Система санітарного контролю у виноградних розсадниках України

Дослідження вірусних, бактеріальних та фітоплазмових хвороб винограду на виробничих виноградниках. Система санітарного контролю на етапах селекції і технології розмноження клонів. Економічна ефективність виробництва сертифікованого садивного матеріалу.

Рубрика Сельское, лесное хозяйство и землепользование
Вид автореферат
Язык украинский
Дата добавления 29.08.2015
Размер файла 181,4 K

Отправить свою хорошую работу в базу знаний просто. Используйте форму, расположенную ниже

Студенты, аспиранты, молодые ученые, использующие базу знаний в своей учебе и работе, будут вам очень благодарны.

Беручи до уваги великий проміжок часу, потрібний для розмноження багаторічної культури, нами було визначено за мету розробку системи санітарного контролю, яку можливо було б накласти на результати селекційних та технологічних етапів.

Усі елементи та етапи санітарного контролю розроблялись відповідно технологічним етапам одержання і розмноження селекційних категорій садивного матеріалу винограду. Таким чином, практично розроблена система санітарного контролю тісно ув'язана з технологічними етапами виділення та розмноження клонів, тобто з технологією виробництва селекційних категорій садивного матеріалу.

За розробки системи санітарного контролю на етапах клонової та генеративної селекції виходили із загальноприйнятих європейських вимог до санітарного стану маточників і садивного матеріалу винограду, особливостей санітарного стану маточних насаджень в Україні, особливостей і періодичності селекційних процесів.

Ефективність системи санітарного контролю визначається її кінцевим результатом - санітарним станом колекцій (банку клонів), базових та сертифікованих маточних насаджень винограду. Аналіз цих даних разом із аналізом методів, які при цьому застосовувались, дає можливість поліпшити систему, розширити її методичну базу, підвищити її ефективність в цілому.

Для визначення ефективності заходів санітарного контролю та оцінки санітарного стану вихідних клонів було узагальнено дані, одержані в період з 1999 по 2007 роки. Результати тестування клонів на латентне ураження вірусною інфекцією надано в табл. 5, яка свідчить про добрий санітарний стан клонового матеріалу у відношенні до ураження вірусами.

Результати лабораторного тестування кущів банку клонів показали добрий санітарний стан клонів у відношенні латентного ураження вірусами. Не виявлено вірусів коротковузля, віруса мозаїки резухи, трьох серотипів вірусу скручування листя.

Таким чином, підтверджено ефективність заходів системи санітарного контролю в одержанні клонового матеріалу, вільного від вірусної інфекції.

В той же час виявлення окремих кущів, уражених бактеріальним раком, на банку клонів свідчить про необхідність суворіших санітарних вимог на етапах розмноження клонів. Аналіз санітарного стану клонів на етапах клонодослідження та банку клонів дозволив запропонувати наступну систему заходів санітарного контролю.

На кожному з етапів проведення клонової селекції (По - кущі первинного відбору; П1, П2 - кущі першого та другого вегетативних поколінь ) і розмноження рекомендовано здійснювати візуальний санітарний контроль і перевірку на відсутність латентного ураження збудниками вірусних хвороб та бактеріального раку винограду.

Таблиця 5

Санітарний стан клонів сортів винограду на клонодослідних ділянках (1999-2006 рр.)

Групи за сортами

Кількість

Візуальний санітарний контроль (кількість обстежених клонів/ кількість клонів, на яких виявлено вірусоподібні симптоми)

Лабораторне тестування (кількість перевірених клонів/ кількість клонів, на яких виявлено латентне ураження вірусами)

Сортів

Клонів

Клони підщепних сортів

9

40

40/1

40/3

Клони технічних сортів

18

47

47/1

47/4

Клони столових сортів

15

24

24/3

24/0

При цьому на етапі По здійснюють попередній неспецифічний скринінг на латентне ураження збудниками вірусних хвороб методом молекулярної гібридизації з длРНК-зондами. На цьому етапі проводять також специфічну детекцію збудника бактеріального раку винограду. На етапі П1 проводять тестування на ураження вірусами коротковузля та скручування листя (1 раз за період вивчення) і повторне тестування на ураження збудником бактеріального раку (1 раз на 2 роки). На етапі П2 (до введення в банк клонів) рослини мають пройти повне обстеження на 7 вірусів (кількома методами) та періодично проходити тестування на латентне ураження збудником бактеріального раку. Здійснюються також візуальні обстеження, а в разі необхідності - лабораторне тестування на ураження бактеріальним некрозом, фітоплазмовими та грибними хворобами.

Санітарний контроль в процесі генеративної селекції та сортовипробування

Вперше до системи санітарного контролю та сертифікації нами було залучено ділянки первинного розмноження сортів нової селекції. Тестуванню методом ІФА була піддана вибірка сортів нової селекції та кущі із симптомами скручування листя з ампелографічної колекції. Тестування рослин селекційних ділянок проводили на вірус коротковузля, два серотипи вірусу скручування листя та вірус мармуровості винограду.

КЛОНОВА СЕЛЕКЦІЯ

Генетична селекція

Санітарний контроль

Виділення за комплексом показників маточних кущів-родоначальників клонів -

П 0 - 3 роки

Попередній скринінг на латентне ураження вірусами (1 раз за період досліджень) та збудником бактеріального раку - 1 раз на 2 роки

Вивчення клонів першого вегетативного покоління - П1. Виділення перспективних за продуктивністю, якістю продукції та розвитком - 3 роки

Тестування на ураження вірусами коротковузля та скручування листя (1 раз за період досліджень) та збудником бактеріального раку - 1 раз на 2 роки

Конкурсне випробування і оцінка клонів другого вегетативного покоління

П 2. Виділення кращих за комплексністю та стабільністю ознак - 3 роки.

