Імунофенотипові особливості пухлинних клітин та Т-лімфоцитів у хворих на гостру мієлоїдну лейкемію

Размещено на http://www.allbest.ru/

ДУ «Інститут гематології та трансфузіології НАМН України»

Імунофенотипові особливості пухлинних клітин та т-лімфоцитів у хворих на гостру мієлоїдну лейкемію

Гордієнко А.І., Третяк Н.М., Стародуб Г.С., Бортнік Г.А.

Київ, Україна

Резюме

Вступ. Сімейство молекул В7: В7.1 (CD80), В7.2 (CD86) та рецептор CD28 є важливими молекулярними структурами, які беруть участь у формуванні специфічних імунних реакцій. Аналіз особливостей рівня їхньої експресії у взаємозв 'язку з перебігом гострої мієлоїдної лейкемії (ГМЛ) представляє значний інтерес.

Метою роботи була оцінка інтенсивності експресії костимуляторних молекул сімейства В7 (В7.1/CD80, В7.2/CD86) на клоні пухлинних клітин і моноцитах; рецептора CD28 на CD3 - Т-лімфоцитах у хворих на ГМЛ до початку лікування та після специфічної терапії.

Матеріали і методи. Імунологічні дослідження були проведені 17 хворим (12 жінок та 5 чоловіків.) на ГМЛ у перший гострий період до початку та після специфічного лікування. Методом протокової лазерної цитофлюориметрії аналізували коекспресію костимуляторних молекул сімейства В7 (В7.1/CD80, В7.2/CD86) пухлинними клітинами з імунофенотипом CD34+-, CD117+-, CD33+- і CD28 ліганду CD3+ Т-лімфоцитами на цитофлюориметрі FACScan (Becton Dickinson, USA). Для статистичної обробки даних використовувався пакет програм StatSoft Statistica 6.0. Оцінку вірогідності розходжень проводили за допомогою непараметричного U-критерію Манна-Уітні. Розходження вважали достовірними приp<0,05.

Результати. Показано, що у хворих на ГМЛ до початку лікування клон пухлинних клітин периферичної крові (ПК) з імунофенотиповим профілем CD34+-, CD117+ -, CD33+- в середньому має різний рівень інтенсивності експресії костимуляторных молекул сімейства B7 (В7.1/CD80, В7.2/CD86) та рецептора CD28. Так, в 1 групі (n=7) хворих виявлено більше CD34+-, CD117+-, CD33+- пухлинних клітин з високою інтенсивністю експресії костимуляторних молекул сімейства В7 (CD80+brlght CD86+brlght). Тоді як у пацієнтів 2 групі (n=10) в крові вище вміст CD34+-, CD33+-, CD117+- пухлинних клітин з низьким рівнем інтенсивності експресії костимуляторних молекул CD80+ Iow, CD86+ Iow. У хворих в 1 групі кількість CD3+brlght лімфоцитів з високою інтенсивністю експресії ліганду CD28 була в середньому достовірно (p<0,05) вище, а CD3+low нижче аналогічних показників 2 групи (p<0,05). У хворих на ГМЛ до терапії (n=10) число в крові CD3+CD28+brlg t клітин достовірно зменшено (p<0,05), а CD3+CD28+ lo" у порівнянні з пацієнтами після терапії (n=6) з пухлинними клітинами в КМ та ПК. Кількість в ПК CD3+CD28+ Iow клітин в обох групах не має достовірних відмінностей. У хворих на ГМЛ в ремісії (n=7) в ПК виявлена більша середня кількість CD33+ моноцитів з високим рівнем інтенсивності експресії молекул CD80+brlght CD86+brlght. Тоді як у хворих після терапії з пухлинними клітинами в КМ у середньому достовірно більше моноцитів з низьким рівнем інтенсивності експресії костимуляторних молекул CD80+Iow C!.)86'bo" у порівнянні з пацієнтами в ремісії. За даними досліджень у 10 хворих на ГМЛ після терапії не була досягнута ремісія. Серед них у 4-х хворих виявлено пухлинні клітини в КМ, а у 6 - в КМ та ПК. В ПК цих хворих до терапії пухлинні клітини в основному експресували низький рівень костимуляторних молекул CD80+l°"' CD86+to'" та ліганду CD28+l°"' на Т-лімфоцитах. Результати імунологічних досліджень показали, що у хворих після терапії з пухлинними клітинами в кістковому мозку (КМ) та ПК залишається в середньому значна кількість клітин з низьким рівнем експресії молекул CD80+lm" CD86+lm" і знижено число CD80+brlght, CD86+brlght відносно хворих 1 групи до терапії. Але при порівнянні з пацієнтами 2 групи до терапії значних відмінностей середньої кількості клітин з низьким рівнем експресії молекули CD80+lm' не спостерігається. При цьому у хворих після терапії в ПК було знижено вміст клітин з високим рівнем експресії молекули CD86+brlght. Виявлено, що у хворих на ГМЛ в ремісії (n=7) вміст в ПК CD3+CD28+brlgbt клітин середньому підвищено (p<0,05), а CD3+CD28+ Іо" достовірно знижено (p<0,05) відносно даних у пацієнтів після терапії (n=4) в КМ яких були пухлинні клітини. Оцінка результатів свідчить, що у хворих на ГМЛ спостерігався взаємозв 'язок низького рівня інтенсивності експресії молекул сімейства В7(В7.1/CD80, В7.2/CD86) та ліганду CD28 Т-лімфоцитами з перебігом захворювання. Таким чином, порушення протипухлинного імунного захисту у хворих на ГМЛ залежить від низького рівня інтенсивності експресії костимуляторних молекул CD80+-, CD86+- на клоні пухлинних клітин з імунофенотиповими ознаками CD34+-, CD117+-, CD33+- та ліганду CD28+ на CD3+-лімфоцитах.

