Лабораторная диагностика и специфическая профилактика колибактериоза (эшерихиоза)

Целю и задачами работы явилось изучение лабораторной диагностики и специфической профилактики бруцеллеза.

Ключевые слова: колибактериоз (эшерихиоз), энтеробактерии, диагностика, животные, птица, иммунитет, профилактика.

Курсовая работа состоит из 5 разделов. В них описывается краткая характеристика колибактериоза и его возбудителя, лабораторная диагностика возбудителя, иммунитет и особенности специфической профилактики.

Оглавление

Введение

1. Обзор литературы

1.1 Краткая характеристика колибактериоза

2. Характеристика возбудителя

2.1 Морфология возбудителя

2.2 Культуральные свойства

2.3 Биохимические свойства

2.4 Антигенные свойства

2.5 Патогенез

2.6 Устойчивость возбудителя

3. Лабораторная диагностика

3.1 Особенности взятия и пересылки патматериала

3.2 Бактериологическая диагностика

3.3 Биопроба

3.4 Серологическая диагностика

4. Иммунитет

5. Особенности специфической профилактики

Заключение

Библиографический список

Введение

История и ареал колибактериоза(эшерихиоза). Впервые заболевание у телят установлено в 1891 году К. Иейсеном в Дании. В специальной литературе известно много синонимов, под которыми описывалась патология: колибациллез, колисепсис, колиэнтерит, коли-диарея, «белый понос телят», токсическая диспепсия.

Патология имеет глобальное распространение, сопровождается большими убытками. В Германии заболеваемость колибактериозом телят в тридцатые годы достигала 42-48 % среди жеребят -19,7 %. Во Франции в отдельные годы на некоторых фермах летальность животных составляла 40-55%. В США потери от колибактериоза определяются цифрой в 10% к обшей заболеваемости телят. Заболевание молодняка с разными показателями наблюдаются во всех странах Европы, Азии и т. д. (Я. Е. Коляков, 1970).В СССР заболевание регистрировалось во всех регионах. Так, в хозяйствах Амурской области в 1946-1969 годы среди телят, павших в первый день жизни, количество положительных лабораторных заключений на колибактериоз составляло 28,7% к числу исследованных проб, среди телят в возрасте 2-3 дней - 34 %, 4-7 дней - 22,5 %, 8-14 дней - 19,4%, 15-21 день-14,3 % Исследовано 3829 проб патологического материала (Ю. П. Мозжухин, 1971). В Приморье за 1967-1970 годы на колибактериоз проведено 746 экспертиз, из которых от 3,8 % до 5,5 %, каждый год были положительными (Е. А. Кирьянов, 1974). Летальность при отдельных вспышках болезни среди телят достигала 46,6 %, а в среднем за год - 32 %. (Е. А. Кирьянов, 1977, 1979). В Хабаровском крае при исследовании 258 проб, обработанных в 1972-1975 годы, число положительных подтверждений на колибактериоз телят составило 12,4%. Случаев колибактериоза среди поросят в эти годы не диагностировано (Е. А. Кирьянов, М. Ф. Соснин, 1978). На Сахалине в 1972-1976 годы количество положительных случаев диагностики колибактериоза телят находилось в пределах 2,1-46,2 % (Е. А. Кирьянов, В. Г. Курдюков и др., 1981). В Амурской области в 1972-1976, годы на колибактериоз, телят исследовано 1696 объектов, частота пожительных результатов по годам колебалась в пределах 15,4-27,9 %, среди поросят - 17,3-35 %. Исследовано 287 трупов (Е. А. Кирьянов, И. Ф. Тютрин, 1981). Колибактериоз в зоне Дальнего Востока в анализируемые годы также регистрировался среди норок, птиц, кроликов./1,3,10,11/.

Большой вклад в изучение проблемы колибактериоза внесли академик С. Н. Вышелесский, Р. А. Цион, Н. А. Михич, Я. Е. Коляков, А. М. Ахмедов, А. Г. Малявин, М. А. Сидоров и др. Достижением последнего времени является разработка и изготовление профилактического препарата колипротектана, предложенного профессором М. А. Сидоровым (1979).

1. Обзор литературы

1.1 Краткая характеристика колибактериоза

Колибактериоз (эшерихиоз) - инфекционное заболевание молодняка животных разных видов, сопровождающееся остротой течения, септическими явлениями, диареей и дегидратацией тела животного, высокой летальностью./12,15,18/.

Колибактериоз телят

Заболевание наблюдается впервые дни жизни: в день после рождения и в последующие 7-15 дней. Основная заболеваемость приходится на первую недолю жизни телят./8,10,12,15,18/.

Симптомы. Колибактериоз у телят протекает в сверхострой, острой и подострой формах (Я. Е. Коляков и др., 1970).

Сверхострое течение наблюдается у телят в возрасте до трех дней. При этом повышается температура тела до 40-41°С прогрессирует угнетение, развивается понос. Инфекционный процесс в отдельных случаях может протекать и без явлений поноса. Больной теленок обычно лежит в боковом положении с вытянутыми конечностями, издает стоны. Позыв к приему корма отсутствует. Течение болезни нередко оканчивается летальным исходом в первый день жизни теленка.

