Физиолого-биохимические показатели крови и почек птиц на фоне применения Фоспренила

Размещено на http://www.allbest.ru/

Размещено на http://www.allbest.ru/

АВТОРЕФЕРАТ

диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук

ФИЗИОЛОГО - БИОХИМИЧЕСКИЕ ПОКАЗАТЕЛИ КРОВИ И ПОЧЕК ПТИЦ НА ФОНЕ ПРИМЕНЕНИЯ ФОСПРЕНИЛА

03.03.01 - физиология

Епихова Ольга Геннадьевна

Курск - 2013

1. Общая характеристика работы

Актуальность работы. В России птицеводство является одной из наиболее эффективных, перспективной и динамично развивающейся отраслью АПК. Для быстрого и непрерывного роста производства продуктов птицеводства, наряду с созданием прочной кормовой базы и выполнением зоогигиенических требований, необходимо максимально использовать достижения биологических и химической наук (Мухтаров Р.Д., 1977; Сапин М.Р., 1999; Фисинин В.И., 2008).

Производство птичьего мяса основывается, главным образом, на использовании бройлеров различных кроссов. Развитие бройлерной промышленности обусловлено высокой скоростью роста молодняка, невысокими затратами корма на один килограмм прироста живой массы, ценностью мяса - как диетического продукта (Пенионжкевич Э.Э., Злочевская К.В., Шахнова Л.В., 1989).

На долю бройлерного птицеводства приходится 61-88% производства мяса в Российской Федерации (Фисинин В.И., 1976; Болотников И.А., Михкиева., В.С., Олейник Е.К., 1983; Силенок А.В., 2011). В настоящее время в птицеводстве находят широкое применение различные препараты и добавки, способствующие повышению иммунитета, увеличению привесов, снижению падежа. В широком спектре препаратов определенную часть занимают иммуномодуляторы, среди которых важное значение имеет «Фоспренил». Он является продуктом фосфорилирования полипренолов хвои, применяется в скотоводстве, свиноводстве и птицеводстве.

Исследованию влияния сочетанного действия Гамавита и Фоспренила на функциональные показатели и морфогенез органов бройлеров (сердца, печени, желудка, почек, железы третьего века, селезенки, поджелудочной железы семенников, лимфоидных бляшек и бурсы фабрициуса) посвящен ряд работ (Финогенова Ю.А., 2010; Жилина О.В., 2010; Жилин А.В., 2010; Чумина Н.Г., 2010; Бобунов А.А., 2012; Мерзлякова И.А., 2012; Постоялко С.И., 2012; Харлан А.Л., 2012; Шелудяков С.А., 2012; Щеглов Н.А., 2012; Чечулина Е.Н., 2012).

Чтобы интенсивное использование птицы не принесло вред ее организму и убыток производству, оно должно базироваться на знании морфологии, которая, раскрывая онтогенетические процессы развития, обеспечивает более глубокое понимание процессов, а также позволяет выявить критические периоды развития отдельных систем организма (Самойлова Л.,1978; Тельцов Л.П., 1995,1998, 2000, 2006; Кочиш И.И., и др., 2011; Епихова О.Г., 2012). Имеющиеся сведения не позволяют судить о действии на морфофункциональное состояние крови и почек препарата «Фоспренил» в различной дозировке. Данный факт послужил основанием проведения комплексных экспериментальных (доклинических) исследований морфофункциональных показателей крови и почек цыплят-бройлеров кросса «Смена-7» от одно- до 38-суточного возраста с учетом их содержания в условиях гиподинамии.

Цель исследования. Установить влияние Фоспренила в различной дозировке на неспецифическую резистентность, биохимические показатели крови и почек цыплят-бройлеров кросса «Смена-7» от 1_суточного до 38-суточного возраста при клеточном содержании в условиях гиподинамии.

Задачи исследования:

1. Рассмотреть механизм действия препарата «Фоспренил» в дозах 0,05 мл/кг и 0,2 мл/кг на организм (на основные параметры гомеостаза, в том числе на уровень естественной резистентности и иммунный статус организма, показатели неспецифической резистентности, соматометрические и морфофункциональные показатели крови и почек) цыплят-бройлеров кросса «Смена-7» от 1-суточного до 38-суточного возраста в условиях клеточного содержания;

2. Выявить динамику биохимических показателей крови и ткани почек, морфогенеза почек у цыплят-бройлеров кросса «Смена-7» в раннем постинкубационном онтогенезе при применении Фоспренила;

3. Провести корреляционный анализ взаимосвязи соматометрических, макро-микрометрических и биохимических показателей крови и ткани почек в процессе развития цыплят-бройлеров кросса «Смена-7» при применении Фоспренила в различной дозировке.

Научная новизна работы. Обосновано и дополнено представление о морфофункциональных показателях крови и почек цыплят-бройлеров кросса «Смена-7» от 1-суточного до 38-суточного возраста при пероральном приеме (вместе с основным рационом в период вакцинации) Фоспренила, способного к коррекции гуморальных факторов неспецифической защиты организма, в дозах 0,05 мл/кг и 0,2 мл/кг при клеточном содержании в условиях пониженной двигательной активности.

С помощью комплексных физиологических, анатомо-гистологических, биохимических, гистохимических, иммунологических и статистических методов исследования определена динамика морфофункциональных показателей крови и абсолютной и относительной массы почек, изучена особенность строения макро- и микрометрических параметров почек цыплят-бройлеров кросса «Смена-7» в постинкубационном онтогенезе при применении иммуномодулирующего и противовирусного фармакологического средства широкого спектра действия - «Фоспренил».

Обоснована корреляционная взаимосвязь развития макро- и микроскопических структур почек и показателей неспецифической резистентности (гематологических показателей) с биологическими периодами и стадиями развития цыплят-бройлеров кросса «Смена-7» под влиянием оптимальной дозы Фоспренила - 0,05 мл/кг.

Теоретическая и практическая значимость. Проведенное комплексное экспериментальное исследование направлено на решение проблемных вопросов морфофизиологии организма птиц относительно морфофункционального изменения крови и почек цыплят-бройлеров кросса «Смена-7» от 1-суточного до 38-суточного возраста при применении Фоспренила во время вакцинации в дозе 0,05 мл/кг - для повышения неспецифической резистентности организма.

