Применение антисептической губки для профилактики послеродового эндометрита у коров

Размещено на http://www.allbest.ru/

Размещено на http://www.allbest.ru/

Автореферат

диссертации на соискание учёной степени кандидата ветеринарных наук

Применение антисептической губки для профилактики послеродового эндометрита у коров

06. 02. 06 - ветеринарное акушерство и биотехника репродукции животных

Бледных Лариса Валентиновна

Казань - 2011

Работа выполнена на кафедре хирургии и акушерства ФГОУ ВПО «Вятская государственная сельскохозяйственная академия».

Научный руководитель: доктор ветеринарных наук, профессор Конопельцев Игорь Геннадьевич

Ведущая организация: ФГОУ ВПО «Уральская государственная сельскохозяйственная академия».

1. Общая характеристика работы

1.1 Актуальность темы

Доктрина продовольственной безопасности Российской Федерации является одним из основных документов, который нацеливает научную общественность и специалистов сельскохозяйственных предприятий на переосмысление настоящего и будущего состояния различных отраслей животноводства. Необходимо продолжать работу над проблемой повышения адаптационных возможностей коров с целью выравнивания показателей высокой продуктивности и функции репродуктивной системы на фоне удлинения срока хозяйственного использования маточного поголовья.

Существенным тормозом в интенсивном использовании генетического потенциала скота является наиболее часто регистрируемый послеродовой эндометрит, возникающий у коров как после патологических, так и нормальных родов (Варганов А.И., 1988; Григорьева Т.Е., 1988; Нежданов А.Г. и др., 1994; Кузьмич Р.Г., 2000; Лободин К.А., 2010; Племяшов К.В., 2010; Gamcik Р. al., 1993; и др.).

В этиопатогенезе воспалительной реакции в слизистом слое матки особое место отводится различным микроорганизмам, состоянию иммунной системы и системе детоксикации (Гугушвили Н.Н., 2000; Турченко А.Н., 2001; Колчина А.Ф., 2001; Степанова И.П., 2001; Ахмедов В.Т., 2009; и др.).

Тенденция роста акушерских заболеваний и наносимый ими значительный экономический ущерб диктуют необходимость поиска новых научных инновационных разработок, направленных на существенное снижение числа животных с акушерской патологией, и внедрения их в производство (Безбородин В.В. и др, 2000; Гавриш В.Г., 2001; и др.).

Приоритетом должны пользоваться новые лекарственные средства и их различные формы изготовления, гарантирующие высокую профилактическую эффективность, обладающие несколькими позитивными свойствами и позволяющие оптимизировать репродуктивную функцию высокопродуктивных животных.

1.2 Цель и задачи исследований

Целью настоящей работы явилось научное обоснование применения антисептической губки для профилактики послеродового эндометрита у коров. Исходя из поставленной цели, на разрешение были поставлены следующие задачи:

- изучить степень возникновения у нетелей и коров аборта, задержания последа и послеродового эндометрита на предприятиях АПК Кировской области

- изучить иммунобиохимические показатели крови у коров в конце сухостоя, при нормальном и патологическом течении послеродового периода;

- определить качественный состав микроорганизмов в маточном содержимом в послеродовой период и изучить их чувствительность к антимикробным средствам;

- изучить особенности фармакокинетики фуразолидона на фоне внутримачного введения коровам антисептической губки;

- обосновать возможность применения антисептической губки для профилактики послеродового эндометрита и определить ее профилактическую и экономическую эффективность.

1.3 Научная новизна

Впервые экспериментально доказана возможность применения антисептической губки для профилактики послеродового эндометрита у высокопродуктивных коров. Определена ее профилактическая и экономическая эффективность при послеродовом эндометрите как после нормальных, так и патологических родов. Изучено влияние антисептической губки на иммунобиохимические показатели крови и на последующую воспроизводительную способность животных. Установлены различия в динамике проявления аборта, задержания последа и послеродового эндометрита у нетелей и коров. Показано, что одним из звеньев патогенеза послеродового эндометрита является высокий уровень в крови у коров веществ низкой и средней молекулярной массы. Научная новизна работы обозначена заявкой на изобретение «Способ профилактики эндометрита у коров» № 2009118754/15 (025776) в Роспатент ФГУ «Федеральный институт промышленной собственности Федеральной службы по интеллектуальной собственности, патентам и товарным знакам».

1.4 Практическая значимость

Разработан способ профилактики послеродового эндометрита у коров на основе применения антисептической губки, который позволяет повысить эффективность, выполняемых ветеринарных мероприятий при данной акушерской патологии и оптимизировать воспроизводительную функцию у животных. На основании выполненных исследований разработана «Временная инструкция по применению антисептической губки для профилактики послеродового эндометрита у коров», которая утверждена проректором по научной работе ФГОУ ВПО «Вятская ГСХА» д.т.н., профессором В.Г. Мохнаткиным. Результаты исследований могут быть использованы в молочном и мясном скотоводстве в рамках проведения акушерской диспансеризации, а также в качестве информационного материала при чтении лекций и проведении практических занятий со студентами факультетов ветеринарной медицины высших учебных и средних специальных заведений, со слушателями Институтов переподготовки и повышения квалификации кадров АПК.