Для острого течения свойственна повышенная температура тела, болезненность живота, угнетение, отсутствие аппетита, профузный понос. При сильной диарее вскоре происходит обезвоживание организма, глаза западают. Затрудняется работа органов дыхания, сердечно-сосудистой системы. Процесс при отсутствии мер лечения также может оканчиваться гибелью животного.

Подострое течение болезни сопровождается меньшей остротой признаков, которые наблюдаются при остром процессе. Считают, что подострое течение болезни, как правило, характерно для стационарно-неблагополучных пунктов. У больных телят регистрирует расстройство функции пищеварения, болезненность и отечность области суставов (чаще коленного и скакательного). Возможны также осложнения на органы дыхания и другие системы организма.

Колибактериоз поросят

Остропротекающее заболевание, характеризующееся профузным поносом, гидремией, массовостью, стационарностью и высокой смертностью. Болеют поросята впервые дни и педели после рождения, а также после отъема (В. И. Косенко, 1983).

Симптомы. Болезнь у поросят протекает в виде колисепсиса, колиэнтерита, отечной болезни. В инфекционном процессе различают сверхострое, острое и подострое течение.

Сверхострое течение болезни обычно продолжается от нескольких часов до двух суток. У больных поросят повышается температура тела, понос, прогрессирует угнетение. Летальность достигает 20-80%. У поросят с острым или подострым инфекционным процессом болезнь длится от 3 до 10 суток. Перечисленные выше признаки выражены более сглажено. Развивается угнетение, снижается упитанность./13,22,23/.

Колиэнтеротоксемия (отечная болезнь)

Одна из форм колибактериозного процесса, отличающаяся злокачественностью. Патология обычно наблюдается у поросят в возрасте 8--12 недель, характеризуется кратковременной лихорадкой, развитием отеков подкожной клетчатки век, головы, судорогами, парезами и параличами. колибактериоз молодняк животное

Вызывается заболевание В-гемолитическими формами кишечной палочки. Поражаются, как правило, упитанные поросята.

Способствуют появлению болезни погрешности в кормлении, нарушении технологии содержания. Влияют в этом отношении большая концентрация животных в помещениях, безвыгульное содержание, сухой, концентратный тип кормления, бессистемное применение антибиотиков и другие факторы (В. И. Косенко, 1983).

У поросят при этой форме нарушается координация движений, понос, рвота. Походка шаткая, поросята зарываются, а подстилку, взвизгивают. У них повышенная раздражительность, мышечная дрожь, плавательные движения. Ранним признаком служит отек век, области головы. У отдельных поросят болезнь начинается внезапно: животное взвизгивает, развиваются судороги, из носовых отверстий и ротовой полости выделяется пенистая жидкость. С этими признаками животные погибают.

Развиваются также симптомы, свидетельствующие о нарушении функции сердечно-сосудистой системы -- учащается дыхание, одышка. Болезнь длится несколько часов и в большинстве случаев оканчивается летально./13,22,23/.

Колибактериоз ягнят

Остропротекающее заболевание ягнят, характеризующееся явлениями колиэнтерита и колнсепсиса. Основными возбудителями считают эшерихии

серо-групп; 08, 09, 015, 020, 026, 035, 078, 0101, 0119, 0137, 041.

Симптомы. Инкубационный период при колибактериозе длится от нескольких часов до двух дней. Больные ягнята угнетены, больше лежат. Температура тела у них повышается до 42°С. Отмечается расстройство функции сердечно-сосудистой системы, дыхания. У ягнят скрежет зубами, из носовых отверстий, ротовой полости видно выделение пенистой жидкости. Отдельные ягнята сильно угнетены, что не могут встать на конечности. У них появляются судороги, заметны плавательные движения, запрокидывание головы. Перед гибелью у ягнят появляются кровянистые истечения из носовых ходов и ротовой полости. Понос наблюдается редко. При описанной форме летальный исход наступает через 1--2 дня.

При колиэнтеритной форме также повышается температура тела. Каловые массы жидкие, пенистые, с примесью слизи и крови. Животное в состоянии депрессии, походка шаткая. Глаза запавшие, полузакрыты. Моча часто имеет кирпично-желтую окраску. У отдельных ягнят в процесс вовлекаются суставы. Пораженные суставы припухшие, болезненны. При пункции их извлекается гнойно-фибриозная масса./2,17/.

Колибактериоз жеребят

Остропротекающее заболевание, характеризующееся поражением кишечника, диареей (Н. А. Мпхип, 1948).

Болеют колибактериозом жеребята впервые дни жизни. Заражение происходит алиментарно, через пуповину, внутриутробно.

Симптомы. У жеребят на второй-третий день после рождения внезапно повышается температура тела, развивается понос. Жеребята отказываются от сосания, лежат. Летальный исход наступает через 24 часа. При затяжном течении обнаруживается опухание суставов. В случае внутриутробного заражения жеребята рождаются больными, слабыми. Такие животные обычно быстро погибают./12/.

