Разработка средств и способов терапии и профилактики респираторных болезней телят

Все испытанные препараты оказали стимулирующее влияние на продукцию антител. Иммунный статус телят характеризовался более высоким уровнем антител к вирусу парагриппа_3 и инфекционного ринотрахеита по сравнению с животными контрольной группы. Наиболее выраженное действие выявлено при одновременном применении вакцины «Бивак» и зоолана. Применение иммуномодулирующих средств способствовало значительному повышению показателей естественной резистентности организма. Так, лизоцимная активность сыворотки крови у телят опытных групп через 21 день после вакцинации находились в пределах 4,4 ± 0,4 - 6,4 ± 0,1%, или на 22,2-154,2% больше по сравнению с контролем. Показатели бетализинной активности у опытных групп животных были на 14,7-55,7% выше по сравнению с животными контрольной группы.

Аналогичная динамика отмечена и по функциональной активности нейтрофилов. Увеличение спонтанного НСТ-теста у телят опытных групп по сравнению с контролем составило 66,5-138,2%, индуцированного - 60,6-121,1%. Наиболее существенное увеличение данных показателей отмечено при применении зоолана.

Усиление противовирусного иммунитета у телят способствовало снижению уровня их заболеваемости на 7,1-10,7% респираторными болезнями и повышению их сохранности.

Таким образом, исследования показали, что применение живой лиофилизированной вакцины «Бивак» против парагриппа_3 и инфекционного ринотрахеита крупного рогатого скота одновременно с иммуномодулирующими средствами способствовало повышению профилактической эффективности вирусных респираторных болезней телят в 93,7-97,3% случаев по сравнению с 86,6% в контроле. Сохранность телят в опытных группах животных была относительно высокой и составила 99,0-99,6%. Полученные результаты исследований позволяют заключить, что эффективность специфической профилактики вирусных респираторных болезней телят может быть значительно повышена за счет вакцины в комплексе с иммуномодулирующими средствами. Из испытанных препаратов наиболее предпочтительным и доступным для широкого практического применения является зоолан.

Влияние зоолана и гликопина на иммунный ответ при вакцинации телят против инфекционного ринотрахеита, парагриппа_3 и вирусной диареи - болезни слизистых крупного рогатого скота

Влияние зоолана и гликопина на эффективность иммунизации животных вакциной «Тривак» определяли в условиях хозяйства, неблагополучного по вирусным респираторным болезням телят, с подтвержденной циркуляцией вирусов инфекционного ринотрахеита (68,4%), вирусной диареи - болезни слизистых (84,7%) и парагриппа_3 (72,4%). В экспериментах использовано 146 клинически здоровых телят 30-45_дневного возраста. С этой целью были сформированы три группы телят: две опытные (46 и 50 голов) и одна контрольная (50 голов).

В качестве средств специфической профилактики животным опытных и контрольной групп применяли живую лиофилизированную вакцину «Тривак» в соответствии с наставлением. Животным первой опытной группы дополнительно применяли зоолан внутримышечно в форме 0,3% раствора в дозе 2 мл на голову трехкратно: первый раз - за 12-18 часов до применения вакцины, а затем с интервалом 24 часа. Через 21 день после первой вакцинации проводили ревакцинацию животных с применением зоолана в тех же режимах. Животным второй опытной группы в качестве иммуномодулирующего средства применяли гликопин в том же режиме, что и зоолан, в форме 0,2% раствора в дозе 2 мл.

Взятие крови у животных для исследований проводили выборочно перед вакцинацией, через 20 дней (перед ревакцинацией) и спустя 20 дней после ревакцинации по 20 проб от каждой группы.

Установлено, что сочетанное применение зоолана или гликопина с вакциной «Тривак» способствовало более интенсивному повышению показателей иммунологической реактивности телят опытных групп по сравнению с контролем - при применении одной вакцины.

При этом повышение показателей Т-лимфоцитов телят первой и второй опытных групп по сравнению с контрольной составило соответственно 68 и 75%, В-лимфоцитов - 125 и 75%, функциональной активности нейтрофилов в спонтанном НСТ-тесте - 55 и 52%, в индуцированном тесте - 32 и 19%, JgG - 48 и 43%, JgM - 60 и 53%, лизоцимной активности - 90 и 103%, бактерицидной активности сыворотки крови - 30 и 28%, среднего геометрического титра антител к вирусу ИРТ - 69 и 50%, ВД-БС - 100 и 89% и ПГ_3 - 79 и 274%.

Сочетанное применение иммуномодулирующих средств в комплексе с вакциной «Тривак» способствовало повышению профилактической эффективности при вирусных респираторных болезнях телят. Профилактическая эффективность сочетанного применения вакцины «Тривак» с зооланом составила 97,8%, с гликопином - 100,0% по сравнению с 84% в контроле. Сохранность телят в опытных группах была на 8,0% выше в сравнении с контролем.

Полученные результаты исследований позволяют заключить, что применение зоолана или гликопина способствует повышению противовирусного поствакцинального иммунитета у телят и профилактической эффективности на 13,8-16,0%, что дает основание рекомендовать их в качестве средств, повышающих эффективность специфической профилактики при вирусных респираторных болезнях телят и их сохранность.

Влияние гликопина на эффективность антителообразования при вакцинации коров-матерей против инфекционного ринотрахеита, парагриппа_3 и вирусной диареи - болезни слизистых крупного рогатого скота, иммунобиологические показатели и напряженность колострального иммунитета у телят

С целью изучения эффективности сочетанного применения эмульсионной инактивированной вакцины против вируса парагриппа_3 (ПГ_3), инфекционного ринотрахеита (ИРТ) и вирусной диареи - болезни слизистых крупного рогатого скота с иммуномодулятором гликопином в стационарно неблагополучном по респираторным болезням хозяйстве были сформированы две группы коров: опытная (280 голов) и контрольная (226 голов), которых иммунизировали эмульсионной инактивированной вакциной против вирусов ПГ_3, ИРТ и ВД-БС внутримышечно в дозе 2 мл двукратно с интервалом 21-30 дней за 1-1,5 месяца до осеменения с последующей ревакцинацией через 6 месяцев. Дополнительно животным опытной группы за 18-24 часа до первой вакцинации, а впоследствии двукратно после иммунизации с интервалом 24 часа внутримышечно применяли иммуномодулятор гликопин в виде 0,2% раствора в дозе 4 мл. При второй вакцинации и ревакцинации животных введение гликопина осуществляли в тех же режимах.

