Репродуктивное здоровье высокопродуктивных молочных коров красно-пестрой породы и биотехнологические методы его коррекции

Анализ изменений концентрации в крови тироксина (Т₄) показал, что у животных с молочной продуктивностью 6000 кг и выше первая половина послеродового периода протекает на стабильном гормональном фоне. В период с 3-6-х по 15-18-е сутки после отела у таких коров содержание Т₄ находилось в пределах 57,7 ±6,82 - 59,8±7,15 нМ/л. Затем концентрация тироксина снижается на 14,5% и до конца месяца регистрируется на уровне 51,1±4,09 - 52,3±4,85 нМ/л. У животных с продуктивностью менее 4000 кг начало послеродового периода характеризуется повышенным содержанием в крови Т₄ . Так, через 3-6 суток после отела у низкопродуктивных коров в крови содержится в 1,26 раза больше тироксина, чем у высокопродуктивных (72,7±7,72 нМ/л против 57,7±6,82 нМ/л). В дальнейшем концентрация гормона в крови, постепенно снижаясь, к концу послеродового периода (25-30-е сутки) уменьшается в 1,45 раза и достигает значений 50,2±4,57 нМ/л, что ниже показателя высокопродуктивных животных в аналогичный срок на 4,2%.

В целом для высокопродуктивных коров характерным является более высокое содержание трииодтиронина в течение всего послеродового периода. Активизация метаболизма тиреоидных гормонов регистрируется на 9-14, 19-24 и 25-30-е сутки после отела. В эти сроки соотношение Т₄:Т₃ составляет соответственно 36,1; 28,3 и 21,9 : 1.

У животных с молочной продуктивностью до 4000 кг первая половина послеродового периода протекает на фоне относительно высокого содержания тироксина, однако интенсивность метаболизма иодидов, судя по концентрации Т₃ и соотношению Т₄:Т₃ (52,3-56,6) , в этот период ниже, чем у высокопродуктивных, и активизируется только на 19-24 и 25-30-е сутки после отела.

Проявление функциональной деятельности яичников у коров в послеродовой период имеет и определенную сезонную зависимость. Осенью на 3-6-е сутки после отела уровень прогестерона в периферической крови коров на 37,8% ниже, чем в те же сроки весной (1,41±0,15 против 1,94±0,28 нМ/л). В осенний сезон в первые три недели послеродового периода снижение концентрации гормона происходит менее интенсивно и минимальное его количество отмечается на 19-24-е сутки. К этому сроку уровень прогестерона в крови коров падает на 20,0% и достигает 1,13±0,06 нМ/л, что приближается к значениям в весенний период года, но на 15-18-е сутки после отела. Следует отметить, что на 9-14-е сутки послеродового периода в осенний сезон регистрируется некоторый подъем уровня прогестерона (на 15,6%), не сопровождающийся изменением концентрации эстрогенов. К 25-30-м суткам после родов секреция прогестерона активизируется и его количество в крови повышается на 36,1% и достигает 1,53±0,25 нМ/л.

Весной в первой половине послеродового периода наблюдается постепенное

снижение уровня прогестерона в крови коров. На 9-14-е сутки после отела количество гормона уменьшается на 37,8% (с 1,94±0,28 на 3-6-е сутки до 1,41±0,62 нМ/л) и становится на 13,5 % меньше, чем в соответствующий период осенью. На 15-18-е сутки после родов регистрируется минимальная концентрация стероида - 1,06±0,09 нМ/л, что на 20,9 % ниже, чем в осенний сезон. В дальнейшем, в связи с активизацией эндокринной функции яичников, уровень прогестерона к 19-24-м суткам поднимается до 2,41±0,40 нМ/л, превышая показатели в осенний период более чем в два раза. К 25-30-м суткам содержание гормона в крови уменьшается на 36,4% и составляет 1,53±0,72 нМ/л.

В осенний сезон содержание эстрадиола-17в в крови коров в первые две недели послеродового периода на 20,1 - 35,5% выше, чем в соответствующие сроки весной, и составляет 135,0±14,7 - 137,2±34,4 пМ/л. Затем концентрация гормона постепенно уменьшается и к 19-24-м суткам его уровень снижается более чем в 2 раза (до 65,3±7,52 пМ/л). К 25-30-м суткам после отела содержание стероида вновь возрастает более чем в два раза и приближается к исходным значениям (133,9±11,9 пМ/л).

Весной концентрация эстрадиола-17в в периферической крови коров на протяжении всего послеродового периода находится на высоком уровне и колеблется в пределах 91,3±10,0 - 113,0±18,5 пМ/л. Наибольшая концентрация гормона 113,0±18,5 пМ/л и 108,9±14,1 пМ/л отмечается соответственно на 9-14-е и 19-24- сутки, а наименьшая (91,3±10,0 пМ/л) на 25-30 день после отела.

Содержание в крови животных тестостерона в весенний сезон было ниже, чем осенью, в течение всего послеродового периода, при этом минимальная разница концентраций регистрировалась на 15-18-е сутки и составляла 15,4%, а максимальная - на 25-30-е сутки (86,9%).

Что же касается динамики гормонов щитовидной железы в сезонном аспекте, то она при сохранении общих закономерностей имеет определенные отличия. Концентрация трииодтиронина осенью с 3-5 и до 15-18 суток после родов стабильная и находится на уровне 1,26±6,29 - 1,29±0,22 нМ/л. С 19-24-х суток начинается повышение содержания Т₃ в крови вначале на 25,8% (до 1,61±0,42 нМ/л), а затем к 25-30-м суткам еще на 17,4% (до 1,89±0,29 нМ/л). В результате, на момент окончания послеродового периода концентрация трииодтиронина в 1,5 раза превышает базальный уровень.

Весной первые две недели после отела также характеризуются постоянным количеством Т₃ в крови, однако подъем концентрации гормона начинается раньше, уже на 15-18-е сутки после отела. Следует отметить, что в весенний сезон содержание трииодтиронина в крови коров было выше, чем осенью, на 12,7% на 3-6-е сутки, 9,3% - на 9-14-е, 16,4% - на 15-18-е, 6,8% - на 19-24-е и 7,4% - на 25-30-е сутки после отела.

