Гельминтозы крупного рогатого скота в республике Татарстан (эпизоотология, диагностика и терапия)

Наиболее эффективной оказалась флотационная смесь из насыщенных солей аммиачной селитры и хлорида цинка в соотношении 3:2 (р=1,53). С помощью этой смеси удалось выявить в среднем 67,5% заложенных яиц дикроцелий и 49,4% яиц фасциол.

При использовании в качестве флотационной жидкости насыщенных солей их трех ингредиентов - хлорида цинка, хлорида натрия и аммиачной селитры в соотношении 2:1:1 (р = 1,54) было выявлено 60,2% заложенных яиц дикроцелий и 44,6% яиц фасциол. С уменьшением плотности флотационных смесей также шло постепенное снижение диагностической эффективности метода.

Наиболее эффективной оказалась флотационная жидкость из смеси насыщенных растворов солей хлорида цинка, хлорида натрия и сахара в соотношении 2:1:1 (р=1,53). Использование этой флотационной жидкости позволило обнаружить в среднем 68,2% заложенных яиц дикроцелий и 50,2% яиц фасциол. При этом поверхностная пленка после центрифугирования оставалась чистой, нанесенные капли не подверглись кристаллизации в течение более 3-х часов.

При исследовании 887 проб фекалий крупного рогатого скота, из 12 неблагополучных по гельминтозам хозяйств, с помощью модифицированного метода были выявлены в 135 пробах (15%) яйца дикроцелий, в 129 (14%) - яйца фасциол, в 271 (26%) - яйца стронгилят пищеварительного тракта и в 64 пробах (7%) яйца трихоцефал.

По методу последовательных промываний удалось выявить всего в 16 пробах (2%) яйца дикроцелий, в 25 пробах (3%) яйца фасциол, в 105 пробах (11%) яйца стронгилят пищеварительного тракта. Яйца трихоцефал не были обнаружены ни в одном случае.

В совхозе «Мамадышский» при исследовании 25 коров с помощью модифицированного метода в 20-и пробах удалось обнаружить яйца фасциол (ИИ - 2-12 экз. в 1г фекалий), в 4-х парамфистом (1-7 экз.), в 18-и - дикроцелий (5-14 экз.), в 10-и - эуретрем (3-12 экз.), в 3-х - мониезий (2-9 экз.), в 18 - капсулы тизаниезий (12-23 экз.), во всех 25-и пробах - яйца стронгилят пищеварительного тракта (6-28 экз.), в 7-и - трихоцефал (2-6 экз.), в 3-х - капиллярий (2-5 экз.) и в 15-и - были выявлены яйца неоаскарисов (2- 7экз.).

Эффективность метода Щербовича уступала модифицированному методу и флотационная жидкость из тиосульфата натрия (р-1,4) была способна флотировать лишь часть тяжелых яиц фасциол и парамфистом. Поэтому только в пробах фекалий 10-и животных были обнаружены единичные яйца фасциол, 2-х пробах - парамфистом, 11-и - дикроцелий, 8-и - эуретрем, 14-и - тизаниезий, 22-х - стронгилят пищеварительного тракта, 2-х - капиллярий и 13-и - неоаскарисов. Яйца трихоцефал и мониезий в исследуемых пробах не были выявлены.

Диагностическая эффективность метода последовательных промываний была сравнительно ниже, и при его помощи лишь в 3-х пробах удалось выявить единичные яйца фасциол, в 4-х - дикроцелий, в 3-х - эуретрем, в 16-и - тизаниезий, в 22-и пробах - яйца стронгилят пищеварительного тракта. Яйца парамфистом, мониезий, трихоцефал, капиллярий и неоаскарисов не были обнаружены ни в одной пробе.

Таким образом, было установлено, что модифицированный копроскопический метод дает возможность диагностировать широкий круг возбудителей ассоциативных инвазий. Освободившиеся от фекальных масс яйца гельминтов после центрифугирования быстро всплывают в поверхностный слой. Благодаря высокой плотности флотационной смеси легко выявляются и тяжелые яйца фасциол и парамфистом (удельный вес 1,31-1,35), дикроцелий и эуретрем (удельный вес 1,3 - 1,32) и еще быстрее всплывают яйца с меньшим удельным весом - трихоцефал, мониезий, стронгилят пищеварительного тракта, капиллярий, неоаскарисов, а также капсулы тизаниезий.

Техника проведения модифицированного метода аналогична методу Щербовича. В качестве флотационной жидкости применяется смесь из трех ингредиентов - насыщенных солей хлорида цинка, хлорида натрия и сахара в соотношении 2:1:1.

2.2.2.1.4 Метод групповой экспресс-диагностики гельминтозов

крупного рогатого скота

С увеличением объема диагностических исследований, существующие лабораторные методы копроскопии не удовлетворяют практические запросы. В течение рабочего дня одним исследователем проводится не более 50 анализов. В целях повышения производительности труда нами был разработан способ групповой экспресс - диагностики гельминтозов крупного рогатого скота.

При проведении экспресс-метода трехингридиентная флотационная смесь готовится как при модифицированном копроскопическом методе. С каждой пробы пинцетом берут примерно 1г фекалий и кладут в стеклянную посуду (банку) емкостью до 3л. (от 10 до 100 проб). Затем взятые пробы заливают небольшим количеством воды и тщательно размешивают, после чего при постоянном помешивании добавляют воду малыми порциями до объема 2л. Взвесь фекалий фильтруют через металлическое сито размером ячеек 0,5Ч0,5 в другую банку емкостью 3л. Оставшийся на сите осадок промывают 0,5л воды. Затем взвесь повторно фильтруют через сито с размером ячеек 0,25Ч0,25 в чистую 3 литровую банку. Осадок на сите снова промывают 0,5л воды. Двукратно отфильтрованную взвесь отстаивают 10 мин, надосадочную жидкость, осторожно сливают, оставляя над осадком лишь небольшое ее количество. Таким образом, осадок промывают 3 - 5 раз обычным сливом воды. После последнего промывания примерно 50 мл осадка наливают в центрифужную пробирку и центрифугируют 1 - 2 мин. при 1500 об/мин. Затем надосадочную жидкость сливают, а к осадку добавляют комбинированной флотационной жидкости (смесь насыщенных солей хлорида цинка, хлорида натрия и сахара в соотношении 2:1:1, которая используется в модифицированном копроскопическом методе). Осадок тщательно взбалтывают до получения взвеси и снова центрифугируют в том же режиме. После прикасанием петли с поверхностной пленки взвеси снимают 3-х капель на предметное стекло для микроскопирования.

Сравнительное испытание экспресс-метода проводили параллельно методами последовательных промываний и модифицированным копроскопическим методом в 12-ти неблагополучных гуртах при исследовании 887 головы крупного рогатого скота.