Взятие крови у животных обеих групп (по 10 голов из каждой группы) для исследований проводили до вакцинации (фоновое исследование) и через 30 дней после второй вакцинации. Молозиво для исследований и повторное взятие крови у животных осуществляли сразу после отела. У полученного потомства исследование крови проводили в динамике до приема молозива и в возрасте 2 и 5 дней.

С целью изучения влияния вакцинации коров-матерей на иммунобиологические показатели и сохранность потомства были сформированы две группы телят, полученных от вакцинированных коров: опытная (180 гол.) - телята, полученные от вакцинированных коров с применением гликопина, и контрольная (165 гол.) - телята, полученные от вакцинированных коров без применения гликопина.

Установлено, что сочетанное применение вакцины с гликопином способствует более выраженному иммунному ответу у коров. Так, при исследовании через 30 дней после второй вакцинации выявлено, что у животных опытной группы титры антител в сыворотке крови к вирусам ПГ_3, ИРТ и ВД-БС повысились на 215, 288, 185% соответственно против 123, 195, 152% в контроле. При исследовании сыворотки сразу после отела было установлено, что у опытных коров титры антител к данным вирусам превышали таковые контрольных: титры антител к вирусам ПГ_3, ИРТ и ВД-БС повысились на 53, 165 и 112% соответственно против 34, 123 и 100% в контроле. Следует отметить, что в молозиве опытной группы коров уровень титров антител к ПГ_3, ИРТ и ВД-БС был выше аналога на 24, 46, и 28% соответственно.

Результаты исследования колострального иммунитета у телят, полученных от иммунизированных коров-матерей, показали, что у телят обеих групп до выпойки молозива антитела к вирусам ПГ_3, ИРТ и ВД-БС отсутствовали. Через 2 дня после приема молозива титры антител к данным вирусам в сыворотке крови телят опытной группы были на 23, 40 и 28%, а через 5 дней - на 24, 36 и 32% соответственно выше в сравнении с контролем. При исследовании иммунного статуса телят, полученных от иммунизированных коров-матерей, установлено, что у телят опытной группы иммунологические показатели были значительно выше в сравнении с контрольной группой.

Так, у телят опытной группы в 20-30_дневном возрасте относительное и абсолютное содержание Т- и В-лимфоцитов было выше на 25, 29% и 50, 58% соответственно в сравнении с этими показателями в контрольной группе. Показатели функциональной активности нейтрофилов крови у телят опытной группы в индуцированном тесте были выше на 28%, в спонтанном тесте не отмечено достоверной разницы данного показателя. Уровень иммуноглобулинов G и М у телят опытной группы был выше на 43 и 33% соответственно в сравнении с контролем. Лизоцимная и бактерицидная активность сыворотки крови у телят опытной группы была выше на 75 и 8% соответственно, чем у животных контрольной группы. Следует отметить, что к 20-30_дневному возрасту наблюдалось характерное снижение уровня вируснейтрализующих антител у животных обеих групп. Однако в опытной группе телят титры антител к вирусам ИРТ и ВД-БС были выше на 34 и 53% в сравнении с контролем, достоверной разницы к вирусу ПГ_3 между опытной и контрольной группами не установлено.

Исследования показали, что заболеваемость телят опытной группы была на 15,8% ниже по сравнению с контролем. Применение данного способа позволило увеличить прирост живой массы и сохранность опытной группы телят.

Таким образом, сочетанное применение вакцины с гликопином способствует повышению иммуногенной активности вакцины, созданию более напряженного колострального иммунитета у новорожденных телят, полученных от коров-матерей опытной группы, повышению иммунобиологических показателей, что обеспечивает высокую профилактическую эффективность и сохранность животных при массовых респираторных болезнях.

Разработка новых средств и способов лечебно-профилактической защиты телят при респираторных болезнях с применением различных антибактериальных, иммуномодулирующих и биологических средств и их сравнительная оценка

Профилактическая и терапевтическая эффективность сочетанного применения антибактериального препарата сульфатетрина_М, иммуномодулирующего средства зоолана и гипериммунной сыворотки крови

Эффективность способов лечения определяли в условиях хозяйств Нижегородской области, являющихся стационарно неблагополучными по парагриппу_3 (ПГ_3), инфекционному ринотрахеиту (ИРТ) и вирусной диареи - болезни слизистых (ВД-БС), где не проводилась специфическая профилактика данных болезней. Результаты серологических исследований, проведенные перед опытами, свидетельствовали о циркуляции вирусов ПГ_3, ИРТ и ВД-БС. Количество серопозитивных животных по отношению к вирусу парагриппа_3 составило 38,4%, ИРТ - 66,4% и ВД-БС - 60,8%. Из проб биоматериала от больных телят были выделены вирусы: ИРТ (28,6%), парагрипп_3 (18,9%) и ВД-БС (24,4%), а также бактерии Streptococcus pneumoniae (10,6%), Salmonella spp. (18,9%), Salmonella dublin (34,4%), Pasteurelle multocida (8,2%). Заболеваемость животных составляла 68-85%, летальность достигала 18-25%.

Учитывая роль бактериальной микрофлоры в этиологической структуре респираторных болезней телят, нами был сконструирован новый комплексный препарат - сульфатетрин_М, содержащий в качестве активнодействующих веществ окситетрациклина гидрохлорид, сульфадимезин, рибофлавин, аскорбиновую кислоту, тиамина бромид и в качестве наполнителя белотин. Препарат применяли в соответствии с наставлением по его применению, утвержденным МСХ и продовольствия РФ от 14 января 2000 г. Он оказывает бактериостатическое действие на стафилококки, стрептококки, клостридии, эшерихии, сальмонеллы, пастереллы, рикетсии.

Испытание способов лечения проводили на трех группах телят в возрасте 45-60 дней в количестве 105 голов. Группы формировали по принципу аналогов: две группы - опытные, одна - контрольная, по 35 голов в каждой.