Характер изменений концентрации тироксина в осенний и весенний сезон не имел существенных различий. Максимальное содержание его в крови было на 3-6-е сутки после отела, а затем, в течение послеродового периода постепенно снижалось, при этом минимальная концентрация гормона весной была зарегистрирована на 19-24-е сутки (51,35±2,56 нМ/л), а осенью - на 25-30-е сутки (49,15±4,62 нМ/л). Вместе с тем, в весенний сезон содержание Т₄ в крови коров было выше во все сроки исследований.

Таким образом, в весенний период процессы послеродовой инволюции половых органов у большинства животных протекают на фоне повышенной гормональной активности щитовидной железы и гонад.

2.5 Показатели гормонального гомеостаза коров при физиологическом и патологическом течении послеродового периода

Выявлено (табл.4), что на 3-6-е сутки после отела у животных с патологическим течением инволюционных процессов в половых органах концентрация в крови прогестерона была на 16,6% выше, чем у здоровых коров (1,75±0,28 нМ/л против 1,50±0,25 нМ/л). Вторая неделя послеродового периода у больных коров проходит на фоне снижения активности прогестеронсинтезирующих структур (соотношение прогестерона с эстрадиолом составило 14,4:1), а у коров с нормальным течением инволюционных процессов, напротив, эндокринная активность яичников возрастает (соотношение прогестерона с эстрадиолом составило 17,5:1). В период с 15 по 18-е сутки у всех животных отмечается снижение продукции прогестерона, тестостерона и эстрадиола. На 19-24-е сутки у здоровых коров активизируется фолликулогенез и при стабильном содержании тестостерона (1,00±0,31 - 0,93±0,14 нМ/л) отмечается увеличение концентрации в крови эстрадиола с 77,8±14,9пМ/л до 100,5±10,9 пМ/мл или на 29,2%, и прогестерона - с 1,16±0,28нМ/л до 2,13±0,28 нМ/л, или на 30,6%. У больных животных в эти сроки активного роста фолликулов не происходит, о чем свидетельствует низкий уровень содержания в крови эстрадиола-17в (59,4±8,22 пМ/л) и прогестерона (1,38±0,37 нМ/л).

К 25-30-м суткам послеродового периода интенсивный рост фолликулов и активная продукция половых стероидов отмечается как у здоровых животных, так и у коров с послеродовыми осложнениями. Вместе с тем, судя по концентрации в крови больных коров прогестерона и его соотношению с эстрадиолом-17в (12,2:1), функциональная активность соединительнотканных структур фолликулов, и яичников в целом, у таких животных снижена. Исходя из этого можно предположить, что у животных с нарушенными инволюционными процессами в матке рост фолликулов в яичниках может завершиться не их созреванием и овуляцией, а кистозной атрезией [5].

Установлено, что в крови коров с послеродовыми осложнениями в первые 3-6 суток после отела содержание трииодтиронина оказалось ниже на 20%, а тироксина - выше на 11,7%, чем у животных с нормальной инволюцией половых органов. На второй неделе послеродового периода интенсивность метаболизма тиреоидных гормонов у коров с нарушенной инволюцией снижается, концентрация трийодтиронина уменьшается до 1,01±0,08 нМ/л, а соотношение Т₄/Т₃ составляет 67,3:1. У животных с нормальным течением инволюционных процессов, напротив, активность образования трийодтиронина возрастает и его концентрация в этот период составляет 1,58±0,25 нМ/л, а соотношение Т₄/Т₃ - 36,3:1.

В дальнейшем у коров с патологией послеродового периода секреция тироксина уменьшается, а продукция трииодтиронина постепенно повышается, но остается стабильно ниже, чем у здоровых животных (соотношение Т₄/Т₃ - 35-48 : 1 против 28-36 : 1 у здоровых коров).

К моменту завершения послеродового периода (25-30-е сутки) у здоровых животных наблюдается активизация гормонсинтезирующей функции щитовидной железы и активизация метаболизма тиреоидных гормонов (соотношение Т₄/Т₃ составляет 26,3:1). У коров с послеотельными осложнениями в этот период также наблюдается увеличение синтеза трииодтиронина, о чем свидетельствует рост его концентрации на 59,2%, однако в целом метаболизм тиреоидных гормонов, судя по соотношению Т₄/Т₃ (28,3), находится на более низком уровне [9].

Таблица 4

2.6 Разработка методов профилактики родовых и послеродовых

заболеваний и нормализации воспроизводительной функции

у высокопродуктивных молочных коров

2.6.1 Коррекция воспроизводительной функции коров с

использованием неспецифического биорегулятора ПАН

Для выяснения механизма действия биостимулятора Плацента активное начало (ПАН) нами были проведены исследования по определению содержания в препарате половых стероидов и его влиянию на показатели гормонального гомеостаза у коров. Выявлено, что в одном миллилитре ПАН содержится прогестерона около 3,0 нг; эстрадиола-17Я в пределах 105 пг и тестостерона - 2,3 нг.

Установлено, что назначение животным биостимулятора в дозе 20 мл за две недели до предполагаемых родов и в день отела оказывает существенное влияние на состояние их гормонально-метаболического гомеостаза. Так, у интактных коров к 6-8-м суткам послеродового периода концентрация эстрадиола-17в в крови равняется 327,7±19,3 пМ/л. В дальнейшем содержание стероида уменьшается на 23,6% и на 10-16-е сутки после отела составляет 250,2±57,3 пМ/л. На 24-34-е сутки после родов в связи с активизацией роста фолликулов уровень гормона в крови увеличивается более чем в 1,6 раза и составляет 419,1±68,3 пМ/л.

В опытной группе на 6-8-е сутки послеродового периода концентрация эстрадиола в крови животных была в 1,52 раза, а на 10-16-е сутки - в 1,81 раза выше показателей коров контрольной группы. К окончанию послеродового периода содержание эстрадиола-17в снизилось на 12,9% и достигло значений, характерных для интактных животных (392,6±56,2 пМ/л).