Установленные особенности в развитии почек у цыплят-бройлеров кросса «Смена-7» под влиянием Фоспренила, могут быть использованы для корректировки стрессов при современной технологии выращивания и проведения профилактических работ по предотвращению заболеваемости мочевыделительной системы.

Полученные данные морфофункциональных показателей крови и морфогенеза почечных микроструктур у цыплят-бройлеров позволяют судить о ее морфофункциональной зрелости, выделить критические периоды в развитии почек, что чрезвычайно важно при назначении препарата «Фоспренил», повышающего иммунный статус и снижающего стресс.

Получены новые экспериментальные данные о морфофункциональных показателях крови, морфогенезе почек цыплят-бройлеров кросса «Смена-7» от 1-суточного до 38-суточного возраста при применении Фоспренила, которые могут служить нормативной основой при применении иммуномодулирующих препаратов, использоваться в качестве учебного материла, при написании учебников и учебных пособий по физиологии, в патологоанатомической диагностике болезней системы мочевыделения и регулировании уровня естественной резистентности и обмена веществ.

Публикации. По теме диссертационной работы опубликовано 13 научных работ: три из них - в периодическом издании из перечня ведущих рецензируемых научных журналов, утвержденных ВАК РФ, - // Сборник статей «Современные научно-технические достижения в ветеринарии» Выпуск 1. - Изд-во Вятская ГСХА. Киров, 15-16 апреля 2010; Электронный журнал «Современные проблемы науки и образования». - М., 2012. - № 5.

Апробация работы. Основные положения диссертационной работы доложены, обсуждены и получили положительную оценку на Международной научно-практической конференции, посвященной 80-летию Вятской государственной сельскохозяйственной академии «Современные научно-практические достижения в ветеринарии» (Киров, 2010), V Международной научно-практической конференции естественно-географического факультета «Экологическая безопасность региона» (Брянск, 18-19 октября 2012); II Международной научно-практической интернет-конференции «Актуальные проблемы современной биологии, морфологии и экологии животных» (Брянск, 2012); заседаниях кафедры зоологии и анатомии ФГБОУ ВПО «Брянский государственный университет имени академика И.Г. Петровского» (Брянск, 2009; 2010; 2011; 2012); опубликованы в коллективной монографии (Брянск, 2012).

Реализация результатов исследования. Материалы диссертационной работы используются в учебном процессе на кафедрах физиологического и морфологического цикла Брянского государственного университета имени академика И.Г. Петровского; Ивановской, Брянской государственных сельскохозяйственных академий, Российском университете дружбы народов, НИИ эпидемиологии и микробиологии имени почетного академика Н.Ф. Гамалеи.

Основные положения диссертационной работы внедрены в технологический процесс птицефабрики ОАО «Снежка» Брянской области Брянского района и используются в качестве тестов Федеральной службой по ветеринарному и фитосанитарному надзору (Россельхознадзор) Управления по Брянской и Смоленской областям, в качестве рекомендаций по применению Фоспренила НИИ эпидемиологии и микробиологии имени почетного академика Н.Ф. Гамалеи.

Достоверность и обоснованность результатов исследования, выводов и рекомендаций обусловлены использованием обширного экспериментального материала, обработанного с помощью компьютерных технологий, а также всесторонним анализом литературных источников, согласованностью полученных данных с общебиологическими закономерностями и данными других авторов.

Основные положения, выносимые на защиту:

1. Коррекция уровня естественной резистентности и иммунного статуса организма бройлеров, содержащихся в условиях пониженной двигательной активности при клеточном содержании, путем введения в воду Фоспренила в дозе 0,2 мл/кг обусловила незначительную оптимизацию морфофункционального состояния крови и биохимических показателей ткани почек, а в дозе 0,05 мл/кг обеспечило более эффективную работу защитных систем организма.

2. Выпаивание во время вакцинации Фоспренила в дозе 0,05 мл/кг цыплятам-бройлерам кросса «Смена-7» от 1-суточного до 38-суточного возраста способствовало оптимизации гомеостаза, повышению уровня естественной резистентности и иммунного статуса организма, проявляющегося в изменении соматометрических показателей (индекс массивности; абсолютная и относительная масса цыпленка (в % по Броди); длина туловища; ширина таза) и морфологии почек (абсолютная и относительная масса почек; линейные макрометрические характеристики - длина, ширина; микрометрические характеристики - капсула, почечные тельца - максимальный и минимальный диаметры и площадь; почечные тельца - ширина просвета, толщина капсулы; проксимальный и дистальный канальцы - диаметр канальца, диаметр просвета канальца и площадь канальца).

3. Корреляционная взаимосвязь основных показателей неспецифической резистентности и развития макро- и микроскопических структур почек по биологическим периодами и стадиями развития бройлеров под влиянием Фоспренила в дозе 0,05 мл/кг.

Личный вклад соискателя. Диссертационная работа является результатом четырехлетних исследований автора на птицефабрике ОАО «Снежка» Брянского района Брянской области. Исследование по изучению показателей крови и морфогенеза почек цыплят-бройлеров кросса «Смена-7» от 1-суточного до 38-суточного возраста при применении Фоспренила выполнено лично.

Полученные в ходе экспериментального (доклинического) исследования цифровые данные отражены в книге записей первичных данных аспиранта. По результатам исследований автора опубликовано 13 работ в сборниках научных трудов различного уровня, в соавторстве: с профессором Брянского государственного университета имени академика И.Г. Петровского Е.В. Зайцевой и аспирантами И.А. Мерзляковой, Е.Н. Булгаковой, А.А. Бобуновым, Р.Ю. Лютым, А.Л. Харланом, Н.Н. Крикливым, профессором Мордовского государственного университета им. Н.П. Огарева Л.П. Тельцовым и профессором Ивановской государственной сельскохозяйственной академии В.В. Прониным. Материалы их исследований не вошли в диссертационную работу.