Больных телят первой опытной группы лечили с применением гипериммунной сыворотки крови (ГИС), содержащей антигемагглютинины к инфекционному ринотрахеиту не ниже 1:256, вирусной диарее - болезни слизистых - 1:500 и к вирусу парагриппа_3 в титре 1:1280 в дозе 2 мл/кг массы животного с интервалом 48 часов до выздоровления и дополнительно зоолан в виде 0,3% водного раствора внутримышечно в дозе 2,0 мл 2 раза в сутки до полного клинического выздоровления. Телятам второй опытной группы дополнительно применяли сульфатетрин_М в дозе 0,7 г/кг массы животного 2 раза в сутки до полного клинического выздоровления. Телятам контрольной группы животных применяли гипериммунную сыворотку.

С целью изучения профилактической эффективности гипериммунной сыворотки и сульфатетрина_М в комплексе с зооланом в условиях неблагополучного по вирусным респираторным болезням хозяйства были сформированы три группы телят в возрасте 20-30 дней: две группы - опытные (14 и 22 гол.), одна - контрольная (18 гол.). Всем группам животных применяли подкожно гипериммунную сыворотку, что и при лечении больных телят в дозе 1 мл/кг массы животного трехкратно с интервалом 10 дней. Животным первой опытной группы дополнительно применяли зоолан в виде 0,3% водного раствора внутримышечно в дозе 2 мл; животным второй опытной группы также применяли зоолан по той же схеме, что и животным первой опытной группы, и дополнительно внутрь сульфатетрин_М в дозе 0,5 г/кг массы животного 2 раза в день в течение 7 дней.

Анализ результатов исследований показал, что наиболее выраженное действие на показатели клеточного, гуморального иммунитета и резистентности организма оказывало комплексное применение зоолана, гипериммунной сыворотки и сульфатетрина_М.

Особенно выраженное влияние применяемые способы лечения оказали на показатели В-лимфоцитов, функциональной активности нейтрофилов (индуцированный тест) и лизоцимную активность сыворотки крови. Так, содержание В-лимфоцитов у телят опытных групп увеличилось на 106,2-163,3% по сравнению с исходными показателями, или на 34,2-91,3% больше по сравнению с контролем; функциональная активность нейтрофилов соответственно по индуцированному тесту - на 122,4-172,3%, или на 46,4-96,3% больше по сравнению с контролем; лизоцимная активность - на 119,1-136,3%, или на 71,6-88,9% больше по сравнению с животными контрольной группы.

Увеличение относительного содержания Т-лимфоцитов у телят опытных групп было незначительным и по сравнению с животными контрольной группы оно составило 10,6-19,7%. Аналогичные изменения отмечены и в содержании общего белка, иммуноглобулинов G и лизоцимной активности сыворотки крови. Данные показатели у телят опытных групп по сравнению с контролем увеличились соответственно на 11,5-12,9%; 5,1-15,8%; 71,6-89,0%.

Анализ результатов терапевтической эффективности разработанных способов лечения показал, что наиболее высокий терапевтический эффект (97,1%) отмечен при комплексном применении гипериммунной сыворотки, сульфатетрина_М и зоолана. Сохранность животных у опытных групп была на 8,6-11,4% выше по сравнению с животными контрольной группы.

Применение разработанных способов лечения способствовало сокращению сроков лечения и рецидивов. Среднесуточный прирост массы у животных первой опытной группы был на 47,0 г, второй - на 89,0 г больше по сравнению с животными контрольной группы.

Исследования по изучению профилактической эффективности показали, что наиболее выраженной профилактической эффективностью являлся способ, включающий одновременное применение гипериммунной сыворотки, сульфатетрина_М и зоолана, который в 95,5% случаев предотвращал возникновение респираторных болезней телят. Относительно высокой эффективностью обладал и способ профилактики с применением гипериммунной сыворотки и зоолана (85,8%), что позволяет рекомендовать их для широкого применения в ветеринарной практике.

Полученные результаты исследований позволяют заключить, что применение разработанного способа лечения и профилактики респираторных болезней телят вирусно-бактериальной этиологии, включающего использование иммуномодулирующих (зоолан), антибактериальных (сульфатетрин_М) и биологических (гипериммунная сыворотка крови) средств, в условиях эксперимента показало его относительно высокую лечебно-профилактическую эффективность (97,1 и 95,5% соответственно). Эффективность комплексного применения указанных средств была обусловлена не только этиотропным действием, но и стимулирующим влиянием на механизмы иммунологической защиты животных.

Терапевтическая эффективность комплексного антибактериального препарата биозина_М, иммуномодулирующего средства кватерина и гипериммунной сыворотки крови

В опытах использовали кватерин_3 (2,2,2 триметилгидразиний) - пропионат, синтезированный в Институте органического синтеза Латвийской Академии наук; комплексный антибактериальный препарат - биозин_М, сконструированный нами в ходе выполнения работы, содержащий в качестве активнодействующих веществ норсульфазол, аскорбиновую кислоту и биовит_80, а также гипериммунную сыворотку, которую получали от специально иммунизированных взрослых животных живой массой не менее 300 кг, свободных от заразных и кровепаразитарных заболеваний, и готовили по методу Н.И. Горбань (1981).

Донорами и реципиентами служили животные одного и того же неблагополучного хозяйства, где в дальнейшем и применяли сыворотку.

Испытание способов лечения проводили на трех группах телят в возрасте 45-60 дней в количестве 36 голов. Группы формировали по принципу аналогов: две группы - опытные, одна - контрольная, по 12 голов в каждой.

Больных телят первой опытной группы лечили с применением гипериммунной сыворотки крови (ГИС), содержащей антигемагглютинины к инфекционному ринотрахеиту не ниже 1:256, вирусной диарее - болезни слизистых - 1:500 и к вирусу парагриппа_3 в титре 1:1280, в дозе 2 мл/кг массы животного с интервалом 48 часов до выздоровления и дополнительно вводили кватерин в виде 40% водного раствора внутримышечно в дозе 4,0 мл 2 раза в сутки до полного клинического выздоровления. Телятам второй опытной группы дополнительно применяли внутрь антибактериальный препарат биозин_М в дозе 0,2 г/кг массы животного 2 раза в сутки до полного клинического выздоровления. Телятам контрольной группы животных применяли только гипериммунную сыворотку (ГИС).