Висновки. Порушення протипухлинного імунного захисту у хворих на ГМЛ залежить від низького рівня інтенсивності експресії костимуляторних молекул CD80+-, CD86+- на клоні пухлинних клітин з імунофенотиповими ознаками CD34+- , CD117+-, CD33+- та ліганду CD28+ на CD3+-лімфоцитах.

Ключові слова: гостра мієлоїдна лейкемія, костимуляторні молекули, пухлинні клітини, моноцити, ліганд.

Abstract

IMMUNOPHENOTYPE CHARACTERISTICS OF TUMOR CELLS AND T-LYMPHOCYTES IN PATIENTS WITH ACUTE MYELOID LEUKEMIA

Gordienko A. 1, Tretyak N. M., Starodub G. S., Bortnik H. A.

SI «Institute of Hematology and Transfusion of the NAMS of Ukraine», Kyiv, Ukraine

Introduction. The B7 family of molecules: B7.1 (CD80), B7.2 (CD86) and the CD28 receptor are important molecular structures involved in the formation of specific immune responses. Analysis of the features of their expression level in relation to the course of acute myeloid leukemia (AML) is of great interest.

The aim of the work was to evaluate the intensity of expression of costimulatory molecules of the B7 family (B7.1/CD80, B7.2/CD86) on a clone of tumor cells and monocytes; of the CD28 receptor on CD3- T-lymphocytes in patients with AML before the start of treatment and after specific therapy.

Materials and methods. Immunological studies were conducted in 17 patients (12 women and 5 men) with AML in the first acute period before and after specific treatment. The co-expression of co-stimulatory molecules of the B7 family (B7.1/CD80, B7.2/CD86) by tumor cells with CD34+, CD117+, CD33+ and CD28 ligand CD3+ T-lymphocytes was analyzed using a ductal laser cytofluorimetry method on a FACScan cytofluorimeter (Becton Dickinson, USA) ). The Statsoft Statistica 6.0 program package was used for statistical data processing. The estimation of the probability of discrepancies was carried out using the non-parametric Mann-Whitney U-test. Differences were considered significant atp<0.05.

