Репродуктивна функція та резистентність до акушерської і гінекологічної патології корів у зв’язку з поліморфізмом білків сироватки крові

Размещено на http://www.allbest.ru/

ЛЬВІВСЬКА ДЕРААВНА АКАДЕМІЯ ВЕТЕРИНАРНОЇ МЕДИЦИНИ ІМЕНІ С.З. ГЖИЦЬКОГО

УДК: 636. 2: 619: 993. 16

Репродуктивна функція та резистентність до акушерської і гінекологічної патології корів у зв'язку з поліморфізмом білків сироватки крові

16.00.07 - ветеринарне акушерство

Автореферат

дисертації на здобуття наукового ступеня

кандидата ветеринарних наук

Каплінський Василь Васильович

Львів 2000

Дисертацією є рукопис.

Робота виконана в Інституті землеробства і біології тварин УААН.

Захист відбудеться “24 “ лютого 2000 р. о 16 годині на засіданні спеціалізованої вченої ради Д 35.826.01 у Львівській державній академії ветеринарної медицини ім. С.З.Гжицького за адресою: 79010, м.Львів-10, вул. Пекарська, 50, аудиторія №1.

З дисертацією можна ознайомитись у бібліотеці Львівської державної академії ветеринарної медицини ім. С.З.Гжицького за адресою: 79010, м.Львів-10, вул. Пекарська, 50.

Автореферат розісланий “ 22 “ січня 2000 р.

Вчений секретар спеціалізованої вченої ради, кандидат біологічних наук, доцент Головач П.І.

корова поліморфний отелення білок

1. ЗАГАЛЬНА ХАРАКТЕРИСТИКА РОБОТИ

Актуальність теми. У розвитку скотарства і збільшенні виробництва тваринницької продукції важливого значення набуває інтенсивне відтворення поголів'я, що значною мірою залежить від репродуктивної функції, стійкості до акушерської і гінекологічної патології корів і телиць (А.П.Студєнцов, 1961; Д.Д.Логвінов, 1975; Г.В.Звєрєва, 1976, 1978; В.С.Шипілов, 1977; В.А.Павлов, 1984; В.П.Іноземцев, 1997).

Покращення репродуктивної функції корів, зменшення частоти акушерських і гінекологічних захворювань можливе за умов ефективних способів їх прогнозування і профілактики, раціонального лікування, спрямованого відбору тварин у ранньому віці з певними фізіологічними і біохімічними показниками, серед яких заслуговують великої уваги поліморфні системи білків (ферментів). Переваги останніх перед іншими показниками у тому, що вони формуються у період внутрішньоутробного розвитку плода, не змінюються з віком тварин і під впливом зовнішніх факторів.

Про можливість використання поліморфних систем білків крові і молока в якості прогностичних тестів репродуктивної функції тварин, резистентності до патологій вказують В.А.Пєтухов, (1985); В.І.Бєляєв, (1987-1989); Й.З.Сірацький, (1992-1994); Б.М.Чухрій і співавт., (1974-1999); І.В.Гузєв, В.К.Черемісін, (1998). Однак опубліковані дані не систематизовані, часто суперечливі і не дають можливості виявити закономірності.

Зважаючи на вказане, ми вивчали у корів відтворну функцію, частоту акушерської і гінекологічної патології, стійкість до неї у зв'язку з вмістом у сироватці крові загального білка і білкових фракцій, локусами поліморфних систем білків і ферментів.

Зв'язок роботи з науковими програмами, планами, темами. Дисертаційна робота була складовою частиною плану науково-дослідних робіт Інституту землеробства і тваринництва західних районів УААН “Оцінка і прогнозування репродуктивної функції великої рогатої худоби за генетичними маркерами“(№ державної реєстрації 06.03. UA 01001641P).

Мета і завдання досліджень. Встановити зв'язoк репродуктивної функції, резистентності до акушерської і гінекологічної патології корів з поліморфізмом білків і ферментів сироватки крові.

Для реалізації поставленої мети досліджували:

стан відтворної функції корів;

поліморфні системи білків і ферментів, вміст загального білка і його фракцій у сироватці крові корів;

особливості перебігу тільності, отелення, післяотельного періоду корів у зв'язку з поліморфними системами білків і ферментів;

зв'язок поліморфних систем білків і ферментів сироватки крові з резистентністю корів до акушерської і гінекологічної патології.

Наукова новизна. Вивчені зв'язки поліморфних систем білків і ферментів, вмісту загального білка і його фракцій у сироватці крові з показниками репродуктивної функції, резистентності до акушерської і гінекологічної патології корів чорно-рябої породи (західний внутрішньо- породний тип). Виявлена ефективність використання вказаних генетичних маркерів для об'єктивної оцінки і прогнозування репродуктивної функції, резистентності корів до акушерської і гінекологічної патології.