Установлено, что у всех групп больных животных до начала опыта отмечено пониженное содержание В-лимфоцитов, общего белка и иммуноглобулинов G и М классов. Ниже физиологического уровня для данной возрастной группы животных были и показатели естественной резистентности организма, о чем свидетельствовали данные бактерицидной, лизоцимной и бетализинной активности сыворотки крови. Отмечено угнетение функциональной активности нейтрофилов.

Наиболее выраженное действие на показатели клеточного, гуморального иммунитета и резистентности организма оказывало комплексное применение кватерина, гипериммунной сыворотки и биозина_М.

Так, содержание В-лимфоцитов у телят опытных групп увеличилось на 113,3-166,6% по сравнению с исходными показателями, или на 41,1-94,4% больше по сравнению с контролем; функциональная активность нейтрофилов соответственно по индуцированному тесту - на 127,6-170,2%, или на 51,5-94,1% больше по сравнению с контролем; лизоцимная активность - на 125,0-147,6%, или на 77,6-100,2% больше по сравнению с животными контрольной группы. Увеличение относительного содержания Т-лимфоцитов у телят опытных групп было незначительным и по сравнению с животными контрольной группы оно составило 19,5-31,4%. Аналогичные изменения отмечены и в содержании общего белка и иммуноглобулинов G. Данные показатели у телят опытных групп по сравнению с контролем увеличились соответственно на 12,3-17,6 и 5,2-16,7%.

Анализ результатов терапевтической эффективности разработанных способов лечения показал, что наиболее высокий терапевтический эффект (91,7%) отмечен при комплексном применении гипериммунной сыворотки, биозина_М и кватерина.

Сохранность животных у опытных групп была на 8,3% выше по сравнению с животными контрольной группы. Применение разработанных способов лечения способствовало сокращению сроков лечения и рецидивов. Среднесуточный прирост массы у животных первой опытной группы был на 61,5 г, второй - на 66,0 г больше по сравнению с животными контрольной группы.

Применение разработанного способа лечения респираторных болезней телят вирусно-бактериальной этиологии, включающего использование иммуномодулирующих (кватерин), антибактериальных (биозин_М) и биологических (гипериммунная сыворотка крови) средств, в условиях эксперимента показало его относительно высокую терапевтическую эффективность (91,7%). Эффективность комплексного применения указанных средств была обусловлена не только этиотропным действием, но и стимулирующим влиянием на механизмы иммунологической защиты животных.

Разработка новых, экологически чистых средств растительного происхождения, обладающих иммуномодулирующей и лечебно-профилактической активностью при респираторных болезнях телят

Подбор лекарственных растений и способ получения растительных препаратов

Для изготовления новых растительных препаратов были подобраны различные лекарственные травы, которые, по данным литературы, известны в народной медицине как средства, обладающие антибактериальным, противовирусным, иммуностимулирующим и лечебно-профилактическим действием при болезнях, связанных с нарушениями функции иммунной системы, желудочно-кишечных заболеваниях, болезнях органов дыхания.

Для решения поставленной задачи были отобраны следующие лекарственные растения: эхинацея пурпурная, чабрец, листья мать-и-мачехи, корни солодки, цветы липы мелколистной, почки сосны, корневища и корни девясила.

Эхинацея пурпурная (Ehinacea purpurea L.) - многолетник, произрастает в прериях Среднего Запада Северной Америки. Культивируется на Украине и Кавказе. Химический состав: полисахариды, флавоноиды, соединение эхинакозид, смолы и жирные кислоты. Эхинацея является стимулятором иммунной системы и обладает бактерицидными и антивирусными свойствами.

Мать-и-мачеха (Tussilago farfara) встречается повсеместно. Собирают листья в первую половину лета. Химический состав: слизь, при гидролизе которой образуются глюкоза, галактоза, урановые кислоты, горькие гликозиды, эфирное масло, сапонины, фитостерин, каротиноиды, яблочная и винная кислоты и др. В народной и научной медицине мать-и-мачеху применяют как отхаркивающее, мягчительное, противовоспалительное, дезинфицирующее и потогонное средство.

Чабрец (тимьян ползучий - Thymus serpyllum L.) естественно растет в лесной зоне. Собирают надземные части растений в период цветения. Химический состав: эфирное масло, дубильные вещества, горечи, флавоноиды, урсоловая и олеаноловая кислоты. В народной и научной медицине чабрец применяют как отхаркивающее, антисептическое, противосудорожное и болеутоляющее средство.

Солодка голая (Glycyrrhiza glabra L.) - многолетнее травянистое растение, произрастает на Северном Кавказе, в Средней Азии, на юго-востоке европейской части РФ. Лекарственное сырье - корни. Его заготавливают осенью или ранней весной как в неочищенном виде, так и очищенном от наружной оболочки. Химический состав: сапонин, глицирризин, флавоноиды, глюкоза, сахароза, крахмал, слизи, камеди, органические кислоты, витамин С, дубильные вещества, липиды. Применяется как отхаркивающее, обволакивающее средство при воспалительных явлениях в желудочно-кишечном тракте, заболеваниях органов дыхания, а также как бактерицидное средство.

Цветки липы мелколистной (Flores Tiliae) встречаются повсеместно. Лекарственное сырье - цветки, собранные в середине цветения вместе с пленчатыми прилистниками. Химический состав: эфирное масло, гликозиды, сапонины, каротин, аскорбиновая кислота, фитонциды, слизь, дубильные вещества. Применяется в качестве потогонного, антимикробного, диуретического, противокашлевого (отхаркивающего), общестимулирующего средства.

Почки сосны (Gemmue Pini) собирают ранней весной в период набухания, до расхождения чешуек на верхушках почек. Химический состав: живица, эфирное масло, каротин, витамины, горькие, дубильные, минеральные вещества, антоциановые соединения. В народной и научной медицине почки сосны применяют как отхаркивающее, потогонное, мочегонное и дезинфицирующее средство.

Девясил высокий (Inula heleium L.) - многолетнее дикорастущее травянистое растение, произрастает по берегам рек, на влажных лугах, среди кустарников на Кавказе, Алтае, в Средней Азии, на юго-востоке европейской части РФ. Лекарственное сырье - корневища и корни (Rhizomata et radices inulae). Химический состав: эфирные масла, инулин, сапонины и другие полисахариды. Применяют как отхаркивающее, противовоспалительное и дезинфицирующее средство при заболеваниях верхних дыхательных путей.