Results. It was shown that in AML patients, before the start of treatment, a clone of PC tumor cells with an immunophenotypic profile of CD34+-, CD117+-, CD33+- has, on average, a different level of intensity of expression of costimulatory molecules of the B7 family (B7.1/CD80, B7.2/CD86) and CD28 receptor. Thus, in 1 group (n=7) of patients, more CD34+-, CD117+-, CD33+-, tumor cells with a high intensity of expression of costimulatory molecules of the B7 family (CD80+br,gbt CD86+br,ght) were found. Whereas in patients of group 2 (n=10), the content of CD34+-, CD33+-, CD117+ - tumor cells with a low level of intensity of expression of costimulatory molecules CD80low, CD86+low is higher in the blood. In patients in group 1, the number of CD3+bnght lymphocytes with a high intensity of expression of the CD28 ligand was on average significantly (p<0.05) higher, and CD3 low was lower than similar indicators in group 2 (p<0.05). In patients with GML before therapy (n=10), the number of CD3+CD28+bnght cells in the blood was significantly reduced (p<0.05), and CD3+CD28low compared to patients after therapy (n=6) with tumor cells in CM and PC. The number of PC CD3+CD28+ low cells in both groups has no significant differences. In patients with AML in remission (n=7), a higher average number of CD33+ monocytes with a high level of intensity of expression of CD80+brig t CD86+brlght molecules was found in PC. Whereas in patients after therapy with tumor cells in CM, on average, significantly more monocytes with a low level of intensity of expression of costimulatory molecules CD80+low CD86+low compared to patients in remission. According to research data, remission was not achieved in 10 patients with AML after therapy. Among them, in 4 patients, tumor cells were found in the CM, and in 6 - in the CM and PC. In the PC of these patients before therapy, tumor cells mainly expressed a low level of costimulatory molecules CD80+lmw CD86+lmw and the ligand CD28 low on T-lymphocytes. The results of immunological studies showed that after therapy with tumor cells in the CM and PC, there remains on average a significant number of cells with a low level of expression of CD80+low CD86+low molecules and a reduced number of CD80+bright, CD86+bright compared to patients of group 1 before therapy. But when compared with patients of group 2 before therapy, no significant differences in the average number of cells with a low level of expression of the CD80+low molecule are observed. At the same time, the content of cells with a high level of expression of the CD86+bright molecule was reduced in patients after PC therapy. It was found that in patients with AML in remission (n=7), the content of CD3+CD28+bnglt cells in PC was on average increased (p<0.05), and CD3+CD28+low was significantly reduced (p<0.05) relative to the data in patients after therapy (n=4) who had tumor cells in their CM. The evaluation of the results shows that in AML patients there was a relationship between the low level of intensity of expression of molecules of the B7 family (B7.1/CD80, B7.2/CD86) and CD28 ligand by T-lymphocytes with the course of the disease.

Thus, the violation of antitumor immune defense in AML patients depends on the low level of intensity of expression of costimulatory molecules CD80+-, CD86+- on a clone of tumor cells with immunophenotypic features of CD34+-, CD117+-, CD33+- and CD28+ ligand on CD3+ lymphocytes.

Conclusions. The violation of antitumor immune defense in patients with AML depends on the low level of intensity of expression of costimulatory molecules CD80+-, CD86+- on a clone of tumor cells with immunophenotypic features of CD34+-, CD117+-, CD33+- and CD28+ ligand on CD3+lymphocytes.

Keywords: acute myeloid leukemia, costimulatory molecules, tumor cells, monocytes, ligand.

Вступ

Молекулярними структурами, які активно беруть участь у формуванні імунної відповіді на антигени різного походження, є костимуляторні молекули сімейства В7: В7.1 (CD80), В7.2 (CD86) та рецептор CD28. Як відомо, в функціонуванні імунної системи молекулам B7/CD28 належить значна роль в регуляції активаційних та інгібуючих процесів в клітинах. Їх вплив реалізується як в умовах фізіологічної норми, так і при патологічних станах організму [1, 2]. Так, сімейство молекул B7/CD28 контролюють протипухлинні антигенспецифічні імунні реакції [3, 4]. Відомо, що гостра мієлоїдна лейкемія (ГМЛ) супроводжується значними порушеннями протипухлинного імунітету. Однак, залишається недостатньо вивчена роль молекул B7/CD28 в регуляції імунних реакцій протипухлинного імунітету та їхній вплив на прогресію ГМЛ [5-10].

Таким чином, аналіз особливостей рівня інтенсивності експресії Т-лімфо- цитами ліганду CD28 та пухлинними клітинами костимуляторних молекул В7 (В7.1/CD80, В7.2/CD86), які регулюють імунну відповідь на пухлинні антигени у взаємозв'язку з перебігом ГМЛ, представляє значний інтерес.

Мета дослідження - оцінити інтенсивність експресії костимуляторних молекул сімейства В7 (В7.1/CD80, В7.2/CD86) на клоні пухлинних клітин і моноцитах; рецептора CD28 на CD3- Т-лімфоцитах у хворих на ГМЛ до початку лікування та після специфічної терапії.

Матеріали і методи

Імунологічні дослідження були проведені у 17 хворих на ГМЛ у перший гострий період до початку терапії та після специфічного лікування. Серед хворих було 12 жінок та 5 чоловіків (діапазон віку 42-75 рр.)

