Диагностика и профилактика лептоспироза

Размещено на http://www.allbest.ru/

Содержание

Введение

1. Краткая характеристика заболевания

2. Эпизоотологические данные

3. Характеристика возбудителя

3.1 История открытия возбудителя

3.2 Морфология возбудителя его место в систематике по Берджи

4. Лабораторная диагностика заболевания

4.1 Особенности взятия и пересылки патологического материала

4.2 Бактериологическая диагностика

4.3 Культуральные свойства

4.4 Биохимические свойства

4.5 Серологическая диагностика

4.6 Биопроба

5. Устоичивость возбудителя

6. Особенности специфической профилактики и иммунитет. Лечение

7. Профилактика и меры борьбы

Заключение

Библиографический список



Введение

Лептоспироз относится к числу наиболее распространенных зоонозных заболеваний, он встречается на всех континентах. Именно потому, что основным источником инфекции являются грызуны, в меньшей степени -- домашние животные, формируются трудно контролируемые городские и природные очаги. Контроль тем более усложняется, что животные могут длительно, иногда месяцами, выделять лептоспиры с мочой, оставаясь внешне здоровыми. Даже вакцинированные животные могут становиться стойкими носителями лептоспир, выделяя их в большом количестве в окружающую среду. Высокая восприимчивость к инфекции людей и легкость инфицирования создают опасность заражения и заболевания человека во время пребывания его в природных очагах лептоспироза, а также при наличии инфицированных грызунов в жилых помещениях, на складах, фермах и т. д., при общении с больными и инфицированными домашними животными.

Тяжесть течения отдельных клинических форм с быстрым нарастанием клинической симптоматики представляет нередко реальную угрозу для жизни больного, а полиорганность поражений, проявляющаяся полиморфизмом клинических проявлений, часто становится причиной диагностических ошибок -- при первичном обращении число таких ошибок, по некоторым данным, доходит до 90 %. А при лептоспирозе, как, пожалуй, при немногих заболеваниях, каждый потерянный день снижает шансы больного на выживание.



1. Краткая характеристика заболевания

Лептоспироз (лат., англ. -- Leptospirosis; болезнь Вейля, тиф собак) -- в основном остро протекающая природно-очаговая болезнь животных многих видов и человека, проявляющаяся кратковременной лихорадкой, ге-моглобинурией или гематурией, геморрагиями, желтушным окрашиванием и очаговыми некрозами слизистых оболочек и кожи, атонией желудочно-кишечного тракта, абортами, маститами, рождением нежизнеспособного потомства, периодической офтальмией и менингоэнцефалитами, снижением продуктивности животных.

Лептоспирозом болеют животные всех возрастов, но чаще и тяжелее -- молодняк. Болезнь протекает остро, реже -- сверхостро (молниеносно), подостро и хронически. Инкубационный период колеблется от 4 до 14 дней.

У крупного рогатого скота молниеносное течение характеризуется внезапным повышением температуры тела (41...41,5'С), бурно развивающимся гемолизом, приводящим в течение 5... 12 ч почти к полному разрушению эритроцитов. Наблюдают отказ от корма, сильное угнетение. Дыхание частое и поверхностное. Смерть при явлениях асфиксии, возбуждения и клонических судорог наступает через 12...24 ч. Летальность 100 %.

Острое течение болезни наблюдается чаще у молодняка в возрасте от 2 нед до 1,5 лет и характеризуется высокой лихорадкой (температура 40...41,5°С), потерей аппетита, шаткой походкой, угнетением и общей слабостью (на пастбище больные животные отстают от стада). Шерстный покров взъерошенный, тусклый. Дыхание затрудненное, поверхностное и учащенное. Отмечают нарушение сердечно-сосудистой деятельности. К концу лихорадочного периода (через 2...6 дней с начала болезни) появляется резкая желтушность конъюнктивы, слизистых оболочек рта, влагалища, а также кожи. Слизистые оболочки окрашены в желтый цвет разных оттенков; на них отмечают кровоизлияния. На коже туловища (спина, пах, подгрудок) появляются ограниченные отеки, приводящие к слущиванию эпидермиса или полному некрозу кожи с ее последующим отторжением.

Резко снижается, а часто совсем прекращается молокоотделение. Мочеиспускание болезненное и затрудненное. Моча вишневого или бурого цвета выделяется небольшими порциями. В начале болезни появляется диарея, сменяющаяся затем явлениями резкой атонии, полного отсутствия аппетита, жвачки и сокращений всех преджелудков. У беременных животных преимущественно во второй половине беременности бывают аборты. Животные быстро худеют.

При гематологическом исследовании устанавливают резкую, вначале гиперхромную, а затем гипохромную анемию, иногда стойкий нейтрофильный лейкоцитоз. Число эритроцитов при этом уменьшается до 1...3млн/мкл (1...3 * 1012/л). Концентрация гемоглобина вначале увеличивается до 14,5 г% (145 г/л), цветовой показатель -- до 1,6 (анемия гиперхромного характера), затем вследствие угнетения эритропоэза показатель гемоглобина снижается до 1,7...5,0г% (17...50 г/л). Число лейкоцитов увеличивается до 13...18тыс/мкл (13... 18 * 109/л). Выявляют нейтрофилию с ядерным сдвигом влево, эозинофилию, лимфопению, иногда моноцитоз.

