Морфология и гистохимия слезных желез косули и крупного рогатого скота

Размещено на http://www.allbest.ru/

АВТОРЕФЕРАТ

диссертации на соискание ученой степени

Морфология и гистохимия слезных желез косули и крупного рогатого скота

06.02.01 - диагностика болезней и терапия животных, патология, онкология и морфология животных

кандидата ветеринарных наук

Евтушенко Дмитрий Владимирович

Улан-Удэ - 2013

Работа выполнена на кафедре морфологии и физиологии ФГБОУ ВПО

«Приморская государственная сельскохозяйственная академия»

Научный руководитель: Момот Надежда Васильевна доктор ветеринарных наук, профессор

Официальные оппоненты: Оножеев Анатолий Алексеевич, доктор ветеринарных наук, профессор

Рядинская Нина Ильинична, доктор биологических наук, профессор.

Ведущая организация: ФГОУ ВПО «Иркутская государственная сельскохозяйственная академия».

Защита диссертации состоится 26 июня 2013 года в 14-00 часов на заседании диссертационного совета Д. 220.006.01 при ФГОУ ВПО «Бурятская государственная сельскохозяйственная академия им. В.Р. Филиппова».

Адрес академии: 670020, г. Улан-Удэ, ул. Пушкина, 8, Факс (301-2) 44-21-33.

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ФГОУ ВПО «Бурятская государственная сельскохозяйственная академия им. В.Р. Филиппова».

Автореферат разослан « » апреля 2013 г.

Ученый секретарь диссертационного совета доктор ветеринарных наук, доцент Томитова Е.А.

Общая характеристика работы

слезный железа косуля рогатый

Актуальность исследования. Как известно, органы чувств, позволяющие животному организму приспосабливаться к окружающей среде, содержат собственно рецепторные элементы, в которых происходит преобразование сигналов внешнего мира в нервный импульс. Орган зрения, представляя собой периферическую часть зрительного анализатора, состоит не только из глазного яблока, но и защитно-вспомогательных органов, к которым относится слезный аппарат (Apparatus lacrimalis), состоящий из слезных желез верхнего и третьего века.

Слезная жидкость, вырабатываемая слезными железами, имеет большое значение для нормальной функции органа зрения, так как увлажняет роговицу и конъюнктиву, способствует очищению конъюнктивальной полости от микроорганизмов, содержит бактерицидный фермент лизоцим, предотвращают высыхание глазной поверхности, обеспечивают ее питание, улучшает оптические свойства роговицы, удаляет инородные тела при их попадании между веками и глазным яблоком. Слеза - это постоянная микросреда переднего отдела глаза, участвующая в метаболических процессах глазного яблока и орбиты и являющаяся универсальным индикатором нарушения обменных процессов при патологических состояниях органа зрения (Чеснокова Н. Б., 1986; Van Haeringen N. J., Van Agtelal E. J., 1989; Петрович Ю.А., Терехина Н.А., 1990; Прокофьева Г. Л., Можеренков В. П. и др., 1994; Сомов Е. Е., Бржеский В. В., 1994; Berta A., 1995). В настоящее время достаточно много научных работ посвящено изучению биохимии слезы при различной патологии органа зрения (Чеснокова Н. Б., 1986, Ballow M., Donshik P., Rapms P., Samartino L., 1987; Бржеский В. В., 1990; Петрович Ю.А., Терехина Н.А., 1990; Бржеский В. В., Сомов Е. Е., 1994; Даниличев В. Ф., 1996 и др.).

Морфология слезных желез наиболее полно изучена у лабораторных животных и человека, а у сельскохозяйственных животных такие сведения единичны, в том числе и по жвачным животным. Имеются данные о исследованиях слезных желез у мелкого рогатого скота, лошадей, кроликов, кошки, собаки, пушных зверей и других животных (K.M. Dyce и др., 1987; Martin C.L., Munnell J., R. Kaswan, 1988; A. M. Gargiulo, C. Dall'Aglio, P. Coliolo, 2001; Ю.С. Гайдученко, 2005,2006; С. И. Ефимов, Н. П. Жабин, Ю. С. Гайдученко, А. В. Ступин, 2008 ).

Сведений о топографии, гистоструктуре и гистохимии слезно-железистого аппарата у домашних и диких травоядных в сравнительно-видовом аспекте недостаточно.

Цель исследования: изучить видовые и индивидуальные особенности морфологии и гистохимии слезных желез верхнего и третьего века диких и домашних травоядных животных на примере косули и крупного рогатого скота.

Задачи исследования:

- определить видовые и индивидуальные морфологические особенности слезных желез косули дальневосточной и косули сибирской;

- дать морфологическую характеристику слезных желез у крупного рогатого скота;

- выявить особенности секреции слезных желез у домашних и диких травоядных на примере косули дальневосточной, косули сибирской и крупного рогатого скота.

Работа является самостоятельным разделом комплексной темы научных исследований кафедры морфологии и физиологии животных института животноводства и ветеринарной медицины Приморской государственной сельскохозяйственной академии и имеет номер государственной регистрации 01.9.30005392.