Результатами исследований установили, что по методу последовательных промываний были выявлены в 16 пробах (2%) яйца дикроцелий, в 25 (3%) - яйца фасциол, в 105 (11%) - яйца стронгилят пищеварительного тракта, следовательно, в 4 гуртах были обнаружены яйца дикроцелий, в 6 - яйца фасциол и в 10 гуртах яйца стронгилят пищеварительного тракта. Яйца трихоцефал не были выявлены ни в одном случае.

С помощью модифицированного копроскопического метода в 135 пробах (15%) были обнаружены яйца дикроцелий, в 129 пробах (14%) - яйца фасциол, в 271 пробе (26%) - яйца стронгилят пищеварительного тракта и в 64 пробах (7%) - яйца трихоцефал.

Результаты модифицированного копроскопического метода и экспресс метода совпадали по каждой группе исследованных животных. Было установлено, что с помощью экспресс-метода в 7 гуртах были обнаружены яйца дикроцелиумов, в 7 - яйца фасциол, в 4 - яйца трихоцефал и во всех 12 гуртах были выявлены яйца стронгилят пищеварительного тракта. Для исследований животных одного гурта (от 10 до 100 проб) требовалось всего от 35 до 50 минут времени.

Таким образом, исследованиями установили, что разработанный способ экспресс - диагностики дает возможность в кратчайшие сроки определить степень инвазированности стад крупного рогатого скота. Этот способ может использоваться также при оценке эффективности дегельминтизации стад после применения антгельминтиков.

2.2.2.2 Усовершенствование серологической диагностики фасциолеза

Материалом для получения антигенов служили фасциолы собранные из желчных протоков печени крупного рогатого скота на Казанском мясокомбинате. Их собрали в термос с физиологическим раствором, нагретым до 37°С. Живых гельминтов, многократно промывали физиологическим раствором, до полного удаления желчи и кровяных сгустков и до отсутствия опалесцента в промывочной жидкости.

Для контроля специфичности и активности антигенов на конвейере мясокомбината при убое крупного рогатого скота установили здоровых, а также зараженных фасциолезом, дикроцелиозом и эхинококкозом. Во время убоя от них брали пробы крови, отделяли сыворотки и консервировали их сухой борной кислотой (2%) и хранили в холодильнике при 2-4°С.

При изыскании оптимальной технологии получения антигенов для РСК в целях выделения соматических экстрактов из фасциол и очищения от липидов использовали различные методы. На кутикулу гельминтов воздействовали ацетоном, диметилсульфоксидом, эфиром и комбинированным способом, а также разрушали ультразвуком. Для очищения антигенов от общих белковых фракций применяли центрифугирование, замораживание и оттаивание и диализ.

Исследованиями установили, что наиболее высокую специфичность и диагностическую эффективность проявил фасциоловый антиген, полученный комбинированным методом изготовления. Этот диагностикум в РСК в разведении 1:20, с позитивной сывороткой фасциол в разведении 1:20 реагировал на 4 креста. С негативными сыворотками в разведениях 1:5 и 1:10 реакции были отрицательными.

При контроле негативными, гомологичными и гетерогенными сыворотками крови испытуемый антиген обладал специфичностью. При исследовании 50 сывороток от здоровых животных, 22 сывороток от зараженных эхинококкозом и 20 сывороток от зараженных дикроцелиозом, результаты РСК были отрицательными. Все 25 сывороток, полученные от инвазированного фасциолами крупного рогатого скота, показывали позитивные результаты в разведениях сывороток 1:10 и 1:20 на 4 креста.

В другом опыте, при исследовании 97 сывороток полученных от здоровых животных результаты РСК с антигеном фасциол были отрицательными. При исследовании 20 сывороток от крупного рогатого скота зараженного дикроцелиями (от 100 до 500 и более экз.) в 19 пробах (95%) были получены отрицательные результаты. Одна проба (5%) показывала сомнительный результат в РСК (1:5 ++). Было установлено, что количество дикроцелий в печени этого животного достигало до 1 тыс. экз. Исследованиями 10 проб сывороток от крупного рогатого скота зараженного эхинококками установили, что в РСК с антигеном фасциол реагировали отрицательно 9 проб (90%). Одно животное (10%), у которого в печени и в легких были 12 крупных ларвоцист, показал позитивный результат в РСК с антигеном фасциол (1:20 +++).

В производственных условиях в 4-х благополучных по фасциолезу хозяйствах исследовали 119 сывороток крови крупного рогатого скота в РСК, паралельно пробы фекалий от них копроскопическими методами. Было установлено, что во всех исследованных пробах яйца фасциол не были обнаружены, а результаты РСК также были отрицательными, что показывал специфичность испытуемого диагностикума.

Дальнейшее испытание антигена фасциол в РСК продолжили при исследовании 1400 сывороток крови от животных из 10 неблагополучных по фасциолезу хозяйств 3-х районов РТ. Также параллельно исследовали пробы фекалий от этих животных копроскопическими методами.

Результаты исследований показали, что при использовании РСК было выявлено 194 зараженных фасциолами животных (16,1%). Методом последовательных промываний было обнаружено всего 23 (1,9%) инвазированных. При использовании модифицированного копроскопического метода было выявлено 156 (13%) зараженных фасциолами крупного рогатого скота.

Таким образом, установлено, что в неблагополучных по фасциолезу хозяйствах разрешающая способность РСК с антигеном фасциол значительно превосходит копроскопические методы, что особенно отмечается при остром фасциолезе.

Антиген фасциол для ИФА готовили также комбинированным методом. Для дальнейшей очистки антигена использовали метод ультрацентрифугирования. При этом диагностикум очистился от примесей высокомолекулярных компонентов, в том числе и от белков хозяина, присутствующих в неочищенных экстрактах.

Диагностическую эффективность ИФА в сравнении с РСК испытали при исследовании сывороток крови от инвазированных фасциолами животных. На Казанском мясокомбинате нами были получены 22 сыворотки крови от крупного рогатого скота, у которых в желчных протоках печени паразитировали от 1 до 15 экз. фасциол. Исследованиями установили, что при ИИ даже одной фасциолой, все 6 животных реагировали положительно в ИФА на фасциолез. Титры антител у двух голов составляли 1:400, а у четырех - 1:800. При исследовании 6 сывороток крови крупного рогатого скота, зараженного двумя фасциолами - 2 пробы показали позитивный результат в титре 1:400, 2 пробы - в титре 1:1600, а 2 - реагировали отрицательно. При ИИ тремя фасциолами, все 3 пробы реагировали положительно, из них 2 пробы - в титре 1:1600, а одна - 1:800. Аналогичные результаты были получены при ИИ четырьмя фасциолами. При этом 2 пробы реагировали положительно в титре 1:1600 и 1 проба - в титре 1:800. 4 животных, спонтанно зараженных фасциолами в количестве от 6 до 15 экз., также реагировали положительно в ИФА, а титры антител у них были выше - у трех - 1:1600, а у одного - 1:3200.

Исследованиями установили, что из 22 сывороток крупного рогатого скота спонтанно зараженного фасциолами в количестве от 1 до 15 экз. положительно в ИФА реагировали 20 проб (90,9%). В РСК положительные показания отметили у 18 проб (81,8%).