Колибактериоз птиц

Инфекционное заболевание различных видов птиц, протекающее в

нескольких клинических формах. Патология чаще развивается в ассоциации с другими инфекциями. Болеет молодняк от одного дня до трехмесячного возраста, реже взрослая птица. Болезнь у взрослой птицы вызывают эшерихии, относящиеся к серологическим группам: 078, 02, 01, 026, 086, у цыплят - 078. 01, 08, 086, 02, 04, 015, 0101, 0142, 0115, 0117, 0119, 0139.

Симптомы. Инкубационный период короткий от нескольких часов до 2--3 суток. Течение инфекционного процесса остро, или септически, или в виде колигранулематоза. Возможна хроническая форма болезни.

Острое течение болезни сопровождается повышением температуры тела, жаждой, усиливающимся угнетением. Перед гибелью птицы развивается профузный понос.

Хроническое течение чаше является результатом перехода одной формы инфекционного процесса в другую. Оно возникает, как правило, на фоне незаконченного лечения. У молодняка птицы после кажущегося выздоровления начинают усиливаться симптомы угнетения, снижается позыв к корму, появляется понос, жажда. У цыплят к 15-20 дню развивается одышка, парезы, параличи, истощение. Оставшиеся в живых цыплята в дальнейшем плохо растут и развиваются.

При колигранулематозе, характеризующимся развитием на внутренних органах и коже специфических гранулем, поражаются молодняк с 2-4-месячного возраста, молодки и взрослая птица. Среди молодняка болезнь принимает энзоотическое течение, сопровождается высокой летальностью, достигающей 70-100%. Колигранулематозная форма вызывается эшери хиями, образующими капсулы и колонии мукоидного типа.

Течение болезни не типично. У больших птиц отмечают вялость, снижение аппетита, бледность гребня, бородки, слизистых оболочек. У кур истощение, прекращение яйцекладки, понос. При сильном поражении печени птица принимает позу пингвина. При пальпации у такой птицы обнаруживают узловатые образования в печени и кишечнике./16/.

2. Характеристика возбудителя колибактериоза

2.1 Морфология возбудителя

Возбудитель открыт Эшерихом в 1885 году, относится к семейству Enterobacteriaceae, роду Escherichia, который по биохимическим свойствам делится на 11 видов.

Бактерия входит в микроценоз организма, являясь постоянным обитателем толстого отдела кишечника человека, млекопитающих, птиц, рыб, рептилий, амфибий, насекомых, ее можно обнаружить на различных видах растений./7,15,21/.

Существовало несколько классификаций эшерихий. В 1905 году на основании ферментации сахарозы и дульцита в группу включены бактерии, коликоммунэ, колилактис, лактисаэрогенес и неаполитанум. В 1914 году к этой группе добавили бактерию коликоммуниор. В 1921 году бактерии были разделены на две подгруппы: коли и аэрогенес. В 1949 году в группе коли насчитывалось 7 видов бактерий: коликоммунэ, аэрогенес, цитроварум, клоаце, акватилис коммунэ, коли мотабили и параколи.

На 5-м Международном конгрессе микробиологов род Эшерихиа был разделен на 2 вида: Эшерихиа коли и Э. фреунди (И. В. Голубева, 1985). В новой классификации род Эшерихиа (Кастеллани, Чамеос, 1919) представлен двумя видами: Э. коли и Э. блаттэ (Н. А. Хоменко, 1985).

Морфология. Возбудитель колибактериоза представляет собой полиморфную палочку размером от 0,2 мкм до 3мкм, ширина 0,8 мкм. Палочки прямые, концы их закруглены. Располагаются одиночно или реже попарно. Отдельные микроорганизмы обладают подвижностью, отдельные штаммы образуют капсулу, другие - не обладают подобными свойствами. При электронной микроскопии различают цитоплазму губчатого строения, клеточную стенку, нуклеоид, жгутики. Грамотрицательные.

Рис. 1. Возбудитель эшерихиоза (E.coli). Об. 90, ок. 15

2.2 Культуральные свойства

По типу дыхания возбудитель факультативный анаэроб. Эшерихии хорошо растут на обычных питательных средах (МПБ, МПА). На плотных средах формируются выпуклые, средней величины, колонии. Они влажные, блестящие, круглые или шероховатые, более плоские и сухие. На среде Эндо колонии окрашиваются в красный цвет с металлическим блеском. На среде Левина колонии имеют темно-фиолетовый или черный цвет. На жидких средах (диффузное помутнение) рост микроорганизмов сопровождается образованием осадка или пленки, кольца на стенке пробирки. Рост микроорганизма возможен в диапазоне 4-45°С. Оптимальной температурой считается 35-37°С./7,15,21/.

2.3 Биохимические свойства

Эшерихии обладают биохимической активностью. Они ферментируют галактозу, лактозу, арабинозу, ксилозу, левулезу и другие углеводы. Бактерия не разжижает желатину, не разлагает мочевину, восстанавливает нитриты в нитраты, образует индол (имеются безгазовые варианты).