Количество белков сыворотки увеличивается до 9,5... 10 %, билирубина -- до 100 мг% (1000 мг/л). Из сыворотки крови исчезает сахар, снижается количество фибриногена; удлиняется срок свертывания крови.

Продолжительность переболевания 2... 10 дней. Смерть наступает при явлениях выраженной асфиксии. В атональном периоде могут быть судорожные сокращения мышц конечностей, спины и шеи. Летальность, если не оказана лечебная помощь, достигает 50...70 %.

Подострое течение лептоспироза характеризуется в основном теми же симптомами, что и острое, только они слабее выражены, развиваются медленнее. Исхудание, напротив, бывает сильнее, некрозы кожи охватывают иногда огромные поверхности. Продолжительность болезни 10... 18 дней (до 3 нед), смертность 10... 15 %. Возможны рецидивы.

Хроническое течение лептоспироза встречается реже, характеризуется прогрессирующим исхуданием животного, анемичностью слизистых оболочек, некрозами, увеличением паховых лимфатических узлов, периодическим кратковременным повышением температуры тела с одновременным появлением кровавой мочи бурого цвета. Больные животные становятся яловыми, или у них возникают аборты в различные сроки беременности.

В динамике развития болезни различают четыре стадии: продромальную (1), бактериемии (2), основных клинических симптомов (токсическую) (3) и выздоровления (4). Из внешней среды возбудитель проникает в организм человека и животных через (ворота инфекции) поврежденную кожу, слизистые оболочки ротовой и носовой полостей, глаз, мочеполовых путей, респираторного и желудочно-кишечного трактов. Благодаря активной подвижности лептоспиры уже через 5...6 мин после заражения появляются в крови и с током крови и по лимфатическим сосудам попадают в паренхиматозные органы -- преимущественно в печень, почки, надпочечники, селезенку, легкие, а также в ликвор и ткани мозга.

Размножение и накопление лептоспир, их токсинов и продуктов обмена в крови, внутренних органах и тканях приводят к выраженной интоксикации, к разрушению эритроцитов (гемолизу), учащению пульса и дыхания, развитию анемии, резкому повышению температуры тела.

Геморрагический синдром характеризуется кровоизлияниями в почках, легких, эндокарде, эпикарде, на слизистых оболочках желудочно-кишечного тракта, полового аппарата и в коже. Развивается инфекционно-токсический шок с резким нарушением функции органов. Токсическая фаза болезни может закончиться смертью животного либо выздоровлением.

В резистентном организме увеличение количества антител в крови и активизация фагоцитоза ведут к постепенному уничтожению лептоспир во всех тканях и органах, кроме почек, так как, находясь в извитых канальцах, они защищены от действия иммуноглобулинов. Формируется вначале нестерильный, а затем стерильный иммунитет.



2. Эпизоотологические данные

К лептоспирозу восприимчивы более ста видов диких и домашних животных. Лептоспирозные эпизоотические очаги подразделяются на природные, антропургические и смешанные.

Основными хозяевами (резервуарами) и источниками лептоспир в природных очагах служат различные виды мелких грызунов, насекомоядных, хищных и других, у которых нередко формируется пожизненное лептоспироносительство. Антропоургические (хозяйственные) очаги возникают при ввозе в хозяйства животных-лептоспироносителей. В антропургических очагах лептоспирозом болеют крупный рогатый скот, буйволы, свиньи, лошади, овцы, козы, олени, собаки, верблюды, кошки, синантропные грызуны, пушные звери и др.

Источником и резервуаром возбудителя инфекции являются клинически и бессимптомно больные, а также переболевшие животные-лептоспироносители. Лептоспироносительство после переболевания или скрытого инфицирования может длиться у животных до 1,5 лет.

Из организма клинически больных животных и бактерионосителей лептоспиры выделяются с мочой, фекалиями, молоком, спермой, выдыхаемым воздухом, истечениями из половых органов, а также с абортированным плодом.

Здоровые животные заражаются лептоспирами через воду, корма, подстилку, почву, пастбища и другие инфицированные объекты внешней среды. Основной путь передачи возбудителя инфекции -- водный, меньшее значение имеют контактный и кормовой. У крупного рогатого скота доказана возможность заражения половым путем, а также передача возбудителя через плаценту.

Лептоспироз у крупного рогатого скота проявляется преимущественно в летне-осенний период. При первичном возникновении лептоспироза в ранее благополучном хозяйстве заболевают животные различных возрастных групп. Эпизоотия охватывает от 20 до 60 % восприимчивых животных, вызывая большую гибель неиммунного молодняка. Главной эпизоотологической особенностью лептоспироза сельскохозяйственных животных в стационарно неблагополучных хозяйствах является преобладание бессимптомных форм инфекции в виде длительного лептоспироносительства.