При исследовании 37 головы молодняка до 2-х лет и 56 коров, свободных от гельминтов, были получены отрицательные результаты ИФА.

В опыте, проведенном на Казанском мясокомбинате из 48 зараженных фасциолезом коров в остром течение инвазии, в ИФА положительно реагировали 46 (95,8%), а в РСК - 44 головы (91,7%). При исследовании 56 взрослых животных, инвазированных половозрелыми фасциолами, в ИФА положительные показания отметили у 53 голов (94,6%). В РСК позитивные результаты были получены у 51 (91,1%) крупного рогатого скота.

При исследовании сывороток крови 32 животных зараженных дикроцелиями позитивные результаты ИФА на фасциолез были отмечены у 2 - х (6,2%), а в РСК у 1 головы (3,1%). Из исследованных 36 головы крупного рогатого скота, инвазированного эхинококками, позитивные показания ИФА отметили у 2-х (5,6%), а в РСК - у 1 животного (2,8%).

Таким образом, установлено, что диагностическая эффективность ИФА при остром течении фасциолеза достигает до 95,8%, а при хроническом течении - 94,6%, а эффективность РСК составляет 91,7% и 91,1% соответственно. У некоторых зараженных дикроцелиями и эхинококками животных при исследовании сывороток крови в ИФА и РСК с антигеном фасциол могут быть перекрестные реакции (от 2,8 до 6,2%).

2.2.2.3 Специфичность и диагностическая эффективность реакции Кацони при эхинококкозе крупного рогатого скота

Изучение специфичности и диагностической эффективности разных модификаций реакции Кацони проводили на Казанском и Нурлатском мясокомбинатах на 760 головах крупного рогатого скота. Предназначенных для убоя животных разделили на 9 групп и вводили внутрикожно цельную (реакция Кацони), или разные разведения эхинококковой жидкости (от 1:1 до 1:100). После читки реакции (через 2-3 часа после введения аллергенов) животных убивали и проводили ветеринарно-санитарную экспертизу внутренних органов.

После убоя 114 голов крупного рогатого скота, которым была введена цельная эхинококковая жидкость, 62 животных оказались здоровыми, 21 - были инвазированы эхинококковыми пузырями, 7 - фасциолами, 7 - дикроцелиумами, а у 9 голов крупного рогатого скота были обнаружены абсцессы в печени и у 8 - плевриты. В этой группе утолщение кожной складки (УКС) у здоровых животных колебалось в пределах от 3-х до 8мм, а при эхинококкозной инвазии оно варьировало от 10 до 28мм. У животных, зараженных фасциолами, этот показатель колебался в пределах 6 - 17мм, дикроцелиями - 3 - 7мм, а при абсцессах печени и плевритах составил 3 - 6мм. Аналогичные результаты были получены и при введении эхинококковой жидкости разведенной в соотношении 1:1.

При разведении эхинококковой жидкости в соотношении 1:3 с физиологическим раствором отметили заметное повышение специфичности реакции Кацони. При этом у здоровых животных УКС не превышало 2мм. У зараженных эхинококками этот показатель колебался в пределах 5 - 12мм, а у инвазированных фасциолами и дикроцелиями, пораженных абсцессами печени и плевритами он также не превышал 2мм.

Наиболее специфичным и диагностически эффективным оказался аллерген из эхинококковой жидкости в разведении 1:3 (1 часть эхинококковой жидкости, 1,5 частей физиологического раствора и 1,5 части глицерина). При таком разведении аллергена УКС у здоровых животных, а также у инвазированных фасциолами и дикроцелиями и у больных абсцессами печени и плевритами не превышало 2мм. У животных зараженных эхинококковыми пузырями этот показатель колебался в пределах 7 - 14мм.

При более высоких разведениях эхинококковой жидкости (1:5 и более) специфичность реакции Кацони заметно повышалась, но при этом резко снижалась выраженность местной реакции. Так, при разведении 1:5 с физиологическим раствором у инвазированных эхинококковыми пузырями животных УКС составило всего 3 - 6мм, при разведениях 1:10, 1:25, 1:50 и 1:100 этот показатель был равен 2 - 4мм, 2 - 3мм, 1 - 3мм и 1 - 2мм соответственно.

Проведенными исследованиями установили, что реакция Кацони с цельной эхинококковой жидкостью и при разведении ее физиологическим раствором в соотношении 1:1 может дать неспецифические позитивные показания у животных при фасциолезе, дикроцелиозе, а также при абсцессах печени и плевритах. УКС у здоровых животных колеблется в пределах 3 - 8мм.

Наиболее специфичным и диагностически эффективным является аллерген из эхинококковой жидкости, разведенной в соотношении 1:3 с физиологическим раствором и глицерином.

В производственных условиях неблагополучном по эхинококкозу Учхозе КГАВМ 345 коровам с помощью безыгольного инъектора «Овод» внутрикожно вводили эхинококковый аллерген, изготовленный по нашей технологии, в дозе 0,2 мл. Учет и оценку модифицированной реакции Кацони проводили через 2-3 часа после введения аллергена.

Результатами исследований были выявлены 23 (6,7%) положительно реагирующих животных. При учете реакции на месте инъекции образовалась разлитая, тестоватой консистенции припухлость. При этом у 4-х животных утолщение кожной складки составило 8мм, у 6-и - 9мм, у 4-х - 10мм, у 2-х - 13мм, у 3-х - 16мм, а у 4-х коров оно достигало до 18мм.

Трое животных, положительно реагирующие на эхинококковый аллерген из этой группы (№ 0632 - 18мм, № 5928 - 10мм и № 6106 - 8мм), были убиты на санитарной бойне Казанского мясокомбината.

При ветеринарно-санитарной экспертизе, в легких и печени убитых животных были обнаружены эхинококковые пузыри величиной от 12 до 42мм. У коровы № 0632 они насчитывались в количестве 14 экз., у № 5928 - 8 экз., а у животного № 6106 были обнаружены 7 экз. ларвоцист.

Аналогичные исследования были проведены в Атнинском, Буинском и Кукморском районах РТ на 540 головах крупного рогатого скота, где с помощью модифицированной реакции Кацони были выявлены 37 положительно реагирующих на эхинококкоз животных.

Таким образом, результаты исследований показали, что реакция Кацони с модернизированным аллергеном является более специфичным тестом, которая позволяет определить истинную эпизоотологическую ситуацию в хозяйствах по эхинококкозу крупного рогатого скота.

2.2.3 Изыскание и испытание новых средств терапии

гельминтозов

2.2.3.1 Эффективность фебтала гранулята при ассоциативных

инвазиях крупного рогатого скота

Для проведения опыта были подобраны спонтанно инвазированные фасциолами и стронгилятами пищеварительного тракта 25 телок в возрасте 18 - 20 месяцев. Они были разделены на пять групп по 5 голов в каждой.