Эшерихии продуцируют до 24 типов колицинов -- веществ, несущих антибиотические свойства./7,15,21/.

2.4 Антигенные свойства

Антигенная структура эшерихий весьма сложна. Установлены О-антиген, заключенный в оболочке клетки; рибосомный - внутри цитоплазмы; Ф + фимбриальный, Н - на поверхности клетки; К - антиген, находящийся в оболочке или в капсуле. В диагностическом плане наибольшее значение имеют О, К и Н-антигены.

Другие антигены представляют значение для интерпретации вопросов патогенности и патогенеза. Эшерихии также содержат термолабильные и В - антигены, имеющие определенную связь с антигенными комплексами эритроцитов человека и животных. Назначение антигенов различно (И. В. Голубева, 1985). Термолабильный антиген является общим для разных видов энтеробактерий. Фимбриальные антигены в некоторой мере ингибируют процесс АО-агглютинации живых бактерии. Они имеют некоторую общность с антигенами шигелл, что проявляется в РА с шигеллезными сыворотками. Значение термолабильного Ф + сводится к появлению задержки агглютинации в первых разведениях сыворотки. У слизистых форм эшерихий

содержится М-антиген, имеющий родство с М-антигеном сальмонелл, М-антиген тормозит агглютинацию в ОК - сыворотках. Данный антиген может присутствовать одновременно с А или К-антигенами. О-антиген является специфичным и представляет собой липополисахаридо-протеиновый комплекс. Кауфман использовал этот антиген для серологической классификации эшерихий. В настоящее время по О-антигену известно 164 группы эшерихий. В состав О-антигеиа входит липид, который обусловливает токсичные свойства этого антигена, имеющие важное значение в патогенезе колибактериоза. При иммунохимическом анализе О-антигенов выяснилась их неоднородность, в связи, с чем они были разделены на хемотипы. При этом оказалось, что некоторые хемотипы являются общими для эшерихий и сальмонелл, другие специфичны только для сальмонелл. Изучение состава липополисахаридов О-антигенов не закончено, классификация их не завершена. Факторный состав О-антигенов, в связи с этим, обозначают символом своей серологической группы. Общий фактор обозначают буквой «а», дополнительные - буквой «б», «с», «д» и т. д. Эти символы обычно применяют для обозначения ЕРЕС (энтеропатогенные штаммы эшерихий).

Эшерихий по О-антигену обнаруживают связи с шигеллами, сальмонеллами, клебсиеллами. При проведении идентификации культур эшерихий с О-антигенами следует учитывать феномен О-инагглютинабильности. Феномен связан с присутствием К-антигена. Устанавливается он после инактивации прогреванием, когда исключается

влияние поверхностных антигенов. При этом по степени термической обработки К-антиген разделяется на Л, А. В антигены. Из этих антигенов антиген А относится к истинным. Антиген В обеспечивает прочность связей в реакции антиген-антитело. От его активности зависит четкость реакции. Л - штаммы нередко несут гемолитические и дермонекротические свойства. Высокотоксичны для мышей и кроликов. Считают, что эти штаммы более патогенны для человека, менее - для животных.

Антиген Н жгутиковый, белковой природы, неоднородный по составу. Установлено 56 разновидностей этого антигена (H1-Н56). Для приготовления антигена используют культуры эшерихий, обладающие выраженной подвижностью. Идентификацию Н-антигена проводят в РА на стекле. Жгутиковые антигены специфичны, они не образуют антигенных связей с бактериями других родов кишечных бактерий. Серологическую идентификацию эшерихий проводят с помощью антисывороток, содержащих соответственно антитела против О-,К- и Н-антигенов. Существуют также методики определения эшерихий при помощи фагов./12,15/.

2.5 Патогенез

По данным Я. Е. Колякова с соавторами (1970), в патогенезе особого внимания заслуживают высокая чувствительность новорожденных к патогенным типам эшерихий, полное отсутствие или незначительное содержание глобулиновой фракции в крови и интенсивная колонизация бактериями тонкого отдела кишечника, проникновение бактерий в лимфоток и кровоток. И. И. Аргангельский и Н. В. Баданин (I960), связывают развитие патогенеза с нарушением защитной функции кишечника, что сопровождается внедрением эшерихий в слизистую оболочку кишечника. Поступающие продукты жизнедеятельности бактерий вызывают раздражение нервных

окончаний, обусловливают воспалительный процесс. Усиливается перистальтика, появляется понос с последующей дегидратацией тканей и интосикацией. Л. А. Таранова (1983) указывает, что в зависимости от вирулентности кишечной палочки и иммунологического состояния организма колибактериоз протекает либо в форме сепсиса, либо в виде энтерита. Первая форма связана с репродукцией кишечной палочки и образованием токсина в кишечнике, в кровяном русле. Вторая - с накоплением токсина в кишечнике. Способствующими факторами в развитии инфекционного процесса являются нарушения режима выпойки телят и недостаточность в кормлении стельных коров./18/.