3. Характеристика возбудителя

3.1 История открытия возбудителя

Заболевания, напоминающие лептоспироз, описывались издавна. В 1841 г. русский врач Зейдлиц, а в 1883 г. французский врач Landusi сообщают о случаях заболеваний, протекавших с тяжелой интоксикацией, желтухой и поражением почек. Этой проблемой заинтересовался Н. П. Васильев, ученик С. П. Боткина. В 1886 г. он опубликовал результаты своих наблюдений за течением болезни, которую он назвал «инфекционная желтуха», у 17 пациентов. В том же году появляется сообщение A.Weil об аналогичных заболеваниях (он наблюдал 4 случая). Работы этих исследователей позволили на основании особенностей клинического течения выделить новую болезнь в отдельную нозологическую форму, получившую впоследствии название «болезнь Васильева -- Вейля».

В 1907 г. A. Stimson описал микроорганизм, который он обнаружил в почках больного, погибшего, как полагали, от желтой лихорадки. Но лишь в 1915 г. японские ученые Inoda, Ito и другие выделили чистую культуру возбудителя (им оказался новый вид спирохет) и доказали его связь с болезнью Васильева -- Вейля. В 1916 г. аналогичный возбудитель был выделен в Германии (Hubener, Reiter), затем еще один -- в Японии. Каждый исследователь давал ему новое имя преимущественно с учетом места первичного обнаружения, но извитую форму возбудителя в названиях отражали все («Spirochaeta»). По предложению Nogushi в 1917 г. эта спирохета получила название «лептоспира» (от греч. leptos -- нежная, тонкая; speira -- спираль), что соответствовало особенностям структуры новой спирохеты. Лишь в 1922 г. была установлена убедительная связь заболевания человека лептоспирозом с патологией, которая обнаруживалась у крыс.

К середине 60-х годов XX ст. уже было известно более 124 серотипа лептоспир, патогенных для человека. Различия в клиническом течении заболеваний, вызываемых разными представителями лептоспир, были отражены в существовавших классификациях. Так, считалось, что речь идет об отдельных группах инфекционных заболеваний (лептоспирозах), отличающихся по этиологии и особенностям клинического течения, -- желтушном (иктерогеморрагическом) лептоспирозе (син. -- болезнь Васильева -- Вейля), вызываемом L. icterohaemorrhagiae, и доброкачественных безжелтушных лептоспирозах, описываемых чаще под названиями «безжелтушный лептоспироз», «водная лихорадка», возбудителями которых, как полагали, были другие лептоспиры (L. grippotyphosa, L. pomona и т. д.).

Однако дальнейшие исследования позволили сделать вывод, что патогенетические механизмы, возникающие в организме человека при заражении различными лептоспирами, универсальны, а поэтому не приходится говорить о строгой специфичности клинических проявлений, обусловленных действием лишь определенного их серотипа. С 1973 г. патологию, вызываемую лептоспирами, стали рассматривать как единую нозологическую форму -- лептоспироз (не лептоспирозы!), а выделенные возбудители -- как серологические варианты единого рода патогенных лептоспир (L. interrogans).

С каждым годом обнаруживаются новые представители рода патогенных лептоспир, количество их к настоящему времени достигает 200.

3.2 Морфология возбудителя его место в систематике по Берджи

Лептоспиры -- спиралевидные бактерии диаметром 0,1--0,25 и длиной 6--15-- 30 мкм, образующие около 20 мелких, тесно расположенных первичных завитков и 1--2 вторичных, придающих клетке форму букв Г, S, С. Осевая нить состоит из двух фибрилл. В темном поле они имеют вид тонких, серебристых нитей с утолщенными и загнутыми в виде крючков концами (рис. 21). У клеток некоторых штаммов концы прямые (бескрючковые лептоспиры).

Для лептоспир характерна активная подвижность. Главный тип движения -- вращательнопоступательный. Спор не образуют. Грамотрицательны, плохо окрашиваются анилиновыми красителями, по Романовскому -- Гимзе -- в красный цвет, но фиксация резко изменяет их морфологию; используют также метод импрегнации серебром по Левадити.

Лептоспиры -- хемоорганотрофные факультативноанаэробные бактерии. Культивируют их в аэробных условиях при температуре 28--30 °С на специальных средах, содержащих 5--10 % сыворотки кролика или овцы, дистиллированную, водопроводную, колодезную воду или фосфатный буфер (рН 7,2-- 7,6). К ним относятся среды: Уленгута, Терских, Ферворта -- Вольфа, Любашенко и др. Размножение лептоспир обычно начинается через 7--20 дней, иногда 1--2 мес. Среда при этом не изменяется и наличие роста определяют микроскопией в темном поле. На плотных средах (Кокса, ВГНКИ) образуют колонии S, О и R-форм. S-Форма -- типичная вирулентная, ее колонии прозрачные, в виде диска с ровным краем.