2. Результаты собственных исследований и их обсуждение

Материалы и методы исследования

Диссертационное исследование выполнялось по заказу ЗАО «Микро-плюс» при ГУ НИИЭМ им. Н.Ф. Гамалеи в период с 2009 по 2010 гг., совместно с группой аспирантов (куратор профессор Зайцева Е.В.), в условиях ОАО Птицефабрика «Снежка» Брянской области, в лаборатории «Морфофизиологии человека и животных» кафедры зоологии и анатомии Брянского государственного университета имени академика И.Г. Петровского (тематика работы кафедры: «Влияние экологических факторов на биологические объекты», номер госрегистрации 01200704777), совместной научно-исследовательской лаборатории Брянского института патологии при Департаменте здравоохранения Брянской области, лаборатории ГАУЗ «Брянский клинико-диагностический центр» и кафедре нормальной, патологической анатомии и ветеринарно-санитарной экспертизы ФГБОУ ВПО «Ивановская государственная сельскохозяйственная академия».

Объектом исследования служили клинически здоровые цыплята кросса «Смена_7», содержащиеся на птицефабрике «Снежка», Брянской области, выращиваемые в условиях эпизоотологического благополучия на ОАО «Птицефабрика «Снежка», кормление и содержание соответствовали рекомендациям. Перед проведением экспериментального исследования состояние естественной резистентности у цыплят-бройлеров кросса «Смена-7» оценивали по результатам исследования крови путем определения содержания гемоглобина в цельной крови и уровня общего белка рефрактометром ИРФ-22 (А.М. Ахметов,1968), лизоцимной активности - нефелометрическим методом (В.Г. Дорофейчук, 1968), бактерицидной и фагоцитарной активности в сыворотке крови - в модификации Кляцкой Ю.В. (2008).

Для проведения физиологического исследования было сформировано по принципу аналогов три группы суточных цыплят - 270 голов (петушков) (девять клеток, т.е. по 30 голов в каждой клетке) - 1-я опытная группа получала Фоспренил в профилактической дозе 0,05 мл/кг, 2-я опытная группа получала Фоспренил в лечебной дозе 0,2 мл/кг, контрольная группа находилась на основном рационе. Лечебную дозу цыплята 2-й опытной группы получали в день вакцинации согласно календарю прививок: 1-е сутки - против болезни Марека и инфекционного бронхита кур (ИБК); 7-е сутки - инфекционной бурсальной болезни (ИББ); 9-е сутки - инфекционного бронхита кур (ИБК); 14-е сутки - болезни Ласотта и болезни Ньюкасла; 17-е сутки - болезни Гамборо.

Материалом исследований служили кровь и почки, полученные от клинически здоровых (особей мужского пола) цыплят-бройлеров кросса «Смена-7».

Каждая птица оценивалась по экстерьеру. У цыплят-бройлеров от 1_суточного до 38-суточного возраста при применении Фоспренила в различной дозировке изучали возрастные изменения показателей крови: гематокрит, количество эритроцитов, лейкоцитов, гемоглобина, скорость оседания эритроцитов; (гемоглобина в цельной крови и уровня общего белка, альбуминов, глобулинов, лизоцимной активности, бактерицидной и фагоцитарной активностей в сыворотке крови; биохимических показателей ткани почек: мочевины, мочевой кислоты, уровня глюкозы.

При определении в крови у цыплят количества эритроцитов и лейкоцитов использовали камеру Горяева. Для выведения лейкоцитарной формулы делали подсчет лейкоцитов разных видов и вычисляли процентное содержание и выведение лейкоцитарного профиля крови.

Для определения в сыворотке крови общего белка пользовались рефрактометром ИРФ-22. Содержание мочевины в сыворотке крови цыплят определяли по цветной реакции с диацетилмонооксимом, содержание глюкозы определяли с помощью прибора OAN - TAR (ультра), содержание фосфора определяли с ванадат-молибденовым реактивом, содержание кальция - реакцией с мурексидом.

Все виды гематологических исследований производились в лабораториях ГАУЗ «Брянский клинико-диагностический центр» на автоматическом биохимическом анализаторе ARCHITECT (c 8000) фирмы ABBOT (США, Япония) с помощью биотестов системы AEROSET.

Перед убоем у петушков каждой группы определяли живую массу и измеряли ширину таза и длину туловища для определения индекса массивности.

Индекс массивности = (Масса тела / Длина туловища) х 100

Данный показатель характеризует компактность телосложения и упитанность птицы. Длина туловища характеризует развитие цыпленка-бройлера, в этой связи нами изучена взаимосвязь между длиной туловища и длиной почек с учетом возраста в постинкубационном онтогенезе. Ширина таза - показатель развития некоторых внутренних органов и крепости телосложения. Измеряли ее между выступами седалищных костей.

У цыплят вычисляли относительный рост ширины почек (в % по Броди) к ширине таза, за весь возрастной период экспериментального исследования. Вычисляли среднесуточный прирост (С), который характеризует скорость роста птицы:

,

где Wt - живая масса в конце периода, г; Wo - живая масса в начале периода, г; t₁ - возраст на начало периода, дни; t₂ - возраст в конце периода, дни (Кочиш И.И., Петраш М.Г., Смирнов С.Б., 2004).

При работе с цыплятами-бройлерами полностью соблюдались международные принципы Хельсинской декларации о гуманном отношении к животным.

После определения массы тела и снятия промеров производили убой по методике А.В. Комарова (1981), путем обескровливания в висячем положении в течение 90-120 секунд. После обескровливания и вскрытия брюшной полости извлекали почки и производили их визуальный осмотр, снимали весовые и линейные показатели, определяли цвет и консистенцию, абсолютную массу, относительный показатель роста массы. Взвешивание производили на электрических весах ВЛКТ-500М (ГОСТ 241-04-80) с точностью до 0,01 г и электронных весах Acculab Sartorius groun Atilon с точностью до 0,001 г. Абсолютную массу почек определяли сразу после вскрытия, относительную массу почек вычисляли в процентах от общей массы цыпленка.

Морфологические исследования почек цыплят-бройлеров включали в себя: определение абсолютной и относительной масс; линейные макрометрические характеристики - длина, ширина; микрометрические характеристики - капсула, почечные тельца - максимальный и минимальный диаметры и площадь; почечные тельца - ширина просвета, толщина капсулы; проксимальный и дистальный канальцы - диаметр канальца, диаметр просвета канальца и площадь канальца.