Уровень прогестерона на всем протяжении послеродового периода был выше у животных контрольной группы. Так, на 6-8-е сутки после отела концентрация гормона равнялась 0,94±0,37 нМ/л, в то время как у животных опытной группы содержание стероида было в 2,15 раза меньше (0,43±0,03 нМ/л). Соотношение прогестерона с эстрадиолом составляло соответственно 3,36 и 1,04. К 10-16-м суткам послеродового периода количество гормона в крови животных обеих групп возрастает (на 30,7% в опытной и 63,3% в контрольной), при этом показатели у интактных коров были выше в 2,45 раза соответственно (1,54±0,37 и 0,63±0,19 нМ/л). Соотношение прогестерона с эстрадиолом в это время у животных опытной группы было в 4,42 раза ниже, чем у контрольных (1,39 против 6,15). К концу послеродового периода разница в содержании стероида в крови коров опытной и контрольной групп не превышает 0,16 нМ/л, а соотношение прогестерона с эстрадиолом составляет 4,63-4,72.

Таким образом, после назначения биостимулятора ПАН в крови коров отмечается повышение уровня эстрадиола-17в и снижение концентрации прогестерона, что обеспечивает в их организме оптимальный гормональный фон для проявления сократительной функции матки и нормальной послеродовой инволюции репродуктивной системы.

Для выявления оптимальной схемы применения препарата ПАН для профилактики послеродовых заболеваний из 62 сухостойных коров было сформировано 5 групп. Коровам первой группы (n=12) препарат ПАН вводился подкожно в дозе 20 мл четыре раза: за 55-60, 25-30, 10-15 суток до родов и в день отела; второй (n=9) - три раза: за 25-30, 10-15 суток до предполагаемых родов и в день отела; третьей (n=21) - два раза: за 10-15 суток до родов и в день отела; четвертой (n=9) препарат назначали согласно Временному Наставлению (утверждено Департаментом ветеринарии МСХиП РФ 12.10.99) дважды: в день отела и через 72 часа (четвертый день послеродового периода). Коровы пятой группы (n=11) служили положительным контролем и им четыре раза вводился внутримышечно тривитамин по 10 мл: за 55-60, 25-30, 10-15 и 4-5 суток до родов.

Послеродовая патология в виде функциональных расстройств и воспалительных заболеваний матки в контрольной группе была зарегистрирована у 63,6% животных. В опытных группах заболеваемость коров после отела была ниже в 1,14-1,91 раза. Вместе с тем следует отметить, что введение препарата в день отела и через 72 часа после родов, как рекомендует Временное наставление, оказалось недостаточно эффективным - акушерская патология зарегистрирована у 55,6% животных. Четырехкратное назначение ПАН за 55-60, 25-30, 10-15 суток до родов и в день отела и трехкратное введение биорегулятора за 25-30, 10-15 суток до родов и в день отела дает сходный результат и снижает заболеваемость коров до 41,7-44,4%, или в 1,52 - 1,43 раза. Самый высокий профилактический эффект был получен при назначении препарата Плацента активное начало двукратно - за 2 недели до предполагаемых родов и в день отела. При использовании этой схемы заболеваемость животных снизилась до 33,3%, или в 1,9 раза по сравнению с положительным контролем.

Результаты этих исследований подтверждены второй серией опытов (n=42). Животным одной группы (n=15) препарат назначали в дозе 20 мл за 10-15 суток до родов и в день отела, коровам второй группы (n=13) - в эти же сроки назначали препарат ПАН в дозе 10 мл и тривитамин в дозе 10 мл, а животным третьей группы (n=14) препараты не вводили и они служили отрицательным контролем. Установлено, что в контрольной группе осложнения послеродового периода возникли у 78,6% животных. Сочетанное введение ПАН в дозе 10 мл с тривитамином позволило снизить заболеваемость до 61,5 %, или в 1,28 раза. Назначение биостимулятора в дозе 20 мл за 15 суток до родов и в день отела уменьшило заболеваемость коров после отела до 46,7%, или в 1,68 раза. Оплодотворяемость животных в этой группе составила 61,5 %, что на 19,8 % больше, чем в группе контроля. Период бесплодия у каждой оплодотворенной коровы был сокращен на 9,7 дня (с 53,8 до 44,1) [3, 4, 6, 17].

2.6.2 Коррекция воспроизводительной функции коров с

использованием адаптогена стресс-корректора лигфол

При изучении влияния лигфола на показатели гормонального гомеостаза коров после его парентерального назначения в дозе 5 мл установлено (табл.5), что перед введением препарата (за месяц до отела) концентрация кортизола в крови животных составила 32,2±4,84 нМ/л. Через две недели после назначения лигфола у животных контрольной группы количество стероида в крови осталось примерно на том же уровне, в то время как у коров опытной группы отмечен рост содержания гормона в крови более чем в 1,9 раза (до 59,4±7,50 нМ/л).

В послеродовой период, после прекращения функционирования фетоплацентарного комплекса, у обработанных лигфолом животных концентрация кортизола в крови сохраняется на стабильно высоком уровне (55,3-52,8 нМ/л) и превышает показатели интактных коров в 1,2-1,9 раза. То есть лигфол оказывает долговременное выраженное стимулирующее влияние на синтез и метаболизм кортикостероидов.

Содержание тестостерона в крови коров за 30 дней до отела (перед постановкой опыта) было на уровне 2,18±0,28 нМ/л. Через 2 недели у контрольных животных количество стероида уменьшилось в 1,6 раза и равнялось 1,35±0,67 нМ/л, а после отела возросло более чем в 2,3 раза и составило 3,22±0,25 нМ/л, что на 47,7% выше фоновых значений. К моменту окончания послеродового периода концентрация тестостерона снизилась в 1,85 раза, однако осталась на 28,8% выше, чем за 2 недели до родов. У животных опытной группы динамика содержания в крови тестостерона в определенной степени соответствовала изменениям, происходящим у контрольных коров. Так, за 2 недели до родов (через 14 дней после введения лигфола) у животных обеих групп количество данного стероида незначительно уменьшилось (на 7,8%). В первые 2 недели после родов синтез гормона активизировался, но не так интенсивно, как у интактных животных, в результате чего значения исходного фона повысились лишь на 23,8%. Через 1 месяц после отела концентрация тестостерона снизилась в 1,96 раза и достигла минимального уровня (1,38±0,20 нМ/л), что на 31,3% ниже, чем за 2 недели до родов. Таким образом, у коров опытной группы в течение 1,5 месяца после назначения лигфола концентрация андрогенов была на стабильно высоком уровне и колебалась в пределах 2,01±0,62-2,70±0,32 нМ/л. При этом в послеродовой период содержание гормона снизилось на 16,2-20,7%. Через 1 месяц после отела у подопытных животных количество стероида было на треть ниже, а у интактных - на треть выше, чем за 2 недели до родов, что, вероятно, связано с нормализующим влиянием лигфола на синтез и ароматизацию тестостерона в фолликулах и интерстициальных клетках яичников.