Оцінка інтродукованих клонів - Пi

Індексація щепленням, тестування методом ІФА на 7 вірусів (перед закладанням банку клонів). Тестування на ураження збудником бактеріального раку кожні 2 роки

БАНК КЛОНІВ

Вирощування вихідного клонового садивного матеріалу

Рис. 1. Схема санітарного контролю на етапах клонодослідження та одержання вихідного клонового садивного матеріалу

Загалом на рослинах селекційних ділянок не було виявлено будь-яких вірусів, на які проводилось тестування. Тестування рослин ампелографічної колекції виявило ураження третім серотипом вірусу скручування листя двох кущів сортів болгарської селекції Супер ран Болгар та Брестовиця. На кущах сортів Янтар ОСГІ, Волго-Дон та Ювілей в ампелографічній колекції виявлено ураження вірусом мармуровості.

За проведення санітарного контролю сортів нової селекції та інтродукованих тестування на віруси на етапі гібридного розсаднику нами запропоновано проводити тестування лише на ті з них, що передаються насінням (коротковузля винограду) та на бактеріальний рак. На подальших етапах (селекційний розсадник, конкурсне випробування і первинні маточники) обмежуються виявленням вірусних хвороб першої групи. Обов'язковим є тестування на бактеріальний рак винограду. Тестування на кожному із зазначених етапів проводять одноразово за період існування насадження, бажано після його вступу до плодоносіння.

Загальна схема санітарних заходів для матеріалу генеративного походження показана на рис. 2.

Санітарний контроль маточних насаджень винограду

Санітарний контроль маточників винограду є етапом, який безпосередньо передує виробництву сертифікованого садивного матеріалу винограду. Ретельність заходів санітарного контролю на базових та сертифікованих маточниках зумовлює санітарний стан садивного матеріалу, а отже - тривалість життя та якість виробничих виноградників.

Станом на 2005 рік базові та сертифіковані маточники порівняно із маточними насадженнями категорії „стандартні” були повністю візуально вільними від симптомів найбільш шкідливих вірусних хвороб (коротковузля та скручування листя) та практично вільними від бактеріального раку.

Одержані нами результати свідчать про перевагу (у відношенні санітарного стану) базових та сертифікованих маточників над маточниками категорії “стандартні”.

Площа базових та сертифікованих маточників, закладених в Україні клоновим матеріалом селекції ННЦ „ІВіВ ім. В.Є. Таїрова” на даний час перевищує 150 га, з яких регулярним візуальним санітарним контролем охоплено близько 100 га, вибірковим лабораторним тестуванням - понад 50 га.

Рослини клонового походження на цих маточниках при закладанні були вільними від найбільш шкідливих вірусів - коротковузля, першого і третього серотипів вирусу скручування листя.

Обмеження вірусної інфекції при переході від клонодослідної ділянки і банку клонів до базових і сертифікованих маточників в розсадниках відбувалось за рахунок вибракування хворих кущів клонів.

Генеративна селекція

Размещено на http://www.allbest.ru/

Размещено на http://www.allbest.ru/

Рис. 2. Санітарний контроль за отримання та розмноження нових сортів

Візуальний санітарний стан насаджень є добрим, симптомів вірусних хвороб і бактеріального раку не виявлено.

Перевірка методом імуноферментного аналізу на латентне ураження вірусами коротковузля та третім серотипом вирусу скручування листя винограду (2002-2007 рр.), показала відсутність цих патогенів у вибірках з маточників підщепних сортів у ДГ «Таїровське», ВАТ „Придунайський”(Одеська область), АФ радгосп „Білозерський” (Херсонська область) та СВК „Ізумрудний”(АР Крим) (табл. 6).

санітарний селекція садивний виноград

Таблиця 6

Лабораторне тестування кущів клонів базових маточників технічних сортів винограду (2005-2007 рр.)

Сорт

Клон, Площа, га

ІФА на латентне ураження вірусами

GFLV

GLRaV I

GLRaV III

ВАТ «Придунайський»

Рислінг рейнський

6841

0,1

-

-

-

-/-

14161

0,3

-

-

-

Совіньйон зелений

648

0,1

-

-

-

-/-

10027

0,02

-

-

-

Фетяска

521

0,3

-

-

-

Трамінер рожевий

3360

1,0

-

-

-

Піно чорний

532

0,3

-

+/-

+/-

Сапераві

359

0,02

-

-

-

Каберне Совіньйон

1473

0,3

-

-

-

-/-

441

0,8

-

-

-

СВК «Ізумрудний»

Ркацителі (2 проби)

4132

-

-

+ (2 кущі)

-

Рислінг рейнський

6841

0,07

-

+/- (2 кущі)

-

Рислінг рейнський

14161

0,03

-

-

-

Совіньйон зелений (5)

4442

-

+/- (3 кущі)

-

-

Сухолиманський білий (1 проба)

1632

0,08

-

-

-

Одеський сувенір (3)

5837

-

-

-

+ (2 кущі)

Примітка: - хворобу не виявлено, + - виявлено, +/- - потрібна повторна лабораторна перевірка

Результати санітарного контролю кущів базових та сертифікованих маточників в базових розсадниках показали добрий санітарний стан клонів у відношенні до латентного ураження вірусними хворобами винограду. Таким чином, заходи системи санітарного контролю щодо обмеження вірусної інфекції на маточних насадженнях є ефективними. Санітарний стан маточників відповідає вимогам виробництва сертифікованого садивного матеріалу винограду.

Періодичність заходів санітарного контролю на маточних насадженнях для системи санітарного контролю у виноградних розсадниках було визначено нами на підставі:

- результатів багаторічних спостережень за санітарним станом маточних насаджень селекційних категорій (за принципом достатності заходів, які застосовувались при цьому);

- особливостей селекційного процесу та технологічних вимог до етапу розмноження.

Нижче надано загальну схему санітарного та генетичного контролю у виробництві сертифікованого садивного матеріалу винограду (рис. 3).

Санітарні заходи запропоновано також для шкілок відповідних категорій. Вони полягають у візуальному санітарному контролі на відсутність ураження вірусною інфекцією та бактеріальним раком. У разі необхідності (за виявлення симптомів вірусних хвороб і бактеріального раку винограду) проводять лабораторну перевірку саджанців.