2.6 Устойчивость возбудителя

Механизм образования резистентности к химическим веществам, антибиотикам у бактерии довольно сложный. Он зависит от совершенства защитных приспособлений микроорганизма. В этой связи имеет значение, прежде всего, состояние здоровья организма, дефекты фагоцитоза, недостаточность клеточной и гуморальной защиты, различные отклонения в микроценозе нормальной микрофлоры организма, характер применения лекарственных препаратов. Перечисленные факторы снижают общую резистентность организма. В этих условиях чувствительные к лекарственным препаратам микроорганизмы могут стать нечувствительными или слабочувствительнымп. Применение лекарственных веществ при этом станет малоэффективным или вообще не эффективным.

Лекарственные препараты обладают избранной специфичностью действия на структурные элементы микробной клетки. Это действие проявляется в отношении оболочки клетки, цитоплазматической мембраны, синтеза нуклеиновых кислот, белка, рибосом и др. Микроорганизмы, с другой стороны, проявляют генетическую резистентность против лекарственных веществ. Эта функция выполняется хромосомным аппаратом, наружной мембраной микробной клетки, а также мутагенными популяциями микроорганизмов. В этом отношении эшерихии обладают широким спектром устойчивости. Они проявляют резистентность в отношении пенициллина, канаванина, триметроприма, касугамицина, линкомицина, ниамина, эритромицина, рифалепицина, спектиномицина, стрептомицина, ампициллина, альбомицнна, поликиксина, к нескольким антибиотикам (Л. Е. Бриан, 1984).

Мощным фактором генетической резистентности является способность клеток создавать дополнительную ДНК, несущую доминирующую функцию устойчивости к антибиотикам. Эта функция осуществляется через посредство плазмид. При этом чувствительность к антибиотикам зависит от природно-климатических зон. Особенновысокую резистентность имеют токсинообразующие линии эшерихий, выделенные на Дальнем Востоке. Резистентность их зачастую не ограничивается одним антибиотиком и распространяется в отношении многих препаратов (полирезистентность). У выделенных штаммов с большим постоянством резистентность проявлялась в отношении ампициллина, хлорамфеникола, стрептомицина, сульфаниламидов, тетрациклина, цефалоридина и др. В связи с этим, в условиях практики при бессистемном применении лекарственных веществ, существует постоянный риск производства популяций возбудителя с высокой лекарственной устойчивостью. Вероятно, этим и объясняется отсутствие эффекта лечения животных с «токсическими» диспепсиями, под которые часто маскируют колибактериоз. На деле, очевидно, так и бывает. Ведь температуру тела больного животного нередко определяют визуально, без термометра.

Эшерихий устойчивы также и к другим экологическим факторам. Они способны сохраняться месяцами в питательных средах, длительное время переносить высушивание и замораживание. Патоген представляется возможным через 1--2 месяца выделить из высушенных кусочков органов, взятых от больного животного. Эшерихии продолжительное время -- до 6,5 лет могут сохраняться в стерильной воде. В водопроводной воде их выживание ограничивается 31 днем. Месяцами бактерии не теряют активности в высохшем кале. Возбудитель быстро разрушается под влиянием высоких температур, под действием различных дезинфицирующих веществ (И. И. Архангельский, Н. В. Баданин, 1960). В этом отношении кишечная палочка служит критерием качества дезинфекции при многих инфекционных заболеваниях.

Изменчивость. Экологические условия оказывают достаточно сильное воздействие на состояние и свойства микробной популяции эшерихий (Д. Г. Кудлан, 1954; В. В. Кольчак, 1980). Оказывается в условиях экстремальности микроорганизмы резко меняют свои свойства. Особенно изменения демонстративны в популяциях кишечной микрофлоры. Эта группа микроорганизмов подвергается каждодневному интенсивному влиянию за счет поступающей пищи, содержащей разный состав и имеющей различные физические и химические свойства. В кишечнике происходит взаимное влияние бактерий на обмен веществ, ферментативные процессы макроорганизма. Здесь же постоянно проявляются антагонистические процессы между микро- и макроорганизмом.

Убедительным доказательством экологического воздействия и изменчивости является огромное количество серологических типов эшерихий. М. Б. Фельдманом, на примере эшерихий, выделенных из воды, показано, что культуры, имея слабые ферментативные свойства, в процессе культивирования усиливали свою энзиматическую активность. И. Н. Блохин, культивируя кишечную палочку в стерильной воде, выделил неагглютинабильный штамм невирулентный для мышей. Бактерии утратили энзиматическую активность и хорошо росли при температуре 30°С. Влияние питательной среды на состояние микробной популяции было доказано Н. Ф. Гамалея в 1894 году. Под действием солей лития он наблюдал изменения в морфологии бактерий, назвав их гетероморфозами. П.В. Циклннская, скармливая кроликам-сосункам культуры протея и кишечной палочки, наблюдала их гибель, составляющую 75% . В тоже время скармливание одной культуры протея, вызывало гибель 33%, кроликов, а скармливание культуры кишечной палочки без протея вообще не сопровождалось заболеваемостью животных. В работах многочисленных исследователей подчеркивается сильная изменчивость биохимических свойств у бактерии кишечной группы./10,11,24/.