Таблица 5

Влияние лигфола на концентрацию гормонов в крови коров

Значительные изменения после назначения лигфола отмечены также в динамике прогестерона и эстрадиола. У интактных животных в предродовой период концентрация прогестерона уменьшилась с 18,5±3,60 нМ/л за 1 месяц до родов до 14,6±4,15 нМ/л за 2 недели до отела (на 21,1%). При этом содержание эстрадиола в те же сроки повысилось соответственно с 262,0±41,2 до 413,0±112,9 пМ/л, или на 57,6%. Соотношение прогестерона и эстрадиола с приближением родов изменилось с 70,6:1 до 35,4:1.

После отела концентрация прогестерона и эстрадиола снизилась более чем в 10 раз и была на уровне соответственно 1,12±0,09 нМ/л и 40,7±3,32 пМ/л. К моменту окончания послеродового периода отмечено некоторое (на 13,0%) уменьшение количества эстрадиола (до 35,4±6,61 пМ/л) при одновременном значительном (в 2,7 раза) росте показателей прогестерона.

У животных опытной группы в предродовой период падение концентрации прогестерона происходило более активно и, несмотря на более низкий по сравнению с контролем уровень эстрадиола, соотношение прогестерона и эстрадиола за 2 недели до отела было ниже, чем у интактных коров (24,7:1 против 35,4:1). В послеродовой период у подопытных животных активизировалась прогестеронсинтезирующая функция яичников. Так, через 2 недели после отела концентрация прогестерона была более чем в 3 раза, а через 1 месяц - в 1,8 раза выше, чем у животных контрольной группы. Соотношение прогестерона и эстрадиола составило 94,2:1-176,2:1.

Отмечено, что применение коровам лигфола не оказывает существенного влияния на динамику содержания в крови тироксина (разница значений в опытной и контрольной группах находилась в пределах 0,4-5,1%), но значительно активизирует метаболизм трииодтиронина.

За 1 месяц до отела концентрация трииодтиронина в крови коров составила 4,39±0,95 нМ/л. За 2 недели до родов данный показатель у животных контрольной и опытных групп снизился соответственно в 1,33 и 1,46 раза. После отела в крови интактных коров количество трииодтиронина продолжало уменьшаться и к 14-му дню послеродового периода достигало минимальных значений (2,09±0,64 нМ/л). Через 1 месяц после родов уровень гормона повысился до 3,33±0,62 нМ/л, однако остался в 1,32 раза ниже исходного фона. У коров опытной группы, напротив, через 2 недели после отела концентрация трииодтиронина возросла в 2 раза (до 6,00±0,98 нМ/л), а к моменту завершения послеродового периода, несмотря на определенное (на 25%) снижение содержания гормона, его количество в крови обработанных животных было в 1,35 раза выше, чем у контрольных.

Таким образом, назначение лигфола глубокостельным коровам оказывает существенное влияние на состояние их гормонально-метаболического гомеостаза. Препарат активизирует стероидогенез в надпочечниках, фетоплацентарном комплексе, оказывает опосредованное гонадотропное и тиреотропное действие.

Изучение профилактической эффективности лигфола проведено на 104 коровах. Использованы следующие схемы назначения препарата: однократно за 25-30 суток до отела, двукратно за 25-30 и 7-10 суток до отела, двукратно за 25-30 суток до и в день отела, двукратно за 7-10 суток до и в день отела.

Установлено, что в контрольной группе послеродовая патология зарегистрирована у 70,0% животных. Четырехкратное назначение сухостойным коровам тривитамина обеспечило снижение их заболеваемости в послеродовой период на 7,5%, введение тканевого препарата из плаценты в день отела и на 3 сутки после родов - на 14,4%. Однократная инъекция лигфола в дозе 5 мл за 25-30 суток до отела не оказала должного эффекта - заболеваемость животных оказалась на уровне отрицательного контроля. Применение лигфола за 25-30 и 7-10 суток до отела позволило сократить заболеваемость коров на 12,8% по сравнению с контролем. Среди животных, получавших лигфол за 25-30 суток до и в день отела, послеродовые заболевания отмечались в 2,33 раза реже, чем у животных контрольной группы, а среди животных, получавших лигфол за 7-10 суток до и в день отела, - в 2,66 раза.

В научно-производственном опыте, выполненном на 112 коровах, животным одной группы (n=37) двукратно за 7-10 суток до и в день отела внутримышечно иньецировали лигфол по 5 мл, второй (n=31) - дополнительно к иньекциям лигфола в день отела внутримышечно вводили миотропный препарат утеротон в дозе 10 мл. Животным третьей группы (n=44) биологически активные вещества не назначали и они служили контролем.

В послеродовой период воспалительные и функциональные расстройства матки зарегистрированы у 77,3 % животных контрольной группы. Назначение адаптогенного препарата лигфола в дозе 5 мл за 7-10 суток до родов и в день отела снизило заболеваемость до 29,7%, или в 2,60 раза. Двукратное введение лигфола в сочетании с утеротоном позволило снизить заболеваемость до 25,8%, что в 2,99 раза меньше группы контроля (табл.6). Анализ данных по воспроизводству показал, что в первой группе оплодотворяемость животных составила 53,1%, что на 19,0 % больше, чем в контроле. Период бесплодия у каждой оплодотворенной коровы сократился на 7,4 дня. У животных второй группы, получавших лигфол и утеротон, оплодотворяемость превышала показатели контрольной группы на 30,2%, а продолжительность бесплодия у каждого животного была сокращена на 13,6 дня.