Організаційні заходи в системі санітарного контролю розподіляються на такі, що виконуються в рамках спеціалізованих розсадників та на державному рівні.

В розсадниках вони заключаються у заходах з організації території насаджень і підготуванні кадрів та технічного персоналу.

На державному рівні організаційні заходи полягають, насамперед, в постійному контролі регіональних представників Української Державної помологічно-ампелографічної інспекції. Якість здійснення санітарних заходів контролюється співробітниками Центру клонової селекції ННЦ «ІВіВ ім. В.Є. Таїрова» через його опірні пункти в регіонах України. Тестування на латентне ураження вірусними хворобами і бактеріальним раком здійснює акредитована лабораторія вірусології і мікробіології ННЦ «ІВіВ ім. В.Є. Таїрова». Певні аспекти санітарного контролю відображено у розробленому за нашої участі чинному ДСТУ 4390:2005 “Сажданці винограду та чубуки виноградної лози. Технічні умови”. Цей документ вперше в Україні дає визначення та встановлює категорії маточних насаджень і садивного матеріалу винограду.

ДСТУ 4390:2005 також регламентує перелік вірусних, бактеріальних та фітоплазмових патогенів, на які має відбуватись санітарний контроль.

Взято участь у розробленні проектів ДСТУ “Виноград. Класифікація маточних насаджень та садивного матеріалу селекційних категорій” ДСТУ і “Маточники та садивний матеріал винограду. Методи виявлення збудників вірусних хвороб і бактеріального раку” в рамках розширення, уніфікації та гармонізації методичної бази системи санітарного контролю.

Таким чином, нормативна та регламентуюча база санітарного контролю для виноградних розсадників України розроблена досить повно та схвалена відповідними державними органами. Затвердження цих документів в якості керівних настанов для виноградних розсадників України завершиться створенням нормативної бази виробництва сертифікованого садивного матеріалу винограду.

Генетичний контроль

Санітарний контроль

Щорічна оцінка стабільності сортових та клонових ознак. За виявлення мінливості проводять ДНК-аналіз для порівняння з ДНК-паспортом клону

Щорічний візуальний санітарний контроль двічі на рік

Банк клонів (від 10 кущів та більше)

Тестування на латентне ураження вірусами та збудником бактеріального раку (1 раз на 3 та 2 роки відповідно)

Вихідні клонові саджанці, етикетка біла з блакитною смугою

Базовий маточник (100 - 300 кущів та більше)

Вибірковий лабораторний контроль на латентне ураження вірусами - 1 раз на 5 років, бактеріальним раком- 1 раз на 2 роки

Базові саджанці, етикетка біла

Сертифікований маточник (3-5 га)

Вибірковий лабораторний контроль на латентне ураження вірусами, - 1 раз на 5 років, бактеріальним раком - 1 раз на 2 роки

Сертифіковані саджанці, етикетки блакитні

Рис. 3. Проведення генетичного та санітарного контролю на етапах розмноження за отримання сертифікованого садивного матеріалу винограду

Економічна ефективність виробництва сертифікованого садивного матеріалу винограду

Економічна ефективність виробництва сертифікованого садивного матеріалу винограду обумовлена генетичною (клонове походження) та санітарною складовою. Санітарна сертифікація підвищує показники приживлюваності, вихід саджанців зі шкілки, збільшення тривалості життя та продуктивності насаджень, що доказано практикою європейських країн.

Підвищення економічної ефективності у розсадництві та виноградарстві (маточники прищепних і підщепних сортів) відбувається за рахунок як збільшення виходу стандартних саджанців і чубуків, так і через ціну на високі категорії садивного матеріалу.

Отримані нами дані з економічної ефективності капітальних вкладень в розсаднику Центру клонової селекції ННЦ «ІВіВ ім. В.Є. Таїрова» «Придунайський» надано в табл. 7.

Таблиця 7

Економічна ефективність капітальних вкладень (за даними розсадника ВАТ «Придунайський», 2005-2007 рр.)

Показник

Садивний матеріал категорії «стандартний»

Садивний матеріал категорії «сертифікований»

Капітальні вкладення на закладання і догляд за підщепними маточниками, тис. грн./га

53481

56613

Середній вихід чубуків підщепи, тис. шт./га

45

58

Продуктивність маточників за весь строк експлуатації, тис. шт./га

1125

2320

Вихід саджанців зі шкілки, тис. шт.

48

56

% від щеплення

45 - 50

55 - 60

Економічна ефективність на 1 грн. капітальних вкладень

53

135

ВИСНОВКИ

1. Теоретично обґрунтовані і розроблені науково-методичні основи санітарного контролю. Розроблено оптимальну для виноградних розсадників України систему санітарного контролю. Система накладається на етапи технології виробництва сертифікованого садивного матеріалу винограду, розроблену спеціалістами Центру клонової селекції ННЦ «ІВіВ ім. В.Є. Таїрова». Систему впроваджено в семи виноградних розсадниках п'яти регіонів України.

2. Проведені дослідження та спостереження за маточними насадженнями та шкілками садивного матеріалу виявили реальну можливість організації виробництва садивного матеріалу, вільного від вірусів та контролюємого на бактеріальний рак, на базі виноградних розсадників України.

3. Встановлено, що серед хвороб, що мають входити до системи санітарного контролю, найбільш поширеними і шкідливими у виноградарських і розсадницьких господарствах є бактеріальний рак та скручування листя винограду. Візуальна зустрічаємість скручування листя складає від 1,1 до 6,5%, бактеріального раку - від 0,5 до 25,6% від загальної кількості оглянутих кущів.

Латентне ураження вірусом скручування коливається від 2-3 до 8%, збудником бактеріального раку - від 5 до 45%.

