Фармако-токсикологическая и терапевтическая оценка новых лекарственных форм анандина

Собакам из 1-й опытной группы с диагнозом отодектоз, назначали ушные капли «Анандин плюс» в дозе 4-5 капель в каждое ухо 1 раз в 5 дней, трехкратно. Животным из 2-й опытной группы, с диагнозом отодектоз осложненный отитом, также назначали капли «Анандин плюс» по ананлогичной схеме. Собакам из 3-й опытной группы, с диагнозом отодектоз и из 4-й опытной группы с диагнозом отодектоз осложненный отитом, назначали тонким слоем в каждое ухо мазь «Акаробор» 1 раз в 5 дней, трехкратно. Животным из 5-й опытной группы, с диагнозом отодектоз и из 6-й опытной группы с диагнозом отодектоз осложненный отитом, назначали ушные капли «Отоферонол плюс» из расчета 4-5 капель в каждое ухо, 1 раз в 5 дней, трехкратно. На протяжении двух недель за животными вели наблюдение, учитывали время исчезновения симптомов болезни. На 14-й день с момента начала эксперимента проводили повторное обследование методом микроскопии на предмет обнаружения возбудителей Otodectes cynotis в биоптате, взятом от каждой больной собаки.

В результате, проведенного лечения, в 1-й опытной группе выздоровели 9 собак из 10, во 2-й группе - 8; в 3-й группе - 9; в 4 и 5-й - по 8; в 6-й - 7 собак. Таким образом, ушные капли «Анандин плюс» являются эффективным терапевтическим средством при отодектозе (в том числе, осложненном отитом), не уступающим по своей акарицидной активности мази «Акаробор» и превосходящей ушные капли «Отоферонол плюс» на 10%.

2.13 Обоснование рецепта мази «Анандин»

Лекарственную композицию подбирали, руководствуясь следующими мотивами. Базисное лекарственное вещество анандин (глюкаминопропилакридон) - стимулирует выработку эндогенного интерферона в больном организме, повышает функциональную активность Т-лимфоцитов и макрофагов, что является важным для формирования антибактериального и противогрибкового иммунитета. Вспомогательные лекарственные вещества: калия салицилат и масло касторовое обеспечивают противовоспалительное и регенерирующее действие. Лекарственная форма длительное время хорошо удерживается на поверхности кожи благодаря основе - вазелину. Растворитель - дистиллированная вода.

Схема 5 Рецепт мази «Анандин»

2.14 Изучение местного раздражающего действия 2%-ной мази «Анандин»

Широкий спектр мазей и часто встречающиеся случаи медикаментозных дерматитов предопределяют необходимость установления не только высоких терапевтических свойств нового лекарственного средства в сравнении с аналогами, но и тщательного изучения его безвредности.

Местное действие мази изучали на морских свинках с массой тела 250-300 г, и кроликах-альбиносах с массой тела 2,0-2,5 кг. Для каждого вида животных формировали опытную и контрольную группы: по 10 морских свинок и по 5 кроликов, в каждой группе. Степень токсического действия мази определяли методом многократных эпикутанных аппликаций. Животным из опытных групп на неповрежденную кожу с шерстным покровом в межлопаточной области наносили мазь «Анандин» (тонким слоем) 2 раза в день, в течение 2 недель. Для животных из контрольных групп использовали вазелин медицинский очищенный, аналогично. На протяжении всего опыта за животными вели клиническое наблюдение.

Согласно, полученным данным констатировали отсутствие воспалительной реакции на месте аппликации мази, зуда (расчесов), изъязвлений, пигментации, аллопеций, толщина кожной складки не изменялась. Следовательно, 2%-ная мазь «Анандин» не обладает местным токсическим и раздражающим действием.



2.15 Определение аллергенных свойств анандиновой мази

Аллергеность анандиновой мази изучали в трех концентрациях (0,5%; 2% и 5%) методом эпикутанных аппликаций. Опыты проводили на морских свинках с массой тела 260-300 г и кроликах-альбиносах с массой тела 2-3 кг.

2.15.1 Опыт на морских свинках

Для проведения эксперимента было сформировано 4 группы по 10 лабораторных животных в каждой. Всем морским свинкам предварительно выстригали волосы на участке в области спины размером 2Ч3 см. Аппликации мази делали в направлении от задней трети спины к голове. Животных сенсибализировали путем многократных аппликаций мази на один и тот же участок кожи. Количество аппликаций составляло тридцать (2 раза в день, в течение 15-ти дней). Мази наносили в количестве 0,1-0,3 г, выдерживали 4 часа и удаляли стерильным ватным тампоном. Животным из 1-й опытной группы применяли 0,5%-ную анандиновую мазь; из 2-й группы - 2%-ную мазь; из 3-й группы - 5%-ную мазь. Морские свинки из 4-й группы служили контролем, им апплицировали вазелин медицинский очищенный.

Через 14 дней с момента последней аппликации на кожу свеже выстриженного участка спины наносили разрешающую дозу мази, соответствующей концентрации для каждой группы животных, через 24 часа анализировали место аппликации мази у лабораторных животных и учитывали наличие или отсутствие аллергической реакции. В результате проведенных манипуляций на месте приложения мази не было обнаружено инфильтрации, эритемы, изъязвления и некроза тканей. Таким образом, на морских свинках было показано, что анандиновая мазь, индифферентно концентраций: 0,5%, 2% или 5%, не обладает аллергенными свойствами.