Научная новизна работы. Описаны анатомо-топографические особенности слезных желез верхнего и третьего века у косули дальневосточной и косули сибирской с учетом их видовых особенностей и были дополнены уже имеющиеся данные по морфологии этих желез у крупного рогатого скота. Проведена морфологическая характеристика слезно-железистого аппарата у домашних и диких млекопитающих в сравнительно-видовом аспекте. Приводятся сведения по гистохимической характеристике секрета, вырабатываемом слезными железами верхнего и третьего века.

Теоретическая и практическая значимость. Полученные результаты по сравнительной морфологии и гистохимии слезных желез верхнего и третьего века диких и домашних травоядных животных вносят уточнения по микро- макроанатомии слезно-железистого аппарата домашних травоядных животных и впервые приводятся эти данные у диких травоядных животных. Сведения по топографии слезных желез возможно использовать при разработке оперативных доступов к этим органам у жвачных животных.

Материал по морфологии и гистохимии слезных желез может быть использован при написании соответствующих разделов учебников, учебных пособий и руководств по анатомии, гистологии, офтальмологии, справочных руководств по сравнительной анатомии позвоночных, а также в клинических и научно-экспериментальных исследованиях при изучении слезно-железистого аппарата у животных, при разработке оперативных доступов к структурам области глазницы.

Апробация результатов научных исследований. Основные материалы диссертационной работы были представлены, обсуждены и одобрены на научных конференциях молодых ученых агропромышленного комплекса Дальнего Востока ( Уссурийск, 2009, 2010 ), на международных конференциях «Актуальные вопросы электрофизиологии и незаразной патологии животных» (Улан-Удэ, 2009), «Актуальные вопросы ветеринарной медицины. Материалы II сибирского ветеринарного конгресса» (Новосибирск, 2010), «Актуальные проблемы агрообразования в Азиатско-Тихоокеанском регионе: проблемы и перспективы» (Уссурийск, 2010), на всероссийской конференции (Современные достижения ветеринарной медицины сельскохозяйственному производству, Донская с/х академия, 2009). Внедрение. Материалы диссертационной работы используются в научно-исследовательской работе и учебном процессе на биологической и морфологических кафедрах Иркутской, Приморской, Бурятской государственных сельскохозяйственных академий, а также Дальневосточного государственного федерального университета.

Публикация результатов исследования. Основные положения диссертационной работы опубликованы в 11 научных работах, в том числе 3 научных статьи опубликованы в ведущих рецензируемых журналах, входящих в перечень ВАК.

Основные положения, выносимые на защиту:

1. Анатомо-топографические особенности слезной железы верхнего века у косули дальневосточной, косули сибирской и крупного рогатого скота, особенности ее гистоструктуры.

2. Видовые и индивидуальные анатомо-топографические особенности слезной железы третьего века у косули дальневосточной, косули сибирской и крупного рогатого скота, особенности ее гистоструктуры.

3. Гистохимическая характеристика слезно-железистого аппарата у жвачных животных.

Структура и объем диссертации. Общий объем диссертации составляет 141 страницу. Она состоит из следующих разделов: введение, обзор литературы, материал и методы исследования, результаты собственных исследований, обсуждение результатов собственных исследований, выводы, практические предложения, библиографический список использованной литературы, приложение. Работа иллюстрирована 52 рисунками и содержит 7 таблиц. Библиографический список использованной литературы включает 166 работ, в том числе 106 на иностранных языках.

Материал и методика

Объектами для проведения морфологических, гистологических и гистохимических исследований служили дикие и домашние травоядные животные - косуля дальневосточная, косуля сибирская и крупный рогатый скот симментальской породы. Материал для исследования от диких животных брался в зимний период на территории Ханкайского района Приморского края, где охота проводилась по лицензиям. Материал от домашних жвачных животных (крупный рогатый скот) принадлежали учебно-опытному хозяйству Приморской ГСХА (Табл. 1).

Материал для гистологического и гистохимического исследований ( слезные железы верхнего и третьего века ) фиксировали в 10-12%-ном растворе нейтрального формалина, жидкостях Карнуа и Максимова. Материал уплотняли заливкой в парафин по общепринятой методике. Срезы толщиной 7 мкм получали с помощью санного микротома МС-2. Для изучения общей гистологической структуры слезных желез срезы окрашивали гематоксилином Майера и эозином, а также красителем, приготовленным из черемухи Маака. Коллагеновые волокна соединительной ткани выявляли по Маллори, эластические волокна - резорцин-фуксином по Вейгерту. Аргентофильные структуры желез импрегнировали нитратом серебра по методу Фута.

Таблица 1 Виды исследуемых травоядных животных

Для определения основных и кислых белков использовали водный и сулемовый растворы бромфенолового синего по Бонхегу ( В.Г. Елисеев и др., 1962; А.И. Кононский, 1976 ). ДНК выявляли фуксин-сернистой кислотой по Фельгену. Для каждой гистохимической реакции ставили соответствующие контроли.