Биохимические свойства- изучены недостаточно. Ферментация углеводов не доказана; обнаружены каталаза, оксидаза, липаза и др.

Истинный экзотоксин лептоспиры не синтезируют. Они обладают эндотоксином и ферментами патогенности: гемолизинами, фибринолизином, плазмокоагулазой, гиалуронидазой, липазой, лецитиназой, которые выделяются в результате лизиса лептоспир. Вирулентными являются свежевыделенные штаммы лептоспир, при культивировании же на питательных средах это свойство относительно быстро теряется.

Лептоспиры обладают общим белковым соматическим антигеном, определяющим их видовую специфичность. Поверхностные полиса харидные антигены служат критериями групповой и серовариантной дифференциации. Антигенные свойства лептоспир изучают в реакции микроагглютинации и методом иммуноадсорбционного анализа.

В воде открытых водоемов патогенные лептоспиры сохраняются от 7 до 30 дней и более; будучи типичными гидрофилами, в почве, перенасыщенной водой, выживают до 280 дней; в свежем молоке -- 8--24 ч; в почках убойных животных при температуре 0--4 °С -- до 28 дней; в замороженном мясе погибают через 10 дней. Чувствительны к действию поваренной соли; в засоленном (4,8 % NaCl) мясе крупного рогатого скота погибают через 10 дней; в гипертоническом растворе поваренной соли (2,8 %) -- через 15 мин.

При кипячении погибают моментально, при 56--58 °С -- в течение 25--30 мин. Быстро гибнут при высушивании и под воздействием прямого солнечного света. Растворы (0,1 %-ный соляной кислоты, 0,5 %-ный фенола) инактивируют лептоспиры за 20 мин.

К лептоспирозу наиболее восприимчивы крупный рогатый скот (серогруппы помона и гебдомадис), свиньи (серогруппы помона и тарассови), лисицы, песцы, менее -- лошади, козы, овцы, буйволы, верблюды, олени, ослы, собаки, кошки, куры. Болеет и человек. Основными носителями лептоспир в природных очагах являются: серые и водяные полевки, серые крысы, домовые мыши, землеройки.

К экспериментальному заражению наиболее чувствительны золотистые хомячки, крольчата-сосунки и молодые морские свинки.



4. Лабораторная диагностика заболевания

4.1 Особенности взятия и пересылки патологического материала

Материалом для прижизненной диагностики служат кровь и моча, для посмертной - трупы мелких животных. От трупов крупных животных и абортированных плодов берут сердце, кусочки паренхиматозных органов, почку, транссудат грудной и брюшной полостей, перикардиальную и спинномозговую жидкости, мочевой пузырь и желудок с содержимым. Патматериал должен быть взят и исследован в течение 6 ч в летнее время и 10…12 ч зимой или при условии хранения его в охлажденном состоянии. По результатам лабораторных исследований хозяйство (ферму, отделение, предприятие, гурт и т.д.) считают неблагополучным по лептоспирозу в одном из следующих случаев: -культура лептоспир выделена из патологического материала; -лептоспиры обнаружены при микроскопическом исследовании патологического материала; антитела обнаружены в сыворотке крови более чем у 20% обследованных животных в титре 1: 50 у невакцинированных, 1: 100 и более у вакцинированных.

При выявлении меньшего числа положительных реакций проводят микроскопию мочи. При отрицательном результате микроскопии мочи повторное исследование сыворотки крови и мочи ранее исследованных животных проводят через 15. «30 дней. Обнаружение лептоспир или антител при повторном исследовании у животных, не имевших их при предьщущем исследовании, или нарастание титра антител в 4 раза и более свидетельствуют о неблагополучии хозяйства.

4.2 Бактериологическая диагностика

Лабораторную диагностику лептоспироза животных проводят в соответствии с действующими Санитарными и ветеринарными правилами. Она основана на комплексе микробиологических и иммунологических методов, которые используются в различных комбинациях. Бактериологические методы исследований включают прямую микроскопию биоматериала, полимеразную цепную реакцию (ПЦР), выделение чистых культур и идентификацию возбудителя, дифференциацию патогенных лептоспир от сапрофитных и биопробу.

Материал засевают по 1--3 капли в 3--5 пробирок со специальной питательной средой и инкубируют при температуре 28--30 °С в течение 3 мес. Лептоспиры начинают размножаться через 7--20 дней, иногда через 1--2 и очень редко -- 3 мес. Наличие роста определяют темно-польной микроскопией раздавленных капель, которые готовят через 3, 5, 7, 10 дней и далее через каждые 5 дней. При обнаружении размножения лептоспир делают пересев в 3--5 пробирок со свежей средой. Получить культуры лептоспир удается не всегда.

4.3 Культуральные свойства

Выделение культуры -- достаточно сложный и кропотливый метод, но именно он позволяет с наибольшей точностью определить серотип возбудителя, вызвавшего заболевание, что весьма важно для эпидемиологических расследований и изучения лептоспироза.