3. Лабораторная диагностика

Болезнь определяют по клиническим, патологоанатомическим и эпизоотологическим данным. Диагноз подтверждают лабораторным исследованием./12,15/.

Рис.2. Схема бактериологического исследования материала на колибактериоз.

3.1 Особенности взятия и пересылки патологического материала

Для бактериологического исследования в лабораторию направляют патологический материал: для прижизненной диагностики - фекалии от больных животных, которые берут из прямой кишки в стеклянные пробирки стеклянной палочкой; для посмертной диагностики - свежий труп или трубчатую кость, отрезок кишечника перевязанного с двух концов, кусок печени, селезенки, почку, брыжеечные лимфоузлы. При вскрытии трупа в лаборатории помимо указанного материала исследуют также кровь из сердца и головной мозг. Если в лабораторию не представляется в кротчайший срок доставить материал. Его консервируют: фекалии - раствором стерильного глицерина с NaCl, кусочки внутренних органов в 30%-ном водном растворе глицерина или 10%-ном растворе NaCl.

3.2 Бактериологическая диагностика

В лаборатории проводят комплексное исследование поступившего материала.

При микроскопии мазков из органов и крови обнаруживают палочки с закругленными краями, расположенные одиночно, по Граму окрашиваются отрицательно.

Для выделения культур эшерихий используют МПА, МПБ, а также среды специального назначения: Эндо, Левина, Симонса, Кларка и др.

На МПА через 18…20ч вырастают влажные круглые колонии с ровными краями и гладкой поверхностью. В жидкой среде рост эшерихий проявляется равномерным помутнением с образованием осадка. Некоторые штаммы обладают гемолитическими свойствами.

На среде Эндо образует три типа колоний:

1) малиновые с металлическим блеском;

2) малиновые с розовым блеском;

3) розовые.

На среде Левина дает рост в виде колоний темнофиолетового цвета.

На среде Симсона не растут: цвет ее не изменяется. На среде Кларка: розово-красное окрашивание учитывают как положительный результат, желтое как отрицательный. Глюкозу и лактозу сбраживает с образованием кислоты и газа. Обесцвечивают метиленовую синь в молоке, молоко свертывает, образует индол. Реакция с метилротом положительная, проба Фогеса-Проскауэра отрицательная. Основываясь на морфологических и культурально - биохимических свойствах, проводят межвидовую дифференциацию. Выделенную культуру типируют в РА, используя типоспецифические агглютинирующие коли-сыворотки.

3.3 Биопроба

Выделенные культуры проверяют на патогенность, заражая внутрибрюшинно белых мышей. Диагноз на колибактериоз считают установленным, если культуру возбудителя изолируют из селезенки, трубчатой кости или из головного мозга. Болезнь также подтверждается, если выделенная культура эшерихий из других органов вызывает гибель белых мышей. В большинстве случаев E.coli , выделенные из трупа или фекалий больных коли-инфекций животных, патогенны для мышей.

3.4 Серологические исследования

Кроме бактериологического исследования, диагноз устанавливают ускоренными методами. В этих целях применяют иммунохимический метод, путем постановки РДП или РИФ. При этом с помощью реакции иммунофлюоресценции можно ставить диагноз через 2--4 часа.

Помимо общепринятого микробиологического исследования существуют также дополнительные методы диагностики. Например, люминесцентно-серологический метод используют как ориентировочный для определения патогенных серотипов E.coli при массовых вспышках желудочно-кишечных заболеваний. Этот метод позволяет за короткий срок получить предварительные результаты.

Колибактериоз следует дифференцировать от диареи незаразного происхождения, сальмонеллеза, стрептококкоза, пастереллёза, некоторых вирусных инфекций.

4. Иммунитет

У новорожденных животных организация защиты против эшерихий проявляется слабо. Они ареактивны в отношении антигена. Поэтому является задачей обеспечить специфическую защиту против ЕРЕС у родившихся животных. Поставленная цель достигается своевременной выпойкой молозива, инъекцией специфического гамма-глобулина, введением гипериммунных сывороток. Насыщение молозива антителами производится через посредство иммунизации беременных животных в последний период плодоношения. Молодняк, переболевший колибактериозов, сохраняет невосприимчивость к реинфекции./9,12/.

5. Особенности специфической профилактики

Терапия и профилактика обеспечивается выпуском антитоксических сывороток, бактериофага, колипротектана ВИЭВ. Для активной профилактики готовится формолтиомерсаловая вакцина против колибактериоза пушных зверей, птиц, телят и поросят (Б. Ю. Шустер и др., 1981). Изготовление вакцины для иммунопрофилактики колибактериоза не всегда обладают выраженной эффективностью. Набор антигенов нередко не отвечает структуре распространенных серовариантов на конкретной территории. Данное обстоятельство выдвигает вопрос о конструировании вакцин, учитывающих региональные особенности серологической структуры эшерихий. Идея создания таких вакцин многократно обсуждалась на различных конференциях. В соответствии с рекомендациями биопредприятия должны постоянно обновлять штаммы эшерихий, которые распространены в животноводстве конкретных территорий. Однако указанная рекомендация пока не находит достаточной реализации в практических делах, что сопровождается недостаточной иммуногенностыо выпускаемых препаратов.