1.5 Апробация работы и реализация результатов исследований

Основные положения диссертации доложены и одобрены на Международной научно - практической конференции «Актуальные вопросы ветеринарной медицины» (Екатеринбург, 2007), Всероссийской научно-практической конференции «Достижения ветеринарной науки и практики» (Киров, 2008), Международной научно-практической конференции, посвященной 100-летию со дня рождения профессора В.А. Акатова «Современные проблемы ветеринарного обеспечения репродуктивного здоровья животных (Воронеж, 2009), Международной научно-практической конференции, посвященной 100-летию со дня рождения П.Г. Петского «Современные научные тенденции в животноводстве» (Киров, 2009), Международной научно-практической конференции «Инновационные подходы в ветеринарии, биологии и экологии» (Троицк, 2011).

1.6 Публикации

Основные положения диссертации изложены в 11 печатных работах, опубликованных в журналах, сборниках, материалах международных, Всероссийских конференций, из которых 2 в изданиях, рекомендованных ВАК РФ.

1.7 Объём и структура диссертации

Материал диссертации изложен на 123 странице компьютерного текста и состоит из введения, обзора литературы, материала и методов исследования, результатов исследований и их обсуждения, выводов, практических предложений и приложения. Список использованной литературы включает 182 источника, в том числе 28 иностранных авторов. Диссертационная работа иллюстрирована 21 таблицей и 5 рисунками.

1.8 Основные положения, выносимые на защиту

- на сельскохозяйственных предприятиях Кировской области наиболее часто среди акушерской патологии у коров диагностируются задержание последа и послеродовой эндометрит;

- определенная роль в патогенезе послеродового острого эндометрита принадлежит веществам низкой и средней молекулярной массы;

- в первые часы после отела матка коров бывает контаминирована ассоциациями сапрофитных и условно-патогенных микроорганизмов, которые проявляют различную чувствительность к антимикробным средствам;

- антисептическая губка обладает высокой профилактической и экономической эффективностью при послеродовом эндометрите.

2. Материал и методы исследования

Научно-исследовательская работа проводилась в период 2006…2011 гг. Клинико-экспериментальные исследования выполняли в условиях животноводческих комплексов ФГУП учхоз «Чистые пруды» и ЗАО «Агрофирма» Дороничи» отделение Пасегово Кировской области на высокопродуктивных (5,5…8 тыс. кг) коровах черно-пестрой голштинизированной породы. В рацион у животных в осенне-зимне-весенний период года входили сено, сенаж, силос, корнеплоды, патока, концентраты и жмых. Основу летнего рациона составляли зеленые корма и концентраты. Доение коров осуществлялось два раза в течение дня с помощью трехтактных аппаратов в молокопровод. Искусственное осеменение животных проводилось маноцервикальным или цервикальным с ректальной фиксацией шейки матки способами.

Изучение вопроса о численности нетелей и коров на сельхозпредприятиях Кировской области и формах проявления у них акушерской патологии осуществляли на основании статистической документации, полученной в Управлении ветеринарии Кировской области, а также непосредственно на животноводческом комплексе ФГУП учхоз «Чистые пруды» Вятской ГСХА. Контроль за состоянием репродуктивных органов у коров в различные физиологические периоды проводили согласно «Методическим указаниям по диагностике, терапии и профилактике болезней органов размножения у коров и телок» (М.,2000).

Материалом для бактериологических исследований служили пробы содержимого матки (n=3), которые получали в день отела, через 2, 4, 6, 10 и 14 дней послеродового периода. Для выделения микроорганизмов проводили посевы на среды Эндо, кровяной агар, энтерококкагар, висмут-сульфитагар, Плоскирева, железосульфитную, Сабуро, Блаурокка и Кристенсена, тиогликолевую и желточно-солевой агар. Выделенные культуры микроорганизмов оценивали на чувствительность к антимикробным средствам в соответствии с «Методическими указаниями по определению чувствительности микроорганизмов к антибиотикам путем диффузии в агар с использованием дисков» (1983).

Определение антимикробной активности фуразолидона к E.coli, Staph. aureus, Proteus vulgaris, гемолитическим дипло- и стрептококкам выполняли методом серийных разведений основного раствора нитрофурана, приготовленного на диметилсульфоксиде с последующим посевом выращенных культур на мясопептонный агар в чашках Петри.

Кровь для иммунобиохимических исследований получали от коров (n=10) из яремной вены за 10 дней до предполагаемого отела, в день родов и на 10-й и 30-й дни послеродового периода. В сыворотке крови определяли общий белок рефрактометрическим методом, белковые фракции - нефелометрическим методом по Оллу и Маккорду, в модификации С.А. Карпюка (1962), общие иммуноглобулины с применением Na₂SО₄ (б/в, х.ч.), циркулирующие иммунные комплексы по П.В. Барановскому и В.С. Данильшину (1983), активность аланинаминотрансферазы и аспартатаминотрансферазы унифицированным методом Райтмана-Френкеля.

Содержание веществ низкой и средней молекулярной массы (ВНСММ) изучали в цельной крови у коров с разным течением послеродового периода и на фоне применения антисептической губки. Для этого из животных сформировали три группы аналогов. В первую опытную включили коров, у которых после отела наблюдалось задержание последа. Им после его оперативного отделения однократно в каждый рог матки вводили антисептическую губку. Послеродовой период у этих животных протекал без осложнений. Вторую контрольную группу составили коровы с нормальным течением родового процесса без угрозы развития послеродовых осложнений и оставленных без профилактической обработки. В третью контрольную группу вошли коровы с клиническими признаками послеродового острого гнойно-катарального эндометрита. Кровь для исследований брали из яремной вены в день отела и на 15…20-е сутки послеродового периода. Уровень содержания ВНСММ в плазме и эритроцитах по методу М.Я. Малаховой (1995) в модификации И.П. Степановой (2004). Расчет суммарного содержания ВНСММ в плазме и эритроцитах крови осуществляли по формуле

S= 4 х еD_(238-298),

где D - оптическая плотность, усл.ед.; 4 - шаг измерения.