Лептоспиры -- строгие аэробы, растут в жидких и полужидких средах, дополненных 10-15% кроличьей сыворотки. Рост наблюдают на 5-8-е сутки инкубирования в виде круглых колоний диаметром 1-3 мм.

Устойчивость во внешней среде. Лептоспиры чувствительны к действию солнечного света и высоких температур (в воде погибают при 45 С через 45 мин, при 70 °С через 10 с), высушивание вызывает немедленную гибель. Выживаемость в пресноводных водоёмах варьирует от нескольких часов до 30 сут (наиболее долго сохраняются в чистой воде с рН менее 7,0 и низкой минерализацией); в сухой почве сохраняются 2-3 ч, а заболоченной -- до 200 сут. Чувствительны к действию дезинфектантов.

4.4 Биохимические свойства

Лептоспиры - хемоорганотрофы с дыхательным типом метаболизма. Повышенная чувствительность к солям синильной кислоты, а также результаты спектроскопических исследований свидетельствуют об участии в их дыхании цитохромной системы. Они оксидазонегативны, но каталазо- и/или пероксидазопозитивны.

Эти микроорганизмы проявляют выраженную аминопептидазную активность при отсутствии протеолитических свойств.

4.5 Серологическая диагностика

Для серологической диагностики лептоспироза применяют различные варианты РА (РАЛ, макроагглютинации, микроскопической аггглютинации, РЛА), РСК.

Для постановки РА необходим набор живых культур патогенных для организма сероваров летоспир, циркулирующих на данной территории. Важнейшими факторами, определяющими специфичность РА, являются чистота и идентичность антигенов. Последнюю контролируют в лабораториях не реже 2 раз в год с применением гипериммунных кроличьих антисывороток или моноклональных антител. Чистоту антигенов лептоспир регулярно проверяют посевами на кровяной агар или тиогликолевый бульон.

Основными недостатками РА при лептоспирозе являются значительные затраты времени и труда на ее постановку, необходимость применения большого количества антигенов лептоспир разных серогрупп, вариабельность качества используемых живых лептоспирозных антигенов, потенциальную опасность заражения проводящих серологическое исследование специалистов (при использовании в качестве антигена живых культур лептоспир), субъективность оценки результатов, возможность перекрестных реакций сероваров, относящихся к разным серогруппам и недостаточно высокую чувствительность (например, при исследовании животных, выделяющих возбудителя с мочой, но не имеющих выраженного антительного ответа). Последнее связано с динамикой IgM-агглютининов (IgG в РА не выявляют).

1. РАЛ

Со времени разработки Мартином и Петтитом в 1918 г этот тест остается "золотым стандартом" серологической диагностики лептоспироза.

Для получения антигена для РАЛ используют 7-10-дневные культуры лептоспир, выращенные на жидких питательных средах и имеющие пышный рост (не менее 50 лептоспир в поле зрения без спонтанной агглютинации и примесей). лептоспироз бактериологический профилактика иммунитет

Агглютинация проявляется склеиванием лептоспир в агломераты, размер которых может варьировать от 3-5 бактерий до огромных шаров, занимающих несколько полей зрения микроскопа. Лизис сначала проявляется образованием зернистости у одиночных и агглютинированных лептоспир. Затем бактерии постепенно теряют подвижность и фрагментируются, превращаясь в скопление аморфных зернистых образований. Агглютинация и лизис протекают в первых разведениях сыворотки одновременно, но по мере увеличения разведения сыворотки начинает преобладать агглютинация так, что в конечных разведениях лизис отсутствует.

Специфические агглютинины появляются в крови собак через 7-10 дн после заражения. У непривитых собак в этот период титр агглютининов обычно невысок (1:100 - 1:200), но в последующем он быстро возрастает до 1:400 и выше, что считают диагностическим уровнем. Обычно к концу второй недели болезни титр антител повышается в 15-40 раз и выше. На этом уровне он сохраняется несколько недель. В последующем отмечают тенденцию постепенного его снижения. На острой стадии инфекции отмечают 4-кратное повышение титра агглютинирующих антител к лептоспирам при тестировании парных проб сывороток. Однако при исследовании этим тестом сыворотки хронически больных собак могут быть получены отрицательные результаты из-за низкого титра специфических агглютининов.

При оценке результатов теста необходимо принимать во внимание большую продолжительность персистенции агглютининов у многих переболевших и привитых, а также возможность отсутствия сероконверсии у части инфицированных животных.

Стабильные титры антител 1:200 -1:400 выявленные в крови собаки с интервалом в 1-2 нед скорее свидетельствуют о ранее перенесенном заболевании или лептоспироносительстве, чем о текущей инфекции. 4-кратное повышение титра антител считатают доказательством последней.

В рутинной лабораторной практике и полевых условиях в настоящее время пользуются не РАЛ, а ее модифицированным вариантом - МРА. Тест проводят в плашках аналогично классической РАЛ, но при учете результатов оценивают лишь степень агглютинации лептоспир.