Вперше для визначення стійкості тварин до вказаної патології використані коефіцієнти резистентності (групові, загальні). Розроблена універсальна програма, для персональних комп'ютерів (ІВМ сумісних), за якою, використовуючи базу даних можна проводити статистичний аналіз, оцінку стану відтворення поголів'я великої рогатої худоби з урахуванням походження, генотипів за поліморфізмом білків, ферментів, еритроцитарних антигенів та біохімічних показників, а також виявляти тварин високорезистентних до акушерських і гінекологічних захворювань.

Практичне значення одержаних результатів. Тестування корів (телиць) за поліморфними системами білків і ферментів сироватки крові і виявлення тварин з високою відтворною здатністю, резистентних до акушерської і гінекологічної патології зменшить частоту і тривалість симптоматичної неплідності, забезпечить інтенсивне відтворення поголів'я.

На захист виносяться такі положення:

-перебіг тільності, родів, післяродового періоду, частота акушерської і гінекологічної патології у корів різних генотипів та у зв'язку з вмістом в сироватці крові загального білка, його фракцій перед отеленням і після нього;

-оцінка репродуктивної функції, резистентності до акушерської і гінекологічної патології корів різних генотипів за поліморфними системами білків і ферментів сироватки крові та коефіцієнтами резистентності.

Особистий внесок.

Робоча програма досліджень розроблена разом з науковим керівником. Роботи з організації дослідів, розроблення методики досліджень та проведення експериментів виконані здобувачем самостійно.

Апробація результатів дисертації.

Основні положення дисертації доповідали на науково-практичних конференціях: 1992, 1993рр.- Інститут землеробства і тваринництва західних районів УААН; 1994р. - Інститут розведення і генетики тварин УААН; Всеукраїнській науковій конференції з фізіології і біохімії тварин, м.Львів (1994); міжнародній науково-практичній конференції “Ветеринарные и зооинжинерные проблемы ведения животноводства,” Вітебськ - Білорусія, 1996р.; науково-методичній конференції “Научные аспекты профилактики и терапии болезней сельскохозяйственных животных,” Воронеж - Росія, 1996р.; міжнародній науково-практичній конференції ”Сучасні проблеми біології, ветеринарної медицини, зооінженерії та технологій продуктів тваринництва,” Львів, 1997р.; II міжнародній конференції ”Проблеми неінфекційної патології тварин,” Біла Церква, 1998р.; III міжнародній конференції ”Молекулярно-генетичні маркери тварин,” м. Київ, 1999р.

Публікації.

За матеріалами дисертації опубліковано десять наукових праць, з них п'ять статей та п'ять матеріалів і тез конференцій.

Структура і обсяг роботи. Дисертація викладена на 155 сторінках комп'ютерного тексту, ілюстрована 46 таблицями і 10 рисунками. Вона складається із вступу, огляду літератури, результатів досліджень, обговорення результатів досліджень, висновків і пропозицій виробництву. Список використаної літератури містить 299 джерел. Додатки на 39 сторінках.

2. МАТЕРІАЛ І МЕТОДИКА ДОСЛІДЖЕНЬ

Робота виконана протягом 1990 - 1993 р.р. в лабораторії відтворення стада Інституту землеробства і тваринництва західного регіону УААН. Науково-виробничі дослідження проводили в господарствах інституту „Оброшино” і „Радехівське” . У досліді було 650 корів чорно-рябої породи (західний внутрішньопородний тип) у віці 3-7 років, жива маса 400-600 кг, надій за лактацію становив у господарстві „Оброшино” ( далі - перше стадо-376 гол.) 2500-3500 кг, „Радехівському” (далі - друге стадо - 274 гол.) 4000-6000 кг молока.

В дослідженнях використовували клінічі і біохімічні методи, які включали акушерську і гінекологічну диспансеризацію корів за методикою розробленою кафедрою акушерства і штучного осіменіння сільсько- господарських тварин Львівської державної академії ветеринарної медицини ім.С.З.Гжицького (1985). Критерієм оцінки репродуктивної функції корів були: тривалість тільності, дн.; час першого осіменіння після отелення, дн.; сервіс-період, дн.; індекс осіменіння; запліднюваність після першого осіменіння, %; всього запліднених (загальна кількість запліднених тварин за період досліджень), %; народження близнят, % .

Резистентність корів до акушерської і гінекологічної патології визначали за частотою захворювань і ускладнень, а саме: до акушерської патології, %: в час тільності (аборти); родів (неправильні розміщення плода, слабкі потуги і перейми, затримання посліду); післяродовий період (субінволюція, випадіння матки, післяродові ендометрити); до гінекологічної патології, %: гострі і хронічні ендометрити; персистентне жовте тіло, кісти яєчників.