Из измельченных лекарственных трав в соответствии с требованиями
Государственной Фармакопеи готовили настойку на 70% спирте в соотношении сырья и извлекателя 1:5. Измельченное растительное сырье помещали в стеклянный сосуд, заливали спиртом, закрывали и выдерживали в темном месте при комнатной температуре (15-20єС) в течение 7 дней, затем настойку сливали, отжимали лекарственное сырье, фильтровали и выливали в темную бутылку. Перед применением препараты разводили кипяченой водой, охлажденной до 37єС до получения 7% раствора.

Из указанных трав были приготовлены следующие препараты: фитасол, фитастим и фитадез. Фитасол - из смеси равных количеств травы и соцветий эхинацеи пурпурной, листьев мать-и-мачехи, цветков липы мелколистной и корней солодки; фитастим - из смеси равных количеств трав и соцветий эхинацеи пурпурной, чабреца, листьев мать-и-мачехи и корней солодки; фитадез - из смеси почек сосны, травы и соцветий эхинацеи пурпурной, корневища и корней девясила.

Данные препараты были испытаны в качестве средств для коррекции вторичных иммунодефицитов у телят, профилактики болезней телят, а также с целью повышения традиционных способов лечения респираторных болезней телят. Были отработаны дозы, кратность и продолжительность их применения по вышеуказанному назначению. В диссертации приводятся режимы их применения, позволяющие получить наибольшую эффективность.

Иммуномодулирующая активность и профилактическая эффективность фитастима, фитасола, фитадеза

Исследования по иммуномодулирующей активности и профилактической эффективности препаратов проведены в условиях неблагополучных по респираторной патологии телят хозяйствах Нижегородской области на 560 клинически здоровых животных 20-30_дневного возраста. Влияние препаратов на иммунологические показатели организма определяли на четырех группах телят: три - опытные, одна - контрольная. Животным первой опытной группы (112 голов) внутрь за 20-30 минут до кормления применяли 7% раствор фитастима в дозе 2,0 мл/кг живой массы один раз в сутки в течение 15 дней, животным второй (120 голов) и третьей (118 голов) групп аналогично фитастиму применяли соответственно фитасол и фитадез. Телятам контрольной группы (110 голов) аналогично фитастиму применяли 7% раствор настойки мать-и-мачехи в дозе 3 мл/кг живой массы. Взятие крови у животных для исследования проводили до применения препаратов (фоновое исследование) и спустя 5-7 дней после завершения опытов по 10 проб от каждой группы.

Установлено, что применение фитастима, фитасола и фитадеза способствует нормализации исходно сниженных показателей иммунного статуса телят.

Так, относительное содержание Т-лимфоцитов крови у животных опытных групп увеличилось соответственно на 23, 22 и 19% против недостоверной разницы в контроле, абсолютное содержание Т-лимфоцитов увеличилось на 68, 60 и 54% против 24% в контроле, относительное содержание В-лимфоцитов увеличилось соответственно на 49, 43 и 33%, абсолютное содержание В-лимфоцитов увеличилось на 100, 74 и 65% по сравнению с контролем, где отмечалось недостоверное изменение данного показателя.

Установлено выраженное стимулирующее влияние фитопрепаратов на показатели функциональной активности нейтрофилов крови. Так, активность нейтрофилов в спонтанном тесте у телят опытных групп увеличилась соответственно на 94, 67 и 72% против недостоверной разницы в контроле, в индуцированном тесте - на 107, 107 и 94% против 22% в контроле. Уровень иммуноглобулинов G в сыворотке крови телят опытных групп увеличился на 31, 24 и 15% по сравнению с недостоверной разницей этого показателя в контроле, иммуноглобулинов М - на 62, 37 и 33% соответственно против 26% в контроле.

Применение фитопрепаратов оказывает положительное влияние на показатели естественной резистентности организма телят. Так, лизоцимная активность сыворотки крови у телят опытных групп увеличилась на 143, 109 и 90% соответственно против 21% в контроле, бактерицидная активность сыворотки крови - на 31, 29 и 16% против недостоверного изменения данного показателя в контрольной группе.

Профилактическая эффективность испытуемых фитопрепаратов была соответственно на 6,1; 6,9; 7,6% выше в сравнении с контролем-аналогом. Сохранность животных в опытных группах составляла 99,1-100%, что на 4,6-5,5% выше в сравнении с контролем. Среднесуточный прирост живой массы у животных опытных групп был соответственно на 42, 36 и 37% выше, чем у телят контрольной группы. Применяемые препараты обеспечивали более легкую форму переболевания.

Таким образом, исследования показали, что применение фитастима, фитасола и фитадеза в дозе 2,0 мл/кг живой массы в течение 15 дней способствует повышению уровня исходно сниженных показателей иммунного статуса телят, что обеспечивает значительное снижение риска заболеваемости респираторной патологией, 100% сохранность и более высокий прирост живой массы животных по сравнению с контролем. Результаты исследований дают основание рекомендовать новые фитопрепараты для использования в качестве средств, повышающих эффективность традиционных лечебно-профилактических мероприятий при болезнях телят.

Профилактическая эффективность фитастима, фитасола и фитадеза в форме аэрозолей

Исследования выполнены на 553 клинически здоровых телятах 20-30_дневного возраста, подобранных по принципу аналогов и сформированны в три опытные и одну контрольную группы.

Аэрозольной обработке подвергали животных четырех телятников, где содержались животные 20-30_дневного возраста. С профилактической целью клинически здоровых животных (145 голов) первого телятника обрабатывали аэрозолью 7% раствора фитастима из расчета 2 мл/м³ помещения. Животных (145 голов) второго телятника аналогично фитастиму обрабатывали аэрозолью фитасола, животных третьего телятника (136 голов) обрабатывали фитадезом аналогично фитастиму. Контролем служили 127 голов клинически здоровых животных аналогичного возраста четвертого телятника, которых обрабатывали аэрозолью спиртовой настойки мать-и-мачехи из расчета 3 мл/м³ помещения. Аэрозольную обработку проводили с помощью сверхзвуковой аэрозольной форсунки САФ при давлении 6-7 атм. в три цикла по 3 дня подряд с 2_х дневным интервалом между каждым циклом, при экспозиции препаратов 45-60 минут. Аэрозольную обработку осуществляли при температуре воздуха 14⁰С и относительной влажности не ниже 70%. Стабильность аэрозолей достигали добавлением 10-20% стерильного глицерина или 10% глюкозы в порошке к общему объему рабочего раствора. Взятие крови у подопытных животных для иммунологических исследований проводили до применения препаратов (фоновое исследование) и спустя 7 дней после завершения трех циклов обработок. Общую бактериальную обсемененность воздуха животноводческих помещений определяли методом осаждения на чашки Петри с мясопептонным агаром.