4. Дослідження просторового і часового поширення зазначених хвороб показало, що на маточних насадженнях в природних умовах найбільш швидко розповсюджуються бактеріальний рак винограду (до 10% за 2 роки за наявності морозних пошкоджень) та грибні хвороби багаторічної деревини (до 3% збільшення ураження за період в 5 років). Статистична оцінка ризиків ураження показала, що поширення бактеріального раку винограду в межах ділянки залежить від вихідного ураження садивного матеріалу та подальшого розповсюдження від осередків хвороби.

5. Для методичного забезпечення системи санітарного контролю оптимізовано та стандартизовано спосіб відбору точкових проб і складання середньої проби за виявлення вірусів винограду. Розроблено та впроваджено в практику санітарного контролю метод молекулярної гібридизації з нерадіоактивно міченими длРНК-зондами. Метод використано для попереднього скринінгу вихідних кущів клонів на відсутність латентного ураження вірусами та для пітвердження збереження санітарного стану клонів на етапах розмноження.

6. Відпрацьовано метод ПЛР-діагностики збудника бактеріального раку. Визначено методи виділення ДНК (з цетавлоном, лужним лізісом та кип'ятінням) та температури відпалу (+45 та +50°С), за яких отримуються найкращі результати. Метод ПЛР-діагностики бактеріального раку впроваджено в систему санітарного контролю у виноградних розсадниках України та засновано для тестування садивного матеріалу.

7. Отримана санітарна характеристика маточних насаджень категорії «стандартні» показала їх переваги над виробничими виноградними насадженнями, які використовуються в якості маточних. Ступінь ураження вірусними хворобами і бактеріальним раком насаджень категорії «стандартні» на 2-17% нижче порівняно з виробничими виноградниками. Зрідженість „стандартних” маточних насаджень в середньому на 3,5% нижча порівняно із зрідженістю виробничих виноградників, що свідчить про позитивний вплив проведення візуального санітарного добору.

8. Отримано понад 50 перспективних клонів вітчизняної селекції 37 прищепних і підщепних сортів, вільних від вірусної інфекції. Кущі клонів тестовано методом ІФА на віруси коротковузля, мозаїки резухи, перший, другий та третій серотипи вірусу скручування листя, вірус мармуровості та вірус А винограду. Санітарний стан клонів характеризується практичною відсутністю ураження вірусними хворобами, в тому числі найбільш шкідливими - коротковузлям, скручуванням листя і борознистістю деревини. Вихідним матеріалом даних клонів було закладено базові маточники в розсадниках п'яти регіонів України.

9. Виявлено тривале збереження санітарного стану «вільний від вірусної інфекції» банку клонів, базових та сертифікованих маточників. На підставі отриманих даних запропонована періодичність тестування на віруси в середньому 1 на 3 роки для банку клонів та 1 раз на 5 років для базових і сертифікованих маточників.

10. Виявлено можливість ураження збудником бактеріального раку (за 3-4 роки від закладання) окремих рослин банку клонів та базових маточників. Це пов'язано із біологією поширення збудника та в окремих випадках - з недотриманням технологічних вимог. Запропоновано підсилення заходів контролю ураження збудником бактеріального раку, яке полягає в частішому тестуванні насаджень усіх категорій - 1 раз на 2 роки.

11. Запропоновано включення сортів нової селекції до системи санітарного контролю на перших етапах їх розмноження (селекційний розсадник, конкурсне випробування, первинні маточники). Методами візуального контролю та лабораторним тестуванням оцінено санітарний стан селекційних ділянок та ампелографічної колекції як практично вільний від вірусної інфекції.

12. Підвищення економічної ефективності розсадництва за виробництва сертифікованого садивного матеріалу відбувається за рахунок збільшення виходу стандартних саджанців і чубуків і через різну ціну на категорії садивного матеріалу. Економічна ефективність на 1 грн. капітальних вкладень за вирощування садивного матеріалу категорії «сертифікований» складає 135 грн. порівняно з 53 грн. за виробництва саджанців категорії «стандартні».

13. Розроблено та відпрацьовано організаційні та інформаційні основи системи санітарного контролю. Вона спирається на мережу виноградних розсадників, кожен з яких обслуговує свою зону. Діяльність системи контролюється Українською Державною Помологічно-ампелографічною інспекцією за наукового супроводу спеціалістів Центру клонової селекції ННЦ «ІВіВ ім. В.Є.Таїрова».

14. У співавторстві розроблено ДСТУ 4390:2005, введений в дію в 2005 році, який регламентує виробництво садивного матеріалу категорій «вихідний клоновий», «базовий» та «сертифікований». У співавторстві розроблені, ухвалені та вводяться в дію проекти ДСТУ «Виноград. Методи тестування на віруси і бактеріальний рак» та «Виноград. Класифікація маточних насаджень та садивного матеріалу селекційних категорій», які визначають особливості проведення селекційних та санітарних заходів в технології виробництва сертифікованого садивного матеріалу винограду.

Рекомендації виробництву

Розроблена та запропонована розсадницьким господарствам система санітарного контролю є невід'ємною частиною за виробництва базових та сертифікованих виноградних саджанців виноградними розсадниками.

В процесі отримання сертифікованого садивного матеріалу винограду слід здійснювати регулярні санітарні заходи на маточниках та шкілках. До них відноситься візуальний санітарний контроль (двічі на рік) та лабораторне тестування на латентне ураження вірусними хворобами і збудником бактеріального раку.

Візуальний санітарний контроль на маточних насадженнях слід проводити двічі на рік ( в травні - червні та серпні - вересні). За візуального санітарного контролю виявляють вірусні хвороби (коротковузля, скручування листя, борознистість деревини та мозаїку жилок), ураження бактеріальним раком, фіто плазмовими хворобами та грибними хворобами багаторічної деревини винограду.

Тестування на латентне ураження здійснюється на сім вірусів та збудник бактеріального раку винограду. Проби для тестування слід відбирати за методичними рекомендаціями акредитованої лабораторії вірусології та мікробіології або за безпосередньої участі її спеціалістів.

На базових маточниках слід перевіряти на латентне ураження вірусами всі кущі протягом 5 років (по 20% кущів на рік). Перевірку на латентне ураження збудником бактеріального раку всіх кущів насадження проводять протягом двох років (по 50% кущів на рік).

