Состояние иммунологической реактивности облученных животных и их потомков 1-го поколения вследствие воздействия сублетального гамма-излучения

Размещено на http://www.allbest.ru/

Состояние иммунологической реактивности облученных животных и их потомков 1-го поколения вследствие воздействия сублетального гамма-излучения

У облученных животных и их потомков 1-го поколения последействие сублетальной дозы гамма-излучения вызывает снижение количественных и повышение качественных показателей в клеточном звене иммунитета. Депрессия в гуморальном звене иммунитета в отдаленном периоде сменяется ее активацией у их потомков 1-го поколения. Высокая активность неспецифической фагоцитарной реактивности сохраняется и у потомков 1-го поколения, но в менее выраженной форме.

Исход лучевых поражений, развитие ближайших и отдаленных последствий зависят от состояния и чувствительности иммунной системы к ионизирующему излучению. Имея высокую радиочувствительность, иммунная система длительное время сохраняет повреждения в отдельных звеньях системы иммунитета. Наиболее часто в этот период регистрируются нарушения Т-клеточного звена, особенно при действии сублетальной дозы гамма-излучения [1-3].

Появление нарушений и дисбаланса в гуморальном звене иммунитета и сопряженных с ним отдаленных последствий и осложнений проявляется ускорением процессов старения, быстрым прогрессированием хронических заболеваний внутренних органов, а также развитием злокачественных новообразований [4, 2].

В ближайшее время после сублетального облучения происходит супрессия во всех звеньях иммунитета, что является основой в формировании иммунологической недостаточности [2, 5, 6]. Поэтому использование иммунологических методов, комплексное изучение состояний клеточного, гуморального звеньев иммунитета, неспецифической фагоцитарной резистентности организма животных и человека необходимы в качестве чувствительных тестов для оценки эффективности последействия сублетальной дозы гамма-излучения отдаленных последствий и у потомков 1-го поколения.

С учетом изложенного выше цель нашего экспериментального исследования -- изучение последействия сублетальной дозы гамма-излучения 6 Гр на иммунологическую реактивность организма у облученных животных и их потомков 1-го поколения.

Материалы и методы исследования

Выполнены 3 серии опытов на 55 белых беспородных половозрелых крысах. 1-я серия -- ин-тактные (n=15), 2-я -- (n=20) облученные (3 месяца) животные, 3-я серия -- облученные животные + потомки 1-го поколения, n=20). Облучение подопытных животных двух серий производилось на российском радиотерапевтическом устройстве «Агат-РМ», гамма-лучами ⁶⁰Co, доза облучения 6 Гр. В периферической крови определяли общее количество лейкоцитов и лимфоцитов. Состояние клеточного звена иммунитета оценивали по абсолютному и относительному количеству СД3+, СД4+, СД8+ и СД19+-клеток с соответствующими моноклональными антителами, расчетным путем подсчитывали иммунорегуляторный индекс [7]. Определяли реакцию торможения миграции лейкоцитов (РТМЛ на ФГА) [8].

Состояние гуморального иммунитета оценивалось по количеству В-лимфоцитов (СД19+) -- исследовали с соответствующими моноклональными антителами методом проточной цитометрии концентрацию циркулирующих иммунных комплексов (ЦИК) [9, 10]. Для исследования антителообра-зующих клеток (АОК) использовали метод локального гемолиза [11]. Индекс супрессии определялся расчетным путем в процентах. Неспецифическое фагоцитарное звено иммунитета оценивалось по фагоактивности полинуклеаров. Изучали содержание фагоцитирующих полинуклеаров (нейтрофилов, псевдоэозинофилов) [12, 13]. В качестве фагоцитирующего материала использовали латекс. Фагоцитарным показателем считали процент нейтрофилов, вступивших в фагоцитоз от общего количества нейтрофилов. Определяли показатели мононуклеарно-фагоцитарной системы (НСТ-тест) [14].

Полученные цифровые данные обрабатывались общепринятыми методами вариационной статистики [15].

Результаты и обсуждение

Нами были изучены основные показатели Т-клеточного, гуморального звеньев иммунитета и неспецифической фагоцитарной резистентности организма у облученных животных в отдаленном периоде и их потомков 1-го поколения после общего воздействия гамма-излучения в сублетальной дозе 6 Гр (см. табл.).