Таблица 6

Показатели воспроизводительной способности коров после применения биологически активных препаратов

Таким образом препарат лигфол обладает выраженным профилактическим действием при акушерской патологии у коров. Наиболее рациональным способом его применения для профилактики родовых и послеродовых заболеваний является двукратное внутримышечное введение в дозе 5 мл за 7-10 суток до отела и в день отела. Дополнительное назначение в день отела препарата утеротон оказывает положительное влияние на воспроизводительную функцию коров, повышает оплодотворяемость и сокращает продолжительность бесплодия [12, 13, 15, 16, 26].

2.6.3 Коррекция воспроизводительной функции коров с использованием миотропного препарата утеротон

Изучение миотропной активности нового отечественного препарата в - адреноблокаторного действия утеротон, активным веществом которого является гидрохлорид пропранолола (анаприлин), показало, что парентеральное введение его коровам после отела в дозе 10 мл уже через 30 мин приводит к увеличению частоты сокращений матки на 17,4%, амплитуды - на 13,6%, продолжительности сокращений - на 28,6% и контракционного индекса - на 71%. Последний показатель был выше, чем у интактных коров, в 1,9 раза (рис.1).

Через 2,5 часа после назначения препарата сохраняется высокая интенсивность сокращений матки, ее контракционный индекс в 1,34 раза превосходит фоновые значения и в 2,94 раза выше, чем у интактных животных. Спустя 5,5 часа амплитуда, частота и продолжительность сокращений снижаются до уровня исходных значений, но при этом общая интенсивность сокращений превосходит показатели интактных коров в 3,9 раза.

Одновременно установлено, что характер сократительной функции матки коров в первые часы после родов существенно изменяется при доении. Во время молокоотдачи у животных, обработанных утеротоном, амплитуда сокращений возрастает на 54,4%, частота - на 10,1%, продолжительность - на 28,6%.

Рис. 1. Влияние утеротона на показатели контрактильной активности матки коров после отела

В результате контракционный индекс увеличивается в 2,18 раза, что в 1,3 раза больше, чем у интактных коров.

Через 1 час после завершения доения общая интенсивность моторной деятельности матки оставалась по-прежнему на уровне, превышающем исходные значения на 76,0%, в то время как у интактных коров в аналогичный период она была ниже в 1,4 раза. Через 2 часа амплитуда, частота и продолжительность сокращений матки у обработанных утеротоном животных снижается, однако продолжает превышать исходные значения соответственно на 9,7; 3,7 и 14,2%. Контракционный индекс был выше исходных значений на 30,1%, в то же время у интактных коров он снизился на 15,4%.

Таким образом, препарат в - адреноблокаторного действия утеротон обладает выраженным миотропным действием. Его внутримышечное введение в первые часы после отела обеспечивает нормализацию спонтанной сократительной функции матки, проявляющуюся в активизации частоты, амплитуды и продолжительности ее сокращений, что ускоряет процессы ретракции и снижает заболеваемость коров послеродовым эндометритом и субинволюцией матки. Это благоприятно отражается на их последующей воспроизводительной функции.

Это заключение нашло свое подтверждение в научно-производственных опытах, выполненных на 65 коровах. Животным одной группы (n=20) в первые 6 часов после отела вводили внутримышечно утеротон в дозе 10 мл, коровам 2-й группы (n=20) в эти же сроки подкожно вводили 40 ед окситоцина, а животным 3-й группы (n=25) биологически активные вещества не назначали, и они служили контролем. Установлено, что назначение утеротона снизило заболеваемость коров послеродовым эндометритом и острой субинволюцией матки по сравнению с отрицательным контролем в 2,56 раза, а окситоцина - в 1,8 раза. Оплодотворяемость животных первой группы от 1-го осеменения оказалась выше, чем после применения окситоцина, на 3,3% и на 12% выше интактных коров. Индекс оплодотворения составил 1,65, продолжительность бесплодия была сокращена на 25,3 дня [27].

2.7 Совершенствование методов терапии коров при патологии

родового акта и послеродового периода

Изучена эффективность использования новых утеротонических и общестимулирующих средств - препаратов утеротон и ПАН в комплексной терапии коров при задержании последа, послеродовом эндометрите и субинволюции матки.

Установлено, что у коров с задержанием последа на почве прочной связи между частями плаценты через 8 часов после выведения плода частота сокращений матки за 60 минут составила в среднем 13,9±0,12 с амплитудой 42,3±2,12 мм и продолжительностью сокращений 1,5±0,06 мин. Контракционный индекс был равен 885,3±32,4 ед. Через 30 минут после введения утеротона в дозе 10 мл частота сокращений матки увеличилась на 13,7%, амплитуда - на 32,6%, а продолжительность - на 13,3%. Вследствие этого контракционный индекс возрос в 1,7 раза по сравнению с исходным фоном. Повышенная сократительная активность миометрия отмечалась на протяжении 5-6 часов после введения утеротона. Однако самостоятельно послед не отделился ни у одной коровы.

У животных с задержанием последа при нормальной связи между материнской и плодной частями плаценты показатели сократительной функции матки были на низком уровне. За 1 час в среднем было 7,82±0,11 сокращений с амплитудой 13,0±1,20 мм и продолжительностью 0,85±0,12 мин, а контракционный индекс равнялся только 86,2±6,52 ед. После инъекции утеротона функциональная активность матки возросла в 3,3 раза, что обусловило отделение плодных оболочек в последующие 1-4 часа у всех коров.

Следовательно, терапевтический эффект миотропного препарата при задержании последа достигается только у коров с ослабленной моторикой матки и нормальной связью между материнской и плодной частями плаценты. При прочном соединении частей плаценты, несмотря на значительное усиление сократительной функции матки под влиянием утеротона, отделение последа не происходит.

Научно - производственные опыты показали, что введение коровам (п=25) препарата утеротон на фоне задержавшегося последа (6-8 часов после выведения плода) обеспечило его отделение у 56% животных. При назначении 40 ЕД окситоцина в сочетании с 2 мл эстрофана (п=25)отделение последа зарегистрировано только у 32% коров. То есть, терапевтический эффект утеротона оказался выше окситоцина и эстрофана в 1,7 раза. Анализ дальнейшего состояния воспроизводительной функции коров показал, что назначение утеротона оказало положительное влияние на оплодотворяемость коров и позволило сократить продолжительность бесплодия в среднем на каждое животное (по сравнению с базовым вариантом лечения) на 14,2 дня.