Исследованиями установлено, что применение фитастима, фитасола и фитадеза в форме аэрозолей способствует повышению иммунологической резистентности организма телят. Так, увеличение Т-лимфоцитов у животных опытных групп по сравнению с исходными показателями составило соответственно 37,2-48,4%, что на 20,6-31,9% больше по сравнению с контролем, показатели В-лимфоцитов увеличились соответственно на 36,1-29,0%, или на 21,5-14,5% больше по сравнению с животными контрольной группы. Применение фитопрепаратов оказывало стимулирующее влияние на показатели общей резистентности организма, и особенно на функциональную активность нейтрофилов и лизоцимную активность сыворотки крови. У животных опытных групп функциональная активность нейтрофилов по спонтанному тесту по сравнению с животными контрольной группы увеличилась соответственно на 32,1-33,1%, индуцированному - 31,2-40,9%, или на 43,5-53,2% по сравнению с исходными показателями. Лизоцимная активность соответственно увеличилась на 88,9-68,4%, или на 57,3-36,8% больше по сравнению с животными контрольной группы.

Результаты исследований свидетельствовали также о высокой антимикробной эффективности аэрозолей фитастима, фитасола и фитадеза.

Общая микробная обсемененность воздуха в животноводческих помещениях после обработки фитастимом снизилась в 4,3 раза, фитасолом и фитадезом - в 3,9 раза и настойкой мать-и-мачехи - в 1,26 раза. Профилактическая эффективность препаратов составила 97,8-98,6%, что на 27,7-28,5% выше по сравнению с контролем.

Таким образом, проведенные исследования позволяют заключить, что применение в форме аэрозолей разработанных нами препаратов фитастима, фитасола и фитадеза способствует снижению микробной обсемененности воздуха в животноводческих помещениях, повышению исходно сниженных иммунобиологических показателей у клинически здоровых телят, обеспечивает профилактическую эффективность в 97,8-98,6% случаев при массовых респираторных болезнях, 100% их сохранность и увеличение среднесуточных привесов. Достоверных различий в эффективности разработанных средств не установлено.

Терапевтическая эффективность сочетанного применения фитадеза с гипериммунной сывороткой крови

Исследования проводили на двух группах больных телят: первая - опытная, вторая - контрольная, подобранные по принципу аналогов. Телятам опытной группы (125 голов) внутрь за 20-30 минут до кормления применяли фитадез в виде 7% водного раствора с интервалом 12 часов в дозе 4,0 мл/кг массы животного. Телятам контрольной группы (110 голов) аналогично фитадезу внутрь применяли спиртовую настойку мать-и-мачехи. Дополнительно телятам обеих групп подкожно вводили иммунную сыворотку животных-доноров в дозе 2 мл/кг живой массы с интервалом в 24-48 часов.

Для лечения респираторных болезней телят использовали экологически безопасный препарат фитадез, представляющий собой спиртовую настойку сбора лекарственных растений, включающего почки сосны, траву и соцветия эхинацеи пурпурной, корневища и корни девясила высокого. Препарат обладает бактерицидным, антивирусным, противовоспалительным, отхаркивающим и иммуностимулирующим действием. Относится к нетоксичным препаратам, не обладает кумулятивными, эмбриотоксическими и аллергенными свойствами, совместим с химиотерапевтическими и биологическими средствами.

С лечебной целью использовали гипериммунную сыворотку животных-доноров, содержащую антигемагглютинины к вирусам парагриппа_3 (ПГ_3) 1:1280, инфекционного ринотрахеита (ИРТ) 1:256 и вирусной диареи - болезни слизистых (ВД-БС) 1:1024.

В результате проведенных исследований установлено, что сочетанное применение фитадеза с иммунной сывороткой животных-доноров способствует повышению показателей иммунного статуса больных телят.

Применение фитадеза способствовало достоверному увеличению относительного и абсолютного содержания T- и B - лимфоцитов крови, функциональной активности нейтрофилов крови (НСТ-тест) и гуморальных факторов естественной резистентности организма. Так, относительное и абсолютное содержание T_лимфоцитов у телят опытной группы увеличилось на 56 и 57% соответственно против 19,3% в контроле, относительное и абсолютное содержание B_лимфоцитов увеличилось на 36 и 29% соответственно против 22 и 14% в контроле. Установлено значительное повышение функциональной активности нейтрофилов крови (НСТ-тест): в спонтанном - на 113% против 80% в контроле, в индуцированном - на 220% против 148% в контрольной группе; повышение уровня иммуноглобулинов G и M на 20 и 64% соответственно против недостоверной разницы в контроле.

Показатели лизоцимной и бактерицидной активности сыворотки крови у опытной группы телят увеличились на 171 и 52% соответственно против 105 и 18% в контроле.

Терапевтическая эффективность сочетанного применения фитадеза с иммунной сывороткой животных-доноров составила 100%, или на 10% выше в сравнении с контролем-аналогом. Среднесуточный прирост живой массы у животных опытной группы был на 24% выше, чем у животных контрольной группы.

Таким образом, исследованиями установлено, что сочетанное применение фитадеза с иммунной сывороткой животных-доноров способствует повышению иммунного статуса телят, что обеспечивает высокую терапевтическую эффективность и сохранность животных при массовых респираторных болезнях.

Выводы

1. Эпизоотологическими, вирусологическими, бактериологическими, серологическими и иммунологическими исследованиями установлено, что респираторные болезни телят имеют сложную этиологическую структуру, ведущее место в которой принадлежит вирусам инфекционного ринотрахеита, парагриппа_3 и вирусу диареи - болезни слизистых.