Карбоксилированные гликозоаминогликаны выявляли альциановым синим по Стидмену, сульфатированные гликозоаминогликаны - основным коричневым по Шубичу. Контролем служили реакции метилирования и деметилирования.

Гликоген и гликопротеины выявляли ШИК-реакцией с целлоидинированием и без целлоидинирования. Контролем служили препараты, опущенные в амилазу с целлоидинированием и без целлоидинирования.

При гистохимической дифференциации различных групп углеводных и белковых компонентов использовали рекомендации А.П. Попова (2004 г.), Р.З. Сиразиева, Г.А. Игумнова, В.Г. Черных (2004 г.), И.И. Силкина, А.П. Попова (2009 г.) и др.

Интенсивность гистохимических реакций определяли с помощью полуколичественной визуальной оценки по методу В.В. Соколовского (Кононский А.И., 1976).

Морфометрические исследования слезных желез верхнего и третьего века проводили с помощью винтового окулярного микрометра «МОВ-1-15^х» на световом микроскопе «Биолам». Высчитывали площадь концевых отделов и внутридольковых выводных протоков, а также площадь ядер и цитоплазмы эпителиоцитов концевых отделов и внутридольковых выводных протоков. Ядерно-протоплазменное отношение (ЯПО) вычисляли с помощью показателей площадей ядер и цитоплазмы железистых клеток.

Морфометрические показатели обработаны с учетом рекомендаций Г.Ф. Лакина (1990). Для графической обработки морфометрических данных применяли программу Grapher - Version 8.5.733. Фотографирование гистологических препаратов проводили с помощью цифровой фотонасадки для микроскопа Digital Camera for Microscope DCM 500, Resolution 5M pixels и программы ScopeTek ScopePhoto, Version: 3.0.12.498.

Результаты исследований

Морфофункциональная характеристика слезной железы верхнего века у косули и крупного рогатого скота.

Согласно нашим результатам у исследуемых диких травоядных животных (косуля дальневосточная и косуля сибирская) слезная железа верхнего века располагается в дорсолатеральной части глаза и медиально от основания скулового отростка лобной кости в виде уплощенного органа желтовато-розоватого цвета вытянутой формы. У крупного рогатого скота в отличие от косули эта железа округло-овальной формы розовато-оранжевого цвета, уплощена в дорсовентральном направлении и располагается в дорсолатеральной глазной поверхности медиальнее от скулового отростка лобной кости. Вариации в размерах этой железы значительные у косуль обоих подвидов в сравнении с крупным рогатым скотом при минимальных размерах этой железы у косули.

Используемые в работе методы выявления коллагеновых, эластических и аргирофильных волокон позволяют обнаружить их как в междольковой, так и во внутридольковой соединительной ткани. В составе железы диких травоядных обнаруживаются отличия, выражающиеся в том, что у сибирской косули в сравнении с дальневосточной косулей междольковые перегородки более заметны за счет значительного количества эластических и пучков коллагеновых волокон. Эластические волокна также как и у дальневосточной косули располагаются в основном в междольковой соединительной ткани. Они окружают междольковые выводные протоки. В железистой паренхиме органа эластические волокна окружают секреторные отделы и внутридольковые выводные протоки железы.

У крупного рогатого скота каких - либо различий в распределении эластических волокон не выявлено. У этих животных также как и у косули дальневосточной и косули сибирской эластические волокна располагаются в междольковой и внутридольковой соединительной ткани, окружая ацинарную и выводную протоковую системы.

У всех исследуемых животных в междольковой соединительной ткани имеются нервные ганглии, кровеносные и лимфатические сосуды. В паренхиме железы все виды волокон, включая и аргирофильные, проходят ориентировано ацинусов и выводных протоков и придают им морфологическую оформленность. Вместе с тем при распределении волокон выявлены видовые отличия у травоядных животных. Так, аргирофильных волокон в слезной железе верхнего века крупного рогатого скота было выявлено больше в отличие от исследуемых диких травоядных животных.

При морфологической оценке препаратов, окрашенных гематоксилин-эозином, было выявлено, что у косули дальневосточной концевые отделы слезной железы верхнего века преимущественно трубчато-альвеолярной формы и имеют средние размеры 1639,12 ± 54,1 мкм². У сибирской косули концевые отделы, также как и у дальневосточной косули, имеют округло-овальную форму, однако средние размеры достоверно различаются и имеют величину 840,63 ± 56,64 мкм². У крупного рогатого скота концевые отделы округлой формы и по данным биометрической обработки средние размеры составляют 1153,99 ± 42,01 мкм² при одном доминирующем классе. В отличие от косулей обоих подвидов у крупного рогатого скота просвет концевых отделов сужен.

Эпителий секреторных отделов слезной железы верхнего века у косули дальневосточной построен из ацинарных клеток кубической формы, средние размеры которых по данным биометрической обработки составляют 187,37 ± 6,55 мкм². Вариационные кривые показывают два доминирующих класса.