Для оценки и эффективности применения Фоспренила определяли химический состав ткани почек, грудных и бедренных мышц на приборе IKAP-9000 фирмы «Термо Джарреля Аш» (США).

Для изучения гистологического строения брали кусочки почек с задней доли. Исследовали как свежие, так и фиксированные препараты. В качестве фиксатора использовали 10%-ный раствор нейтрального формалина (Г.А. Меркулов, 1961). Срезы толщиной 5-10 мкм готовили на ротационном микротоме МПС-2.

Для обзорной картины препараты окрашивали гематоксилином и эозином (Р. Ромейс, 1953; Д.М. Саркисов, 1996). Гистометрические измерения структур почек цыплят проводились методом случайного отбора поля зрения микроскопа. Количество микроскопических объектов определяли серией подсчетов в поле зрения микровизора (Р. Лилли, 1969; К. Ташке, 1980; Г.Ф. Лакин, 1980; Г.Г. Автандилов, 1990).

Съемку макро- и микропрепаратов проводили с помощью цифрового фотоаппарата Canon Power Shot G 5 («Canon», Германия), микровизора Vizo 130 и компьютерной программы AxioVision. При фотографировании гистологических срезов дополнительно использовали микроскоп JENAMED 2, окуляр GF-PW10Ч25, объектив 40, 100. Каждый срез сканировался с помощью программы Scan Wizard 5.

Для изучения количественных показателей, полученных в экспериментальных исследований, производили статистическую обработку цифрового материала на персональном компьютере AMD Pentium (tm) XP 1800+ в операционной системе Windows XP с помощью программного пакета Microsoft Word, Microsoft Excel с уровнем достоверности: ***⁾P<0,001; **⁾P<0,01; *⁾P<0,05 и программы Statistica-6.

Взаимосвязь признаков определяли, используя корреляционный метод Пирсона с вычислением соответствующего коэффициента (r).

Результаты исследований протоколировали и документировали фотографиями с препаратов, таблицами, схемами. Полученные цифровые данные экспериментальных исследований приведены к Международной системе единиц СИ. Названия анатомических структур почек приведены в соответствии с Международной анатомической ветеринарной номенклатурой - Nommica anatomica Veterinaria (2000).

Гуморальные факторы неспецифической защиты организма цыплят-бройлеров кросса «Смена-7» ОАО птицефабрика «Снежка»

До проведения основной серии физиологических исследований о влиянии иммуномодулятора «Фоспренил» на организм цыплят-бройлеров кросса «Смена_7», содержащихся в промышленных условиях ОАО птицефабрики «Снежка», условиях эпизоотического благополучия, нами было проведено изучение состояние естественной резистентности.

Для определения естественной резистентности у цыплят мы провели гематологические и биохимические исследования в 1-, 5-, 7_, 10-, 14-, 17-, 28- и 38-суточном возрастах. Уровень общего белка увеличивается равномерно с возрастом птицы до 14-суточного возраста в 2,2 раза по сравнению с суточным возрастом. С 14-суточного возраста отмечается уменьшение показателя в 1,3 раза, и в 38-суточном возрасте он составляет 3,92± 0,26 г%.

Уровень альбуминов равномерно увеличивается с возрастом птицы: в 1,3 раза до 10-суточного возраста. С 14-х суток показатель скачкообразно уменьшается: уменьшается в 1,4 раза с 14-суточного до 17-суточного возраста, а к 38_суточному возрасту увеличивается в 1,1 раза. Уровень б-глобулинов равномерно увеличивается с возрастом: до 7-суточного возраста в 1,2 раза; с 10-суточного возраста показатель равномерно уменьшается в 1,3 раза и составляет в 38-суточном возрасте 17,85± 0,32%. Содержание в-глобулинов в крови бройлеров кросса «Смена-7» равномерно увеличивается к 7-суточному возрасту на 0,5%; к 14-суточному возрасту уменьшается в 1,2 раза; к 28-суточному возрасту увеличивается в 1,3 раза и к концу наблюдения уменьшается на 0,56%. Уровень г-глобулинов изменяется гетерохронно с возрастом птицы: к 10-суточному возрасту увеличивается в 1,65 раза, в 14_суточном уменьшается на 0,94%. Далее следует равномерное увеличение, и к концу наблюдения показатель увеличивается в 1,2 раза.

Активность лизоцима сыворотки крови у суточных цыплят составляет 4,49± 0,14%, с возрастом данный показатель равномерно увеличивается: в 1,3 раза к 7-суточному возрасту и с 10-суточного возраста к моменту окончания наблюдения - статистически достоверно - увеличивается в 1,25 раза.

Бактерицидная активность крови бройлеров кросса «Смена-7» равномерно увеличивается до 7-суточного возраста в 1,15 раза, в 10-суточном возрасте отмечается уменьшение на 2,47%, а к 38-суточному возрасту - увеличение в 1,19 раза, что по сравнению с суточным возрастом в 1,3 раза больше. Фагоцитарная активность крови бройлеров кросса «Смена-7» в суточном возрасте составляет 51,94± 0,08%, с возрастом данный показатель равномерно увеличивается в 1,24 раза и в 38-суточном возрасте достоверно составляет 64,41± 0,27%, что связано с периодом созревания организма и окончанием периода роста птицы.

У цыплят было установлено снижение уровня естественной резистентности, на что указывает недостаточность адаптационного резерва и угнетение Т_лимфоцитарного звена иммунной системы.