На сертифікованих маточниках вибірково (але не менше 1% від загальної кількості кущів на ділянці) слід проводити тестування на латентне ураження вірусами (1 раз на 5 років) та на латентне ураження збудником бактеріального раку (1 раз на 2 роки).

Нові цінні генотипи слід вводити до системи санітарного контролю за первинного розмноження, з метою зниження обсягів тестування та запобігання ураження матеріалу генеративного походження.

Для закладання маточників та шкілок слід використовувати земельні ділянки, де виноград та плодові не вирощувались понад 10 років. Контроль розташування ділянки, наявності санітарних смуг та санітарного стану ґрунтів має здійснюватися спеціалістами Центру клонової селекції ННЦ «ІВіВ ім. В.Є. Таїрова». Контроль санітарного стану ґрунтів слід проводити на відсутність нематод, що переносять НЕПО-віруси (Xiphinema index, Xiphinema italiae) та збудника бактеріального раку винограду Agrobacterium tumefaciens (vitis).

В процесі експлуатації насаджень слід запобігати переносу збудника бактеріального раку з уражених виноградників на маточні насадження шляхом дотримання послідовності обробки ґрунтів на ділянках (від здорових до хворих) та очищення робочих органів від ґрунту за переходу від ділянки до ділянки.

Виноградні розсадники мають чітко дотримуватись рекомендованих організаційних заходів, вести документацію з проведення заходів санітарного контролю.

Зазначені вище рекомендації слід брати до уваги, користуючись ДСТУ 4390:2005 “Сажданці винограду та чубуки виноградної лози. Технічні умови”; розробленим за участі Центру клонової селекції ННЦ «ІВіВ ім. В.Є. Таїрова».

СПИСОК ОСНОВНИХ РОБІТ, ОПУБЛІКОВАНИХ ЗА ТЕМОЮ ДИСЕРТАЦІЇ

Монографія

1. Мулюкина Н.А. Вирусные болезни и бактериальный рак винограда / Н.А. Мулюкина ? Одеса: ННЦ «ИВиВ им. В.Е. Таирова», 2005. - 147 с. (Здобувачем проведено збір і обробку літературних даних, узагальнено експериментальні дані, зроблено висновки, написано монографію).

Брошури

2. Методические рекомендации по ограничению распространения бактериального рака в питомниководстве / [Власов В.В., Силецкий В.П., Мулюкина Н.А. и др.]. - Одеса: ННЦ «ИВиВ им. В.Е. Таирова», 2007. - 18 с. (Здобувачем проведено збір і обробку літературних даних, дослідження, узагальнено експериментальні дані).

3. Інструкція з апробації маточних насаджень і садивного матеріалу винограду / [Тулаєва М.І., Хілько В.Ф., Чисніков В.С. та ін.]. - Одеса: ННЦ «ІВіВ ім. В.Є. Таїрова», 2007. - 15 с. (Здобувачем проведено збір і обробку літературних даних, узагальнено експериментальні дані, написано рекомендації).

4. Методические рекомендации по агротехническим исследованиям в виноградарстве Украины / [Авидзба А.М., Иванченко В.И., Якушина Н.А. и др.]. - Ялта: НИВиВ «Магарач», 2004. - 264 с. (Здобувачем проведено збір і обробку літературних даних, узагальнено експериментальні дані, зроблено висновки, написано рекомендації).

Статті в журналах та збірниках наукових праць

5. Биотехнологические методы диагностики вирусных болезней и бактериального рака винограда / Б.Н. Милкус, В.И. Картузова, Н.А. Мулюкина [и др.]. // Виноградарство и виноделие: сб. научн. работ ИВиВ им. В.Е. Таирова. - 1997. - С. 32-37. (Здобувачем проведено дослідження, узагальнено експериментальні дані).

6. Милкус Б.Н. Применение иммуноферментного анализа для выявления вирусов винограда / Б.Н. Милкус, Н.А. Мулюкина, А.В. Бабенко // Труды научного центра виноградарства и виноделия. - Ялта, 2000. - Т. I. - С. 27-28. (Здобувачем проведено дослідження, узагальнено експериментальні дані).

7. Мулюкіна Н.А. Виявлення та ідентифікація вірусу мармуровості винограду / Н.А. Мулюкіна, А.В. Щербина // Аграрний вісник Причорномор'я: зб. наук. праць. - Одеса, 2002. - Вип. 18. - С. 172-173. (Здобувачем проведено дослідження, узагальнено експериментальні дані, зроблено висновки, написано текст статті).

8. Мулюкіна Н.А. Молекулярно-біологічні методи діагностики вірусних хвороб винограду / Н.А. Мулюкіна, А.В. Щербина // Науковий вісник НАУ. - Київ, 2002. - Вип. 53. - С. 228-233. (Здобувачем проведено збір та обробку літературних даних, проведено дослідження, узагальнено експериментальні дані, зроблено висновки, написано текст статті).

9. Мулюкіна Н.А. Діагностика вірусних хвороб та їх регламентація у виробництві садивного матеріалу винограду / Н.А. Мулюкіна, А.В. Щербина // Науковий вісник НАУ. - Київ, 2002. - Вип. 58. - С. 65-71. (Здобувачем проведено збір та обробку літературних даних, узагальнено експериментальні дані, зроблено висновки, написано текст статті).

10. Мулюкина Н.А. Вирусные болезни винограда и их влияние на виноградное растение / Н.А. Мулюкіна // Виноградарство і виноробство: міжвідомчий тематичний науковий збірник. - Одеса: ННЦ «ИВиВ им. В.Е. Таирова», 2004. - Вип. 41. - С. 45-53.