2.15.2 Опыт на кроликах-альбиносах

Было сформировано 4 группы по 10 кроликов в каждой. Животных сенсибилизировали аппликациями мазей по следующей схеме: 2 раза в день, 10 суток подряд. Лабораторных животных из 1-ой опытной группы обрабатывали 0,5%-ной анандиновой мазью, из 2-й опытной группы - 2%-ной анандиновой мазью, из 3-й опытной группы - 5%-ной анандиновой мазью, из 4-й контрольной группы - вазелином медицинским очищенным. Мази наносили в количестве 0,3-0,5 г на предварительно выстриженный участок кожи спины в межлопаточной области размером 4Ч4 см. Аппликации делали в направлении от шеи к хвосту, мазь выдерживали 4 часа и удаляли стерильным ватным тампоном. Через 14 дней спустя с момента последней аппликации вновь эпилировали кожу на участке сенсибилизации и наносили разрешающую дозу изучаемого препарата, соответствующей концентрации. Через 24 часа учитывали клинико-морфологические изменения.

Согласно полученным данным, можно говорить о том, что мази на основе анандина не обладают выраженными аллергенными свойствами, но возможна индивидуальная повышенная к ней чувствительность. Так, у одного кролика из 1-й опытной (0,5% мазь) и у одного кролика из 3-й (5% мазь) опытной группы была эритема на месте приложения мази. При этом признаков инфильтрации, изъязвления и некроза тканей не было обнаружено ни у этих двух особей, ни у остальных животных. В виду того, что аллергическая реакция наблюдалась у лабораторных животных-альбиносов из групп, где применяли анандиновую мазь с минимальной и максимальной концентрацией базисного лекарственного вещества, можно предположить, что аллергическая реакция была обусловлена не самим анандином, а другими ингредиентами.

2.16 Изучение антимикотической активности «Анандина для инъекций» на модели генерализованного кандидоза у белых мышей

Всего в опыте использовали 60 лабораторных животных с массой тела 18-20 г. Для получения модели генерализованного кандидоза животным внутривенно инъецировали взвесь Candida albicаns в дозе 15 млн. клеток гриба на мышь, что в 5 раз превышает минимальную смертельную дозу для этого вида животных при данном способе введения препарата. Для выявления антикандидозной активности препарата мышам из опытных групп 10%-ный раствор «Анандина для инъекций» вводили внутримышечно в дозах 10 мг/кг и 100 мг/кг массы тела животных в течение 5 дней после заражения. Ввиду того, что критериями эффективности антимикотической терапии могут быть количество погибших животных и сроки их гибели, то результаты опыта оценивали по средней продолжительности жизни экспериментальных животных и выживаемости мышей.

Наиболее эффективной при лечении генерализованного кандидоза явилась доза «Анандина для инъекций» - 10 мг/кг массы тела. Так, в ходе опыта отметили гибель 45% лабораторных животных в 1-й опытной группе и 80% - во 2-й группе, тогда как в контрольной группе наблюдали 100%-ный летальный исход белых мышей. Благодаря иммуномодулирующим эффектам «Анандина для инъекций», в 1-й группе выжило 55% экспериментальных животных, а во 2-й группе - лишь 20%, то есть разница составила 35%. Продолжительность жизни белых мышей в контрольной группе была 4,85 суток. В группе, где терапевтическая доза «Анандина для инъекций» была увеличена в 10 раз, продолжительность жизни белых мышей составила 8,71 суток. У лабораторных животных получавших внутримышечно «Анандин для инъекций» в дозе 10 мг/кг массы тела - 11,28 суток, т.е. в первом случае, в 1,7 раза, а во втором - 2,3 раза больше, чем в контроле.

Результаты эксперимента подтвердили, что 10%-ный раствор «Анандина для инъекций» обладает антимикотической активностью в отношении Candida albicans. Наибольший эффект отметили при применении препарата в терапевтической дозе 10 мг/кг массы тела мыши.



2.17 Изучение антифунгального действия 2%-ной мази «Анандин» на экспериментальной модели поверхностного кандидоза у лабораторных животных

Для изучения химиотерапевтической эффективности противогрибковых препаратов в эксперименте на модельных инфекциях необходимо для каждого конкретного случая подбирать восприимчивых животных. Руководствуясь этим правилом для получения локального инфекционного процесса на коже, спровоцированного Candida albicans в эксперименте были задействованы белые крысы и кролики-альбиносы.

2.17.1 Эксперимент на крысах

Опыт проводили на 20 клинически здоровых белых крысах, с массой тела 200-250 г. В опытной и контрольной группах было по 10 крыс. За 24 часа до заражения животным внутримышечно вводили 0,3 мл/гол. официнальной суспензии кортизона ацетата. Перед заражением выстригали шерсть на коже спины, размером 1,5х2 см и обрабатывали бесшерстный участок 70є этиловым спиртом. Затем эпилированную кожу осторожно скарифицировали. Заражение проводили эпикутанным способом взвесью двухсуточной культуры гриба Candida albicans (концентрация 500 млн.кл./мл), предварительно растертой в ступке с кусочками агара Сабуро. В течение семи дней вели наблюдение за экспериментальными животными. Уже через сутки с момента заражения на контактной поверхности отмечали гиперемию, позднее образовывались корочки с эрозивной поверхностью под ними. По периферии поражения на 5-6-й дни возникали мелкие пузырьки. При посеве патологического материала, взятого на границе участка поражения от каждого животного, на агаре Сабуро наблюдали активный рост колоний гриба Candida albicans.