Изучение эффективности применения тканевого биостимулятора Плацента активное начало в комплексной терапии коров с послеродовым эндометритом и субинволюцией матки проведено на 106 коровах в двух сериях опытов. В первой серии опытов при лечении коров с подострой и хронической субинволюцией матки (n=41) было определено, что наивысший лечебный эффект достигается при включении в схему комплексной терапии 4-кратного введения ПАН: на 1, 4, 7 и 10-е сутки лечения.

Научно-производственные испытания оптимальной схемы лечения выполнены на 50 животных, которые были распределены на две группы. Коровам первой группы (n=23) в составе комплексной терапии в качестве патогенетического средства парентерально иньецировали ПАН 4-кратно на 1-е, 4-е, 7-е и 10-е сутки лечения в дозе 20 мл, а коровам контрольной группы (n=27) 6 инъекций 7 %-ного раствора ихтиола на изотоническом растворе натрия хлорида в повышающе-понижающихся дозах. После первого курса лечения с применением ихтиолотерапии выздоровление наступило у 59,3%, а после второго - у 85,2%. При использовании в качестве средства патогенетической терапии ПАН лечебная эффективность одного курса составила 73,9%, а двух - 96,7% и оказалась выше, чем в контрольной группе соответственно в 1,25 и 1,14 раза. Продолжительность бесплодия у оплодотворенных животных после назначения ПАН была меньше, чем в контроле, на 15,9 дня.

При изучении эффективности препарата ПАН для лечения коров с послеродовым гнойно-катаральным эндометритом и острой субинволюцией матки (n=15) на фоне назначения симптоматической и этиотропной терапии определено, что после первого курса лечения с применением ихтиолотерапии выздоровление наступило у 42,8% животных, в то время как после 4-кратного назначения ПАН клинические признаки заболевания исчезли у 62,5% коров, что на 19,7% больше, чем в контроле. После повторного курса лечения количество здоровых животных в контрольной группе возросло до 71,4%, а в опытной до 87,5% или оказалось больше на 16,1%. Применение ПАН позволило сократить продолжительность бесплодия у каждой оплодотворенной коровы в среднем на 8,7 дня.

Можно считать, что препараты утеротон и ПАН являются высокоэффективными лечебными средствами при патологии родового акта и послеродового периода у молочных коров [27].

2.8 Клинико-эндокринологическое обоснование применения нового гонадотропного препарата фоллимаг для коррекции функциональной деятельности яичников и воспроизводительной способности высокопродуктивных молочных коров

Оценка гонадотропной активности нового отечественного гонадотропного препарата фоллимаг проведена в сравнении с аналогичным гонадотропным препаратом фоллигон производства фирмы «Интервет» - Голландия.

Установлено (табл.7), что концентрация прогестерона в крови бесплодных коров с гипофункцией яичников, проявляющейся анафрадизией, колебалась от 1,14 до 4,88 нМ/л и в среднем составила 2,99±0,28 нМ/л, эстрадиола-17 в - от 114,1 до 229,9 пМ/л (в среднем 163,5±9,69 пМ/л), тестостерона - от 1,28 до 3,32 нМ/л (в среднем 2,33±0,18 нМ/л) и тироксина - от 17,5 до 48,0 нМ/л (в среднем 32,3±2,62 нМ/л).

Через две недели после применения стандартного гонадотропного препарата фоллигон концентрация прогестерона в крови возрастает до 9,04±0,56 нМ/л, или в 3,02 раза. При этом отмечается некоторое снижение концентрации эстрадиола-17в (на 10,17%) и тестостерона (на 6,9%). Одновременно значительно активизируется гормонсинтезирующая функция щитовидной железы. Количество тироксина в крови возрастает с 32,3±2,62 нМ/л до 49,2±8,24 нМ/л, или в 1,52 раза.

Следовательно, препарат фоллигон обладает не только высокой гонадотропной, но и тиреотропной активностью. В совокупности такое действие приводит к нормализации репродуктивной функции животных.

У контрольных животных концентрация прогестерона в крови повысилась до 6,16±0,93 нМ/л, или в 2,06 раза при одновременном снижении содержания эстрадиола-17в и тестостерона. В то же время функциональная активность щитовидной железы осталась на низком уровне (27,1±2,46 нМ/л).

Характер гормональных изменений в организме коров после введения гонадотропного препарата фоллимаг аналогичен изменениям, свойственным стандартному препарату фоллигон (табл.7). Под влиянием данного препарата прогестеронсинтезирующая функция яичников у коров повысилась в 4,38 раза, гормоносинтезирующая функция щитовидной железы - в 1,27 раза при одновременном снижении концентрации в крови эстрадиола-17 в и тестостерона.

Таблица 7

Показатели содержания в крови коров половых и тиреоидных гормонов при гипофункции яичников и назначении гонадотропных препаратов

Таким образом, новый отечественный гонадотропный препарат фоллимаг по своему действию на физиологический статус коров не отличается от зарубежного аналога - фоллигона. Эти препараты, обладая специфическим действием на функцию гонад и щитовидной железы, через синтезируемые ими гормоны оказывают положительное активизирующее влияние на общие процессы обмена веществ в организме животных [8, 24].

Производственная оценка эффективности применения препарата фоллимаг для восстановления плодовитости коров с гипофункцией яичников была проведена в двух опытах. В начале на 172 коровах было изучено влияние разных доз фоллимага и фоллигона на репродуктивную функцию. Животные были распределены на шесть групп. Коровам первой группы (n=20) внутримышечно однократно вводили фоллигон в дозе 2 ИЕ на кг массы тела, второй (n=18) - тот же препарат в дозе 3 ИЕ/кг, третьей (n=16) - фоллимаг в дозе 2 ИЕ/кг, четвёртой (n=31) - фоллимаг в дозе 3 ИЕ/кг, коровы пятой группы (n=54) служили положительным контролем. Им двукратно с интервалом семь суток парентерально вводили по 10 мл тривитамина и проводили четыре сеанса трансректального массажа половых органов с интервалом 48 часов. Коровы шестой группы (n=33) лечению не подвергались и служили отрицательным контролем.