С целью снижения риска заражения лабораторных работников разработан также вариант реакции, при постановке которого вместо живых культур лептоспир применяют инактивированные 0,2-0,5% формалина бактерины. При оценке результатов МРА учитывают только агглютинацию, поскольку формалинизированные ЛС не лизируются сывороткой. Из-за недостаточно высокой чувствительности эта модификация теста не нашла широкого применения.

Вместо набора антигенов разных сероваров патогенных ЛС при постановке теста может быть использован единственный антиген, которым служит штамм Patoc1 непатогенного видаL.biflexa. Реакция позволяет лишь установить принадлежность тестируемого изолята к лептоспирам.

2. Реакция макроагглютинации (РМА)

Этот вариант РА проводят с жидкими культурами референтных сероваров ЛС, в которых рост бактерий проявляется видимой при встряхивании пробирки мутью. После добавления в них разведения (1:10) гомологичной антисыворотки в соотношении 1:5 из агглютинировавших лептоспир быстро образуются хлопья, сохраняющиеся несколько суток и полностью не распадающиеся даже при энергичном встряхивании пробирок.

С и учитывают результаты с помощью лупы при непрямом освещении.С, а затем 30 мин при 55В модификации Смита-Тулоша (1937 г) реакцию проводят 3ч при температуре 37

Старбук и Уорд (1942 г) предложили проводить тест с формалинизированными культурами лептоспир. Обработанные формалином лептоспиры осаждают центрифугированием и окрашивают генцианвиолетом. При постановке реакции смешивают по 1 капле антигенов и тестируемой сыворотки на стеклянной пластинке белого цвета. Ее осторожно покачивают в течение 10 мин и проводят учет результатов. Положительной реакцией считают появление в смеси рыхлых, окрашенных в синий цвет агрегатов.

3. РЛА

По чувствительности РЛА несколько уступает РАЛ, но проще в постановке и позволяет получить результат в более короткий срок. Проводится с помощью латексных частиц, на которых сорбируется антиген лептоспир.

4. РА полимерных частиц с лептоспирозным антигеном.

Этот современный вариант РА пока еще не нашел широкого применения, хотя получил положительные отклики, как медицинских,так и ветеринарных специалистов. В качестве носителя наружных мембранных антигенов лептоспир использованы частицы поли-DL-лактид-полиэтиленгликоля, покрытые антигеном лептоспир. Тест по специфичности соответствует, но несколько уступает по чувствительности РАЛ. Он проще в постановке и позволяет получить результат серологического исследования в течение 3 ч. Кроме того, агглютинины выявляются им в более ранние сроки и в более высоком титре, чем в РА.

РСК

РСК редко используют для серологической диагностики лептоспироза собак. Комплементсвязывающие антитела появляются у инфицированных сероварами icterohaemorrhagiaee и canicola животных этого вида через 4 дн после заражения, а через 9-10 нед пз они исчезают. Тест не позволяет дифференцировать серовары лептоспир. При постановке РСК большое значение имеет концентрация лептоспир в антигене. Поэтому для приготовления последнего отбирают только те культуры лептоспир, в которых при темнопольном микроскопировании в 1 поле зрения видно не менее 50-100 бактерий. Для получения ориентировочного результата РСК проводят с пулом антигенов разных сероваров (полиантигеном), но при необходимости установления серотипа/серовара лептоспир, вызвавшего инфекцию у животного, для постановки теста пользуются моновалентными антигенами, приготовленными из референтных штаммов, относящихся к определенным серогруппам/сероварам.

4.6 Биопроба

Метод более чувствительный, чем культуральный; проводится с целью выделения и очистки культур лептоспир, определения их вирулентности и дифференциации от сапрофитов.

Заражают золотистых хомячков 20--30-дневного возраста и крольчат-сосунов в возрасте 10--20 дней. На каждую пробу берут двух животных; на 4--5й день убивают первого, на 14--16й день -- второго, если оно не погибло раньше. Из сердца, печени и почек убитых или павших животных проводят посевы. Сыворотку крови убитого через 14--16 дней животного исследуют в реакции микроагглютинации (РМА) с лептоспирами 13 серогрупп. Положительная РМА в разведении 1:10 и выше указывает на наличие лептоспир в исследуемом материале.



5. Устоичивость возбудителя

В воде открытых водоемов патогенные лептоспиры сохраняются от 7 до 30 дней и более; будучи типичными гидрофилами, в почве, перенасыщенной водой, выживают до 280 дней; в свежем молоке -- 8--24 ч; в почках убойных животных при температуре 0--4 °С -- до 28 дней; в замороженном мясе погибают через 10 дней. Чувствительны к действию поваренной соли; в засоленном (4,8 % NaCl) мясе крупного рогатого скота погибают через 10 дней; в гипертоническом растворе поваренной соли (2,8 %) -- через 15 мин.