Из таблицы видно, что при облучении гамма-лучами в дозе 6 Гр во второй группе количество лейкоцитов соответствует исходному значению. Повышается число лимфоцитов, но при этом не достигает статистической значимости. Отмечается повышение абсолютного и относительного показателей СД3+ и СД4+ лимфоцитов до уровня контрольных величин. Достоверно сниженными в этот период наблюдения остаются абсолютное и относительное числа СД8+ лимфоцитов на 36,6 и 29 % соответственно, что обусловливает повышение иммунорегуляторного индекса в 1,57 раза (P<0,001). Индекc миграции лейкоцитов в РТМЛ на ФГА соответствует контрольному показателю.

Резюмируя полученные результаты, можно заключить, что в отдаленном периоде после воздействия гамма-облучения в дозе 6 Гр отмечается нормализация числа лейкоцитов, СД3+ и СД4+ лимфоцитов, снижение уровня СД8+ лимфоцитов и нормализация лимфокинпродуцирующей способности лейкоцитов.

В третьей группе -- потомков 1-го поколения в периферической крови отмечаются лейкоцитоз, лимфоцитоз, снижение количества абсолютного и относительного содержания СД3+ и СД4+ лимфоцитов и иммунорегуляторного индекса. Количество СД8+ соответствует данным контрольной группы. Повышается лимфокинпродуцирующая способность лейкоцитов.

Таким образом, у облученных животных и их потомков 1-го поколения на фоне лейко-лимфоцитоза отмечается снижение количества СД3+ и СД4+ лимфоцитов и повышение функциональной способности лейкоцитов.

Количество лимфоцитов в периферической крови повышается до контрольных уровней. Повышение числа АОК в селезенке до 40+2,3 % сопровождается снижением индекса супрессии в 1,6 раза и концентрации ЦИК в сыворотке крови в 6,5 раза. При этом надо отметить, что, несмотря на повышение антителообразования в селезенке, снижение индекса супрессии и концентрации ЦИК в сыворотке крови не достигают уровня контрольных величин и остаются достоверно низкими.

У потомков облученных животных 1-го поколения активность в гуморальном звене иммунитета проявляется в увеличении числа СД19+ лимфоцитов. Число последнего статистически увеличено в сравнении с контрольной группой в 1,5 раза. В сыворотке крови отмечается достоверное снижение циркулирующих иммунных комплексов. Антителопродуцирующая способность селезенки соответствует контрольной величине.

Резюмируя полученные данные, можно констатировать, что в отдаленном периоде у облученных животных отмечается депрессия, тогда как у потомков облученных животных 1-го поколения отмечается активация гуморального звена иммунитета.

Ранее приведенные нами исследования показывают, что в ближайшем периоде лучевого поражения в дозе 6 Гр происходит повышение функционально-метаболической активности нейтрофилов, что сопровождалось увеличением НСТ-теста на 61 %.

В отдаленном периоде -- через 90 дней после сублетального гамма-облучения -- достоверно повышается показатель фагоцитоза, фагоцитарное число и НСТ-тест -- на 1,7, 1,5 и 1,5 раза соответственно, что свидетельствует о высокой функциональной способности неспецифического фагоцитарного звена иммунитета.

Приведенные результаты позволяют предположить, что высокая фагоцитарная способность нейтрофилов и макрофагов свидетельствует о включении адаптивных механизмов в отдаленном периоде облучения.

У потомков 1-го поколения облученных животных отмечается в сравнении со второй группой достоверное снижение фагоцитоза и НСТ-теста. Но в сравнении с показателями интактной группы фагоцитоз и фагоцитарное число достоверно выше в 1,3 и 1,4 раза соответственно. Функционально-метаболическая активность нейтрофилов на 22 % превышает данные интактного организма.