Телкам первой и второй групп назначили фебтал гранулят в дозе 45 мг/кг (10 мг/кг по ДВ) индивидуально перорально однократно. Животным второй группы дополнительно вводили подкожно тривит в дозе 5 мл и Е-селен из расчета 1мл на 50кг живой массы. Телкам третьей и четвертой группы испытуемый препарат назначили в дозе 90 мг/кг (20 мг/кг по ДВ). Животным четвертой группы также вводили тривит и Е-селен в тех же дозах, что во второй группе. Животные пятой группы служили контролем. Эффективность препаратов учитывали через 30 дней после их введения.

Было установлено, что после применения фебтала гранулята в дозе 45 мг/кг, от стронгилят пищеварительного тракта освободились все 5 телок, а яйца фасциол не выделяли 4 животные. У пятой телки количество яиц фасциол снизилось на 91,3% (с 112,5±7,5 до 9,8±1,2 экз. в 1г фекалий). При назначении испытуемого препарата в сочетании с тривитом и Е-селеном была получена 100% эффективность против фасциол и стронгилят пищеварительного тракта. В третьей группе, где фебтал гранулят применялся в дозе 90 мг/кг и в четвертой группе, где препарат назначался в сочетании с тривитом и Е-селеном яйца фасциол и стронгилят пищеварительного тракта также не выделялись.

ИИ животных контрольной группы в период опыта практически не изменялась и среднее количество яиц фасциол и стронгилят в г фекалий в начале опыта составили 129,2±8,7 и 227,2±9,6 экз., а в конце - 127,4±7,5 и 232,5±8,7 экз. соответственно.

В другом опыте были подобраны 15 выбракованных по разным хозяйственным причинам коров, спонтанно инвазированные фасциолами и стронгилятами пищеварительного тракта. Их разделили на две равноценные группы по 6 голов в каждой. Коровам первой группы назначили фебтал гранулят в дозе 45 мг/кг, второй - в дозе 90 мг/. Животным обеих групп одновременно с антгельминтиком вводили подкожно тривит в дозе 5 мл и Е-селен из расчета 1мл на 50кг живой массы. Три коровы третьей группы служили контролем. Эффективность применения разных доз фебтала гранулята в сочетании с препаратами, повышающими неспецифическую резистентность организма, учитывали по результатам убоя через 30 - 60 дней после дегельминтизации.

Установили, что в первой и второй опытных группах, где испытуемый препарат применялся в дозах 45 и 90 мг/кг в сочетании с препаратами, повышающими неспецифическую резистентность организма, был получен 100% ЭЭ и ИЭ при фасциолезе, т.е. при убое животных в желчных ходах печени живых гельминтов не было обнаружено. При стронгилятозах пищеварительного тракта также был получен 100% эффективность, и при убое животных в стенках тонкого и толстого отделов кишечника гельминты не были выявлены, однако хроническое воспаление мышечной оболочки кишок сохранилось.

У коров контрольной группы желчные ходы печени были обизвествлены и в них были обнаружены в среднем 12,2±3,3 экз. F. hepatica, а в тонких и толстых кишках выявлены нематоды из подотряда Strongylata в среднем, по 876,5±14,3 экз.

Таким образом, результатами исследований установлено, что при смешанной инвазии крупного рогатого вызванной фасциолами и стронгилятами пищеварительного тракта оптимальной дозой фебтала гранулята 22% является 45 мг/кг (10 мг/кг по ДВ) в сочетании с препаратами, повышающими неспецифической резистентности организма - тривитом (5 мл) и Е-селеном (1 мл на 50кг).

2.2.3.2 Эффективность фезола при ассоциативных инвазиях

крупного рогатого скота

Для проведения опыта из гурта 215 коров были подобраны 55 голов естественно инвазированных фасциолами (в среднем 13,4±2,8 экз. яиц в 1г фекалий) и стронгилятами пищеварительного тракта (в среднем 234,6±21,2 экз. яиц в 1г фекалий). В пробах фекалий у коров обнаруживались также и единичные яйца дикроцелий, эуретрем, мониезий, тизаниезий, трихоцефал, капиллярий и неоаскарисов.

Опытные животные были разделены на 11 групп по 5 коров в каждой. Коровам первой группы назначили внутрь альбен (50 мг/кг), второй - вермитан 20% гранулят (50 мг/ кг), третьей - клозальбен-10 (80,0 мг/кг), четвертой - подкожно ивомек плюс (0,02 мг/кг), пятой, шестой и седьмой группам - внутрь фебтал гранулят 22% (34, 60 и 90 мг/кг соответственно), а животным восьмой, девятой и десятой групп - внутрь фезол 70% (15, 20 и 25 мг/кг, соответственно). Коровы одиннадцатой группы служили контролем. Копроскопические исследования проводили до и через 30 дней после применения антгельминтиков

Исследованиями установлено, что альбен в дозе 50 мг/кг живой массы проявил 80% ЭЭ, и 92,7% ИЭ при фасциолезе, а также 80% ЭЭ и 97,3% ИЭ при стронгилятозах пищеварительного тракта. Вермитан в дозе 50 мг/кг показывал 80% ЭЭ и 91% ИЭ при фасциолезе и 80% ЭЭ и 96,5% ИЭ при стронгилятозах. После применения клозальбена - 10 в дозе 80 мг/кг, ивомека плюс - 0,02 мг/кг, ЭЭ препаратов составили 100% и от смешанных инвазий освободились все опытные коровы.

Фебтал гранулят в дозе 34 мг/кг проявил 60% ЭЭ при фасциолезе и 80% ЭЭ при стронгилятозах. ИЭ препарата при фасциолезе составила 70,9%, при стронгилятозах - 94%. При применении испытуемого препарата в дозе 60 мг/кг ЭЭ препарата при фасциолезе и стронгилятозах равнялась 80%, а ИЭ при фасциолезе вырос до 84%, а при стронгилятозах - до 95,7%. Фебтал гранулят в дозе 90 мг/кг показывал 100% ЭЭ.

Фезол в дозе 15 мг/кг проявил 80% ЭЭ при фасциолезе и стронгилятозах и от гельминтов освободилось четверо животных. У пятой коровы количество яиц фасциол в 1г фекалий снизилось на 92,3%, а яиц стронгилят - на 97,9%. При применении фезола в дозах 20 и 25 мг/кг живой массы все опытные животные освободились от фасциол и стронгилят пищеварительного тракта.

В третьей, четвертой, седьмой, девятой и десятой опытных группах животных, где применялись соответственно клозальбен (80 мг/кг), ивомек плюс (0,02 мг/кг), фебтал гранулят (80 мг/кг) и фезол (20 и 25 мг/кг) в пробах фекалий также не обнаруживались и яйца дикроцелий, эуретрем, мониезий, тизаниезий, трихоцефал, капиллярий и неоаскарисов. В первой, второй, пятой, шестой и восьмой группах, где были использованы соответственно альбен (50 мг/кг, вермитан (50 мг/кг), фебтал (34 и 60 мг/кг) и фезол (15 мг/кг) были выявлены единичные яйца и других ассоциативных инвазий.