Для расчета критерия интоксикации (КИ), отражающего баланс между накоплением токсинов в крови и связыванием их альбумином и эритроцитами, определяли общую концентрацию альбумина в сыворотке крови в реакции с бромкрезоловым зеленым. Расчет критерия интоксикации проводили по формуле КИ=100 х S (плазма) / S (эритроциты) х ОКА,

где S (плазма) и S (эритроциты) - содержание ВНСММ в плазме и эритроцитах соответственно, усл.ед.²; ОКА - общая концентрация альбумина плазмы крови, г/л.

Антисептическая, гемостатическая губка представляет собой сухую пористую массу, хорошо растворимую в воде и нерастворимую в спирте и органических растворителях, размером 30 х 10 см. Одна пластина антисептической губки содержит фуразолидон, сульфанол НП-3, желатин пищевой. В течение 10 сек. она способна впитывать жидкость в количествах в несколько раз превышающих собственный вес. Технология изготовления губки была разработана совместно с к.м.н. Е.М. Репняковой (ФГУ Кировский НИИ гематологии и переливания крови») на основе «Инструкции по медицинскому применению антисептической губки с канамицином», утвержденной и.о. Руководителя Департамента Государственного контроля лекарственных средств и медицинской техники Минздрава России А.А. Топорковым 7 декабря 2003 г.

Для изучения регенеративного и гемостатического действия антисептической губки провели эксперимент на белых разнополых крысах в возрасте 2-х лет и живой массой 220…260 г. Для этого воспользовались методикой планиметрического метода по Л.Н. Поповой, суть которого состоит в определении характера и темпов ранозаживления путем регистрации скорости уменьшения площади раневой поверхности во времени (Фенчин К.М., 1979). Для эксперимента лабораторные животные были разделены на три группы - одну опытную и две контрольные по пять в каждой. У наркотизированных эфиром крыс на спине удаляли волосяной покров, участок обрабатывали 70° этиловым спиртом и используя трафарет наносили полнослойные кожные раны площадью 15 х 15 мм². Для изучения гемостатического действия животным опытной группы на раневую поверхность сразу же применяли аппликации антисептической губки и учитывали время остановки кровотечения в минутах. Животным контрольной группы кровотечение останавливали с помощью ватно-марлевых тампонов.

С целью изучения регенеративного действия губки крысам опытной группы на раневую поверхность применяли аппликации антисептической губки, которую фиксировали при помощи бинтовой повязки. Крысам первой контрольной группы раны ежедневно смазывали мазью «Левомеколь», а животных второй контрольной группы оставляли без обработки. На полиэтиленовой пленке маркером фиксировали контур раневой поверхности и измеряли ее площадь при помощи миллиметровой бумаги путем подсчета количества квадратных миллиметров внутри контура. Скорость заживления раневого дефекта за сутки в % рассчитывали по формуле

(S - Sn) х 100 / S х t,

где S - площадь раны при предыдущем измерении; Sn - площадь раны при данном измерении; t - число дней между измерениями.

Для составления цитограмм и их количественного анализа на второй день после нанесения ран на обезжиренные предметные стекла из раневого секрета делали мазки методом поверхностной биопсии. Препараты фиксировали в жидкости Никифорова в течение 20-ти минут, затем окрашивали азур-эозином по Романовскому 25 минут.

С целью установления пролонгированных свойств антисептической губки при внутриматочном введении проводили количественный анализ содержания фуразолидона в пробах маточных выделений спектрофотометрическим методом определения концентрации нитрофуранов в органах и тканях по Бузарду в модификации Сонина (1962). Для этого сформировали две группы животных - опытную (n=5) и контрольную (n=5). Коровам опытной группы после оперативного отделения последа однократно внутриматочно вводили две антисептические губки, а коровам контрольной группы - пять фуразолидоновых палочек также однократно. После чего ежедневно из канала шейки матки брали пробы в количестве 5,0 мл спустя 4 часа после введения препаратов и на протяжении последующих 14 дней послеродового периода. Пробы сразу подвергали замораживанию при температуре -18^оС и в последующем все исследования осуществляли согласно методике при постоянном охлаждении и используя охлажденные реактивы.

Наличие остаточных количеств фуразолидона в молоке устанавливали спектрофотометрическим методом определения концентрации нитрофуранов в крови и молоке на спектрофотометре «Спекол-1500» по методике Бузарда в модификации Сонина (1962). С этой целью у коров опытной (антисептическая губка, n=5) и контрольной (фуразолидоновые палочки, n=5) групп ежедневно из одной четверти вымени брали пробы молока в количестве 20,0 мл спустя 6 часов после введения препаратов и последующих 10-ти дней после отела. Свежеполученные пробы молока после охлаждения до температуры 3…5^о С подвергали количественному анализу на содержание фуразолидона.