Методом протокової лазерної цитофлюориметрії аналізували коекс- пресію костимуляторних молекул сімейства В7 (В7.1/CD80, В7.2/CD86) пухлинними клітинами з імунофенотипом CD34+-, CD 117'-. CD33+- і CD28 ліганду CD3' Т-лімфоцитами за допомогою анти-CD80, анти-CD86, анти-CD34, анти-CD117, CD33, анти-CD3, анти-CD28 моноклональних антитіл (МКА), мічених флюорохромами (Becton Dickinson, USA).

Дослідження здійснювали на цитофлюориметрі FACScan (Becton Dickinson, USA). Для збору та аналізу даних використовували програмне забезпечення LYSYS-II Ver.1.1. (Becton Dickinson); WinMDI 2,8 (Joseph Trotter, Scripps Institute, La Jolla, CA). «Гейти» пухлинних клітин, лімфоцитів та моноцитів виділяли з урахуванням параметрів бічного (SSC) і переднього (FSC) світлорозсіювання в режимі лінійного посилення сигналів, а також показників флюоресценції по двох каналах (FL1 і FL2) у режимі логарифмічного посилення сигналів. Показники флюо- ресценції враховувалися при використанні анти-CD45+/CD14+ монокло- нальних антитіл (МКА).

Для статистичної обробки даних використовувався пакет програм Statsoft Statistica 6.0. Оцінку вірогідності розходжень проводили за допомогою непараметричного U-критерію Манна-Уітні. Розходження вважали достовірними при p<0,05.

Усі дослідження проводили з дотриманням основних положень Конвенції Ради Європи про права людини та біомедицину, Гельсінської декларації Всесвітньої медичної асоціації про етичні принципи проведення наукових медичних досліджень за участю людини (1964 р. з подальшими доповненнями, включаючи версію 2000 р.) та наказу МОЗ України № 690 від 23.09.2009 р.

Результати та їх обговорення

Залежно від різного рівня інтенсивності експресії костимуляторних молекул сімейства В7 (В7.1/ЄО80, В7.2/ЄО86) на клоні пухлинних клітин з імунофенотиповим профілем CD34+-, CD117+-, CD33+-, хворі на ГМЛ до початку лікування були розподілені на дві групи.

У першій групі хворих на ГМЛ (n=7; 41,2%) до початку лікування сумарна кількість пухлинних клітин в периферичної крові (ПК) з високим рівнем інтенсивності експресії молекули CD80+bright в середньому дорівнювала (6,7±0,3)%. У цих хворих молекулу CD86+bright експресують в середньому (21,0±1,1)% пухлинних клітин. Тоді як низькій рівень експресії молекули CD80+low виявлено в середньому на 1,3±0,1%, а молекули CD86+low - (7,7±0,5)% пухлинних клітин. Оцінка даних свідчить, що в першій групі хворих на ГМЛ до терапії в ПК вміст CD80+low клітин був в середньому достовірно нижче в 5,2 раза (p<0,05) CD80'lirlgl" клітин, а CD86+low в 2,7 раза (p<0,05) CD86'lirlgl" клітин. В даній групі хворих кількість в ПК CD3+CD28+ Т-лімфоцитів в середньому дорівнювала (27,9±1,7)%.

У другій групі хворих на ГМЛ (n=10, 58,8%) в перший гострий період сумарна кількість пухлинних клітин, що експресують з високим рівнем інтенсивності молекулу CD80+bright в середньому дорівнювало (1,9±0,1)%, а молекулу CD86+bright - (6,0±0,4)%. Низькій рівень експресії молекули CD80+low виявлено в середньому на 8,2±0,2%, а молекули CD86+low- (20,3±1,2)% пухлинних клітин. Як свідчать дані у хворих на ГМЛ в 2 групі кількість CD80low пухлинних клітин була достовірна вище CD80+bright в 4,3 раза (p<0,05). Поряд з цим, кількість CD86+low пухлинних клітин була також достовірна вище в 3,4 рази (p<0,05) числа CD86+bright клітин. Вміст в ПК CD3+CD28+ Т-лімфоцитів в середньому дорівнював (23,5±1,3)%.

На підставі оцінки результатів дослідження встановлено, що у хворих на ГМЛ в першій групі кількість CD80+low пухлинних клітин в 6,3 рази (p<0,05), а CD86+low - в 2,6 раза (p<0,05) достовірна нижче відносно аналогічних показників в другій групі. Але кількість CD80+bright, CD86+bright була, відповідно, достовірна підвищена в 3,7 раза (p<0,05), 3,5 раза (p<0,05) ніж у другій групі хворих. У першій групі хворих кількість CD3+CD28+ Т-лімфоцитів в ПК була в середньому достовірно вище в 1,5 раза (p<0,05) у порівнянні з пацієнтами другої групи.