У животных контрольной группы в пробах фекалий среднее количество выделяемых яиц фасциол и стронгилят пищеварительного тракта практически не изменялись и также обнаруживались яйца других смешанных инвазий.

Исследованиями установлено, что при ассоциативных инвазиях крупного рогатого скота наиболее эффективными являются клозальбен - 10 (80 мг/кг) и ивомек плюс (0,02 мг/кг) в рекомендуемых инструкциями дозах. При фасциолезе и при других микстинвазиях требуется увеличить дозу фебтала гранулята до 90 мг/кг (20 мг/кг по ДВ) живой массы.

Оптимальной терапевтической дозой фезола при фасциолезе, стронгилятозах пищеварительного тракта и при других ассоциативных инвазиях крупного рогатого скота является 20 мг/кг (14 мг/кг по ДВ).

Производственное испытание антгельминтной эффективности фезола при фасциолезе крупного рогатого скота проводили в марте-апреле 2009 года в СХКП «Кунгер» Атнинского района Республики Татарстан. В этих целях использовали 104 коровы дойного гурта и 12 выбракованных коров из группы откорма спонтанно зараженных фасциолами (ЭИ - 38,6%). В результате гельминтоовоскопического обследования животных дойного гурта методами последовательных промываний и модифицированным копроскопическим методом яйца фасциол были обнаружены у 62 коров, т. е. ЭИ дойного гурта составила 59,6%. Из группы откорма из 12 животных были заражены фасциолами 11 коров (ЭИ 91,7%). Всем коровам дойного гурта и из группы откорма назначили фезол в дозе 20 мг/ кг (14 мг/ кг по ДВ) индивидуально с кормом.

В дойном гурте животных антигельминтную эффективность фезола рассчитывали по типу «Критический тест» копроовоскопическими методами, сравнивая количество яиц гельминтов в фекалиях до и через 30 дней после лечения подопытных животных. В группе откорма, оценку эффективности фезола определяли по типу «Контрольный тест» путем убоя подопытных животных (11 голов), через 30 - 60 дней, по результатам гельминтологической вскрытий печени.

Полученные данные при производственном испытании фезола в дозе 14 мг/кг по ДВ показали достаточно высокую эффективность препарата против имагинальных форм фасциол. В дойном гурте по копроскопическим исследованиям ЭЭ препарата составила 98,1%, ИЭ - 98,7%.

При гельминтологическом вскрытии печени выбракованных животных у одной коровы обнаружили живую фасциолу. Остальные 10 животных были свободны от гельминтов. В этой группе получена ЭЭ фезола составила 91,7%, и ИЭ - 98,2%.

Таким образом, производственные испытания показали, что оптимальной терапевтической дозой фезола при фасциолезе крупного рогатого скота является 14 мг/кг по ДВ.

2.2.3.3 Влияние фезола и фебтала гранулята на гематологические

и иммунологические показатели крупного рогатого скота

Из 25 спонтанно инвазированных фасциолезом и стронгилятозами пищеварительного тракта коров были сформированы 5 опытных групп, по 5 голов в каждой.

Животным первой и второй групп перорально назначили фезол в дозах 35 и 50 мг/кг соответственно. Коровам третьей и четвертой группы вводили внутрь фебтал гранулят 22% в дозах 60 и 90 мг/кг. Животные пятой группы служили контролем и они не получали антгельминтиков. Кровь для гематологических и иммунологических исследований брали до и через 7, 14, 21 и 28 дней после дегельминтизации.

Результаты исследования крови показали, что через 7 дней после применения антгельминтиков отметили незначительное снижение количества эритроцитов в крови, но спустя 14 дней их число стало повышаться, и на 28-е сутки количество эритроцитов было выше фоновых показателей в первой группе в 1,34 раза, во второй - 1,32, в третьей - 1,30, а в четвертой в 1,32 раза, то есть во всех опытных группах произошло достоверное повышение количества эритроцитов, и оно приблизилось к физиологической норме здоровых животных. У животных контрольной группы число эритроцитов в ходе опыта оставалось примерно на одном уровне (4,33±0,45 - 4,34±0,56).

Количество лейкоцитов у зараженных ассоциативными инвазиями животных оставалась сравнительно высокой, и она колебалась в пределах от 11,21±0,53 до 11,95±0,65%. Однако в конце срока исследования (через 28 дней) у дегельминтизированных животных этот показатель в первой группе снизился в 1,28, во второй - 1,3, в третьей - 1,45, а в четвертой - 1,25 раза, и она приблизилась к физиологической норме здоровых животных. В контрольной группе животных количество лейкоцитов в крови оставалось на высоких пределах (11,64±0,67 - 12,14±0,62%) в течение всего периода опыта.

Содержание гемоглобина в крови коров до начала опыта в первой группе составило 8,56±0,56 г%, второй - 8,23±0,34, третьей - 7,87±0,43 и в четвертой - 8,74±0,62 г%. Через 7 дней после применения антгельминтиков уровень гемоглобина несколько снизился, но спустя 14 дней его количество в крови начало повышаться, а максимальное значение его уровня было установлено к концу срока исследования (через 28 дней) и она составила в первой группе 10,12±0,4 г%, второй - 9,93±0,67, третьей - 10,23±0,42 и в четвертой группе - 9,89±0,47 г%. У животных контрольной группы содержание гемоглобина в крови варьировало в небольших пределах (от 8,76±0,43 до 8,83±0,36 г%).

Скорость оседания эритроцитов (СОЭ) в крови у коров во всех четырех опытных группах к 7 дню после применения фезола и фебтала гранулята стала несколько выше фонового показателя и в первой группе она равнялась 1,89±0,23 мм/час, второй - 1,93±0,15, третьей - 1,98±0,26, а в четвертой группе - 1,97±0,32 мм/час. Через 14 дней показатели СОЭ начали постепенно уменьшаться, а наиболее заметное их снижение произошло на 28 сутки, и в первой группе она составила 0,93±0,23 мм/час, второй - 0,87±0,27, третьей - 0,91±0,18 и в четвертой группе 0,91±0,18 мм/час. В контрольной группе коров показатели СОЭ в крови в ходе опыта оставались примерно одинаковом уровне (1,78±0,27 - 1,76±0,24 мм/час).

В лейкограмме крови число базофилов и эозинофилов во всех опытных группах животных достоверно снижалось, а в контрольной группе их количество оставалось на исходном уровне. Количество юных нейтрофилов в составе крови к концу опыта в первой и третьей группах равнялось к нулю, а во второй и четвертой группах оно составило 0,2±0,21 и 0,3±0,12% соответственно. Число палочкоядерных и сегментоядерных нейтрофилов и моноцитов в крови у животных всех опытных групп к 28 дню достоверно уменьшилось по сравнению с фоновыми показателями, а в контрольной группе их количество оставалось на уровне исходных данных. Количество лимфоцитов в опытных группах после применения антгельминтиков и в контрольной группе, существенных изменений не перетерпело.

