Паразитозы крупного рогатого скота в Среднем, Нижнем Поволжье и новые химические средства в борьбе с ними

На правах рукописи

Арисов Михаил Владимирович

Паразитозы крупного рогатого скота

в среднем, нижнем поволжье и новые химические средства в борьбе с ними

03.00.19 - паразитология

16.00.04 - ветеринарная фармакология с токсикологией

автореферат

диссертации на соискание ученой степени доктора ветеринарных наук

Нижний Новгород - 2008г.

Работа выполнена в ООО «НВЦ Агроветзащита», на кафедре паразитологии, общей биологии и ветсанэкспертизы ФГОУ ВПО «Нижегородская государственная сельскохозяйственная академия» (НГСХА), в лаборатории иммунологии ГНУ «Всероссийский научно-исследовательский институт гельминтологии им. К.И. Скрябина» (ВИГИС), хозяйствах и госветучреждениях Республики Калмыкия, Волгоградской и Нижегородской областей.

Научные консультанты:

заслуженный деятель науки РФ,

доктор ветеринарных наук, профессор Даугалиева Эмма Хасановна

доктор ветеринарных наук, профессор Абрамов Владислав Евгеньевич

Официальные оппоненты:

доктор ветеринарных наук, с.н.с. Скира Василий Николаевич

доктор биологических наук, профессор Новак Дмитрий Михайлович

доктор ветеринарных наук, профессор Жолобова Инна Сергеевна

Ведущая организация - ФГОУ ВПО «Саратовский государственный университет им. Н.И. Вавилова»

Защита состоится «22» января 2009 г. в 12⁰⁰ на заседании диссертационного совета Д 220.047.02 при ФГОУ ВПО «Нижегородская государственная сельскохозяйственная академия» (603107, Нижний Новгород, пр. Гагарина, 97).

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ФГОУ ВПО НГСХА (603107, Нижний Новгород, пр. Гагарина, 97).

Автореферат опубликован на официальном сайте ВАК РФ «01» октября 2008 г.

Автореферат разослан «____» ____________ 2008 г.

Ученый секретарь диссертационного совета

к. вет. н., доцент А.В. Пашкин

общая характеристика работы

Актуальность проблемы. В настоящее время огромные потери животноводству наносят инвазионные болезни, что объясняется их массовым распространением. Нанося значительный урон здоровью, инвазионные болезни являются причиной снижения сохранности различных видов сельскохозяйственных животных. Несмотря на достаточную изученность многих инвазионных болезней животных, ликвидировать их и предотвращать последствия распространения до сих пор не удается. Многие исследователи распространение экто- и эндопаразитозов животных объясняют особенностями природно-климатических условий территорий и технологией содержания поголовья. Установленное в конце 19-го века «правило Лейкарта» в биологическом цикле развития многих паразитов до сих пор является основой прижизненной диагностики паразитозов, а развитие патологического процесса в организме животных при «larva migrans» до сих пор при отдельных паразитозах остается «научной тайной».

Ряд исследователей указывают на широкое распространение инвазионных болезней крупного рогатого скота (К.И. Скрябин, Р.С. Шульц, 1937; Х.В. Аюпов, 1968; В.Ф. Никитин, 1988; В.Н. Беденкова, 1985; С.Д. Дурдусов, 1999 и др.) и особенно эктопаразитозов (М.П. Демьянович, 1947; Н.П. Орлов, 1951; В.Б. Дубинин, 1954; С.Н. Никольский, П.С. Суворов, 1971; А.А. Водянов, 1986; Е.А. Алексеев, 1988; П.С. Стринадкин, 1989 и др.).

Непроходящей проблемой в ветеринарии продолжает оставаться изучение трематодозов крупного рогатого скота (К.И. Скрябин, В.Г. Эвранова, 1952; А.М. Сазанов, 1976; Н.В. Демидов, 1965; В.А. Ромашов, 1979; В.В. Горохов, 1986 и др.).

Нерешенной остается проблема нематодозов и цестодозов в популяции крупного рогатого скота (В.С. Ершов, 1935; В.А. Потемкина, 1949; М.Ш. Акбаев, 1986; И.А. Архипов, 2005 и др.).

Важным в борьбе с паразитозами животных является использование надежных, высокоэффективных противопаразитозных средств и способов их применения, а поиск новых, более эффективных, нетоксичных и экономичных препаратов продолжает оставаться актуальной проблемой современной ветеринарии и медицины.

В борьбе с саркоптоидозами, трематодозами, цестодозами и нематодозами в нашей стране и за рубежом разработано и применяется большое количество противопаразитарных и антигельминтных средств. Однако до сих пор проблема борьбы с паразитозами считается не до конца решенной, многие предложенные препараты оказались токсичными, угнетающими иммунную систему организма животных, оказывают и отдаленные воздействия на популяции животных.

Во многом оказались неизученными региональные особенности функционирования паразитарных систем. Широкое распространение инвазионных заболеваний крупного рогатого скота в аридной зоне юга России и других регионах страны, необходимость совершенствования профилактических и лечебных мероприятий при паразитозах в регионе определили выбор темы и направления наших исследований.

Цель и задачи исследований. В сравнительном аспекте и динамике изучить особенности функционирования паразитарных систем в популяции крупного рогатого скота в условиях Республики Калмыкия, Среднего и Нижнего Поволжья и на этой основе усовершенствовать систему противопаразитарных мероприятий в регионах, изучить фармакотоксикологические свойства и терапевтическую эффективность новых противопаразитарных препаратов и определить их место и роль в общей системе противоэпизоотических мероприятий.

В соответствии с целью были поставлены следующие задачи:

1. В сравнительном аспекте и динамике изучить территориальные, временные и популяционные границы эпизоотического проявления псороптоза, гематопиноза и бовиколеза в хозяйствах Республики Калмыкия.

2. Изучить особенности эпизоотического проявления трематодозов в условиях Волгоградской и Нижегородской областей.

3. Провести многофакторный анализ и изучить особенности проявления цестодозов и нематодозов в популяции крупного рогатого скота в различных природно-климатических условиях европейской части РФ.

4. Усовершенствовать систему противоэпизоотических мероприятий в конкретных регионах РФ с учетом эпизоотической ситуации и степени риска конкретных паразитозов.

