли объем и степень мутности сцеженной жидкости. Мутность, характеризующую концентрацию сперматозоидов, оценивали в баллах по следующей шкале: 1 - жидкость имеет цвет сильно разбавленного молока; 2 - жидкость имеет цвет разбавленного молока; 3 - жидкость имеет цвет цельного молока. Средний объем и средний балл мутности семенной жидкости в каждом варианте опытов определяли в расчете на число положительно отреагировавших на инъекцию рыб.

В табл.1 и 2 приведены результаты тестирования ИПД и ЗДГ гипофиза сазана на самцах стерляди. Анализ данных этих таблиц показывает, что, как передняя, так и задняя доля гипофиза сазана стимулировали спермиацию у самцов стерляди, однако в их действии наблюдались определенные различия. Реакция самцов стерляди на инъекцию препарата ЗДГ, по сравнению с реакцией на ИПД, носила несколько обедненный характер: спермиация наблюдалась не у всех рыб, запаздывала во времени, животные выделяли меньшее по объему количество семенной жидкости с более низкой концентрацией сперматозоидов. Наблюдалась тенденция к усилению реакции с возрастанием дозы вводимого препарата. Скорее всего, отмеченные различия обусловлены различными механизмами действия ИПД и ЗДГ на самцов рыб.

гипофиз экспериментальный сазан

Таблица 1. Результаты тестирования ИПД гипофиза сазана на самцах стерляди

Таблица 2. Результаты тестирования 3ДГ гипофиза сазана на самцах стерляди

Проведенные опыты подтверждают данные о возможности использования ЗДГ для стимуляции спермиации у рыб (Гарлов и др., 1985). Следует констатировать отсутствие строгой таксономической специфичности присутствующего в ЗДГ фактора, стимулирующего спермиацию: препарат ЗДГ из сазаньего гипофиза (сем. Карповые) оказался эффективным для стимуляции спермиации у рыб семейства Осетровых. Действующим началом в ЗДГ при стимуляции спермиации у рыб, по-видимому, не могут быть ни гонадотропные гормоны, ни гонадотропин-рилизинг гормоны, поскольку предыдущие опыты показали, что самцы озерной лягушки, достаточно чувствительные и к тем, и к другим препаратам, на препараты ЗДГ рыб не реагируют (Подушка, Куриличев, 1987; Подушка и др., 1988).

гипофиз экспериментальный сазан

Литература

1.Баранникова И.А. 1949. Локализация гонадотропной функции в гипофизе севрюги (Acipenser stellatus) // Доклады АН СССР. Т.69. № 1. С.117-120.

2.Баранникова И.А., Боев А.А., Буковская О.С. и др. 1989. Анализ созревания русского осетра Acipenser gueldenstaedti под действием люлиберина в связи с возможностью использования этого препарата в рыбоводстве // Вопросы ихтиологии. Т. 29. Вып. 3. С.439-447.

3.Баранникова И.А., Боев А.А., Зенкевич Г.А. и др. 1981. Результаты использования очищенного гонадотропина осетровых по сравнению с другими гипофизарными препаратами для стимуляции созревания самок русского осетра Acipenser gueldenstaedti Brandt // Вопросы ихтиологии. Т. 21. Вып. 4. С.719-725.

4.Бурлаков А.Б. 1978. Влияние гипофизарных инъекций на активность и изоферментный состав малатдегидрогеназы в некоторых тканях самок белого толстолобика // Вопросы ихтиологии. Т. 18. Вып. 6. С.1110-1117.

5.Гарлов П.Е. 1972. О регуляторном влиянии гипоталамо-гипофизарной нейросекреторной системы осетровых на эндокринные железы и перспективы использования этого явления в рыбоводстве // Тезисы отчетной сессии ЦНИОРХа. Астрахань. С.39-40.

Размещено на Allbest.ru