Эффективность применения антисептической губки для профилактики послеродового эндометрита при нормальном отеле изучали на высокопродуктивных коровах черно-пестрой голштинизированной породы, которых по принципу парных аналогов разделили на две группы. Опытным животным (n=25) сразу после родов однократно в полость матки назначали одну пластину губки. Коровам контрольной группы (n=25) с самопроизвольным отделением последа профилактическую обработку не проводили.

Для изучения эффективности применения антисептической губки для профилактики послеродового эндометрита после оперативного отделения плодных оболочек животные по принципу аналогов были разделены на опытную и контрольную группы. Коровам опытной группы (n=22) после удаления плодных оболочек однократно в каждый из рогов матки вводили по одной губке. Животным контрольной группы (n=22) в этом случае с профилактической целью вводили внутриматочно однократно 5 суппозиториев неофура.

Расчет экономической эффективности применения антисептической губки проводили согласно «Методике определения экономической эффективности ветеринарных мероприятий» (М., 1997). Статистическая обработка материала выполнена на персональном компьютере IBM “Pentium IV” в операционной системе “Windows-2000” с помощью пакета программ АSD.

3. Результаты собственных исследований

3.1 Численность маточного поголовья крупного рогатого скота на сельскохозяйственных предприятиях Кировской области и формы проявления акушерских болезней у коров и нетелей

Общая численность коров и нетелей на предприятиях АПК Кировской области в период с 2008 по 2010 года снизилась на 7,3%.

В период 2008… 2010 гг. в хозяйствах Кировской области проанализировали частоту случаев у коров и нетелей аборта, задержания последа и послеродового острого эндометрита. Было установлено, что стабильно не высоким оставался показатель абортировавших коров и нетелей (2,1%). В среднем нарушения в течении заключительной стадии родов за анализируемый период времени отмечали у 10,8% маточного поголовья.

Согласно статистическим данным, в среднем 14…16 тысяч коров переболели эндометритом в течение года (14,3 %).

Вместе с тем в 2006-2007 гг. в родильном отделении животноводческого комплекса ФГУП учхоз «Чистые пруды» нами был проведен мониторинг задержания последа и послеродового острого эндометрита у высокопродуктивных коров черно-пестрой голштинизированной породы. На основании клинического осмотра, вагинального и ректального исследований животных было установлено, что у 39,8% коров наблюдалось нарушение течения заключительной стадии родов, а у 49,4% - диагностировали воспаление эндометрия.

антисептическая губка эндометрит профилактика

3.2 Сравнительная оценка динамики иммунобиохимических показателей крови здоровых и заболевших послеродовым эндометритом коров

В результате исследования сыворотки крови было установлено, что достоверной разницы в показателях общего белка, a-глобулинов, а также активности ферментов аланин- и аспартатаминотрансфераз у здоровых и больных животных во все периоды наблюдений не отмечалось.

Вместе с тем у больных коров к 30-му дню послеродового периода происходит значительное снижение в крови уровня альбуминовой фракции (на 26,4%). У клинически здоровых животных уровень альбуминовой фракции белка к 30-му дню превышает аналогичный показатель у больных животных на 29,3% (Р < 0,001). Кроме того, к 30-му дню послеродового периода в крови у заболевших коров отмечается более высокий уровень b--- и g--- глобулинов, который на 35 и 5% соответственно превосходит аналогичный показатель у клинически здоровых животных (Р < 0,001; Р < 0,05).

Количество общих иммуноглобулинов в сыворотке крови больных эндометритом коров к 30-му дню на 46,8% превышает их количество у здоровых животных (Р < 0,001).

Сопоставляя количественные показатели циркулирующих иммунных комплексов, нами было отмечено, что у здоровых животных происходило их закономерное снижение в течение всего периода инволюции репродуктивных органов. Обратную картину наблюдали у коров, у которых впоследствии развился послеродовой эндометрит. Значение уровня циркулирующих иммунных комплексов, как малого и среднего, так и крупного размеров на 10-й день послеродового периода имел более высокое значение (С₃ на 48,9%, С₄ на 39,8%) по сравнению с аналогичным показателем у клинически здоровых коров в эти же сроки исследования.

Провели сравнительный анализ содержания веществ низко- и среднемолекулярной массы (ВНСММ) в крови здоровых и больных послеродовым эндометритом животных (таблица 1).

Таблица 1 - Уровень эндотоксикоза и общая концентрация альбумина (ОКА) в крови здоровых и больных эндометритом животных (n=7)

Показатель	Сроки взятия крови
	День отела	15-20 день после отела
Содержание ВНСММ, усл.ед.2: плазма эритроциты	3,11±0,26 3,25±0,11 16,27±0,58 17,43±0,02	2,10±0,22 5,5±0,34* 14,50±0,94 21,37±0,79*
ОКА, г/л	38,02±2,25 34,33±1,08	40,35±1,93 29,01±1,14*
Критерий интоксикации, усл.ед.	0,50±0,02 0,54±0,08	0,35±0,06 0,91±0,06*

* Р < 0,001- достоверно по отношению к показателям здоровых животных

¦ Примечание: в числителе - показатели крови здоровых животных; в знаменателе - показатели крови коров, больных послеродовым эндометритом