Изучение действия на организм цыплят-бройлеров кросса «Смена-7» продукта фосфорилирования полипренолов хвои - Фоспренил

Абсолютная масса птицы в контрольной и опытной группах, где применялся иммуномодулятор «Фоспренил» в дозе 0,05 мл/кг, увеличивалась гетерохронно с возрастом птицы. Возрастные различия являлись статистически достоверными (Р?0,05). В 1-й опытной группе при применении иммуномодулятора «Фоспренил» к 38 суткам абсолютная масса птицы составляла 1928,20± 68,42 г, во 2-й опытной группе - 1946,60± 26,74 г. В контрольной группе в стартовый период, на 1-е сутки, индекс массивности у цыплят-бройлеров кросса «Смена-7» составлял 8,28%; в период развития к 38 суткам увеличился в 8 раз и составлял 67,81%. В 1-й опытной группе в период развития, на 38-е сутки, индекс массивности составлял 58,16%; во 2-й опытной группе составил 59,76%. В 1-й опытной группе, при применении иммуномодулятора «Фоспренил», на 38-е сутки длина туловища цыпленка составляла 15,96± 1,02 см, что на 0,16 см больше, чем в контрольной группе; во 2-й опытной группе, соответственно, 15,84± 0,30 см (Р?0,05). У цыплят-бройлеров в 1-й опытной группе, при применении Фоспренила, на 38-е сутки ширина таза составляла 6,48± 0,16 см; во 2-й опытной группе - 6,48± 0,90 см (Р?0,05).

Выпаивание цыплятам-бройлерам продукта фосфорилирования полипренолов хвои - препарата «Фоспренил» в дозе 0,05 мл/кг с питьевой водой по предложенной схеме, вместе с основным рационом во время вакцинации, привело к снижению в период развития на 38-е сутки индекса массивности на 9,65% и титра антител до 1:33 при одинаковой конверсии корма (2,30), увеличению живой массы цыпленка на 146,60 г и сохранности поголовья на 8,22%, а в химическом составе грудных и бедренных мышц - к увеличению сухого вещества на 1,00-1,04%, протеина - 1,00-1,04%, снижению жира - 0,95-0,87% и золы - 1,18-0,91% соответственно (Табл. 1).

Таблица 1 Химический состав мышц и сравнительные показатели по применению препарата «Фоспренил» бройлерам кросса «Смена-7»

При применении иммуномодулирующего и противовирусного препарата «Фоспренил» в период вакцинации, в дозе 0,05 мл/кг, у цыплят-бройлеров кросса «Смена-7» в период раннего постинкубационного онтогенеза возникает стимулирующий эффект, проявляющийся в более раннем развитии организма и формировании морфологических структур почек и ускоренных биохимических и обменных процессов, что приводит к ранней морфофункциональной зрелости почек к 25-суточному возрасту и повышению неспецифической резистентности организма.

Наблюдения позволяют сделать вывод о повышении гуморальных факторов неспецифической защиты организма от стресс-взаимодействий, повышении уровня общей резистентности, продуктивности и сохранности поголовья у цыплят.

Показатели крови у бройлеров кросса «Смена-7» в контрольной группе и при применении Фоспренила

В результате наших исследований выявлено, что гематокритное число меняется с различной периодичностью. В 1-й опытной группе в период развития, на 38-е сутки, гематокрит крови составил 44,20± 1,24%; во 2-й опытной группе, соответственно, 44,20± 1,24%. Содержание гемоглобина в крови бройлеров кросса «Смена-7» изменялось скачкообразно в контрольной и опытных группах. Максимальное значение было зафиксировано в ростовом периоде на 15-е сутки и 25-е сутки, минимальное значение - на 1-5-е сутки. В 1-й опытной группе в период развития, на 38-е сутки, количество гемоглобина составляло 105,52± 1,78 г/л; во 2-й опытной группе, соответственно, 105,46± 1,56 г/л (Рис.1).

Рис. 1. Динамика количества гемоглобина в крови у бройлеров кросса «Смена-7» в контрольной группе и при применении иммуномодулятора «Фоспренил»

Высокое содержание эритроцитов в крови цыплят-бройлеров кросса «Смена-7» в раннем постнатальном онтогенезе обусловлено высокой потребностью растущего организма в питательных веществах.

В 1-й опытной группе в период развития, на 38 сутки, скорость оседания эритроцитов составила 4,08± 0,19 мм/ч; во 2-й опытной группе - 4,02± 0,38 мм/ч, количество эритроцитов - 4,44± 0,09*10¹²/л и 4,46± 0,06*10¹²/л соответственно. Интенсивное уменьшение содержания лейкоцитов в крови у цыплят-бройлеров кросса «Смена-7» при применении Фоспренила происходит в период с 1-суточного до 38_суточного возраста, связано непосредственно со становлением иммунитета. При детальном анализе профилактических прививок и вакцинаций, проводимых на ОАО «Снежка» установлено, что они не повлияли на содержание лейкоцитов в крови цыплят-бройлеров кросса «Смена-7». А вводимый препарат «Фоспренил» в дозе 0,05 мл/кг не проявил угнетающего действия на лейкопоэз, и в связи с этим фактом количество лейкоцитов у цыплят опытной и контрольной групп не выходило за пределы нормы. Применение Фоспренила в дозе 0,05 мл/кг способствует увеличению гематокрита на 1,84%; количества гемоглобина - на 0,30%; скорости оседания эритроцитов - на 2,51%; количества лейкоцитов - на 1,24%; уменьшению количества эритроцитов - на 1,51%. Гематологические показатели бройлеров кросса «Смена-7» незначительно варьировали с возрастом в контрольной и опытной группах при применении иммуномодулятора «Фоспренил» в дозе 0,05 мл/кг. Максимальное содержание гемоглобина в крови у цыплят-бройлеров наблюдалось в ростовом периоде на 15-е сутки и 25-е сутки, минимальное значение - на 1-5-е сутки.

Корреляционный анализ абсолютной массы и гематологических показателей бройлеров кросса «Смена-7» в контрольной группе и при применении Фоспренила

Корреляционный анализ абсолютной массы птицы и гематологических показателей бройлеров свидетельствует о наличии тесной отрицательной связи между ее абсолютной массой и количеством лейкоцитов в крови (r = _0,75). В 1-й опытной группе и во 2-й опытной группе корреляционный анализ абсолютной массы птицы и гематологических показателей бройлеров свидетельствует о наличии тесной положительной связи между абсолютной массой и количеством гематокрита (r = 0,77) - (r = 0,79), соответственно.

Неспецифическая резистентность организма цыплят-бройлеров кросса «Смена-7» при применении Фоспренила

Известно, что Фоспренил выполняет роль адаптогена, влияет на организм цыплят-бройлеров на системном уровне, включается в процессы метаболизма в организме, что является основой его экологической безвредности.