Так, результати досліджень показали, що в першій групі хворих на ГМЛ до терапії в ПК виявлено більше пухлинних клітин (імунофентип CD34+-, CD117+-, CD33+-,) з високою інтенсивністю експресії костиму- ляторних молекул сімейства В7 (E7.1/CD80, E7.2/CD86). У пацієнтів другої групи навпаки в ПК вище вміст CD34+-, CD33+-, CD 117'- пухлинних клітин з низьким рівнем інтенсивності експресії костиму- ляторних молекул CD80, CD86. костимуляторний молекула клітина лімфоцит

Таким чином, аналіз отриманих даних свідчить, що у хворих на ГМЛ до початку лікування клон пухлинних клітин з імунофенотиповим профілем CD34+-, CD117+-, CD33+- має різний рівень інтенсивності експресії костимуляторных молекул сімейства B7 (В7.1/CD80, В7.2/CD86). Це супроводжується також змінами в ПК кількості Т-лімфоцитів, які експресують рецептор CD28.

У хворих на ГМЛ в стадії ремісії у ПК та кістковому мозку (КМ) відсутні пухлинні клітини, тому рівень інтенсивності експресії молекул сімейства B7 (В7.1/CD80, В7.2/CD86) оцінювали на моноцитах ПК з імунофенотиповим профілем CD33'. Це пояснюється тим, що пухлинні клітини поряд з мієлоїдним мають також моноцитарне походження. Порівняльний аналіз проводили з аналогічними даними, які характеризують рівень інтенсивності експресії цих маркерів у 4 хворих після терапії, але за наявності пухлинних клітин в КМ.

За результатами імунологічних досліджень у 7 хворих в ремісії сумарна кількість CD33'CD80' клітин в середньому дорівнювала (42,3±1,8)%. Серед них низькій рівень інтенсивності експресії молекули CD80+low виявлено в середньому на 0,4±0,1% клітинах, а більш високий CD80+brlght на (41,9±1,3)% моноцитів. Показано, що у хворих сумарна кількість CD33+CD86+ клітин в ПК становила (61,0±3,2)%. В популяції цих клітин виявлено CD86+low- (3,7±0,1)%, а CD86+bright - (7,2±3,0)%. За результатами імунофенотипових досліджень у хворих в ремісії сумарна кількість CD3'CD28' Т-лімфоцитів ПК в середньому дорівнювала (30,1±1,5)%.

У хворих на ГМЛ в різні періоди захворювання на клітинах ПК оцінювали рівень інтенсивності експресії ліганду CD28 на CD3' Т-лім- фоцитах. За даними досліджень у хворих до терапії в першій групі (n=7) кількість CD3+bright лімфоцитів з високою інтенсивністю експресії ліганду CD28 була в 7,5 раза (p<0,05) вище, а CD3 low в 10,5 раза (p<0,05) нижче аналогічних показників другої групи (n=10).

Таблиця 1. Відносний вміст у ПК хворих пухлинних клітин і моноцитів, що експресують молекули CD80, CD86, і CD3+- лімфоцитів, які несуть ліганд CD28 до лікування та після специфічної терапії (відсоток позитивних клітин, M±m)

Примітки: * - ГМЛ- гострий період; ** - ГМЛ- період ремісії; # - ГМЛ після терапії.

Показано, що у хворих на ГМЛ в ремісії вміст в ПК CD3+CD28+bright клітин підвищено в 1,3 раза (p<0,05), а CD3+CD28+low знижено в 3,0 рази (p<0,05) відносно даних у пацієнтів після терапії (n=4) в КМ яких були пухлинні клітини.

Дані свідчать, що у хворих на ГМЛ до терапії (n=10) в крові кількість CD3+CD28+bright клітин зменшено в 1,5 раза (p<0,05), а CD3+CD28+low у порівнянні з пацієнтами після терапії (n=6) з пухлинними клітинами в КМ та ПК. Відносно кількості в ПК CD3+CD28+low клітин в обох групах достовірних відмінностей не було.

Таблиця 2. Рівень експресії ліганду CD28 Т-лімфоцитами ПК у різні періоди захворювання (відсоток позитивних лімфоцитів, M±m)

Примітки: * - ГМЛ- гострий період; ** - ГМЛ- період ремісії; # - ГМЛ після терапії.