У коров спонтанно инвазированных фасциолезом и стронгилятозами пищеварительного тракта, после их дегельминтизации выявлялись существенные изменения в содержании Т- лимфоцитов в периферической крови. Было установлено, что через 7 дней после применение фезола и фебтала гранулята происходит достоверное снижение количество Т- клеток. В нашем опыте, в первой группе животных оно снизилось от исходного в среднем на 12,2%, во второй - на 13%, в третьей - 12,8%, а в четвертой группе на 15,2%. Однако к 14 дню после дегельминтизации уровень Т- лимфоцитов у опытных животных повысилась выше фоновых показателей и она колебалась в пределах 36,8±0,65 - 38,2±0,74%, а через 28 дней она уже достигла до максимальных значений (38,9±0,53 - 40,6±0,47%) и приблизилась к уровню физиологических норм здоровых животных.

Содержание Т- лимфоцитов у животных контрольной группы, не перетерпело каких - либо заметных изменений и оно колебалось в пределах 32,3±0,64 - 34,5±0,45% в течение всего периода опыта.

Относительное содержание В-лимфоцитов во всех опытных группах через 7 дней после применения антгельминтиков также несколько снизилось, но через 14 дней оно приравнивалось к уровню фоновых показателей (18,7±0,53 - 19,4±0,48%), а спустя 28 дней после применения фезола и фебтала уровень В-клеток достигла до физиологической нормы (20,4±0,74 - 21,5±0,56%).

В контрольной группе животных уровень В- лимфоцитов оставался примерно в тех значениях в течение всего периода исследований и он колебался в пределах от 18,2±0,35 до 18,7±0,46%.

Таким образом, исследованиями установлено, что при спонтанном заражении крупного рогатого скота ассоциативными инвазиями дегельминтизация их фезолом (35 и 50 мг/кг) и фебталом гранулятом (60 и 90 мг/кг) через 7 дней после их применения вызывает кратковременное снижение количества эритроцитов, гемоглобина и уровня Т- и В- лимфоцитов, а также некоторое повышение СОЭ, количества лейкоцитов, эозинофилов, нейтрофилов и моноцитов. Через 14 дней после применения антгельминтиков эти показатели приближаются к уровню фоновых, а спустя 28 дней наблюдается достоверное повышение количества эритроцитов, гемоглобина и уровня Т- и В- лимфоцитов, а также снижение СОЭ, количества эозинофилов, лейкоцитов, нейтрофилов и моноцитов.

2.2.3.4 Эффективность разных доз новой фосфорной соли пиперазина и фезола при неоаскариозе телят

С целью титрации оптимальной терапевтической дозы новой фосфорной соли пиперазина и фезола были проведены два опыта на 60 спонтанно инвазированных неоаскариозом телятах 1 - 2 месячного возраста.

В первом опыте животные были разделены на 6 групп по 5 голов в каждой. Телятам первой, второй, третьей и четвертой групп была назначена соответственно фосфорная соль пиперазина в дозах 0,1; 0,2; 0,3 и 0,4 г/кг живой массы однократно. Животным пятой группы был применен пиперазин гексагидрат в дозе 0,5 г/кг. Эффективность разных доз испытуемого препарата учитывали по результатам исследований фекалий животных до и через 7 дней после введения. Телята шестой группы служили контролем.

Фосфорная соль пиперазина в дозе 0,1 г/кг живой массы проявил 40% ЭЭ, а у трех телят количество яиц неоаскарисов в 1г фекалий снизилось в среднем на 73,1%. Испытуемый препарат в дозе 0,2 г/кг показывал 80% ЭЭ, а в дозах 0,3 и 0,4 г/кг был получен 100% эффективность. При применении пиперазин гексагидрата в дозе 0,5 г/кг, также все опытные животные освободились от гельминтов. У животных контрольной группы наблюдали лишь незначительное снижение выделения яиц неоаскарисов.

Во втором опыте 30 телят разделили на 6 групп по 5 голов в каждой. Животным первой, второй и третьей групп назначили фезол однократно в дозах 2,5; 3,0 и 3,5 мг/кг живой массы по ДВ соответственно. Телятам четвертой и пятой групп дали фебтал гранулят однократно в дозах 7,5 и 10,0 мг/кг по ДВ соответственно. Телята шестой группы служили контролем.

Результаты исследований показали, что фезол в дозе 2,5 мг/кг по ДВ проявил 60% ЭЭ, а у двух телят количество яиц неоаскарисов в 1г фекалий снизилось на 83 %. При применении испытуемого препарата в дозе 3мг/кг по ДВ была установлена 80%, а у пятого теленка количество яиц неоаскарисов в 1г фекалий снизилось в среднем на 95,3%. Фезол в дозе 3,5 мг/кг по ДВ проявил 100% эффективность. После применения фебтала гранулята в дозе 7,5 мг/кг была получена 80% ЭЭ, а у пятого теленка количество яиц неоаскарисов уменьшилось на 95,7%. Фебтал гранулят в дозе 10,0 мг/кг по ДВ показывал также 100%. В контрольной группе животных наблюдали незначительное снижение яиц неоаскарисов.

Таким образом, установлено, что при дегельминтизации телят от неоаскариоза, терапевтической дозой новой фосфорной соли пиперазина является 0,3 г/кг живой массы, а фезола - 5 мг/кг (3,5 мг/кг по ДВ) однократно.

3 ОБСУЖДЕНИЕ

Дано обсуждение результатов собственных исследований и данных литературы по эпизоотологии, терапии и профилактике гельминтозов крупного рогатого скота.

ВЫВОДЫ

1. На территории Республики Татарстан у крупного рогатого скота установлено 35 видов гельминтов, в том числе из класса трематод - 5, цестод - 6, а наибольшая их часть - 24 вида отнесены к классу нематод. Из них 3 вида гельминтов (Paramphistomum ichikawai, Bunostomum trigonocephalum и Capillaria bovis) зарегистрированы нами в республике впервые.

2. У крупного рогатого скота наибольший удельный вес занимают паразитарные системы эхинококкоза (4,7 - 9,3%) и стронгилятозов пищеварительного тракта (3,4 - 69,4%). Значительная доля приходиться паразитарным системам фасциолеза (2,0 - 5,6%) и дикроцелиоза (2,0 - 6,2%).

2. В условиях РТ у крупного рогатого скота установлены пять условных зон паразитарной системы фасциолеза: благополучная (2 района), слабого (до 2% - 9 районов), умеренного (до 5% - 12 районов), сильного инвазирования (от 10 до 36% - 10 районов) и зона периодических вспышек (до 10% - 10 районов);

Определены также три условные зоны паразитарной системы дикроцелиоза: слабого (до 5% - 16 районов), умеренного (от 5 до 15% - 16 районов) и сильного инвазирования (от 15 до 55,6% - 10 районов);

Установлены три условные зоны паразитарной системы эхинококкоза: слабого (до 3% - 13 районов); умеренного (от 3 до 10% - 14 районов) и сильного инвазирования (от 10 до 53,5% - 16 районов).