Установлено, что введение коровам с гипофункцией яичников высокоактивного гонадотропного препарата фоллигон в дозе 2 ИЕ/кг массы тела (в среднем 1 тыс. ИЕ на животное) индуцировало половой цикл с овуляцией фолликулов у 60% животных, а в дозе 3 ИЕ/кг (в среднем 1,5 тыс. ИЕ на животное) - у 83,3%. При этом у 8,3-20% животных была отмечена полиовуляция. В сравнении с положительным контролем показатели индукции половой цикличности фоллигоном оказались выше в 1,35-1,88 раза, а с отрицательным контролем - в 2,46-3,41 раза.

Парентеральное введение препарата фоллимаг в дозе 2 ИЕ/кг (в среднем 1 тыс. ИЕ на животное) индуцировало овуляцию фолликулов у 43,8% животных, что оказалось на уровне группы животных положительного контроля. Увеличение дозы препарата до 3 ИЕ/кг (1,5 тыс. ИЕ на животное) обеспечило овуляцию у 87,1% коров, что выше положительного контроля в 1,96 раза, а отрицательного - в 3,57 раза. Полиовуляция зарегистрирована у 3,7% животных.

Во второй серии опытов, выполненных на 86 коровах с гипофункцией яичников, были сформированы две группы. Животным одной группы (n=56) после постановки диагноза однократно внутримышечно был введён фоллимаг в дозе 3 ИЕ на кг массы тела, второй (n=30) - двукратно с интервалом 10 суток было введено по 10 мл тривитамина и проведён четырехкратный трансректальный массаж половых органов с интервалом 48 часов. В первой группе половая цикличность проявилась у 94,6%, а во второй - у 50,0 % животных. Эффективность использования препарата оказалось выше в 1,89 раза. За период наблюдения в опытной группе оплодотворилось 58,9% животных, тогда как в контроле только 40,0%. Разница в пользу фоллимага составила 18,9%.

Таким образом, новый очищенный отечественный гонадотропный препарат фоллимаг по своему специфическому действию не уступает зарубежному аналогу - препарату фоллигон. Оптимальной дозой препарата для восстановления плодовитости коров при гипофункции половых желез, проявляющейся полной депрессией их генеративной функции, следует считать 3 ИЕ на кг массы тела [18].

Оценка гормонопоэтической функции яичников коров после инъекции фоллимага показала, что для получения оптимальной реакции половых желез на вводимые гонадотропные препараты необходимо учитывать сохраняющуюся у животных спонтанную цикличность функциональной деятельности аденогипофиза и гонад и добиваться синергизма в биологическом действии экзогенных и эндогенных гонадотропинов. Исходя из полученных совместно с Н. Е. Богдановой данных, это время должно приурочиваться к последним суткам атрезии и первым двум суткам любой волны роста фолликулов (лучше третьей), которая регистрируется у коров через каждые 6-7 дней на протяжении каждого 21-дневного цикла независимо от функционального состояния репродуктивных органов. Введение экзогенных гонадотропных препаратов на фоне периодически возрастающего синтеза и инкреции эндогенных гонадотропинов обеспечивает наибольший эффект [19, 20, 21, 22, 23, 24, 28].

2.9 Повышение оплодотворяемости и профилактика эмбриональной смертности у коров

2.9.1 Применение утеротона для повышения оплодотворяемости коров

Известно, что технологические приемы, используемые при искусственном осеменении, оказывают стрессовое воздействие на организм коров и способствуют выделению из надпочечников адреналина, который блокирует выделение окситоцина гипофизом. Вследствие этого ослабляется моторика матки, снижается отрицательное давление в ее полости и затрудняется продвижение спермиев к месту оплодотворения яйцеклетки, что негативно отражается на результатах осеменения. В этой связи нами была изучена возможность использования в-адреноблокатора утеротон для повышения оплодотворяемости коров.

Установлено, что в конце феномена полового возбуждения в матке коров регистрируется отрицательное давление, величина которого в среднем составляет 11,24±0,94 мм водяного столба. Через 30 минут после введения препарата утеротон в дозе 10 мл значение отрицательного давления возрастает в среднем на 23,4% и достигает 13,84±0,76 мм водяного столба. Таким образом, назначение коровам препарата утеротон в стадию возбуждения полового цикла снимает эффект действия катехоламинов, что приводит к активизации сократительной функции матки и повышению в ее полости отрицательного давления.

Влияние назначения утеротона за 15-30 мин до осеменения на оплодотворяемость изучено на 48 коровах. Животным первой группы (n=16) вводили утеротон в дозе 10 мл (50 мг А.Д.В.), коровам второй (n=13) - в дозе 5 мл (25 мл А.Д.В.), животным третьей группы (n=19) препарат не назначали, и они служили контролем. Установлено, что в контрольной группе оплодотворяемость от первого осеменения составила 36,8%. Введение утеротона в дозе 10 мл повышает результативность осеменения коров на 19,4% по сравнению с контролем (до 56,2%), а в дозе 5 мл - на 17,0 % (до 53,8%). Несмотря на то, что доза вводимого препарата в опытных группах отличалась в два раза разница по оплодотворяемости составила лишь 2,4 % .

В следующем опыте была изучена эффективность использования утеротона для повышения оплодотворяемости коров в сочетании с синтетическим гонадолиберином - сурфагоном. Животным первой группы (n=56) за 15-30 мин до осеменения однократно внутримышечно вводили утеротон в дозе 5 мл, коровам второй группы (n=21) в эти же сроки вводили по 20 мкг препарата сурфагон, коровам третьей группы (n=68) иньекции сурфагона сочетали с иньекцией 5 мл утеротона. Животным четвертой группы (n=38) препараты не назначали, и они служили контролем.

Определено (табл.8), что введение утеротона повысило оплодотворяемость животных после первого осеменения в сравнении с контролем на 20,4%, сурфагона - на 15,0%, а сочетание утеротона с сурфагоном - на 25,5% .