Таким образом, полученные данные позволяют сделать заключение, что в ближайшем периоде после сублетального облучения в дозе 6 Гр повышается функционально-метаболическая активность нейтрофилов, тогда как в отдаленном периоде после облучения происходит повышение не только функционально-метаболической активности нейтрофилов, но и повышение функциональной активности лейкоцитов. Высокая активность неспецифической фагоцитарной звена иммунитета сохраняется и у облученных потомков 1-го поколения, но в менее выраженной форме.

У облученных животных и их потомков 1-го поколения на фоне лейко-лимфоцитоза отмечается снижение количества СД3+ и СД4+ лимфоцитов и повышение функциональной способности лейкоцитов. В отдаленном периоде у облученных животных в гуморальном звене иммунитета отмечается депрессия, тогда как у их потомков 1-го поколения отмечается активация гуморального звена иммунитета. Высокая активность неспецифической фагоцитарной резистентности организма сохраняется и у облученных потомков 1-го поколения, но в менее выраженной форме.

Список литературы

облученный животное цитометрия иммунитет

1. Simon D., Bauer M.E., Jeckel C.M., Luz C. The role of stress factors during aging of the immune system // Ann. NY Acad. Sci. -- 2003. -- 1153. -- P. 139-152.

2. Жетписбаев Б.А. Иммунокоррекция нарушений адаптационных механизмов при стрессе на фоне лучевого поражения организма: Автореф. дис. д-ра мед. наук. -- Алматы, -- 45 с.

3. Жетписбаев Г.А., Жетписбаев Б.А., Кембаева Д.К., Узбекова С.Е. Действие острого гамма-излучения и левзея на состояние центральных и периферических лимфоидных органов // Экология, радиация, здоровье: МатериалыIII Междунар. конф. -- Семей, 2002. -- С. 126.

4. Жетписбаева Х.С., Ильдербаев О.З., Жетписбаев Б.А. Стресс и иммунная система. -- Алматы, 2009. -- 235 с.

5. Жетписбаев Б.А., Мусайынова А.К., Шалгимбаева Г.С., Хисметова З.А. Отдаленные эффекты малой дозы радиации: иммунологический эффект // Наука и здравоохранение. -- 2013. -- № 5. -- С. 30-31.

6. Аклеев А.В., Овчарова Е.А. Иммунный статус людей, подвергшихся хроническому радиационному воздействию в отдаленные сроки // Мед. радиол. и радиац. безопасность. -- 2007. -- № 3. -- С. 5-9.

7. Гариб Ф.Ю., Гариб В.Ю., Ризопулу А.П. Способ определения субпопуляции лимфоцитов. 1111 № 2426 Руз // Расмий ахборотнома. -- Ташкент, 1995. -- № 1. -- С. 90.

8. Артемова А. Г. Феномен торможения миграции лейкоцитов крови у морских свинок с гиперчувствительностью замедленного типа к чужеродному тканевому агенту // Бюл. эксперим. биол. и мед. -- 1973. -- Т. 76, № 10. -- С. 67-71.

9. Digeon M., LaverM. Detection of circulating immune complex in human sera by simplified assays with polyethylene glucose // J. Immunol. Methods. -- 1977. -- № 1. -- Р. 165-183.

10. Гринкевич Ю.Я., Алферов А.Н. Определение иммунных комплексов в крови онкологических больных // Лаб. дело. -- 1981. -- № 8. -- С. 493-495.

11. Jerne N., Nordin A. Plague formation in agar by single antibodyproducing cells // -- 1963. -- № 140. -- P. 336-406.

12. Бутаков А.А., Оганезов В.К., Пинегин и др. Спектрофотометрическое определение адгезивной способности полиморфноядерных лейкоцитов периферической крови // Иммунология. -- 1991. -- № 5. -- С. 71-72.

13. Кост Е.А. Справочник по клиническим лабораторным методам исследования. -- М., 1975.

14. Нагоев Б.С., Шубич М.Г. Значение теста восстановления нитросинего тетразолия для изучения функциональной активности лейкоцитов // Лабораторное дело. -- 1981. -- № 4. -- С. 195-198.

15. Монцевичюте-Эрингене Е.В. Упрощенные математико-статистические методы в медицинской исследовательской работе // Пат. физиол. и эксперим. терапия. -- 1961. -- № 1. -- С. 71-76.

Размещено на Allbest.ru