Содержание ВНСММ в плазме и эритроцитах, общая концентрация альбумина и критерий интоксикации (табл. 1) в день отела у животных всех экспериментальных групп имел приблизительно одинаковые значения. На 15…20-й день после отела наметилась различная динамика в изучаемых показателях у клинически здоровых и больных острым эндометритом коров. В организме здоровых коров отмечали тенденцию постепенного снижения концентрации веществ низкой и средней молекулярной массы, как в плазме (с 3,11 до 2,10 усл.ед.²), так и в эритроцитах (с 16,27 до 14,50 усл.ед.²). У животных с послеродовым гнойно-катаральным эндометритом к середине послеродового периода наблюдалось достоверное увеличение содержания ВНСММ по сравнению с исходным значением, как в плазме (в 1,7 раза), так и в эритроцитах (1,2 раза). Уровень эндогенных веществ, циркулирующих в кровеносном русле у животных с острым воспалением слизистой оболочки матки по отношению к интактным коровам на дату последнего исследования, был существенно выше (в плазме в 2,6 раза, а в эритроцитах в 1,5 раза). Содержание альбумина в сыворотке крови заболевших коров к 20 дню после отела было на 28,1% ниже, чем у здоровых животных, а критерий интоксикации в этот же период был выше на 61,5%.

3.3 Качественный состав микроорганизмов матки у коров в послеродовой период и их чувствительность к антимикробным средствам

В результате выполненных микробиологических исследований был сделан вывод о том, что уже в первые часы после отела матка коров контаминирована микрофлорой, которая представлена, главным образом, ассоциациями сапрофитных и условно-патогенных микроорганизмов. Их качественный состав начинал меняться к 4-му дню послеродового периода, когда происходило интенсивное размножение условно-патогенной и патогенной микрофлоры. При этом во всех пробах обнаруживали гемолитическую кишечную палочку, золотистого стафилококка, гемолитических стрепто- и диплококков, сульфитредуцирующих клостридий. Эти же микроорганизмы присутствовали в экссудате заболевших эндометритом коров. Наличие вульгарного протея свидетельствовало о гнилостных процессах в полости матки и обусловливало продолжительное течение воспалительного процесса.

Выделенная из матки гемолитическая кишечная палочка оказалась высокочувствительной к антибиотикам цефалоспоринового ряда, ципрофлоксацину, левомицетину, гентамицину и фуразолидону и нечувствительной к эритромицину, тетрациклину, стрептомицину, пенициллину, линкомицину, рифампициллину. Золотистый стафилококк был чувствителен к ципрофлоксацину, левомицетину, канамицину, гентамицину, цефалоспоринам и фуразолидону и устойчив к действию эритромицина, тетрациклина, стрептомицина, пенициллина, линкомицина, рифампициллина. Культуры вульгарного протея оказались чувствительными лишь к ципрофлоксацину, цефалоспоринам и фуразолидону и проявили устойчивость к остальным тест-антибиотикам. Наименьшую устойчивость к антимикробным средствам проявили культуры гемолитических дипло- и стрептококков. У них зоны ингибиции роста были минимальными вокруг дисков, пропитанных цефалоспоринами и стрептомицином.

3.4 Научное обоснование применения антисептической губки с фуразолидоном для профилактики послеродового эндометрита у коров

3.4.1 Определение антимикробной активности фуразолидона методом серийных разведений

Размещено на http://www.allbest.ru/

Размещено на http://www.allbest.ru/

Результаты исследований по определению величины антимикробной активности к различным микроорганизмам представлены на рисунке 1.

Как показали результаты исследований (рис. 1), в минимальной концентрации (0,38мкг/мл) фуразолидон подавлял размножение золотистого стафилококка. Наименьшую антимикробную активность фуразолидон проявил в отношении вульгарного протея - бактериостатическая и бактерицидная концентрация препарата составила 100,0 мкг/мл. Активное размножение E.coli и Streptococcus hаemolyticus подавлял нитрофуран в концентрации 6,25 и 12,5 мкг/мл соответственно, а бактерицидно действовал на данные микроорганизмы в концентрациях 12,5 и 25,0 мкг/мл.

3.4.2 Изучение регенеративного и гемостатического действия антисептической губки с фуразолидоном

Было показано, что антисептическая губка обладает гемостатическими свойствами, и использование ее обеспечивает остановку кровотечения в течение менее 3-х минут.

С целью изучения регенеративного действия губки крысам опытной группы на раневую поверхность применяли аппликации антисептической губки, которую фиксировали при помощи бинтовой повязки. Крысам первой контрольной группы раны ежедневно смазывали мазью «Левомеколь», а животных второй контрольной группы оставляли без обработки.

Было установлено, что процесс регенерации кожных ран с аппликацией на них антисептической губки происходил быстрее, чем у крыс, оставленных без обработки, и достоверно не отличался от такового у животных, которым применяли «Левомеколь». У опытных крыс быстрее происходило отхождение струпа, отмечалась меньшая воспалительная реакция окружающих рану тканей и после отхождения струпа была более выражена контракция раны, что характеризовалось резким уменьшением площади раневого дефекта по отношению к исходному значению (на 86,9%). Следует отметить тот факт, что скорость заживления ран с аппликациями губки была достоверно выше (в 1,5 раза) по сравнению с необработанными ранами и не отличалась от крыс, обработанных мазью. В дальнейшем в более сжатые сроки происходил и процесс эпителизации.

3.4.3 Изучение пролонгированных свойств антисептической губки

По результатам проведеного химического анализа уста-новили, что после введения антисептической губки средний уровень концентрации фуразо-лидона в пробах маточного содержимого с 1-го по 7-й дни после отела был стабилен и находился в пределах от 134,3 ±--2,17 до 125,4 ±--2,61 мкг/г. Начиная с 8-го дня концентрация резко снижалась до 26,4±2,8 мкг/г, на 9-й день она составляла 11,9±1,92 мкг/г, а на 10-й день послеродового периода - 3,4±1,06 мкг/г. На 11-й день следов производного нитрофурана в пробах обнаружено не было (рис. 2).