Для об'єктивного визначення частоти акушерської і гінекологічної патології у піддослідних тварин, встановлення вірогідності відхилень, проведення дисперсного аналізу, нами розроблені коефіцієнти резистентності, які вираховували за формулою:

KР = C заг. (1 + n Схв.) = 1 + n С хв.

де n - кількість хвороб, ускладнень виражених у 0,01 одиниці;

С заг. - загальна кількість тварин;

С хв. - число хворих тварин.

Якщо значення коефіцієнтів резистентності наближені або дорівнюють одиниці стійкість тварин до патології висока, а якщо значно більші одиниці - низька. Таким способом оцінювали резистентність корів до патології з врахуванням фізіологічних періодів: тільності, отелення, після отелення.

Матеріалом для генетико- біохімічних досліджень була сироватка крові корів. Для визначення вмісту загального білка і його фракцій, кров відбирали за 10-15 дн. до очікуваного отелення та на 3-7 день після нього.

На підставі результатів досліджень генотипу за поліморфними системами білків і ферментів сироватки крові корів формували групи резистентних до патології (клінічно здорових) і схильних до захворювань (з акушерськими і гінекологічними хворобами, ускладненнями).

Вміст загального білка сироватки крові визначали за біуретовою реакцією. Поліморфізм білків сироватки крові - трансферинів, постальбумінів визначали методом диск-електрофорезу в 7,5% поліакриламідному гелі за удосконаленою нами системою приготування розділяючих гелів (U. Laemmli, 1970), яка забеспечує економію часу і реактивів для приготування гелів. При дослідженні фракційного складу білків сироватки крові викорстовували метод типізації їх за В.М.Холодом (1983). Вміст білкових фракцій визначали на аналізаторі фореграм АФ-1. Електрофорез білків для якісного і кількісного аналізу проводили в стандартних умовах. Фенотипи постальбумінів і трансферинів оцінювали візуально за методикою G.Aschton (1957).

Поліморфізм ізоферментів амілази-1 досліджували за зміненою методикою Ю.І.Рожкова (1983) - методом афінного електрофорезу в 5% поліакриламідному гелі, а амілази-2 в 7% гелі. Для приготування гелів використовували удосконалену нами систему U. Laemmli (1970). Афінний електрофорез амілази-1 проводили 40 хв. при напрузі 100 В, а амілази-2 при напрузі 200 В протягом 60 хв..Одержані електрофореграми інкубували 2 години в середовищі такого складу: ацетат натрію 1,2 г, оцтова кислота (конц.) - 0,25 мл, СаСL2 - 0,2 г, вода дистильована - 100 мл, після чого фарбували 1,5% розчином NaJ + J2 до насичення. Після фарбування занурювали в 0,5% розчин Na2SO3. Поліморфізм ізоферментів амілази-1 і -2 визначали візуально за їх розміщенням на фореграмі (Ю. І. Рожков, 1983).

Генетичну частоту алелів поліморфних систем білків і ферментів сироватки крові визначали за формулою Харді-Вайнберга.

Аналіз показників репродуктивної функції корів з урахуванням поліморфних систем білків і ферментів сироватки крові, вмісту загального білка і його фракцій, частоти акушерської і гінекологічної патології проведено за розробленою в лабораторії інституту програмою для ІВМ сумісних персональних комп'ютерів (СУБД “CLIPPER”). Статистична обробка одержаних результатів проведена за П.Ф.Рокіцьким (1967), М.О.Плохінським (1970).

3. РЕЗУЛЬТАТИ ДОСЛІДЖЕНЬ ТА ЇХ АНАЛІЗ

1.Репродуктивна функція корів у зв'язку з поліморфізмом білків і ферментів сироватки крові.

Генетична частота досліджених поліморфних систем білків і ферментів сироватки крові корів у різних стадах не однакова. Частота алеля A трансферинового локуса у корів першого стада менша, а алеля D більша на 0,16 одиниці, порівняно з тваринами другого стада (табл. 1). Порівняно з другим стадом, у першому корів-гомозигот з типом трансферину DD на 14,7% більше, а гомозигот AA менше на 17,1%. У першому стаді гетерозигот з типом трансферину AE не виявлено, а DE - 1,33%, у другому - однакова кількість, 1,46%. В обидвох стадах частота алеля E - 0,01.

Вивченням постальбумінів та їх фенотипів виявлено, що у корів першого стада частота алелів A і B постальбумінового локуса однакова (0,5). У корів другого стада частота алеля B вища на 0,08 одиниці. Кількість корів-гетерозигот AB в першому і другому стадах майже однакова (63,2 і 64,6%). В першому стаді гомозигот AA більше на 4,6%, а BB менше на 3,5%, ніж у другому.