С 7-го дня белым крысам из опытной группы назначали 2%-ную мазь «Анандин». Курс лечения был следующим: ежедневно в течение пяти суток, 2 раза в день на пораженный участок наносили испытуемую мазь. Лабораторных животных из контрольной группы лечению не подвергали. На 14-й день с момента начала эксперимента констатировали полное клиническое выздоровление белых крыс в опытной группе. Микроскопия биоптата на границе локуса заражения подтвердила достоверность сделанных выводов. При этом в изолированных соскобах наблюдали единичные скопления дрожжеподобных клеток, но мицелиальные нити отсутствовали (сапрофитная форма гриба).

Одновременно у животных в контрольной группе процесса заживления и регенерации тканей на участке заражения не было. К 21-му дню регистрировали спонтанное выздоровление восьми из десяти белых крыс. У 2-х крыс по-прежнему отмечали образование мелких пузырьков, десквамацию эпителия и зуд в области места заражения. Микроскопия эпидермиса с границы зоны поражения показала скопление дрожжеподобных клеток и единичных мицелиальных нитей, что свидетельствовало о развитии патологического процесса в коже, спровоцированного грибом Candida albicans.

На основании полученных данных можно сделать вывод о том, что применение 2%-ной мази «Анандин» для лечения крыс с кандидозным поражением кожи было эффективным и позволило купировать сроки выздоровления животных в среднем на 10-12 дней, по сравнению с контрольными, а так же способствовало активной регенерации пораженной ткани.

2.17.2 Эксперимент на кроликах

Опыт ставили на 20 кроликах-альбиносах с массой тела 2,5-3 кг. Каждому животному в межлопаточной области спины выстригали шерсть на участке размером 2х3 см и эпилированную область обрабатывали 70є этиловым спиртом. Заражение проводили методом подкожной инъекции двухсуточной культуры гриба Candida albicans, из которой готовили суспензию с концентрацией 500 млн.кл./мл. Каждому кролику инъецировали по 5 мл взвеси, подтитрованной 100 000 ЕД бензилпенициллина-натриевой соли.

Было сформировано две группы опытная и контрольная, по 10 голов. Через сутки с момента заражения наблюдали воспалительную реакцию на коже большинства лабораторных животных из обеих групп. Воспаление кожи характеризовалось активной гиперемией, отечностью и зудом. На 2-3-й дни отмечали десквамацию эпителия и образование корочек-наложений, при удалении которых открывались эрозивно-язвенные участки. По периферии эпилированного прямоугольника кожи обнаруживали мелкие пузырьки с мутным экссудатом. В соскобах патологического материала с пораженных участков обнаруживали дрожжеподобные клетки и единичные нити псевдомицелия, что подтверждало развитие поверхностного кандидоза у кроликов.

С 4-го дня от момента заражения в опытной группе для лечения животных применяли 2%-ную мазь «Анандин» по схеме: 2 раза в сутки, в течение 5 дней, ежедневно. Кроликов из контрольной группы не лечили. На 2-й день с момента заражения у большинства кроликов отмечали гиперемию, отек и зуд контактной поверхности, у всех животных была выявлена десквамация эпителия кожи. К 3-4-му дню все перечисленные симптомы воспаления кожи сохранялись, у некоторых животных наблюдали эрозивно-язвенные поражения.

После начала применения испытуемой мази у кроликов отмечали улучшение клинического состояния и исчезновение характерных признаков. К 8-му дню все неблагоприятные симптомы у животных из опытной группы исчезали. Наблюдение продолжали до 15-го дня. Рецидивов не отмечали. Повторная микроскопия биоптата на предмет обнаружения активных форм гриба Candida albicans показала лишь отдельные дрожжеподобные клетки и отсутствие мицелиальных нитей, что свидетельствовало о сапрофитном состоянии гриба и выздоровлении животных.

У контрольных животных все неблагоприятные симптомы наблюдали с момента заражения по 10-й день включительно. С 11-го дня отмечали спонтанное выздоровление некоторых кроликов. К 15-му дню регистрировали спонтанное выздоровление семи животных, повторная микроскопия биоптата с локуса заражения у 3-х животных из 10 показала наличие дрожжеподобных клеток и единичных нитей мицелия, что свидетельствовало о продолжении инфекционного процесса в коже.

Таким образом, было показано, что 2%-ная мазь «Анандин» способствует купированию смоделированного процесса поверхностного кандидоза у кроликов-альбиносов и сокращает сроки выздоровления в среднем в 2 раза.

2.18 Клинические испытания 2%-ной мази «Анандин» при питироспорозе и поверхностном кандидозе кожи у собак

Malassezia pahydermatis и Candida albicans являются условно-патогенными микромицетами. Они провоцируют болезни кожи у собак на фоне сниженной резистентности организма, что может быть вызвано иммуносупрессивной терапией (применением цитостатиков, глюкокортикоидов), длительным назначением антибиотиков по поводу первичного заболевания, что приводит к снижению резистентности и нарушению соотношения нормальной микрофлоры кожи. Кроме того, влажные, теплые условия в сочетании с плохой вентиляцией способствуют развитию у животных микозов, протекающих совместно со стафилококковыми инфекциями кожи. Современный подход к терапии микозов - назначение противогрибковых лекарственных препаратов и иммуномодуляторов, которые позволяют организму справиться самостоятельно с инфекцией, вызванной условно-патогенными грибами за счет собственных резервов.