Для лечения больных колибактериозом животных предложен большой арсенал средств. Из специфических препаратов используют иммунную сыворотку, бактериофаг.

Сыворотку вводят внутримышечно в дозе 30--80 мл в сутки. Бактериофаг дают телятам через рот от 30--50 мл 3 раза через 2 часа. Перед выпаиванием препарата дают теленку 3--5-процентный раствор пищевой соды (25--30 мл).

Для лечения больных животных широко используют антибиотики (О. 3. Исхаков и др., 1984). При лечении применяют левомицетин, тетрациклин, полимиксин, неомицин. Антибиотики выпаивают молодняку с водой или молоком./8,12,13,14,19,22/.

Заключение

Колибактериоз -- инфекционное заболевание молодняка животных разных видов, сопровождающееся остротой течения, септическими явлениями, диареей и дегидратацией тела животного, высокой летальностью.

Колибактериоз, как указывалось выше, имеет глобальное распространение, проявляясь с разной интенсивностью. Наблюдения показывают, что на отдельных фермах патология регистрируется в течение многих лет. Источником патогенных форм эшерихий являются больные животные, а также взрослое поголовье, которое постоянно содержится в помещениях, не пользуется моционом. Такие животные выполняют роль банка патогенных сероваров эшерихий. Установлено также и то обстоятельство, что телята, свиньи, находящиеся на интенсивном режиме выращивания, способны репродуцировать формы эшерихий, устойчивые к лекарственным веществам. При этом репродукция патогена не зависит от употребления этими животными сульфаниламидов и антибиотиков. Это открытие имеет принципиальное значение в механизме распространения патогенных форм кишечной палочки.

Существует сложный механизм передачи возбудителя от больного к здоровому. Известна передача патогена внутриутробно. В силу обильного выделения патогена во внешнюю среду маточным поголовьем происходит насыщение им родильных боксов, отделении, профилакториев. Возбудитель в больших количествах присутствует в воздухе, па стенах, кормушках, в подстилке, на предметах ухода, молочной посуде, руках, одежде ухаживающего персонала. Эти обстоятельства обеспечивают проникновение возбудителя в организм в период акта родов, после рождения алиментарно, аэрогенно. Обеспечивается передача патогена также непосредственно через контаминированные руки, поилки, при сосании, облизывании стенок станков, кормушек, через подстилку и другими путями. При обследовании птицефабрики эшерихий обнаруживали в птичниках, в цехе инкубации, в помещении для сортировки яиц, цыплят, в убойном цехе. Поэтому роль больного животного, его выделений, при колибактериозе весьма значительна. В качестве активных источников возбудителя большое значение принадлежит маточному поголовью. Различные осложнения после акта родов (патологии подовых органов, молочной железы) нередко вызываются энтеропатогенными формами кишечной палочки.

В механизме передачи возбудителя определенная роль принадлежит кормам. Эшерихии выделяли из рыб, китового мяса, мясных туш, трупов сельскохозяйственных животных, которые в виде рыбной, мясокостной муки идут в качестве приправы при изготовлении комбикормов.

На заболеваемость молодняка сельскохозяйственных животных колибактериозом оказывают влияние условия кормления и содержания маточного поголовья, а также условия его выращивания в первую неделю жизни. У телят, родившихся от коров с нарушенным обменом веществ, в частности, отмечаются признаки физиологической незрелости. У них слабо выражены безусловные рефлексы, низкий уровень сывороточного белка, мало в крови альбуминов, сахара, понижена резервная щелочность, повышено содержание кетоновых тел.

Таким образом, условия кормления, содержания маточного поголовья в последнюю треть беременности и уровень гигиены выращивания молодняка сельскохозяйственных животнпых в значительной мере предопределяют возможность колибактериоза на ферме. Особенно большой риск возникновения эпизоотического процесса существует на фермах промышленного типа, где поголовье животных не пользуется активным моционом.

Центральной задачей борьбы с колибактериозом является создание нормальных условий кормления и содержания коров, а также обеспечение выращивания молодняка. В этой связи кормление коров должно осуществляться на основе биологически полноценных рационов. Животным в обязательном порядке устраивается активный моцион. Организация активного моциона коров служит мощным фактором, профилактирующим накопление плазмид, обладающих патогенностью и лекарственной устойчивостью.

Не меньшее значение в системе предупреждения распространения патогенных эшерихий имеет правильная организация отелов и выращивания новорожденных телят. Для отела коров на каждой ферме оборудуют двухсекционные родильные обеления из расчета 10--15%, мест от общего поголовья коров. В каждой такой секции сооружается по несколько боксов. Перед отелом проводят туалет и дезинфекцию кожного покрова коровы. Продезинфицированный бокс заправляют подстилкой хорошего качества. Отел принимают на чистую мешковину. Теленку в первый час после рождения с целью профилактики колибактериоза выпаивают 80--100 мл гипериммунной сыворотки, затем молозиво.