Размещено на http://www.allbest.ru/

Размещено на http://www.allbest.ru/

Анализ содержания фуразолидона в пробах маточных выделений, взятых от коров после внутриматочного применения фуразолидоновых палочек показал, что средняя концентрация нитрофурана спустя 4 часа после введения препарата составила 121,2 2,42 мкг/г, на второй день она снизилась до 53,4 1,73 мкг/г, а на третьи сутки - до 28,7±0,50 мкг/г. На четвертый день фуразолидон в пробах отсутствовал.

3.4.4 Определение остаточных количеств фуразолидона в молоке при внутриматочном введении антисептической губки

Результаты исследования представлены на рисунке 3.

Размещено на http://www.allbest.ru/

Размещено на http://www.allbest.ru/

Количественный анализ молока на определение остаточных количеств фуразолидона показал следующее (рис.3). У коров, которым с профилактической целью применяли антисептическую губку, средняя концентрация нитрофурана в молоке спустя 6 часов после введения препарата составила 9,16 мкг/мл. В дальнейшем происходило равномерное снижение концентрации фуразолидона - на 2-й день она равнялась 8,34 мкг/мл, на 3-й - 1,72 мкг/мл, на 4-й день обнаружены лишь его следы (0,21 мкг/мл).

Спустя 6 часов после введения суппозиторий концентрация фуразолидона в молоке составила 9,18 мкг/мл, в пробах молока, взятых на второй день после отела, она снизилась до 7,06 мкг/мл, а на третьи сутки до 0,29 мкг/мл. На четвертый день количественный анализ показал, что остаточных количеств производного нитрофурана в молоке обнаружено не было.

3.4.5 Эффективность применения антисептической губки для профилактики послеродового эндометрита у коров после нормальных родов

Эффективность применения антисептической губки для профилактики эндометрита у коров после нормального отела представлены в таблице 2.

Использование антисептической губки (табл. 2) для профилактики послеродового эндометрита на фоне самопроизвольного отделения последа на 24% снижает риск возникновения воспалительной реакции в эндометрии у коров в послеродовой период. Кроме того, назначение губки положительно сказалось на восстановлении воспроизводительной способности коров после отела.

Таблица 2 - Профилактическая эффективность антисептической губки после нормального отела у коров (n=25)

Показатель	Антисептическая губка	Без препарата
Не заболело эндометритом, коров/%	22/88,0	16/64,0
Оплодотворилось после первого осеменения из числа не заболевших, коров/%	14/63,6	5/20,0
Оплодотворилось в течение года, коров %	23/92	19/76
Коэффициент оплодотворения	1,4 0,1*	2,32 0,2
Дней бесплодия	46,1 6,9*	84,9 8,3

* Р<0,001 - достоверно по отношению к контролю

Так после первого осеменения в опытной группе, из числа не заболевших коров, оплодотворилось 63,6%, что на 43,6% больше, чем в контрольной группе. Для оплодотворения не заболевших коров на фоне применения антисептической губки в 1,7 раза требовалось меньше количество осеменений по сравнению с животными, оставленными без профилактической обработки, и у них в 1,8 раза короче был период бесплодия. У не заболевших коров, обработанных антисептической губкой, в сравнении с клинически здоровыми животными, в крови был более высоким уровень общего белка (на 3,2%) и альбуминов (на 9,8%). Напротив несколько ниже были значения ??- глобулинов (на 2,8%), общих иммуноглобулинов (на 12%), циркулирующих иммунных комплексов различного размера (на 2,4 и 11,1%). При использовании антисептической губки для профилактики послеродового эндометрита у коров на фоне самопроизвольного отделения последа предотвращенный ущерб в расчете на одно животное составил 2652,8 руб., а экономическая эффективность на рубль затрат - 68,8 руб.

3.4.6 Эффективность применения антисептической губки для профилактики послеродового эндометрита у коров после оперативного отделения последа

Перед экспериментом животных разделили на две группы - опытную и контрольную. В опытной группе находились коровы (n=22), которым после отделения последа однократно в полость каждого рога матки вводили по одной пластине антисептической губки с фуразолидоном. Контрольным животным (n=22) в первые часы после оперативного удаления плодных оболочек также однократно внутриматочно назначали 5 суппозиториев «Неофур». Результаты опыта представлены в таблице 3.

Применение антисептической губки (табл. 3) для профилактики послеродового эндометрита на фоне оперативного отделения последа оказалось на 18,2% эффективнее в сравнении с неофуром. Для оплодотворения не заболевших коров на фоне применения антисептической губки в 1,6 раза требовалось меньше количество спермодоз, и у этих животных в 2,3 раза короче был период бесплодия по сравнению с использованием неофура.