По нашим исследованиям у косули сибирской эпителиоциты концевых отделов имеют кубическую форму и средние размеры их практически совпадают с дальневосточной косулей (184,8 ± 6,3 мкм²).

У крупного рогатого скота в отличие от сибирской и дальневосточной косули эпителиоциты секреторных отделов имеют слегка вытянутую форму и несколько большие средние размеры, которые составляют 234,35 ± 9,56 мкм² при двух равнозначных доминирующих классах.

Наши кариометрические исследования эпителиоцитов секреторных отделов слезной железы верхнего века показали, что у дальневосточной косули ядра имеют преимущественно круглую форму и средние размеры их по данным биометрической обработки равны 17,42 ± 0,43 мкм² при наличии двух доминирующих классов. У сибирской косули ядра эпителиоцитов концевых отделов, также как у косули дальневосточной, преимущественно круглой формы, однако средние размеры их несколько меньше в сравнении с косулей дальневосточной и составляют 15,72 ± 0,3 мкм² при наличии одного доминирующего класса.

У крупного рогатого скота ядра эпителиоцитов секреторных отделов округло-овальной формы и составляют 20,3 ± 0,34 мкм² при наличии одного доминирующего класса.

Цито- и кариометрические исследования, проведенные нами, позволили установить ядерно-протоплазменное отношение для эпителиоцитов ацинусов слезной железы верхнего века. Величина ЯПО эпителиоцитов концевых отделов у дальневосточной косули имеет средние размеры 0,075 ± 0,003 при выявленном одном доминирующем классе. У сибирской косули средние размеры величины ЯПО эпителиоцитов концевых отделов значительно больше, чем у дальневосточной косули и составляют 0,11 ± 0,003 при одном доминирующем классе.

У крупного рогатого скота средние размеры величины ЯПО эпителиоцитов секреторных отделов приближены к показателям дальневосточной косули и составляют 0,0791 ± 0,004, однако в отличие от косуль обоих подвидов, функционально активными являются два доминирующих класса.

Внутридольковые выводные протоки слезной железы верхнего века у диких травоядных по данным биометрической обработки составляют в среднем 3184,3 ± 118,47 мкм² у дальневосточной косули и 3607,88 ± 137,72 мкм² - у сибирской косули. На основании морфологических и биометрических данных выявлено три вида протоков: малые, средние и большие. Первые - это протоки, имеющие малые размеры, округлой формы с однослойным однорядным цилиндрическим эпителием. Второй вид протоков - со средними размерами, овальной и неправильно округло-овальной формы. Выстланы эти протоки столбчатым однослойным однорядным эпителием. Третий вид - это протоки с большими размерами и неправильной формы. Эпителий в этих протоках, также как и в протоках средних размеров, столбчатый однослойный однорядный.

У крупного рогатого скота средние размеры внутридольковых выводных протоков приближены к показателям дальневосточной косули и составляют 3090,9 ± 137,2 мкм². Однако в отличие от косуль обоих подвидов выявлено два вида протоков: малые и большие. Несмотря на то, что морфологически у крупного рогатого скота выявлены предацинарные протоки, всё-таки доминирующими оказались протоки двух видов: малые и большие.

Протоки малых размеров имеют округло-овальную форму и выстланы цилиндрическим эпителием с ядрами, оттеснеными к базальной мембране. Протоки малых размеров составляют в слезной железе верхнего века крупного рогатого скота большинство. Протоки с большими размерами, также как и у косуль обоих подвидов, имеют неправильно-овальную форму и выстланы столбчатым эпителием.

Величина ЯПО внутридольковых выводных протоков слезной железы верхнего века значительно варьирует, имея среднестатистические размеры 0,156 ± 0,008 у косули дальневосточной и 0,11 ± 0,003 - у косули сибирской, что подтверждается графиками вариационных кривых.

У крупного рогатого скота величина ЯПО значительно больше, чем у косули дальневосточной и практически в два раза больше чем у косули сибирской и составляет 0,197 ± 0,005. Вариационные кривые свидетельствуют о том, что у крупного рогатого скота, в отличие от косулей обоих подвидов, функционально активными являются два доминирующих класса, равнозначных друг другу по представительству членов в них.

Гистохимическое исследование на гликоген и гликопротеины у всех исследуемых нами диких и домашних травоядных животных выявило слабую гликопротеиновую активность эпителиоцитов концевых отделов слезной железы верхнего века, а гликоген в цитоплазме железистых клеток слезной железы верхнего века отсутствует.

Гистохимические реакции с водным и сулемовым растворами бромфенолового синего показали значительную выработку основных и кислых белков эпителиальными клетками секреторных отделов, внутридольковых и междольковых выводных протоков слезной железы верхнего века как у косули дальневосточной, так и у косули сибирской. У крупного рогатого скота, в отличие от косулей обоих подвидов, количество вырабатываемых белков значительно меньше. Так у дальневосточной косули интенсивность выработки основных белков по В.В. Соколовскому составила 2,1 балла, у сибирской косули - 2,2 балла, у крупного рогатого скота - 1,73 балла. Выработка кислых и основных белков составляет у косули дальневосточной 2,13 балла, у косули сибирской - 2,43 балла, у крупного рогатого скота - 1,81 баллов.