При кипячении погибают моментально, при 56--58 °С -- в течение 25--30 мин. Быстро гибнут при высушивании и под воздействием прямого солнечного света. Растворы (0,1 %-ный соляной кислоты, 0,5 %-ный фенола) инактивируют лептоспиры за 20 мин.



6. Особенности специфической профилактики и иммунитет. Лечение

Переболевание лептоспирозом сопровождается формированием вначале нестерильного, а затем стерильного (по окончании срока лептоспироносительства) иммунитета высокой специфичности, напряженности и значительной продолжительности.

Для активной иммунизации животных используют поливалентную депонированную вакцину ВГНКИ, выпускаемую в двух вариантах (различное сочетание серогрупп лептоспир). С профилактической целью ее применяют в неблагополучных, откормочных и угрожаемых по лептоспирозу хозяйствах, при выпасе животных в зоне природного очага болезни, при выявлении в хозяйстве животных, сыворотка крови которых реагирует на лептоспироз по РМА или РА, и в районах с отгонным животноводством. Сыворотку крови вакцинированных животных не исследуют на лептоспироз в течение 2 -- 3 мес после вакцинации.

Для пассивной иммунизации применяют поливалентную сыворотку против лептоспироза сельскохозяйственных и промысловых животных. Сыворотка, как и вакцина, не освобождает организм животных от лептоспироносительства, не профилактирует аборты у зараженных животных.

Заболевших лептоспирозом животных изолируют и подвергают лечению. Лечение может быть специфическим и симптоматическим. Из специфических средств хороший лечебный эффект оказывает поливалентная гипериммунная противолептоспирозная сыворотка, особенно если ее применить в самом начале болезни. Сыворотку вводят подкожно в разовых дозах: крупному рогатому скоту 50-120 мл; телятам 20-40 мл; свиньям, овцам, лисицам 5-30 мл. При тяжелом течении болезни введение сыворотки через 1-2 дня повторяют. Внутривенно сыворотка вводится в половинных дозах. Эффективно также применение антибиотиков: стрептомицин (по 10-12 тыс. ЕД на 1кг массы животного 2 раза в день 4-5дней подряд), дитетрациклин (свиньям по 30 тыс.ЕДна 1кг массы животного 2-3 раза с интервалом 2-3дня). Для симптоматического лечения используют глюкозу. При лептоспирозе в организме животных наблюдается гипогликемия. Использование глюкозы компенсирует недостачу сахара, пополняет энергетические ресурсы организма, 40% раствор глюкозы вводят внутривенно : крупному рогатому скоту и лошадям 500 мл; молодняку 50-200 мл; лисицам, песцам и собакам 5-10мл. Для устранения атонии желудочно-кишечного тракта используют слабительные (внутрь -- глауберовую соль 25-500г). Для дезинфекции мочевых путей внутрь применяют уротропин с водой: крупным животным 5-10г, телятам 1-2г. Для поддержания сердечной деятельности подкожно инъекция кофеина: крупным животным 2-3г; мелкому рогатому скоту и свиньям 0,5-2г. При поражении ротовой полости ее промывают растворами марганцовокислого калия (1:1000). Некротические очаги кожи смазывают ихтиоловой мазью, борным вазелином и т.д. Больным животным создают наилучшие условия кормления и содержания. В рацион вводят рыбий жир, рыбную муку, микроэлементы, витамины. Телят и поросят облучают кварцевой лампой.

Больных животных необходимо предохранять от действия солнечных лучей, необходимо их чаще поить.



7. Профилактика и меры борьбы

В целях недопущения возникновения лептоспироза ввод животных для племенных и пользовательных целей разрешается только из благополучных хозяйств, при отрицательных результатах серологического исследования по РМА или РА. Всех поступающих в хозяйство животных карантинируют в течение 30 дней и исследуют на лептоспироз. Не допускают ввода (ввоза) в племенные хозяйства животных или продуктов их убоя из неблагополучных хозяйств; эксплуатации производителей, сыворотка крови которых дает положительную РМА или РА; участия в выставках невакцинированных против лептоспироза собак; скармливания пушным зверям и собакам сырых продуктов убоя больных животных и лептоспироносителей.

Проводят плановые диагностические исследования животных, отлов и исследование грызунов на лептоспироз, бактериологическое исследование воды открытых водоемов. Ведут строгий учет абортов, мертво-рождений, случаев заболеваний и падежа животных. При подозрении на лептоспироз берут патологический материал и направляют его в лабораторию для исследования.

Запрещают выпас невакцинированных животных на территории природного очага лептоспироза, проводят мероприятия по его ликвидации. Систематически уничтожают грызунов. Содержат в соответствующем ветеринарно-санитарном состоянии пастбища, водопои и животноводческие помещения; осушают сырые и заболоченные участки. Для поения животных используют воду из артезианских скважин или водопроводной сети. Летние лагеря устраивают на возвышенных сухих участках. Исключают контакт животных хозяйства с животными, находящимися в личном пользовании, бродячими собаками; запрещают совместный выпас и водопой животных благополучных и неблагополучных групп.