За типами ізоферментів амілази-1 корови-гомозиготи CC числом переважали гетерозигот BC в обидвох стадах : у першому на 42,0%, другому на 11,3%. Гомозигот CC в першому стаді більше на 19,1%, ніж у другому. Відповідно і частота алеля C у корів першого стада становила 0,84, що більше, ніж алеля B на 0,68 одиниці. У корів другого стада частота алелів С і B відповідно 0,71 і 0,29. Частота алеля С у корів першого стада більша на 0,13 одиниці, а B менша на 0,13 одиниці, ніж у другому.

У корів тестованих за типами амілази-2 виявлено два фенотипи: одноалельний BB і двоалельний AB. Частота фенотипів BB у корів першого стада 6 становила 83,9%, у другому 84,7%; відповідно з ізоферментами амілази-2 AB 16,0% і 15,3%. Але, як у першому стаді, так і другому виявлено значну перевагу числа корів-гомозигот BB над гетерозиготами AB (в межах 67,9 - 69,4%). У корів обидвох стад генетична частота алелів B і A становила відповідно 0,92 і 0,08.

Таблиця 1 Частота алелів та фенотипів досліджених поліморфних систем білків і ферментів у сироватці крові піддослідних корів

Очевидно, виявлені відмінності між генетичною частотою алелів і фенотипів вказаних поліморфних макромолекул білків у корів окремих стад зумовлені рівнем селекційно-племінної роботи. Це позначилось на частоті поліморфних систем білків і ферментів сироватки крові та показниках репродуктивної функції корів.

Аналіз одержаних результатів свідчить, що між досліджуваними показниками репродуктивної функції у групах корів, тестованих за вказаними поліморфними системами, існують значні відмінності, за винятком тривалості тільності, яка не виходила за межі фізіологічної норми - 282,0±12 дн. (табл. 2).

Так, перше осіменіння після отелення, сервіс-період, індекс осіменіння менші у корів-гомозигот AA, порівнянно з DD, відповідно на 11,6%, 12,5 і 9,9%, а порівняно з гетерозиготами AD на 4,3%, 9,1 та 10,4%.

Таблиця 2 Показники репродуктивної функції корів у зв'язку з поліморфними системами білків і ферментів сироватки крові

Примітка: F - критерій Фішера, h2- сила впливу, ступінь достовірності * - Р< 0,05.

Запліднюваність після першого осіменіння корів з типом трансферину AA становила 59,4%, що, порівняно з групами DD; AD; AE; DE більше, відповідно, на 7,6%, 10,3, 9,4, 48,3%. Всього запліднених серед гомозигот AA 87,6%, що більше, ніж DD і гетерозигот AD на 5,3 та 4,6%. Народження близнят гомозиготамии AA становило 4,13%, що також більше, ніж у DD і гетерозигот AD на 3,6%, але менше, ніж у DE на 7%.

Виявлена перевага за досліджуваними показниками корів-гомозигот АА над DD та гетерозиготами AD i DE, свідчить про ефективність використання фенотипів трансферинів як генетичних маркерів для оцінки і прогнозування відтворної функції.

Аналіз показників репродуктивної функції свідчить, що час першого осіменіння після отелення, тривалість сервіс-періоду менші у корів з типом постальбуміну AB, ніж з AA і BB на 9,2 і 4,3%, а індекс осіменіння більший на 8,7 і 1,1%, відповідно. Запліднюваність після першого осіменіння вища у корів-гомозигот AA, ніж BB і гетерозигот AB на 3,0% і 11,7%. Різниці за загальною запліднюваністю корів з різними типами постальбумінів не встановлено (83,7 - 84,0%). Виявлена різниця показників репродуктивної функції корів у зв'язку з фенотипами постальбумінів не достовірна. Сила впливу постальбумінового локуса на показники відтворної функції знаходилась в межах 0,2 - 0,7%. Отже, немає підстав стверджувати про вплив фенотипів постальбумінів на репродуктивну функцію корів.

Аналіз результатів досліджень ізоферментів амілази-1 свідчить, що гомозиготи ВВ виділяються найкоротшим періодом від отелення до першого осіменіння (52,17 дн.) і сервіс-періодом (76,57 дн.), найвищою запліднюваністю після першого осіменіння (56,7%). Народження близнят у корів-гомозигот BB - 3,23%, що більше, ніж у CC і BC, відповідно на 2,0% і 1,8%. Гетерозиготи ВС характеризуються найгіршими значеннями наведених показників. Сила впливу ізоферментів амілази-1 на показники репродуктивної функції у корів не перевищує 0,8% (P>0,05). У клінічно здорових корів з типом амілази-1 BB достовірно менша тривалість сервіс-періоду, ніж у гомозигот СС і гетерозигот BC, відповідно, на 8,2 і 16,0 дн. (P < 0,01; 2=0,045). Отже, за репродуктивною функцією найбільш доцільні для господарств корови з ізоферментами амілази-1 гомозиготи ВВ.