Карбоксилированные гликозоаминогликаны в слезной железе верхнего века косули дальневосточной и косули сибирской вырабатываются в небольшом количестве и выявлялись в виде следов. Так, у дальневосточной косули интенсивность гистохимической реакции по В.В. Соколовскому составила 1,53 балла, а у сибирской косули - 1,43 балла. У крупного рогатого скота, в отличие от косули дальневосточной и косули сибирской, карбоксилированные гликозоаминогликаны вырабатываются в значительных количествах. Выработка их составила по В.В. Соколовскому 2,53 балла, что достоверно больше, чем у дальневосточной и сибирской косуль.

Гистохимическая реакция на сульфатированные гликозоаминогликаны отрицательная у всех исследуемых животных.

Гистохимическая реакция по Фёльгену показала, что у косули дальневосточной и косули сибирской ДНК эпителиоцитов концевых отделов и выводных протоков равномерно распределена по кариоплазме. Часть ядер имеют крупную глыбчатость, хотя значительное количество ядер железистых клеток с мелкозернистым хроматином, на основании чего мы выделили ядра клеток двух видов: «тёмные» и «светлые». Количество «светлых клеток» большинство, что свидетельствует об активных функциональных процессах.

Морфофункциональная характеристика слезной железы третьего века у косули и крупного рогатого скота

Морфологические исследования показали, что слезная железа третьего века у исследуемых травоядных животных имеет схожее анатомо-топографическое расположение, различаясь по размерам и форме. Так, нами было установлено, что у косули дальневосточной, косули сибирской, а также у крупного рогатого скота слезная железа третьего века располагается на хряще третьего века в области назо-медиальной поверхности глазного яблока и имеет две части: поверхностную и глубокую. Выводные протоки железы открываются на поверхности третьего века, обращенной к глазной поверхности.

У крупного рогатого скота поверхностная часть железы в отличии от косулей обоих подвидов имеет достоверно большие размеры.

У косули сибирской слезная железа третьего века имеет больше соединительной ткани и более толстые соединительнотканные прослойки в отличие от дальневосточной косули. У крупного рогатого скота слезная железа третьего века в сравнении со слезной железой верхнего века имеет значительное количество липоцитов как в междольковой ткани, так и в железистой паренхиме органа. Также имеется незначительное количество инфильтратов из лимфоцитов.

Коллагеновых волокон у косули дальневосточной много как в междольковой ткани, так и в железистой паренхиме органа. Волокна окружают концевые отделы, междольковые и внутридольковые выводные протоки, благодаря чему хорошо видны поддольки органа. У сибирской косули коллагеновых волокон в слезной железе третьего века несколько больше, чем у дальневосточной косули. Они входят в состав не только междольковой соединительной ткани, но и внутридольковой, составляя с ней единое целое. В междольковой соединительной ткани они располагаются длинными плотными пучками и делят железу на множество долек и окружают междольковые выводные протоки. В железистой паренхиме органа их количество также велико и они окружают концевые отделы и внутридольковые выводные протоки.

У крупного рогатого скота, в отличие от косуль обоих подвидов, в железистой паренхиме органа коллагеновых волокон незначительное количество. Также их меньше в сравнении данной железы со слезной железой верхнего века. Поддолек в составе долек железы мало.

Эластические волокна в слезной железе третьего века косули дальневосточной располагаются в основном в междольковой соединительной ткани. В железистой паренхиме они окружают концевые отделы и выводные протоки. У косули сибирской эластичность железы большая, благодаря значительному количеству эластических волокон. У крупного рогатого скота эластические волокна выявляются во внутридольковой и междольковой соединительной ткани и окружают ацинусы и междольковые и внутридольковые выводные протоки железы.

Аргирофильные волокна в составе слезной железы третьего века косули дальневосточной и косули сибирской определяются в составе концевых отделов и выводных протоков, не обнаруживая подвидовых различий. У крупного рогатого скота аргирофильные волокна хорошо выявляются во всех структурах дольки железы и входят в состав внутридольковой соединительной ткани.

Концевые отделы слезной железы третьего века косули дальневосточной, косули сибирской и крупного рогатого скота преимущественно округло-овальной формы и средние размеры их составляют по данным биометрической обработки 793,4 ± 44,2 мкм² у дальневосточной косули, 720,3 ± 50,69 мкм² - у сибирской косули и 996,97 ± 52,24 мкм² - у крупного рогатого скота. Сравнивая показатели площадей ацинусов, мы получили достоверные различия между дикими и домашними травоядными при сходных показателях размеров у косуль обоих подвидов. Это подтверждается величиной ацинарных клеток концевых отделов слезной железы третьего века косули дальневосточной и косули сибирской. Эпителиоциты имеют среднюю величину 239,7 ± 14,47 мкм² у дальневосточной косули и 261 ± 20,02 мкм² - у сибирской косули. У крупного рогатого скота эпителий секреторных отделов построен из клеток удлиненно-овальной формы, размер которых составляет 275,3 ± 11,69 мкм².