У регуляції імунних реакцій на антигени різної природи, у тому числі пухлинні, важлива роль належить молекулярним сигналам, що надходять Т-лімфоцитам від костимуляторних молекул сімейства В7 (B7.1/CD80, B7.2/CD86) за допомогою трансдукції через ліганд CD28 [1, 6].

У проведених дослідженнях для оцінки стану антигенспецифічного протипухлинного імунітету у пацієнтів з ГМЛ у різні періоди захворювання вивчали рівень інтенсивності експресії пухлинними клітинами з імунофенотипом CD34+- CD 117'-, CD33 +- костимуляторних молекул CD80', CD86+ та ліганду CD28+ Т-лімфоцитами.

Отримані дані свідчать, що у двох групах хворих на ГМЛ в перший гострий період до початку лікування клон пухлинних клітин з імуно- фенотиповим профілем CD34+-, CD117-, CD33'- мав різний рівень інтенсивності експресії костимуляторных молекул сімейства B7 (B7.1/CD80, B7.2/CD86) та ліганду CD28 Т-лімфоцитами.

Імунологічні дослідження показали, що у хворих першої групи (n=7) до терапії в ПК виявлено в середньому більша кількість пухлинних клітин з високим рівнем інтенсивності експресії костимуляторних молекул CD80+bright, CD86+bright та CD3+CD28+bright Т-лімфоцитів у порівнянні з хворими другої групи (n=10). У пацієнтів першої групи після проведення специфічної терапії була досягнута ремісія.

Представляло інтерес вивчення у хворих в ремісії особливостей експресії костимуляторних молекул CD80', CD86' моноцитами, які відносяться до антигенпрезентируючих клітин (пре-дендрітні клітини мієлодного походження). Крім того, вони є субстратними клітинами пухлинного процесу при ГМЛ. Зокрема, при ГМЛ костимуляторні молекули сімейства В7 ексресують пухлинні клітини мієло-моноцитарного походження [6].

Аналіз даних свідчить, що у хворих на ГМЛ в ремісії в ПК виявлена більша середня кількість CD33' моноцитів з високим рівнем інтенсивності експресії молекул CD80+bright CD86+bright. Тоді як у хворих після терапії з пухлинними клітинами в КМ у середньому достовірно більше моноцитів з низьким рівнем інтенсивності експресії костимуляторних молекул CD80+low CD86+low у порівнянні з пацієнтами в ремісії.

За даними клініко-гематологічних досліджень, у 10 хворих на ГМЛ після терапії не була досягнута ремісія. Серед них у 4-х хворих виявлено пухлинні клітини в КМ, а у 6 - в КМ та ПК. У ПК цих хворих до терапії рівень експресії костимуляторних молекул CD80'low CD86'low та ліганду CD28'low на Т-лімфоцитах був низьким.

Результати імунологічних досліджень показали, що у хворих після терапії з пухлинними клітинами в КМ та ПК залишається в середньому значна кількість клітин з низьким рівнем експресії молекул CD80'low CD86+low і знижено число CD80+bright , CD86+bright відносно хворих першої групи до терапії. Але при порівнянні з пацієнтами другої групи до терапії значних відмінностей середньої кількості клітин з низьким рівнем експресії молекули CD80+low не спостерігалось. При цьому у хворих після терапії в ПК було знижено вміст клітин з високим рівнем експресії молекули CD86+bright.

У хворих на ГМЛ порушенню протипухлинного імунітету сприяє низький рівень інтенсивності експресії молекул сімейства В7(В7.1/CD80, В7.2/CD86) та ліганду CD28 Т-лімфоцитами, що має взаємозв'язок з перебігом захворювання.