5. Изучить фармакотоксикологические свойства новых отечественных препаратов (дельцид, фаскоцид), а также определить лечебно-реабилитационную эффективность, роль и место ряда препаратов (дельцид, фаскоцид, альбен-супер, 10%-ная суспензия альбендазола) в системе противоэпизоотического обеспечения современного животноводства.

Научная новизна. В сравнительном аспекте и динамике изучены особенности эпизоотического проявления мониезиоза и эктопаразитозов (псороптоза, гематопиноза и бовиколеза) крупного рогатого скота в условиях Республики Калмыкия; изучены и определены пространственно-территориальные и популяционные границы эпизоотического проявления трематодозов (фасциолеза, парамфистоматоза и дикроцелиоза) в различных агроклиматических зонах Приволжского и Южного федерального округов, установлены их роль и место в формировании заразной патологии этого вида животных. Изучены фармакотоксикологические свойства и терапевтическая эффективность новых препаратов: дельцид, фаскоцид, альбен-супер, 10%-ная суспензия альбендазола и на этой основе усовершенствована система противоэпизоотических мероприятий при экто- и эндопаразитозах крупного рогатого скота в условиях изучаемых регионов.

Практическая значимость. На основании изученных результатов исследований подтверждено, что экто- и эндопаразитозы крупного рогатого скота - паразитозы управляемые, применение препаратов дельцида, фаскоцида, альбена-супер, 10%-ной суспензии альбендазола в соответствующих дозах значительно повышает эффективность противопаразитарных мероприятий в популяции крупного рогатого скота в изучаемых регионах.

Результаты исследований терапевтической эффективности изучаемых противопаразитарных средств использованы при разработке нормативных документов по применению в ветеринарной практике:

- проекта инструкции по применению препарата дельцид для борьбы с эктопаразитозами животных, дезинсекции и деакаризации помещений;

- инструкции по применению фаскоцида гранул для дегельминтизации жвачных животных при трематодозах (утв. Россельхознадзором 14.06.06 ПВР - 2 - 1/01 1638);

- инструкции по применению препарата альбен для дегельминтизации сельскохозяйственных животных, пушных зверей и кур (утв. департаментом ветеринарии МСХ РФ 27.03.02 №13 - 3 - 04/0385);

- инструкции по применению препарата альбендазол-суспензии 2,5 и 10%-ной для дегельминтизации жвачных.

Положения, выносимые на защиту:

1. Эктопаразитозы (псороптоз, гематопиноз и бовиколез) и эндопаразитозы (мониезиоз, дикроцелиоз) являются важными составляющими нозологического профиля инвазионной патологии крупного рогатого скота в аридной зоне европейского юга РФ.

2. Производственно-территориальные, временные, популяционные и субпопуляционные границы эпизоотического проявления трематодозов (фасциолеза, парамфистоматоза и дикроцелиоза) в популяции крупного рогатого скота подтверждают их важную роль и место в формировании суммарной заразной патологии сельскохозяйственных животных в условиях Приволжского и Южного федерального округов РФ.

3. Антипаразитарные препараты (дельцид, фаскоцид) не обладают выраженными токсическими, аллергизирующими, эмбриотоксическими и тератогенными свойствами, в терапевтических и в 3 - 5 раз превышающих дозах не вызывают изменений клинического и гомеостатического статуса организма животных.

4. Применение противопаразитарных (антигельминтных) средств дельцида, фаскоцида, альбена-супер, 10% суспензии альбендазола в комплексной системе противопаразитарных мероприятий значительно повышает лечебно-реабилитационную и профилактическую эффективность противоэпизоотических мероприятий при инвазионных болезнях крупного рогатого скота в изучаемых регионах.

Пути реализации. Результаты исследований могут быть использованы при корректировке противопаразитарных мероприятий в других регионах России, а также в педагогическом процессе при подготовке специалистов ветеринарной профессии.

Апробация работы. Основные положения диссертации доложены, обсуждены и одобрены на научно-практических конференциях «Теория и практика борьбы с паразитарными болезнями» (Москва, ВИГИС, 2002, 2003, 2004, 2005); на Международной научно-практической конференции «Актуальные проблемы инвазионной, инфекционной и незаразной патологии животных» (Ставрополь, 2003); на Международных научно-практических конференциях «Современные проблемы иммуногенеза, теории и практики борьбы с паразитарными и инфекционными болезнями сельскохозяйственных животных» (Москва - Уфа, 2004, 2005); на Международной межвузовской научно-практической конференции аспирантов и соискателей «Предпосылки и эксперимент в науке» (Санкт-Петербург, 2004, 2005); на Международном симпозиуме «Стратегия развития сельского и лесного хозяйства, сферы услуг в РФ и мире» (Н. Новгород, 2003); на межрайонных семинарах, совещаниях ветспециалистов Ковернинского района Нижегородской области; на межкафедральном заседании профессорско-преподавательского состава кафедр паразитологии, общей биологии и ветсанэкспертизы, эпизоотологии и инфекционных болезней НГСХА (2004-2007 гг.). Приоритет результатов исследований подтверждается патентом на изобретение № 2328299 от 10 июля 2008 года.

По теме диссертации опубликованы 44 печатные работы, в том числе 16 в центральных изданиях, рекомендованных ВАК РФ для публикации материалов докторских диссертаций.

Внедрение. Результаты исследований под авторским надзором с положительным эффектом в 2002-2008 гг. внедрены в хозяйствах и госветучреждениях Нижегородской, Волгоградской областей и Республике Калмыкия. Материалы исследований включены в нормативно-техническую документацию: Проект инструкции по применению препарата дельцид для борьбы с эктопаразитами животных, дезинсекции и дезакаризации помещений; Инструкция по применению фаскоцида гранул для дегельминтизации жвачных животных при трематодозах № ПВР - 2 - 1/01638; Инструкция по применению препарата альбен для дегельминтизации сельскохозяйственных животных, пушных зверей и кур № ПВР - 2 - 5.0/00575, ПВР-2-5.0/00576; Инструкция по применению препарата альбендазол-суспензия 2,5% и 10% для дегельминтизации жвачных.

Объем и структура диссертации. Диссертация изложена на 329 страницах машинописного текста и включает введение, обзор литературы, материалы и методы исследования, результаты собственных исследований и их обсуждение, выводы и практические предложения и приложения. Работа иллюстрирована 79 таблицами и 17 рисунками. Список литературы включает 539 источников, из них 173 зарубежных авторов. Приложение - на 18 страницах.