11. Мулюкина Н.А. Санитарная селекция банка клонов винограда / Н.А. Мулюкина, М.И. Тулаева, Л.И. Тарахтий // Виноградарство і виноробство: міжвідомчий тематичний науковий збірник. - Одеса: ННЦ «ИВиВ им. В.Е. Таирова», 2005. - Вип. 42. - С. 70-77. (Здобувачу належить планування і проведення досліджень, проведено збір та обробку літературних даних, проведено дослідження узагальнено експериментальні дані, зроблено висновки, написано текст статті).

12. Мулюкіна Н.А. Вплив відбору проб на виділення двоспіральної РНК, асоційованої з мозаїкою жилок винограду / Н.А. Мулюкіна // Аграрний вісник Причорномор'я: Зб. наук. праць. - Одеса, 2005. - Вип. 29. - С. 147-150.

13. Особливості прояву та візуального визначення вірусних хвороб в санітарній селекції винограду / Н.А. Мулюкина, М.И. Тулаева, В.Л. Чистякова [та ін.] // Научные труды Южного филиала «Крымский агротехнический университет» НАУ. - Симферополь, 2006. - Вып. 96. - С. 217-225. (Здобувачу належить ідея, планування і проведення досліджень, проведено аналіз даних, узагальнено експериментальні дані, зроблено висновки, написано текст статті).

14. Мулюкіна Н.А. Система санітарної селекції винограду в Україні / Н.А. Мулюкіна, М.І. Тулаєва // Науковий вісник НАУ. - Київ, 2006. - Вип. 100. - С. 67-75. (Здобувачу належить ідея, планування і проведення досліджень, проведено дослідження узагальнено експериментальні дані, сформульовано висновки, написано текст статті).

15. Результати санітарної селекції на базових і сертифікованих маточниках винограду в Україні / Н.А. Мулюкіна, М.І. Тулаєва, В.С. Чісніков [та ін.] // Виноградарство і виноробство: міжвідомчий тематичний науковий збірник. - Одеса: ННЦ «ИВиВ им. В.Е. Таирова», 2006. - Вип. 43. - С. 104-112. (Здобувачу належить планування і проведення досліджень, проведено дослідження, узагальнено експериментальні дані, зроблено висновки, написано текст статті).

16. Результати санітарної селекції клонів сортів винограду / Н.А. Мулюкіна, М.І. Тулаєва, В.Ф. Хілько [та ін.] // Наукові доповіді НАУ. - Київ, 2006. - №3. - 9 с. (Здобувачу належить планування і проведення досліджень, проведено дослідження, узагальнено експериментальні дані, сформульовано висновки, написано текст статті).

17. Мулюкіна Н.А. Особливості поширення вірусних хвороб та оцінка ризику вторинного ураження маточних насаджень винограду селекційних категорій / Н.А. Мулюкіна // Збірка наукових праць Уманської ДАУ. - Умань, 2007. - Вип. 67: Агрономія. - Ч. 1. - С. 242-250 (Здобувачу належить ідея, планування і проведення досліджень, проведено збір та обробку літературних даних, проведено аналіз та узагальнено експериментальні дані, зроблено висновки, написано текст статті).

18. Мулюкіна Н.А. Бактеріальний рак винограду: причини поширення та заходи боротьби із хворобою / Н.А. Мулюкіна // Науковий вісник ХНАУ. - Харків, 2007. - №5: Ролинництво, селекція, насінництво, овочівництво. - С. 140-147. (Здобувачу належить планування і проведення досліджень, проведено дослідження, узагальнено експериментальні дані, сформульовано висновки, написано текст статті).

19. Мулюкіна Н.А. Особливості природного поширення бактеріального раку винограду / Н.А. Мулюкіна // Захист і карантин рослин. - 2007. - №53. - С. 160-166. (Здобувачу належить ідея, планування і проведення досліджень, проведено збір та обробку літературних даних, проведено аналіз та узагальнено експериментальні дані, зроблено висновки, написано текст статті).

20. Мулюкіна Н.А. Застосування імуноферментного аналізу в санітарній селекції клонів винограду / Н.А. Мулюкіна // Аграрний вісник Причорномор'я. - Одеса, 2007. - Вип. 2 (40) - С. 234-239. (Здобувачу належить планування і проведення досліджень, проведено дослідження, узагальнено експериментальні дані, сформульовано висновки, написано текст статті).

21. Санітарний стан маточних насаджень винограду категорії «стандартні» в Україні / Мулюкіна Н.А., Тулаєва М.І., Чісніков В.С. [та ін.] // Вісник Білоцерківського державного аграрного університету. - Біла Церква, 2007. - Вип. 46. - С. 97-102. (Здобувачу належить ідея, планування і проведення досліджень, проведено збір та обробку літературних даних, проведено аналіз та узагальнено експериментальні дані, зроблено висновки, написано текст статті).

22. Мулюкіна Н.А. Статистична оцінка деяких параметрів за виявлення вірусів винограду методом імуноферментного аналізу / Н.А. Мулюкіна // Вісник аграрної науки Південного регіону. - Одеса, 2007. - Вип. 8. - С. 176-179. (Здобувачу належить планування і проведення досліджень, проведено дослідження, узагальнено експериментальні дані, сформульовано висновки, написано текст статті).

23. Мулюкіна Н.А. Економічна доцільність застосування сертифікованого садивного матеріалу винограду (санітарний аспект) / Н.А. Мулюкіна // Виноградарство і виноробство: Міжвідомчий тематичний науковий збірник ННЦ «ИВиВ им. В.Е. Таирова». - 2007. - Вип. 44. - С. 86-93. (Здобувачу належить планування і проведення досліджень, проведено дослідження, узагальнено експериментальні дані, сформульовано висновки, написано текст статті).

24. Мулюкіна Н.А. Особливості схем сертифікації садивного матеріалу винограду в країнах світу / Н.А. Мулюкіна // Науковий вісник НАУ. - Київ, 2007. - Вип. 105. - С. 66-72. (Здобувачу належить ідея, планування і проведення досліджень, проведено збір та обробку літературних даних, сформульовано висновки, написано текст статті).