Одержані дані узгоджується з результатами інших дослідників, які підкреслюють значну роль молекул сімейства B7 (B7.1/CD80, В7.2/CD86) в реакціях протипухлинного імунітету [2, 3]. Костимуляторні молекули CD80, CD86 посилюють ефекторну функцію цитотоксичних Т-лімфоцитів після взаємодії з мембранним лігандом CD28 [4, 11]. Імунна відповідь на пухлинні антигени є складним інтегральним процесом. Так, для розвитку протипухлинної антигенспецифічної імунної відповіді необхідна активація Т-клітин за допомогою двох сигналів. Перший з них Т-лімфоцит отримує від антигенпрезентируючих клітин за допомогою Т-клітинного рецепторного комплексу, якій розпізнає антиген разом з молекулами головного комплексу гістосумісності класу 1 (CD8+- лімфоцити) та 2 (CD4+- лімфоцити) [2]. Крім того, антигенпрезентуючі клітини передають лімфоцитам другий сигнал (антигенспецифічний), якій необхідний для їх подальшої активації. Цей сигнал CD3-лімфоцити отримують від костимуляторних молекул сімейства В7 (CD80, CD86), які експресують антигенпрезентуючі клітини, і взаємодіють з мембранним лігандом CD28 [11, 12]. Аналіз результатів дослідження та відомості літератури дозволяють стверджувати, що ефективність протипухлинних імунних реакцій залежить від особливостей імунофенотипового профілю пухлинних клітин, що характеризує їхні біологічні властивості. Це особливо пов'язано з високим рівнем інтенсивності експресії ними костимуляторних молекул CD80, CD86, які підвищують цитотоксичний потенціал імуно- регуляторних субпопуляций Т-лімфоцитів. Тоді як низькій рівень експресії костимуляторних молекул знижує антигенпрезентуючі функції пухлинних клітин та моноцитів, що негативно впливає на індукцію реакцій протипухлинного імунітету [6, 9, 10]. Відомо, що костимуляторні молекули впливають на біологічні властивості пухлинних клітин, що мають імунофенотип та функції антигенпрезентиручих клітин, які передають сигнал для активації Т-лімфоцитам через молекулу CD28 [1, 3, 7, 10].

За результатами дослідження, у хворих на ГМЛ до початку лікування виявлено низький рівень інтенсивності експресії костимуляторних молекул пухлинними клітинами та ліганду CD28+ Т-лімфоцитами. При цьому, можна стверджувати, що низький рівень інтенсивності експресії костимуляторних молекул CD80+-, CD86+- та ліганду CD28+- сприяє порушенню імунологічного нагляду у хворих на ГМЛ. Вірогідно, що відсутність адекватної реакції з боку імунної системи пов'язана з тим, що для індукції імунної відповіді має значення не тільки природа антигенного стимулу, але й рівень інтенсивності експресії костимуляторних молекул CD80, CD86 та ліганду CD28 [1, 6, 12].

Вважається, що формування імунопатологічних процесів пов 'язано з недостатньою реалізацією специфічної імунної відповіді [2, 4, 11, 14]. Це підтверджується зменшенням в ПК кількості CD3+CD28+ Т-лімфоцитів, що є однією з причин, які призводять до дисбалансу реакцій антигенспецифічного протипухлинного імунітету у хворих на ГМЛ до початку лікування.

У даному дослідженні підвищення в ПК хворих на ГМЛ в стадії ремісії кількості моноцитів з високими рівнями експресії костимуляторних молекул та Т-лімфоцитів з лігандом CD28+ свідчить про позитивні зміни стану протипухлинного імунітету.

Натомість наявність в КМ хворих на ГМЛ після терапії CD34+-, CD117+-пухлинних клітин, а також зниження інтенсивності експресії на CD33+ моноцитах молекул CD80+, CD86+ та ліганду CD28+ на Т-лімфо- цитах можливо є раннім передвісником розвитку рецидиву захворювання.

Таким чином, порушення протипухлинного імунного захисту у хворих на ГМЛ залежить від низького рівня інтенсивності експресії костимуляторних молекул CD80+, CD86+ на клоні пухлинних клітин з імунофенотиповими ознаками CD34+, CD117+, CD33+ та ліганду CD28+ на CD3+-лімфоцитах.

Література

1. Chen L. co-inhibitory of B7-CD28 family in the control of T-cell immunity. Nat Rev Immunol. 2004, 4:336-347.

2. Hourigan C. S., Oetjen K. A. The distribution of T-cell subsets and the expression of immune checkpoint receptors and ligands in patients with newly diagnosis and relapsed acute myeloid leukemia. Cancer. 2019, 125 (9): 1470-1481.

3. Chen L. co-inhibitory of B7-CD28 family in the control of T-cell immunity. Nat Rev Immunol. 2004, 4:336-347.

4. Hourigan C. S., Oetjen K. A. The distribution of T-cell subsets and the expression of immune checkpoint receptors and ligands in patients with newly diagnosis and relapsed acute myeloid leukemia. Cancer. 2019, 125 (9): 1470-1481.

5. Zumerle S., Molon B., Viola A. Membrane rafts in T-cell activation: F spotlight on CD28 costimulation Front. Immunol. 2017, 8: 1467.

6. Sendcer S., Reinhardt D., Niktoreh N. Rediracting the immune microenvironment in acute myeloid leukemia. Cancers (B(Basel), 2021. 13(6): 141423.