Руководствуясь вышеизложенным, была изучена терапевтическая активность 2%-ной мази «Анандин» и «Анандина для инъекций» при питироспорозе и поверхностном кандидозе у собак. В эксперименте было задействовано 60 собак разных пород в возрасте от 3 до 7 лет. Условно их разделили на 5 групп. В группы с 1-ой по 4-ую входили по 9 собак с питироспорозом и по 3 животных с поверхностно-очаговым кандидозом. Пятая группа объединяла 12 клинически здоровых животных, которые были зарезервированы для контроля. Из анамнеза больных поверхностным кандидозом пациентов следовало, что каждое животное подвергалось длительной антибиотической и/или гормональной терапии по поводу первичного заболевания. У всех собак из опытных групп регистрировали иммунодефицитный синдром.

Диагноз ставили комплексно с учетом анамнеза, клинических признаков и лабораторного подтверждения. У больных питироспорозом собак очаговые поражения кожи были в области туловища, подмышек, паха, межпальцевых пространств. Эти локусы были покрасневшими, с аллопециями и шелушением кожи. У некоторых собак отмечали жирную экссудацию и зуд. При этом у вислоухихих собак был отит, обусловленный Malassezia pahydermatis.

Клиническая картина у собак, больных поверхностным кандидозом была представлена локализованными сыпями различной морфологии в области морды, туловища, естественных складок кожи и между пальцами лап. Поражения кожи характеризовались наличием пустул и папул, наполненных серозной жидкостью, после вскрытия которых образовывались эрозии. Десквамация эпителия характеризовалась наличием белесоватых и сероватых корочек; отмечали выпадение шерсти и зуд. Также регистрировали гиперемию и отечность губ и брылей с мелкими эрозиями и шелушением.

Животным из 1-й опытной группы назначали для местного лечения 2%-ную мазь «Анандин». Обработку пораженных участков кожи проводили 2 раза в день, ежедневно в течение 14 дней, после предварительной санации 0,05%-ным раствором хлоргексидина. Животных из 2-й опытной группы дополнительно однократно, вводили подкожно или внутримышечно 10%-ный раствор «Анандина для инъекций» в дозе 10 мг/кг массы тела. Животным из 3-й и 4-й опытных групп назначали «Нистатиновую мазь» и 1%-ный крем «Клотримазола» соответственно и согласно принятых наставлений.

Уровни миелопероксидазы и лизосомных катионных белков на фоне рН кожи, дают косвенное представление о резистентности организма и способности кожи проявлять адекватное фунгицидное и бактерицидное действие. До начала лечения рН кожи собак из опытных групп была повышена по сравнению с клинически здоровыми животными и составляла в среднем - 6,10±0,09 (P > 0,05), против 5,68±0,07, в контроле. Уровень лизосомных катионных белков и миелопероксидазы нейтрофилов капиллярной крови, напротив, был достоверно ниже у животных в опытных группах по сравнению с контрольными. Так, уровень лизосомных катионных белков в среднем по опытным группам составлял 1,39±0,05 ед. (P < 0,05), против 1,61±0,03 в контроле, а миелопероксидазы - 0,77±0,03 ед. (P < 0,001) , против - 1,37±0,04, в контрольной группе. После лечения у собак из опытных групп значение рН кожи было максимально приближено к показателям у клинически здоровых животных и составляло в среднем 5,85±0,05 (P< 0,05), при этом адекватным контрольному значению был показатель рН кожи у собак из 2-ой опытной группы - 5,68±0,09 (P< 0,05). Содержание миелопероксидазы было достоверно выше, однако, по-прежнему, уступало этому показателю у здоровых животных. Однако во 2-ой опытной группе, где применяли лекарственные формы анандина этот показатель был выше, чем в других опытных группах и составлял 1,31±0,03 ед. (P < 0,001). Одним из основных факторов, характеризующих фунгицидные свойства кожи, является способность нейтрофилов капиллярной крови высвобождать лизосомные катионные белки, как было показано ранее. Их уровень до начала лечения у больных собак был достоверно ниже, чем у клинически здоровых, а после курса терапии - повышался. Максимально приближенными к контрольному уровню были результаты, полученные в 1-й и 2-й опытных группах: 1,60±0,03 ед. (P < 0,05) и 1,62±0,02 ед. (P < 0,05), соответственно. Полученные данные свидетельствовали о том, что применение 2%-ной мази «Анандин» благотворно влияет на состояние кожи и ферментные системы нейтрофилов капиллярной крови.

Исследование крови чрезвычайно важно при диагностике внутренних болезней. Для исключения возможной системной патологии было проведено гематологическое обследование собак. У животных, страдающих микозами, отмечали эритроцитопению, лейкоцитопению и гемоглобинемию на фоне увеличения скорости оседания эритроцитов (хотя и в пределах границ физиологических нормативов). Однако, назначенное лечение обеспечивало оптимизацию всех перечисленных показателей. При этом лучшие результаты наблюдали в 1-й и 2-й опытных группах, где применяли для лечения больных собак 2%-ную мазь «Анандин» и 10%-ный раствор «Анандина для инъекций».

Изменения в лейкограмме у собак с поверхностными микозами нехарактерны. Снижение количества сегментоядерных нейтрофилов отмечали у собак, страдающих поверхностными микозами, по сравнению с клинически здоровыми. Количество лимфоцитов было несколько выше у собак из опытных групп, чем в контроле. Уровень моноцитов был значительно выше у опытных животных по сравнению с контрольными значениями.