В хозяйствах проводят специфическую профилактику колибактериоза. Для этого глубоко стельных коров и нетелей вакцинируют гидроокисьалюминиевой формолтиомерсаловой вакциной против колибактериоза телят и ягнят. Коров и нетелей иммунизируют за 1,5--2 месяца до отела внутримышечно двукратно с перерывом в 10--15 дней. Вакцинацией коров обеспечивается высокая концентрация антител в молозиве, которые защищают родившегося теленка от влияния патогенных эшерихий. Применение вакцины коровам снижает заболеваемость телят колибактериозом в 1,5--3 раза, смертность -- в 5--10 раз (В. В. Кольчак, 1983)./4,5,6,9,13,17,18,19/.

Библиографический список

1. Аверихин А. И. Патологоанатомическая характеристика алиментарной и

инфекционной диареи телят молозивного периода. - Инфекционные и паразитарные болезни сельскохозяйственных животных.- Омский СХИ, 1983.- С. 25-28.

2.Ахмедов А. М. Колибактериоз. - В кн.: Болезни овец и коз.- М.: «Колос»,1973.- С. 102-108.

3.Барабанов И. И., Колесниченко И. Д., Наконечников Б. Д. Кишечная палочка у телят при колибактериозе. - Земля сибирская, дальневосточная, 1980, № 8.- С. 37.

4. Ветеринарное законодательство.- М.: Агропромиздат, 1988.- 671 с.

5. Гелетюк В. 3. Выращивание здоровых телят. - Ветеринария.- 1982, № 3.- С. 13-14.

6.Гнатенко Г. В., Тупииа Л. Г., Ракицкий Д. Т. Опыт борьбы с колибактериозом телят. - Ветеринария.- Киев: «Урожай», 1983, вып. 57.- С. 15-17.

7. Голубева И. В. Эптеробактерии (руководство).- М.: «Медицина», 1985.- С. 57-85.

8. Гумул В. А., Афанасьев Л. А., Мауланов А. 3. Клиника и лечение

колибактериоза телят. - Вестник с-х науки Казахстана, 1985, № 2, С. 68-71.

9.Карпуть И. М., Ульянов А. Г., Плавскин И. И., Курчевский Л. П. Профилактика диспепсии новорожденных телят аутоиммунного происхождения. - Ветеринария.- 1985, № 6, С. 50-51.

10. Кирьянов Е. А., Больных В. Т. Экология и эпизоотология колибактериоза телят. - В кн.: Производство продуктов животноводства на промышленной основе на Дальнем Востоке. Новосибирск: СО ВАСХНИЛ, 1983.- С. 129-132.

11. Кольчак В. В. Некоторые биологические свойства культур эшерихий, выделенных от телят Амурской области.-- В кн.: Борьба с болезнями сельскохозяйственных животных на Дальнем Востоке, тр. Дальневосточного НИВИ, том 11.- Омск, 1980.- С. 28-31.

12.Колычев Н.М., Госманов Р.Г. Ветеринарная микробиология и иммунология.- Омск, 1996.- 552 с.

13.Костенко В. И. Колибактериоз поросят.-В кн.: Профилактика инфекционных болезней.- М.: «Колос», 1983.- С. 19-29.

14. Митюшин В. В. Лечение телят при острых расстройствах пищеварения. - Ветеринария.- 1985, № 10.- С. 53-55.

15. Практикум по ветеринарной микробиологии.- М.: Академия, 2005.- 604 с.

16.Рахманина И. А. Колибактериоз цыплят.-В кн.: «Профилактика инфекционных болезней молодняка.- М.: «Колос», 1983.- С. 151-156.

17. Сидоров М. А., Гущин В. Н. Профилактика колибактериоза животных. -

Ветеринария.- 1984, № 3- С. 41-43.

18. Таранова Л. А. Колибактериоз телят.-В кн.: Профилактика инфекционных болезней молодняка.- М.: «Колос,1983.- С. 19-29.

19. Фельдман И. И., Корис Г. С, Иванов А. А. Профилактика колибактериоза телят.- Ветеринария.- 1985 № 10, С. 17.

21. Хоменко Н. А. Питательные среды и реактивы.- В кн.: Энтеробактерии (руководство). М.: «Медицина», 1985.- С. 305-309.

22. Шустер Б. Ю., Малахов Ю. А., Соловьева В. С, Тугаринов О. А. Сальмонеллезы и колибактериоз.-В кн.: Ветеринарные препараты М.; «Колос», 1981.- С. 216-236.

23.Шишков В. П., Федоров А. И. Колибактериоз.- В кн.: Патологоанатомическая диагностика болезней свиней.- М.: «Колос», 1984.- С. 162-166.

24.Шихалев Ю. Н. Жизнеспособность сальмонелл и кишечной палочки в мясо-костной муке. - Ветеринария.- 1980, № 9.- С. 18-19.

Размещено на Allbest.ru