3. Мониторинг эпизоотической ситуации и составление эпизоотических карт по паразитарным системам фасциолеза, дикроцелиоза и эхинококкоза животных, являются важным звеном для составления прогноза развития гельминтологической ситуации в районах республики.

4. На территории РТ гельминтами (различными видами стронгилят, фасциолами, дикроцелиями, эхинококками и др.) заражены в среднем 37,3% крупного рогатого скота. Одновременное паразитирование нескольких видов гельминтов (от 2-х до 8) регистрируется у 31,6% инвазированных животных.

5. Сочленами паразитоценоза у крупного рогатого скота являются стронгилята пищеварительного тракта, фасциолы, дикроцелии, парамфистомы, эуретремы, диктиокаулы, трихоцефалы, а также личинки эхинококков и др. Наиболее часто встречаются ассоциации из двух сочленов: фасциолы - стронгилята, дикроцелии - стронгилята и личинки эхинококков - стронгилята.

6. Неоаскариоз телят распространен в 64,7% обследованных хозяйствах РТ. Наиболее высокая ЭИ (57,1 - 71,9%) регистрируется у телят от 1 до 2-х месячного возраста. С увеличением возраста степень инвазии постепенно снижается и животные 6 месячного возраста не выделяют яиц неоаскарисов.

7. Диагностическая эффективность метода последовательных промываний колеблется в пределах 17,5±0,6 - 19,3±0,4%, а модифицированного седиментационного способа она повышается до 23,4±1,4% - 27,6±1,4%.

8. Диагностическая эффективность модифицированного флотационного метода составляет 45,3±1,7% - 54,2±1,5%, а комбинированного метода достигает 50,2 ± 1,2% - 68,2% ± 1,2%, заложенных яиц гельминтов.

9. Универсальный экспресс - метод групповой гельминтоовоскопии позволяет определить степень заражения стад крупного рогатого скота ассоциативными инвазиями. За рабочий день один специалист может исследовать до 1 тысячи проб.

10. Новый способ изготовления антигена фасциол позволяет получить специфичный диагностикум для РСК и ИФА. Серологическая диагностика фасциолеза наиболее эффективна в ранние сроки развития инвазии. В неблагополучных гуртах в остром периоде болезни РСК с антигеном фасциол дает возможность выявить до 91,7%, а ИФА - до 94,6% зараженных животных.

11. Эхинококковый аллерген, приготовленный по новой технологии, обладает достаточной специфичностью и высокой диагностической эффективностью. У здоровых животных, зараженных фасциолами, дикроцелиями, а также у больных абсцессами печени и плевритами утолщение кожной складки не превышает 2мм. У зараженных эхинококками крупного рогатого скота этот показатель колеблется в пределах 7 - 14мм.

12. Для дегельминтизации телят при неоаскариозе, оптимальной терапевтической дозой фезола является 3,5 мг/кг по ДВ, а новой фосфорной соли пиперазина - 0,3 г/кг живой массы однократно.

13. Применение фезола и фебтала гранулята в дозах 35 - 90 мг/кг через 7 дней в организме крупного рогатого скота вызывает кратковременное снижение количества эритроцитов, гемоглобина и уровня Т- и В- лимфоцитов, а также некоторое повышение СОЭ, количества, эозинофилов и нейтрофилов. Спустя 28 дней гематологические и иммунологические показатели достигают до уровня физиологических норм здоровых животных.

14. При ассоциативных инвазиях крупного рогатого скота (стронгилятозы пищеварительного тракта, фасциолез, дикроцелиоз, парамфистоматоз, эуритрематоз и др.) оптимальной терапевтической дозой фебтала гранулята является 20 мг/кг живой массы по ДВ, а фезола - 14 мг/кг по ДВ однократно.

ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ

Результаты мониторинга и эпизоотические карты по основным гельминтозам крупного рогатого скота могут быть использованы в ГУВ КМ РТ и в районных станциях по борьбе с болезнями животных при составлении прогноза по гельминтозам животных и плана противоэпизоотических мероприятий.

Модифицированные копроскопические методы могут быть применены для повышения эффективности диагностики, а также для изучения эпизоотической ситуации по ассоциативным инвазиям крупного рогатого скота.

Серологическая диагностика фасциолеза эффективна при остром течении инвазии. Разработанный способ изготовления фасциолового антигена позволяет получить специфичный диагностикум для РСК и ИФА.

Реакция Кацони с усовершенствованным эхинококковым аллергеном может быть применена для объективной оценки и прогноза эпизоотической ситуации по эхинококкозу;

Фебтал гранулят и фезол являются эффективными при микстинвазиях крупного рогатого скота. Новая фосфорная соль пиперазина и фезол могут быть применены при неоаскариозе телят.

Полученные результаты использованы при разработке следующих нормативно-технических документов:

- Рекомендации по борьбе с гельминтозами крупного рогатого скота в районах Республики Татарстан (Утв. ГУВ КМ РТ от 20.10. 2009г.).

- Инструкция по применению фебтала гранулята для дегельминтизации сельскохозяйственных животных, пушных зверей и птиц. (Утв. Россельхознадзором. ПВР - 2 - 1.9/ 00108 от 30.12.2005г.).

- Инструкция по применению фезола для дегельминтизации сельскохозяйственных животных. (Утв. Ученым советом ВИГИС от 27.09.2008г).

- Модифицированный копроскопический метод диагностики ассоциативных инвазий крупного рогатого скота (одобрен Секцией «Инвазионные болезни животных» Отделения ветеринарной медицины РАСХН от 25.05. 2007г).

- Метод групповой экспресс-диагностики гельминтозов крупного рогатого скота (одобрен Секцией «Инвазионные болезни животных» Отделения ветеринарной медицины РАСХН от 25.05. 2007г).

- Методические рекомендации по копроскопической диагностике гельминтозов сельскохозяйственных животных» (Утв. ГУВ КМ РТ 18.11. 2007г.);

- Временная инструкция по изготовлению и контролю антигена фасциол для РСК (Утв. ГУВ КМ РТ от 10.09. 2001г.);

- Временное наставление по постановке и учету РСК с антигеном фасциол (Утв. ГУВ КМ РТ от 10.09. 2001г.);

- Технические условия (ТУ) на изготовление, контроль и применение экспериментальных серий антигена фасциол (Утв. ГУВ КМ РТ от 10.09. 2001г.);

- Временная инструкция по изготовлению эхинококкозного аллергена для реакции Кацони (Утв. ГУВ КМ РТ от 22.12. 2003г.).

- Временное наставление по применению эхинококкозного аллергена в реакции Кацони (Утв. ГУВ КМ РТ от 22.12. 2003г.);

СПИСОК РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ

Статьи в ведущих научных журналах, рекомендованных ВАК Минобразования и науки РФ и патенты на изобретения:

1. Латыпов Д.Г. Мониторинг эпизоотической ситуации по гельминтозам крупного рогатого скота в Республике Татарстан / Д.Г. Латыпов, М.Х. Лутфуллин, Г.Н. Гайсин // Ветеринарный врач. Казань, 2001. - № 4. - С. 24- 26.