При применении препарата «Фоспренил» в дозе 0,05 мл/кг уровень общего белка в крови цыплят-бройлеров увеличивается, и в 38-суточном возрасте и составляет 3,02± 0,16г%. Содержание альбуминов в 1-й опытной группе равномерно увеличивается с возрастом птицы. Данный показатель превышает на 8,4% у цыплят-бройлеров, не получавших препарат «Фоспренил». Уровень б_глобулинов увеличился к 38-суточному возрасту и составил 18,91± 0,30, что на 5,3% превышает показатель по отношению к птицам, не получавшим препарат. Содержание в-глобулинов в крови бройлеров кросса «Смена-7» к 38-суточному возрасту - увеличивался в 1,4 раза, а уровень г-глобулинов изменялся равномерно с возрастом птицы в 1,86 раза и составил 24,56± 0,17%. При применении Фоспренила активность лизоцима сыворотки крови равномерно увеличилась в 1,4 раза к 38 суткам. Бактерицидная активность крови бройлеров увеличилась к 38_суточному возрасту в 1,3 раза, фагоцитарная активность крови - 65,44± 0,40%.

Таблица 2 Возрастная динамика гематологических показателей и естественной резистентности у цыплят-бройлеров кросса «Смена-7» при применении Фоспренила, М± m

Примечание: *⁾ различие с предыдущем возрастом достоверно - Р < 0,05

Во 2-й опытной группе цыплят-бройлеров при применении препарата «Фоспренил» в дозе 0,2 мл/кг происходит значительное уменьшение уровня общего белка в крови в 1,35 раза; альбуминов - в 1,23 раза; б-глобулинов - в 1,35 раза; в_глобулинов - в 4,48 раза; г-глобулинов - в 1,45 раза. Активность лизоцима сыворотки крови сокращается в 1,4 раза; бактерицидная активность - в 1,68 раза; фагоцитарная активность - в 2,24 раза. При увеличении дозировки препарата в 4 раза наблюдается значительное угнетение организма бройлеров, что проявляется в уменьшении показателей неспецифической резистентности, (Таблица 2-3).

Выпаивание препарата «Фоспренил» в дозе 0,05 мл/кг вместе с основным рационом во время вакцинации бройлерам кросса «Смена-7» получает положительное отражение в биохимических показателях крови цыплят, выраженное в увеличении уровня общего белка на 0,17%, альбуминов - на 8,4 %, б-глобулинов - на 5,3 %, в_лобулинов - на 1,1 %, г-глобулинов - на 13 %. Применение препарата на 1,2 % повышает активность лизоцима, на 7,9 % бактерицидную активность и на 11,7 % фагоцитарную активность сыворотки крови бройлеров.

Таблица 3 Возрастная динамика биохимических показателей крови у цыплят-бройлеров кросса «Смена-7» (контроль), М± m

Примечание: *⁾ различие с предыдущем возрастом достоверно - Р < 0,05

Морфологические показатели почек бройлеров кросса «Смена-7» в контрольной группе и при применении Фоспренила

У цыплят-бройлеров кросса «Смена-7» при применении Фоспренила в различной дозировке нет принципиальных изменений в топографии, и каудальная доля левой почки лежит в почечной ямке подвздошной кости, медиальная и краниальная доли заходят на поясничный отдел позвоночника. Дорсальная поверхность почки выпуклая, бугорчатая, вентральная поверхность более плоская с вдавлениями.

В 1-й опытной группе в период развития, на 38-е сутки, абсолютная масса правой почки составляла 3,658± 0,342 г (Р?0,05), левой - 3,788± 0,295 г (Р?0,05); во 2-й опытной группе - 4,006± 0,132 г и 4,179± 0,409 г соответственно. Относительная масса почек (в % по Броди) изменялась скачкообразно с возрастом птицы в обеих опытных группах. Максимальное значение относительной массы было зафиксировано в ростовом периоде, на 15 сутки. В 1-й опытной группе на 38-е сутки относительная масса правой почки составила 0,39%, левой - 0,41%; во 2-й опытной группе данный показатель правой почки составил 0,45%, левой - 0,44%. На 38-е сутки в 1-й опытной группе длина правой составила 5,52± 0,08 см, левой - 5,54± 0,15 см; во 2-й опытной группе - 5,46± 0,16 и 5,46± 0,12 см соответственно.

Относительная длина (в % по Броди) правой и левой почек изменялась скачкообразно с возрастом птицы в обеих группах. Максимальное значение относительной массы в контрольной группе было зафиксировано в ростовом периоде, на 15-е сутки, в опытных группах - на 20-е сутки. Относительная ширина правой и левой почек (в % по Броди) изменялась скачкообразно с возрастом птицы во всех группах. Максимальное значение относительной массы в контрольной и опытных группах было зафиксировано в ростовом периоде, на 15 сутки, минимальное - на 10 сутки.

Нами установлено, что абсолютная масса правой и левой почек цыплят-бройлеров кросса «Смена-7» в контрольной и опытной группах, где применялся иммуномодулятор «Фоспренил», достоверно увеличивалась с возрастом птицы. Относительная масса, длина и ширина почек (в % по Броди) изменялась скачкообразно с возрастом птицы. Максимальное значение данных показателей было зафиксировано в ростовом периоде, на 15 сутки. В 1-й опытной группе, при применении иммуномодулятора «Фоспренил», относительная масса почек незначительно превышала значение в контрольной группе; относительная длина и ширина почек в опытной группе была меньше, чем в контрольной группе.

Микрометрические показатели почек бройлеров кросса «Смена-7» в контрольной группе и при применении Фоспренила

Нами установлено, что применение Фоспренила цыплятам-бройлерам кросса «Смеан-7» не оказывает значительных изменений в почках, и паренхима почек, как и у всех птиц, не имеет разделения на корковую и мозговые зоны, а основной морфологической и функциональной единицей почки является нефрон, состоящий из капсулы клубочка, проксимального отдела, петли Генле.

У цыплят-бройлеров в 1-й опытной группе, где применялся иммуномодулятор «Фоспренил», в период развития, на 38-е сутки, толщина капсулы правой почки составляла в среднем 22,80± 0,16 мкм, левой - 22,12± 0,21 мкм; во 2-й опытной группе, соответственно, 22,94± 0,24 и 22,66± 0,15 мкм (Р?0,05).