В качестве бактериальных агентов, осложняющих развитие болезни, являются стафилококки, стрептококки, сальмонеллы и пастереллы.

2. Иммунологический мониторинг, основанный на системно-функциональном подходе к оценке иммунного статуса, позволил выявить у клинически здоровых и больных телят иммунодефицитного состояния, характеризующегося низкой функциональной активностью иммуно-компетентных клеток, пониженным содержанием общего белка и иммуноглобулинов.

2.1. Формирование иммунодефицитного состояния обусловлено нарушением условий содержания коров-матерей и телят и воздействием на организм животных ассоциаций микроорганизмов.

3. Разработаны новые способы коррекции вторичных иммунодефицитов у телят с применением зоолана, гликопина, кватерина и его производных - квациклина и изокватерина.

3.1. Установлено, что все испытанные препараты обладали выраженной иммуномодулирующей активностью при вторичных иммунодефицитах телят.

Сравнительное изучение их эффективности показало, что наиболее выраженное иммуномодулирующее действие отмечено у зоолана, гликопина и кватерина.

3.2. Применение зоолана в виде 0,3% раствора в дозе 1,6 мл или гликопина в виде 0,2% раствора в дозе 2 мл трехкратно с интервалом 5 дней нормализует соотношение Т- и В-лимфоцитов, повышает содержание иммуноглобулинов, функциональную активность нейтрофилов и неспецифическую резистентность организма (бактерицидную, лизоцимную, бетализинную активность сыворотки крови).

3.3. Выраженный иммуномодулирующий эффект выявлен при применении кватерина в виде 40% раствора в дозе 4 мл два раза в сутки в течение 5 дней, квациклина и изокватерина - в виде 2% раствора в дозе 4 мл внутримышечно трехкратно с интервалом 5 дней.

4. Разработаны новые способы повышения эффективности специфической профилактики вирусных респираторных болезней телят с применением вакцин и средств, обладающих иммуномодулирующей активностью.

4.1. Применение зоолана, гликопина, кватерина и его производных - квациклина и изокватерина при вакцинации телят против инфекционного ринотрахеита, парагриппа_3 обеспечивает повышение напряженности поствакцинального противовирусного иммунитета у телят и их сохранности.

4.2. Сравнительное изучение эффективности препаратов показало, что наиболее высокий уровень антителообразования отмечен при применении вакцин в сочетании с зооланом или гликопином.

4.3. Двукратная иммунизация телят вакциной «Тривак» в 30-60_дневном возрасте в сочетании с зооланом или гликопином обеспечивала формирование не только выраженного специфического гуморального иммунитета, но и оказывала стимулирующее влияние на клеточные и гуморальные факторы неспецифической резистентности телят.

Уровень Т-лимфоцитов у телят опытных групп по сравнению с контролем увеличивался соответственно на 68,0 и 75,0%, В-лимфоцитов - 125,0 и 75,0%, JgG - 48,0 и 43,0%, JgM - 60,0 и 53,0; средний геометрический титр вируснейтрализующих антител к вирусам ПГ_3 увеличивался соответственно на 79,0 и 274,0%, ИРТ - 69,0 и 50,0%; ВД-БС - 100,0 и 89,0%.

4.4. Профилактическая эффективность сочетанного применения вакцины «Тривак» с зооланом составила 97,8%, с гликопином - 100,0% по сравнению с 84,0% в контроле; сохранность телят в опытных группах животных была выше на 8,0% по сравнению с контролем.

4.5. Двукратное введение гликопина стельным коровам повышает антигенную активность вакцинных препаратов против инфекционного ринотрахеита, парагриппа_3 и вирусной диареи - болезни слизистых крупного рогатого скота и обеспечивает формирование у телят напряженного колострального иммунитета. Иммунный статус телят, полученных от этих коров, характеризуется более высоким уровнем антител к вирусу инфекционного ринотрахеита, парагриппа_3 и вирусной диареи - болезни слизистых (8,1 log₂; 8,6 log₂ и 11,8 log₂) соответственно против (5,8 log₂; 7,0 log₂ и 9,2 log₂) в контроле; JgG 11,3 ± 0,5 мг/мл против 7,9 ± 0,4 мг/мл в контроле; JgM 1,2 ± 0,03 мг/мл против 0,9 ± 0,03 мг/мл в контроле при относительно высокой функциональной активности иммунокомпетентных клеток.

4.6. Профилактическая эффективность вакцинации коров против инфекционного ринотрахеита, парагриппа_3 и вирусной диареи - болезни слизистых с применением гликопина составила 97,2% по сравнению с 81,4% в контроле. Сохранность телят в опытной группе составила 100% по сравнению с 94,0% в контроле.

5. Разработаны новые способы лечения и профилактики респираторных болезней телят вирусно-бактериальной этиологии, включающие применение иммуномодулирующих (зоолан, кватерин, фитасол, фитастим), антибактериальных (сульфатетрин_М, биозин_М) и биологических (гипериммунная сыворотка) средств.

5.1. Сравнительное изучение их эффективности показало, что наиболее высокая (97,1%) терапевтическая эффективность была установлена при комплексном применении сульфатетрина_М, зоолана и гипериммунной сыворотки крови, которая была обусловлена не только этиотропным действием препаратов, но и стимулирующим влиянием на механизмы иммунологической защиты.

5.2. Уровень В-лимфоцитов у телят данной опытной группы по сравнению с животными контрольной группы увеличился на 91,1%, Т-лимфоцитов - на 19,8%, JgG - на 15,8%, общего белка - на 12,9%, функциональная активность нейтрофилов по индуцированному НСТ-тесту - на 96,2%, лизоцимная активность - на 89,0%, бактерицидная активность - на 11,7%, бетализинная активность - на 51,7%.

5.3. Применение данного способа лечения способствовало повышению противоэпизоотической эффективности мероприятий за счет увеличения сохранности животных и прироста живой массы. Сохранность телят опытной группы была на 11,4%, а прирост живой массы на 89,0 г больше по сравнению с контролем. Профилактическая эффективность данного способа составила 95,5% по сравнению с 77,8% в контроле.