Наиболее характерными были изменения показателей специфического и неспецифического иммунитета и ферментных систем у собак до и после лечения. Так, фагоцитарная активность у животных из 1-й опытной группы до начала лечения была на 19% ниже, чем у клинически здоровых животных. По окончании лечения разница с контролем была 5%. Наименьшую фагоцитарную активность крови до лечения констатировали у собак из 2-й опытной группы - на 19,5% ниже, чем у контрольных особей. Однако, в группе где сочетанно применяли 2%-ную мазь «Анандин» с «Анандином для инъекций» был самый высокий показатель фагоцитарной активности крови у животных - 72,02 ± 2,64% (P < 0,001), против 72,44±1,15 у здоровых животных. У собак из 3-й и 4-й опытных групп фагоцитарная активность крови была в среднем на 18,5% ниже по сравнению с контролем. К концу лечения разница составляла 7,3%.

Количество иммуноглобулинов в среднем по опытным группам было 13,18 ± 0,49 г/л (P < 0,001). Разница до начала лечения составляла 26,7%. По окончании лечения этот показатель в 1-й и 2-й опытных группах у собак составил 17,91 ± 0,24 г/л и 18,01 ± 0,27 г/л (P < 0,001), что вполне адекватно контролю - 17,97±0,54.

Общепризнано ведущее значение нарушений Т-системы иммунитета в патогенезе микопатий. Уровень Т-лимфоцитов до начала лечения в опытных группах был приблизительно в 2 раза ниже, чем у клинически здоровых животных, составляя в среднем по опытным группам 23,63±1,29 % (P < 0,001), против - 41,25±1,05 %. По окончании лечения у животных из опытных группы процентное содержание Т-лимфоцитов повышалось. Максимально приближенным к контрольному значению был уровень Т-лимфоцитов у собак из опытных групп, где назначали лекарственные формы анандина, а именно в 1-ой группе - 39,11±2,08 %, во 2-ой группе - 41,24±1,10 % (P < 0,001). У животных из 3-й и 4-й опытных групп этот показатель был ниже, чем в контроле в среднем на 22,1%.

Процентное содержание В-лимфоцитов у животных из опытных групп до начала лечения было существенно ниже по сравнению с клинически здоровыми собаками, составляя в среднем по опытным группам 9,99±0,54 % (P < 0,001), против 23,04±1,17 %, в контроле. По окончании курса лечения наблюдали увеличение процента В-лимфоцитов по сравнению с первоначальным уровнем. При этом уровень В-лимфоцитов повышался адекватно контрольному значению этого показателя у собак в 1-й и 2-й опытных группах: 21,56±1,44 % и 23,01±1,19 % (P < 0,001), соответственно. В 3-й и 4-й группах этот показатель составил: 15,12±1,61 % и 12,17±1,95 % (P < 0,001), соответстенно. Уровень О-лимфоцитов до начала лечения в среднем по опытным группам превышал контрольный в 1,9 раза. Количество О-лимфоцитов на момент окончания лечения у собак из 1-ой и 2-й опытных групп было максимально приближено к таковому у клинически здоровых животных. У собак из 3-й и 4-й опытных групп этот показатель по-прежнему был выше контрольного в 1,5 раза. При этом прослеживалась следующая закономерность: у здоровых животных сумма Т- и В-лимфоцитов была больше количества О-лимфоцитов, а у больных микозами - наоборот: число О-клеток было больше суммы Т- и В-клеток.

Таким образом, можно сделать вывод о том, что 2% мазь «Анандин» обладает высокой антимикотической и иммуностимулирующей активностью, а также регенерирующими свойствами, которые позволяют купировать патологический процесс, спровоцированный возбудителями Malassezia pahydermatis и Candida albicans в течение 10-14 дней, что свидетельствует о преимуществе указанной лекарственной формы анандина перед «Нистатиновой мазью» и 1%-ным кремом «Клотримазола», на ранних стадиях поверхностных микозов. При этом сочетанное применение мази «Анандин» с парэнтеральным, однократным введением 10%-ного раствора «Анандина для инъекций» позволяет повысить терапевтическую эффективность. Это выражается в сокращении сроков купирования патологического процесса и подтверждается результатами микологических исследований. Следовательно, 2%-ную мазь «Анандин» можно рекомендовать в качестве высокоактивного альтернативного фармакологического средства для лечения собак, страдающих поверхностным кандидозом и питироспорозом, в тех случаях, когда поражение кожи локализовано на ограниченных участках и как средство вспомогательной терапии при обширных поражениях.



Выводы

1. Включение иммуномодулятора «Анандин®» - 1,2:5,6-ди-о-изопропилиден-б-D-глюкофураноза-3-0-(N,N-диметиламинопропил) -10-метиленкарбоксилат-9-акридон - в структуру лекарственных форм для наружного применения расширило фармакологические возможности последних и повысило их терапевтическую активность.

2. Глазные-интраназальные капли «Анандин» не обладают местным раздражающим действием, аллергенными свойствами и не вызывают болевых ощущений при инстилляции.

3. Глазные-интраназальные капли «Анандин» оказывают эффективное противовирусное действие при конъюнктивите, сопровождающем инфекционный ринотрахеит кошек, а также терапевтически активны в 80% случаев острых конъюнктивитов различного генеза у кошек.

4. Оптимальная схема применения глазных-интраназальных капель «Анандин» при конъюнктивите кошек: 1-2 капли/глаз, 3-4 раза в день, 7-10 дней.

5. Ушные капли «Анандин» не обладают местным раздражающим действием и аллергенными свойствами, проявляют противовоспалительное (за счет анандина), антимикробное (благодаря грамицидину С), регенирирующее (обусловленное маслом касторовым), действие при остром наружном отите у собак.