Таблица 3 - Профилактическая эффективность антисептической губки после оперативного отделения последа у коров и её влияние на воспроизводительную способность, n=22

Показатель	Антисептическая губка	Неофур
Заболело эндометритом коров/%	14/63,6	18/81,8
Профилактическая эффективность, %	36,4	18,2
Оплодотворилось после первого осеменения коров/%	4/50,0	0/0
Оплодотворилось всего, %	81,8	72,7
Коэффициент оплодотворения	1,7±0,36	2,7±0,4
Дней бесплодия	66,3±9,78*	152,2±11,3

* Р<0,001- достоверно по отношению к контролю

Кроме того, количество животных, оплодотворенных после первого осеменения из числа незаболевших коров опытной группы, составило 50%, а при назначении неофура таковых не оказалось. Количество стельных коров за год при использовании губки было на 9,1% больше, чем в контрольной группе. Применение антисептической губки после оперативного отделения последа позволило предотвратить ущерб в расчете на одно животное в размере 1394,7 руб., при этом экономическая эффективность на рубль затрат составила 14,0 руб.

3.4.6.1 Влияние внутриматочного введения антисептической губки на уровень эндогенной интоксикации организма коров

Содержание ВНСММ в плазме и эритроцитах у животных разных экспериментальных групп в различные периоды представлено в таблице 4.

Таблица 4 - Содержание ВНСММ (усл.ед.²) в плазме и эритроцитах клинически здоровых, больных острым эндометритом коров и обработанных антисептической губкой (n=7)

Показатель	Срок взятия крови
	день отела	15-20-й день после отела
	Плазма	Эритроциты	Плазма	Эритроциты
Антисептическая губка	3,68±0,12	17,9±0,59	2,4 0,98	16,63±0,33
Клинически здоровые	3,11±0,26	16,27±0,58	2,10 0,22	14,50±0,94
Больные эндометритом	3,25±0,11	17,43±0,02	5,5 0,34*	21,37±0,79*

* Р < 0,001- достоверно по отношению к исходному значению, к показателям здоровых животных и обработанных антисептической губкой

Уровень эндогенной интоксикации (табл. 4) организма в день отела у животных всех групп имел приблизительно одинаковые значения. На фоне применения антисептической губки уровень интоксикации на 15…20 день после отела незначительно превышал аналогичный показатель здоровых коров и составлял - 2,49 в плазме и 16,63 усл.ед.² в эритроцитах.

У животных с послеродовым гнойно-катаральным эндометритом наблюдалось достоверное увеличение содержания ВНСММ как в плазме, так и в эритроцитах и составляло 5,5² и 21,37 усл.ед.² соответственно, и выше аналогичного показателя у коров опытной группы на 54,73% (в плазме) и на 22,18% (в эритроцитах).

Показатели, характеризующие накопление токсинов в крови и связывание их альбумином и эритроцитами представлены в таблице 5.

Таблица 5 - Содержание альбумина и значения критерия интоксикации и у экспериментальных коров

Показатель	Группа коров (n=7)
	Антисептическая губка	Клинически здоровые	Больные эндометритом
Альбумин, г/л: день отела 15-20-й день	35,33 1,11 35,71 1,09	38,02 2,25 40,35 1,93	34,33 1,08 29,01 1,14*
КИ, усл.ед.: день отела 15-20-й день	0,58 ,02 0,42 ,01	0,50 0,04 0,35 0,01	0,54 0,08 0,916*

* Р < 0,001 - достоверно по отношению к исходному значению, к показателям здоровых животных и обработанных антисептической губкой

Результаты исследований показывают (табл. 5), что с развитием острого воспалительного процесса в эндометрии происходит достоверное снижение содержания альбуминовой фракции к 15…20-му дню послеродового периода на 15,5% по сравнению с исходным значением и ниже аналогичного показателя у коров, обработанных антисептической губкой на 18,8%, здоровых коров - на 28,1%.

Кроме того, на фоне применения антисептической губки остается на более низком уровне по сравнению с заболевшими животными критерий интоксикации, значение которого приближается к таковому у здоровых коров.

Выводы

1 На сельскохозяйственных предприятиях Кировской области стабильно высокой остается заболеваемость коров задержанием последа и послеродовым эндометритом - 10,8 и 14,3% соответственно. В отдельных хозяйствах патология третьей стадии родов достигает 39,8%, а заболеваемость коров послеродовым острым эндометритом - 49,4%.

2 Развитие послеродового острого эндометрита у высокопродуктивных коров сопровождается повышением в крови уровня ??- глобулинов (на 16,4%), количества общих иммуноглобулинов (на 47,3%), циркулирующих иммунных комплексов малых, средних (на 34,7%) и крупных размеров (на 42,6%), а также достоверным снижением уровня альбумина (на 26,4%), повышением содержания веществ малой и средней молекулярной массы в плазме крови (на 54,7%) и в эритроцитах (на 22,18%).

3 В первые часы после отела матка коров бывает контаминирована сапрофитными и условно-патогенными микроорганизмами, представленными в виде ассоциаций. На 4-й день послеродового периода преобладают гемолитическая кишечная палочка, золотистый стафилококк, гемолитические стрепто- и диплококки, сульфитредуцирующие клостридии, которые проявляют различную степень устойчивости к антимикробным средствам. Бактерицидная концентрация фуразолидона в отношении Staphylococcus aureus составила 0,38, E.coli - 12,5, Streptococcus hаemolyticus - 25,0, а в отношении Proteus vulgaris - 100 мкг/мл.

4 Гемостатический эффект антисептической губки в среднем проявляется через 2,6 минуты. Скорость заживления ран с аппликациями губкой достоверно (в 1,5 раза) выше по сравнению с необработанными ранами, а также в более сжатые сроки происходит процесс их эпителизации.