2. Лутфуллин М.Х. Эпизоотическая ситуация по фасциолезу крупного рогатого скота в Республике Татарстан / М.Х. Лутфуллин, Д.Г. Латыпов, Г.Н. Гайсин, Р.Р. Тимербаева // Ветеринарный врач. Казань, 2001. - № 3. - С. 66- 68.

3. Латыпов Д.Г. Эпизоотическая ситуация по дикроцелиозу крупного рогатого скота в Республике Татарстан / Д.Г. Латыпов, М.Х. Лутфуллин, Г.Н. Гайсин // Ветеринарный врач. Казань, 2002. - № 1. - С. 16 - 18.

4. Латыпов Д.Г. Эхинококкоз крупного рогатого скота в Республике Татарстан / Д.Г. Латыпов, М.Х. Лутфуллин, Г.Н. Гайсин, А.М. Идрисов // Ветеринарный врач. Казань, 2002. - № 1. - С. 18 - 20.

5. Латыпов Д.Г. Диагностическая значимость РСК при фасциолезе крупного рогатого скота / Д.Г. Латыпов, М.Х. Лутфуллин, Р.Р. Тимербаева //Ученые записки Казанской государственной академии ветеринарной медицины. Казань, 2002. - Т. 172. - С. 133 - 137.

6. Латыпов Д.Г. Динамика комплементсвязывающих антител у спонтанно инвазированного фасциолезом крупного рогатого скота после применения антгельминтиков / Д.Г. Латыпов, Р.Р. Тимербаева, Г.Г. Горшкова // Ученые записки Казанской государственной академии ветеринарной медицины. Казань. 2002, Т. 172. - С. 137 - 140.

7. Латыпов Д.Г. Диагностическая эффективность реакции связывания комплимента при фасциолезе крупного рогатого скота/ Д.Г. Латыпов, М.Х. Лутфуллин, Р.Р. Тимербаева. //Ученые записки Казанской Государственной академии ветеринарной медицины. Казань, 2002. - Т. 172. - С. 140 - 144.

8. Латыпов Д.Г. Специфичность и диагностическая эффективность реакции Кацони при эхинококкозе крупного рогатого скота / Д.Г. Латыпов, А.М., Идрисов, М.Х. // Ученые записки Казанской Государственной академии ветеринарной медицины. Казань, - 2003. - Т. 174. - С. 108 - 115.

9. Латыпов Д.Г. Сравнительная эффективность различных гельминтоовоскопических методов при диагностике трематодозов крупного рогатого скота / Д.Г. Латыпов // Ветеринарный врач. Казань, 2003. - № 3. - С. 64- 67.

10. Фаттахов С.Г. Пиперазиновая соль бис (оксиметил) фосфиновой кислоты обладающая антигельминтной активностью / С.Г. Фаттахов, М.Х. Лутфуллин, Д.Г. Латыпов и др. //Патент на изобретение RU № 2211835, 10.09. 2003 - 14л.

11. Долбин Д.А. Эффективность различных антгельминтиков при неоаскаридозе телят / Д.А. Долбин, М.Х. Лутфуллин, Д.Г. Латыпов // Ученые записки Казанской государственной академии ветеринарной медицины. Казань, 2004. - Т. 178. - С. 53 - 60.

12. Идрисов А.М. Гематологические и биохимические показатели крови при экспериментальном эхинококкозе кроликов / Идрисов А.М., Латыпов Д.Г., Лутфуллин М.Х. // Ученые записки Казанской государственной академии ветеринарной медицины. Казань, 2004. - Т. 178. - С. 67 - 73.

13. Латыпов Д.Г. Экспресс диагностика гельминтозов крупного рогатого скота / Д.Г. Латыпов, М.Х. Лутфуллин, Г.Г. Горшкова // Ученые записки Казанской государственной академии ветеринарной медицины. Казань, - 2006. Т. 184. - С. 152 - 159.

14. Латыпов Д.Г. Способ групповой экспресс диагностики гельминтозов крупного рогатого скота / Д.Г. Латыпов, М.Х. Лутфуллин, Г.Г. Горшкова, Д.А. Долбин // Патент на изобретение RU № 2302207, 10.07. 2007 - 5л.

15. Латыпов Д.Г. Усовершенствованный флотационный метод гельминтоовоскопии фекалий у крупного рогатого скота / Д.Г. Латыпов // Ученые записки Казанской Государственной академии ветеринарной медицины. Казань, 2008. Т. 191. - С. 166- 170.

16. Латыпов Д.Г. Эффективность разных антгельминтиков при ассоциативных инвазиях крупного рогатого скота /Д.Г. Латыпов, Л.А. Гайсина / Ученые записки Казанской государственной академии ветеринарной медицины. Казань, 2008, - Т. 192. - С. 90 - 95.

17. Латыпов Д.Г. Эффективность разных гельминтоовоскопических методов при диагностике ассоциативных инвазий крупного рогатого скота / Д.Г. Латыпов, Л.А. Гайсина // Ученые записки Казанской государственной академии ветеринарной медицины. Казань, 2008. - Т. 192. - С. 95 - 100.

18. Тимербаева Р.Р. Распространение гельминтозов сельскохозяйственных животных в Республике Татарстан / Р.Р. Тимербаева, А.М. Идрисов, Д.Г. Латыпов // Ученые записки Казанской Государственной академии ветеринарной медицины. Казань, 2008. - Т. 192. - С. 148-152.

19. Латыпов Д.Г. Прогноз развития гельминтологической ситуации у крупного рогатого скота в Республике Татарстан / Д.Г. Латыпов, М.Х. Лутфуллин // Ученые записки Казанской Государственной академии ветеринарной медицины. Казань. 2009. - Т. 197 . - С. 68 - 72.

20. Латыпов Д.Г. Антгельминтики при ассоциативных инвазиях крупного рогатого скота /Д.Г. Латыпов // Ученые записки Казанской Государственной академии ветеринарной медицины. Казань. 2009. - Т. 197 . - С. 73- 78.

21. Латыпов Д.Г. Экономическая эффективность применения фебтала гранулята при микстинвазиях крупного рогатого скота / Д.Г. Латыпов // Ученые записки Казанской Государственной академии ветеринарной медицины. Казань. 2009. - Т. 198. - С. 113 - 115.

22. Латыпов Д. Г. Экономический ущерб, причиняемый гельминтозами крупного рогатого скота в Республике Татарстан / Д.Г. Латыпов, М.Х. Лутфуллин // Ученые записки Казанской Государственной академии ветеринарной медицины. Казань. 2000. - Т. 198. . - С. 116 - 119.

23. Латыпов Д.Г. Гельминтоовоскопическая диагностика ассоциативных инвазий крупного рогатого скота / Д.Г. Латыпов, Л.А. Гайсина // Ветеринарный врач. Казань, 2010. - № 1. - С. 50 - 52.