У корів з ізоферментами амілази-2, гетерозигот АВ перше осіменіння після отелення, тривалість сервіс-періоду менші на 4,2; 7,7 дн., ніж у гомозигот BB. Вплив ізоферментів амілази-2 на показники відтворної функції не достовірний , а сила впливу неістотна (1,3%).

2. Резистентність корів до акушерської і гінекологічної патології у зв'язку з поліморфізмом білків і ферментів сироватки крові.

Результати досліджень свідчать, що у корів різних генотипів за поліморфними системами білків і ферментів сироватки крові частота акушерської і гінекологічної патології має значні відмінності.

У корів з фенотипом трансферину DE частота акушерської патології становить 33,3% і гінекологічної 66,7% (рис. 1). У гетерозигот з типом трансферину AD частота акушерської патології 24,8%, що порівняно з гомозиготами AA, DD і гетерозиготами DE менше, відповідно, на 2,5; 6,6 і 8,5%. Частота гінекологічної патології у гомозигот AA менша, ніж у DD і гетерозигот AD, AE і DE, відповідно, на 13,5%; 11,0; 6,0 і 47,7%. Частота акушерської і гінекологічної патології (разом) у корів з трансферином AA менша, ніж у тварин з фенотипами DD, AD і DE на 17,6%; 8,5; 53,7%, відповідно, але більша, ніж у AE на 21,3%.

Одержані результати свідчать про перевагу у стійкості до патології корів носіїв алеля А трансферинового локуса. Це підтверджується коефіцієнтами резистентності.

Вплив трансферинів (V- градацій) на коефіцієнти резистентності до акушерської патології (з урахуванням фізіологічних періодів) не достовірний (F = 0,481 - 0,897), а сила впливу неістотна 0,3 - 0,5% (2 = 0,003 - 0,005). Достовірний вплив трансферинового локуса виявлений на коефіцієнти резистентності до гінекологічної патології (F=3,306, P<0,05) з силою впливу 2% (2=0,020). Дисперсним аналізом між окремими групами корів з фенотипами трансферинів (||- градації), виявили, що значення коефіцієнта резистентності до гінекологічної патології у корів-гомозигот AA менше, ніж у DD на 0,13 одиниці (P<0,05; 2=0,023), а порівняно з гетерозиготами AD і DE на 0,11 та 0,48 одиниці (P<0,05 і 0,01; 2=0,01 та 0,084). У корів з типом трансферину AD коефіцієнт резистентності до гінекологічної патології менший на 0,37 одиниці, ніж у DE (P<0,05; 2=0,015). Отже, сила впливу фенотипів трансферинів на вказаний показник істотна і становить 1 - 8,4%.

Частота акушерської і гінекологічної патології (разом) у корів-гомозигот з фенотипом постальбуміну BB становила 51,2%, що менше, ніж у тварин з типами AB i АА на 5,4 і 7,3%; відповідно акушерської патології у них було менше на 3,2 і 8,8%, а гінекологічної - на 2,2%, ніж у гетерозигот AB і більше ніж у гомозигот АА на 1,5%. Вплив фенотипів постальбумінів на коефіцієнти резистентності до акушерської і гінекологічної патології (||| градації) не достовірний (F=0,333-1,261,P>0,05), а сила впливу неістотна і не перевищує 0,4%.

За типом амілази-1 корови-гетерозиготи BC виділяються більшою частотою акушерської і гінекологічної патології, порівняно з гомозиготами СС і ВВ, відповідно, на 8,7 та 10,3% (рис.2). Гомозиготи СС і ВВ характеризуються меншими значеннями частоти акушерської патології порівняно з гетерозиготами ВС на 5,7 і 4,9%, а гінекологічної на 3,0 і 5,4%.

Стійкість до акушерської і гінекологічної патології за значеннями загальних коефіцієнтів резистентності у корів-гомозигот CC і BB становила 1,53±0,03 і 1,52±0,13 одиниці, у гетерозигот BC - 1,61±0,05 од.. Різниця не достовірна (F=1,099, P>0,05), сила впливу незначна 0,3%. Вплив ізоферментів амілази-1 на коефіцієнти резистентності до акушерської патології та гінекологічної був у межах 0,189 - 2,225 (P>0,05), а сила впливу не перевищувала 1,4%.