У петушков в период развития в 1-й опытной группе, где применялся иммуномодулятор, максимальный диаметр почечных телец в правой почке составлял в среднем 90,80± 0,61 мкм, минимальный - 83,62± 0,77 мкм; во 2-й опытной группе - 90,04± 0,68 мкм и 83,94± 0,59 мкм соответственно.

В период развития у цыплят в 1-й опытной группе, где применялся «Фоспренил», максимальный диаметр почечных телец в левой почке составлял в среднем 90,46± 0,85 мкм, минимальный - 84,36± 0,79 мкм; во 2_й опытной группе, соответственно, 90,52± 0,69 мкм и 84,50± 0,85 мкм. Интенсивное увеличение площади почечных телец в контрольной и опытных группах наблюдалось в ростовом периоде, с 10-х по 15-е сутки (Р?0,05), (Рис.2).

Ширина просвета почечных телец правой и левой почек увеличивалась с возрастом птицы. Максимальное значение ширины просвета почечных телец в контрольной и опытных группах было зафиксировано в периоде развития, на 30_е сутки, а интенсивное увеличение наблюдалось в ростовом периоде, с 10-х по 15-е сутки. Возрастные различия являлись статистически достоверными (Р?0,05). У цыплят в 1-й опытной группе в период развития толщина капсулы почечных телец в правой почке составляла 7,12± 0,15 мкм, в левой - 8,04± 0,18 мкм; во 2-й опытной группе к 38 суткам толщина капсулы почечных телец в правой почке составляла 7,84± 0,17 мкм, в левой -8,22± 0,14 мкм. В возрасте одних суток у цыплят-бройлеров кросса «Смена-7» четко выражены прямые канальцы, располагающиеся пучками или по отдельности. Размеры канальцев различные, их площадь меньше площади извитых канальцев. Нашими исследованиями установлено, что развитие морфологических структур почек у цыплят-бройлеров кросса «Смена-7» протекает неравномерно. Наиболее активно органогенез протекает до 20-суточного возраста (Рис. 3).

Рис.2. Динамика площади почечных телец у бройлеров кросса «Смена-7» в контрольной группе и при применении иммуномодулятора «Фоспренил»

Рис.3. Мочевые канальцы почки цыпленка-бройлера кросса «Смена-7» в 15-суточном возрасте. Ув. х200. (Опыт 1). Окр. Гематоксилином и эозином

Рис.4. Дольки почки цыпленка-бройлера кросса «Смена-7» в 30-суточном возрасте. Ув. х200. (Опыт 2). Окр. Гематоксилином и эозином

В почках цыплят-бройлеров мелкие собирательные канальцы выстланы низким призматическим эпителием. Эпителиоциты собирательных канальцев имеют не зернистую цитоплазму, ядра клеток округлой формы. В почках собирательные канальца окружает тонкая соединительнотканная оболочка, ближе к медиальной поверхности почки, где собирательные канальцы впадают в мочеточник.

Со стороны просвета собирательного канальца имеется двухслойный призматический эпителий с четко выраженными границами эпителиоцитов. По мере увеличения диаметра собирательного канальца его эпителиальные клетки становятся высокими, призматическими, с хорошо выраженными границами. Дольки почки имеют коническую форму, направленные широким основанием к поверхности почки, а узким - к центральной части. В центре дольки проходит внутридольковая вена и концевые ветви почечных артерий (Рис. 4). В период развития, на 38 сутки, в 1-й опытной группе, при применении иммуномодулятора, диаметр просвета дистальных канальцев в правой почке составил 24,26± 0,25 мкм; во 2-й опытной группе - 24,12± 0,28 мкм и 24,66± 0,34 мкм (Р?0,05) соответственно.

Первые 10 суток жизни цыпленка - это период, являющийся важнейшим этапом развития организма, и в том числе и почек. В первый месяц жизни цыпленка завершается образование нефронов, происходит рост и дифференцировка всех структур организма. В 1-й опытной группе, при применении иммуномодулятора «Фоспренил», в период развития диаметр проксимальных канальцев в правой почке составил 65,60± 0,28 мкм, в левой - 66,16± 0,33 мкм; во 2-й опытной группе в правой почке - 65,44± 0,40 мкм, в левой - 66,10± 0,31 мкм.

Диаметр просвета проксимальных канальцев в правой и левой почках изменялся неравномерно с возрастом птицы в контрольной и опытных группах. В 1-й опытной группе, при применении иммуномодулятора «Фоспренил», в период развития диаметр дистальных канальцев в правой почке составил 49,62± 0,45 мкм, в левой - 50,30± 0,49 мкм; во 2-й опытной группе - 49,22± 0,48 мкм и 50,26± 0,49 мкм (Р?0,05) соответственно.

Рис.5. Динамика площади проксимальных канальцев у бройлеров кросса «Смена-7» в контрольной группе и при применении иммуномодулятора «Фоспренил»

Площадь проксимальных канальцев в правой и левой почках скачкообразно изменялась с возрастом. Максимальное значение площади проксимальных канальцев в контрольной и 1-й опытной группе было зафиксировано в ростовом периоде, на 15-е сутки (Р?0,05), (Рис.5). Площадь дистальных канальцев в правой и левой почках скачкообразно изменялась с возрастом птицы во всех группах. Максимальное значение площади дистальных канальцев в контрольной и опытных группах было зафиксировано в периоде развития, на 30 сутки.

В результате нашего исследования установлено, что Фоспренил в дозе 0,05 мл/кг оказывает интенсивное увеличение микрометрических показателей почек у цыплят-бройлеров кросса «Смена-7» в возрастном аспекте: площади и ширины почечных телец в ростовом периоде, с 10-х по 15-е сутки. Возрастные различия являлись статистически достоверными (Р?0,05), (Рис.6).