Форма ядер эпителиоцитов концевых отделов слезной железы третьего века у косули дальневосточной округлая и округло-овальная. Средние размеры площадей ядер у этих животных составляют 20,87 ± 0,34 мкм². У сибирской косули ядра эпителиоцитов концевых отделов концевых отделов округло-овальной формы и имеют средние размеры 18,52 ± 0,58 мкм². У крупного рогатого скота ядра секреторных отделов округлой формы и составляют 15,79 ± 0,36 мкм².

Средняя величина ЯПО эпителиоцитов концевых отделов слезной железы третьего века косули дальневосточной составляет 0,1 ± 0,005. У сибирской косули и крупного рогатого скота средние значения величины ЯПО равны 0,072 ± 0,005 мкм² и 0,135 ± 0,006 мкм² соответственно. Анализируя представленные результаты по величине ЯПО, можно отметить достоверно высокие показатели у домашних животных в сравнении с дикими млекопитающими, что свидетельствует о видовой специфичности органа.

По данным биометрической обработки в слезной железе третьего века косули дальневосточной, косули сибирской и крупного рогатого скота можно отметить два вида внутридольковых выводных протоков: малые с низким призматическим эпителием и большие с однослойным однорядным цилиндрическим эпителием.

Внутридольковые выводные протоки имеют по данным биометрической обработки средние размеры 1985,3 ± 162,99 мкм² у дальневосточной косули и 2640,9 ± 142,94 мкм² - у сибирской косули, что достоверно больше ( Р>0,001 ) при сравнении этих величин друг с другом.

Внутридольковые выводные протоки слезной железы третьего века крупного рогатого скота имеют средние размеры своих площадей 2903,2 ± 130,26 мкм², что в сравнении с дикими травоядными животными достигает достоверных различий.

Эпителий внутридольковых выводных протоков слезной железы третьего века косули дальневосточной и косули сибирской построен из столбчатых эпителиоцитов размером 54,96 ± 3,53 мкм² у дальневосточной косули и 64,49 ± 2,52 мкм² у сибирской косули. Эпителиоциты внутридольковых выводных протоков слезной железы третьего века крупного рогатого скота столбчатой формы размером 75,38 ± 4,16 мкм², что достоверно больше чем у дальневосточной и сибирской косули.

Ядра эпителиоцитов внутридольковых выводных протоков слезной железы третьего века у косули дальневосточной округлые, занимающие центральное положение и в среднем составляют 18,89 ±0,38 мкм². У сибирской косули ядра эпителиоцитов внутридольковых выводных протоков от округло-овальной до вытянутой овальной формы. Средние размеры их несколько больше, чем у косули дальневосточной и равны 19,96 ± 0,56 мкм². У крупного рогатого скота ядра эпителиоцитов внутридольковых выводных протоков преимущественно округло-овальной формы и средние размеры их площадей составляют 13,35 ± 0,53 мкм², что достоверно меньше, чем у косулей обоих подвидов.

Средние размеры величины ЯПО внутридольковых выводных протоков слезной железы третьего века косули дальневосточной равны 0,258 ± 0,01. У сибирской косули средняя величина ЯПО несколько меньше, чем у дальневосточной косули и составляет 0,243 ± 0,007. У крупного рогатого скота величина ЯПО достоверно меньше, чем у дальневосточной и сибирской косуль и в среднем составляет 0,197 ± 0,005. Несмотря на отличия в значениях ЯПО у домашних и диких травоядных, эпителий протоков функционально активен у всех животных, что подтверждается гистохимическими исследованиями.

Реакция с водным и сулемовым растворами бромфенолового синего показали значительную выработку основных и кислых белков клетками секреторных отделов, а также эпителиоцитами внутридольковых и междольковых выводных протоков слезной железы третьего века как у дальневосточной, так и у сибирской косули. У крупного рогатого скота основные и кислые белки выявлялись в железистых клетках концевых отделов и выводных протоков железы, а также в составе секрета протоков, но в достоверно меньшем количестве, чем у косуль обоих подвидов. Так, у дальневосточной косули полуколичественная оценка выработки основных белков по В.В. Соколовскому составила 2,1 балла. У сибирской косули выработка белков больше, чем у дальневосточной косули и составляет 2,43 баллов, в то время как у крупного рогатого скота - 1,6 баллов, что достоверно меньше, чем у косуль обоих подвидов. Выработка суммарно кислых и основных белков составила 2,4 балла у дальневосточной косули, 2,73 баллов - у сибирской косули и 1,72 балла - у крупного рогатого скота.