6. Оптимальная схема применения ушных капель «Анандин» при остром наружном отите у собак: 2-4 капли/ухо, 2 раза в день 7-10 дней.

7. Ушные капли «Анандин плюс» не оказывают местного раздражающего и аллергенного действия, обладают противовоспалительным, антимикробным, регенирирующим и акарицидным (за счет циперметрина/перметрина) действием при отодектозе кошек и собак, а также отодектозе, осложненном отитом.

8. Применение ушных капель «Анандин плюс» при отодектозе кошек также эффективно, как и применение мази «Акаробор» и эффективнее на 20% по сравнению с применением «Неостомазана» при лечении отодектоза и на 40% при лечении отодектоза, осложненного отитом. По своим фармакологическим свойствам и терапевтической активности при отодектозе собак ушные капли «Анандин плюс» не уступают мази «Акаробор» и превосходят ушные капели «Отоферонол®» на 10 %.

9. Оптимальная схема применения ушных капель «Анандин плюс» для кошек: 2-3 капли/ухо, 1 раз в 3-5 дней, в течение 2-3 недель. Оптимальная схема применения ушных капель «Анандин плюс» для собак: 4-5 капель/ухо, 1 раз в 5 дней, 3-х кратно.

10. Применение «Анандина для инъекций» на модели генерализованного кандидоза у белых мышей в дозе 10 мг/кг, в течение 5 дней после заражения увеличивает продолжительность жизни белых мышей в 2,3 раза.

11. Мазь «Анандин» не обладает местным раздражающим действием и аллергенными свойствами, оказывает противогрибковое и заживляющее действие на экспериментальной модели поверхностного кандидоза у морских свинок, купируя сроки выздоровления, по сравнению со спонтанным исцелением, на 10-12 дней.

12. На экспериментальной модели поверхностного кандидоза у кроликов-альбиносов 2%-ная мазь «Анандин» оказывает противогрибковое и заживляющее действие, купируя сроки выздоровления, по сравнению со спонтанным исцелением, на 8 дней.

13. Мазь «Анандин» обладает высокой антимикотической, противовоспалительной и регенерирующей активностью при питироспорозе и поверхностно-очаговом кандидозе кожи у собак, купируя патологический процесс в течение 10-14 дней.

14. Эффективность противогрибковой терапии повышается при сочетанном применение 2%-ной мази «Анандин» и однократного внутримышечного введения «Анандина для инъекций» из расчета 10 мг/кг массы тела собаки.

15. Под действием сочетанного применения 2%-ной мази «Анандин» и «Анандина для инъекций» по сравнению с изолированным применением «Нистатиновой мази» и 1%-ного крема «Клотримазола» более эффективно происходит нормализация рН кожи до уровня 5,68±0,09 (P< 0,05), повышение уровня миелопероксидазы до уровня 1,31±0,03 (P< 0,001) и лизосомных катионных белков до уровня 1,62±0,02 (P< 0,05), а также восстановление показателей лейкограммы у больных собак.

16. Под действием 2%-ной мази «Анандин» и «Анандина для инъекций» по сравнению с изолированным применением нистатиновой мази и 1%-ного крема клотримазола уровень Т- и В-лимфоцитов в крови больных собак достоверно повышается до такового у клинически здоровых животных. Так, уровень Т-лимфоцитов составил 41,24±1,10 % (P< 0,001), уровень В-лимфоцитов - 23,01±1,19 % (P< 0,001).

17. Оптимальная схема применения 2%-ной мази «Анандин» при дерматомикозах, спровоцированных Malassezia pahydermatis и Candida albicans: тонким слоем на пораженный участок, 2 раза в день в течение 10-14 дней.

18. Фармакологическая и терапевтическая эффективность новых лекарственных форм «Анандина» наглядно демонстрирует научно-практическую целесообразность их разработки и перспективность внедрения политропных лекарственных средств с включением в рецептуру этих препаратов иммуномодулирующих веществ.

Практические предложения

1. Разработаны и внедрены в производство четыре новых лекарственных формы анандина для наружного применения.

2. Разработаны и утверждены в Департаменте Ветеринарии Инструкции по применению капель глазных-интраназальных «Анандин», двух видов ушных капель: «Анандин» и «Анандин плюс» и мази «Анандин».

3. ТУ 9337-003-46913214-00 Капли глазные-интраназальные «Анандин».

4. ТУ 9337-004-46913214-00 Капли ушные «Анандин».

5. ТУ 9337-005-46913214-00 Капли ушные «Анандин плюс».

6. ТУ 9337-002-46913214-00 Мазь «Анандин».

7. Аттестат ФГУ ВГНКИ, удостоверяющий соответствие и наличие условий для промышленного производства четырех новых лекарственных форм «Анандина» для наружного применения.

8. Патент «Способ лечения отодектоза у кошек».

9. Учебное пособие «Новые лекарственные формы индуктора эндогенного интерферона - анандина. Опыт применения в ветеринарии» (2006). Гриф Министерства сельского хозяйства Российской Федерации.

10. Материалы диссертации внедрены в учебный процесс вузов Минсельхоза России.



Список опубликованных работ

1. Соколов В.Д. Клиническая фармакология и фармакотерапия : учеб. пособие / В.Д.Соколов, Н.Л.Андреева, З.Н.Черкай. - СПб. - 1999. - С.75-93.