25. Санітарна селекція матеріалу винограду клонового та генеративного походження / Н.А. Мулюкіна, А.В. Щербина, В.Л. Чистякова [та ін.] // Виноградарство і виноробство: міжвідомчий тематичний науковий збірник. - Одеса: ННЦ «ИВиВ им. В.Е. Таирова», 2008. - Вип. 45 (2). - С. 80-83. (Здобувачу належить ідея, планування і проведення досліджень, проведено збір та обробку літературних даних, сформульовано висновки, написано текст статті).

Матеріали наукових конференцій

1. Милкус Б.Н. Зараженность вирусами винограда европейских сортов из стран Восточной Европы / Б.Н. Милкус, Н.А. Мулюкина, А.В. Щербина // Иммунитет и фитосанитарная селекция в системе интегрированной защиты виноградных насаждений: международная научно-практическая конференция, 31 августа - 1 сентября 2001 г.: тезисы докладов. - Кишинев, 2001, С. 13-14. (Автором проведено дослідження та аналіз експериментальних даних).

2. Тулаева М.И. Результаты клоновой селекции винограда в Украине / Тулаева М.И., Мулюкина Н.А., Чисников В.С., Хилько В.Ф. // 100 години институт по лозарство и винарство: юбилейна научна сесия, 2002 г.: доклады. - Плевен, 2002. - С. 38-39. (Автором проведено збір та обробку літературних даних, аналіз експериментальних даних).

3. Tulaeva M. Sanitary selection and diagnostics of grapevine virus diseases in Ukraine / M. Tulaeva, V. Chisnikov, N. Muljukina // Abstracts of 14th Meet. of the ICVG, 12-17 of September, 2003. - Locorotondo (Bari), Italy, 2003. - P. 155. (Автором проведено збір та обробку літературних даних, аналіз та узагальнення експериментальних даних зроблено висновки, написано текст статті).

4. Тулаева М.И. Перспективы производства сертифицированного посадочного материала винограда в Украине / Тулаева М.И. Мулюкина Н.А. // Виноградарство и виноделие XXI столетия: матер. междунар. симп., 7-8 сентября 2005 г. - Одесса, 2005. - С. 50-55. (Автором проведено збір та обробку літературних даних, аналіз експериментальних даних).

5. Мулюкина Н. Применение биотехнологических методов диагностики вирусных болезней в производстве здорового посадочного материала винограда / Н.А. Мулюкина // Вино и виноделие XXI столетия: V международная специализированная выставка-симпозиум, 3-5 февраля 2005 г.: доклады. - Одесса, 2005. - С. 116.

6. Мулюкина Н. Система санитарной селекции в виноградных питомниках Украины / Н.А. Мулюкина // Мобилизация и сохранение генетических ресурсов винограда, совершенствование методов селекционного процесса: международная научно-практическая конференция, 13-14 августа 2008 г.: доклады. - Новочеркасск, Россия, 2008. - С. 152-157.

АННОТАЦИИ

Мулюкина Н.А. Система санитарного контроля в виноградных питомниках Украины. - Рукопись

Диссертация на соискание ученой степени доктора сельскохозяйственных наук по специальности 06.01.08 - Виноградарство. - Национальный научный центр «Институт виноградарства и виноделия им. В.Е. Таирова», Одесса, 2008.

Теоретически обоснованы и разработаны научно-методические основы системы санитарного контроля за производством сертифицированного посадочного материала винограда. Система санитарного контроля накладывается на этапы технологии производства сертифицированного посадочного материала винограда, разработанную специалистами Центра клоновой селекции ННЦ «ИВиВ им. В.Е. Таирова».

Система впервые в Украине объединяет и включает следующие элементы:

организационные - сеть питомников Центра клоновой селекции и организаций, которые осуществляют государственный контроль и научное сопровождение деятельности питомников;

информационные - базы данных патогенов и болезней, распространенных в Украине, которые входят в систему санитарного контроля, базы стандартизированных или метрологически аттестованных методик отбора проб и диагностики латентного поражения заболеваниями, базы данных маточных насаждений в питомниках, базы данных нормативной документации;

идентификационные - объединение санитарного контроля с ампелографическим и молекулярно-генетическим контролем;

технологические - категории насаждений на клоновой основе - клоноиспытательные участки, банк клонов, базовые и сертифицированные маточники; категории насаждений на генеративной основе - селекционный питомник, участки конкурсного испытания, маточники первичного размножения.

На производственных виноградниках и маточных насаждениях виноградных питомников Украины изучено распространение вирусных и фитоплазменных болезней, бактериального рака и болезней многолетней древесины, вызываемых грибами.

Установлено, что среди болезней, которые должны быть охвачены системой санитарного контроля, наиболее распространенными и вредоносными являются бактериальный рак и скручивание листьев винограда. Уровни визуального поражения этими болезнями достигают 6,5 % для скручивания листьев и 25,6 % для бактериального рака.

Для методического обеспечения системы разработаны, оптимизированы и внедрены в практику санитарного контроля молекулярно-биологические методы диагностики латентного поражения возбудителями вирусных болезней и бактериального рака винограда, в том числе методы молекулярной гибридизации и ПЦР-анализа.

Разработанные и оптимизированные методы применены для тестирования кустов с клоноиспытательных участков, банка клонов, базовых и сертифицированных маточников на возможное латентное поражение вирусными болезнями и бактериальным раком.

С их помощью оценено санитарное состояние растений свыше 50 перспективных клонов отечественной селекции 37 привойных и подвойных сортов на этапах испытания, а также базовых и сертифицированных маточников, заложенных этими клонами. Санитарное состояние клонов характеризуется практическим отсутствием поражения вирусными болезнями, в том числе наиболее вредоносными - короткоузлием, скручиванием листьев и бороздчатостью древесины винограда. Исходным материалом данных клонов были заложены базовые маточники в семи виноградных питомниках Украины.

Показано, что степень поражения возбудителями вирусных болезней и бактериального рака маточных насаждений категории «стандартные» на 2-17% ниже по сравнению с производственными виноградниками (в зависимости от заболевания).