Собственные исследования

Материалы, методы и объем исследований

Работа выполнялась в 2001- 2008 гг. в ООО «НВЦ Агроветзащита»; на кафедрах паразитологии, общей биологии и ветсанэкспертизы; эпизоотологии и инфекционных болезней ФГОУ ВПО «Нижегородская государственная сельскохозяйственная академия» (НГСХА); в лаборатории иммунологии ГНУ «Всероссийский научно-исследовательский институт гельминтологии им. К.И. Скрябина» (ВИГИС); хозяйствах и госветучреждениях Республики Калмыкия, Волгоградской и Нижегородской областей.

С целью изучения характера эпизоотического проявления и эпизоотологической географии экто- и эндопаразитозов крупного рогатого скота в различных агроклиматических зонах РФ проведены:

- ретроспективные исследования и анализ данных, полученных автором во время многолетних эпизоотологических экспериментов и эпизоотологического мониторинга экто- и эндопаразитозов крупного рогатого скота в условиях аридной зоны юга РФ, в субъектах федерации Нижнего и Среднего Поволжья;

- ведомственные статистические информации управлений ветеринарии субъектов федерации, районных станций по борьбе с болезнями животных, районных и областных ветеринарных лабораторий, территориальных управлений федеральной службы Россельхоз- и Роспотребнадзора за период с 1991 по 2008 г.;

- материалы клинико-эпизоотологических обследований эпизоотических очагов экто- и эндопаразитозов крупного рогатого скота в изучаемых регионах;

- результаты гельминтологических, копрооволярвоскопических, паразитологических и иммунологических исследований сельскохозяйственных животных в хозяйствах Республики Калмыкия, Нижегородской и Волгоградской областей, выполненных по нашей просьбе региональными ветеринарными лабораториями;

- материалы и протоколы заседаний экспертных комиссий и экспедиций по периодическому оперативному анализу фаунистических паразитологических исследований, эпизоотической и эпидемиологической ситуации по паразитозам в конкретных субъектах РФ;

- материалы республиканских и региональных научно-практических конференций и совещаний по заразной патологии животных, в т.ч. паразитозам крупного рогатого скота;

- ветеринарная отчетность об инвазионных (паразитарных) болезнях животных в подразделениях Агроклиматического комплекса и индивидуальных животноводческих хозяйствах конкретных регионов, в т.ч. и базовых хозяйствах, избранных для проведения эпизоотологических экспериментов при выполнении данной работы.

Проведены эпизоотологический и паразитологический анализ и оценка показателей развития эпизоотического и инвазионного процессов трематодозов, нематодозов, цестодозов и эктопаразитозов крупного рогатого скота в конкретных условиях изучаемых регионов РФ путем ретроспективного анализа на доступную глубину ретроспекции.

С целью эпизоотологической (паразитологической) диагностики проведены мониторинговые и скрининговые гельминтологические, паразитологические исследования и оценка показателей территориально-пространственных, временных и популяционных границ гельминтозов и эктопаразитозов и их смешанных форм.

Для выяснения причинно-следственных связей и факторов, воздействующих на механизм развития эпизоотического проявления паразитозов (гельминтозов), исследовали взаимодействие между эпизоотологическими параметрами популяций сельскохозяйственных животных с использованием ретроспективного и оперативного анализа, математического аппарата дифференциальных уравнений, формальной статистической экстраполяции, автокорреляции, линейной регрессии.

С целью выявления тенденций социально-экономической значимости экто- и эндопаразитозов крупного рогатого скота и отработки тактики и стратегии противоэпизоотических (противопаразитарных) мероприятий на примере аридной зоны юга России, Волгоградской и Нижегородской областей проведена оценка степени взаимодействия популяций паразитов и хозяина (крупного рогатого скота) в различных природно-климатических и хозяйственно-технологических условиях с использованием эпизоотологических (паразитологических) контроля и экспериментов.

Методами планируемых эпизоотологических экспериментов проведена оценка влияния ландшафтно-природной и хозяйственной среды и антропогенной деятельности на экстенсивность и интенсивность эпизоотического проявления паразитозов в популяции крупного рогатого скота в социально-экологической системе, в т.ч. и оценка эффективности систем противопаразитарных (противогельминтозных) мероприятий в контролируемых экспериментах с использованием системы «Placebo».

В десяти базовых хозяйствах Республики Калмыкия с 2001 по 2008 г. изучено эпизоотическое проявление псороптоза, гематопиноза, бовиколеза, мониезиоза и диктиокаулеза на 4219 головах крупного рогатого скота; в базовых хозяйствах Волгоградской и Нижегородской областей на 15013 головах крупного рогатого скота изучено эпизоотическое проявление трематодозов.

Фаунистические и паразитарно - хозяйственные отношения при паразитозах проводили на основе скрининговых паразитологических исследований, полного и неполного гельминтологических вскрытий, сбором паразитов и их морфологической идентификации.

Скрининговые паразитологические исследования при диагностике псороптоза проводили по традиционной методике (Н.П. Орлов, Н.И. Аргинский, С.Н. Никольский, 1962; К.И. Абуладзе, 1978); гематопиноза - по методике (Д.И. Благовещенский, 1972); бовиколеза - по методу С.Д. Родина (1981). Посмертную диагностику трематодозов крупного рогатого скота проводили методом неполного гельминтологического вскрытия (по К.И. Скрябину), экстенс- и интенсинвазированность определяли путем подсчета количества фасциол в печени.

Гельминтокопроовоскопические исследования проводили методом флотации с использованием счетной камеры ВИГИС и последовательных смывов. Собранных при вскрытии печени трематод отдельно от каждого животного подсчитывали и определяли среднюю интенсивность инвазии, а также рассчитывали экстенсивность инвазии в разрезе районов области.

Диагноз на дикроцелиоз крупного рогатого скота устанавливали путем количественных копроовоскопических исследований проб фекалий, а также гельминтологического вскрытия печени животных.

Зараженность крупного рогатого скота мониезиями определяли по результатам копроовоскопических исследований методом флотации (по Фюллеборну). Диагноз на диктиокаулез устанавливали по клинической картине (массовый кашель), при обнаружении методами Вайда и Бермана характерных личинок длиной 0,31 - 0,36 мм в свежих фекалиях, а также гельминтологическими вскрытиями легких животных разного возраста.