2. Мухина З.Н. Низкомолекулярные супериндукторы интерферона / З.Н.Мухина, К.А.Кузьмина / Актуальные проблемы ветеринарной медицины мелких домашних животных // матер. конф. Санкт-Петербург, 25-26 нояб. 1999 г. - Санкт-Петербург, 1999. - С.82.

3. Moukhina Z.N. Comparative analysis of interferogenic activite of Anandinum and Virus of Newcasle Disease in vitro / Z.N. Moukhina // Worldґs poultry congress 2000. - Montrйal, Canada. - 20-25 august, 2000. - P.107.

4. Мухина З.Н. К вопросу лечения собак, страдающих болезнями кожи / З.Н.Мухина // Новые фармакологические средства в ветеринарии : матер. 13-й научно-практич. конф. - Санкт-Петербург, 2001. - С.91-92.

5. Мухина З.Н. Лекарственные формы анандина - препараты выбора при лечении мелких домашних животных / З.Н.Мухина // Новые фармакологические средства в ветеринарии : матер. 13-й научно-практич. конф. - Санкт-Петербург, 2001. - С.93-94.

6. Соколов В.Д. Клиническая фармакология и фармакотерапия: Учебное пособие, 2-е изд., перераб. и доп. / В.Д.Соколов, Н.Л.Андреева, З.Н.Черкай. - Санкт-Петербург, 2002. - С.80-100.

7. Мухина, З.Н. Обоснование перспектив использования индукторов интерферона в составе комбинированных лекарственных препаратов / З.Н.Мухина // Новые фармакологические средства в ветеринарии : матер. 14-й научно-практич. конф. - Санкт-Петербург, 2002. - С.78-79.

8. Мухина З.Н. Теоретическое обоснование перспективности создания комбинированных лекарственных средств на примере продукции научно-исследовательского общества «Медитэр» / З.Н.Мухина // Матер. научн. конф. профес.-препод. состава, научн. сотруд. и аспир. СПбГАВМ. - Санкт-Петербург, 2002. - С.58-59.

9. Черкай З.Н.Краткий фармакологический анализ структуры некоторых препаратов НИО «Медитэр» и результаты их использования в ветеринарии / З.Н.Черкай // Петербургский зоокурьер. - 2003. - № 2. - С.11.

10. Черкай З.Н. Теоретическое обоснование включения в рецептуру капель ушных «Анандин» грамицидина С / З.Н.Черкай // Матер. 57-й научн. конф. молоых ученых и студентов СПбГАВМ, посвящ. 300-летию Санкт-Петербурга. - Санкт-Петербург, 2003. - С.79-80.

11. Черкай З.Н. Фармакологическое обоснование рецепта ушных капель «Анандин» / З.Н.Черкай // Новые фармакологические средства в ветеринарии : матер. 15-й научно-практич. конф., посвящ. 300-летию Санкт-Петербурга. - Санкт-Петербург, 2002. - С.47-48.

12. Черкай З.Н. Фармакокоррекция и диетотерапия пищевой аллергии у собак / З.Н.Черкай // Современные проблемы ветеринарной диетологии и нутрициологии : матер. 2-го междунар. симпозиума, Санкт-Петербурга, 22-24 апр. 2003 г. - Санкт-Петербург. - 2003. - С. 43-45.

13. Черкай З.Н. Капли глазные-интраназальные «Анандин» (рецептура, безвредность, результаты применения и внедрения в ветеринарии) / З.Н.Черкай // Международный вестник ветеринарии. - 2004. - № 2. - 69-73.

14. Черкай З.Н. Фармакологическое обоснование перспектив использования в ветеринарии индуктора эндогенных цитокинов «Анандина» в составе лекарственных форм для наружного применения / З.Н.Черкай // Ветеринарная клиника. : Екатеринбург, 2004. - № 3 (22). - С.21-23.

15. Семенов С.А., Результаты применения препарата «Римолан» при лечении онкопатологии собак / С.А.Семенов, Е.А.Быкова, Д.Спруджа, З.Н.Черкай, Л.Иванова, Л.Обушева, Н.В.Мухина // Медицинская иммунология. - 2004. - С. 17-18.

16. Черкай З.Н. Перспективы применения «Анандина» в ветеринарии / З.Н.Черкай // Исследования, результаты : сб.тр. Казахского нац. аграр. унив. - 2005. - № 3. - С.79-81.

17. Черкай З.Н. Фармакологический анализ препаратов, содержащих анандин. Опыт применения в ветеринарии / З.Н.Черкай // Зооиндустрия. - 2005. - № 8-9. - С.8-9.

18. Черкай З.Н. Новые лекарственные формы индуктора эндогенного интерферона - анандина. Опыт применения в ветеринарной медицине: учеб. пособие / З.Н.Черкай. - Санкт-Петербург, 2006. - 92 с.

19. Черкай З.Н. К вопросу лечения вирусных конъюнктивитов у кошек / З.Н.Черкай // Ветеринария. Зоотехния. Комбикорма : тез. докл. междунар. специализир. конгресса-выставки. - Санкт-Петербург, 28-31 авг. 2006 г. - Санкт-Петербург, 2006. - С.257-258.

20. Черкай З.Н. Основные принципы коррекции здоровья животных / З.Н.Черкай // Ветеринария. Зоотехния. Комбикорма : тез. докл. междунар. специализир. конгресса-выставки. - Санкт-Петербург, 28-31 авг. 2006 г. - Санкт-Петербург, 2006. - С.258-259.

21. Черкай З.Н. Лекарственные формы анандина в патогенетической терапии дерматомикозов у собак / З.Н.Черкай // Зооиндустрия. - 2006. - № 9. - С.5-6.