Карбоксилированные гликозоаминогликаны у дальневосточной и сибирской косули выявлялись альциановым синим в виде следов в клетках концевых отделов и выводных протоков. Однако, у крупного рогатого скота в отличие от диких травоядных реакция с альциановым синим показала значительную выработку карбоксилированных гликозоаминогликанов эпителиоцитами секреторных отделов и выводных протоков железы. Так, интенсивность протекания гистохимической реакции по их выявлению по В.В. Соколовскому составила 1,56 баллов у косули дальневосточной, 1,41 балла - у косули сибирской и 2, 43 балла - у крупного рогатого скота. В то же время гистохимически сульфатированных гликозоаминогликанов у всех исследуемых животных нами не было обнаружено в слезно-железистом аппарате при слабой гликопротеиновой активности.

Морфофункциональные исследования, проведенные нами с указанием видовых и подвидовых особенностей у изученных животных представляют интерес не только для морфологов, но и для биологов, охотоведов, так как от деятельности слезно-железистого аппарата наряду с другими органами чувств зависит выживаемость диких животных в природных условиях. Для практиков - животноводов, работающих с крупным рогатым скотом, нормальное функционирование слёзных желез позволяет избежать травматизма, что в конечном счете сказывается на продуктивности животных.

Выводы

1. По данным научных исследований у диких как и у домашних травоядных животных слезно-железистый аппарат представлен двумя железами, различающимися по своим морфологическим характеристикам: слезной железой верхнего века и слезной железой третьего века.

2. У диких и домашних травоядных животных на примере косули дальневосточной, косули сибирской и крупного рогатого скота слезная железа верхнего века, различаясь по морфологическим показателям, располагается в дорсолатеральной части глаза и медиально от основания скулового отростка лобной кости.

3. Коллагенизация слезной железы верхнего века и слезной железы третьего века у диких травоядных животных в сравнении с крупным рогатым скотом довольно высокая. Причём, между дикими представителями заметны различия на подвидовом уровне в количестве коллагеновых, аргирофильных и эластических волокон, которые более выражены у сибирской косули.

4. По данным морфологических, цито-кариометрических исследований и биометрического анализа концевые отделы слезной железы верхнего века достоверно различны по величине у всех травоядных животных. Наиболее высокие показатели площадей концевых отделов имеются у косули дальневосточной, средние - у крупного рогатого скота и наименьшие - у сибирской косули. Высокое ЯПО эпителиоцитов концевых отделов у сибирской косули, несмотря на незначительную величину площадей ацинусов, свидетельствует о наибольшей функциональной активности клеток в сравнении с клетками других исследуемых животных.

5. Внутридольковая выводная протоковая система слезной железы верхнего века у косули дальневосточной, косули сибирской в отличие от крупного рогатого скота представлена тремя видами протоков: большими, средними и малыми. У крупного рогатого было выявлено два вида протоков: большие и малые. Достоверные различия в размерах протоков выявлены нами между косулей сибирской и косулей дальневосточной при наибольшей величине протоков у косули сибирской. А между протоками косули дальневосточной и крупного рогатого скота различия не достоверны. Вместе с тем эпителий, выстилающий внутридольковые выводные протоки у косули дальневосточной и косули сибирской подвидовых различий не выявляет и как у крупного рогатого скота представлен однослойным однорядным столбчатым эпителием. Исключение составляют лишь средние протоки крупного рогатого скота, которые выстланы однослойным однорядным кубическим эпителием.

6. Гистохимическое изучение секрета, вырабатываемого эпителиоцитами концевых отделов и внутридольковых выводных протоков слезной железы верхнего века показало, что железа секретирует преимущественно по серозному типу. У дальневосточной и сибирской косули вырабатывается большое количество основных и кислых белков, незначительное количество карбоксилированных гликозоаминогликанов и гликопротеинов при отсутствии гликогена и сульфатированных гликозоаминогликанов. У крупного рогатого скота в состав секрета входит умеренное количество основных и кислых белков, значительное количество карбоксилированных гликозоаминогликанов при слабой выработке гликопротеинов, в то время как сульфатированные гликозоаминогликаны также отсутствуют.

7. Слезная железа третьего века у косули дальневосточной, косули сибирской и крупного рогатого скота располагается на хряще третьего века в области назо-медиальной поверхности глазного яблока и имеет две морфологически различимые части: поверхностную и глубокую.

8. Морфологическое устройство концевых отделов слезной железы третьего века у исследуемых нами диких и домашних жвачных животных при сходных морфологических показателях имеет достоверные видовые различия в размерах площадей ацинусов, а также по морфологии эпителиоцитов у крупного рогатого скота в сравнении с косулей обоих подвидов.

9. Морфологический анализ внутридольковой выводной протоковой системы слезной железы третьего века у всех травоядных животных в отличие от слезной железы верхнего века представлена двумя видами протоков: большими и малыми, достоверно различаясь по среднестатистическим показателям своих площадей.

10. Гистохимическая характеристика слезной железы третьего века у диких жвачных показывает, что у этих животных железа преимущественно серозная. У крупного рогатого скота по характеристике секреторной активности эпителиальных клеток концевых отделов и внутридольковых выводных протоков железа является серозно-слизистой.