С целью совершенствования противопаразитарных мероприятий в экспериментальных и производственных условиях изучили ряд отечественных антипаразитарных препаратов.

Фармакотоксикологические свойства препаратов изучали на клинически здоровых крысах, белых мышах, морских свинках и кроликах (живой массой соответственно 210 - 230 г, 19 - 23 г, 2 - 2,3 кг).

Параметры их острой токсичности изучали в соответствии с методическими рекомендациями по определению общетоксического действия фармакологических веществ (1997 г.), используя метод Кербера в модификации Прозоровского и метод пробитанализа, предложенный Литчфилдом и Уилкоксоном, в модификации З. Рота с определением ЛД₀, ЛД₁₆, ЛД₅₀, ЛД₈₄ и ЛД₁₀₀.

Исследование кумулятивных свойств препаратов проводили на крысах и мышах (Lim et all, 1961).

Исследования по острой ингаляционной токсичности дельцида выполнены на 30 белых крысах-самцах (160 - 180 г) и 20 белых мышах-самцах (20 - 22 г) (Van des Waerden, 1940, 1950). В исследованиях использовали 4% концентрат эмульсии дельцида, который разводили из расчета 10000, 8000 и 6000 мг/м³. Концентрация 10000 мг/м³ в данных условиях эксперимента являлась максимально достижимой.

Местное и кожно-резорбтивное действие препаратов изучали в 2 - х сериях опытов: путем однократного его воздействия на 42 беспородных крысах и пятикратного с интервалом в 5 суток воздействия на кроликах.

Влияние препарата на слизистые оболочки глаза изучали методом конъюнктивальной пробы.

Влияние препаратов на гомеостаз организма животных изучали путем гематологических и биохимических исследований крови и биохимических исследований мочи. При этом по общепринятым методам определяли динамику количества эритроцитов, лейкоцитов, выводили лейкограмму, контролировали уровень гемоглобина, цветного показателя крови, через сутки после первой и последней презентацией препаратов.

В это же время по биохимическим тестам оценивали функцию печени и состояние белкового, жирового и углеводного обмена.

Биологическое действие препаратов при многократном введении в желудок изучали в субхроническом и хроническом экспериментах, используя дозы на уровне 1/10 и 1/100 от ЛД50 и 1/200, 1/400 и 1/4000 от ЛД50 соответственно. Оценку состояния животных проводили по клиническим, специфическим (функциональное состояние печени, почек) и интегральным (масса тела, коэффициенты внутренних органов и др.) показателям.

Биохимические параметры сыворотки крови: общий белок, альбумин, билирубин общий, холестерин, креатинин, глюкозу, триглицериды, мочевину, мочевую кислоту, а также активность аланинаминотрансферазы (АЛТ) и аспартатаминотрансферазы (ACT) определяли на анализаторе типа ELAN-6150 («Eppendorf», Германия).

Функциональную активность почек оценивали путем определения диуреза (в течение 6 часов), содержания белка, мочевины и мочевой кислоты.

Иммунотоксические свойства препаратов определяли по выраженности реакции ГЗТ (В.М. Манько и др., 1989) и количеству антителообразующих клеток (АОК) в селезенке (Conningham, 1965).

Определение аутологических розеткообразующих клеток (ауто-РОК) мышей проводили по M.Jondal et al. (1972), при этом эритроцитарным маркером служила 1,5%-ная суспензия аутологических эритроцитов.

Состояние В-иммунной системы изучали по методу Mendes (1973) (Даугалиева Э.Х., 1989).

Неспецифическую резистентность организма животных определяли в реакции Пауля - Буннеля (1932), в модификации Чернушенко и Когосовой (1985).

Выделение лимфоцитов по методу A. Boyum (1986).

Супрессию В-системы иммунитета оценивали по ответу на эритроциты барана (ЭБ). Титр гемагглютининов в микроварианте прямой реакции гемагглютинации (Seper, 1962) с помощью микротитратора «Такачи».

Определение аллергизирующих свойств препаратов проводили на мышах в реакции непрямой дегрануляции тучных клеток (по методу Л.М. Ишимовой и Л.И. Зимченко, 1967) и внутрикожной пробе.

Эмбриотоксические и тератогенные свойства препаратов определяли в соответствии с «Методическими рекомендациями по доклиническому изучению репродуктивной токсичности фармакологических средств», утвержденными Минздравом РФ, 2000 г.

Количественное определение остаточных препаратов в органах и тканях животных проводили совместно с канд. биол. наук Русаковым С.В. с использованием метода газожидкостной хроматографии, в соответствии с «Временными методическими указаниями по определению пиретроидов в молоке и мясе животных методом газожидкостной хроматографии» (№ 6093-91, утверждены Минздравом СССР от 29.07.1991).

Результаты исследований подвергнуты статистическому анализу (Н.А. Плохинский, 1978) с использованием методов современной прогностики. Графические исследования проводили по общепринятым в медицине и ветеринарии методам.

Лечебно-профилактическую эффективность препаратов изучали in vitro и in vivo.

Акарицидные свойства дельцида в сравнительном аспекте изучали на имаго клещей Р. cuniculi (в трех повторностях), а также на кроликах, пораженных псороптозом в соответствии с «Методическими указаниями по первичному отбору новых акарицидов и сравнительному изучению их активности против саркоптоидных клещей» (М., 1982).

Терапевтическую эффективность препаратов проводили в производственных условиях СПК «Экспериментальное хозяйство» и СПК «Прудовый» Целинного района Республики Калмыкия на зараженных клещами Psoroptes животных, путем их крупнокапельного опрыскивания 0,005%-ным рабочим раствором дельцида. Учет эффективности проводили через 1, 7 и 14 суток после обработки.

Испытание новых трематоцидных препаратов проводили на 751 голове крупного рогатого скота, спонтанно зараженных фасциолами и парамфистомами под двух- или трехкратным гельминтоовоскопическим контролем (К.И. Абуладзе, Н.П. Гильденблат, Г.С. Дзасохов и др., 1978; К.И. Абуладзе, Н.В. Демидов и др., 1990) с использованием счетной камеры ВИГИС (Л.Д. Мигачева, Г.А. Котельников, 1989).

Терапевтическую эффективность учитывали через 25 - 30 дней после дачи препаратов, оценивали по изменению показателей интенс- и экстенсэффективности (ИЭ и ЭЭ) (Р.С.Шульц, 1933), методом «Контрольный тест», а также методом количественного учета яиц фасциол в 1 г фекалий по методу Гара (И.А. Архипов, 1989). Использовали схему дегельминтизации животных (Н.В. Демидов, С.В. Березкина, 1986).