7. Uchiumi H., Matsushima T., Yamane A., Doki N. Prevalence and clinical characteristics of acute myeloid leukemia associated with disseminated intravascular coagulation. International Journal of Hematology. 2007, 86 (2): 137-142.

8. Gribben N. The role of B7 family molecules in hematologic malignancy, Blood .2013, 121(5): 734744.

9. Mao Y., Hu Z., Xu X., Xa J. Identification of a prognostic model based of costimulatory molecule-related subtypes and characterization of tumor microenviroment infiltration in acute myeloid leukemia. Front. Genet. 2022, 19 (13):973319.

10. Jinlong G., Anchum C., Mingshu V. Role of CD80, CD86 and their receptors in the immune response in virus infections. Journal of Experimental and clinical virology. 2018, 6: 435-439.

11. Ramizi M., Iravani S., Yaghobi R., Arandi N. Dysregulated expression of CD28 and CTLA -4 molecules in patients with acute myeloid leukemia and possible association with development of graft versus host disease after hematopoietic stem cell transplantation. Int. J. Organ Transplant. Med/ 2019, 10 (2): 84-90.

12. Esensten J.H., Helou Y.A., Chopra G., Weiss A., Blueston J.A.Zumerle S., Molon B., Viola A. Membrane rafts in T-cell activation: F spotlight on CD28 costimulation Front. Immunol. 2017, 8: 1467.

13. Sendcer S., Reinhardt D., Niktoreh N. Rediracting the immune microenvironment in acute myeloid leukemia. Cancers (B (Basel), 2021. 13(6): 141423.

14. Uchiumi H., Matsushima T., Yamane A., Doki N. Prevalence and clinical characteristics of acute myeloid leukemia associated with disseminated intravascular coagulation. International Journal of Hematology. 2007, 86 (2): 137-142.

15. Gribben N. The role of B7 family molecules in hematologic malignancy, Blood .2013, 121(5): 734744.

16. Mao Y., Hu Z., Xu X., Xa J. Identification of a prognostic model based of costimulatory molecule-related subtypes and characterization of tumor microenviroment infiltration in acute myeloid leukemia. Front. Genet. 2022, 19 (13):973319.

17. Jinlong G., Anchum C., Mingshu V. Role of CD80, CD86 and their receptors in the immune response in virus infections. Journal of Experimental and clinical virology. 2018, 6: 435-439.

18. Ramizi M., Iravani S., Yaghobi R., Arandi N. Dysregulated expression of CD28 and CTLA -4 molecules in patients with acute myeloid leukemia and possible association with development of graft versus host disease after hematopoietic stem cell transplantation. Int. J. Organ Transplant. Med/ 2019, 10 (2): 84-90.

19. Esensten J.H., Helou Y.A., Chopra G., Weiss A., Blueston J.A.CD28 costitimulation: From mechanism to the therapy. Immunity. 2016, 44: 973-988.

20. Swatler J., Turos K., Piwska K. Immunosuppressive cell subsets and factors in myeloid leukemia. Cancers (Basel). 2021, 13 (6): 1203.

21. Hamed N., Barakat S. Clinical signification of CD86 levels in patients with acute myelogenous leukemia. Alexandria Journal of Medicine. 2011, 47 (1): 25-30.

22. Arpinati M., Testoni N., Ricci P. Expression of CD86 in acute myeloid leukemia is a marker of dendritic monocytic lineage. Experimental Hematology. 2002, 30 (2): 126-134.

23. Roussel X., Daguindau F., Beiccanu A., Dessbrosses Y., Wardu W. Acute myeloid leukemia from biology to clinical practices through development and pre-clinical therapeutics. Front. Oncol. 2020, 10: 599933.

24. mulation: From mechanism to the therapy. Immunity. 2016, 44: 973-988.

25. Swatler J., Turos K., Piwska K. Immunosuppressive cell subsets and factors in myeloid leukemia. Cancers (Basel). 2021, 13 (6): 1203.

26. Hamed N., Barakat S. Clinical signification of CD86 levels in patients with acute myelogenous leukemia. Alexandria Journal of Medicine. 2011, 47 (1): 25-30.

27. Arpinati M., Testoni N., Ricci P. Expression of CD86 in acute myeloid leukemia is a marker of dendritic monocytic lineage. Experimental Hematology. 2002, 30 (2): 126-134.

28. Roussel X., Daguindau F., Berccanu A., Dessbrosses Y., Wardu W. Acute myeloid leukemia from biology to clinical practices through development and pre-clinical therapeutics. Front. Oncol. 2020, 10: 599933.

Размещено на Allbest.ru