Изреженность маточников категории «стандартные» в среднем на 3,5% меньше по сравнению с этим показателем на промышленных виноградниках.

Изучение пространственного и временного распространения вирусных болезней и бактериального рака винограда показало низкую скорость процессов естественного распространения скручивания листьев (0,4% за 5 лет) и значительную скорость естественного распространения бактериального рака винограда (до 10% за 2 года при наличии морозных повреждений).

Показано продолжительное сохранение санитарного состояния «свободный от вирусной инфекции» банка клонов, базовых и сертифицированных маточников и относительно быстрое поражение этих насаждений бактериальным раком винограда. С учетом этого предложена периодичность тестирования на вирусы в среднем 1 раз в три года для банка клонов и 1 раз в пять лет для базовых и сертифицированных маточников. Для бактериального рака предложена периодичность тестирования 1 раз в 2 года для всех категорий маточных насаждений.

Установлено, что повышение экономической эффективности питомниководства при производстве сертифицированного посадочного материала винограда происходит за счет увеличения выхода стандартных саженцев и черенков, а также за счет различной цены на категории посадочного материала. Экономическая эффективность на 1 грн. капитальных вложений при выращивании посадочного материала категории «сертифицированный» составляет 135 грн. по сравнению с 53 грн. при производстве саженцев категории «стандартные».

Разработаны организационные и информационные основы системы санитарного контроля. Система опирается на сеть виноградных питомников, каждый из которых обслуживает прежде всего свой регион. Деятельность системы контролируется Украинской государственной Помолого-ампелографической инспекцией при научном сопровождении специалистов Центра клоновой селекции ННЦ «ИВиВ им. В.Е. Таирова».

В соавторстве разработан ДСТУ 4390:2005, введенный в действие в 2005 году, который регламентирует производство посадочного материала категорий «исходный клоновый» «базовый» и «сертифицированный». В соавторстве разработаны, приняты и вводятся в действие проекты ДСТУ «Виноград. Методы тестирования на вирусы и бактериальный рак» и «Виноград. Классификация маточных насаждений и посадочного материала селекционных категорий».

Ключевые слова: санитарный контроль, вирусы, бактериальный рак, фитоплазменные болезни, банк клонов, базовые и сертифицированные маточники, иммуноферментный анализ, молекулярная гибридизация, полимеразная цепная реакция

Мулюкіна Н.А. Система санітарного контролю у виноградних розсадниках України. - Рукопис

Дисертація на здобуття наукового ступеня доктора сільськогосподарських наук за спеціальністю 06.01.08 - Виноградарство. - Національний науковий центр «Інститут виноградарства і виноробства ім. В.Є. Таїрова», Одеса, 2008.

Теоретично обґрунтовано та розроблено науково-методичні основи системи санітарного контролю у виробництві сертифікованого садивного матеріалу винограду. Систему розроблено та впроваджено в семи виноградних розсадниках України. На виробничих виноградниках і маточних насадженнях виноградних розсадників України досліджено розповсюдження найбільш шкідливих вірусних та фітоплазмових хвороб, бактеріального раку винограду і грибних хвороб багаторічної деревини винограду.

Для методичного забезпечення системи розроблено, оптимізовано та впроваджено в практику санітарного контролю молекулярно-біологічні методи діагностики латентного ураження збудниками вірусних хвороб і бактеріального раку. Візуально та лабораторними методами оцінено санітарний стан понад 50 перспективних клонів вітчизняної селекції 37 прищепних і підщепних сортів на етапах випробування, а також кущів базових та сертифікованих маточників, закладених ціми клонами на площі понад 150 га.

Економічна ефективність на 1 грн. капітальних вкладень за вирощування садивного матеріалу категорії «сертифікований» складає 135 грн. порівняно з 53 грн. за виробництва саджанців категорії «стандартні».

Розроблено та введено в дію ДСТУ 4390:2005, який регламентує виробництво садивного матеріалу категорій «вихідний клоновий», «базовий» та «сертифікований».

Ключові слова: санітарний контроль, віруси, бактеріальний рак, фіто плазмові хвороби, банк клонів, базові та сертифіковані маточники, імуноферментний аналіз, молекулярна гібридизація, полімеразна ланцюгова реакція.

Muljukina N.A. System of sanitary control in grapevine nurseries of Ukraine.- Manuskript

Thesis for the Degree of Doctor of Agricultural Sciences in Speciality 06.01.08 - Viticulture.- National Scientific Center “Tairov Research Institute of Viticulture and Wine-Making”, Odessa, 2008.

The system of sanitary control has been based and developed for grapevine nurseries of Ukraine. System of sanitary control has been introducted into the practice of 7 grape nurseries of Ukraine The spreading of the most harmful virus diseases, crown gall, phytoplasma and fungal diseases on industrial vineyards and grapevine mother plantations has been studied. For the methodical providing of the sanitary control system the molecular biology methods of viruses and crown gall disease agent identification have been developed and optimized. These methods have been applied for the testing of more than 50 perspective clones of ukrainian selection of 37 scion and rootstocks cultivars during trial stages. The laboratory testing of the plants from base and certified mother plantations established with these clones on more than 150 ha has been done. The economical effectiveness of the grapevine planting material producing per 1 hrn of capital investments has been calculated. It makes up 53 hrn and 135 hrn for planting material of categories “standard” and “certified” respectively.

State standard DSTU 4390:2005 for the regulation of producing of grapevine planting material of the categories “initial clonal”, “base” and “certified” has been elaborated in co-authorship and implemented.

Key words: sanitary control, viruses, crown gall disease, phytoplasma diseases, fungal diseases, clone collection, base and certified grapevine mother plantations, ELISA-test, molecular hybridization, polymerase chain reaction.

Размещено на Allbest.ru


Подобные документы

Работы в архивах красиво оформлены согласно требованиям ВУЗов и содержат рисунки, диаграммы, формулы и т.д.
PPT, PPTX и PDF-файлы представлены только в архивах.
Рекомендуем скачать работу.