11. По данным микро- макроморфологических, гистохимических исследований, а также данным биометрического анализа слезные железы верхнего и третьего века имеют значительное сходство у косули дальневосточной и косули сибирской, что говорит о их родовом сходстве. Однако, имеющиеся морфологические различия в строении слезно-железистого аппарата доказывают правомерность разделения косуль на два подвида: на косулю дальневосточную и косулю сибирскую.

Практические предложения

Результаты собственных исследований мы рекомендуем для использования:

1. при написании соответствующих разделов учебников, учебных пособий и руководств по анатомии, гистологии, офтальмологии, справочных руководств по сравнительной анатомии позвоночных;

2. в клинических и научно-экспериментальных исследованиях при изучении слезно-железистого аппарата у травоядных животных;

3. при разработке оперативных доступов к слезно-железистому аппарату у домашних и диких травоядных животных.

Список опубликованных работ по теме диссертации

1. Момот, Н.В. К техническим свойствам Padus maackii / Н.В. Момот, Л.В. Лапшин, Ю.А. Момот, Д.В. Евтушенко // Актуальные вопросы электрофизиологии и незаразной патологии животных : матер. междунар. науч. - практ. конф. - Улан - Удэ : Изд-во БГСХА, 2009. - С. 14-15.

2. Момот, Н.В. Применение новых оптических систем при исследовании железистой паренхимы / Н.В. Момот, Ю.А. Момот, Е.В. Фролов, Д.В. Евтушенко // Современные достижения ветеринарной медицины сельскохозяйственному производству: матер. всерос. науч. - практ. конф. - пос. Персиановский, 2009. - С. 32-33.

3. Момот, Ю.А. К морфологическим особенностям выводной протоковой системы экзокриновых желез / Ю.А. Момот, Д.В. Евтушенко // Актуальные вопросы ветеринарной медицины : матер. II сибирского ветеринарного конгресса. - Новосибирск, 2010. - С. 164-165.

4. Евтушенко, Д.В. Морфология слезных желез у млекопитающих / Д.В. Евтушенко // Молодые ученые - агропромышленному комплексу Дальнего Востока : матер. межвузов. науч. - практич. конф. - Уссурийск, 2010. - Вып. 10. - С. 79-84.

5. Евтушенко, Д.В. К сравнительной характеристике секрета слезной железы верхнего века косули дальневосточной и косули сибирской / Д.В. Евтушенко, Н.В. Момот // Актуальные проблемы агрообразования в Азиатско-Тихоокеанском регионе: проблемы и перспективы: сб. науч. ст. по мат. междунар. конф. - Уссурийск, 2011. - С. 210-212.

6. Евтушенко, Д.В. К топографии слезных желез верхнего и третьего века у косули дальневосточной и косули сибирской / Д.В. Евтушенко, Н.В. Момот // Молодые ученые - агропромышленному комплексу Дальнего Востока : матер. межвузов. науч. - практич. конф. - Уссурийск, 2011. - Вып. 11. - С. 82-83.

7. Евтушенко, Д.В. Морфология секреторных отделов слезных желез крупного рогатого скота / Д.В. Евтушенко // Вестник КрасГАУ. - 2012. - №1. - С. 211-215.

8. Евтушенко, Д.В. Морфологическая характеристика концевых отделов слезной железы верхнего века косули дальневосточной и косули сибирской / Д.В. Евтушенко // Вестник КрасГАУ. - 2012. - №3. - С. 204-206.

9. Евтушенко, Д.В. Морфология внутридольковой выводной протоковой системы слезной железы третьего века косули / Д.В. Евтушенко // Ученые записки КГАВМ. - Казань, 2012. - Т. 209. - С. 133-136.

10. Евтушенко, Д.В. К анатомическим особенностям слезных желез домашних жвачных животных / Д.В. Евтушенко // Materialy VIII Mezinarodni Vedecko - Prakticka Konference. - Dny Vedy, 2012. - Dil 75. - C. 61-63.

11. Евтушенко, Д.В. К морфо-биологическим особенностям косули дальневосточной и косули сибирской [Электронный ресурс] / Д.В. Евтушенко // Инновационные технологии в ветеринарной медицине, животноводстве и природоохранном комплексе дальневосточного региона: сб. науч. ст. Междунар. науч.-практ. конф. - Электрон. текст. дан. - Уссурийск, [2012]. - 1 электрон. опт. диск (CD-ROM).

На правах рукописи

Лицензия № 020572 от 16.09.97 г. Подписано в печать

Формат 60Х84 1/16. Бумага офсетная

Печать RISOGRAPH TR 1510. уч.-изд. л.

Тираж 100 экз. заказ №

Приморская государственная сельскохозяйственная академия

692510 г. Уссурийск, пр. Блюхера, 44

Участок оперативной полиграфии Приморской гос. с.-х. академии

692500 г. Уссурийск, ул. Раздольная, 8

Размещено на Allbest.ru