Аналіз результатів досліджень амілази-2 свідчить, що акушерської і гінекологічної патології у гетерозигот AB менше на 1,5%, ніж у гомозигот BB. Вплив ізоферментів амілази-2 на коефіцієнти резистентності до вказаної патології не достовірний (F=0,0 - 1,858), а сила впливу незначна і знаходиться в межах 0,0 - 1,8%.

3. Поліморфізм білків і ферментів, вміст загального білка і його фракцій в сироватці крові корів до та після отелення.

Вміст загального білка в сироватці крові корів з різними фенотипами трансферинів, за 10 - 15 дн. до отелення і 3 - 7 дн. після нього, був у межах фізіологічної норми і становив 8,02 - 8,51г% (табл.3).

Таблиця 3 Фенотипи трансферинів, вміст загального білка і білкових фракцій в сироватці крові корів до та після отелення

Примітка: ступінь достовірності *- P<0,05; ** - P<0,01

У корів, тестованих за фенотипами трансферинів, фракційний склад білків сироватки крові перед отеленням неоднаковий. Найбільша різниця виявлена за вмістом альбуміну, який у гомозигот АА становив 43,22 ± 2,69%, DD - 37,9 ± 2,01 %, гетерозигот AD - 36,65 ± 1,17%. У гомозигот АА вміст альбуміну в сироватці крові, порівняно з гетерозиготами AD, вірогідно вищий на 6,57% (F=5,652; Р< 0,05; 2= 0,098). Максимальний рівень 2 - глобуліну у гомозигот DD - 4,8 ± 0,43% та гетерозигот AD - 4,15 ± 0,31%, у гомозигот АА -2,93 ± 0,23%, різниця статистично достовірна (Р<0,01), а сила впливу локуса трансферину значна - 8,1%. Вміст фракції -глобуліну найнижчий у гомозигот АА 14,77±1,62% і найвищий у гетерозигот AD 18,89±0,77% - P<0,05; 2=0,092, II- градації, а гомозиготи DD займають проміжне місце - 17,76±0,94%. Вміст 1 -; Hp -; g- глобулінів у корів з різними фенотипами трансферинів до отелення істотно не відрізнявся і знаходився в межах, відповідно, 5,56 - 6,1%; 2,7 - 3,39%; 28,74 - 31,09%; сила впливу фенотипів на дані показники становила 1,4 - 2,9% (Р>0,05). Таким чином, у корів-гомозигот АА, порівняно з DD і гетерозиготами AD до отелення встановлено вищий вміст альбуміну (43,22%), відповідно, на 5,26 і 6,57% та менший глобулінів: 2- (2,93%) і - (14,77%), відповідно, на 1,22; 1,84% і 2,34; 4,12%.

Після отелення, у корів з фенотипами трансферинів зберігалась та ж тенденція вмісту загального білка, альбуміу, 1-, 2-, -, Нр - глобулінів, як і до отелення. У гомозигот АА концентрація альбуміну 42,12±2,57%, достовірно вища, ніж у DD - 35,09±0,77% і гетерозигот AD - 35,15±1,07% (F=5,036; P<0,01; 2=0,117). Рівень g-глобуліну в післяродовий період у гомозигот АА становив 29,81±1,0%, у DD - 33,04±0,79% різниця достовірна - F=6,063; P<0,05, сила впливу значна (15,1%).

Вміст g-глобуліну в сироватці крові корів після отелення, порівняно з періодом до отелення, зростає, але з різною інтенсивністю. У гомозигот АА він підвищується на 1,07%, у DD на 3,33% і гетерозигот AD на 2,15% - Р>0,05.

У клінічно здорових корів з фенотипом трансферину АА вміст альбуміну в сироватці крові до та після отелення достовірно вищий (45,42±3,56 і 44,58±4,13%), ніж у гомозигот DD та гетерозигот AD (33,77 - 35,85 ± 1,65%).

У корів з різними фенотипами трансферинів виявили акушерську і гінекологічну патологію у 48,2%. Частота її у гомозигот АА становила 40%, DD - 55,6% і гетерозигот AD - 45,50%. З акушерської патології найчастіше були: під час отелення - затримання посліду; після отелення - післяродові ендометрити, а з гінекологічної - гострі та хронічні ендометрити.

До отелення у клінічно здорових гомозигот АА вміст альбуміну становив 45,42%, у схильних до патології - 39,93%. Рівень - i Hp-глобулінів у схильних до захворювань, відповідно, 17,75 і 5,03%, у клінічно здорових - 12,78 і 2,4%, різниця статистично не достовірна (P>0,05). Отже, названі показники не мають значення для прогнозування акушерської і гінекологічної патології у корів.