Изучение антигельминтной эффективности препаратов фаскоцид и альбен-супер при дикроцелиозе крупного рогатого скота проводили в СПК «Оленьевский» Дубовского района Волгоградской области, неблагополучном по данной инвазии.

Эффективность препарата учитывали по результатам копроовоскопических исследований животных подопытных и контрольных групп до и через 15 дней после обработки. Расчет эффективности препаратов осуществляли по типу «контрольный тест». Эффективность препаратов учитывали и по результатам гельминтологического вскрытия печени животных (по 1 - 2 головы из группы) через 25 дней после дегельминтизации и учета количества обнаруженных дикроцелий.

Изучение терапевтической эффективности препаратов 2,5 и 10% суспензии альбендазола для индивидуальной и групповой дегельминтизации крупного рогатого скота при мониезиозе и диктиокаулезе проводили в экспериментальном хозяйстве КНИИСХ «Верхний Яшкуль» Целинного района Республики Калмыкия.

Расчет эффективности препарата проводили по типу «контрольный тест» согласно «Руководству, одобренному Всемирной ассоциацией за прогресс ветеринарной паразитологии» (1995).

Для выявления ущерба, причиненного хозяйствам паразитозами крупного рогатого скота, провели расчеты в соответствии с методикой определения экономической эффективности ветеринарных мероприятий (1982).

Автор выражает искреннюю благодарность коллективам кафедр эпизоотологии и инфекционных болезней, паразитологии, общей биологии и ветсанэкспертизы НГСХА, специалистам хозяйств, госветучреждений Волгоградской и Нижегородской областей и Республики Калмыкия, д.в.н., профессорам Н.В. Филиппову, А.В. Усенкову; д.в.н., профессору С.В. Енгашеву; заслуженным деятелям науки д.в.н., профессору Э.Х. Даугалиевой, д.в.н., профессору, члену-корреспонденту РАСХН В.В. Сочневу за методическую помощь и сотрудничество при выполнении нашей работы.

Результаты исследований

Эпизоотологический мониторинг за распространением эктопаразитозов (псороптоза, гематопиноза и бовиколеза) крупного рогатого скота в аридной зоне юга России

Особенности эпизоотического проявления псороптоза, гематопиноза и бовиколеза крупного рогатого скота изучали в хозяйствах Республики Калмыкия и установили, что псороптоз среди крупного рогатого скота имеет широкие (территориально-пространственные) границы, показатель неблагополучия по макро-территориальным и четко обозначенным административным пунктам равняется единице, что является объективным и прогностическим показателем тенденций его эпизоотического проявления в регионе. Индекс эпизоотичности по результатам исследований варьировал от 0,08 до 0,25 (по хозяйствам районов). В целом по изучаемому региону он составляет 0,25.

Экстенсивность инвазии (ЭИ) псороптоза среди взрослого крупного рогатого скота в хозяйствах республики варьирует от 13,8 до 32,1%. В целом по базовым хозяйствам ЭИ клещами P. bovis составила 28,37%.

Установили субпопуляционные границы эпизоотического проявления псороптоза в регионе. Так, среди коров ЭИ псороптоза составляет 23,2±1,2%. Наибольшее количество животных, пораженных псороптозом (25 - 32,1%), установлено в январе - феврале.

Среди нетелей в среднем по региону псороптоз установлен в 27,9±1,3% с вариацией от 16,7 до 43,9%. Более высокая степень их поражения также установлена в январе - феврале (29,7 - 43,9%). Установили, что темп нарастания вовлеченности нетелей в эпизоотическое проявление псороптоза составил 4,7±0,2% (в месяц).

Эпизоотическое проявление псороптоза среди молодняка крупного рогатого скота оказалось более высоким (34,7±1,7%). Месячный темп нарастания субпопуляционных границ псороптоза по данной группе животных составил 12,5%. ЭИ псороптозом телят в январе - феврале оказалась наибольшей (39,5 - 65,4%), в марте несколько ниже (26,2 - 30,7%).

Разработали линейно-радианные схемы-модели временной, популяционной и субпопуляционной вовлеченности крупного рогатого скота в функционирование паразитарной системы псороптоза в аридной зоне южной части РФ.

В ходе осуществления скрининго-мониторинговых исследований установили одновременное поражение крупного рогатого скота псороптозом, гематопинозом и бовиколезом.

В среднем по Республике Калмыкия пораженность крупного рогатого скота гематопинозом составляла 49,1±2,4%; в том числе коров - 46,0±2,3%. Максимальная ЭИ крупного рогатого скота гематопинозом установлена в Приозерном районе (55,7%).

Установили, что пораженность нетелей составила 48,6±2,4%, молодняка крупного рогатого скота - 53,1±2,6%. Высокую степень заражения молодняка гематопинозом установили в хозяйствах Приютенского района (74,5%).

Пораженность крупного рогатого скота власоедами в Республике Калмыкия составила 45,6±2,3%, в том числе коров в среднем 43,4±2,1% , с вариациями в разрезе изученных хозяйств от 25,6 до 53,1%, нетелей - 46,4±2,3%; телят - 47,3±2,3%.

На основе анализа полученных результатов исследования следует, что гематопиноз и бовиколез крупного рогатого скота широко распространены в животноводческих хозяйствах Республики Калмыкия и встречаются в тех же хозяйствах, что и псороптоз. Все это подтверждает, что эктопаразитозы крупного рогатого скота в этом регионе функционируют как смешанные паразитарные системы.

Многофакторным анализом установили выраженную зависимость вовлеченности крупного рогатого скота в эпизоотическое проявление эктопаразитозов от сезона года и возраста животных. Разработали схему-модель годовой динамики эктопаразитозов крупного рогатого скота в республике (рис. 3, 4).