Таблица 8

Эффективность применения утеротона и сурфагона для повышения

оплодотворяемости коров

Таким образом, введение препарата утеротон в дозе 5 мл за 15-30 мин до осеменения обеспечивает активизацию моторной функции матки и повышение оплодотворяемости коров на 17,0-20,4%. Сочетанное применение утеротона с сурфагоном повышает оплодотворяемость коров в 1,6 раза.

2.9.2 Применение фоллимага для повышения оплодотворяемости и профилактики эмбриональной смертности у коров

Опыты по изучению эффективности применения препарата фоллимаг для повышения оплодотворяемости и профилактики эмбриональной смертности проведены на коровах, многократно проявляющих половую цикличность и осеменяемых три и более раза. Включённым в опыт животным на 17-18 сутки после последнего осеменения однократно внутримышечно вводили фоллимаг в дозе 2 ИЕ на кг массы тела.

Установлено, что фоллимаг активизирует прогестеронсинтезирующую функцию яичников (содержание прогестерона в крови после введения препарата увеличивается с 8,2±0,12 нМ/л до 11,0±0,18 нМ/л, или на 34,1%) и гормонсинтезирующую функцию щитовидной железы (содержание тироксина в крови увеличивается с 33,2±1,22 нМ/л до 42,4±2,10 нМ/л, или на 27,7%), улучшает витаминный обмен, опосредованно влияет на показатели минерального, белкового и липидного обменов.

При клинико-гинекологическом контроле выявлены следующие результаты. Остались стельными от предыдущего осеменения 43,8% коров. Проявили половую цикличность 46,9%, из них оплодотворились 80% животных. Всего после назначения препарата оказались стельными 81,2%, а бесплодными - только 18,8% животных.

Таким образом, назначение коровам, многократно приходящим в охоту, за 3-4 дня до наступления предполагаемого очередного полового цикла препарата фоллимаг в дозе 2 ИЕ на кг массы тела повышает функциональную активность яичников и щитовидной железы, что способствует сохранению беременности на ранних этапах развития зародыша. У неоплодотворенных животных введение препарата обеспечивает наступление полноценной стадии возбуждения полового цикла и высокую их оплодотворяемость.

ВЫВОДЫ

1. Функциональное состояние органов репродуктивной системы у коров красно-пестрой породы при среднегодовой молочной продуктивности 6,0-6,7 тыс. кг в условиях доминирования силосно-концентратного типа кормления, привязно-выгульного содержания позволяет получить при системном ветеринарном контроле от каждых 100 коров 92-95 телят при их сохранности 97,5 - 98,5%. При нормальном течении родового акта и послеродового периода интервал от отела до плодотворного осеменения в среднем составляет 77-82 дня, индекс оплодотворения - 1,39-1,43, межотельный период - 362-367 дней.

2. Нарушения воспроизводительной функции у крупного рогатого скота регистрируются в виде абортов у 2,6 %, мертворождаемости - 2,9 %, патологии родового акта в форме задержания последа - 7,9-10,2%, послеродовых острых субинволюции матки и эндометритов - у 15,9 - 20,2%, хронической дисфункции матки - у 40,4-51,2 % и яичников - у 35,9-46,3% коров. Переболевание коров во время и после родов сопровождается в последующем снижением оплодотворяемости при первом осеменении с 64,4-68,1% до 40,5-42,7%, или в 1,59 раза, возрастанием индекса оплодотворения до 2,16 - 2,21, или в 1,55 раза, периода от отела до оплодотворения - до 128-136 дней, межотельного периода - до 413-421 дня, а продолжительности бесплодия - на 51-54 дня.

3. Интенсивность использования коров в воспроизводстве во многом определяется сроками завершения после родов инволюционных процессов в матке и восстановления гормональных механизмов овуляторной функции яичников. В условиях силосно-концентратного типа кормления и привязно-выгульного содержания животных инволюция матки завершается в течение полутора месяцев у 79,2% коров, двух месяцев, - у 83,0%, а у 17% животных спонтанного восстановления данного органа до нормального состояния не отмечено. Наиболее динамично восстановительные процессы в половых органах протекают у коров с молочной продуктивностью 4-6 тыс. кг.

4. Восстановление овуляторной функции яичников при нормальном течении инволюционных процессов в матке происходит в основном к 21-27-м суткам послеродового периода. Этому предшествуют три волны роста и атрезии фолликулов. Рост фолликулов в яичниках и овуляция сопровождаются активизацией функциональной деятельности щитовидной железы, увеличением синтеза трииодтиронина, контролирующего синтез аденогипофизом лютеинизирующего гормона и повышающего чувствительность тканевых структур яичников к действию гонадотропинов. Наиболее высокая функциональная активность яичников и щитовидной железы присуща коровам с высокой молочной продуктивностью в весенний сезон года.

5. Патологическое течение послеродового периода характеризуется задержкой восстановления генеративной и эндокринной функций яичников. Ко времени окончания послеродового периода очередная волна роста фолликулов завершается не овуляцией, а их кистозной атрезией. При этом расстройство функциональной деятельности органов половой системы у коров после родов возникает на фоне дисбаланса синтеза и метаболизма тиреоидных гормонов, пониженной секреции трииодтиронина.

6. Двукратное парентеральное введение коровам в дозе 20 мл за две недели до предполагаемых родов и в день отела тканевого биостимулятора Плацента активное начало обеспечивает повышение концентрации в крови в первые две недели послеродового периода эстрадиола в 1,52-1,81 раза и снижение содержания прогестерона в 2,15-2,45 раза. Положительное влияние препарата на синтез и метаболизм половых стероидов клинически проявляется снижением частоты акушерской патологии в 1,68-1,91 раза, повышением оплодотворяемости животных на 19,8% и сокращением продолжительности бесплодия у каждого оплодотворенного животного на 9,7 дня.

7. Четырехкратное подкожное введение препарата Плацента активное начало в дозе 20 мл с интервалом 72 часа в комплексе с этиотропной и симптоматической терапией обеспечивает выздоровление после двух курсов лечения 96,7% животных с подострой и хронической субинволюцией матки и 87,5% животных с острой формой субинволюции матки и гнойно-катарального эндометрита, при сокращении продолжительности бесплодия у каждой оплодотворенной коровы соответственно на 15,9 и 8,7 дня.