22. Черкай З.Н. Эффективность капель «Анандин» при вирусных болезнях кошек / З.Н.Черкай // Ветеринария. - 2006. - № 7. - С.57-59.

23. Черкай З.Н. Эффективные лекарственные формы в ветеринарной дерматологии / З.Н.Черкай // Ветеринария. - 2006. - № 12. - С.56-58.

24. Черкай З.Н. К вопросу лечения вирусных конъюнктивитов у кошек / З.Н.Черкай // Актуальные проблемы ветеринарной медицины : тез. докл. междунар. научно-практич. конгр. Санкт-Петербург, 28-29 авг. 2006 г. - Санкт-Петербург, 2006. - С. 254-258.

25. Черкай З.Н. Основные принципы коррекции здоровья животных / З.Н.Черкай //Актуальные проблемы ветеринарной медицины : тез. докл. междунар. научно-практич. конгр. Санкт-Петербург, 28-29 авг. 2006 г. - Санкт-Петербург, 2006. - С. 258-259.

26. Мухина Н.В. Ветеринарная диетология как основа коррекции здоровья животных / Н.В.Мухина, З.Н.Черкай // Ветеринария и кормление. - 2006. - № 3. - С. 12-13.

27. Мухина Н.В. К вопросу профилактики вирусных инфекций / Н.В.Мухина, Ю.А.Бойков, З.Н.Черкай // Матер.научн.сессии СЗНМЦ РАСХН и ВНИВИП, Санкт-Петербург - Ломоносов, 29-30 мая 2006 г. - Санкт-Петербург, 2006. - С.170-173.

28. Семенов С.А. Результаты исследования показателей врожденного иммунитета у собак / С.А.Семенов, Е.А.Быкова, Л.Р.Хемий, Н.В.Мухина, З.Н.Черкай // Актуальные проблемы ветеринарной медицины : тез. докл. междунар. научно-практ. конгр. - Санкт-Петербург, 28-31 авг. 2006 г. - Санкт-Петербург : ЛЕНЭКСПО, 2006. - С.217-220.

29. Черкай З.Н. К вопросу о создании новых эффективных препаратов для лечения отитов у собак / З.Н.Черкай // Ветеринарная медицина домашних животных : сб. ст. - Казань: Печатный двор, 2006. - С.133 - 136.

30. Черкай З.Н. Сравнительная эффективность анандина при поверхностной микопатии у собак / З.Н.Черкай // Ветеринарная медицина домашних животных : сб. ст. - Казань: Печатный двор, 2006. - С.136 - 139.

31. Черкай З.Н. Опыт применения ушных капель «Анандин плюс» при отодектозе кошек / З.Н.Черкай // Ветеринария и кормление. - 2006. - № 6. - С. 27.

32. Черкай З.Н. Новая форма «Анандина» - капли глазные-интраназальные / З.Н.Черкай // Ветеринарная практика. - 2006. - №4. - С.11-14.

33. Черкай З.Н. Способ лечения отодектоза у кошек / З.Н.Черкай // Решение о выдаче патента на изобретение. - 26.06.2006.

34. Черкай З.Н. Ушные капли «Анандин» при бактериальных отитах у собак / З.Н. Черкай // Ветеринария. - 2007. - №3. - С.59-60.

35. Черкай З.Н. Использование капель глазных-интраназальных «Анандин» при конъюнгтивитах / З.Н. Черкай // Доклады Российской академии сельскохозяйственных наук : научно-теоретический журнал. 2007. - №2.- С.47-49.

36. Черкай З.Н. Применение капель с «Анандином» при конъюнктивите кошек / З.Н.Черкай // Ветеринария. - 2007. - №5. - С.57-58.

37. Черкай З.Н Генерализованный кандидоз у белых мышей / З.Н.Черкай // Ветеринарная практика. - 2007. - №2. - С.11-14.

38. Черкай З.Н Лекарственные формы анандина в патогенетической терапии дерматомикозов у собак / З.Н.Черкай // Ветеринарная практика. - 2007. - №3. - С.12-15.

39. Черкай З.Н Эффективность ушных капель «Анандин» при отитах у собак / З.Н.Черкай // Новые фармакологические средства в ветеринарии: матер. 19-й международной научно-практич. конф. - Санкт-Петербург, 2007. - С.22.

40. Черкай З.Н Объединение двух видов лекарственных форм в одну / З.Н.Черкай // Ветеринария и кормление. - 2007. - № 3. - С. 28-29.



Автор выражает благодарность

1. Ректору ФГОУ ВПО «СПбГАВМ», профессору, члену-корреспонденту РАСХН А.А.Стекольникову.

2. Проректору по науке ФГОУ ВПО «СПбГАВМ», профессору А.А.Сухинину.

3. Научному консультанту, заслуженному деятелю науки РФ, профессору В.Д.Соколову.

4. Заведующей кафедрой фармакологии и токсикологии, профессору Н.Л.Андреевой.

5. Директору НИО «Медитэр», кандидату химических наук О.В.Травкину.

6. Ветеринарным специалистам лечебных учреждений Санкт-Петербурга, Калининграда, Ярославля, Мурманска и Смоленска.



Лицензия ПЛД № 69-217 от 22. 10. 1997 г.

Подписано в печать

Тираж 100 экз. Заказ №

Отпечатано с готового оригинала-макета

в типографии ООО «Политон»

198096, Санкт-Петербург, пр. Стачек, 82

тел: 784-13-35

Размещено на Allbest.ru