При установлении диагноза на лептоспироз в хозяйстве вводят ограничения, на основании которых запрещают вывоз (вывод) животных для племенных и пользовательных целей, ввод невакцинированных против лептоспироза животных, перегруппировку скота без ведома вет-специалистов, продажу продуктов от вынужденно убитых животных, использование воды открытых водоемов для поения животных, содержание здоровых невакцинированных животных на пастбищах, где раньше выпасали больных лептоспирозом животных (сухие участки в солнечную погоду можно использовать через 7 дней, влажные -- только для вакцинированного скота). Животноводческие помещения и территорию вокруг них приводят в надлежащее ветеринарно-санитарное состояние.

Текущую дезинфекцию в неблагополучном хозяйстве проводят после каждого случая выделения больного животного, а в последующем через каждые 10 дней до снятия ограничений. При этом применяют осветленный раствор хлорной извести с содержанием 2 % активного хлора, 2 %-ный горячий раствор серно-карболовой смеси, 5 %-ную эмульсию фенольного креолина и др.

Молоко, полученное от больных коров, кипятят и используют в корм скоту, а от клинически здоровых, сыворотка крови которых дает положительную РМА или РА без нарастания титра, -- используют без ограничений.

В неблагополучном по лептоспирозу хозяйстве проводят осмотр всех животных и выборочную термометрию. Больных и подозрительных по заболеванию животных изолируют, уточняют диагноз и лечат; клинически здоровых -- вакцинируют.

Ограничения в откормочных комплексах и репродукторных хозяйствах снимают после сдачи животных на убой, проведения тщательной очистки, санитарного ремонта и заключительной дезинфекции; в племенных и пользовательных хозяйствах -- после установления их благополучия.



Заключение

В целях недопущения заболевания животных лептоспирозом собственники и владельцы скота, ветеринарные специалисты обязаны выполнять следующее:

-осуществлять контроль за клиническим состоянием животных, учитывать количество абортов и при подозрении на лептоспироз отбирать патматериал для лабораторных исследований;

-комплектование племенных хозяйств (ферм), предприятий, станций искусственного осеменения из благополучных по лептоспирозу хозяйств;

-исследовать всех поступающих в хозяйство животных в период 30-дневного карантина на лептоспироз в РМА в разведении 1:25;

-разрешается комплектовать откормочные хозяйства (отделения, фермы) клинически здоровыми животными без обследования на лептоспироз, но с обязательной вакцинацией их против лептоспироза в период карантинирования;

-не допускать контакта животных со скотом неблаголучных по лептоспирозу хозяйств (ферм), населенных пунктов на пастбищах, в местах водопоя и т.д.;

-не выпасать невакцинированных животных на территории природных очагов лептоспироза;

-не устраивать летних лагерей для животных на берегах открытых водоемов;

-систематически уничтожать грызунов в животноводческих помещениях, на территории ферм, местах хранения кормов и т.п.



Библиографический список

1. Ананьин, В.В. Лептоспирозы людей и человека[Текст]:книга / В.В. Ананьин.-М.: Медицина , 2006.-323-350с.

2. Аракелова, Н.Т. Организация дезинфекционных барьеров в животноводстве [Текст]: / Н.Т.Аракелова ,Е.В. Троицкая// Ветеринария .-2009 .-№4.-С.14-15.

3. Евгилевский, А.А. Лептоспироз : Эпизоотологические и клинические особенности , вопросы диагностики, профилактики и лечения[Текст]:/А.А.Евгилевский,О.Б.Ситникова,А.Ф.Лебедев// Ветеринарная патология.-2015.-№1.-С.12-14.

4. Инфекционные болезни животных [Текст] : учебник для студ. вузов, обуч. по спец. "Ветеринария" / Б. Ф. Бессарабов [и др.] ; под ред. А. А. Сидор чука. - М. : Колос, 2007. - 671 с.

5. Инфекционные болезни крупного рогатого скота [Текст] / сост. Ф. М. Орлов. - Москва : Колос, 2008. - 368 с.

6. Карышева, А. Ф. Инфекционные болезни животных [Текст] : справоч- ная книга / А. Ф. Карышева, С. В. Карышев. - Кишинев : Картя молдовеняскэ, 2009.

7. Смирнов,А.М. Ветеринарно-санитарные и зоогигиенические мероприятия [Текст]: / А.М.Смирнов, В.Г.Тюрин/ Ветеринария.-2012.-№9 .-С.3-7.

8. Соболева, Г.Л. Лептоспироз [Текст]:/ Г.Л.Соболева, А.Е.Верховская, Ю.А. Малахов / Ветеринария сельскохозяйственных животных.-2012.-№4.-С.3-5.

9. Стеценко, Ю.Ю. Лептоспироз [Текст]: / Ю.Ю.Стеценко/ Ветеринария сельскохозяйственных животных.-2007.-№6.-С.10-11.

Размещено на Allbest.ru