6. Разработаны новые, экологически безопасные и доступные для применения в ветеринарной практике средства растительного происхождения - фитасол, фитастим и фитадез, обладающие иммуномодулирующей и лечебно-профилактической эффективностью при респираторных болезнях телят. Способы применения препаратов просты и экономичны, в установленных режимах применения они не оказывают токсического и побочного действия на организм животных.

6.1. Применение фитасола, фитастима и фитадеза внутрь в дозе 2,0 мл/кг живой массы за 20-30 минут до кормления один раз в сутки в течение 15 дней способствует нормализации исходно сниженных иммунобиологических показателей у телят. Относительное содержание Т-лимфоцитов у телят опытных групп увеличивалось на 19,0-23,0%, В-лимфоцитов - 33,0-49,0%, в то время как у телят контрольной группы изменение данных показателей было недостоверным.

Установлено выраженное стимулирующее влияние фитопрепаратов на показатели функциональной активности нейтрофилов крови, JgG и JgM, лизоцимной и бактерицидной активности сыворотки крови, что обеспечивало профилактическую эффективность у животных опытных групп в 93,4-94,9% случаев по сравнению с 87,3% в контроле при 99,2-100,0% сохранности. Прирост живой массы у животных опытных групп был на 32,8-39,0% выше по сравнению с контролем.

6.2. Применение фитадеза внутрь в сочетании с иммунной сывороткой животных-доноров способствовало повышению терапевтической эффективности традиционного способа лечения на 10% и увеличению среднесуточного прироста живой массы на 24,0%. Способ оказывал нормализующее влияние на показатели клеточного и гуморального иммунитета у телят, общей неспецифической резистентности организма.

7. Разработан новый способ профилактики респираторных болезней телят с применением аэрозолей лекарственных средств, полученных из сырья растительного происхождения.

7.1. Применение фитасола, фитастима и фитадеза в форме аэрозолей из расчета 2 мл/м³ помещения в три цикла по 3 дня подряд с двухдневным интервалом между каждым циклом в течение 45-60 минут способствовало повышению исходно сниженных показателей клеточного и гуморального иммунитета, неспецифической резистентности организма у клинически здоровых телят, снижению микробной обсемененности животноводческих помещений в 3,8-4,3 раза, снижению заболеваемости телят на 27,7-28,5% и повышению прироста живой массы и их сохранности по сравнению с контролем.

8. Апробация разработанных средств и способов коррекции иммунодефицитных состояний у телят, лечения и профилактики респираторных болезней телят в производственных условиях показала их технологичность, относительно высокую воспроизводимость и противоэпизоотическую эффективность.

9. Внедрение новых средств, изготовленных по утвержденной научной и нормативно-технической документации, для борьбы с респираторными болезнями телят в условиях хозяйств Нижегородской области подтвердило их эффективность и востребованность.

Практические предложения

Для применения в ветеринарии предложены следующие нормативно-технические документы и приоритетные научные разработки:

* Сульфатетрин_М. Технические условия 9344-003-00670433-2000;

* Наставление по применению сульфатетрина_М в ветеринарии №13-5-2/1851, утв. Департаментом ветеринарии Министерства сельского хозяйства и продовольствия Российской Федерации, 2000 г.;

* Инструкция по изготовлению сульфатетрина_М в производственных условиях, утв. в установленном порядке 17.02.2003 г.;

* Биозин_М. Технические условия ТУ 9344-005-00670433-2000;

* Наставление по применению биозина_М в ветеринарии №13-5-2/1853, утв. Департаментом ветеринарии Министерства сельского хозяйства и продовольствия Российской Федерации, 2000 г.;

* Инструкция по изготовлению биозина_М в производственных условиях, утв. в установленном порядке 17.02.2003 г.;

* Временное наставление по применению зоолана в ветеринарии №13-5-2/1552, утв. Департаментом ветеринарии Министерства сельского хозяйства и продовольствия Российской Федерации, 2000 г.;

* Временное наставление по применению фитасола в ветеринарии в порядке широких производственных испытаний в 2006-2007 гг., одобренное Ученым советом НИВИ НЗ РФ и утв. Комитетом государственного ветеринарного надзора Нижегородской области 22 декабря 2005 г.;

* Временное наставление по применению фитастима в ветеринарии в порядке широких производственных испытаний в 2006-2007 гг., одобренное Ученым советом НИВИ НЗ РФ и утв. Комитетом государственного ветеринарного надзора Нижегородской области 22 декабря 2005 г.;

* Временное наставление по применению фитадеза в ветеринарии в порядке широких производственных испытаний в 2006-2007 гг., одобренное Ученым советом НИВИ НЗ РФ и утв. Комитетом государственного ветеринарного надзора Нижегородской области 21 декабря 2005 г.;

* Научно обоснованная система эпизоотологического надзора профилактических и лечебно-реабилитационных мероприятий при болезнях телят в раннем постнатальном периоде, одобренная Департаментом ветеринарии Министерства сельского хозяйства и продовольствия Российской Федерации, 2000 г.;

* Методические рекомендации по коррекции системных иммунодефицитов для профилактики и терапии массовых желудочно-кишечных и респираторных болезней телят, одобренные Ученым советом НИВИ НЗ РФ и секцией ветеринарной медицины Северо-Восточного научно-методического центра Российской Академии сельскохозяйственных наук, 2005 г.;

* Рекомендации по способам профилактики респираторных болезней телят, одобренные Ученым советом НИВИ НЗ РФ и секцией ветеринарной медицины Северо-Восточного научно-методического центра Российской Академии сельскохозяйственных наук, 2007 г.;

* Рекомендации по способам лечения респираторных болезней телят, одобренные Ученым советом НИВИ НЗ РФ и секцией ветеринарной медицины Северо-Восточного научно-методического центра Российской Академии сельскохозяйственных наук, 2008 г.;

* Технология лечебно-профилактической защиты от массовых желудочно-кишечных и респираторных болезней телят, одобренная Ученым советом НИВИ НЗ РФ и НТС Министерства сельского хозяйства и продовольственных ресурсов Нижегородской обл., 2009 г.;

* Лечебно-профилактические средства и способы их применения для лечения и профилактики респираторных болезней телят, приоритетность которых подтверждена патентами Российской Федерации №2150281, 2150279, 2169558, 2303992, 2309762, 2311190, 2328299, 2364407;