5 После внутриматочного введения антисептической губки концентрация фуразолидона в маточном содержимом в первые 7 дней остается стабильно высокой (от 134,3 до 125,4 мкг/г). Начиная с 8-го дня, его концентрация снижается до 26,4±2,8 мкг/г, а к 11-му дню не обнаруживается. При этом период выведения из организма коров фуразолидона с молоком составляет 4 дня (от 9,16 до 0,21 мкг/мл).

6 Применение антисептической губки на фоне самопроизвольного отделения последа у высокопродуктивных коров на 24% снижает риск возникновения послеродового эндометрита, обусловливает оплодотворение после первого осеменения 63,6, а в течение года 92% коров при коэффициенте оплодотворения 1,4 и периоде бесплодия 46,1 дней.

7 Антисептическая губка, введенная в полость рогов матки после оперативного отделения последа, в сравнении с неофуром на 18,2% повышает эффективность профилактических мероприятий при послеродовом эндометрите, на 9,1% больше обусловливает оплодотворение коров, при более низком коэффициенте оплодотворения (на 58,8%) и коротком периоде бесплодия (на 85,9 дней). Применение антисептической губки предупреждает возникновение эндогенной интоксикации в организме животных (уровень веществ низкой и средней молекулярной массы составил в плазме крови - 2,49±0,98, в эритроцитах - 16,63±0,33 усл.ед).

8 Экономическая эффективность назначения антисептической губки для профилактики послеродового эндометрита у коров на фоне самопроизвольного отделения последа на рубль затрат составила 68,8 руб., а после оперативного отделения последа - 14,0 руб.

Практические предложения

1 Для профилактики послеродового эндометрита после нормального отела рекомендуется однократное внутриматочное введение одной пластины антисептической губки. После оперативного отделения последа с целью предупреждения воспаления слизистой оболочки матки в каждый ее рог следует однократно вводить по одной пластине антисептической губки.

2 Результаты выполненных исследований рекомендуется использовать при чтении лекций, проведении практических занятий по ветеринарному акушерству в вузах, а также в Институтах по подготовке и переподготовке кадров АПК.

Список опубликованных работ по теме диссертации

1 Бледных Л.В. Микробный состав содержимого матки у коров при остром послеродовом эндометрите /Л.В. Бледных, И.Г. Конопельцев //Актуальные вопросы ветеринарной медицины. Т 2. - Екатеринбург, 2007.- С.102-104.

2 Бледных Л.В. Качественный состав микрофлоры матки у коров в послеродовой период и ее чувствительность к антимикробным средствам/ Л.В. Бледных, А.Л. Мухамадьярова //Достижения ветеринарной науки и практики: Сб. статей Всеросс. науч.-практ. конф.- Киров, 2008.- С. 26-29.

3 Бледных Л.В. Иммунобиохимические показатели крови здоровых и больных послеродовым эндометритом коров /Л.В. Бледных //Науке нового века - знания молодых: Сб. статей 9-й науч. конф. аспирантов и соискателей. Ч.1.- Киров, 2009.- С. 161-165.

4 Бледных Л.В. Иммунобиохимические показатели крови коров, больных послеродовым эндометритом /Л.В. Бледных //Современные научные тенденции в животноводстве:Сб. статей Междунар. науч.-прак. конф. Ч.2.- Киров, 2009.- С.20-22.

5 Конопельцев И.Г. Антисептическая губка - новый подход в профилактике эндометрита у коров /И.Г. Конопельцев, Л.В. Бледных //Современные проблемы ветеринарного обеспечения репродуктивного здоровья животных: Матер. Междунар. науч.-практ. конф.- Воронеж, 2009.- С. 225-229.

6 Бледных Л.В. Профилактическая эффективность антисептической губки при нормальных и патологических родах /Л.В. Бледных //Науке нового века - знания молодых: Матер. всеросс. науч.-прак. конф. молодых ученых, аспиратнов и соискателей.- Киров, 2010.- С. 97-101.

7 Бледных Л.В. Уровень эндогенной интоксикации у коров, находящихся в посленродовом периоде /Л.В. Бледных, И.Г. Конопельцев //Современные научно-практические достижения в ветеринарии:Матер. Междунар. науч.-прак. конф. Выпуск 1.- Киров, 2010.- С.23-26.

*8 Бледных Л.В. Новый пролонгированный препарат для профилактики послеродового эндометрита у коров/ Л.В. Бледных //Ученые записки КГАВМ. Том 204.- Казань, 2010.- С. 35-40.

*9 Конопельцев И.Г. Антисептическая, гемостатическая губка для профилактики эндометрита у коров /И.Г. Конопельцев, Л.В. Бледных //Ветеринария.- № 2.- 2011.- С.45-48.

10 Инновационные подходы в оптимизации воспроизводительной способности коров на фоне их высокой молочной продуктивности /И.Г. Конопельцев, Л.В. Бледных, А.Г. Норкин, и др. //Инновационные подходы в ветеринарии, биологии и экологии: Матер. Междунар. науч.-практ. конф.- Троицк, 2011.

11 Эндометрит у коров (сравнительная оценка схем лечения, патогенез) /И.Г. Конопельцев, А.Ф. Сапожников, Л.В. Бледных, Е.С. Муравина //Современные научно-практические достижения в ветеринарии: Сб. статей Междунар. науч.-практ. конф. Выпуск 2.- Киров, 2011.- С. 49-52.

*публикации в рецензируемых изданиях, рекомендованных ВАК РФ.

Размещено на Allbest.ru