Установили, что в изучаемом регионе с наступлением стабильного похолодания и постановкой крупного рогатого скота на стойловое содержание эпизоотическое проявление эктопаразитозов ежегодно возобновляется и практически завершается межэпизоотический период этих инвазий. Первые групповые вспышки эктопаразитозов возникали в гуртах животных с наиболее скученным их содержанием в сырых и тесных помещениях, при несоблюдении режимов и сроков противопаразитарных обработок. Впоследствии (в начале зимы) вовлеченность крупного рогатого скота в эпизоотическое проявление псороптоза, гематопиноза и бовиколеза постоянно увеличивается, а в январе - феврале экстенсивность этих инвазий достигает максимума. Подтвердили, что среди молодых животных заболевания распространялись быстрее, чем среди взрослого поголовья. С наступлением весны ЭИ эктопаразитозов крупного рогатого скота снижается, вновь заболевших животных этими инвазиями не устанавливали.

Совершенствование системы противоэпизоотических мероприятий при эктопаразитозах крупного рогатого скота в изучаемом регионе

Основываясь на полученных результатах скрининго-мониторинговых исследований по определению особенностей их эпизоотического проявления эктопаразитозов крупного рогатого скота в регионе, провели подбор и оценку терапевтической эффективности противопаразитарных средств для борьбы с ними.

Изучение терапевтической эффективности бутокса при псороптозе, гематопинозе и бовиколезе крупного рогатого скота провели в СПК «Экспериментальное хозяйство» Целинного района. Животных подопытной группы (38 голов) 2-кратно, с интервалом в 7 дней, обрабатывали методом крупнокапельного опрыскивания водной эмульсией бутокса в концентрации 0,005% из расчета 3 литра на голову. Животные контрольной группы (5 голов) обработкам не подвергались.

Через двое суток после второй обработки при исследовании соскобов с пораженных участков кожи животных опытной группы были обнаружены отдельные живые клещи Psoroptes bovis, возбудители гематопиноза и бовиколеза не обнаружены. При исследовании соскобов через четверо суток после второй обработки живых клещей не обнаружили. Корочки на пораженных участках кожи, подвергнутых обработке, подсохли и на 10 - 15-й дни отпали. Через 30 и 60 дней после лечения рецидивов заболевания не выявили.

У животных контрольной группы в течение опыта (15 дней) наблюдали клинические признаки псороптоза. На теле обнаруживали вшей и власоедов, а в соскобах кожи находили живых клещей Psoroptes bovis. В последующем этих животных также подвергли обработке 0,005%-ной водной эмульсией бутокса и получили противопаразитарный эффект такой же, как и среди животных первой группы.

С учетом полученных результатов исследований провели производственное испытание препарата бутокс в СПК «Прудовый» Целинного района Республики Калмыкия на 106 животных (39 голов коров, 41 - нетели и 26 - молодняк), пораженных смешанной формой эктопаразитов. В качестве контроля оставили 6 больных коров.

Последующими наблюдениями установили, что через 7-14 дней после второй обработки воспалительные процессы на пораженных участках прекратились, наблюдалась эпителизация кожи и отрастание нового волосяного покрова. Живых клещей, вшей и власоедов в соскобах кожи через 14 дней после второй обработки не выявили ни в одном случае, через 30 дней рецидивов заболевания также не установили. В то же время у животных контрольной группы устанавливали явные симптомы псороптоза, гематопиноза и бовиколеза, из соскобов с пораженных участков их кожи выделяли живых клещей P. bovis. При завершении эксперимента животных из контрольной группы также двукратно обработали эмульсией бутокса в концентрации 0,005%.

Результаты проведенных исследований и производственной апробации подтвердили, что 0,005%-ная водная эмульсия бутокса при псороптозе крупного рогатого скота обладает 100% - ной акарицидной эффективностью и не вызывает у обработанных животных токсических явлений.

Фармакотоксикологические свойства препарата дельцид

Совместно с научной группой ООО «НВЦ Агроветзащита» изучили фармакотоксикологическую характеристику инсектоакарицидного препарата дельцид, в котором в качестве действующего вещества являются 4% синтетического пиретроида дельтаметрина. Препарат по внешнему виду представляет собой маслянистую прозрачную жидкость желтовато-коричневого цвета, со слабым специфическим запахом, хорошо эмульгирует с водой, образуя стойкую эмульсию белого цвета.

Для определения среднесмертельной дозы дельцида при введении в желудок использовали метод Кербера в модификации В.Б. Прозоровского и установили, что ЛД₅₀ дельцида для крыс с учетом стандартной ошибки составила 1200±71,9 мг/кг, для мышей - 679,2±79,9 мг/кг, что дало основание отнести данный препарат к III классу токсичности - умеренно опасные по ГОСТ 12.1.007-76.

Коэффициент кумуляции препарата равен 3,33. По классификации веществ по кумулятивным свойствам эмульсия дельцида относится к группе веществ со слабо выраженной кумуляцией.

При определении острой накожной токсичности дельцида установили, что через 4 часа после нанесения эмульсии дельцида препарат практически отсутствовал на коже. Отмечали незначительное покраснение кожи, которое исчезало в течение первых суток после нанесения. При аппликации токсических доз дельцида в первые 2 суток после воздействия у опытных животных не отмечали изменений внешнего вида и видимых нарушений физиологических функций. Однако в последующие сроки установлены признаки интоксикации, характерные для острого отравления препаратом: взъерошенность шерстного покрова, тремор, судороги, кровянистые истечения из носа и гибель животных в течение 7 суток, что позволило определить среднесмертельную дозу (ЛД₅₀) препарата при накожном нанесении, которая составила 4916,7±293 мг/кг. Кожно-оральный коэффициент составил 4,1.

Таким образом, дельцид по величине ЛД₅₀^сut (4916,7±293 мг/кг) и по значению кожно-орального коэффициента (4,1) относится в соответствии с ГОСТ 12.1.007 к III классу опасности.

Местное и кожно-резорбтивное действие дельцида в подостром эксперименте на кроликах изучали в опыте с многократным его нанесением на кожу 3 - м кроликам массой 2,0 - 2,3 кг, 3 кролика служили контролем. Дельцид наносился в виде 4% эмульсии в дозе 600 мг/кг, составляющей 1/8 от однократной ЛД₅₀ при накожном нанесении. Экспозиция - 5 раз с интервалом 5 суток на кожу, учитывая способ применения в ветеринарной практике.

В течение всего опытного периода внешних признаков токсикоза и гибели кроликов не отмечали. Изменения показателей белкового, жирового и углеводного обменов у кроликов опытной группы не отличались от контрольных (Р>0,05).