Вміст загального білка в сироватці крові корів-гомозигот за типом трансферину АА, з акушерською і гінекологічною патологією після отелення, 7,55 г%, а клінічно здорових - 8,48 г%. У гомозигот DD клінічно здорових вміст Нр-глобулінів 3,01%, схильних до патології - 1,94% (P<0,05). У гетерозигот AD схильних і резистентних до патології не виявлено достовірної різниці вмісту загального білка і його фракцій в сироватці крові. Отже, на виникнення патологічних процесів в організмі корів вказує зниження вмісту загального білка і Нр-глобуліну.

До отелення у схильних до захворювань гомозигот АА і DD (однофакторним дисперсним аналізом II- градації) встановлено вірогідну різницю за вмістом Нр-глобуліну; число його в сироватці крові, відповідно 5,03±1,66% і 2,46±0,29% (F=6,246, P<0,05, 2=0,294). У гетерозигот AD вміст Нр-глобуліну - 3,44±0,46%, нижчий на 1,59%, ніж у гомозигот АА і більший - DD на 0,98% (P>0,05). Після отелення, порівняно з передродовим періодом, у корів-гомозигот АА і DD та гетерозигот AD спостерігали різної інтенсивності зменшення вмісту Нр-глобуліну. А саме, у гомозигот АА з 5,03% до 2,38% (на 2,65%); у DD з 2,46 до 1,94% (на 0,52%) і у гетерозигот AD з 3,44 до 1,92% (на 1,52%); рівень -глобуліну зростав у гомозигот АА, DD і гетерозигот AD, відповідно, на 4,18%, 5,44 і 2,82%. Наведені результати свідчать про напруженість функції імунної системи організму хворих корів. Але достовірного впливу фенотипів трансферинів (III градації) на показники білкового спектру сироватки крові у корів схильних до акушерської і гінекологічної патології до та після отелення не встановлено - F=0,134-3,072; а сила впливу не перевищувала 0,8-16,5%.

У корів тестованих за локусами постальбуміну, амілази-1 і -2 (схильних до захворювань і клінічно здорових) встановлені відмінності білкового спектру сироватки крові, до отелення і після нього, аналогічні. Сила впливу локусів на вказані показники знаходилась в межах 0,0-36,1%.

ВИСНОВКИ

1. У корів чорно-рябої породи (західний внутрішньопородний тип) існує зв'язок між показниками відтворної функції, резистентності до акушерської і гінекологічної патології з вмістом у сироватці крові загального білка, його фракцій, поліморфізмом білків і ферментів.

2. У корів з фенотипом трансферину АА показники сервіс-періоду, індексу осіменіння менші, відповідно на 33,3 і 37,6%, а запліднюваність після першого осіменіння вища на 7,6-48,3%, порівняно з тваринами фенотипів DD, АD, АЕ, DЕ.У клінічно здорових корів з ізоферментами амілази-1, гомозигот ВВ тривалість сервіс-періоду менша на 8,2 і 16,0 дн., порівняно з гомозиготами СС і гетерозиготами ВС.

3. Сила впливу локусів трансферину, постальбуміну, ізоферментів амілази-1 і -2 на досліджувані показники становить 2,1-10,6%, що свідчить про ефективність їх використання для оцінки і прогнозування репродуктивної функції корів.

4. Корови з фенотипом трансферину АА, постальбуміну ВВ, ізоферментів амілази-1 ВВ і СС, амілази-2 АВ, виділяються вищою резистентністю до акушерської і гінекологічної патології на 1,5-53,7%, порівняно з іншими гомо- і гетерозиготами тих же локусів.

5. Виявлена достовірна перевага корів-носіїв алеля А трансферинового локуса у стійкості до акушерської і гінекологічної патології за коефіцієнтами резистентності. Сила впливу досліджених локусів на показники резистентності корів до вказаної патології становить: трансферину 1,0-8,4%, постальбуміну, амілази-1 і -2 0,0 - 4,4%.

6. Вміст загального білка в сироватці крові корів, тестованих за локусами трансферину, постальбуміну, ізоферментів амілази-1 і -2, перед отеленням і після нього у межах фізіологічної норми (7,0-9,4 г%).

7. Перед отеленням у корів, стійких і схильних до акушерської і гінекологічної патології, , не встановлено в сироватці крові відмінностей у вмісті загального білка і його фракцій, що не дає підстав використовувати їх з прогностичною метою. Захворювання корів після отелення супроводжується зниженням вмісту загального білка і Hp-глобулінів, та підвищенням g-глобулінів у сироватці крові.

8. Резистентним до акушерської і гінекологічної патології тваринам з дослідженими поліморфними системами білків і ферментів сироватки крові до та після отелення властиві вищі значення вмісту фракцій альбуміну та зниження глобулінів. У резистентних корів з фенотипом трансферину АА вміст у сироватці крові альбуміну вищий на 5,26 - 11,05%, а глобулінів a2 і b менше на 1,22 - 4,12%, порівняно з гомозиготами DD і гетерозиготами АD. Сила впливу локуса трансферину значна і становить 5,6 - 22,5%.