Рис. 6. Динамика площади почечных телец у бройлеров кросса «Смена-7» в контрольной группе и при применении иммуномодулятора «Фоспренил»

Диаметр просвета проксимальных и дистальных канальцев в правой и левой почках изменялся неравномерно, а площадь проксимальных и дистальных канальцев - скачкообразно с возрастом птицы как в контрольной, так и в опытной группах (Р?0,05). Максимальное значение площади проксимальных канальцев в обеих группах было зафиксировано в ростовом периоде, на 15-е сутки, дистальных канальцев - в периоде развития, на 30-е сутки. Полученные нами данные, еще раз подтверждают известные данные о том, что в дистальных извитых канальцах почек у птиц, осуществляется всасывание ионов натрия, калия, воды и других веществ, а также тем, что дистальные отделы извитых канальцев регулируют и поддерживают постоянство концентрации ионов натрия и калия в организме.

Биохимические показатели ткани почек у бройлеров кросса «Смена-7» в контрольной группе и при применении Фоспренила

Содержание мочевины в ткани правой и левой почек изменялось неравномерно с возрастом птицы в контрольной и опытных группах. Максимальное значение было зафиксировано в периоде развития, на 30-е сутки, минимальное значение - в ростовом периоде, на 10-е сутки. В 1-й опытной группе, в период развития, содержание мочевой кислоты в ткани правой почки составило 75,80± 2,48 мкмоль/л/г, в левой - 75,00± 5,04 мкмоль/л/г; во 2-й опытной группе - 75,60± 1,94 мкмоль/л/г и 75,40± 4,06 мкмоль/л/г соответственно.

Содержание уровня глюкозы в ткани и крови чрезвычайно важно для диагностики энергетического обмена. Препарат «Фоспренил» способствует ускоренной утилизации глюкозы организмом цыплят-бройлеров кросса «Смена-7», ремонтного молодняка и кур, что привело к снижению ее уровня содержания в сыворотке крови. Содержание глюкозы в ткани правой и левой почек изменялось неравномерно в контрольной и опытных группах. Интенсивное увеличение количества глюкозы в ткани почек наблюдалось в период с 1-х по 10-е сутки, затем ее содержание оставалось приблизительно на одном уровне, в период с 30-х по 38-е сутки отмечалось уменьшение содержания глюкозы. В период развития, на 38-е сутки, в 1-й опытной группе содержание глюкозы в ткани правой почки составило 4,48± 0,11 ммоль/л/г, в ткани левой почки - 4,40± 0,10 ммоль/л/г; во 2-й опытной группе - 4,46± 0,11 ммоль/л/г и 4,39± 0,13 ммоль/л/г соответственно.

При сопоставлении результатов исследования - уровня мочевины, мочевой кислоты и глюкозы в почках цыплят-бройлеров кросса «Смена-7» с данными этих показателей в крови выявлено, что содержание мочевой кислоты, повышаясь в крови, снижается в почечной ткани. В то же время динамика мочевины и динамика глюкозы не только не совпадает с динамикой мочевой кислоты, но и имеет свои особенности для каждого из этих показателей.

Биохимические показатели тканей почек у цыплят-бройлеров кросса «Смена-7» изменялись под влиянием Фоспренила в дозе 0,05 мл/кг и с возрастом неравномерно и незначительно: увеличение содержания мочевины - на 2,77%, глюкозы - на 1,32%, уменьшение содержания мочевой кислоты - на 0,40%. Статистически достоверных различий между контрольной и опытной группой не выявлено.

Максимальное содержание в ткани почек мочевины и глюкозы в обеих опытных группах было отмечено в периоде развития, на 30-е сутки, минимальное значение - с 1-х по 10-е сутки, максимальное содержание в ткани почек мочевой кислоты - с 1-х по 5-е сутки, и на 38-е сутки, минимальное - на 15-е сутки. На наш взгляд, высокие значения уровня глюкозы в ткани почек у цыплят-бройлеров кросса «Смена-7» (петушков) в раннем постнатальном онтогенезе, могут быть вызваны их биологической сущностью и способностью к самосохранению.

Корреляционный анализ абсолютной массы и микрометрических, биохимических показателей ткани почек у бройлеров кросса «Смена-7»

В контрольной группе отмечено наличие тесной положительной корреляционной связи между абсолютной массой почек и площадью почечных телец, площадью проксимальных канальцев, площадью дистальных канальцев (r = 0,90; 0,62; 0,81). Значение коэффициента корреляции свидетельствует о тесной положительной связи между площадью почечных телец и площадью проксимальных канальцев, площадью дистальных канальцев (r = 0,87; 0,92). Нами отмечена тесная положительная корреляционная связь между площадью проксимальных канальцев и площадью дистальных канальцев (r = 0,88). У цыплят в 1-й и 2-й опытной группах корреляционный анализ абсолютной массы и микрометрических показателей почек свидетельствует о наличии тесной положительной корреляционной связи между массой почек и площадью почечных телец, площадью проксимальных канальцев, площадью дистальных канальцев (r = 0,92; 0,57; 0,83) и (r = 0,92; 0,55; 0,87) соответственно. Значение коэффициента корреляции свидетельствует о тесной положительной связи между площадью почечных телец и площадью проксимальных канальцев, площадью дистальных канальцев (r = 0,79; 0,85) и (r = 0,78; 0,89). Нами отмечена тесная положительная корреляционная связь между площадью проксимальных канальцев и площадью дистальных канальцев (r = 0,79) и (r = 0,72) соответственно.

В 1-й опытной и во 2-й опытной группах корреляционный анализ абсолютной массы и биохимических показателей ткани почек свидетельствует о наличии тесной положительной корреляционной связи между массой почек и содержанием в ткани почек мочевины (r = 0,84) и (r = 0,83). Значение коэффициента корреляции свидетельствует о тесной отрицательной связи между содержанием в ткани почек мочевой кислоты и глюкозы (r = - 0,89) и (r = - 0,90), соответственно.

фоспренил бройлер биохимический почка

Выводы

1. Применение продукта фосфорилирования полипренолов хвои - Фоспренила в дозе 0,05 мл/кг для коррекции резистентности организма, в день вакцинации, вместе с основным рационом, бройлерам кросса «Смена-7» способствует в ростовом периоде, на 15-е и 25-е сутки неравномерному изменению в крови:

- гематологических показателей (достоверному увеличению количества гемоглобина, гематокрита, скорости оседания эритроцитов, количества лейкоцитов и незначительному уменьшению количества эритроцитов);