При нанесении эмульсии дельцида у одного из трех кроликов отмечали наличие функциональных изменений кожи в виде гиперемии розового тона (1,5 балла) и незначительного быстро проходящего отека кожи (1 балл). Общая сумма баллов составила 2,5, что позволяет классифицировать местно-раздражающее действие препарата как слабое (IV класс опасности). Вышесказанное позволяет сделать вывод о том, что дельцид не обладает кожно-резорбтивным действием.

Действие дельцида на слизистые оболочки глаз изучали в опытах на 9 кроликах. При нанесении препарата у кроликов всех групп отмечали гиперемию и слезотечение. У кроликов, которым наносили одну каплю препарата, реакция была слабой и исчезла через 3 часа. У кроликов, получавших по 2 и 3 капли, эти явления исчезли через 24 часа, реакция была слабовыраженной.

Таким образом, дельцид обладает слабовыраженным действием на слизистую оболочку глаза с восстановлением ее до нормы в течение суток.

Изучение биологического действия дельцида при повторном воздействии в субхроническом эксперименте (при введении в желудок) проводили на 30 белых беспородных крысах-самцах с исходной массой 130 - 150 г, которым ежедневно через желудочный зонд вводили дельцид в виде водной эмульсии в дозах 120 и 12 мг/кг, что соответствовало 1/10 и 1/100 от ЛД₅₀. Каждая подопытная и контрольная группы состояли из 10 животных. Животным контрольной группы при тех же условиях содержания и кормления вводили равный объем воды.

_{По окончании эксперимента все животные были убиты и определены массовые коэффициенты внутренних органов. Полученные данные свидетельствуют, что все весовые коэффициенты внутренних органов опытных животных достоверно не отличаются от контрольных величин. При патоморфологическом анализе внутренних органов выраженных дистрофических и некробиотических изменений у животных обеих групп выявлено не было. Наблюдались лишь незначительные нарушения в системе микроциркуляции некоторых органов, а именно в тимусе и сердце. Однако обнаружение аналогичных изменений у контрольных животных ставит под сомнение критерий вредности полученных изменений.}

_{Таким образом, полученные результаты свидетельствуют о том, что дельцид в дозах 1/10 и 1/100 от ЛД50 практически не токсичен. Единичные изменения поведенческих реакций организма животных и некоторые патоморфологические нарушения, которые имели место на уровне большей из доз (120 мг/кг), восстанавливались через месяц. Эту дозу можно считать близкой к порогу субхронического эксперимента, т.к. более низкий уровень (12 мг/кг) является недействующим.}

В условиях ингаляционного пути поступления в опытах на белых крысах и мышах испытывали 3 концентрации: 6000, 8000 и 10000 мг/м³. Установлено, что концентрация 10000 мг/м³ являлась высокотоксичной для крыс и мышей, и летальность в данном случае составила 80 и 100% соответственно. Гибель животных наступала в течение суток. При воздействии дельцида на организм крыс в концентрации 8000 мг/м³ гибель составила 20%. Для крыс параметры острой токсичности были определены методом пробит-анализа ЛК₅₀ = 8070 мг/м³. Для мышей использовался метод «одной точки» (Van des Waerden, 1940), который предусматривает графическое определение ориентировочного уровня на прямой, параллельной графику, полученному на крысах, при этом ЛК₅₀ для мышей составила 6800 мг/м³. Таким образом, дельцид по острой ингаляционной токсичности для крыс и мышей относится к III классу опасности.

Оценку Т-клеточного звена иммунной системы проводили в реакции гиперчувствительности замедленного типа и установили, что индекс стимуляции у мышей подопытной группы составил 5,1±0,14, а в контроле 4,9. Это указывает, что дельцид не обладает иммуностимулирующими свойствами, но и не угнетает иммунный статус. При двукратной обработке 0,005%-ным раствором дельцида мышей, кинетика ауто-РОК характеризовалась снижением как абсолютного (42,2±2,1 клеток), так и относительного (1,7%) количества розеткообразующих клеток в крови мышей на 5-й день после обработки с постепенным увеличением на 15-й день исследований (56,3±2,4 клеток). У животных контрольной группы количество ауто-РОК на 5-й день находилось на уровне 61,4±2,7, а на 15-й день - 60,7±2,5 клеток в 1 мкл крови, или 2,5 и 2,4% соответственно.

В динамике относительного количества В-лимфоцитов после двукратной обработки 0,005%-ным раствором дельцида наблюдали незначительное снижение ЕАС-РОК на 5-й день исследования до 14,6±0,2%. С 15-го дня отмечали увеличение В-лимфоцитов у подопытных животных до 16,8±0,3%. Содержание ЕАС-РОК в крови мышей контрольной группы существенно не отличалось в течение всего периода наблюдений и составляло 17,2±0,3 - 17,4±0,4%. Таким образом, дельцид угнетает количество В-лимфоцитов лишь в первые 5 дней после обработки животных с последующим восстановлением.

При определении титров гемагглютининов в сыворотке крови не установлено значительной разницы в интенсивности гуморального иммунного ответа на антиген у животных, обработанных дельцидом (общ. АТ - 4,06±0,22), и контрольными животными (общ. АТ - 4,24±0,25).

Для определения аллергизирующих свойств дельцида использовали 6 морских свинок, которых двукратно обработали 0,005%-ным раствором дельцида. Через 2 дня мышей убили, собрали сыворотку крови. Тучные клетки выделяли из перитониальной жидкости 2 крыс-самцов массой 140 - 150 г после внутрибрюшинного введения физраствора с гепарином в количестве 10 мл. Затем на предметные стекла, покрытые 0,3%-ным нейтральротом на абсолютном спирте, наносили по 1 капле тучных клеток, сыворотки крови от подопытных свинок и препарата дельцид в разведении 1:10. В контрольную пробу брали тучные клетки и сыворотку крови от тех же свинок (по 1 капле) и по разнице процента дегрануляции тучных клеток в опыте и в контроле судили о сенсибилизации организма. Для контроля достоверности полученных данных подсчитывали процент дегрануляции тучных клеток в перитониальной жидкости (10%) и с комплементом (8%).

Согласно полученным данным процент дегрануляции тучных клеток составил 4,0±0,11. Известно, что при значении до 10% препарат не обладает сенсибилизирующими свойствами.