9. Корекція генетичної частоти поліморфних систем білків (ферментів) сироватки крові у корів чорно-рябої худоби (західний внутрішньопородний тип) відбором для ремонту стада телиць і збереження корів з фенотипом постальбуміну ВВ і АА, ізоферментами амілази-1 ВВ і СС, амілази-2 АВ і носіїв алеля А трансферинового локуса - гомозигот АА і гетерозигот АЕ і АD забезпечить високу репродуктивну функцію, резистентність до акушерської і гінекологічної патології поголів'я.

ПРОПОЗИЦІЇ ВИРОБНИЦТВУ

1. Для забезпечення інтенсивного відтворення поголів'я чорно-рябої породи (західний внутрішньопородний тип), високої резистентності корів до акушерської і гінекологічної потології, у колективних, фермерський та індивідуальних господарствах, необхідно відбирати ремонтних телиць і корів - носіїв алеля А трансферинового локуса (гомозигот АА, гетерозигот АЕ і АD) та за фенотипами постальбуміну (ВВ), ізоферментів амілази-1 (ВВ і СС), амілази-2 (АВ).

2. Для відбору тварин з високою репродуктивною функцією, резистентністю до патології у племінних і великих товарних стадах використовувати розроблену програму для ІВМ - сумісних персональних комп'ютерів, яка забезпечить своєчасний аналіз і оцінку зв'язків відтворення поголів'я з фізіологічними ознаками і генотипом тварин.

3. Результати досліджень доцільно внести до програми підвищення кваліфікації лікарів ветеринарної медицини, зооінженерів, а також для підготовки студентів біологічних факультетів відповідних вищих навчальних закладів.

СПИСОК ОСНОВНИХ ПРАЦЬ, ОПУБЛІКОВАНИХ ЗА ТЕМОЮ ДИСЕРТАЦІЇ

1. Каплінський В.В. Репродуктивна функція корів у зв'язку з кодомінантними поліморфними системами білків крові // Збірник статей міжнародної науково-практичної конференції “Сучасні проблеми біології, ветеринарної медицини, зооінженерії та технологій продуктів тваринництва” -Львів. 1997. -С.500-501.

2. Каплінський В.В. Резистентність до акушерської і гінекологічної патології у корів // Вісник Білоцерківського державного аграрного університету. Біла-Церква, 1998. Вип.5, част. 2, -С.20-24.

3. Каплінський В.В. Вплив вмісту загального білка, білкових фракцій сироватки крові та різних фенотипів трансферинів на розвиток акушерських і гінекологічних хвороб у корів // Вісник Білоцерківського державного аграрного університету. Біла-Церква, 1998. Вип.5, част. 2, -С.25-28.

4. Каплінський В.В. Білковий спектр сироватки крові корів у зв'язку з акушерською і гінекологічною патологією: // Сільський господар. -1999, №7-8, -С.45-47.

5. Каплінський В.В. Поліморфізм білків і ферментів сироватки крові та репродуктивна функція корів // Науковий вісник Львівської державної академії ветеринарної медицини ім. С. З. Гжицького. Львів, 1999. Вип. 4, -С.76-81.

6. Каплінський В.В., Морозов В.Ф. Фенотипи трансферинів і відтворна функція корів // Тези доповідей науково-практичної конференції “Генетично-селекційні та технологічні проблеми відтворення сільськогосподарських тварин” - Київ.-1994. - С.50.

7. Каплінський В.В., Морозов В.Ф. Білкові фракції сироватки крові у корів з різними типами трансферинів // Тези доповідей Всеукраїнської конференції фізіології і біохімії тварин. - Львів.-1994. -С.69-70.

8. Чухрий Б.Н., Каплинский В.В. Прогнозирование акушерской и гинекологической патологии у коров // Материалы научно-методической конференции “Научные аспекты профилактики и терапии болезней сельскохозяйственных животных” - Воронеж, ч.I. 1996. -С.130-131.

9. Чухрий Б.Н., Каплинский В.В., Морозов В.Ф. Неспецифическая резистентность и интенсивность течения послеродового периода у коров // Материалы международной научно-практической конференции “Ветеринарные и зооинжинерные проблемы ведения животноводства” -Витебск. -1996. -С.77.

10. Чухрій Б.М., Каплінський В.В., Морозов В.Ф. Поліморфні системи білків сироватки крові, казеїнів молока та резистентність до акушерської і гінекологічної патології у корів // Тези доповідей III міжнародної конференції “Молекулярно-генетичні маркери тварин” - Київ. -1999. -С.63-64.

Размещено на Allbest.ru