Внутрикожная проба проведена на 6 морских свинках. У всех животных в области спины был выбрит участок для внутрикожной пробы. Трем животным ввели двукратно 0,005%-ную эмульсию дельцида в дозе 0,375 мг/кг (пороговая доза), а трем другим - физиологический раствор. Реакцию учитывали через 0,5, 4 и 24 часа после второго введения. Через 0,5 часа воспалительный вал вокруг места введения составил 1-2 мм, через 4 часа 6-8 мм, у контрольных животных - 2-3 мм. Через 24 часа на месте введения гиперемия исчезла у животных обеих групп.

Изучение влияния дельцида на организм крупного рогатого скота провели в базовом хозяйстве СПК «Ленина» Нижегородской области. Использовали 25 голов крупного рогатого скота в возрасте 2 - 3 лет, которых разделили на 3 группы: животных 1-й группы обрабатывали 0,005%-ной эмульсией дельцида методом опрыскивания; вторую группу - дозой 0,025% (пятикратно увеличена); третья группа служила контролем. В результате установлено, что общее клиническое состояние и гематологические показатели подопытных животных, обработанных раствором дельцида в терапевтической и пятикратно увеличенной дозе, существенно не отличались от показателей в дни исследований и от контрольной группы. Физико-химические и биохимические показатели мочи животных опытных групп были в пределах физиологической нормы.

Для определения остаточных количеств действующего вещества (дельтаметрина) в организме крупного рогатого скота после обработки 0,005%-ным рабочим раствором дельцида отбирали пробы крови и молока, а также мышц, жира, кожи, печени, почек, селезенки и легких. Согласно полученным данным следы пиретроида в крови и молоке обнаруживаются только в течение 1-го часа после обработки. Через 3, 6, 10 и 24 часа остаточное количество пиретроида находилось ниже порога детектирования методом газожидкостной хроматографии или отсутствовало. Максимальное накопление дельтаметрина в остальных пробах приходится на первые сутки. Начиная с пятых суток идет резкий спад его содержания, и на десятый день пиретроид регистрировали лишь в тканях кожи и околопочечном жире. Учитывая данные фармакокинетики и сроков выведения препарата из тканей и органов, убой на мясо крупного рогатого скота следует проводить не ранее, чем через пять дней после обработки.

Изучение эффективности дельцида в лабораторных и производственных условиях

Изучение акарицидных свойств дельцида в лабораторных условиях проводили на имаго клещей Р. cuniculi (табл. 1, 2, 3). Согласно полученным данным (табл. 1) дельцид в рабочей концентрации обладает выраженным акарицидным действием, т.к. 100%-ная гибель клещей происходит в течение четырех суток.

Таблица 1

Акарицидное действие дельцида на имаго клещей Р. cuniculi

Препарат	Количество	Гибель клещей, в %, через, часов
	опытов	клещей	24	48	72	96
Дельцид (0,005%)	6	60	35	61,7	88,3	100
Вода	6	60	-	-	-	-

Препарат не обладает овоцидным действием, т.к. у обработанных кроликов в течение четырех суток вылупилось 86,7% личинок, у контрольных - 98,3% (табл. 2).

Таблица 2

Овоцидное действие дельцида на яйца клещей Р. cuniculi

Препарат	Количество	Вылупилось личинок через, часов	(%)
	опытов	яиц	24	48	72	96
Дельцид (0,005%)	6	60	17	28	43	52	86,7
Вода	6	60	18	33	50	59	98,3

При ежедневном контактировании в течение 15 минут клещей Р. cuniculi с поверхностями тканевых салфеток (12 см²) темного цвета, пропитанных рабочим раствором дельцида, установили, что гибель клещей через 72 часа составляет 6,7%, через 96 часов гибели клещей не наблюдали. Следовательно, остаточное акарицидное действие препарата является кратковременным (табл. 3).

Таблица 3

Остаточное акарицидное действие дельцида

Препарат	Количество	Гибель клещей, в %, при контакте через, часов
	опытов	клещей	24	48	72	96
Дельцид (0,005%)	6	60	100	61,7	6,7	0
Вода	6	60	0	0	0	0

_{Изучение терапевтической эффективности препарата дельцид проведено в условиях СПК «Экспериментальное хозяйство» Целинного района Республики Калмыкия на 12 нетелях, больных псороптозом, гематопинозом и бовиколезом, которых разделили на 4 группы (по 3 головы в каждой). Животных первой группы дважды с 7-дневным интервалом обработали 0,002%-ной, второй группы - 0,004%-ной, третьей группы - 0,005%-ной по ДВ водной эмульсией дельцида путем опрыскивания по 3 л на каждую обработку. Нетелей четвертой (контрольной) группы обрабатывали водой в тех же объемах.}

Учет эффективности проводили перед второй обработкой, затем через 7, 14 и 30 дней (срок наблюдения). Установили, что у животных первой и второй групп через 7 и 14 суток отмечалось затухание болезненного процесса с подсыханием корочек в очагах поражения. Однако у этих животных в соскобах из очагов поражения обнаруживали живые и парализованные имаго, нимфы, личинки и яйца клещей. У животных третьей группы через 7 и 14 суток воспалительные процессы в очагах поражения прекратились, установлена эпителизация кожи и рост волосяного покрова на облысевших участках. В соскобах с мест поражения у этих животных живых клещей, вшей и власоедов не обнаруживали. Рецидивов болезни через 30 дней у них не отмечено.

У животных четвертой (контрольной) группы симптомы псороптоза в эти же сроки наблюдения усилились с появлением новых очагов поражения, в соскобах с которых выявлялись живые клещи на всех фазах развития, а на теле животных обнаруживали вшей и власоедов. В связи с этим животных этой группы, а также животных первой и второй групп в конце опыта обрабатывали 0,005%-ной водной эмульсией дельцида.

Производственную апробацию терапевтической эффективности препарата дельцид провели на 229 животных (72 нетели, 87 дойных коров, 70 голов молодняка крупного рогатого скота), больных псороптозом, гематопинозом и бовиколезом.

Животных обрабатывали 0,005%-ной по ДВ водной эмульсией дельцида путем двукратного с интервалом 7 дней опрыскивания. Отклонений в поведении и общем состоянии обработанных животных не отмечали. В качестве контроля 5 больных животных не обрабатывали препаратом. Клиническое и биологическое (полное) выздоровление животных подопытных групп наступало к 14-му дню после второй обработки. В течение последнего месяца рецидивов болезней не устанавливали. У животных контрольной группы отмечались явные симптомы псороптоза и выделение живых клещей в соскобах.